本发明涉及兽药领域，特别是涉及含凝结芽孢杆菌的菌剂及在宁乡花猪养殖的应用。
背景技术：
：我国是畜禽养殖大国，养殖历史悠久。随着我国经济和科技水平的不断提高，人们对畜禽养殖动物的需求量和品质也在不断提高，畜禽养殖动物的消费市场容量不断增大。畜禽养殖业正呈现出突飞猛进的发展态势。而宁乡花猪作为全国四大生猪地方名种之一，已有300多年养殖历史，与普通猪肉相比具有胆固醇含量低、不饱和脂肪酸含量高、肌肉更有弹性、口感好、肉味香浓、没有异味腥味等特点。极大的受到市场及广大消费者的欢迎。近年来随着养猪业“减抗、替抗”步伐的日益加快，研发与应用替代抗生素及化学合成药物的且高效安全的饲料添加剂，进而使猪、尤其是幼龄仔猪具有以良好的生产性能，已成为养猪业与饲料工业的热点之一。饲用抗生素的应用在一定程度上推动了畜牧业的发展，使得畜禽养殖无论在饲料转化效率还是在生产数量方面都得到了大幅提高。但抗生素在畜禽养殖中的长期、大量滥用也带来了很多的负面效应，如畜禽产品中抗生素残留、引发了细菌耐药性等。因此，探寻环境友好、安全有效型抗生素替代品成为全球饲料业一项紧迫又关键的任务。技术实现要素：基于此，有必要针对饲用抗生素残留、引发了细菌耐药性的问题，提供一种含凝结芽孢杆菌的菌剂及在宁乡花猪养殖的应用。一种含凝结芽孢杆菌的菌剂，以重量份计包括以下组分：凝结芽孢杆菌20-30份、枯草芽孢杆菌15-25份、乳铁蛋白10-15份、纤维素酶2-5份、维生素b1-3份、维生素a1-3份、豆粕粉25-35份；其中，维生素b是b族维生素中的一种或两种，所述凝结芽孢杆菌的活菌数为数2×1010cfu/g。进一步地，以重量份计包括以下组分：凝结芽孢杆菌25-30份、枯草芽孢杆菌18-25份、乳铁蛋白10-15份、纤维素酶2-5份、维生素b1-3份、维生素a1-3份、豆粕粉28-35份。进一步地，以重量份计包括以下组分：凝结芽孢杆菌30份、枯草芽孢杆菌20份、乳铁蛋白12份、纤维素酶5份、维生素b2份、维生素a2份、豆粕粉29份；凝结芽孢杆菌的活菌数为数2×1010cfu/g，维生素b为维生素b1。含凝结芽孢杆菌的菌剂在宁乡花猪养殖中的应用。上述含凝结芽孢杆菌的菌剂，通过菌剂中各组分的相互协同作用，调节猪肠道微生态平衡、促进动物机体的消化、改善动物肠道炎症、提高动物机体免疫功能及抗病力、促进动物生长、降低死亡淘汰率和饲料增重比，为猪养殖提升养殖效益的同时提升猪肉品质，进一步丰富和完善猪的生态养殖技术。具体实施方式为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面对本发明的具体实施方式做详细的说明。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明。但是本发明能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似改进，因此本发明不受下面公开的具体实施的限制。一种含凝结芽孢杆菌的菌剂，以重量份计包括以下组分：凝结芽孢杆菌20-30份、枯草芽孢杆菌15-25份、乳铁蛋白10-15份、纤维素酶2-5份、维生素b1-3份、维生素a1-3份、豆粕粉25-35份；其中，维生素b是b族维生素中的一种或两种，所述凝结芽孢杆菌的活菌数为数2×1010cfu/g。配方中各组分的作用1、凝结芽孢杆菌可显著提高仔猪饲料转化率，降低死亡率，明显降低仔猪粪便中大肠杆菌和肠球菌数量，提高抗氧化能力。2、凝结芽孢杆菌(bacilluscoagulans)，为同型乳酸发酵菌，是最具潜力的益生菌之一。