一种可降解液态发酵饲料霉菌毒素的复合生物制剂及其制备方法和应用与流程

本发明涉及生物制剂，具体涉及一种可降解液态发酵饲料霉菌毒素的复合生物制剂及其制备方法和应用。

背景技术：

1、霉菌毒素是霉菌生长过程中产生的毒性次级代谢产物，由于气候、地理位置、储存条件等原因，粮食谷物和饲料等极易受多种霉菌毒素污染。目前已知的霉菌毒素有500多种，包括黄曲霉毒素(afb1)，玉米赤霉烯酮(zen)，赭曲霉毒素a(ota)，伏马毒素(fb)，呕吐毒素(don)、t-2毒素等。这些霉菌毒素具有致癌、致突变和致畸性，可导致人和动物死亡，且多种霉菌毒素共存的几率大，具有协同毒性，严重威胁畜禽和人类健康。因此，建立一个安全简单的霉菌毒素脱毒方法是一个十分重要的问题。现有技术中，生物技术降解霉菌毒素主要有生物转化型、酶解型及吸附型等三种途径。生物转化型是通过筛选某些微生物，利用其代谢过程中生物转化作用，使霉菌毒素遭到破坏或转变为低毒或无毒的物质。酶解型是利用某些特殊的生物酶降解或分解霉菌毒素，使其转变为低毒或无毒的物质。吸附型是利用某些对霉菌毒素具有吸附功能的特殊生物材料吸附霉菌毒素，减轻对动物造成的危害。

2、液态发酵饲料是将饲料与水混合均匀后，通过微生物的代谢活动将饲料中大分子物质降解为小分子物质，分解或转化饲料中抗营养因子，产生有机酸(主要是乳酸)、细菌素、消化酶等有益代谢产物，最终形成的一种低ph、富含益生物质、更易被畜禽消化和吸收的饲料。液态发酵饲料具有提高畜禽生长性能、改善胃肠道健康、扩大饲料来源、降低生产成本等优势，可实现畜禽饲养过程中少用甚至不使用抗生素的目标。在规模化生产中，液态发酵饲料采用接种发酵，接种发酵是将特定的发酵剂接种于发酵基料，使接种的菌种成为优势菌群，进而调控发酵进程及发酵方向。然而，目前对霉菌毒素脱毒的研究集中于固态饲料成品和饲料原料，而液态发酵料作为一种特殊形态的饲料，普通的生物降解剂不能或者不能很好适用于液态发酵，且生物降解剂对降解霉菌毒素的研究也未见报道。

技术实现思路

1、本发明的目的在于克服现有技术的不足之处而提供一种可降解液态发酵饲料霉菌毒素的复合生物制剂及其制备方法和应用。

2、为实现上述目的，本发明采取的技术方案如下：

3、第一方面，本发明提供了一种可降解液态发酵饲料霉菌毒素的复合生物制剂，包括菌剂和酸制剂；所述菌剂由混合菌发酵而得；按重量份数计，所述混合菌包括植物乳杆菌5-10份，干酪乳杆菌5-10份，唾液乳杆菌5-10份，戊糖片球菌1-10份，解淀粉芽孢杆菌1-10份，枯草芽孢杆菌1-10份；所述酸制剂包括苯乳酸溶液1-3份，苯甲酸钠溶液1-3份。

4、本发明的针对液态发酵饲料专用复合生物制剂，集降解霉菌毒素含量、解决液态饲料分层、提高液态发酵料发酵效果的功能为一体，解决液态饲料发酵过程杂菌和霉菌快速增殖、液体分层、发酵效果差等棘手问题。

5、作为本发明所述的复合生物制剂的优选实施方式，所述苯乳酸溶液为质量百分比为1％-1.2％的水溶液。

6、作为本发明所述的复合生物制剂的优选实施方式，所述苯甲酸钠溶液为质量百分比为0.05％-0.08％的水溶液。

7、作为本发明所述的复合生物制剂的优选实施方式，所述植物乳杆菌的保藏编号为cgmcc 1.571；所述干酪乳杆菌的保藏编号为cgmcc 1.8727；所述唾液乳杆菌的保藏编号为cgmcc1.1881；所述戊糖片球菌的保藏编号为cgmcc1.12961；所述解淀粉芽孢杆菌的保藏编号为cgmcc1.8713；所述枯草芽孢杆菌的保藏编号为cgmcc1.15792。

8、第二方面，本发明提供了上述复合生物制剂的制备方法，包括以下步骤：

9、(1)取所述植物乳杆菌、干酪乳杆菌、唾液乳杆菌、戊糖片球菌混合，按照质量体积比为5％-10％的量接种至培养基，培养得一级种子液a；取所述解淀粉芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌混合，按照质量体积比为5％-10％的量接种至培养基，培养得到一级种子液b；将所述一级种子液a和一级种子液b按照体积比(2-2.5):1的比例混合，按照体积百分比为3％-5％的量转接到发酵培养基，培养至对数生长期，得二级种子液；即为菌剂；

