一种降解舰艇船舶餐厨垃圾的微生物菌剂及其制备方法
【专利摘要】本发明提供了一种降解舰艇船舶餐厨垃圾的微生物菌剂及其制备方法。它解决了现有船舶餐厨垃圾处理能力差的问题。本微生物菌剂由以下质量分数的菌种原料混合而成：枯草芽孢杆菌15-35份、侧孢芽孢杆菌10-20份、解脂假丝酵母30-50份、绿色木霉10-20份、黑曲霉15-35份。其制备方法为：1)将上述各菌株分别进行单株培养，再进行活化培养及发酵；2)用载体进行吸附，各菌株获得单一菌粉；3)取得相应组分的各菌株单一菌粉，充分混合得到微生物菌剂。本发明可对单一干燥菌粉做合理配比，使各单菌相互协作。复合菌剂中各单一组分有效活菌数高，只需少量菌剂便可快速、充分地降解垃圾，成本低、使用方法简便。
【专利说明】一种降解舰艇船舶餐厨垃圾的微生物菌剂及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物【技术领域】，涉及一种降解舰艇船舶餐厨垃圾的微生物菌剂及其制 备方法。
【背景技术】
[0002] 随着世界经济的发展和海洋运输的加强，船舶垃圾产生量持续增加。餐厨垃圾作 为船舶垃圾中的重要组成部分，具有高油脂、高蛋白质、高盐分含量等特质。由于舰艇船舶 具有空间狭小、密闭性强等特殊的特点，餐厨垃圾若处理不当就会变质腐烂、滋生蚊蝇、散 发恶臭甚至滋生细菌病毒。舰艇船舶上餐厨垃圾的处理已成为海洋运输中亟待解决的问 题。
[0003] 目前餐厨垃圾的主要处理方法有：物理法、化学法和生物法。物理法处理餐厨垃圾 主要有超声波法、汽浮法、粗粒化法。化学法处理餐厨垃圾主要有氧化法和絮凝法。生物学 方法的基本原理是微生物利用餐厨垃圾中部分有机物作为营养源进行增殖，在微生物增殖 过程中将餐厨垃圾中的大分子物质转化为有用的小分子，从而达到餐厨垃圾减量和转化的 目的。由于舰艇船舶空间的特殊性，以及生物法处理餐厨垃圾的效率高、成本低、无二次污 染等特点，生物法已成为处理舰艇船舶餐厨垃圾的主要方法。利用微生物的新陈代谢，可快 速、高效地降解餐厨垃圾，是餐厨垃圾无害化、减量化的一种理想的处理方法。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是针对现有的技术存在上述问题，提出了一种针对舰艇船舶餐厨垃 圾高油脂、高蛋白质、高盐分含量等特质，提供所培养的微生物进行生物法高效处理的降解 舰艇船舶餐厨垃圾的微生物菌剂及其制备方法。
[0005] 本发明的目的可通过下列技术方案来实现：一种降解舰艇船舶餐厨垃圾的微生物 菌剂，所述菌剂由以下质量分数的菌种原料混合而成：枯草芽孢杆菌15-35份、侧孢芽孢杆 菌10-20份、解脂假丝酵母30-50份、绿色木霉10-20份、黑曲霉15-35份。
[0006] -种降解舰艇船舶餐厨垃圾的微生物菌剂的使用方法，将微生物菌剂与舰艇船舶 餐厨垃圾按照质量比为1:300-500的比例充分混合，在温度为28-40°C下，发酵36-72h。
[0007] -种降解舰艇船舶餐厨垃圾的微生物菌剂的制备方法，包括以下制备步骤：
[0008] 1)、将枯草芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、解脂假丝酵母、绿色木霉、黑曲霉分别进行单 株培养，然后将所获得的单株菌落按照10%的接种量接入液体培养基中进行活化培养，再 将活化后的菌种接入装有体积比为60-75%培养基的发酵设备中进行发酵；
[0009] 2)、将所得发酵液用载体进行吸附，制得枯草芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、解脂假 丝酵母的有效活菌数为5X10 9个/克，制得绿色木霉、黑曲霉的有效活菌数为5X108 个/克，上述各菌株获得单一菌粉，吸附载体的各组分质量比为：硅藻土 ：麸皮：米糠= 1-1. 5:0. 5-1. 5:2-3 ；
[0010] 3)、取得枯草芽孢杆菌的单一菌粉15-35份、侧孢芽孢杆菌的单一菌粉10-20份、 解脂假丝酵母的单一菌粉30-50份、绿色木霉的单一菌粉10-20份、黑曲霉的单一菌粉 15-35份，将上述各菌株单一菌粉的质量份数进行充分混合得到微生物菌剂。
[0011] 在上述的降解舰艇船舶餐厨垃圾的微生物菌剂的制备方法中，所述枯草芽孢杆菌 的单一菌粉的制备包括以下步骤：
[0012] 1)、将经纯化后的试管斜面上的枯草芽孢杆菌接种至装有体积比为10-20%的液 体活化培养基的三角瓶中；液体活化培养基的溶剂为蒸馏水，溶质组分及其浓度为：蛋白 胨8-12g/L、牛肉膏2-4g/L、可溶性淀粉15-35g/L、氯化钠4-6g/L，液体活化培养基的pH值 为7. 0-7. 2 ;接种枯草芽孢杆菌的液体活化培养基在温度35-37°C、摇床转速为140-160r/ min 下，培养 18-24h ;
[0013] 2)、将经步骤（1)活化所得的枯草芽孢杆菌接种至装有体积比为60-75%的发酵 培养基的发酵罐内，接种量为2-4%;发酵培养基的溶剂为蒸馏水，溶质组分及其浓度为：蛋 白胨8-12g/L、牛肉膏2-4g/L、可溶性淀粉15-35g/L、氯化钠4-6g/L，发酵培养基的pH值为 7. 0-7. 2 ;接种枯草芽孢杆菌的发酵培养基在温度35-37°C、搅拌转速为200-220r/min下， 扩大培养24-40h，直至发酵罐中的枯草芽孢杆菌产孢率为80%以上，将发酵后的枯草芽孢 杆菌用载体进行吸附，直至有效活菌数达到5 X 109个/克，即得枯草芽孢杆菌的单一菌粉。
[0014] 在上述的降解舰艇船舶餐厨垃圾的微生物菌剂的制备方法中，所述侧孢芽孢杆菌 的单一菌粉的制备包括以下步骤：
[0015] 1)、将经纯化后的试管斜面上的侧孢芽孢杆菌接种至装有体积比为10-20%的液 体活化培养基的三角瓶中；液体活化培养基的溶剂为蒸馏水，溶质组分及其浓度为：蛋白 胨8-12g/L、牛肉膏2-4g/L、甘露醇15-25g/L、酵母膏5-10g/L、葡萄糖15-25g/L、氯化钠 4_6g/L，液体活化培养基的pH值为7. 0-7. 2 ;接种侧孢芽孢杆菌的液体活化培养基在温度 35-37°C、摇床转速为 140-160r/min 下，培养 18-24h ;
