一种保健组合物及其制备方法和用途
【专利摘要】本发明提供了一种保健组合物，所述保健组合物由下列重量份数的原料制成：发酵虫草菌粉(Cs-4)1～5份、丹参1～9份、枸杞子2～18份。本发明保健组合物主要由蝙蝠蛾拟青霉菌粉(发酵虫草菌粉Cs-4)及天然药用植物制成的，具有增强免疫力、抗氧化和滋补肾虚、改善肾功能作用。本发明还提供其制备方法和用途。
【专利说明】一种保健组合物及其制备方法和用途
【技术领域】
[0001] 本发明涉及食品领域，特别涉及一种主要由蝙蝠蛾拟青霉菌粉（发酵虫草菌粉 Cs-4)及天然药用植物制成的、具有增强免疫力、抗氧化和滋补肾虚、改善肾功能作用的保 健组合物及其制造方法和用途。
【背景技术】
[0002] 免疫力是人体自身的防御机制，是人体识别和消灭外来侵入的任何异物（病毒、 细菌等）的能力，是处理衰老、损伤、死亡、变性的自身细胞以及识别和处理体内突变细胞 和病毒感染细胞的能力。现代免疫学认为，免疫力是人体识别和排除"异己"的生理反应。 人体内执行这一功能的是免疫系统。数百万年来，人类生活在一个既适合生存又充满危险 的环境，人类能得以续存，是获得了非凡的免疫力。所以说免疫力是生物进化过程的产物。
[0003] 免疫力低下使免疫系统不能正常发挥保护作用，在此情况下，极易招致细菌、病 毒、真菌等感染，因此免疫力低下最直接的表现就是容易生病。因经常患病，加重了机体的 消耗，所以一般有体质虚弱、营养不良、精神萎靡、疲乏无力、食欲降低、睡眠障碍等表现，生 病、打针吃药便成了家常便饭。每次生病都要很长时间才能恢复，而且常常反复发作。
[0004] 随着社会走向老龄化，高血压发病率较高，不少高血压患者肾功能常不同程度受 损；高尿酸血症发病率也较高，也影响肾功能；尿路结石手术治疗也可能会影响肾功能；一 些药物，如一些抗生素、解热镇痛药等也可能会引发肾功能不全，等等。研制一种能补肾、帮 助恢复肾功能、维护肾功能的保健食品很有意义。
[0005] 在社会经济日益发展的今天，人民群众普遍追求提高生活质量、身体健康、长寿。 而大多数人都希望能通过运动、饮食、保健食品等手段提高自身的免疫力、抗氧化力和通过 中医保健来达到维护正常肾功能，延年益寿的目的。经济发展伴随着生活水平和卫生健康 知识水平的提高，人们这种愿望日渐强烈。因此研发一些能增强免疫力、抗氧化力和滋补肾 虚、改善肾功能的保健食品显得越来越重要。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的在于提供一种主要由蝙蝠蛾拟青霉菌粉（发酵虫草菌粉Cs-4)及天 然药用植物制成的、具有增强免疫力、抗氧化和滋补肾虚、改善肾功能作用的保健组合物。
[0007] 本发明所述的保健食品主要由以下重量配比的原料组成：发酵虫草菌粉 (Cs_4) 1?5份；丹参1?9份；枸祀子2?18份。
[0008] 优先的，所述保健组合物由下列重量份数的原料制成：发酵虫草菌粉（Cs-4) 1份、 丹参1.65份、枸杞子3. 53份。
[0009] 发酵虫草菌粉（Cs-4)是采用与虫草天然菌种发酵而得的人工虫草，具有与天然 虫草相似的化学成分和药理作用。发酵虫草菌粉（Cs-4)，功能补益肺肾，秘精益气。用于 肺肾两虚，精气不足，久咳虚喘，神疲乏力，不寐健忘，腰膝痠软，月经不调，阳瘘早泄；慢性 支气管炎、慢性肾功能不全、高脂血症、肝硬化见上述证候者。经药理实验证实，本品具有抗 炎，止咳、祛痰、镇静、促性腺作用；能降低血清胆固醇、甘油三酯和脂质过氧化物，增加心肌 与脑供血,具有较轻度降血压、抑制血小板聚集、延长缺氧时动物生存时间等作用，对心脑 组织有保护作用。其主要药理作用与青海天然虫草相似。
