一种高密度发酵枯草芽孢杆菌的方法
【专利摘要】本发明涉及一种高密度发酵枯草芽孢杆菌的方法，采用液态发酵和固体发酵相结合的混合发酵模式，同时在固体发酵培养基中加入了椰子壳粉，椰子壳含有木质素36.51%，纤维素53.06%，戊聚糖29.27%，能促进枯草芽孢杆菌的增殖。
【专利说明】一种高密度发酵枯草芽孢杆菌的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于农业应用微生物【技术领域】。
【背景技术】
[0002]目前我国水产养殖业主要以高密度养殖为主，因此养殖户面临着一方面为了追求高产量而不断加大饲料投放量，一方面由于大量残饵、养殖动物粪便排放过多而造成水体的氨氮及亚硝酸盐升高影响鱼虾个体大小和产量的矛盾。目前市场上农用枯草芽孢杆菌产品质量参差不齐，急需提高枯草芽孢杆菌的发酵水平。
【发明内容】
[0003]技术问题
本发明的目的是提供“一种高密度发酵枯草芽孢杆菌的方法”，提高了产品的菌含量，降低了养殖户的使用成本。
[0004]技术方案
本发明所述的一种高密度发酵枯草芽孢杆菌的方法，其步骤如下:
(O将活化好的枯草芽孢杆菌按5%-10%的接种量接种到培养基中进行摇床培养，该培养基为:蔗糖15_20g/l、蛋白胨3-5g/l、氯化钠5-10g/l、PH=7.0-7.2。培养条件为:150-200r/min、温度为35-37度、通气量为1:1 ;培养24-48小时；
(2)将椰子壳粉碎成30-60目的粉状，用自来水按1:1的比例浸泡12-24小时；
(3)将浸泡好的椰子壳、麸皮、豆柏粉按(1-2):(2-5):(2-5)的比例进行混匀，配成固体培养基，高温灭菌，灭菌温度为8(Γ121度，灭菌时间为0.5^1小时，然后冷却至3(Γ40度后，将步骤I的枯草芽孢杆菌液体在无菌条件下接种到固体培养基中，混匀，然后置30-40度温度下进行通气培养，培养时间为2Γ48小时；
(4)将步骤3培养好的固体芽孢菌进行烘干，烘干温度为45飞O度，然后进行粉碎，即得高密度枯草芽孢杆菌粉剂；菌含量大于等于10ncfu/g。
[0005]【具体实施方式】:
实施例1:
(1)将活化好的枯草芽孢杆菌按10%的接种量接种到培养基中进行摇床培养，该培养基为:蔗糖20g/l、蛋白胨5g/l、氯化钠10g/l、PH=7.0。培养条件为:1200r/min、温度为37度、通气量为1:1 ;培养24小时；
(2)将椰子壳粉碎成60目的粉状，用自来水按1:1的比例浸泡12小时；
(3)将浸泡好的椰子壳、麸皮、豆柏粉按1:3:2的比例进行混匀，配成固体培养基，高温灭菌，灭菌温度为121度，灭菌时间为0.5小时，然后冷却至40度后，将步骤I的枯草芽孢杆菌液体在无菌条件下接种到固体培养基中，混匀，然后置34度温度下进行通气培养，培养时间为36小时；
(4)将步骤3培养好的固体芽孢菌进行烘干，烘干温度为60度，然后进行粉碎，即得高密度枯草芽孢杆菌粉剂；菌含量为3.4X 10ncfU/g。
【权利要求】
1.一种高密度发酵枯草芽孢杆菌的方法，其特征在于:固体培养基配方由椰子壳、麸皮、豆柏粉组成。
2.根据权利要求1所述的一种高密度发酵枯草芽孢杆菌的方法，其特征在于如下步骤: (1)将活化好的枯草芽孢杆菌按5%-10%的接种量接种到培养基中进行摇床培养，该培养基为:蔗糖15_20g/l、蛋白胨3-5g/l、氯化钠5-10g/l、PH=7.0-7.2 ;培养条件为:150-200r/min、温度为35-37度、通气量为1:1 ;培养24-48小时； (2)将椰子壳粉碎成30-60目的粉状，用自来水按1:1的比例浸泡12-24小时； (3)将浸泡好的椰子壳、麸皮、豆柏粉按(1-2):(2-5):(2-5)的比例进行混匀，配成固体培养基，高温灭菌，灭菌温度为8(Γ121度，灭菌时间为0.5^1小时，然后冷却至3(Γ40度后，将步骤I的枯草芽孢杆菌液体在无菌条件下接种到固体培养基中，混匀，然后置30-40度温度下进行通气培养，培养时间为2Γ48小时； (4)将步骤3培养好的固体芽孢菌进行烘干，烘干温度为45飞O度，然后进行粉碎，即得高密度枯草芽孢杆菌粉剂；菌含量大于等于10ncfu/g。
【文档编号】C12R1/125GK104293702SQ201410485671
【公开日】2015年1月21日 申请日期:2014年9月23日 优先权日:2014年9月23日
【发明者】孙义 申请人:领绿生物镇江有限公司