[0016] 2)、将经步骤（1)活化所得的侧孢芽孢杆菌接种至装有体积比为60-75%的发酵 培养基的发酵罐内，接种量为2-4%;发酵培养基的溶剂为蒸馏水，溶质组分及其浓度为：蛋 白胨8-12g/L、牛肉膏2-4g/L、甘露醇15-25g/L、酵母膏5-10g/L、葡萄糖15-25g/L、氯化钠 4_6g/L，发酵培养基的pH值为7. 0-7. 2 ;接种侧孢芽孢杆菌的发酵培养基在温度35-37°C、 搅拌转速为200-220r/min下，扩大培养24-40h，直至发酵罐中的侧孢芽孢杆菌产孢率为 80%以上，将发酵后的侧孢芽孢杆菌用载体进行吸附，直至有效活菌数达到5 X 109个/克， 即得侧孢芽孢杆菌的单一菌粉。
[0017] 在上述的降解舰艇船舶餐厨垃圾的微生物菌剂的制备方法中，所述解脂假丝酵母 的单一菌粉的制备包括以下步骤：
[0018] 1)、将经纯化后的试管斜面上的解脂假丝酵母接种至装有体积比为10-40%的 液体活化培养基的三角瓶中；液体活化培养基的溶剂为蒸馏水，溶质组分及其浓度为： 12Brix的麦芽汁，液体活化培养基的pH值自然；接种解脂假丝酵母的液体活化培养基在温 度 28-30°C、摇床转速为 110_130r/min 下，培养 35-45h ;
[0019] 2)、将经步骤（1)活化所得的解脂假丝酵母接种至装有体积比为60-75%的发 酵培养基的发酵罐内，接种量为2-4% ;发酵培养基的溶剂为蒸馏水，溶质组分及其浓度 为：12Brix的麦芽汁，发酵培养基的pH值自然；接种解脂假丝酵母的发酵培养基在温度 28-30°C、搅拌转速为140-180r/min下，扩大培养65-75h，将发酵后的解脂假丝酵母用载体 进行吸附，直至有效活菌数达到5 X 109个/克，即得解脂假丝酵母的单一菌粉。
[0020] 在上述的降解舰艇船舶餐厨垃圾的微生物菌剂的制备方法中，所述绿色木霉的单 一菌粉的制备包括以下步骤：
[0021] 1)、将经纯化后的试管斜面上的绿色木霉接种至装有体积比为10-20%的液体 活化培养基的三角瓶中；液体活化培养基的溶剂为蒸馏水，溶质组分及其浓度为：蔗糖 28-32g/L、硝酸钠2-4g/L、七水合硫酸镁0. 4-0. 6g/L、氯化钾0. 4-0. 6g/L、四水合硫酸亚铁 微量、磷酸氢二钾〇. 8-1. 2g/L，液体活化培养基的pH值为6. 0-6. 5,接种绿色木霉的液体活 化培养基在温度28-30°C、摇床转速为110_130r/min下，培养48-72h ;
[0022] 2)、将经步骤（1)活化所得的绿色木霉接种至装有固体发酵培养基的固体发酵池 内；固体发酵培养基中各组分的组成为：玉米碎粒15-30份、稻壳25-35份、麸皮20-40份、 蔗糖2-8份、七水合硫酸镁0. 1-0. 8份、尿素2-10份；接种绿色木霉的固体发酵培养基在 28-30°C下发酵培养5-8天，直至绿色木霉的孢子数达到5 X 108个/克，然后将发酵产物直 接破碎，即得绿色木霉的单一菌粉。
[0023] 在上述的降解舰艇船舶餐厨垃圾的微生物菌剂的制备方法中，所述黑曲霉的单一 菌粉的制备包括以下步骤：
[0024] 1)、将经纯化后的试管斜面上的黑曲霉接种至装有体积比为10-20%的液体活化 培养基的三角瓶中；液体活化培养基的溶剂为蒸馏水，溶质组分及其浓度为：蔗糖28-32g/ L、硝酸钠2-4g/L、七水合硫酸镁0. 4-0. 6g/L、氯化钾0. 4-0. 6g/L、四水合硫酸亚铁微量、磷 酸氢二钾0. 8-1. 2g/L，液体活化培养基的pH值为6. 0-6. 5 ;接种黑曲霉的液体活化培养基 在温度28-30°C、摇床转速为110_130r/min下，培养45-60h ;
[0025] 2)、将经步骤（1)活化所得的黑曲霉接种至装有固体发酵培养基的固体发酵池 内；固体发酵培养基的各组分的组成为：玉米碎粒15-30份、黄豆饼粉20-25份、二水合硫 酸锰0. 1-0. 5份、二水合硫酸锌0. 2-0. 8份、七水合硫酸镁0. 1-0. 8份、稻壳25-35份、麸皮 10-20份、尿素2-8份；接种黑曲霉的固体发酵培养基在28-30°C下发酵培养3-5天，直至黑 曲霉的孢子数达到5 X 108个/克，然后将发酵产物直接破碎，即得黑曲霉的单一菌粉。
[0026] 与现有技术相比，本发明将枯草芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、解脂假丝酵母、绿色木 霉、黑曲霉的菌株进行扩大培养，再进行高密度扩大培养，最后用载体吸附制得各菌株的单 一干燥菌粉，根据其用途采用合理配比，复合得到用于降解舰艇船舶餐厨垃圾的微生物菌 齐U，用于舰艇船舶餐厨垃圾的处理，具有以下优点：
[0027] (1)针对不同组成的舰艇船舶餐厨垃圾可对单一干燥菌粉做合理配比，使各单菌 相互协作，协同降解舰艇船舶餐厨垃圾。
[0028] (2)复合菌剂中各单一组分有效活菌数高，用于降解舰艇船舶餐厨垃圾时，只需少 量菌剂便可快速、充分地降解舰艇船舶餐厨垃圾，故菌剂用量少、成本低、使用方法简便。
【具体实施方式】
[0029] 以下是本发明的具体实施例，对本发明的技术方案作进一步的描述，但本发明并 不限于这些实施例。
[0030] 实施例1.餐厨垃圾分解菌剂的制备
[0031] 一、各菌株单一菌粉的制备
[0032] 分别对枯草芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、解脂假丝酵母、绿色木霉、黑曲霉进行单株 培养和高密度扩大培养，最后将培养后得到的各单一菌体用载体吸附，制得各菌株的单一 干燥菌粉，吸附载体各组分的质量比为：娃藻土 ：麸皮：米糠=1:0. 8:2. 5。
[0033] 1.枯草芽孢杆菌单一菌粉的制备