[0010] 窦敬芳、翁孝刚，发酵虫草菌粉对糖尿病大鼠肾脏结构的影响[中国临床康复 2006,10(15) :105?107]，动物实验显示，发酵虫草菌粉可阻止肾脏重量的增加和肾小球 各体积增大，显著改善糖尿病大鼠肾脏结构，防止系膜区扩大和基底膜增厚，具有显著地抗 肾小球纤维化的作用。同时降低组织糖基化蛋白水平，降低血脂，并可有效地防止肾小管病 变。
[0011] 郭丹丹等，虫草菌粉对糖尿病性心肌病模型大鼠心室重塑与心肌炎症因子的影响 [山东中医药大学学报2013, 37(1) :56?58]，研究结果表明，虫草菌粉可改善糖尿病性心 肌病模型大鼠的心室重塑，其机制可能与调节心肌细胞炎症因子NF-KB、TNF-a、IL-10的 表达有关。
[0012] 孙丽霞，发酵虫草菌粉治疗糖尿病肾病的临床研究[内蒙古医学杂志2009， 41(7) :811?812]，研究结果表明，采用发酵虫草菌粉治疗糖尿病肾病，具有较好的临床效 果。同时，发酵虫草菌粉能降低血清胆固醇、甘油三酯和脂质过氧化物，增加心肌与脑的供 血，具有轻度降血压、抑制血小板聚集、延长缺氧时动物生存时间等作用；对心、脑组织有保 护作用。
[0013] 张玉等，发酵虫草菌粉对早期糖尿病肾病患者尿蛋白及脂代谢的影响[药物与临 床试验2012, 50 (36) :64?65]，研究结果表明，在应用缬沙坦的基础上，加用发酵虫草菌粉 对早期糖尿病肾病患者有良好改善作用。
[0014] 刘瑞林等，发酵虫草菌粉对原发性高血压患者血尿酸及血脂的影响[临床报道 2006, 27 (8) :498?502]，研究结果表明，发酵虫草菌粉用于原发性高血压患者可同时降低 患者血UA、TG水平，并提高HDL-C水平。
[0015] 丹参，性味苦、微寒，归心、肝经。功能活血祛瘀，通经止痛，清心除烦，凉血消痈。用 于胸痹心痛，脘腹胁痛，癥瘕积聚，热痹疼痛，心烦不眠，月经不调，痛经经闭，疮疡肿痛。
[0016] 《中药现代研究与临床应用》:"丹参能明显增加肾动脉血流量。""丹参均能使各治 疗组血液粘稠度明显降低。""丹参不仅可以增加冠心病患者和动物的血液流速，而且可以 增加全血和红细胞2-3DPG含量，明显改善缺氧动物的氧分压和血氧饱和度。"
[0017] 《本经》："主心腹邪气，肠鸣幽幽如走水，寒热积聚；破癥除瘕，止烦满，益气。"
[0018] 《别录》："养血，去心腹痼疾结气，腰脊强，脚痹；除风邪留热，久服利人。"
[0019] 黄怀东等，丹参对冠心病患者血浆5-羟色胺水平及血液流变学的影响[中国基层 医学1997,4(4) :219]，研究表明：丹参具有抗张血管，改善心肌微循环灌注间，提高心肌对 缺血缺氧耐受性，高浓度丹参可抑制血小板致密颗粒释放5-ΗΤ ;由此可证明，丹参可阻止 5-ΗΤ释放，改善血液粘滞性和高凝血状态，是预防和治疗冠心病的有效药物。
[0020] 邓世周，丹参液对31例冠心病患者血液流变学影响的观察（新中医1994,1 : 59-60)，提示丹参液确实能够降低血粘度，改变红细胞膜的电荷，增加经细胞的变形能力， 降低血小板的凝聚性能，起到防治心脑血管疾病突然发作的目的。
[0021] 枸杞子，性味甘，平，归肝、肾经。功能滋补肝肾，益精明目。主治，用于虚劳精亏， 腰膝酸痛，眩晕耳鸣，阳萎遗精，内热消渴，血虚萎黄，目昏不明。
[0022] 《本草经疏》：枸杞子，润而滋补，兼能退热，而专于补肾、润肺、生津、益气，为肝肾 真阴不足、劳乏内热补益之要药。
[0023] 《本草汇言》：俗云枸杞善能治目，非治目也，能壮精益神，神满精足，故治目有效。
[0024] 《本草通玄》：枸杞子，补肾益精，水旺则骨强，而消渴、目昏、腰疼膝痛无不愈矣。
[0025] 《本草正》:枸杞，味重而纯，故能补阴，阴中有阳，故能补气。所以滋阴而不致阴衰， 助阳而能使阳旺。
[0026] 《中药大辞典》:枸杞滋肾，润肺，补肝，明目。治肝肾阴亏，腰膝酸软，头晕，目眩，目 昏多泪，虚劳咳嗽，消渴，遗精。
