一种海水分歧杆菌鱼肝培养基及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种海水分歧杆菌鱼肝培养基及其制备方法，其特征在于包括：90g～100g的鲜鱼肝、8g～12g琼脂粉、350ml～400ml蒸馏水。其制备方法包括以下步骤：捣碎处理、混合搅拌、灭菌处理、后处理操作，获得培养基。本发明的鱼肝培养基与现有各种细菌培养相比，营养成分配比更适合海水分歧杆菌生长，培养制备操作方法简洁。另，采用美洲鲥鱼肝脏为主要成分培养基分离出病原菌，并经过形态特征鉴定和分子基因测定，确定为海水分歧杆菌，为防治奠定基础。
【专利说明】一种海水分歧杆菌鱼肝培养基及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种海水分歧杆菌的培养基及其制备方法，属于微生物领域。
【背景技术】
[0002]美洲鋪鱼从美国引进中国10多年，每年气温超过25°C时，美洲鋪鱼就会发病死亡，其主要表现症状是:肝脏先出现小白点病灶，然后肝脏溃烂，鱼体出现小红点，最后死亡。多年来不少科研所专家一直努力想分离病菌，找到预防治疗方案，先后使用营养琼脂、胰蛋白胨大豆琼脂、硫柠胆蔗琼脂、麦康凯琼脂、血琼脂、伊红美蓝琼脂、淀粉琼脂培养基、马铃薯培养基、罗氏培养基和小川培养基等10多种培养基均无法找出导致鱼病的病原菌。
【发明内容】
[0003]本发明的目的是为了解决现有细菌培养基配方的不足，提供一种营养成分全面适合海水分歧杆菌生长的海水分歧杆菌的培养基。
[0004]为解决上述技术问题，本发明的技术方案为:一种海水分歧杆菌鱼肝培养基，其创新点在于包括:90g~100g的鲜鱼肝、8g~12g琼脂粉、350ml~400ml蒸懼水。
[0005]优选地，所述海水分歧杆菌鱼肝培养基的最佳配比为:95g的鲜鱼肝、IOg琼脂粉、400ml蒸馏水。
[0006]一种海水分歧杆菌鱼肝培养基的制备方法，包括以下步骤:
1)捣碎处理
首先将鲜鱼肝捣碎，确保捣碎后的鲜鱼肝目数控制在15目~30目之间；
2)混合搅拌
将捣碎处理后的鲜鱼肝倒入高压灭菌锅中，并倒入上述比例的蒸馏水，搅拌均匀，此时再倒入上述比例的琼脂粉，充分搅拌混合；
3)灭菌处理
加热高压灭菌锅，保持高压灭菌锅内温度在121 °C，灭菌时间维持20min ；
4)后处理操作
灭菌完成后，揭开高压灭菌锅锅盖，自然冷却到高压灭菌锅内温度到90°C，获得培养基，接着取出灭菌后的培养基至灭菌操作台上，利用无菌玻璃棒搅拌均匀后倒入若干直径为IOcm的培养皿，每个培养皿中加入20~25ml的培养基，静置2h后即可。
[0007]本发明的优点在于:本发明的鱼肝培养基与现有各种细菌培养相比，营养成分配比更适合海水分歧杆菌生长，培养制备操作方法简洁。另，采用美洲鋪鱼肝脏为主要成分培养基分离出病原菌，并经过形态 特征鉴定和分子基因测定，确定为海水分歧杆菌，为防治奠定基础。
【具体实施方式】
[0008]下面结合具体实施案例对本发明进行详细阐述。[0009]实施例1:
一种海水分歧杆菌鱼肝培养基，由下列组份组成:鲜鱼肝100g、琼脂粉10g、蒸馏水400ml。