[0034] (1)将经纯化后的试管斜面上的枯草芽孢杆菌接种至装有体积比为15%的液体 活化培养基的三角瓶中，所述液体活化培养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为：蛋白胨l〇g/L、 牛肉膏3g/L、可溶性淀粉20g/L、氯化钠5g/L、pH7. 0 ;在温度35°C摇床转速为140r/min下， 培养22h ;
[0035] (2)将活化所得的枯草芽孢杆菌接种至装有体积比为60%的发酵培养基的发酵 罐内，接种量为4%，所述发酵培养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为：蛋白胨10g/L、牛肉膏 3g/L、可溶性淀粉20g/L、氯化钠5g/L、pH7. 0 ;在温度35°C搅拌转速为210r/min下，扩大培 养24h，测得发酵罐中的枯草芽孢杆菌产孢率为85 %，将发酵后的枯草芽孢杆菌用载体进 行吸附，直至有效活菌数达到5 X 109个/克，即得枯草芽孢杆菌单一菌粉。
[0036] (3)枯草芽孢杆菌单一菌粉有效活菌数的测定
[0037] ①采集枯草芽孢杆菌单一菌粉不少于500g，从中称取10g，加入带玻璃珠的100ml 无菌水中，静置20min后在200r/min的摇床上充分震荡30min，既得枯草芽孢杆菌单一菌 粉的母液菌悬液。
[0038] ②用无菌吸管吸取5ml上述母液菌悬液，加入45ml无菌水中，混匀既得ΙχΚΓ1稀 释的菌悬液，按此法依次稀释，分别得 lxl〇_2、lxl〇_3、lxl〇_4、lxl〇_5、lxl〇_ 6、lxl〇_7、lxl〇_8、 lxl(T9稀释的菌悬液（每个稀释度必须更换无菌吸管）。
[0039] ③用1ml无菌吸管分别吸取稀释度为ΙχΚΓ7、1χ1(Γ8、1χ1(Γ 9的菌悬液0. 1ml，加至 直径为9cm平皿的琼脂培养基表面，用无菌玻璃刮刀将菌悬液均匀地涂于培养基表面，每 一稀释度重复3次，同时加无菌水的空白对照，于适宜条件下培养，每个稀释度取5个菌落 的菌体，涂片染色，显微镜观察识别后计数菌落。
[0040] ④菌落计数，以平板上出现30-300个菌落数的平板为计数标准（丝状真菌为 10-150个菌落数）；当只有一个稀释度其平均菌落数在30-300之间时，则以该平均菌落数 乘以其稀释倍数；若有两个稀释度其平均菌落数均在30-300之间，则按两者菌落数之比值 来决定，若其比值小于2,则计数两者的平均数，若比值大于2,则计数其中稀释度较小的菌 落总数；若三个稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀 释倍数；若三个稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释 倍数；若三个稀释度的平均菌落数均不在30-300之间，则以最接近300或30的平均菌落数 乘以稀释倍数；有效活菌数计算按式（1)计算： ω ,
[0041] η = :' Χ Χ、? xlO8 式（1) m x v2
[0042] 式中：
[0043] n_质量有效活菌数，单位为亿每克（亿/克）；
[0044] Γ -有效菌落平均数，单位为个；
[0045] k-稀释倍数；
[0046] Vi-基础液体积，单位为毫升（ml);
[0047] m-样品量，单位为克（g);
[0048] v2_菌悬液加入量，单位为毫升（ml)。
[0049]枯草芽孢杆菌有效活菌数测定所用固体培养基为营养琼脂培养基，所述营养琼脂 培养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为：牛肉膏5g/L、蛋白胨10g/L、氯化钠5g/L、琼脂粉20g/ L，ρΗ7· 0〇
[0050] 经测定所得枯草芽孢杆菌单一菌粉中有效活菌数含量为60亿/克。
[0051] 2.侧孢芽孢杆菌单一菌粉的制备
[0052] (1)将经纯化后的试管斜面上的侧孢芽孢杆菌接种至装有体积比为10%的液体 活化培养基的三角瓶中，所述液体活化培养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为：蛋白胨8g/L、 牛肉膏3g/L、甘露醇20g/L、酵母膏7g/L、葡萄糖18g/L、氯化钠4g/L、pH7. 0 ;在温度35°C摇 床转速为160r/min下，培养20h ;
[0053] (2)将经活化所得的侧孢芽孢杆菌接种至装有体积比为65%的发酵培养基的发 酵罐内，接种量为3%，所述发酵培养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为：蛋白胨8g/L、牛肉膏 3g/L、甘露醇20g/L、酵母膏7g/L、葡萄糖18g/L、氯化钠4g/L、pH7. 0 ;在温度35°C搅拌转速 为200r/min下，扩大培养32h，测得发酵罐中的侧孢芽孢杆菌产孢率为85 %，将发酵后的侧 孢芽孢杆菌用载体进行吸附，直至有效活菌数达到5 X 109个/克，即得侧孢芽孢杆菌单一 菌粉。
[0054] (3)侧孢芽孢杆菌单一菌粉有效活菌数测定
[0055] 侧孢芽孢杆菌单一菌粉中有效活菌数的测定与枯草芽孢杆菌单一菌粉有效活菌 数测定方法、步骤相同；其中，侧孢芽孢杆菌有效活菌数测定所用固体培养基为CM 3营养琼 脂培养基，所述〇113营养琼脂培养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为：牛肉膏lg/L、酵母粉2g/ L、蛋白胨5g/L、氯化钠5g/L、琼脂粉20g/L，pH7. 0。
[0056] 经测定所得侧孢芽孢杆菌单一菌粉中有效活菌数含量为65亿/克。
[0057] 3.解脂假丝酵母单一菌粉的制备
[0058] (1)将经纯化后的试管斜面上的解脂假丝酵母接种至装有体积比为25%的液体 活化培养基的三角瓶中，所述液体活化培养基，溶剂为蒸馏水，溶质为浓度为12Brix的麦 芽汁，pH自然；在温度28°C摇床转速为120r/min下，培养35h ;
