一种藤黄色单胞菌及其制备和应用的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种藤黄色单胞菌及其应用；藤黄色单胞菌（Luteimonas?sp.）HB-2CGMCC?No.6457已经在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏时间为2012年08月17日；该藤黄色单胞菌用于油藏驱油，将菌株在45℃条件下采用12m3工业发酵罐发酵48小时，发酵后的菌液按照1%的质量浓度与质量1%的营养液从注水井注入到油藏中，注入量为0.07PV；原油粘度下降53%，提高采收率大于5.0%，投入产出比为1:6.4。
【专利说明】一种藤黄色单胞菌及其制备和应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及微生物采油领域，具体涉及一株藤黄色单胞菌及其制备和在采油工程中的应用。
【背景技术】
[0002]微生物采油技术是通过将筛选的微生物同营养液一同注入油藏，或者注入激活剂激活油藏中的内源微生物，利用微生物在油藏中的有益活动及其代谢产物与油藏中液相和固相的互相作用，改善原油的流动性质，从而提高原油采收率的综合性技术。微生物采油技术经过多年的发展，逐渐成为目前国内外发展迅速的一项提高原油采收率技术，也是21世纪一项高新生物技术。
[0003]微生物采油机理主要有微生物自身对原油的降解及其代谢产物对原油的作用，微生物对原油的降解作用体现在微生物以石油为碳源，长链烷烃被微生物降解为短链烷烃，从而增加原油流动性；而代谢产物作用主要包括生物表面活性剂、有机酸、生物气以及小分子的有机物，这些组分都能从一定程度上降低原油粘度，增加原油流动性，从而启动提高采收率的作用。显然，这里提高采收率作用效果的大小与微生物的种类和功能有很大关系。
[0004]中低温稠油油藏由于原油本身粘度大，而且油藏温度较低，结果导致原油流动性非常差，常规注水开发效果不理想，通过筛选高效降粘菌种并用于低温稠油油藏提高采收率研究具有重要意义。
[0005]根据查阅国内外专利和文献发现，目前筛选出用于微生物驱油的菌种有黄单胞杆菌、恶臭假单胞菌、铜绿假单胞菌、地衣芽孢杆菌、嗜热脱氮芽孢杆菌、肠杆菌、短芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、裂烃棒杆菌、野兔棒杆菌、酵母嗜石油杆菌、枯草杆菌、热带假丝酵母、球拟酵母、粘滞沙雷氏菌、阴沟肠杆菌、鲁疫链球菌、梭形芽孢杆菌、波茨坦短芽孢杆菌、不动杆菌、明串球菌。室内研究表明，`这些菌株都具有一定降低的降低发酵液表面张力和油水界面张力，部分能够降解原油，具有降低原油粘度的功能，但都有一定的局限性，比如对地层温度，矿化度以及原油性质的适应性等方面，而且很少有经过物模驱油实验评价和现场应用效果分析。
【发明内容】
[0006]本发明的目的是:提供一株可有效降解高蜡及高胶质原油，降低原油粘度并提高原油采收率一种藤黄色单胞菌及其制备和应用。
[0007]本发明的技术方案是:本发明所提供的藤黄色单胞菌(Luteimonas sp.)HB-2CGMCC N0.6457已经在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，地址:北京市朝阳区北辰西路I号院3号中国科学院微生物研究所，保藏时间为2012年08月17曰。
[0008]藤黄色单胞菌(Luteimonas sp.)CGMCC N0.6457是从宝力格油井产出液中分离得到的，其菌落为淡黄色，圆形，表面光滑不透明，边缘整齐，直径为1.5mm。[0009]细胞呈杆状，大小为0.5 μ mX 1.0-2.0 μ m,单个或成对排列。革兰氏阴性，不生孢，产生β-聚羟基丁酸盐颗粒。具体生理生化实验见表1。
[0010]表1藤黄色单胞菌部分生理生化特征
[0011]
【权利要求】
1.一种藤黄色单胞菌，其特征在于:藤黄色单胞菌(Luteimonas sp.)HB-2CGMCCN0.6457已经在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏时间为2012年08月17日。
2.—种权利要求1所述的藤黄色单胞菌的应用，其特征在于:该藤黄色单胞菌用于油藏驱油，将菌株在45°C条件下采用12m3工业发酵罐发酵48小时，发酵后的菌液按照1%的质量浓度与质量1%的营养液从注水井注入到油藏中，注入量为0.07PV。
3.—种权利要求1所述的藤黄色单胞菌的制备方法，其特征在于: (1)采样和富集:从宝力格油田产出液及费油坑中进行取样，然后采用以富集培养基进行富集； 按重量百分比富集培养基组成为:葡萄糖2%，蛋白胨0.05%，酵母粉0.05%，尿素0.05%,硫酸铵0.05%,磷酸二氢钾0.5%，7水硫酸镁0.02%,氯化钠0.01%,自来水配制； 制备富集培养基的工艺条件为:pH值6~8，115°C灭菌20分钟，培养温度为25-45° C，培养时间为8-48小时； (2)菌种的筛选和纯化: 将质量2%的混合菌液与质量5%的宝力格混合油加入到富集培养基中，45°C条件下在摇床恒温培养48小时，观察原油的乳化情况并测量发酵液的表界面张力值，待原油能够完全分散乳化并且发酵液表/界面张力值降低大于50%以上的样品进行下一步的分离纯化，分离用培养基质量:营养琼脂+5%脱纤维羊血；对分离纯化的单菌株重复步骤(2)的实验，最终筛选出一株高效驱油菌种，经16s rDNA序列分析并结合生理生化实验确定该菌株为藤黄色单胞菌属。`
【文档编号】C12N1/02GK103865820SQ201210528104
【公开日】2014年6月18日 申请日期:2012年12月10日 优先权日:2012年12月10日
【发明者】董范, 柯从玉, 朱庆忠, 胡书宝, 吴刚, 宋社民, 王保华, 薄海江, 吴应德 申请人:中国石油天然气股份有限公司