专利名称：一种高f值复合低聚肽的制备方法
一种高F值复合低聚肽的制备方法技术领域
本发明属于植物深加工技术领域，具体涉及到一种高F值复合低聚肽的制备方法。
技术背景
高F值低聚肽是一种具有高支链氨基酸含量和低芳香族氨基酸含量组成的平均分子量在30(T1000D左右的小肽体系。大量研究证明，高F值低聚肽具有独特的氨基酸组成和生理功能，具有辅助治疗或减轻肝性脑病、改善肝脏病人的蛋白质营养状况、抗疲劳等功效。国内外关于高F值低聚肽的研究主要集中在从单一原料中制取，比如大豆蛋白、鱼蛋白、酪蛋白、玉米蛋白、葵花蛋白等，但都有或多或少的缺点，如原料蛋白变性严重、必须氨基酸含量不平衡、F值低等。
大豆蛋白中蛋氨酸、(半)胱氨酸、苏氨酸等含硫氨基酸含量较少，而花生、亚麻籽和油茶籽弥补了这一不足，而且在酶的作用下，蛋白质水解得到的肽分子量较小，易于低聚肽的形成。
本发明所使用的原料天然无公害，来源于植物的种子，经去壳粉碎后，按照一定比例进行混合，调质后采用挤压膨化预处理方式，经两步酶法处理，不仅将蛋白质多肽链切割成短肽，而且短肽末端是芳香族氨基酸，经活性炭吸附可去除，同时得到了脂肪酸比例平衡的混合油，可进一步经精炼制成食用调和油。发明内容
本发明提供一种新型的高F值低聚肽制备技术，即首先将粉碎的大豆、花生、亚麻籽、油茶籽按一定的比例混合，调质后进行挤压膨化预处理，进一步粉碎后进行两步酶解， 一步酶解分离原料中的油脂，二步酶解使蛋白质多肽链剪切成所需要的短肽，然后经活性炭吸附去除芳香族氨基酸及游离脂肪酸，进一步的超滤、冷冻干燥即可得到高F值复合低聚肽。
本发明的步骤如下步骤一将大豆、花生、亚麻籽、油茶籽分别进行去壳粉碎，粉碎后的物料按质量比为 1:1:1:1的比例进行混合，调节物料水分含量到14%，然后进行挤压膨化预处理得到膨化物料；步骤二 对步骤一中的膨化物料粉碎后过80目筛，粉碎过筛后的膨化物料与水混合得到混合液，所述的加水量与物料质量比为5:1，向混合液中加入Alcalase2. 4L碱性蛋白酶进行酶解得到酶解液I，所述的加酶量为底物质量浓度的1_3%，酶解pH为7. 5-9. 5，酶解温度为40-60°C，酶解时间为l_4h，然后将酶解液I加热IOmin进行灭酶，灭酶后离心分离得到混合油、多肽液及残渣；步骤三将步骤二中所得的多肽液，加入木瓜蛋白酶进行酶解得到酶解液II，所述的加酶量为底物质量浓度的O. 5-2%，酶解pH为5-9，酶解温度为40-60°C，酶解时间为O. 5_2h，然后将酶解液II加热5min进行灭酶，灭酶后离心分离得到上清液；步骤四将步骤三中所得的上清液加入活性炭除去芳香族氨基酸和游离氨基酸后分别经透析、超滤、冷冻干燥得到复合蛋白高F值低聚肽。
所述步骤一中挤压膨化条件为套筒温度90°C，螺杆转速lOOrpm，模孔孔径15mm。
所述步骤四中活性炭的添加量为底物质量的5-10倍。
所述步骤四中透析所用透析袋截留分子量在3500Da以下。
所述步骤四中超滤膜孔径为O. 1-5微米，截留分子量在100-1000，操作压差在O.5_3Mpa。
所述步骤四中冷冻干燥条件为真空条件下-50°c干燥12h。
本发明的有益点是本发明采用一种高F值复合低聚肽的制备方法，首先将粉碎的大豆、花生、亚麻籽、油茶籽按一定的比例混合，调质后进行挤压膨化预处理，进一步粉碎后进行两步酶解， 一步酶解分离原料中的油脂，二步酶解使蛋白质多肽链剪切成所需要的短肽，然后经活性炭吸附去除芳香族氨基酸及游离脂肪酸，进一步的超滤、冷冻干燥即可得到高F值低聚肽粉。原料来源天然，处理方式温和无毒无公害，是一种绿色环保的制备方法。本发明所获得的高F值低聚肽的F值可达到60-78，游离氨基酸含量为4 6%，芳香族氨基酸含量低于1%，它可用于营养疗效食品、功能保健食品和运动员食品等多类特种食品。
附图是本发明方法的工艺路线图。
具体实施例方式具体实施方式