[0059] (2)将经活化所得的解脂假丝酵母接种至装有体积比为75%的发酵培养基的发 酵罐内，接种量为4%，所述发酵培养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为12Brix的麦芽汁，pH自 然；在温度28°C搅拌转速为140r/min下，扩大培养72h，将发酵后的解脂假丝酵母用载体进 行吸附，直至有效活菌数达到5 X 109个/克，即得解脂假丝酵母单一菌粉。
[0060] (3)解脂假丝酵母单一菌粉有效活菌数测定
[0061] 解脂假丝酵母单一菌粉中有效活菌数的测定与枯草芽孢杆菌单一菌粉有效活菌 数测定方法、步骤相同；其中，解脂假丝酵母有效活菌数测定所用固体培养基为酵母菌培养 基，所述酵母菌培养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为：葡萄糖200g/L、酵母粉4g/L、尿素2g/ L、琼脂粉 20g/L，pH4.5。
[0062] 经测定所得解脂假丝酵母单一菌粉中有效活菌数含量为55亿/克。
[0063] 4.绿色木霉单一菌粉的制备
[0064] (1)将经纯化后的试管斜面上的绿色木霉接种至装有体积比为10%的液体活化 培养基的三角瓶中，所述液体活化培养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为：蔗糖30g/L、硝酸 钠2g/L、七水合硫酸镁0. 5g/L、氯化钾0. 5g/L、四水合硫酸亚铁微量、磷酸氢二钾lg/L、 pH6. 2,在温度28°C摇床转速为130r/min下，培养48h ;
[0065] (2)将经活化所得的绿色木霉接种至装有固体发酵培养基的固体发酵池内，所述 固体发酵培养基的各组分的组成为：玉米碎粒18份、稻壳30份、麸皮35份、蔗糖5份、七水 合硫酸镁〇. 5份、尿素5份；在28°C下发酵培养7天，直至孢子数达到5 X 108个/克，然后 将发酵产物直接破碎，即得绿色木霉单一菌粉。
[0066] (3)绿色木霉单一菌粉有效活菌数测定
[0067] 绿色木霉单一菌粉中有效活菌数的测定与枯草芽孢杆菌单一菌粉有效活菌数测 定方法、步骤相同；其中，绿色木霉有效活菌数测定所用固体培养基为PDA培养基，所述PDA 培养基，各组分浓度为：马铃薯浸取液1L、葡萄糖20g、琼脂粉15g，pH自然；其中马铃薯浸 取液的制备方法为：称取马铃薯200g，洗净去皮后切成小块，加蒸馏水1000ml煮沸半个小 时，后经双层纱布过滤，将滤液补足l〇〇〇ml，既得所述马铃薯浸取液。
[0068] 经测定所得绿色木霉单一菌粉中有效活菌数含量为6亿/克。
[0069] 5.黑曲霉单一菌粉的制备
[0070] (1)将经纯化后的试管斜面上的黑曲霉接种至装有体积比为15%的液体活化培 养基的三角瓶中，所述液体活化培养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为：蔗糖28g/L、硝酸钠 3g/L、七水合硫酸镁0. 4g/L、氯化钾0. 4g/L、四水合硫酸亚铁微量、磷酸氢二钾1. 2g/L、 pH6. 5,在温度30°C摇床转速为120r/min下，培养55h ;
[0071] (2)将经活化所得的黑曲霉接种至装有固体发酵培养基的固体发酵池内，所述固 体发酵培养基的各组分的组成为：玉米碎粒15份、黄豆饼粉22份、二水合硫酸锰0. 2份、二 水合硫酸锌〇. 5份、七水合硫酸镁0. 5份、稻壳35份、麸皮15份、尿素4份；在30°C下发酵 培养5天，直至孢子数达到5 X 108个/克，然后将发酵产物直接破碎，即得黑曲霉单一菌粉。 [0072] (3)黑曲霉单一菌粉有效活菌数测定
[0073] 黑曲霉单一菌粉中有效活菌数的测定与枯草芽孢杆菌单一菌粉有效活菌数测定 方法、步骤相同；其中，黑曲霉有效活菌数测定所用固体培养基为PDMA培养基，所述PDMA培 养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为：马铃薯浸取液500ml、2Brix麦芽汁500ml、葡萄糖20g、微 生物 &0· 05g、琼脂粉 20g/L，ρΗ5· 5。
[0074] 经测定所得黑曲霉单一菌粉中有效活菌数含量为5亿/克。
[0075] 实施例2.餐厨垃圾分解菌剂的制备
[0076] -、各菌株单一菌粉的制备
[0077] 分别对枯草芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、解脂假丝酵母、绿色木霉、黑曲霉进行单株 培养和高密度扩大培养，最后将培养后得到的各单一菌体用载体吸附，制得各菌株的单一 干燥菌粉，吸附载体各组分的质量比为：娃藻土 ：麸皮：米糠=1. 2:0. 6:2。
[0078] 1.枯草芽孢杆菌单一菌粉的制备
[0079] (1)将经纯化后的试管斜面上的枯草芽孢杆菌接种至装有体积比为10%的液体 活化培养基的三角瓶中，所述液体活化培养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为：蛋白胨12g/L、 牛肉膏4g/L、可溶性淀粉15g/L、氯化钠5g/L、pH7. 2 ;在温度37°C摇床转速为160r/min下， 培养24h ;
[0080] (2)将活化所得的枯草芽孢杆菌接种至装有体积比为65%的发酵培养基的发酵 罐内，接种量为3%，所述发酵培养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为：蛋白胨12g/L、牛肉膏 4g/L、可溶性淀粉15g/L、氯化钠5g/L、pH7. 2 ;在温度37°C搅拌转速为200r/min下，扩大培 养36h，测得发酵罐中的枯草芽孢杆菌产孢率为90%，将发酵后的枯草芽孢杆菌用载体进 行吸附，直至有效活菌数达到5 X 109个/克，即得枯草芽孢杆菌单一菌粉。
[0081] (3)枯草芽孢杆菌单一菌粉有效活菌数的测定
[0082] 测定方法同实施例1步骤1 (3)所述。
[0083] 经测定枯草芽孢杆菌单一菌粉有效活菌数含量为70亿/克。
[0084] 2.侧孢芽孢杆菌单一菌粉的制备
