一种固体发酵来源的液体复合酶的制备方法及其用途
【专利摘要】本发明涉及一种固体发酵来源的液体复合酶的制备方法及其用途，所述的方法包括：固体发酵：将培养基高压湿热灭菌，加入制备好的菌种发酵得到固体发酵醪；液体醪液：在固体发酵醪中添加缓冲液得到液体醪液；过滤：将液体醪液过滤，得到酶液；超滤浓缩：通过超滤方式对酶液进行浓缩，得到浓缩酶液；酶活检测、复配：对浓缩酶液的酶活进行测定，然后根据复合酶的配方计算各种单酶的添加量，进行复配，稀释到规定水平，得到液体酶半成品；添加保护剂：在液体酶半成品中添加稳定保护剂，即得液体复合酶。本发明的方法，既能保证固体发酵复合酶高降解率的优势，又能保证酶活不受高温制粒的损失，可以极大提交酶解的效率。
【专利说明】一种固体发酵来源的液体复合酶的制备方法及其用途
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种固体发酵来源的液体复合酶的制备方法及其用途，属于饲料复合酶。
【背景技术】
[0002]饲用复合酶在实际生产中的使用越来越广泛。饲用复合酶在形态上分为两种:固体复合酶和液体复合酶。固体复合酶直接添加在饲料原料中混匀后进行制粒生产，液体复合酶在饲料制粒后喷涂在饲料表面。在酶源的生产方式上分两种:固体发酵和液体发酵。固体复合酶同时具有两种生产方式:固体发酵和液体发酵；液体复合酶只来源于液体发酵。固体发酵复合酶因其培养基为各种饲料原料的原因，其使用效果远优于液体发酵复合酶。颗粒饲料中的固体复合酶与液体复合酶相比较，固体复合酶在高温制粒过程中的酶活损失较大，有的高达90%，具体见表1 ;液体复合酶在高温制粒后再进行喷涂，其酶活没有任何损耗。因此固体发酵的液体酶使用效果明显优于固体发酵固体酶和液体发酵液体酶。因此开发一种使用效果好的液体复合酶是十分必要的。另外液体发酵复合酶的酶解率为
1.88%，酶解率很低。
[0003]表1固体酶制剂在颗粒饲料制粒过程中的酶活保留
[0004]
【权利要求】
1.一种固体发酵来源的液体复合酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤: 第一步、固体发酵:将培养基在搅拌机内混合均匀，然后分装到布袋中，12rc，30min，高压湿热灭菌，待培养基冷却至25-35°C，将培养基倒入搅拌机中然后加入制备好的菌种搅拌均匀，搅拌均匀后放到曲盘中，平铺均匀，厚度适中，为3-5cm，最后盖上湿布，开启控温开关，控制温度为29°C，发酵40-60h后，进行翻曲及补水，补水量为8-15%，然后再发酵72小时完成整个发酵过程，得到固体发酵醪； 第二步、液体醪液:在固体发酵醪中添加缓冲液得到液体醪液，缓冲液加入量为固体发酵醪重量的2-3倍； 第三步、过滤:将液体醪液过滤，得到酶液； 第四步、超滤浓缩:通过超滤方式对酶液进行浓缩，浓缩的倍数为2-3倍，得到浓缩酶液； 第五步、酶活检测、复配:对浓缩酶液的酶活进行测定，然后根据复合酶的配方计算各种单酶的添加量，进行复配，稀释到规定水平，得到液体酶半成品； 第六步、添加保护剂:在液体酶半成品中添加稳定保护剂，即得液体复合酶。
2.根据权利要求1 所述的一种固体发酵来源的液体复合酶的制备方法，其特征在于:所述的菌种为长柄木霉菌粉、米曲霉菌粉、黑曲霉菌粉和解淀粉芽孢杆菌菌粉中的一种或者一种以上的混合物。
3.根据权利要求1所述的一种固体发酵来源的液体复合酶的制备方法，其特征在于:所述的缓冲液为柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液，pH为5.0~6.0。
4.根据权利要求1所述的一种固体发酵来源的液体复合酶的制备方法，其特征在于:所述的过滤采取三级过滤，液体醪液依次通过板框过滤、离心过滤和陶瓷膜过滤。
5.根据权利要求1所述的一种固体发酵来源的液体复合酶的制备方法，其特征在于:所述的稳定保护剂为质量分数为60%的乳酸钠水溶液，添加量为液体酶半成品重量的20-25%。
6.根据权利要求5所述的一种固体发酵来源的液体复合酶的制备方法，其特征在于:所述的添加量为液体酶半成品重量的23%。
7.如权利要求1-6任一项所制备的液体复合酶用于制备饲料的添加剂。
【文档编号】C12R1/69GK104017790SQ201410275822
【公开日】2014年9月3日 申请日期:2014年6月19日 优先权日:2014年6月19日
【发明者】颜鹏飞 申请人:颜鹏飞