一株分解纤维素的酵母及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一株分解纤维素的酵母及其应用，涉及具有特色生理功能的酵母。本发明酵母从宜宾浓香型白酒产区分离得到，其保藏编号为CGMCC?No.9140，分类命名为汉逊德巴利酵母(Debaryomyces?hansenii)；生长条件为温度27-34℃，pH4.5-6.5，在YPD培养基上32℃培养2天后菌落为白色，直径5mm左右，表面湿润光滑，凸起，易于挑起，细胞呈圆形，出芽生殖。在pH5.8的YPD液体培养基，32℃培养36h，其产纤维素酶活性为1.837U/mL。本发明酵母可用于生产以纤维素为主要原料的高蛋白饲料，使白酒糟蛋白含量增加60％以上；也可用于生产丢糟酒，提高丢糟酒产量及品质。
【专利说明】一株分解纤维素的酵母及其应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及具有特色生理功能的酵母，具体涉及一株分解纤维素的酵母及其应用。
【背景技术】
[0002]目前，纤维素的分解除采用蒸汽爆破、酸水解等物理化学方法外，主要利用霉菌或细菌所产的纤维素酶分解，特别是霉菌如绿色木霉在通氧发酵情况下，产纤维素酶能力可达30U/mL发酵液，是目前主要的纤维素酶生产菌种。
[0003]在生产中一般直接使用霉菌所产纤维素酶，但白酒白酒糟酸度大，且富含多种醇、醛、酯等物质，霉菌所产纤维素酶的酶活性在白酒糟内容易受到这些醇、醛等有害物质的抑制，导致其作用效果较差，用量较大，一般每口窖池用量在1kg以上；同时直接接种霉菌处理白酒糟，则会由于酒糟内溶氧较低，需氧量大的霉菌仅在表层20cm左右生长，而且生长速度较慢，不能用于生产白酒丢糟饲料；同时由于霉菌副产物多具有不良风味，也不能用于生产丢糟白酒，因此，直接接种霉菌处理白酒糟不可行，也未见有其他微生物直接处理白酒糟的相关报道。
[0004]酵母作为一种较为安全的微生物，产毒害物质的可能性远远少于霉菌、细菌，其所产纤维素酶在食品、医药或饲料工业中有更好的应用优势，特别是由于其对酒糟环境的良好适应性，产纤维素酶的酵母在白酒糟的处理上具有很好的应用价值，主要体现在利用该酵母生产酒糟饲料及丢糟酒上，不仅可利用酵母所产纤维素酶分解酒糟纤维素用于酵母自身生长，积累菌体蛋白，还可利用酵母的发酵能力，产生一定量的乙醇。
[0005]但迄今为止，降解纤维素的酵母研究较少，能直接降解未经任何处理的白酒糟纤维素的酵母更是未见报道。
【发明内容】
[0006]本发明的目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一株分解纤维素的酵母及其应用。
[0007]本发明的目的通过下述技术方案实现:
[0008]宜宾浓香型白酒产区是浓香型白酒的主产地，由于长期的生产驯化及选择富集作用，形成了其独特的酵母区系，其中包括一些具有特色生理功能的酵母资源。
[0009]一株分解纤维素的酵母，从宜宾浓香型白酒产区分离得到，编号YB1。该酵母于2014年5月9日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址:北京市朝阳区北辰西路I号院3号，中国科学院微生物研究所)，保藏编号为CGMCCN0.9140,分类命名为汉逊德巴利酵母(Debaryomyces hansenii)。
[0010]本发明的酵母生长条件优选为:温度27-34°C，pH4.5-6.5 ;更优选的，其生长条件为:温度 32°C，pH5.8。
[0011]本发明的酵母在YPD培养基上32°C培养2天后，其菌落为白色，直径5mm左右，表面湿润光滑，凸起，易于挑起；细胞呈圆形，出芽生殖。所述的YPD培养基的配方为:葡萄糖20g、酵母粉10g、蛋白胨20g、琼脂1gj 100mL,自然pH, 121°C高压灭菌30min。
[0012]本发明的酵母可用于分解纤维素，其能够以纤维素为唯一碳源生长，并在添加羧甲基纤维素的YNB琼脂培养基(上海源叶生物科技有限公司出产)上分解纤维素。
[0013]将本发明保存的酵母活化制成0.50D的酵母菌悬液后按5%接种量接种到pH调至
5.8的YPD液体培养基中，32°C培养36h，其产纤维素酶活性最高，为1.837U/mL。