[0027] 王玲等，枸杞子多糖的分离、纯化、分析及免疫作用的研究[昆明医学院学报 1995,16(2)29?32]，研究结果表明，所提取的枸杞子多糖具有明显增强ConA和LPS诱导 的小鼠脾脏淋巴细胞增殖作用，并对S-180荷瘤小鼠具明显的免疫抑瘤作用。
[0028] 秘瑞欣，枸杞子多糖提取工艺及抗氧化活性的研究与探讨[化学工程与装备 2010,9 :42?43]，研究结果表明，枸杞子多糖对羟基自由基的清除效果较好，其清除率高 于维生素 C，而对超氧阴离子自由基的清除率低于维生素 C，在实验浓度范围内，其清除能 力不随多糖浓度的增加而显著增高。
[0029] 睢大员等，枸杞子、北五味子和黄精三种多糖的增强免疫与抗脂质过氧化作用 [白求恩医科大学学报，22(6) :606?607]，研究结果表明，三种多糖按400mg/kg给小鼠 每天灌胃1次，连续7天，均可使小鼠免疫器官的重量增加，明显增强网状内皮系统对印度 加墨汁的吞噬能力，亦能明显降低CC14中毒小鼠肝组织丙二醛含量，具有抗脂质过氧化作 用。其作用强度依次为枸杞子粗多糖、北五味子粗多糖和黄精粗多糖。
[0030] 本发明还提供一种用于增强免疫力、抗氧化和滋补肾虚、改善肾功能的保健组合 物的制备方法，其包括下列步骤：
[0031] A、按下列重量份数称取原料：发酵虫草菌粉（Cs_4) 1?5份、丹参1?9份、枸杞 子2?18份；
[0032] B、取发酵虫草菌粉（Cs-4)，备用；
[0033] C、取丹参用30?97%的乙醇提取1?3次，每次0. 5?3小时，滤过，合并滤液， 回收乙醇后药液备用；药渣用水提取1?2次，每次0. 5?3小时，滤过，滤液与上述药液合 并，浓缩，干燥，粉碎成细粉，备用；
[0034] D、取枸杞子用水提取1?3次，每次0. 5?3小时，滤过，浓缩到至相对密度为 1. 05?1. 5,所述相对密度在60°C测定，加乙醇至含醇量达30?80 %，搅拌，静置1?72 小时，滤过，取沉淀，干燥，粉碎成细粉，备用；
[0035] E、将上述三种细粉混合均匀制成制剂。
[0036] 本发明还提供上述的保健组合物作为用于增强免疫力、抗氧化和滋补肾虚、改善 肾功能的保健食品的用途。优选的，所述的保健食品为胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂、滴丸剂、 锭剂、合剂、口服溶液剂、散剂、煎膏剂、糖浆剂，更优选为胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂。
【具体实施方式】
[0037] 为使本发明更加容易理解，下面将进一步阐述本发明的具体实施例。
[0038] 实施例一：称取发酵虫草菌粉（Cs-4) 1000克，丹参1000克，枸杞子1000克。
[0039] 1、取发酵虫草菌粉（Cs-4)，备用；
[0040] 2、取丹参用30?97%的乙醇提取1?3次，每次0. 5?3小时，滤过，合并滤液， 回收乙醇后药液备用；药渣用水提取1?2次，每次0. 5?3小时，滤过，滤液与上述药液合 并，浓缩，干燥，粉碎成细粉，备用；
[0041] 3、取枸杞子用水提取1?3次，每次0. 5?3小时，滤过，浓缩到至相对密度为 1. 03?I. 5 (60°C测），加乙醇至含醇量达40?80%，搅拌，静置0. 5?48小时，滤过，取沉 淀，干燥，粉碎成细粉，备用；
[0042] 将上述步骤制得的三种粉未混匀制成制剂即可。
[0043] 实施例二：称取发酵虫草菌粉（Cs-4) 1000克，丹参1650克，枸杞子3530克。
[0044] 1、取发酵虫草菌粉（Cs-4)，备用；
[0045] 2、取丹参用30?97%的乙醇提取1?3次，每次0. 5?3小时，滤过，合并滤液， 回收乙醇后药液备用；药渣用水提取1?2次，每次0. 5?3小时，滤过，滤液与上述药液合 并，浓缩，干燥，粉碎成细粉，备用；
