一种耐高温耐损伤的饲用酵母制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种耐高温耐损伤的饲用酵母制备方法,它属于饲用酵母制备领域。本发明解决了现有饲用酵母制剂不耐高温、不耐机械损伤、活力损失较大的技术问题。方法如下：向鲜饲用酵母加入脱水山梨醇单硬脂酸甘油酯水溶液，搅匀；加入海藻酸钙溶液，搅匀；加入壳聚糖和无水CaCl2混合液搅拌，静置包埋；然后无菌抽滤或者冷冻离心后干燥。产品耐高温，可耐受40~60℃；活力高，活细胞数可达400亿个/g；耐机械损伤，细胞经多层包埋，可耐受包埋、造粒、包装、储运等加工和储运过程中的机械损伤，损伤后活细胞数可保留50%~80%以上；储存时间长，室温下能存储12个月以上，室温下存储1年活细胞数能保留初始的90%以上。
【专利说明】一种耐高温耐损伤的饲用酵母制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于饲用酵母【技术领域】；具体涉及一种可用于生物饲料的耐高温耐损伤的 饲用酵母制备方法。
【背景技术】
[0002] 现有的饲用酵母制剂只能采用真空包装的活性干酵母产品形式提供给养殖户，自 行配伍使用。这种真空包装的活性干酵母不耐高温和机械损伤，不能耐受饲料企业直接将 其配入配合饲料时，必须进行的搅拌加工、造粒、干燥工艺过程中的高温和机械损伤，所引 起的酵母活力损失较大。由此影响了酵母生物饲料的实际保健效果的确定性和稳定性。
【发明内容】
[0003] 本发明要解决现有饲用酵母制剂不耐高温、不耐机械损伤、活力损失较大的技术 问题；而提供了一种耐高温耐损伤的饲用酵母制备方法。
[0004] 为解决上述技术问题，本发明中耐高温耐损伤的饲用酵母制备方法是按下述步骤 进行的： 步骤一、按脱水山梨醇单硬脂酸甘油酯质量是鲜饲用酵母质量19Γ6%的配比向鲜饲用 酵母加入质量分数为19Γ15%的脱水山梨醇单硬脂酸甘油酯（SMS)无菌水溶液，搅拌均匀， 得到溶液A ; 步骤二：按体积比为1:1向溶液A加入质量百分比浓度为29Γ4%海藻酸钙无菌溶液，搅 拌均匀，得到溶液B ; 步骤三、按体积比为1:1向溶液B加入混合液充分搅拌f3h，其中所述的混合液由壳聚 糖、无水CaCl2及水配制并经121°C高温灭菌20min处理的，混合液中壳聚糖的质量百分比 浓度为29Γ4%，无水CaCl 2质量百分比浓度29Γ4%，静置包埋； 步骤四、然后无菌抽滤或者冷冻离心后干燥，得到耐高温耐损伤的饲用酵母。
[0005] 步骤一所述的鲜饲用酵母是通过下述步骤获得的：将饲用酵母置于麦芽汁液体种 子培养基中28°C活化培养24h，按19Γ10%接种量接入液体马铃薯培养基中45°C培养24h， OD值> 1. 6,得到发酵培养液；再将发酵培养液置于冷冻离心机中300(T5000r/min离心 15~30min，用无菌蒸馏水洗涤2次后，得到鲜酵母，存于4°C冰箱备用。所述液体马铃薯培养 基马铃薯汁100ml，葡萄糖1?3%，无水CaCO 3O. 5%?1%，花生酸0· 059Γ0. 24%，pH值自然；所述 麦芽汁液体种子培养基：氯霉素〇. 〇1%?〇. 02%，麦芽膏粉109Γ13%，pH值为6. (Γ6. 4。
[0006] 步骤一所述的鲜酵母为鲜斜面菌种酿酒酵母或者鲜产朊假丝酵母等。
[0007] 步骤一脱水山梨醇单硬脂酸甘油酯（SMS)水溶液配制方法：称取1~15克的脱水山 梨醇单硬脂酸甘油酯（SMS)，加入l(T20mL蒸馏水中，加热溶解，定容至IOOmL,配成质量分 数为19Γ15%的溶液，121°C高温灭菌20min，冷却至室温备用。