3、凝结芽孢杆菌(bacilluscoagulans)可产生多种代谢物，如抑菌物质：la、lactospore、细菌素和凝固素等；消化酶类：α—淀粉酶、纤维素酶、β—半乳糖苷酶、脂肪酶和蛋白酶等，还可促进动物机体对某些矿物质元素(如铁、磷、钙和锌等)和维生素d的吸收利用，从而表现出良好的益生性能。4、凝结芽孢杆菌(bacilluscoagulans)对常见肠道疾病如慢性结肠炎、腹泻和便秘等有明显疗效，还具有调节血糖血脂和捉高免疫力的功效。5、凝结芽孢杆茵具有良好的抗逆性，其芽孢耐高温、耐酸和耐胆盐等。且兼具乳酸菌和芽孢菌共同的特点，以及良好的安全性。6、凝结芽孢杆菌作为益生菌的一种既具有乳酸菌产酸的特性又具有芽孢杆菌耐高温、抗逆性强和耐储存的优点。7、凝结芽孢杆菌是一种既能生成有机酸，又能形成孢子的益生菌，具有稳定性好、抗逆性强、复活率高、代谢旺盛等特点，表现出了可替代抗生素的特性。8、枯草芽孢杆菌进入动物肠道后，能显著降低肠道大肠埃希菌、产气荚膜梭菌和沙门菌的数量，而且对小肠绒毛的发育具有显著的促进作用，能对病原菌等引起的肠黏膜细胞损伤进行修复。9、枯草芽孢杆菌具有耐高温、耐酸碱、抗逆性强、易贮存等特点，动物饲料中使用枯草芽孢杆菌具有防制疾病'促进动物生长和增强动物免疫力的功效。10、枯草芽孢杆菌通过定植畜禽肠道，降低大肠杆菌等有害菌。降低肠道危害；通过蛋白酶和淀粉酶等的分泌补充肠道内源酶不足，提高畜禽对饲料营养物质的消化率。11、教槽料中添加枯草芽孢杆菌可以帮助仔猪快速建立平衡的微生物区系，帮助抵抗病原菌的侵袭，从而减少仔猪腹泻，减少仔猪囚黄白痢导致的死亡，保证仔猪正常的生长。12、枯草芽孢杆菌在治疗过程中能在动物肠道内形成一种优势种群，占据肠壁上的靶细胞，形成生物保护屏障，并且在代谢过程中能产生有机酸、提供能量和营养，也会降低局部ph，抑制致病菌的生长繁殖。13、枯草芽胞杆菌不仅能治疗猪的腹泻病，而且治愈率比恩诺沙星和乙酰甲喹高，可以替代抗生素治疗猪的腹泻性疾病。14、豆粕含有丰富的粗蛋白、粗脂肪、钙磷等微量元素、洗涤纤维、多种必须氨基酸、多种非必须氨基酸、蔗糖、水苏糖、棉籽糖及能量。15、大豆粕的蛋白质质量分数最高，达43％左右；各种氨基酸含量丰富且比较平衡，能满足动物对不同营养的需求，特别是一些必需氨基酸质量分数较高，如赖氨酸达2．5％～3．0％，色氨酸0．6％～0．7％，蛋氨酸0．5％～0．7％；16、乳铁蛋白是一种乳制菌蛋白，有调理素性质，在它的影响下，嗜中性粒细胞的吞噬活性加强。17、乳铁蛋白可刺激初次体液免疫应答，另外还能增强淋巴细胞的细胞毒作用与nk细胞的杀伤作用。18、牛的乳铁蛋白(bovinelactoferrin。bif)，是一种分子量约80kda的单亚基糖蛋白。其mrna全长为2351bp，编码708个氨基酸，而blf的完整基因为3415kbp，有17个外显子，位于牛的第22号染色体上l4l，由689个氨基酸残基组成。19、牛的乳铁蛋白(bovinelactoferrin。bif)的二级结构主要是α—螺旋和β—折叠，立体结构是在二级结构的基础上折叠成两个基本相等的叶(n叶和c叶)，每一个叶状结构中含有一个与fe3+结合的部位，此部位存在于一个很深的裂隙中。20、乳铁蛋白能对细胞分裂活性和解毒酶活性进行调节，能增强自然杀伤细胞的活性，这是由于其具有抑茵、杀菌以及干扰微生物与宿主细胞之间的结合等作用。21、lfcinb具有广谱抗菌活性，对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有效，同时具有抗真菌、抗病毒、刺激细胞生长、参与免疫调节等多种生物学功能。