一种纳米硒-褐藻寡糖复合物的制备方法及其应用

本发明涉及饲料，尤其是涉及一种纳米硒-褐藻寡糖复合物的制备方法及其应用。

背景技术：

1、纳米硒作为一种新型的硒形式，与传统的无机硒和有机硒相比，具有更高的生物活性和生物利用率；同时，其还具有纳米材料独特的纳米尺寸效应，可以显著提高硒的营养功效。在畜禽生产上，饲料中补充硒元素主要以亚硒酸钠(na2seo3)、硒代蛋氨酸为主，但是na2seo3毒性较高，而且生物利用率低，由于畜禽对硒的中毒范围较窄，因此往往容易造成因补充量不当而引起中毒。硒代蛋氨酸虽然较na2seo3安全，但其使用成本高，大规模使用会增加畜禽生产成本。纳米单质硒在没有分散模板的情况下，会发生团聚从而影响生物活性，因此，使用具有天然生物活性的褐藻寡糖(aos)作为制备纳米硒的模板分散剂，复合物不仅具有纳米硒的生物学作用，还具备了aos的相关生物活性。

2、肉鸡处于高温环境下，机体会产生热应激反应，热应激导致体内产生过多的氧化自由基(ros)，各种生理代谢活动因此受到严重影响，机体免疫机能、抗氧化机能、消化机能等生物学功能受到抑制，最终影响生产性能。热应激会显著降低肉鸡的法氏囊、脾脏等器官的免疫性能，影响机体整体的抗菌抗病毒能力。而在高温环境下，热应激肉鸡的消化吸收功能也会受到破坏。肠道机械屏障作为机体一种重要的物理屏障，既能阻挡大分子毒素透过肠黏膜进入机体，又能保证机体对营养物质的吸收和转化利用。目前已证实热应激能提高肉鸡肠道通透性：体现在血清二胺氧化酶(dao)活性和d-乳酸(d-la)水平的升高；降低肠道紧密连接蛋白的基因和蛋白表达水平。从而损伤肠道机械屏障功能，严重危害肉鸡健康和生产。

3、本发明通过制备一种新型的高效补硒添加剂：纳米硒-褐藻寡糖(senps-aos)，发现其可以有效地保护热应激诱导的肉鸡肠道机械屏障损伤，在肉鸡生产中具有极大的潜在应用价值。因此，研制senps-aos符合行业可持续发展的需求，应用前景广阔。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种纳米硒-褐藻寡糖复合物的制备方法及其应用，为缓解肉鸡热应激提供一种新型的优质硒产品。

2、根据本发明的一个目的，本发明提供一种纳米硒-褐藻寡糖复合物的制备方法，包括如下步骤：

3、1)利用正交及单因素试验探索纳米硒-褐藻寡糖(senps-aos)最佳制备条件，确定褐藻寡糖浓度、反应时间、反应温度对复合物制备的影响；

4、2)通过扫描电镜(sem)、能谱扫描(eds)等设备表征senps-aos，纳米硒颗粒直径、se含量；

5、3)动物试验探究senps-aos对热应激肉鸡肠道通透性、回肠抗氧化性能指标、回肠屏障功能相关因子基因及蛋白表达指标的影响；

6、4)综合评估senps-aos对热应激肉鸡肠道机械屏障功能的保护作用，即得。

7、进一步地，senps-aos溶液利用vc还原na2seo3，制备纳米硒。

8、进一步地，senps-aos的最佳制备条件为褐藻寡糖浓度400mg/l、反应时间0.5h、反应温度60℃。

9、进一步地，senps-aos的纳米硒颗粒粒径约为80nm，se元素含量约为8％。

10、进一步地，senps-aos能降低热应激肉鸡的肠道通透性，提高回肠组织抗氧化酶水平。

11、进一步地，senps-aos能提高热应激肉鸡回肠的相关紧密连接蛋白、硒蛋白、抗氧化酶的基因表达和蛋白表达水平。

12、根据本发明的另一个目的，本发明提供一种纳米硒-褐藻寡糖复合物的应用，用于降低热应激肉鸡肠道通透性、提高回肠抗氧化酶、紧密连接蛋白、硒蛋白等屏障功能相关因子的基因和蛋白表达水平。

13、本发明技术方案确定了senps-aos的最佳制备条件，以及明确的纳米硒粒径大小和复合物的se含量；同时明确了senps-aos能有效保护热应激肉鸡的肠道机械屏障功能，为进一步开发新型高效的绿色纳米硒添加剂提供试验参考，对家禽行业通过营养途径解决热应激问题具有重要意义。

技术特征：

1.一种纳米硒-褐藻寡糖复合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种纳米硒-褐藻寡糖复合物的制备方法，其特征在于，senps-aos溶液利用vc还原na2seo3，制备纳米硒。

3.根据权利要求1所述的一种纳米硒-褐藻寡糖复合物的制备方法，其特征在于，senps-aos的最佳制备条件为褐藻寡糖浓度400mg/l、反应时间0.5h、反应温度60℃。

4.根据权利要求1所述的一种纳米硒-褐藻寡糖复合物的制备方法，其特征在于，senps-aos的纳米硒颗粒粒径为80nm，se元素含量为8％。

5.根据权利要求1所述的一种纳米硒-褐藻寡糖复合物的制备方法，其特征在于，senps-aos能降低热应激肉鸡的肠道通透性，提高回肠组织抗氧化酶活性。

6.根据权利要求1所述的一种纳米硒-褐藻寡糖复合物的制备方法，其特征在于，senps-aos能提高热应激肉鸡回肠的相关紧密连接蛋白、硒蛋白、抗氧化酶的基因表达和蛋白表达水平。

7.根据权利要求1-6任一所述的一种纳米硒-褐藻寡糖复合物的制备方法制备的纳米硒-褐藻寡糖复合物的应用，其特征在于，用于降低热应激肉鸡肠道通透性，提高回肠抗氧化酶活性、紧密连接蛋白、硒蛋白、抗氧化酶相关因子的基因和蛋白表达水平。

技术总结
本发明提供了一种纳米硒‑褐藻寡糖复合物的制备方法及其应用，包括如下步骤：利用正交及单因素试验探索纳米硒‑褐藻寡糖(SeNPs‑AOS)最佳制备条件，确定褐藻寡糖浓度、反应时间、反应温度对复合物制备的影响；通过扫描电镜、能谱扫描等设备表征SeNPs‑AOS，纳米硒颗粒直径、Se含量；动物试验探究SeNPs‑AOS对热应激肉鸡肠道通透性、回肠抗氧化性能指标、相关因子基因及蛋白表达指标的影响；综合评估SeNPs‑AOS对热应激肉鸡肠道机械屏障功能的保护作用，即得。本发明确定了SeNPs‑AOS的最佳制备条件，以及明确的纳米硒粒径大小和复合物的Se含量；同时明确了SeNPs‑AOS能有效保护热应激肉鸡的肠道机械屏障功能，对家禽行业通过营养途径解决热应激问题具有重要意义。

技术研发人员：刘文超,邱盛坚,李晓斌,赵越,杨玉莹,黄孟祎,夏晨明
受保护的技术使用者：广东海洋大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/14