一种奴卡氏菌培养基的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种奴卡氏菌培养基。其特征在于，配制1000ml培养基的配方中含有：可溶性淀粉2～4g；牛肝粉10～20g；苯唑青霉素0.005～0.02g；多枯菌素3～5万单位；蒜硫胺素0.1～0.4g；肌醇0.01～0.2g；硫酸镁0.8～1.1g；琼脂15～20g；蒸馏水加至1000ml。本发明与现有技术相比较，具有检出可靠、奴卡氏菌分离率高的特点。
【专利说明】一种奴卡氏菌培养基
【技术领域】
[0001]本发明涉及检验微生物培养领域，具体涉及一种适用于奴卡氏菌的培养基。
【背景技术】
[0002]奴卡氏菌属已有的种近30个，与医学有关的种也近10个，属于放线菌属，为需氧菌，存在于土壤，可引起人的奴卡菌病。带菌的灰尘、土壤或食物通过呼吸道、皮肤创口或消化道进入人体，然后局限于某一器官或组织，或经血循环散播至脑、肾或其他器官。由于该菌不很常见，而且生长较慢，使用传统方法需要几周方能较准确地做出鉴定，因而临床上又很容易误诊。常用一般抗生素进行治疗，结果延误时间，造成多处病灶转移，如转移至脑部极易造成死亡。故临床细菌检查的正确与快速鉴定极为重要。目前临床培养多使用血琼脂平板，在37°C需氧培养下多数于3~7d才能生长为肉眼可见的针尖大的菌落，做生化反应进行鉴定则需培养4~6周。而且如果是痰标本，则很有可能会被痰标本中的正常菌群所掩盖而产生误诊。
【发明内容】
[0003]本发明的技术任务是针对以上现有技术的不足，提供一种加速奴卡氏菌生长且分
离率高的培养基。
[0004]本发明解决其技术问题的技术方案是:一种奴卡氏菌培养基，其特征在，配制1000ml培养基 的配方中含有:
[0005]可溶性淀粉2~4g ;
[0006]牛肝粉10~20g ；
[0007]苯唑青霉素0.005~0.02g ；
[0008]多枯菌素3~5万单位；
[0009]蒜硫胺素0.1~0.4g ;
[0010]肌醇0.01 ~0.2g;
[0011]硫酸镁0.8 ~1.1g;
[0012]琼脂15 ~20g;
[0013]蒸馏水加至1000ml。
[0014]优化方案中，每1000ml培养基还含有胸腺嘧啶核苷0.05~0.5g。
[0015]优化方案中，每1000ml培养基还含有丙酮酸钙0.01~0.lg。
[0016]优化方案中，每1000ml培养基还含有柠檬酸锌0.01~0.lg。
[0017]优化方案中，上述的可溶性淀粉为薯蓣淀粉。
[0018]其中所述的可溶性淀粉、牛肝粉提供碳氮源和能量；苯唑青霉素、多枯菌素抑制杂菌生长，提高了奴卡氏菌的分离率；肌醇为营养增强剂，蒜硫胺素为激活剂，可以促进肌醇摄取；硫酸镁为缓冲剂，且可以破坏标本中残留的抗真菌菌素；琼脂是培养基的凝固剂；胸腺嘧啶核苷为营养增强剂，丙酮酸钙和柠檬酸锌除有营养增强作用外，还可以抑制革兰氏阳性菌生长。
[0019]本发明与现有技术相比较，具有检出可靠、奴卡氏菌分离率高的特点。
【具体实施方式】
[0020]以下结合实际情况，对本发明的【具体实施方式】作详细说明。
[0021]实施例1，配制1000ml培养基的配方中含有:玉米淀粉2g ;牛肝粉20g ;硫酸镁
0.8g ;琼脂15g ;苯唑青霉素0.02g ;多枯菌素5万单位；蒜硫胺素0.1g,肌醇0.2g ;蒸懼水加至 1000mlo
[0022]实施例2，配制1000ml培养基的配方中含有:豌豆淀粉4g ;牛肝粉IOg ;硫酸镁
1.1g ;琼脂20g ;苯唑青霉素0.005g ;多枯菌素3万单位；蒜硫胺素0.4g，肌醇0.01g ;蒸馏水加至1000ml0