22、豆粕为高蛋白豆粕（sbm-hp）、低寡糖豆粕（sbm-lo）、常规豆粕（sbm-cv）、带皮豆粕、去皮豆粕、膨化浸出豆粕与生坯浸出豆粕中的一种或两种。23、乳铁蛋白为人乳铁蛋白(humanlactoferrin，hlf)、鼠乳铁蛋白(murinelactoferrin，mlf)、山羊乳铁蛋白(eaprinelactoferrin，clf)中的一种或两种。24、纤维素酶是酶的一种，在分解纤维素时起生物催化作用。是可以将纤维素分解成寡糖或单糖的蛋白质。25、纤维素酶是降解纤维素生成葡萄糖的一组酶的总称，它不是单体酶，而是起协同作用的多组分酶系，是一种复合酶，主要由外切β-葡聚糖酶、内切β-葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶等组成，还有很高活力的木聚糖酶。作用于纤维素以及从纤维素衍生出来的产物。组分之间的相互影响、协同作用以及创新点凝结芽孢杆菌能够产生抑菌物质：la、lactospore、细菌素等抑制肠道有害菌群的生长，同时分泌如α-淀粉酶、纤维素酶、β—半乳糖苷酶、脂肪酶和蛋白酶等消化酶类，促进肠道食糜的消化吸收。并且凝结芽孢杆菌能够形成具有抗酸、抗热和抗胆碱芽孢，稳定性好。枯草芽孢杆菌能够占据肠壁上的靶细胞，形成生物保护屏障，并且在代谢过程中能产生有机酸、提供能量和营养。提高养殖动物免疫力及抗病力。b族维生素为养殖动物提供营养因子，促进生长，改善肉质风味和胴体品质。乳铁蛋白可刺激初次体液免疫应答，增强淋巴细胞的细胞毒作用与nk细胞的杀伤作用，提高机体免疫力和抗病力。纤维素酶能够作用于纤维素，形成小分子的葡萄糖、寡糖或单糖等物质，促进肠道食糜的消化，提高饲料转化利用率。豆粕含有丰富的粗脂肪、粗蛋白、钙磷等微量元素、多种必须氨基酸、洗涤纤维、多种非必须氨基酸、水苏糖、蔗糖、棉籽糖及能量等。丰富饲料营养，促进动物生长。上述含凝结芽孢杆菌的菌剂，在添加凝结芽孢杆菌的同时添加了适量了枯草芽孢杆菌，利用枯草芽孢杆菌好氧生长的生理特性，快速降低宁乡花猪肠道氧含量，同时与凝结芽孢杆菌在厌氧环境条件下产类似丙酸、丁酸较有氧环境条件多的特点相结合，科学配比枯草芽孢杆菌与凝结芽孢杆菌在制剂中的占比，使凝结芽孢杆菌在宁乡花猪肠道健康等方面发挥更好的作用。同时加入枯草芽孢杆菌，其分泌的多种酶如蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、脂肪酶、葡聚糖酶等对降解植物性饲料中复杂有机成分，促进消化，提高饲料利用率具有更好的效果。上述含凝结芽孢杆菌的菌剂，通过菌剂中各组分的相互协同作用，调节猪肠道微生态平衡、促进动物机体的消化、改善动物肠道炎症、提高动物机体免疫功能及抗病力、促进动物生长、降低死亡淘汰率和饲料增重比，为猪养殖提升养殖效益的同时提升猪肉品质，进一步丰富和完善猪的生态养殖技术。进一步地，以重量份计包括以下组分：凝结芽孢杆菌25-30份、枯草芽孢杆菌18-25份、乳铁蛋白10-15份、纤维素酶2-5份、维生素b1-3份、维生素a1-3份、豆粕粉28-35份。进一步地，凝结芽孢杆菌30份、枯草芽孢杆菌20份、乳铁蛋白12份、纤维素酶5份、维生素b2份、维生素a2份、豆粕粉29份；所述凝结芽孢杆菌的活菌数为数2×1010cfu/g，维生素b为维生素b1。一种含凝结芽孢杆菌的菌剂在猪养殖中的应用。实施例11：材料与方法1.1：材料凝结芽孢杆菌购自山东宝来利来生物工程有限公司菌种保藏中（菌种保藏编号:blcc1-0571）,芽孢杆菌粉剂为长沙拜特生物科技研究所有限公司通过固体发酵并生产。1.2：试验猪的选择与方法试验于2018年2月5日至2018年3月12日在宁乡邦士富生猪养殖场进行。