[0010]对应的一种海水分歧杆菌鱼肝培养基的制备方法，包括以下步骤:
1)捣碎处理
首先将鲜鱼肝捣碎，确保捣碎后的鲜鱼肝目数控制在15目~30目之间；
2)混合搅拌
将捣碎处理后的鲜鱼肝倒入高压灭菌锅中，并倒入上述比例的蒸馏水，搅拌均匀，此时再倒入上述比例的琼脂粉，充分搅拌混合；
3)灭菌处理
加热高压灭菌锅，保持高压灭菌锅内温度在121 °C，灭菌时间维持20min ；
4)后处理操作
灭菌完成后，揭开高压灭菌锅锅盖，自然冷却到高压灭菌锅内温度到90°C，获得培养基，接着取出灭菌后的培养基至灭菌操作台上，利用无菌玻璃棒搅拌均匀后倒入若干直径为IOcm的培养皿，每个培养皿中加入20~25ml的培养基，静置2h后即可。
[0011]实施例2:
一种海水分歧杆菌鱼肝培养基，由下列组份组成:鲜鱼肝95g、琼脂粉10g、蒸馏水400ml ο
[0012]对应的一种海水分歧杆菌鱼肝培养基的制备方法，包括以下步骤:
1)捣碎处理
首先将鲜鱼肝捣碎，确保捣碎后的鲜鱼肝目数控制在15目~30目之间；
2)混合搅拌
将捣碎处理后的鲜鱼肝倒入高压灭菌锅中，并倒入上述比例的蒸馏水，搅拌均匀，此时再倒入上述比例的琼脂粉，充分搅拌混合；
3)灭菌处理
加热高压灭菌锅，保持高压灭菌锅内温度在121 °C，灭菌时间维持20min ；
4)后处理操作
灭菌完成后，揭开高压灭菌锅锅盖，自然冷却到高压灭菌锅内温度到90°C，获得培养基，接着取出灭菌后的培养基至灭菌操作台上，利用无菌玻璃棒搅拌均匀后倒入若干直径为IOcm的培养皿，每个培养皿中加入20~25ml的培养基，静置2h后即可。
[0013] 以上对本发明创造的一个实施例进行了详细说明，但所述内容仅为本发明创造的较佳实施例，不能被认为用于限定本发明创造的实施范围。凡依本发明创造申请范围所作的均等变化与改进等，均归属于本发明创造的专利涵盖范围之内。
【权利要求】
1.一种海水分歧杆菌鱼肝培养基，其特征在于包括:90g~100g的鲜鱼肝、8g~12g琼脂粉、350ml~400ml蒸馏水。
2.如权利要求1所述的一种海水分歧杆菌鱼肝培养基，其特征在于，所述海水分歧杆菌鱼肝培养基的最佳配比为:95g的鲜鱼肝、10g琼脂粉、400ml蒸馏水。
3.—种海水分歧杆菌鱼肝培养基的制备方法，其特征在于包括以下步骤: 1)捣碎处理 首先将鲜鱼肝捣碎，确保捣碎后的鲜鱼肝目数控制在15目~30目之间； 2)混合搅拌 将捣碎处理后的鲜鱼肝倒入高压灭菌锅中，并倒入上述比例的蒸馏水，搅拌均匀，此时再倒入上述比例的琼脂粉，充分搅拌混合； 3)灭菌处理 加热高压灭菌锅，保持高压灭菌锅内温度在121 °C，灭菌时间维持20min ； 4)后处理操作 灭菌完成后，揭开高压灭菌锅锅盖，自然冷却到高压灭菌锅内温度到90°C，获得培养基，接着取出灭菌后的培养基至灭菌操作台上，利用无菌玻璃棒搅拌均匀后倒入若干直径为10cm的培养皿，每个培养皿中加入20~25ml的培养基，静置2h后即可。
【文档编号】C12R1/01GK103898027SQ201410146610
【公开日】2014年7月2日 申请日期:2014年4月14日 优先权日:2014年4月14日
【发明者】蔡星, 张飞, 王婷 申请人:江苏中洋集团股份有限公司