[0085] (1)将经纯化后的试管斜面上的侧孢芽孢杆菌接种至装有体积比为15%的液体 活化培养基的三角瓶中，所述液体活化培养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为：蛋白胨9g/L、 牛肉膏4g/L、甘露醇15g/L、酵母膏10g/L、葡萄糖20g/L、氯化钠5g/L、pH7. 2 ;在温度37°C 摇床转速为140r/min下，培养24h ;
[0086] (2)将经活化所得的侧孢芽孢杆菌接种至装有体积比为60%的发酵培养基的发 酵罐内，接种量为2%，所述发酵培养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为：蛋白胨9g/L、牛肉膏 4g/L、甘露醇15g/L、酵母膏10g/L、葡萄糖20g/L、氯化钠5g/L、pH7. 2 ;在温度37°C搅拌转 速为210r/min下，扩大培养28h，测得发酵罐中的侧孢芽孢杆菌产孢率为90 %，将发酵后的 侧孢芽孢杆菌用载体进行吸附，直至有效活菌数达到5 X 109个/克，即得侧孢芽孢杆菌单 一菌粉。
[0087] (3)侧孢芽孢杆菌单一菌粉有效活菌数测定
[0088] 侧孢芽孢杆菌单一菌粉中有效活菌数的测定与枯草芽孢杆菌单一菌粉有效活菌 数测定方法、步骤相同；其中，侧孢芽孢杆菌有效活菌数测定所用固体培养基为CM 3营养琼 脂培养基，所述〇113营养琼脂培养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为：牛肉膏lg/L、酵母粉2g/ L、蛋白胨5g/L、氯化钠5g/L、琼脂粉20g/L，pH7. 0。
[0089] 经测定所得侧孢芽孢杆菌单一菌粉中有效活菌数含量为55亿/克。
[0090] 3.解脂假丝酵母单一菌粉的制备
[0091] (1)将经纯化后的试管斜面上的解脂假丝酵母接种至装有体积比为35%的液体 活化培养基的三角瓶中，所述液体活化培养基，溶剂为蒸馏水，溶质为浓度为12Brix的麦 芽汁，pH自然；在温度30°C摇床转速为110r/min下，培养40h ;
[0092] (2)将经活化所得的解脂假丝酵母接种至装有体积比为60%的发酵培养基的发 酵罐内，接种量为3%，所述发酵培养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为12Brix的麦芽汁，pH自 然；在温度30°C搅拌转速为160r/min下，扩大培养68h，将发酵后的解脂假丝酵母用载体进 行吸附，直至有效活菌数达到5 X 109个/克，即得解脂假丝酵母单一菌粉。
[0093] (3)解脂假丝酵母单一菌粉有效活菌数测定
[0094] 解脂假丝酵母单一菌粉中有效活菌数的测定与枯草芽孢杆菌单一菌粉有效活菌 数测定方法、步骤相同；其中，解脂假丝酵母有效活菌数测定所用固体培养基为酵母菌培养 基，所述酵母菌培养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为：葡萄糖200g/L、酵母粉4g/L、尿素2g/ L、琼脂粉 20g/L，pH4.5。
[0095] 经测定所得解脂假丝酵母单一菌粉中有效活菌数含量为62亿/克。
[0096] 4.绿色木霉单一菌粉的制备
[0097] (1)将经纯化后的试管斜面上的绿色木霉接种至装有体积比为15%的液体活化 培养基的三角瓶中，所述液体活化培养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为：蔗糖29g/L、硝酸 钠3g/L、七水合硫酸镁0. 4g/L、氯化钾0. 5g/L、四水合硫酸亚铁微量、磷酸氢二钾1. 2g/L、 pH6. 0,在温度29°C摇床转速为120r/min下，培养56h ;
[0098] (2)将经活化所得的绿色木霉接种至装有固体发酵培养基的固体发酵池内，所述 固体发酵培养基的各组分的组成为：玉米碎粒25份、稻壳25份、麸皮30份、蔗糖4份、七水 合硫酸镁〇. 6份、尿素3份；在29°C下发酵培养8天，直至孢子数达到5 X 108个/克，然后 将发酵产物直接破碎，即得绿色木霉单一菌粉。
[0099] (3)绿色木霉单一菌粉有效活菌数测定
[0100] 绿色木霉单一菌粉中有效活菌数的测定与枯草芽孢杆菌单一菌粉有效活菌数测 定方法、步骤相同；其中，绿色木霉有效活菌数测定所用固体培养基为PDA培养基，所述PDA 培养基，各组分浓度为：马铃薯浸取液1L、葡萄糖20g、琼脂粉15g，pH自然；其中马铃薯浸 取液的制备方法为：称取马铃薯200g，洗净去皮后切成小块，加蒸馏水1000ml煮沸半个小 时，后经双层纱布过滤，将滤液补足l〇〇〇ml，既得所述马铃薯浸取液。
[0101] 经测定所得绿色木霉单一菌粉中有效活菌数含量为5. 5亿/克。
[0102] 5.黑曲霉单一菌粉的制备
[0103] (1)将经纯化后的试管斜面上的黑曲霉接种至装有体积比为10%的液体活化培 养基的三角瓶中，所述液体活化培养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为：蔗糖31g/L、硝酸钠 2g/L、七水合硫酸镁0. 4g/L、氯化钾0. 5g/L、四水合硫酸亚铁微量、磷酸氢二钾0. 8g/L、 pH6. 3,在温度28°C摇床转速为110r/min下，培养48h ;
[0104] (2)将经活化所得的黑曲霉接种至装有固体发酵培养基的固体发酵池内，所述固 体发酵培养基的各组分的组成为：玉米碎粒20份、黄豆饼粉25份、二水合硫酸锰0. 3份、二 水合硫酸锌〇. 5份、七水合硫酸镁0. 6份、稻壳25份、麸皮10份、尿素5份；在28°C下发酵 培养4天，直至孢子数达到5 X 108个/克，然后将发酵产物直接破碎，即得黑曲霉单一菌粉。
[0105] (3)黑曲霉单一菌粉有效活菌数测定