[0014]本发明酵母可用于生产以纤维素为主要原料的高蛋白饲料，也可用于生产丢糟酒坐寸ο
[0015]本发明相对于现有技术具有如下优点和效果:
[0016]现有高产纤维素酶的霉菌如绿色木霉等产纤维素酶活性一般可达30U/mL，与这些霉菌相比，该酵母的酶活不够高，但其优势在于其对白酒糟的适应性较好，可直接利用酒糟纤维素生产优质酵母蛋白，使白酒糟蛋白含量增加60%以上，而且生产周期短，生产方式简便，生产过程便于控制，无不良副产物或不愉快气味产生，清洁环保。
【专利附图】
【附图说明】
[0017]图1本发明分解纤维素的酵母在YPD琼脂培养基上32°C培养2d后的菌落形态。
[0018]图2本发明分解纤维素的酵母在YH)琼脂培养基上32°C培养2d后的细胞形态(放大640倍)。
【具体实施方式】
[0019]下面结合实施例对本发明做进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
[0020]本发明分解纤维素的酵母，从宜宾浓香型白酒产区分离得到，编号YB1。该酵母于2014年5月9日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址:北京市朝阳区北辰西路I号院3号，中国科学院微生物研究所)，保藏编号为CGMCCN0.9140,分类命名为汉逊德巴利酵母(Debaryomyces hansenii)。
[0021]本发明的酵母在Yro培养基上32°C培养2天后，菌落形态如图1所示:菌落为白色，直径5mm左右，表面湿润光滑，凸起，易于挑起；细胞形态如图2所示:细胞呈圆形，出芽生殖。所述的YPD培养基的配方为:葡萄糖20g、酵母粉10g、蛋白胨20g、琼脂1gJK100mL,自然 pH, 121 °C 高压灭菌 30min。
[0022]实施例1利用本发明酵母生产以纤维素为主要原料的高蛋白饲料
[0023]首先将斜面保存的酵母菌种利用接种针接种I环到YPD液体培养基中，32°C培养I天，再对得到的酵母菌悬液在25°C下，3000rpm离心5min，倒去上清液，添加无菌水后混匀再次在相同条件下离心，洗涤菌体，制成浓度为0.50D的酵母菌悬液；
[0024]按4%接种量，利用喷雾器直接喷洒该酵母菌悬液至新鲜白酒糟中，混匀，露天堆积2-3天，监测酸度变化，至pH升高至5左右检测酒糟蛋白含量，达到16-18%即可按常规糟粉饲料加工工艺加工成高蛋白糟粉饲料，与未使用该酵母相比蛋白含量增加60%以上。
[0025]实施例2利用本发明酵母生产丢糟酒，提高丢糟酒产量及品质
[0026]按照实施例1中的方法制备酵母菌悬液，在混入曲粉的同时，按1%接种量接种至添加大曲复糟发酵的白酒糟醅中，入窖发酵生产丢糟酒，与未添加该酵母的复糟发酵糟醅相比，可使丢糟酒出酒率提高0.8-1%，同时不影响丢糟酒其他理化指标。
[0027]上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
【权利要求】
1.一株分解纤维素的酵母，其特征在于:保藏编号为CGMCCN0.9140，分类命名为汉逊德巴利酵母(Debaryomyces hansenii)。
2.根据权利要求1所述的分解纤维素的酵母，其特征在于:生长条件为:温度27-34°C, pH4.5-6.5。
3.根据权利要求2所述的分解纤维素的酵母，其特征在于:生长条件为:温度32°C，pH5.8。
4.根据权利要求1所述的分解纤维素的酵母，其特征在于:在YPD培养基上32°C培养2天后，菌落为白色，直径5mm左右，表面湿润光滑，凸起，易于挑起；细胞呈圆形，出芽生殖。
5.根据权利要求1所述的分解纤维素的酵母，其特征在于:在pH为5.8的YPD液体培养基中，32°C培养36h，其产纤维素酶活性最高，为1.837U/mL。
6.权利要求1所述的分解纤维素的酵母在分解纤维素中的应用。
7.权利要求1所述的分解纤维素的酵母在生产以纤维素为主要原料的高蛋白饲料中的应用。
8.权利要求1所述的 分解纤维素的酵母在生产丢糟酒中的应用。
【文档编号】C12R1/645GK104130954SQ201410324366
【公开日】2014年11月5日 申请日期:2014年7月8日 优先权日:2014年7月8日
【发明者】游玲, 王涛, 王松 申请人:宜宾学院