选择该场出生日期相近且体重在30公斤左右的花猪60头（公30头，母30头），随机分成对照组、加药组和实验组3组，每组各20头。基础日粮其配方组成及营养水平见表1。试验用芽孢杆菌粉剂，含活菌数为108个/g以上；加药组为基础日粮中添加100mg/kg痢菌净；试验组为在基础日粮中加100mg/kg的含凝结芽孢杆菌的菌剂；含凝结芽孢杆菌的菌剂包括凝结芽孢杆菌30份、枯草芽孢杆菌20份、乳铁蛋白12份、纤维素酶5份、维生素b2份、维生素a2份、豆粕粉29份；凝结芽孢杆菌的活菌数为数2×1010cfu/g。对照组为基础日粮中不添加药物和含凝结芽孢杆菌的菌剂。表1：基础日粮其配方组成及营养水平原料比列（%）营养水平含量玉米49.50猪消化能（mj/kg）13.67豆粕15.50粗蛋白（%）17.56小麦9.00粗纤维（%）3.85菜籽粕4.00钙（%）1.02麸皮16.00总磷（%）0.510磷酸氢钙0.90可利用磷（%）0.34石粉3.00赖氨酸（%）0.93霉可吸0.10蛋+胱氨酸（%）0.691%预混料2.001.3：饲养管理试验花猪由同一饲养员拌料，日喂3-4次，连续饲喂30天。采用鸭嘴式饮水器，保证花猪饮水充足，定时冲洗，保证猪舍干净卫生，整个试验环境条件基本一致。2：试验结果与分析表2：凝结芽孢杆菌对生长育肥花猪生产性能和经济效益的影响指标对照组加药组试验组p值平均始重/kg31.350±2.61031.550±2.50031.270±2.630平均末重/kg41.850±5.62044.290±4.94045.570±5.55p＜0.05平均日增重/kg0.350±0.0320.425±0.0140.477±0.055p＜0.01平均日采食量/kg2.0252.0642.057饲料增重比5.7864.8564.312全期均增重/kg10.50012.74014.300饲料价格/元2.7002.7302.732肥猪销售价（元/kg）57.1057.1057.10每头猪采食量/kg60.75061.92061.71每头猪饲料成本/元164.025169.042168.592增重饲料成本(元/kg)15.62113.26811.790p＜0.05猪沙门氏菌阳性率30.60026.30024.100p＜0.052.1：试验结果分析：由表2可知，基础饲粮中添加含凝结芽孢杆菌的菌剂的试验组与饲粮中添加痢菌净的加药组试验期全期均增重均比简单饲喂基础饲粮组要高，且试验组高于加药组。在增重饲料成本方面试验组最低，加药组次之，简单饲喂基础饲粮的对照组最高。因此，基础饲粮以含凝结芽孢杆菌的菌剂替代抗生素，对促进宁乡生态花猪的生长、花猪生态养殖经济效益的提升与养殖规模的拓展具有很大的意义。实施例21：试验材料与方法1.1：试验动物与设计试验选取60日龄，体重8公斤左右的宁乡流沙河花猪仔猪90头，按体重分为3个处理，每个处理5个重复(每个重复一个栏)，每个重复6头猪(公、母各半)。对照组不加抗生素与含凝结芽孢杆菌的菌剂，加药组添加入喹乙醇，试验组加入含凝结芽孢杆菌的菌剂，试验期30天。含凝结芽孢杆菌的菌剂包括凝结芽孢杆菌30份、枯草芽孢杆菌20份、乳铁蛋白12份、纤维素酶5份、维生素b2份、维生素a2份、豆粕粉29份；凝结芽孢杆菌的活菌数为数2×1010cfu/g。1.2：试验饲粮基础饲粮参照美国nrce7l猪营养需要标准，以玉米、豆粕等为主要原料配制，饲粮组成及营养成分见表1和表2。表1：基础饲粮配方表2:营养成分(风干基础)原料含量(％)原料含量(％)消化能(mj·kg-1)／％14.72有效磷/％0.32粗蛋白质／％18.05苏氨酸／％0.90钙／％0.84蛋氨酸／％0.38总磷/％0.51赖氨酸／％1.411.3:饲养管理猪舍自然通风，试验猪由专人负责饲养，自由采食和饮水，定期清理，免疫及消毒程序按猪场常规进行。