[0106] 黑曲霉单一菌粉中有效活菌数的测定与枯草芽孢杆菌单一菌粉有效活菌数测定 方法、步骤相同；其中，黑曲霉有效活菌数测定所用固体培养基为PDMA培养基，所述PDMA培 养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为：马铃薯浸取液500ml、2Brix麦芽汁500ml、葡萄糖20g、微 生物 &0· 05g、琼脂粉 20g/L，ρΗ5· 5。
[0107] 经测定所得黑曲霉单一菌粉中有效活菌数含量为6. 5亿/克。
[0108] 实施例3.餐厨垃圾分解菌剂的制备
[0109] 一、各菌株单一菌粉的制备
[0110] 分别对枯草芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、解脂假丝酵母、绿色木霉、黑曲霉进行单株 培养和高密度扩大培养，最后将培养后得到的各单一菌体用载体吸附，制得各菌株的单一 干燥菌粉，吸附载体各组分的质量比为：硅藻土 ：麸皮：米糠=1. 5:0. 5:3。
[0111] 1.枯草芽孢杆菌单一菌粉的制备
[0112] (1)将经纯化后的试管斜面上的枯草芽孢杆菌接种至装有体积比为20%的液体 活化培养基的三角瓶中，所述液体活化培养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为：蛋白胨8g/L、 牛肉膏2g/L、可溶性淀粉30g/L、氯化钠6g/L、pH7. 1 ;在温度36°C摇床转速为150r/min下， 培养20h ;
[0113] (2)将活化所得的枯草芽孢杆菌接种至装有体积比为75%的发酵培养基的发酵 罐内，接种量为2 %，所述发酵培养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为：蛋白胨8g/L、牛肉膏2g/ L、可溶性淀粉30g/L、氯化钠6g/L、pH7. 1 ;在温度36°C搅拌转速为210r/min下，扩大培养 32h，测得发酵罐中的枯草芽孢杆菌产孢率为95%，将发酵后的枯草芽孢杆菌用载体进行吸 附，直至有效活菌数达到5 X 109个/克，即得枯草芽孢杆菌单一菌粉。
[0114] (3)枯草芽孢杆菌单一菌粉有效活菌数的测定
[0115] 测定方法同实施例1步骤1⑶所述。
[0116] 经测定枯草芽孢杆菌单一菌粉有效活菌数含量为55亿/克。
[0117] 2.侧孢芽孢杆菌单一菌粉的制备
[0118] (1)将经纯化后的试管斜面上的侧孢芽孢杆菌接种至装有体积比为18%的液体 活化培养基的三角瓶中，所述液体活化培养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为：蛋白胨llg/L、 牛肉膏2g/L、甘露醇25g/L、酵母膏5g/L、葡萄糖25g/L、氯化钠5g/L、pH7. 1 ;在温度36°C摇 床转速为150r/min下，培养22h ;
[0119] (2)将经活化所得的侧孢芽孢杆菌接种至装有体积比为70%的发酵培养基的发 酵罐内，接种量为4%，所述发酵培养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为：蛋白胨llg/L、牛肉膏 2g/L、甘露醇25g/L、酵母膏5g/L、葡萄糖25g/L、氯化钠5g/L、pH7. 1 ;在温度36°C搅拌转速 为210r/min下，扩大培养30h，测得发酵罐中的侧孢芽孢杆菌产孢率为85 %，将发酵后的侧 孢芽孢杆菌用载体进行吸附，直至有效活菌数达到5 X 109个/克，即得侧孢芽孢杆菌单一 菌粉。
[0120] (3)侧孢芽孢杆菌单一菌粉有效活菌数测定
[0121] 侧孢芽孢杆菌单一菌粉中有效活菌数的测定与枯草芽孢杆菌单一菌粉有效活菌 数测定方法、步骤相同；其中，侧孢芽孢杆菌有效活菌数测定所用固体培养基为cm 3营养琼 脂培养基，所述〇113营养琼脂培养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为：牛肉膏lg/L、酵母粉2g/ L、蛋白胨5g/L、氯化钠5g/L、琼脂粉20g/L，pH7. 0。
[0122] 经测定所得侧孢芽孢杆菌单一菌粉中有效活菌数含量为60亿/克。
[0123] 3.解脂假丝酵母单一菌粉的制备
[0124] (1)将经纯化后的试管斜面上的解脂假丝酵母接种至装有体积比为15%的液体 活化培养基的三角瓶中，所述液体活化培养基，溶剂为蒸馏水，溶质为浓度为12Brix的麦 芽汁，pH自然；在温度29°C摇床转速为120r/min下，培养45h ;
[0125] (2)将经活化所得的解脂假丝酵母接种至装有体积比为70%的发酵培养基的发 酵罐内，接种量为2%，所述发酵培养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为12Brix的麦芽汁，pH自 然；在温度29°C搅拌转速为170r/min下，扩大培养75h，将发酵后的解脂假丝酵母用载体进 行吸附，直至有效活菌数达到5 X 109个/克，即得解脂假丝酵母单一菌粉。
[0126] (3)解脂假丝酵母单一菌粉有效活菌数测定
[0127] 解脂假丝酵母单一菌粉中有效活菌数的测定与枯草芽孢杆菌单一菌粉有效活菌 数测定方法、步骤相同；其中，解脂假丝酵母有效活菌数测定所用固体培养基为酵母菌培养 基，所述酵母菌培养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为：葡萄糖200g/L、酵母粉4g/L、尿素2g/ L、琼脂粉 20g/L，pH4.5。
[0128] 经测定所得解脂假丝酵母单一菌粉中有效活菌数含量为55亿/克。
[0129] 4.绿色木霉单一菌粉的制备
[0130] (1)将经纯化后的试管斜面上的绿色木霉接种至装有体积比为20%的液体活化 培养基的三角瓶中，所述液体活化培养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为：蔗糖28g/L、硝酸 钠4g/L、七水合硫酸镁0. 6g/L、氯化钾0. 6g/L、四水合硫酸亚铁微量、磷酸氢二钾0. 9g/L、 pH6. 5,在温度30°C摇床转速为110r/min下，培养72h ;
