一种与胰腺癌相关的肿瘤标记物及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明属于基因工程和医药领域，涉及一种新的胰腺癌早期诊断的肿瘤标记物，更具体地说公开了一种与胰腺癌相关的血清/组织肿瘤标记物及其应用。该标志物为CystatinSN（CST1）、CystatinS(CST4)、CystatinSA(CST2)的组合。该标志物及其引物、抗体可用于诊断试剂盒应用，用于胰腺癌的辅助诊断。
【专利说明】一种与胰腺癌相关的肿瘤标记物及其应用
【技术领域】
[0001]本发明属于基因工程及肿瘤学领域，涉及一种与胰腺癌相关的血清/组织肿瘤标记物及其应用。
【背景技术】
[0002]胰腺癌是一种恶性程度高，预后极差的肿瘤，且发病率在世界范围内有逐年上升的趋势。美国癌症协会资料显示，胰腺癌的发病率已居恶性肿瘤的第10位，病死率居恶性肿瘤第4位，5年生存率仅为5%。由于胰腺的解剖学位置较深，腹部疼痛、体重减轻、黄疸等临床特异性的症状不易被发现，多数患者确诊时已发生癌症转移。因此，早期诊断是提高胰腺癌治愈率的关键因素，寻找敏感性、特异性高的肿瘤标志物成为临床科学研究的重点目标。
[0003]血清肿瘤标志物是胰腺癌诊断常用方法之一，CA19_9、CA242、CEA等。这些标记物单独作为诊断胰腺癌的指标尚不精确，敏感性较低，并且在其他消化道肿瘤及良性疾病中也有升高，因此对胰腺癌早期诊断的价值有限。另外，一些基因肿瘤标志物也用于临床胰腺癌的早期诊断，但始终未能达到诊断的目的。因此，寻找敏感性高、特异性强、结果稳定的肿瘤标志物仍是胰腺癌早期诊断中亟待解决的问题。
[0004]半胱氨酸蛋白酶抑制剂(Cystatins, CSTs)能抑制细胞内外的半胱氨酸蛋白酶，在肿瘤的生长、血管生成、浸润和转移起重要作用，可作为肿瘤诊断和预后估计的标志物。Cystatins最早是由Anastasi等采用亲和层析的方法首次在鸡蛋清中分离得到的对半胱氨酸蛋白酶有抑制作用的一种蛋白质，作为一个半胱氨酸蛋白酶抑制剂的超家族，依据其分子结构主要分成三大类:⑴胞内cystatin也称stefis,包括A和B2个成员！⑵分泌型cystatins,包含有C、D、E/M、F、G、S、Sv和SA等成员；⑶血浆中的激肽原，包含低分子质量和高分子质量激肽原。目前这个家族中，研究较多，并且与恶性肿瘤关系较为明确的主要是CystatinA、B、C和M等。CST1、CST4、CST2均属于Cystatin家族中的II型分泌蛋白，近年来有研究发现，Cyatatin SN在胃癌`组织中呈现高表达，并与胃癌细胞的侵袭转移相关。又有研究结果表明，其在直肠癌细胞中和患者血液中有高表达。基于Cystatin家族的功能，将其作为临床肿瘤标记物具有很大的临床应用价值及前景。
【发明内容】
[0005]本发明的首要目的是针对上述技术问题，提出一种与胰腺癌相关的血清/组织肿瘤标记物。
[0006]本发明的第二个目的是提供上述血清/组织肿瘤标记物的mRNA引物及抗体。
[0007]本发明的第三个目的是提供上述血清/组织肿瘤标记物的mRNA引物及抗体在胰腺癌辅助诊断中的应用。
[0008]本发明的第四个目的在于提供一种检测胰腺癌的试剂盒。
[0009]本发明的目的通过以下技术方案得以实施:[0010]—种与胰腺癌相关的血清/组织基因标记物，该标记物为CystatinSN、CystatinS和CystatinSA中的一种或多种的组合。
[0011]优选地,所述的标记物为CystatinSN、CystatinS和CystatinSA的组合。
[0012]本发明同时提供了 CystatinSN、CystatinS和/或CystatinSA在制备胰腺癌诊断试剂或胰腺癌诊断试剂盒中的应用。
[0013]更具体地说，本发明提供了 CystatinSN、CystatinS和/或CystatinSA检测试剂在制备胰腺癌诊断试剂或胰腺癌诊断试剂盒中的应用。
[0014]所述的检测试剂包括检测引物，序列如SEQ ID NO:1和/或SEQ ID NO: 2。
[0015]或者，所述的检测试剂包括CystatinSN、CystatinS和/或CystatinSA蛋白抗体。
[0016]所述的抗体可以通过商品化的途径获得。
[0017]发明同时提供给了一种用于诊断胰腺癌的试剂盒,含有CystatinSN、CystatinS和/或CystatinSA基因检测试剂。
[0018]或者，用于诊断胰腺癌的试剂盒含有CystatinSN、CystatinS和/或CystatinSA蛋白检测试剂。
[0019]或者，用于诊断胰腺癌的试剂盒含有基因检测试剂和蛋白检测试剂中的一种或多种。发明同时提供了一种用于检测胰腺癌的引物，序列如SEQ ID N0:1和SEQ ID N0:2所示o
[0020]表1CystatinSN, S，SA 引物序列
[0021]
【权利要求】
1.一种与胰腺癌相关的基因标记物，其特征在于该标记物为CystatinSN、CystatinS和CystatinSA中的一种或多种的组合。
2.如权利要求1所述的标记物，其特征在于所述的标记物为CystatinSN、CystatinS和CystatinSA 的组合。
3.如权利要求1所述的基因标记物，其特征在于为血清/组织基因标记物。
4.CystatinSN>CystatinS和/或CystatinSA在制备胰腺癌诊断试剂或胰腺癌诊断试剂盒中的应用。
5.CystatinSN>CystatinS和/或CystatinSA检测试剂在制备胰腺癌诊断试剂或胰腺癌诊断试剂盒中的应用。
6.如权利要求5所述的应用，其特征在于所述的检测试剂包括检测引物，序列如SEQID NO:1 和 / 或 SEQ ID NO: 2。
7.如权利要求5所述的应用，其特征在于所述的检测试剂包括CystatinSN、CystatinS和/或CystatinSA蛋白抗体。
8.如权利要求7所述的应用，其特征在于所述的抗体为与CystatinSN、CystatinS和/或CystatinSA蛋白特异性识别的抗体。
9.一种用于诊断胰腺癌的试剂盒，其特征在于所述试剂盒含有CystatinSN、CystatinS和 /或CystatinSA基因检测试剂；或者所述试剂盒含有CystatinSN、CystatinS和/或CystatinSA蛋白检测试剂。
10.一种用于检测胰腺癌的引物，其特征在于序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示。
【文档编号】C12N15/11GK103667444SQ201310461171
【公开日】2014年3月26日 申请日期:2013年9月29日 优先权日:2013年9月29日
【发明者】吴斌 申请人:中山大学附属第三医院