[0046] 3、取枸杞子用水提取1?3次，每次0. 5?3小时，滤过，浓缩到至相对密度为 1. 03?I. 5 (60°C测），加乙醇至含醇量达40?80%，搅拌，静置0. 5?48小时，滤过，取沉 淀，干燥，粉碎成细粉，备用；
[0047] 将上述步骤制得的三种粉未混匀制成制剂即可。
[0048] 实施例三：称取发酵虫草菌粉（Cs-4) 1000克，丹参300克，枸杞子800克。
[0049] 1、取发酵虫草菌粉（Cs-4)，备用；
[0050] 2、取丹参用30?97%的乙醇提取1?3次，每次0. 5?3小时，滤过，合并滤液， 回收乙醇后药液备用；药渣用水提取1?2次，每次0. 5?3小时，滤过，滤液与上述药液合 并，浓缩，干燥，粉碎成细粉，备用；
[0051] 3、取枸杞子用水提取1?3次，每次0. 5?3小时，滤过，浓缩到至相对密度为 1. 03?I. 5 (60°C测），加乙醇至含醇量达40?80%，搅拌，静置0. 5?48小时，滤过，取沉 淀，干燥，粉碎成细粉，备用；
[0052] 将上述步骤制得的三种粉未混匀制成制剂即可。
[0053] 本发明产品对增强免疫力、抗氧化和滋补肾虚、改善肾功能有较好的效果，制造方 法独特、可行，适合药厂、保健食品厂的应用。
[0054] 下面为发明人委托广东药学院对本发明保健组合物（以下称为虫草丹杞胶囊）药 效学的实验研究，其中虫草丹杞胶囊浸膏为上述制备例二制备得到，具体如下：
[0055] -细胞免疫功能测定
[0056] ( -）虫草丹杞胶囊对小鼠 ConA诱导的脾淋巴细胞转化的影响
[0057] 1试验材料
[0058] I. 1主要试剂RPMI1640培养液、小牛血清、谷氨酰胺、2-巯基乙醇（2-Me)、双抗、 刀豆蛋白 A(ConA)、盐酸（HCl)、异丙醇、MTT、Hank' s 液、PBS 缓冲液（ρΗ7· 2-7. 4)、0· 4%台 酚兰溶液。
[0059] 1. 2药物：虫草丹杞胶囊，3. 5g生药/g，批号：20131225,东莞市亚洲制药有限公司 提供。
[0060] 1. 3试验剂量
[0061] 虫草丹杞胶囊临床每日用量为10. 5g生药/d (I. 75g生药/0. 5g/粒，一次2粒，一 天3次），成人体重以60kg计，平均用药剂量为0. 175g生药/kg/d，本试验小鼠低、中、高三 个剂量组分别设为I. 75、3. 5、7g生药/kg/d，上述剂量为临床用药剂量的10、20、40倍（按 体重计算）。
[0062] 1. 4动物KM小鼠，SPF级，18?22g，广东省医学实验动物中心，动物质量合格证： SCXK (粤）2013-0002。
[0063] 1.5主要器材：纱布、200目筛网、24孔培养板、96孔培养板（平底）、手术器械、大 号注射器内芯、CO 2培养箱、酶标仪、超净工作台、高压灭菌器、无菌滤器、离心机、倒置显微 镜。
[0064] 2 方法
[0065] 2. 1溶液配制
[0066] 完全培养基：RPMI1640培养液，用前加入10%小牛血清，1%谷氨酰胺（200mmol/ L)，1%双抗（1万U/mL)及5X 10_5mol/L的2-巯基乙醇。
[0067] ConA液：用双蒸水配制成100 μ g/mL的溶液，过滤除菌，-20°C保存。
[0068] 无菌 Hank' s 液：用前以 3. 5% NaHCO3 调 ρΗ7· 2。
[0069] MTT液：将20mgMTT溶于4mL ρΗ7· 2的PBS中，现配现用。
[0070] 酸性异丙醇溶液：96mL异丙醇中加入4mLlmol/L的HC1，临用前配制。
[0071] 2. 2分组及给药将小鼠按体重随机分4组，即虫草丹杞胶囊高、中、低剂量组，同时 设空白对照组，每组12只。灌胃量为0.2ml/10g，每天1次，连续4周。空白对照组灌胃给 予同容积的生理盐水。
[0072] 2· 3MTT 法