1.4：数据记录分别于试验开始和结束时空腹称重，作为花猪的始重和末重，并分别记录好各组的采食量，计算料肉比。试验结束时，空腹取出肠内容物，并将其稀释后，以涂布方法接种在选择性培养基上，其中乳酸菌用msr培养基，37℃培养48h后进行菌落计数；大肠杆菌用伊红美蓝琼脂培养基，37℃培养48h后进行菌落计数；双岐乳杆菌用bl培养基，37℃培养48h后进行菌落计数；试验结果以lg（cfu/g）表示。2：试验结果与分析表3：各组仔猪生长性能的对照表项目对照组试验组加药组初始重/kg8.17±0.1268.05±0.028.14±0.09末重/kg14.82±0.7515.23±0.7115.05±0.47日增重/g221.7±16.4239.3±52.4230.3±13.4日耗料/g602.89±81.3610.02±24.13605.13±12.87饲料增重比2.72±0.122.55±0.072.63±0.24腹泻率/%0.59±0.680.40±0.130.45±0.85存活率/%100100100由表3可知，基础饲粮中添加喹乙醇的加药组、基础饲粮中添加含凝结芽孢杆菌的菌剂的饲料增重比均低于简单饲喂基础饲粮的对照组。且试验组低于加药组。在降低仔猪腹泻率方面，试验组表现最好，加药组次之。因此，在基础饲粮中添加一定量的含凝结芽孢杆菌的菌剂能够在一定程度上降低仔猪腹泻率，提高仔猪养殖经济效益，对宁乡生态花猪的养殖与推广具有很好的意义。表4：各组仔猪血清生化指标的对照表项目对照组试验组加药组葡萄糖（mmol·l-1）4.48±1.295.31±1.335.01±1.03总蛋白（g·l-1）51.94±2.6553.78±2.6552.58±2.01白蛋白（g·l-1）31.02±1.6233.91±0.5432.94±1.42甘油三脂（mmol·l-1）0.69±0.270.60±0.210.62±0.14血清尿素氮（mmol·l-1）5.23±0.665.62±0.435.51±0.25谷丙转氨酶（u·l-1）53.94±10.2955.65±10.1855.21±9.07谷草转氨酶（u·l-1）90.03±19.1790.85±20.1290.47±20.17由表4可知，通过对仔猪血清生化指标的检测，在血清中葡萄糖、总蛋白、白蛋白、血清尿素氮、谷丙转氨酶、谷草转氨酶的指标方面，加药组和试验组均高于对照组；且这些指标中试验组又高于加药组。在仔猪血清甘油三脂指标中，试验组最低。因此，在基础饲粮中添加一定量的含凝结芽孢杆菌的菌剂替代抗生素，对宁乡生态花猪的健康养殖和提升宁乡生态花猪的肉质风味具有明显的效果。表5：各组粪便菌群的对照表项目对照组加药组试验组大肠杆菌7.45±0.216.05±0.146.23±0.15乳酸菌9.12±0.359.03±0.689.35±0.62双歧杆菌8.62±0.468.93±0.559.15±0.45由表5可知，在基础饲粮中添加一定量的含凝结芽孢杆菌的菌剂能够替代抗生素减少宁乡生态花猪仔猪肠道中大肠杆菌的数量，并且对仔猪肠道益生菌中的乳酸杆和双歧杆菌几乎不产生抑制并稍有促进其生长繁殖的作用。由此可知，基础饲粮中添加一定量的含凝结芽孢杆菌的菌剂能够代替抗生素，在降低宁乡生态花猪仔猪肠道有害菌群数量，促进肠道益生菌群的生长繁殖方面发挥作用。能够更好的保证宁乡生态花猪养殖模式的生态化。以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。当前第1页12