[0008] 步骤三静置包埋时间为6?12h。
[0009] 步骤四所述的无菌抽滤的真空压力0. 01~0. 02Mpa。步骤四所述冷冻离心的转速为 300(T5000r/min，时间为 15?30min，温度(TlO°C。
[0010] 步骤四所述干燥是2(T50°C鼓风干燥机2~24h。步骤四干燥采用流化床干燥机干 燥，进风温度7(Tl40°C，出风温度4(T70°C，干燥时间30?130S。
[0011] 本发明的耐高温耐损伤的饲用酵母的水分< 8%，白色粉末颗粒，粒径： 0· 5?I. 5mm。包埋率在90%以上。
[0012] 本发明产品采用无菌铝箔袋(或无菌真空袋）包装，成品。本发明产品可直接用于 养殖禽畜的日常保健型饮水用添加剂；也可制成浓缩饲料料按照0. 19Γ5%配比配合饲料现 配现用饲喂；也可按〇. 1%~5%配比进行造粒来生产全价型生物饲料。
[0013] 本发明的优点： 1) 耐高温，可耐受4(T60°C的储存及造粒温度； 2) 活力高，活细胞数可达400亿个/g ; 3) 耐机械损伤，细胞经多层包埋，可耐受包埋、造粒、包装、储运等加工和储运过程中的 机械损伤。损伤后活细胞数可保留509Γ80%以上。
[0014] 4)储存时间长，室温下能存储12个月，室温下存储1年活细胞数能保留初始的90% 以上。
【具体实施方式】
[0015]
【具体实施方式】一：本实施方式中饲用酵母的菌种名称为： 酿酒酵母菌株 300，自编号 DQFC2117-1 中科院微生物研究所微生物菌种保藏中心菌株号AS 2. 300。
[0016] 特点：酿酒酵母；耐高温，可提高酒的含脂量，生香味。
[0017] 鲜饲用酵母是通过下述步骤获得的：将酿酒酵母菌株置于麦芽汁液体种子培养基 中28°C活化培养24h，按10%接种量接入液体马铃薯培养基中45°C培养24h，OD值> 1. 6， 得到发酵培养液；再将发酵培养液置于冷冻离心机中4000r/min离心20min，用无菌蒸馏水 洗涤2次后，得到鲜酵母，存于4°C冰箱备用。所述液体马铃薯培养基马铃薯汁100ml，葡萄 糖2%，无水CaC0 3l%，花生酸0.10%，pH自然。所述麦芽汁液体种子培养基：氯霉素0.01%， 麦芽膏粉12%，pH 6.2。
[0018] 本实施方式中耐高温耐损伤的饲用酵母制备方法是按下述步骤进行的： 步骤一、按脱水山梨醇单硬脂酸甘油酯质量是鲜饲用酵母质量5%的配比向上述方法 制得的鲜饲用酵母加入质量分数为10%的脱水山梨醇单硬脂酸甘油酯（SMS)无菌水溶液， 搅拌均匀，得到溶液A ; 步骤二：按体积比为1:1向溶液A加入质量百分比浓度为2%海藻酸钙无菌溶液，搅拌 均匀，得到溶液B ; 步骤三、按体积比为1:1向溶液B加入混合液充分搅拌2h，其中所述的混合液由壳聚 糖、无水CaCl2及水配制并经121°C高温灭菌20min处理的，混合液中壳聚糖的质量百分比 浓度为2%，无水CaCl 2质量百分比浓度2%，静置包埋6h ; 步骤四、然后真空压力〇. OlMpa下无菌抽滤后在40°C条件下鼓风干燥10h，得到耐高温 耐损伤的饲用酵母。
[0019] 本实施方式的耐高温耐损伤的饲用酵母的水分< 8%，白色颗粒，粒径： 0· 5~L 5mm〇
[0020] 本实施方式的耐高温耐损伤的饲用酵母的包埋率：90%。耐高温，可耐受4(T60°C 的储存及造粒温度；活力高，活细胞数可达400亿个/g ;耐机械损伤，细胞经多层包埋，可耐 受包埋、造粒、包装、储运等加工和储运过程中的机械损伤，损伤后活细胞数可保留509Γ80% 以上。