[0073] 2. 3. 1脾细胞悬液的制备：末次给药后lh，称重，无菌取脾、胸腺，称重，将脾置于 盛有3mL无菌Hank' s液平皿中，并在脾上面放置一块纱布，用大号注射器内芯轻轻将脾磨 碎，制成单个细胞悬液。经200目筛网过滤，用Hank's液冲洗两次，每次离心IOmin (IOOOr/ min)。然后将脾细胞重悬于2mL的完全培养液中，用0. 4%台酚兰拒染法，计数活细胞数，调 整细胞浓度为3 X IO6各/mL。
[0074] 2. 3. 2淋巴细胞增殖反应：将细胞悬液分两孔加入24孔培养板中，每孔lmL，一孔 加入75 μ L ConA液（相当于7. 5 μ g/mL)，另一孔作为对照，置5% CO2，培养箱中培养72h。 培养结束前4h，每孔轻轻吸去上清液0. 7mL，加入0. 7mL不含小牛血清的RPMI1640培养液， 同时加入MTT (5mg/mL) 50 μ L/孔，继续培养4h。培养结束后，每孔加入ImL酸性异丙醇，人 工吹打混匀，使紫色结晶完全溶解，然后分装到96孔培养板中，每个孔分装3孔作为平行 样，用酶标仪，以570nm波长测定光密度。用加 ConA孔的光密度值减去不加 ConA孔的光密 度值代表淋巴细胞的增殖能力。
[0075] 3 结果
[0076] 由表1可见，虫草丹杞胶囊各剂量组小鼠的胸腺/体重和脾脏/体重比值与空白 对照组比较，无显著性差异（P > 〇. 05)，提示虫草丹杞胶囊对小鼠免疫器官/体重比值无明 显影响。虫草丹杞胶囊各剂量组小鼠的脾淋巴细胞增殖能力均高于空白对照组，其中虫草 丹杞胶囊高剂量组脾淋巴细胞增殖能力较强（P〈〇. 05)。提示虫草丹杞胶囊对小鼠 ConA诱 导的脾淋巴细胞转化的具有一定的促进作用。
[0077] 表1虫草丹杞胶囊小鼠胸腺/体重、脾脏/体重比值，脾淋巴细胞增殖能力的影响 (^ + -V )
【权利要求】
1. 一种保健组合物，其特征在于，所述保健组合物由下列重量份数的原料制成：发酵 虫草菌粉（Cs_4) 1?5份、丹参1?9份、枸杞子2?18份。
2. 根据权利要求1所述的保健组合物，其特征在于，优先的，所述保健组合物由下列重 量份数的原料制成：发酵虫草菌粉（Cs-4) 1份、丹参1. 65份、枸杞子3. 53份。
3. -种用于增强免疫力、抗氧化和滋补肾虚、改善肾功能的保健组合物的制备方法，其 特征在于，其包括下列步骤： A、 按下列重量份数称取原料：发酵虫草菌粉（Cs-4) 1?5份、丹参1?9份、枸杞子2? 18份； B、 取发酵虫草菌粉（Cs-4)，备用； C、 取丹参用30?97%的乙醇提取1?3次，每次0. 5?3小时，滤过，合并滤液，回收 乙醇后药液备用；药渣用水提取1?2次，每次0. 5?3小时，滤过，滤液与上述药液合并， 浓缩，干燥，粉碎成细粉，备用； D、 取枸杞子用水提取1?3次，每次0. 5?3小时，滤过，浓缩到至相对密度为1. 05? 1. 5,所述相对密度在60°C测定，加乙醇至含醇量达30?80%，搅拌，静置1?72小时，滤 过，取沉淀，干燥，粉碎成细粉，备用； E、 将上述三种细粉混合均匀制成制剂。
4. 根据权利要求1所述的保健组合物作为用于增强免疫力、抗氧化和滋补肾虚、改善 肾功能的保健食品的用途。
5. 根据权利要求4所述的保健组合物作为用于增强免疫力、抗氧化和滋补肾虚、改善 肾功能的保健食品的用途，其特征在于，所述保健食品为胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂、滴丸 齐?、锭剂、合剂、口服溶液剂、散剂、煎膏剂、糖浆剂。
【文档编号】A23L1/29GK104273527SQ201410377509
【公开日】2015年1月14日 申请日期:2014年8月1日 优先权日:2014年8月1日
【发明者】梁峰, 罗洪顺 申请人:东莞市亚洲制药有限公司