一本实施方式的步骤如下步骤一将大豆、花生、亚麻籽、油茶籽分别进行去壳粉碎，粉碎后的物料按质量比为1:1:1:1的比例进行混合，调节物料水分含量到14%，然后在套筒温度90°C，螺杆转速 IOOrpm，模孔孔径15mm的条件下进行挤压膨化预处理得到膨化物料，然后将膨化物料进行粉碎后过80目；步骤二 将步骤一收集的过筛后的膨化物料放入酶解罐中，按照1:5的料液比加入蒸馏水，在40°C下，加2mol/L NaOH调节pH=7. 5，加入为底物质量浓度的2%的Alcalase2. 4L 碱性蛋白酶，恒温反应3h，得到酶解液I，酶解液I加热IOmin进行灭酶，离心分离得到混合油、多肽液及残渣；步骤三将步骤二中的多肽液，调节PH值=5，温度为40°C，按照加酶量为底物质量浓度的O. 5%的量加入木瓜蛋白酶，反应lh，得到酶解液II，将酶解液II加热5min进行灭酶，高速离心分离出上清液；步骤四将步骤三中所得的上清液加入活性炭除去芳香族氨基酸和游离氨基酸，活性炭添加量1:5 (与底物的质量比)，经透析脱盐、超滤纯化、冷冻干燥得到高F值低聚肽粉。
具体实施方法二 本实施方法与具体实施方法一不同点在于步骤二中将酶解温度调节为50°C，pH值为8，酶添加量为2%，其它组成和步骤与具体实施方法一相同；具体实施方法三本实施方法与具体实施方法一不同点在于步骤三中，PH=6,酶解温度为55°C，酶添加量为1%，反应时间2h。其它组成和步骤与具体实施方法一相同；具体实施方法四本实施方法与具体实施方法一不同点之一在于步骤二中将酶解温度调节为50°C，pH值为8，酶添加量为2% ;本实施方 法与具体实施方法一不同点之二在于步骤三中酶解pH=6，温度为55°C，酶添加量为1%，反应时间2h。其它组成和步骤与具体实施方法一相同。
权利要求
1.一种高F值复合低聚肽的制备方法，其特征在于，所述方法步骤如下 步骤一将大豆、花生、亚麻籽、油茶籽分别进行去壳粉碎，粉碎后的物料按质量比为1:1:1:1的比例进行混合，调节物料水分含量到14%，然后进行挤压膨化预处理得到膨化物料； 步骤二 对步骤一中的膨化物料粉碎后过80目筛，粉碎过筛后的膨化物料与水混合得到混合液，所述的加水量与物料质量比为5:1，向混合液中加入Alcalase2. 4L碱性蛋白酶进行酶解得到酶解液I，所述的加酶量为底物质量浓度的1_3%，酶解pH为7. 5-9. 5，酶解温度为40-60°C，酶解时间为l_4h，然后将酶解液I加热IOmin进行灭酶，灭酶后离心分离得到混合油、多肽液及残渣； 步骤三将步骤二中所得的多肽液，加入木瓜蛋白酶进行酶解得到酶解液II，所述的加酶量为底物质量浓度的0. 5-2%，酶解pH为5-9，酶解温度为40-60°C，酶解时间为0. 5_2h，然后将酶解液II加热5min进行灭酶，灭酶后离心分离得到上清液； 步骤四将步骤三中所得的上清液加入活性炭除去芳香族氨基酸和游离氨基酸后分别经透析、超滤、冷冻干燥得到复合蛋白高F值低聚肽。
2.根据权利要求1所述的一种高F值复合低聚肽的制备方法，其特征在于所述步骤一中挤压膨化条件为套筒温度90°C，螺杆转速IOOrpm，模孔孔径15mm。
3.根据权利要求1所述的一种高F值复合低聚肽的制备方法，其特征在于所述步骤四中活性炭的添加量为底物质量的5-10倍。
4.根据权利要求1所述的一种高F值复合低聚肽的制备方法，其特征在于所述步骤四中透析所用透析袋截留分子量在3500Da以下。
5.根据权利要求1所述的一种高F值复合低聚肽的制备方法，其特征在于所述步骤四中超滤膜孔径为0. 1-5微米，截留分子量在100-1000，操作压差在0. 5-3Mpa。
6.根据权利要求1所述的一种高F值复合低聚肽的制备方法，其特征在于所述步骤四中冷冻干燥条件为真空条件下_50°C干燥12h。
全文摘要
本发明提供一种高F值复合低聚肽的制备方法，采用氨基酸比例平衡及脂肪酸平衡的混合油料，进行粉碎、挤压膨化预处理后，选择两步酶解法，提取油脂与低聚肽混合液，借助活性炭的吸附作用，再经透析、超滤、冷冻干燥得到高F值的低聚肽。采用混合油料，有利于得到一种氨基酸比例平衡的低聚肽；酶法的应用，不仅减少了溶剂的使用，降低了环境污染及废水处理的能耗，而且保证了所提取的混合油料低聚肽的绿色制取，按照人类所需来剪切蛋白质得到具有高营养价值的天然植物低聚肽。
文档编号C12P21/06GK102994602SQ20121055740
公开日2013年3月27日 申请日期2012年12月20日 优先权日2012年12月20日
发明者江连洲, 李杨, 齐宝坤, 冯红霞, 王欢, 曹亮 申请人:东北农业大学