[0131] (2)将经活化所得的绿色木霉接种至装有固体发酵培养基的固体发酵池内，所述 固体发酵培养基的各组分的组成为：玉米碎粒25份、稻壳25份、麸皮25份、蔗糖3份、七水 合硫酸镁〇. 4份、尿素7份；在30°C下发酵培养5天，直至孢子数达到5X 108个/克，然后 将发酵产物直接破碎，即得绿色木霉单一菌粉。
[0132] (3)绿色木霉单一菌粉有效活菌数测定
[0133] 绿色木霉单一菌粉中有效活菌数的测定与枯草芽孢杆菌单一菌粉有效活菌数测 定方法、步骤相同；其中，绿色木霉有效活菌数测定所用固体培养基为PDA培养基，所述PDA 培养基，各组分浓度为：马铃薯浸取液1L、葡萄糖20g、琼脂粉15g，pH自然；其中马铃薯浸 取液的制备方法为：称取马铃薯200g，洗净去皮后切成小块，加蒸馏水1000ml煮沸半个小 时，后经双层纱布过滤，将滤液补足1000ml，既得所述马铃薯浸取液。
[0134] 经测定所得绿色木霉单一菌粉中有效活菌数含量为5亿/克。
[0135] 5.黑曲霉单一菌粉的制备
[0136] (1)将经纯化后的试管斜面上的黑曲霉接种至装有体积比为20%的液体活化 培养基的三角瓶中，所述液体活化培养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为：蔗糖30g/L、硝酸 钠4g/L、七水合硫酸镁0. 6g/L、氯化钾0. 6g/L、四水合硫酸亚铁微量、磷酸氢二钾lg/L、 pH6. 0,在温度29°C摇床转速为130r/min下，培养60h ;
[0137] (2)将经活化所得的黑曲霉接种至装有固体发酵培养基的固体发酵池内，所述固 体发酵培养基的各组分的组成为：玉米碎粒30份、黄豆饼粉20份、二水合硫酸锰0. 5份、二 水合硫酸锌〇. 8份、七水合硫酸镁0. 2份、稻壳20份、麸皮20份、尿素2份；在28°C下发酵 培养5天，直至孢子数达到5 X 108个/克，然后将发酵产物直接破碎，即得黑曲霉单一菌粉。
[0138] (3)黑曲霉单一菌粉有效活菌数测定
[0139] 黑曲霉单一菌粉中有效活菌数的测定与枯草芽孢杆菌单一菌粉有效活菌数测定 方法、步骤相同；其中，黑曲霉有效活菌数测定所用固体培养基为PDMA培养基，所述PDMA培 养基，溶剂为蒸馏水，溶质浓度为：马铃薯浸取液500ml、2Brix麦芽汁500ml、葡萄糖20g、微 生物 &0· 05g、琼脂粉 20g/L，ρΗ5· 5。
[0140] 经测定所得黑曲霉单一菌粉中有效活菌数含量为5. 5亿/克。
[0141] 实例4.利用实例1-3制备的菌剂分解舰艇船舶餐厨垃圾
[0142] 本实例取用实例1-3制得的三种菌剂，分别接种至实际采集的舰艇船舶餐厨垃圾 中，观察菌剂在实际应用中发挥的作用，测定所选取舰艇船舶餐厨垃圾指标的减量率。
[0143] -、实验方法
[0144] 供试舰艇船舶餐厨垃圾：初始含水量为52. 01%，主要成分含量（以干基计）为淀 粉45. 45%、蛋白质20. 37%、脂肪19. 52%、纤维素2. 69%、其他11. 97% ;上述含量均为质 量百分数。
[0145] 取供试舰艇船舶餐厨垃圾3份，每份100公斤，取实例1-3中制备的餐厨垃圾菌剂 250g/种；一份菌剂对应一份供试餐厨垃圾，一起放入餐厨垃圾集成处理设备中，混合均匀 后在35°C下发酵48h ;待发酵结束后测定供试舰艇船舶餐厨垃圾中各组分的减量率，实验 重复3次。
[0146] 二、餐厨垃圾中各组分检测方法
[0147] 1.餐厨垃圾中含水量测定
[0148] (1)称取餐厨垃圾样品20g(精确到O.Olg)，放入已知质量的铝盒中，盖好盒盖，称 量铝盒加餐厨垃圾的质量；
[0149] (2)揭开盒盖，在80°C的烘箱中将铝盒烘干至恒重，取出后放入干燥器内冷却至 室温；
【权利要求】
1. 一种降解舰艇船舶餐厨垃圾的微生物菌剂，其特征在于，所述菌剂由以下质量分 数的菌种原料混合而成：枯草芽孢杆菌15-35份、侧孢芽孢杆菌10-20份、解脂假丝酵母 30-50份、绿色木霉10-20份、黑曲霉15-35份。
2. 根据权利要求1所述的降解舰艇船舶餐厨垃圾的微生物菌剂的使用方法，其特征在 于，将微生物菌剂与舰艇船舶餐厨垃圾按照质量比为1:300-500的比例充分混合，在温度 为 28-40°C下，发酵 36-72h。
3. 根据权利要求1所述的降解舰艇船舶餐厨垃圾的微生物菌剂的制备方法，其特征在 于，包括以下制备步骤： 1) 、将枯草芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、解脂假丝酵母、绿色木霉、黑曲霉分别进行单株培 养，然后将所获得的单株菌落按照10%的接种量接入液体培养基中进行活化培养，再将活 化后的菌种接入装有体积比为60-75%培养基的发酵设备中进行发酵； 2) 、将所得发酵液用载体进行吸附，制得枯草芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、解脂假丝 酵母的有效活菌数为5X109个/克，制得绿色木霉、黑曲霉的有效活菌数为5X10 8个 /克，上述各菌株获得单一菌粉，吸附载体的各组分质量比为：硅藻土 ：麸皮：米糠= 1-1. 5:0. 5-1. 5:2-3 ； 3) 、取得枯草芽孢杆菌的单一菌粉15-35份、侧孢芽孢杆菌的单一菌粉10-20份、解脂 假丝酵母的单一菌粉30-50份、绿色木霉的单一菌粉10-20份、黑曲霉的单一菌粉15-35 份，将上述各菌株单一菌粉的质量份数进行充分混合得到微生物菌剂。
