一种具有抑制Aβ聚集活性的化合物的制备方法与用途
【专利摘要】本发明公开了一种具有抑制Aβ聚集活性的化合物的制备方法与用途，属于微生物药物领域。一种抑制Aβ聚集的化合物，其结构如式(I)所示，该化合物可通过保藏编号为CCTCCNO：M 2014343的链霉菌发酵分离制备得到。结构如式(I)所示化合物具有较强的抑制Aβ聚集的活性，且具有良好的剂量依赖性。其可用于制备Aβ聚集抑制剂，并用于制备阿尔茨海默症以及其他形式痴呆的治疗药物。本发明为治疗阿尔茨海默症提供了新的途径。CCTCC NO：M 20143432014.07.21
【专利说明】一种具有抑制Aβ聚集活性的化合物的制备方法与用途
【技术领域】
[0001] 本发明属于微生物药物领域，特别涉及一种具有抑制Αβ聚集活性的化合物的制 备方法与用途。
【背景技术】
[0002] 阿尔茨海默症（Alzheimer'sdisease，AD)也称老年痴呆症，是一种发病率最高 且危害最大的中枢神经系统退行性疾病，常见的临床表现为持续性的记忆力衰退，认知功 能障碍，失语以及人格改变等。老年痴呆症不仅危害着老年人的身心健康和生活质量，同时 给家庭和社会带来了沉重的负担。流行病学资料表明AD在65岁以上的老年人群中具有高 达3?10%的发病率，且由于缺乏特异性的临床治疗方法，已成为老年人继心脏病、肿瘤、 卒中之后的第四大死因。由于老年痴呆与增龄密切相关，随着老年人口的增加以及人类寿 命的延长，AD的发病率也随之增加，AD的发病机制和防治渐渐成为了国内外研究的热点， 也得到了越来越多的医学关注。
[0003]AD的发病机制仍未完全阐明，但临床发现AD患者脑中的标志性病理特征表现为 在大脑皮层和海马出现神经原纤维缠结（neurofibrillarytangles，NFTs)和主要由β-淀 粉样蛋白（amyloidβ-protein,Αβ)组成的老年斑。众多临床和基础研究也表明Αβ在 脑内的广泛沉积和老年斑形成是AD发生与发展的早期必然因素，远远早与NFTs及其他病 理损害的发生。Aβ的聚集使其具有神经细胞毒性，表现为破坏细胞膜完整性、扰乱胞内环 境稳定及诱导细胞凋亡等。因此Αβ异常聚集被认为是AD最主要的发病机制，而阻止或抑 制Aβ的聚集沉积也成为AD的新治疗靶点。
[0004]目前针对AD的临床治疗药物主要为胆碱酯酶抑制剂，抗氧化药，抗炎药，脑循环 改善剂，钙拮抗剂等，但这些药物均存在一定的毒副作用和使用限制。因而筛选具有抑制 Aβ聚集的小分子先导化合物正成为研制AD治疗药物的热点。
【发明内容】
[0005] 本发明的首要目的在于提供一种抑制Aβ聚集的化合物。
[0006] 本发明的另一目的在于提供一种生产上述抑制Aβ聚集的化合物的链霉菌及利 用该链霉菌制备该化合物的方法。
[0007] 本发明的再一目的在于提供上述抑制Aβ聚集的化合物的用途。
[0008] 本发明的目的通过下述技术方案实现：
[0009] -种抑制Aβ聚集的化合物，其结构如式（I)所示：
[0010]
【权利要求】
1. 一种抑制AP聚集的化合物，其特征在于结构如式（I)所示：
2. 生产权利要求1所述的化合物的链霉菌，其特征在于：保藏编号为CCTCC NO: M2014343。
3. 利用权利要求2所述的链霉菌制备权利要求1所述的化合物的方法，其特征在于包 括如下步骤： (1) 将权利要求2所述的链霉菌先在ISP2液体培养基中培养，再转接到FM3培养基 中进行发酵；所述的FM3培养基由以下组分组成：可溶性淀粉20g/L，酵母粉5g/L，黄豆粉 15g/L，蛋白胨2g/L，碳酸钙4g/L，海盐18g/L，pH值为7. 0 ; (2) 将步骤（1)获得的发酵液用乙酸乙酯萃取、浓缩得粗提物； (3) 将步骤（2)获得的粗提物在硅胶中用二氯甲烷和甲醇组成的洗脱液进行洗脱，收 集洗脱液； (4) 将步骤（3)获得的含有目的化合物的洗脱液浓缩，通过LH20柱层析以及半制备液 相分离纯化得到权利要求1所述的化合物。
4. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于步骤（3)中所述的硅胶的目数为300?400 目。
5. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于包括如下步骤： (1)将权利要求2所述的链霉菌经平板活化后接种于ISP2液体培养基中，28°C、220r/ min振荡培养3d，再以5%的接种量接种到FM3培养基中，28°C、220r/min振荡培养7d ; ⑵将步骤⑴获得的发酵液用等体积乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，减压浓缩 获得乙酸乙酯提取物； (3) 将步骤（2)获得的乙酸乙酯提取物在硅胶中进行梯度洗脱，依次用体积比分别为 50:1、25:1、10:1、5:1、1:1的二氯甲烷和甲醇组成的五个洗脱液进行洗脱，依次获得各洗脱 液洗出的组分； (4) 将步骤（3)获得含有目的化合物的组分合并后，减压浓缩，再将浓缩后的合并组分 进行羟丙基葡聚糖凝胶LH20柱层析以及C18半制备液相分离纯化，得到权利要求1所述的 化合物。
6. 根据权利要求5所述的方法，其特征在于： 步骤（4)中所述的LH20柱层析所用洗脱液为体积比1:1的二氯甲烷和甲醇；所述的 C18半制备液相分离纯化所用的流动相为体积比15:85的甲醇和水； 步骤⑵和⑷中所述减压浓缩的温度为40?100°C。
7. 权利要求1所述的化合物在抑制AP聚集中的应用。
8. 权利要求1所述的化合物在制备AP聚集抑制剂和/或治疗痴呆症的药物中的应 用。
9. 根据权利要求8所述的应用，其特征在于：所述的痴呆症为阿尔茨海默症。
10. -种AP聚集抑制剂和/或治疗痴呆症的药物，其特征在于：包含权利要求1所述 的化合物。
【文档编号】C12R1/465GK104341405SQ201410499832
【公开日】2015年2月11日 申请日期:2014年9月25日 优先权日:2014年9月25日
【发明者】洪葵, 徐东波, 马敏, 邓子新 申请人:武汉大学