一种推断人体死后间隔时间的方法
【专利摘要】本发明公开了一种推断人体死后间隔时间的方法，属于医学检验领域。所述方法包括：提取不同死亡时间的人的胆囊粘膜上皮细胞作为样本，并将所述样本涂片；将涂片后的所述样本进行染色；对染色后的样本进行图像分析，分析的参数包括：胆囊粘膜上皮细胞的细胞核的异形指数、灰度参数和几何参数，灰度参数包括平均光密度、平均灰度和积分光密度；将参数进行统计，获得参数的线性回归方程，根据线性回归方程中的一个或多个确定死后间隔时间。本发明提供的推断人体死后间隔时间的方法，在人体死后5～36h内，通过分析胆囊粘膜上皮细胞的细胞核的异形指数、灰度参数和几何参数，得到异形指数、灰度参数和几何参数与PMI关系，从而推断人体死后间隔时间。
【专利说明】一种推断人体死后间隔时间的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医学检验领域，特别涉及一种推断人体死后间隔时间的方法。
【背景技术】
[0002] 人体死后间隔时间（postmortem interval，PMI)推断一直是法医病理学研究的重 点、难点和热点之一，尤其早期PMI的推断，在刑事侦查中排查犯罪嫌疑人、仲裁死亡医疗 纠纷等司法实践中更具现实意义。客观、准确的早期PMI推断，可为公安机关刑事侦查提供 重要的客观线索，有利于公安机关辨别犯罪嫌疑人是否有作案时间，确定或缩小侦查范围， 提高侦查效率和准确度。此外，死后间隔时间的推断有时对自然灾害的评估分析、保险和财 产继承也至关重要。
[0003] DNA是具有显著生化稳定性的遗传物质，同物种不同组织的体细胞的DNA含量是 恒定的。在机体死亡后，细胞组织发生缺血、缺氧，随着氧自由基生成增多，细胞自身消化， 其结构进行解体，DNA也逐渐发生降解，其DNA的含量及细胞核的形态变化亦具规律性，表 现为核凝固、边集、碎裂、溶解等改变。研究人员在研究死后间隔时间时，其研究对象均为脑 细胞、脾细胞或肝细胞，且研究人员均认为仅在脑细胞、脾细胞或肝细胞中的DNA能够准确 反映死后间隔时间。
【发明内容】
[0004] 为了解决现有技术中没有针对胆囊反映死后间隔时间的问题，本发明实施例提供 了一种推断人体死后间隔时间的方法。所述技术方案如下 ：
[0005] 本发明提供了一种推断人体死后间隔时间的方法，所述方法包括：
[0006] 提取不同死亡时间的人的胆囊粘膜上皮细胞作为样本，并将所述样本涂片；
[0007] 将涂片后的所述样本进行染色；
[0008] 对染色后的所述样本进行图像分析，所述分析的参数包括：所述胆囊粘膜上皮细 胞的细胞核的异形指数、灰度参数和几何参数，所述灰度参数包括平均光密度、平均灰度和 积分光密度；
[0009] 将所述参数进行统计，获得所述参数的线性回归方程，所述线性回归方程为：
【权利要求】
1. 一种推断人体死后间隔时间的方法，其特征在于，所述方法包括： 提取不同死亡时间的人的胆囊粘膜上皮细胞作为样本，并将所述样本涂片； 将涂片后的所述样本进行染色； 对染色后的所述样本进行图像分析，所述分析的参数包括：所述胆囊粘膜上皮细胞的 细胞核的异形指数、灰度参数和几何参数，所述灰度参数包括平均光密度、平均灰度和积分 光密度； 将所述参数进行统计，获得所述参数的线性回归方程，所述线性回归方程为：
其中，YID为推断的死后间隔时间，X ID为对应测量的异形指数；
其中，YAe为推断的死后间隔时间，X Ae为对应测量的平均灰度；
其中，YMD为推断的死后间隔时间，x MD对应测量的平均光 密度；
其中，Υια)为推断的死后间隔时间，χ ια)为对应测量的积分光 密度； 根据所述线性回归方程中的一个或多个确定死后间隔时间。
2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述样本剪取自所述人死后5?36h的所 述胆囊粘膜上皮细胞。
3. 根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述涂片的方法为：将取出的所述样本置 于含有400mg/L的庆大霉素的生理盐水中，首次剪取所述样本的时间在所述人死后5h完 成，在18°C恒温箱中存放0. 5h，然后在保湿盒内，剪取0. 5cmX0. 5cmX lcm所述样本1份， 且每隔lh剪取一次，将剪取的所述样本浸于清水中洗涤，取出所述样本并用滤纸吸干，将 吸干后的所述样本涂布。
4. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于，将涂布后的所述样本采用孚尔根染色方 法进行染色。
5. 根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述孚尔根染色方法包括：将备染的所述 涂片浸入固定液中固定〇. 5h,取出后置于6N盐酸溶液中水解30min,取出后置于蒸馈水中 洗涤，再浸入由副品红配制的席夫氏试剂中放置30min，用浓度为0. 5 %的偏重亚硫酸钠溶 液浸洗2min，重复浸洗三次，流水冲洗5min后，进行封片。
6. 根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述固定液为卡诺氏固定液。
7. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述图像分析采用彩色病理图像分析系 统。
8. 根据权利要求7所述的方法，其特征在于，在显微镜高倍物镜下摄取染色后的所述 涂片的图像视野，以"弓"字型的形状作为采集线路，保证采集的图像无重复、无交叉，且每 张所述涂片随机取10个视野，每个视野采集一幅图像。
9. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述几何参数包括面积、平均直径、等效 直径和周长。
【文档编号】C12Q1/68GK104087660SQ201410269524
【公开日】2014年10月8日 申请日期:2014年6月17日 优先权日:2014年6月17日
【发明者】李长雷, 杨友华, 易卉玲, 舒细记 申请人:江汉大学