[0021] 表I :25°C下不同储存时间活细胞数表
【权利要求】
1. 一种耐高温耐损伤的饲用酵母制备方法，其特征在于耐高温耐损伤的饲用酵母制备 方法是按下述步骤进行的： 步骤一、按脱水山梨醇单硬脂酸甘油酯质量是鲜饲用酵母质量1%飞％的配比向鲜饲用 酵母加入质量分数为1%~15%的脱水山梨醇单硬脂酸甘油酯无菌水溶液，搅拌均匀，得到溶 液A ; 步骤二：按体积比为1:1向溶液A加入质量百分比浓度为29T4%海藻酸钙无菌溶液，搅 拌均匀，得到溶液B ; 步骤三、按体积比为1:1向溶液B加入混合液充分搅拌f3h，其中所述的混合液由壳聚 糖、无水CaCl2及水配制并经121°C高温灭菌20min处理的，混合液中壳聚糖的质量百分比 浓度为29T4%，无水CaCl 2质量百分比浓度29T4%，静置包埋； 步骤四、然后无菌抽滤或者冷冻离心后干燥，得到耐高温耐损伤的饲用酵母。
2. 根据权利要求1所述的一种耐高温耐损伤的饲用酵母制备方法，其特征在于鲜饲 用酵母是通过下述步骤获得的：将饲用酵母置于麦芽汁液体种子培养基中28°C活化培养 24h，按19T10%接种量接入液体马铃薯培养基中45°C培养24h，OD值> 1. 6,得到发酵培养 液；再将发酵培养液置于冷冻离心机中300(T5000r/min离心15?30min，用无菌蒸馏水洗涤 2次后，得到鲜酵母。
3. 根据权利要求2所述的一种耐高温耐损伤的饲用酵母制备方法，其特征在于所述液 体马铃薯培养基：马铃薯汁IOOmL,葡萄糖f 3%，无水CaCO3O. 59T1%，花生酸0. 059T0. 24%， pH自然；所述麦芽汁液体种子培养基：氯霉素0.019T0.02%，麦芽膏粉109Tl3%，pH 6. 0?6. 4。
4. 根据权利要求1、2或3所述的一种耐高温耐损伤的饲用酵母制备方法，其特征在于 步骤一所述的鲜酵母为鲜斜面菌种酿酒酵母或者鲜产朊假丝酵母。
5. 根据权利要求4所述的一种耐高温耐损伤的饲用酵母制备方法，其特征在于步骤一 脱水山梨醇单硬脂酸甘油酯水溶液配制方法：称取1~15克的脱水山梨醇单硬脂酸甘油酯， 加入l(T20mL的蒸馏水中，加热溶解，定容至IOOmL,配成质量分数为19T15%的溶液，121°C 高温灭菌20min，冷却至室温备用。
6. 根据权利要求4所述的一种耐高温耐损伤的饲用酵母制备方法，其特征在于步骤三 静置包埋时间为6~12h。
7. 根据权利要求4所述的一种耐高温耐损伤的饲用酵母制备方法，其特征在于步骤四 所述的无菌抽滤的真空压力〇? 〇l~〇. 〇2Mpa。
8. 根据权利要求4所述的一种耐高温耐损伤的饲用酵母制备方法，其特征在于步骤四 所述冷冻离心的转速为300(T5000r/min，时间为15?30min，温度为(TlO°C。
9. 根据权利要求4所述的一种耐高温耐损伤的饲用酵母制备方法，其特征在于步骤四 所述干燥是2(T50°C鼓风干燥机2?24h。
10. 根据权利要求4所述的一种耐高温耐损伤的饲用酵母制备方法，其特征在于步骤 四干燥采用流化床干燥机干燥，进风温度7(Tl4(TC，出风温度4(T70°C，干燥时间3CT130S。
【文档编号】C12N11/10GK104313007SQ201410615442
【公开日】2015年1月28日 申请日期:2014年11月5日 优先权日:2014年11月5日
【发明者】刘宇峰, 孙宇峰, 杨庆丽, 王玥明, 姬妍茹, 董艳, 石杰 申请人:黑龙江省科学院大庆分院