[0023]实施例3，配制1000ml培养基的配方中含有:土豆淀粉2g ;牛肝粉20g ;硫酸镁
0.Sg ;琼脂15g ;苯唑青霉素0.02g ;多枯菌素5万单位；蒜硫胺素0.lg，肌醇0.2g，胸腺嘧啶核苷0.05g ;蒸馏水加至1000ml。
[0024]实施例4，配制1000ml培养基的配方中含有:薯蓣淀粉4g ;牛肝粉IOg ;硫酸镁
1.1g ;琼脂20g ;苯唑青 霉素0.005g ;多枯菌素3万单位；蒜硫胺素0.4g,肌醇0.01g,胸腺嘧啶核苷0.5g ;蒸馏水加至1000ml。
[0025]实施例5，配制1000ml培养基的配方中含有:土豆淀粉3g ;牛肝粉15g ;硫酸镁Ig ；琼脂18g ;苯唑青霉素0.01g ;多枯菌素4万单位；蒜硫胺素0.2g，肌醇0.1g,胸腺嘧啶核苷
0.1g ;蒸馏水加至1000ml。
[0026]实施例6，配制1000ml培养基的配方中含有:土豆淀粉2g ;牛肝粉20g ;硫酸镁
0.8g ;琼脂15g ;苯唑青霉素0.02g ;多枯菌素5万单位；蒜硫胺素0.1g,肌醇0.01g,胸腺嘧啶核苷0.05g，丙酮酸钙0.lg，柠檬酸锌0.1g;蒸馏水加至1000ml。
[0027]实施例7，配制1000ml培养基的配方中含有:薯蓣淀粉4g ;牛肝粉IOg ;硫酸镁
1.1g ;琼脂20g ;苯唑青霉素0.005g ;多枯菌素3万单位；蒜硫胺素0.4g，肌醇0.2g，胸腺嘧啶核苷0.5g，丙酮酸钙0.01g，柠檬酸锌0.01g ;蒸馏水加至1000ml。
[0028]实施例8，配制1000ml培养基的配方中含有:薯蓣淀粉3g ;牛肝粉15g ;硫酸镁Ig ；琼脂18g ;苯唑青霉素0.01g ;多枯菌素4万单位；蒜硫胺素0.3g，肌醇0.1g,胸腺嘧啶核苷0.2g,丙酮酸钙0.05g,柠檬酸锌0.05g ;蒸懼水加至1000ml。
[0029]实施例1~8培养基的制备方法可以为:取除多枯菌素、苯唑青霉素外的原料溶于蒸懼水中，混匀，蒸懼水定容至1000ml, 121°C, 15min灭菌后，降温到50~60°C,无菌操作下加入多枯菌素、苯唑青霉素溶解混匀，分装。
[0030]本发明所得奴卡氏菌培养基具有奴卡氏菌生长快，分离率高的特点，为临床资料充分证明:20株奴卡氏菌菌株(其中:星形奴卡氏菌8株、巴西氏奴卡氏菌8株及豚鼠奴卡氏菌4株)制成生理盐水菌悬液，以McFarland 0.5标准比浊管调整菌悬液浊度，用盐水连续10倍稀释，分别取0.1rnl接种于实施例8方案培养基、实施例5方案培养基、实施例2方案培养基、血琼脂平板上。36~37°C保温，48小时时各组检出阳性菌株(中央内凹，表面有皱褶，颗粒状橙黄色，菌落表面有白色菌丝生长)例数为:实施例8方案培养基15例、实施例5方案培养基12例、实施例2方案培养基8例、血琼脂平板6例。96小时时各组检出菌例数为:实施例8方案培养基20例、实施例5方案培养基20例、实施例2方案培养基18
例、血琼脂平板14例。结果表明，本发明实施例奴卡氏菌分离率明显高目前常用于的血琼
脂平 板。
【权利要求】
1.一种奴卡氏菌培养基，其特征在于，配制1000ml培养基的配方中含有: 可溶性淀粉2~4g ; 牛肝粉10~20g ； 蒜硫胺素0.1~0.4g ; 肌醇0.01~0.2g ; 硫酸镁0.8~1.1g ; 琼脂15~20g ; 蒸馏水加至1000ml。
2.根据权利要求1所述的一种奴卡氏菌培养基，其特征在于每1000ml培养基还含有胸腺嘧啶核苷0.05~0.5g。`
【文档编号】C12Q1/04GK103789394SQ201210595203
【公开日】2014年5月14日 申请日期:2012年12月24日 优先权日:2012年12月24日
【发明者】郭三保 申请人:郭三保