一种嗜冷菌计数琼脂培养基及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明为微生物领域，特别涉及一种嗜冷菌计数琼脂培养基，所述培养基的组分包括EC肉汤、2.5g/L酵母浸粉、0.065g/L脱脂奶粉、2.0g/L葡萄糖、4.Og/L氯化锰、15.Og/L琼脂，pH值为6.9-7.1?所述EC肉汤为每升EC肉汤中含有胰蛋白胨20.0g、乳糖10.0g、氯化钠5.0g、磷酸氢二钾4.0g，其余为蒸馏水。本发明培养基组方简单，制备操作方便，成本低，利于推广应用；菌生长迅速，变异率低；便于观察，分析。
【专利说明】一种嗜冷菌计数琼脂培养基及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明为微生物领域，特别涉及一种嗜冷菌计数琼脂培养基及其应用。
【背景技术】
[0002] 世界上微生物间的多样化和变异性及物种生境的生态复杂性，带来了探讨、了解 微生物的广泛性、复杂性和长久性。微生物的一个物种就是一个独特的基因库，微生物的新 陈代谢是错综复杂的生命活动，在长期的生物进化中，形成了一套完整统一的灵敏调节系 统，依靠这种调节系统，严格控制各种代谢活动。有条不紊协调进行并灵活适应环境。不同 培养基，因培养基配方不同，影响其生长和变异情况。
[0003] 培养基（Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料， 一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。有的培养 基还含有抗菌素和色素，用于单种微生物培养和鉴定。培养基由于配制的原料不同，使用要 求不同，而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后，易被细菌污染或分解变 质，因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基（如组织培 养基），较长时间的贮存，必须放在3?6°C的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管，现在 均改制成粉末。
[0004] 培养基根据化学分类为天然培养基、组合培养基和半组合培养基；根据物理分类 为液体培养基、固定培养基和脱水培养基；根据微生物分类为选择性培养基、鉴别培养基。
[0005] 目前还不能完全从生化反应的基本原理来推断和计算出适合某一菌种的培养基 配方，只能用生物化学、细胞生物学、微生物学等的基本理论，参照前人所使用的较适合某 一类菌种的经验配方，再结合所用菌种和产品的特性，采用摇瓶、玻璃罐等小型发酵设备， 按照一定的实验设计和实验方法选择出较为适合的培养基。
[0006] 培养基设计的基本步骤是：
[0007] 根据前人的经验和培养基成分确定时一些必须考虑的问题，初步确定可能的培养 基成分
[0008] 通过单因子实验最终确定出最为适宜的培养基成分
[0009] 当培养基成分确定后，剩下的问题就是各成分最适的浓度，由于培养基成分很多， 为减少实验次数常采用一些合理的实验设计方法。这些实验往往基于多因子实验，包含均 勻设计、正交实验设计、响应面分析等。
【发明内容】
[0010] 本发明克服现有技术中的不足，提供一种嗜冷菌计数琼脂培养基及其应用。
[0011] 本发明运用生物化学，微生物学及无机、有机、分析化学和荧光技术的原理，对不 同的碳源、氮源、无机盐类、维生素、生长促进剂等诸类营养组分的组合进行筛选，对培养基 的PH值、离子强度、氧化-还原电势、表面张力、气体环境等物化因子进行了比较，研究出了 本发明的培养基。
[0012] 本发明所采用的技术方案为：
[0013] 一种嗜冷菌计数琼脂培养基，所述培养基的组分包括EC肉汤、2. 5g/L酵母浸粉、 0. 065g/L脱脂奶粉、2. Og/L葡萄糖、4. Og/L氯化锰、15. Og/L琼脂，pH值为6. 9-7. 1。
[0014] 在以上方案的基础上，所述EC肉汤为每升EC肉汤中含有胰蛋白胨20. 0g、乳糖 10. 〇g、氯化钠5. 0g、磷酸氢二钾4. 0g，其余为蒸馏水。
[0015] 本发明还公开了嗜冷菌计数琼脂培养基的应用，用于奶制品中嗜冷微生物的菌落 总数测定。
[0016] 称取本品24. 25g加入1000ml蒸馏水，不停搅拌加热溶解，分装试管，分装每管 10mL，并放入一个小倒管，115°C高压灭菌15min，迅速冷却，备用。
[0017] 制备好的液体培养基保存于2-8°C，应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴 暗干燥处，保存温度2-30°C。
[0018] 本发明的有益效果：
[0019] 1、培养基组方简单，制备操作方便，成本低，利于推广应用；
[0020] 2、菌生长迅速，变异率低；
[0021] 3、便于观察，分析。
【具体实施方式】
[0022] 实施例1 :
[0023] -种嗜冷菌计数琼脂培养基，所述培养基的组分包括：
[0024] EC肉汤、2. 5g/L酵母浸粉、0. 065g/L脱脂奶粉、2. 0g/L葡萄糖、4. 0g/L氯化锰、 15. 0g/L 琼脂，pH 值为 6. 9-7. 1。
[0025] 在以上方案的基础上，所述EC肉汤为每升EC肉汤中含有胰蛋白胨20. 0g、乳糖 10. 〇g、氯化钠5. 0g、磷酸氢二钾4. 0g，其余为蒸馏水。
[0026] 称取本品24. 25g加入1000ml蒸馏水，不停搅拌加热溶解，分装试管，分装每管 10mL，并放入一个小倒管，115°C高压灭菌15min，迅速冷却，备用。
[0027] 制备好的液体培养基保存于2_8°C，应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴 暗干燥处，保存温度2_30°C。
[0028] 上述【具体实施方式】中的实施例是说明性的而不是限定性的，可按照所限定范围列 举出若干个实施例，因此在不脱离本发明总体构思下所做的任何变化和修改，都应属本发 明所限定的保护范围之内。
【权利要求】
1. 一种嗜冷菌计数琼脂培养基，其特征在于所述培养基的组分包括EC肉汤、2. 5g/ L酵母浸粉、0. 〇65g/L脱脂奶粉、2. Og/L葡萄糖、4. Og/L氯化锰、15. Og/L琼脂，pH值为 6. 9-7. 1〇
2. 根据权利要求1所述的一种嗜冷菌计数琼脂培养基，其特征在于所述EC肉汤为每升 EC肉汤中含有胰蛋白胨20. Og、乳糖10. Og、氯化钠5. Og、磷酸氢二钾4. Og，其余为蒸馏水。
3. -种根据权利要求1所述的一种嗜冷菌计数琼脂培养基的应用，其特征在于用于奶 制品中嗜冷微生物的菌落总数测定。
【文档编号】C12Q1/06GK104212877SQ201410478459
【公开日】2014年12月17日 申请日期:2014年9月18日 优先权日:2014年9月18日
【发明者】王明刚, 王雪梅 申请人:青岛润鑫伟业科贸有限公司