一种新型炭疽杆菌复合干粉培养基的制作方法
【专利摘要】本发明属于生物化学实验材料的设计与制造【技术领域】，特别是涉及一种新型炭疽杆菌复合干粉培养基，该培养基由下述材料组成：营养肉汤：5-13g，酪蛋白胨：0.1-0.6g，硫代乙醇酸钠：0.5-1.5g，注射水800-1000ml。本发明主要用炭疽杆菌的实验室培养。
【专利说明】一种新型炭疸杆菌复合干粉培养基
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物化学实验材料的设计与制造【技术领域】，特别是涉及一种新型炭疽 杆菌复合干粉培养基。
【背景技术】
[0002] 炭疽杆菌传统通气用培养基是采用新鲜黄豆芽经过绞碎后煮沸的方式进行制作， 由于黄豆芽在制作过程中，黄豆的质量、豆芽制作工艺等环节都会对其产生很大的影响，因 此存在着质量不稳定甚至不达标等一系列问题，本研究以生物化学原材料作为培养基的制 作原材料，极大的提高了培养基的稳定性。
[0003] 本发明构思是用生物化学原材料代替新鲜黄豆芽制作炭疽杆菌通气用培养基， 其结果表明，采用生物化学原材料代替新鲜黄豆芽来制作是可行的，稳定的，有应用价值 的。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于：使用生物化学原材料制作炭疽通气用培养基方法，替代了使 用新鲜黄豆芽制作炭疽通气用培养基的方法，使炭疽通气用培养基更稳定、便于操作。
[0005] 本发明是这样实现的：一种新型炭疽杆菌复合干粉培养基，该培养基由下述 材料组成：营养肉汤：5_13g，酪蛋白胨：0. 1-0. 6g，硫代乙醇酸钠：0. 5-1. 5g，注射水 800-1000ml。
[0006] 选用的BR生代试剂购自中国兽医药品监察所。营养肉汤为北京中海生物科 技有限公司生产，货号：20130916.01 ;硫代乙醇酸钠为北京奥博星生物科技有限责任公 司生产，货号：20111018.02 ;酪蛋白胨为北京奥博星生物科技有限责任公司生产，货号 20111018. 03。
[0007] 本发明的有益效果：本发明采用生物化学原材料通过一定量的配比来制作炭疽杆 菌通气用培养基，与传统的使用新鲜豆芽来制作炭疽杆菌通气用培养基的方法相比质量稳 定，同时省时、省力；制作工艺简单，简化了程序，缩短时间，降低了污染几率，彰显技术进 止 /J/ 〇
[0008] 本发明进行了 3个实验批次的炭疽杆菌通气培养对比实验。实验结果表明，使用 化学原材料代替新鲜黄豆芽制作的炭疽杆菌通气用培养基通气培养活菌数由平均2. 63亿 /ml增长至5. 73亿/ml,同时安全检验及效力检验与国家规定标准相符。
【具体实施方式】
[0009] 下面将结合实施例对发明作进一步说明。
[0010] 实施例1、一种新型炭疽杆菌复合干粉培养基，该培养基由下述材料组成：营养肉 汤：5g，酪蛋白胨：0. Ig,硫代乙醇酸钠：0. 5g，注射水800ml。 实施例2、一种新型炭疽杆菌复合干粉培养基，该培养基由下述材料组成：营养肉汤： 13g，酪蛋白胨：0. 6g，硫代乙醇酸钠：1. 5g，注射水1000ml。 实施例3、一种新型炭疽杆菌复合干粉培养基，该培养基由下述材料组成：营养肉汤： 8g，酪蛋白胨：0. 35g，硫代乙醇酸钠：1. 0g，注射水900ml。
[0011] 实验验证 实验流程：菌种制作；培养基制作、接种、通气培养；毒力检验步骤； (1)菌种制作 将原代菌种启封移植至普通肉汤斜面培养基，在36?37°C条件下培养18?24小时， 将培养物划线接种于普通肉汤琼脂培养基平皿若干付，在36?37°C条件下培养18?24小 时。选取普通肉汤琼脂培养基平皿上生长出的单个菌落，在低倍镜45度折射光下，挑选5 个以上菌落边缘不整齐，呈波纹状结构的菌落。然后用普通肉汤液体培养基将选取的菌落 混合均匀，划线移植于普通肉汤琼脂斜面。在36?37°C条件下培养18?24小时为一级种 子。
[0012] (2)培养基制作、接种、通气培养： (3)本发明的培养基：营养肉汤：13g，酪蛋白胨：0. 6g，硫代乙醇酸钠：1. 5g，注射水 1000ml。以上配方将生物化学原材料充分溶解，KKTC煮沸10分钟后，118-121°C高压灭菌 40分钟后降温至37°C。按照《中华人名共和国兽用生物制品生产工艺规程2010版》之方 法进行通气培养及菌液收获保存。
[0013] (3)毒力检验： 皮下注射体重18?22g小白鼠4只，每只0. 25ml ;皮下注射体重300?400g豚鼠4只 及1. 5?2kg家兔2只，每只各0. 5ml。注射后，上述动物可引起剧烈水肿，小白鼠应至少死 亡3只，豚鼠至少3只存活，家兔应2/2存活。
[0014] 选用的BR生代试剂购自中国兽医药品监察所。营养肉汤为北京中海生物科技 有限公司生产，货号：20130916.01 ;硫代乙醇酸钠为北京奥博星生物科技有限责任公司 公司生产，货号：20111018.02 ;酪蛋白胨为北京奥博星生物科技有限责任公司公司生产， 货号：20111018. 03;大豆蛋白胨为北京奥博星生物科技有限责任公司公司生产，货号： 20120120. 04〇
[0015] 试验结果见下表1。
[0016] ⑴炭疽杆菌复合干粉培养基与黄豆芽汤通气培养及保存期活菌计数结果见表1。
[0017] 表1.复合干粉培养基与黄豆芽汤通气培养及保存期活菌计数实验结果
【权利要求】
1. 一种新型炭疽杆菌复合干粉培养基，其特征在于：该培养基由下述材料组成：营养 肉汤：5-13g，酪蛋白胨：0. 1-0. 6g，硫代乙醇酸钠：0. 5-1. 5g，注射水800-1000ml。
【文档编号】C12N1/20GK104388359SQ201410719175
【公开日】2015年3月4日 申请日期:2014年12月2日 优先权日:2014年12月2日
【发明者】孟建国, 岳华 申请人:新疆天康畜牧生物技术股份有限公司