去乙酰基华蟾毒精作为ugt1a4催化o-葡萄糖醛酸结合反应的特异性探针底物的应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开一种去乙酰基华蟾毒精作为UGT1A4催化O-葡萄糖醛酸结合反应的特异性探针底物的应用，可用于各种来源的UGT1A4单酶催化O-葡萄糖醛酸结合反应的活性标定，以及定量测定各种哺乳动物组织器官来源的微粒体、S-9 等制备物中UGT1A4催化O-葡萄糖醛酸结合反应的活性，可应用于预测和评价以UGT1A4催化O-葡萄糖醛酸结合反应为主要途径的化合物在特定机体的代谢清除率，以及UGT1A4介导的O-葡萄糖醛酸结合反应诱发的药物-药物相互作用研究，具有特异性更强、代谢产物单一、毒副作用低、廉价易得等优点。
【专利说明】去乙酰基华蟾毒精作为UGT1A4催化O-葡萄糖醛酸结合反 应的特异性探针底物的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种去乙酰基华蟾毒精的新用途，尤其是去乙酰基华蟾毒精作为 UGT1A4催化0-葡萄糖醛酸结合反应的特异性探针底物的应用。
【背景技术】
[0002] 尿苷二磷酸葡萄糖酸酸转移酶（UDP-glucuronosyltransferases，UGT)是一类II 相代谢酶，催化底物与内源性的辅因子尿苷二磷酸葡萄糖醛酸（UDPGA)发生结合反应，使其 水溶性增加而利于从体内清除。UGT主要表达于肝、肾、肠等机体重要的代谢和排泄器官， 不仅参与胆红素、留体激素、甲状腺激素、胆汁酸和脂溶性维生素等内源性物质的代谢，还 在阿片类药物、镇痛药、非留体抗炎药和抗惊厥药等药物的代谢过程中发挥重要作用。当 UGT的功能由于疾病、基因多态性或竞争性抑制等因素发生异常时，会产生内源性物质代谢 紊乱以及药物处置的异常。特别是一些安全范围和治疗窗比较窄的药物，往往会产生严重 的不良反应。因此，掌握UGT的代谢活性以及药物经UGT介导的代谢属性，对于药物在临 床的个体化安全应用具有重要意义。然而，UGT超家族包含多个成员（如UGT1A1、UGT1A3、 UGT1A4、UGT1A6、UGT1A7、UGT2B4、UGT2B7及UGT2B15等），各亚型的组织分布、表达水平和代 谢活性存在较大差异，底物范围虽有重叠却又不尽相同，这就对UGT酶活和药物代谢的定 量评价增加了难度。
[0003] UGT1A4是UGT超家族的一员，可以催化UDPGA结合到底物的氮位，如赛庚啶、丙 咪嗪和奥氮平等药物，也可催化某些药物的〇-葡萄糖醛酸化反应，如双氢睾酮，反式雄酮、 10-羟基喜树碱等。UGT1A4的活性直接影响这些药物的体内代谢，对药物的临床安全应用 具有非常重要的意义，因此，FDA建议在新药研发过程中评价UGT1A4对药物的代谢潜能。目 前，已报道的UGT1A4的探针底物有三氟拉嗪（TFP)，应用LC-MS/MS检测反应体系中底物剩 余量或产物生成量，以单位时间内的底物消除量或其葡萄糖醛酸产物的生成量来标定体系 中UGT1A4的活性。但是，TFP只是UGT1A4催化N-葡萄糖醛酸化的探针底物，并不能作为 UGT1A4催化0-葡萄糖醛酸化的探针底物，因而不能全面评价UGT1A4催化葡萄糖醛酸化代 谢的活性。
[0004] 去乙酰基华蟾毒精是中药蟾酥中重要的活性成分，是A环3位具有β-羟基的蟾 蜍甾烯类化合物，结构式如下：
【权利要求】
1. 一种去乙酰基华蟾毒精作为UGT1A4催化0-葡萄糖醛酸结合反应的特异性探针底物 的应用。
【文档编号】C12Q1/48GK104480193SQ201410700247
【公开日】2015年4月1日 申请日期:2014年11月28日 优先权日:2014年11月28日
【发明者】马骁驰, 霍晓奎, 王超, 田象阁, 姜丽, 王长远, 张宝璟, 黄珊珊, 邓卅 申请人:大连医科大学