10、(2)将所述苯乳酸溶液和苯甲酸钠溶液混合；得酸制剂；

11、(3)将所得菌剂和酸制剂混合，即成。

12、作为本发明所述的制备方法的优选实施方式，所述培养的温度为37℃-42℃。

13、第三方面，本发明提供了一种畜饲料添加剂，包括所述复合生物制剂。

14、第四方面，本发明提供了一种饲料，包括所述复合生物制剂。

15、第五方面，本发明将所述复合生物制剂、所述畜饲料添加剂、所述饲料在液态发酵饲料霉菌毒素降解中应用。

16、第六方面，本发明将所述复合生物制剂、所述畜饲料添加剂、所述饲料在仔猪饲养中应用。

17、与现有技术相比，本发明的有益效果为：

18、本发明的复合生物制剂中，植物乳杆菌可以产生大量的乳酸、苯乳酸、对羟基苯乳酸和吲哚乳酸，可快速抑制黄曲霉毒素b1的生长和产生；干酪乳杆菌能产生大量淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶，同样会产出较多的小肽和氨基酸，抗氧化能力也会得到提高；干酪乳杆菌还可以结合黄曲霉毒素b1，形成乳酸菌-afb1复合物。同时将zen转化成弱毒性的β-zol；唾液乳杆菌通过抑制禾谷镰孢霉和尖孢镰孢霉益生的作用，从源头上减少霉菌毒素的产生；戊糖片球菌可以提高动物的免疫力，促进肠道吸收；解淀粉芽孢杆菌可以有效降解黄曲霉毒素b1；枯草芽孢杆菌可同时降解afb1和zen。菌剂中菌种协同发酵可在短时间内降低液态发酵饲料的ph值在5以下，减少霉菌增殖，可以有效降解液态发酵料中黄曲霉毒素b1、呕吐毒素、伏马毒素等毒素。而苯甲酸钠在ph小于4.5的酸性环境中能够更好的发挥抑制霉菌作用。苯甲酸钠可以在酸性发酵液环境下高效抑制霉菌，同时性质非常稳定，在广泛的ph条件和不同温度环境下均可保持稳定性。苯乳酸和苯甲酸钠联合具有协同高效抑制霉菌的作用，而且，而苯乳酸与苯甲酸钠联用后，苯乳酸的浓度降为单独使用时的1/2～1/4，苯甲酸钠的浓度则降为单独使用时的1/2～1/16。

19、同时，菌剂可以促进液态发酵效果，使液态发酵的营养成分含量更高，更好消化吸收，并且增加液态发酵料流动性，减少液体分层，利于液态发酵饲料管道输送。在保证液态发酵饲料营养效果的基础上，很好的解决液态发酵饲料降解霉菌毒素的问题。

20、本发明的生产工艺流程极为简便，能有效降低生产成本。

技术特征：

1.一种可降解液态发酵饲料霉菌毒素的复合生物制剂，其特征在于，包括菌剂和酸制剂；所述菌剂由混合菌发酵而得；按重量份数计，所述混合菌包括植物乳杆菌5-10份，干酪乳杆菌5-10份，唾液乳杆菌5-10份，戊糖片球菌1-10份，解淀粉芽孢杆菌1-10份，枯草芽孢杆菌1-10份；所述酸制剂包括苯乳酸溶液1-3份，苯甲酸钠溶液1-3份。

2.根据权利要求1所述的复合生物制剂，其特征在于，所述苯乳酸溶液为质量百分比为1％-1.2％的水溶液。

3.根据权利要求1所述的复合生物制剂，其特征在于，所述苯甲酸钠溶液为质量百分比为0.05％-0.08％的水溶液。

4.根据权利要求1-3任一项所述的复合生物制剂，其特征在于，所述植物乳杆菌的保藏编号为cgmcc 1.571；所述干酪乳杆菌的保藏编号为cgmcc 1.8727；所述唾液乳杆菌的保藏编号为cgmcc1.1881；所述戊糖片球菌的保藏编号为cgmcc1.12961；所述解淀粉芽孢杆菌的保藏编号为cgmcc1.8713；所述枯草芽孢杆菌的保藏编号为cgmcc1.15792。

5.权利要求1～4任一项所述复合生物制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述培养的温度为37℃-42℃。

7.一种畜饲料添加剂，其特征在于，包括权利要求1～4任一项所述复合生物制剂。

8.一种饲料，其特征在于，包括权利要求1～4任一项所述复合生物制剂。

9.权利要求1～4任一项所述复合生物制剂、权利要求7所述畜饲料添加剂、权利要求8所述饲料在液态发酵饲料霉菌毒素降解中的应用。

10.权利要求1～4任一项所述复合生物制剂、权利要求7所述畜饲料添加剂、权利要求8所述饲料在仔猪饲养中的应用。

技术总结
本发明属于生物制剂技术领域，公开了一种可降解液态发酵饲料霉菌毒素的复合生物制剂及其制备方法和应用。本发明的可降解液态发酵饲料霉菌毒素的复合生物制剂包括菌剂和酸制剂；所述菌剂由混合菌发酵而得；按重量份数计，所述混合菌包括植物乳杆菌5‑10份，干酪乳杆菌5‑10份，唾液乳杆菌5‑10份，戊糖片球菌1‑10份，解淀粉芽孢杆菌1‑10份，枯草芽孢杆菌1‑10份；所述酸制剂包括苯乳酸溶液1‑3份，苯甲酸钠溶液1‑3份。本发明的复合生物制剂集降解液态发酵饲料霉菌毒素含量、解决液态饲料分层、提高液态发酵料发酵效果的功能为一体，解决液态饲料发酵过程杂菌和霉菌快速增殖、液体分层、发酵效果差等棘手问题。

技术研发人员：韩国清,邢孔萍,赵春秀
受保护的技术使用者：佛山市华洋动物营养品有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/3/31