4. 根据权利要求3所述的降解舰艇船舶餐厨垃圾的微生物菌剂的制备方法，其特征在 于，所述枯草芽孢杆菌的单一菌粉的制备包括以下步骤： 1) 、将经纯化后的试管斜面上的枯草芽孢杆菌接种至装有体积比为10-20%的液体 活化培养基的三角瓶中；液体活化培养基的溶剂为蒸馏水，溶质组分及其浓度为：蛋白胨 8-12g/L、牛肉膏2-4g/L、可溶性淀粉15-35g/L、氯化钠4-6g/L，液体活化培养基的pH值为 7. 0-7. 2 ;接种枯草芽孢杆菌的液体活化培养基在温度35-37°C、摇床转速为140-160r/min 下，培养18-24h ; 2) 、将经步骤（1)活化所得的枯草芽孢杆菌接种至装有体积比为60-75%的发酵培养 基的发酵罐内，接种量为2-4% ;发酵培养基的溶剂为蒸馏水，溶质组分及其浓度为：蛋白 胨8-12g/L、牛肉膏2-4g/L、可溶性淀粉15-35g/L、氯化钠4-6g/L，发酵培养基的pH值为 7. 0-7. 2 ;接种枯草芽孢杆菌的发酵培养基在温度35-37°C、搅拌转速为200-220r/min下， 扩大培养24-40h，直至发酵罐中的枯草芽孢杆菌产孢率为80%以上，将发酵后的枯草芽孢 杆菌用载体进行吸附，直至有效活菌数达到5 X 109个/克，即得枯草芽孢杆菌的单一菌粉。
5. 根据权利要求3所述的降解舰艇船舶餐厨垃圾的微生物菌剂的制备方法，其特征在 于，所述侧孢芽孢杆菌的单一菌粉的制备包括以下步骤： 1) 、将经纯化后的试管斜面上的侧孢芽孢杆菌接种至装有体积比为10-20%的液体 活化培养基的三角瓶中；液体活化培养基的溶剂为蒸馏水，溶质组分及其浓度为：蛋白 胨8-12g/L、牛肉膏2-4g/L、甘露醇15-25g/L、酵母膏5-10g/L、葡萄糖15-25g/L、氯化钠 4_6g/L，液体活化培养基的pH值为7. 0-7. 2 ;接种侧孢芽孢杆菌的液体活化培养基在温度 35-37°C、摇床转速为 140-160r/min 下，培养 18-24h ; 2) 、将经步骤（1)活化所得的侧孢芽孢杆菌接种至装有体积比为60-75%的发酵培养 基的发酵罐内，接种量为2-4%;发酵培养基的溶剂为蒸馏水，溶质组分及其浓度为：蛋白胨 8-12g/L、牛肉膏 2-4g/L、甘露醇 15-25g/L、酵母膏 5-10g/L、葡萄糖 15-25g/L、氯化钠 4-6g/ L，发酵培养基的pH值为7. 0-7. 2 ;接种侧孢芽孢杆菌的发酵培养基在温度35-37°C、搅拌 转速为200-220r/min下，扩大培养24-40h，直至发酵罐中的侧孢芽孢杆菌产孢率为80%以 上，将发酵后的侧孢芽孢杆菌用载体进行吸附，直至有效活菌数达到5 X 109个/克，即得侧 孢芽孢杆菌的单一菌粉。
6. 根据权利要求3所述的降解舰艇船舶餐厨垃圾的微生物菌剂的制备方法，其特征在 于，所述解脂假丝酵母的单一菌粉的制备包括以下步骤： 1) 、将经纯化后的试管斜面上的解脂假丝酵母接种至装有体积比为10-40%的液体 活化培养基的三角瓶中；液体活化培养基的溶剂为蒸馏水，溶质组分及其浓度为：12Brix 的麦芽汁，液体活化培养基的pH值自然；接种解脂假丝酵母的液体活化培养基在温度 28-30°C、摇床转速为 110_130r/min 下，培养 35-45h ; 2) 、将经步骤（1)活化所得的解脂假丝酵母接种至装有体积比为60-75%的发酵培养 基的发酵罐内，接种量为2-4%;发酵培养基的溶剂为蒸馏水，溶质组分及其浓度为：12Brix 的麦芽汁，发酵培养基的pH值自然；接种解脂假丝酵母的发酵培养基在温度28-30°C、搅拌 转速为140-180r/min下，扩大培养65-75h，将发酵后的解脂假丝酵母用载体进行吸附，直 至有效活菌数达到5 X 109个/克，即得解脂假丝酵母的单一菌粉。
7. 根据权利要求3所述的降解舰艇船舶餐厨垃圾的微生物菌剂的制备方法，其特征在 于，所述绿色木霉的单一菌粉的制备包括以下步骤： 1) 、将经纯化后的试管斜面上的绿色木霉接种至装有体积比为10-20%的液体活化培 养基的三角瓶中；液体活化培养基的溶剂为蒸馏水，溶质组分及其浓度为：蔗糖28-32g/L、 硝酸钠2-4g/L、七水合硫酸镁0. 4-0. 6g/L、氯化钾0. 4-0. 6g/L、四水合硫酸亚铁微量、磷酸 氢二钾0. 8-1. 2g/L，液体活化培养基的pH值为6. 0-6. 5,接种绿色木霉的液体活化培养基 在温度28-30°C、摇床转速为110_130r/min下，培养48-72h ; 2) 、将经步骤（1)活化所得的绿色木霉接种至装有固体发酵培养基的固体发酵池内； 固体发酵培养基中各组分的组成为：玉米碎粒15-30份、稻壳25-35份、麸皮20-40份、蔗 糖2-8份、七水合硫酸镁0. 1-0. 8份、尿素2-10份；接种绿色木霉的固体发酵培养基在 28-30°C下发酵培养5-8天，直至绿色木霉的孢子数达到5 X 108个/克，然后将发酵产物直 接破碎，即得绿色木霉的单一菌粉。
8. 根据权利要求3所述的降解舰艇船舶餐厨垃圾的微生物菌剂的制备方法，其特征在 于，所述黑曲霉的单一菌粉的制备包括以下步骤： 1) 、将经纯化后的试管斜面上的黑曲霉接种至装有体积比为10-20%的液体活化培养 基的三角瓶中；液体活化培养基的溶剂为蒸馏水，溶质组分及其浓度为：蔗糖28-32g/L、硝 酸钠2-4g/L、七水合硫酸镁0. 4-0. 6g/L、氯化钾0. 4-0. 6g/L、四水合硫酸亚铁微量、磷酸氢 二钾0. 8-1. 2g/L，液体活化培养基的pH值为6. 0-6. 5 ;接种黑曲霉的液体活化培养基在温 度 28-30°C、摇床转速为 110_130r/min 下，培养 45-60h ; 2) 、将经步骤（1)活化所得的黑曲霉接种至装有固体发酵培养基的固体发酵池内；固 体发酵培养基的各组分的组成为：玉米碎粒15-30份、黄豆饼粉20-25份、二水合硫酸锰 0. 1-0. 5份、二水合硫酸锌0. 2-0. 8份、七水合硫酸镁0. 1-0. 8份、稻壳25-35份、麸皮10-20 份、尿素2-8份；接种黑曲霉的固体发酵培养基在28-30°C下发酵培养3-5天，直至黑曲霉 的孢子数达到5 X 108个/克，然后将发酵产物直接破碎，即得黑曲霉的单一菌粉。
【文档编号】C12R1/885GK104087533SQ201410324504
【公开日】2014年10月8日 申请日期:2014年7月9日 优先权日:2014年7月9日
【发明者】孙庆利, 李宗武, 盛华斗, 马玉莹 申请人:山东城矿环保集团有限公司