专利名称:海参多肽的制备方法
海参多肽的制备方法
技术领域：
本发明涉及的是一种海参多肽的制备方法，具体涉及以海参肠和海参卵制备海参活性多肽的方法，属生活需要之保健食品加工技术领域：
。
背景技术海参肠卵含有丰富的优质蛋白及人体必需的8种氨基酸和多种微量元素。具备较强的滋阴壮阳、改善消化系统微循环、增强心肌营养血液循环流量、抑制肿瘤细胞生长和扩散的功效。由于传统加工方式使海参肠卵当做下脚料被剔除掉，造成了海参资源的浪费。经研究海参肠卵体中保持海参粘多糖，皂甙等活性成分质量较完全，如何在加工中得以保留和开发利用是本领域科技工作者和企业追求的目标。经过长期研究产生了利用海参肠卵加工海参保健食品的技术，如中国发明专利申请“海参卵营养品及其制备方法(公开号CN101361578)”和中国发明专利申请“一种海参肠多肽胶囊的制备方法 (CN101422205) ”所介绍的。但这些技术都使用了酶解工艺，使原料中参加了外源物质，同时还需要经过高温灭酶操作，这使得海参肠卵所包含的营养物质结构被破坏，主要是过度地分解了蛋白质并使其中活性多肽简化成了非活性多肽，进而使其营养作用被削弱。
发明内容
本发明所要解决的技术问题，是要既使海参肠卵蛋白被分解而使其易于被人们所吸收，又使其中活性成份得到保留，提升海参肠卵制品的保健营养价值，从而提供一种海参多肽的制备方法。
本发明提供的海参多肽的制备方法，先对海参肠卵进行清洗后破碎制成海参肠卵混合流体，再进行分解，然后通过超滤纯化，最后经浓缩后制成或在浓缩后再经干燥后制成海参多肽成品，其中所使用的分解工艺是先使用真空超声波反应釜对海参肠卵混合流体进行处理，处理时超声波功率为1000 1200W，发射频率为20 35kHz，脉冲周期频率为10 14次/秒，声速为1000 2000米/秒，温度为40 60°C，相对真空度为-120 -160Pa，所说超声波处理进行40 50min后间隔10 15min再进行40 50min，然后用180 220目的过滤器过滤得海参肠卵活性多肽液；在超滤纯化前，先对海参肠卵活性多肽液经8000 10000r/min的转速离心分离6 8min，再按上清，即海参肠卵多肽分离液重量计加入1 2 倍的体积比浓度为2 3%的乙醇水溶液进行稀释，稀释在相对真空度为-80 -100 下进行，时间30 50min ；超滤时先以通过孔径为1. 0 1. 2 μ m的微滤器过滤，再以截留分子量为10000道尔顿的超微膜过滤；所说的浓缩是纳米膜浓缩，即用截留分子量为200道尔顿的卷式纳米膜对纯化后的海参肠卵多肽纯化液进行过滤，以滤去200道尔顿以下的乙醇水溶液，获得200 10000道尔顿的海参肠卵活性多肽浓缩液。
本发明提供的海参多肽的制备方法，利用海参肠卵在超声波中会产生空化现象对海参肠卵进行分解，与现有技术相比，不需要加入外源酶等外源物质，也不必经过高温灭酶操作，有利于海参肠卵活性成份的保留，可使海参肠卵的有效成份80%得到利用。另外，使用超微膜纯化海参肠卵活性多肽液，有效固定多肽分子量和滋阴壮阳功能性物质的确定， 使海参多肽的保健作用更明显。而纳米膜浓缩海参肠卵活性多肽液，是一个常温物理浓缩过程，且使海参蛋白多肽、多糖、皂甙分子结构相对稳定，避免了因高温蒸发浓缩导致的氧化和分解。
本发明提供的海参多肽的制备方法，所说的干燥是冷冻干燥，即先将海参肠卵活
3性多肽浓缩液在-30 _35°C温度下，在2 池时间中冻结成固态，然后在50 60°C温度中升华18 20h，最后在60°C中解吸1 浊；升华和解吸的相对真空度为-100 -1601^。 冷冻干燥海参肠卵活性多肽，有效的保留多肽活性稳定于固体物质分子中，强化了多肽活性功能，同时也避免了加热干燥所可能导致的有效成份的氧化和分解。
本发明提供的海参多肽的制备方法，所说的海参肠卵混合流体的制备是先按质量百分比将海参肠60 70%和海参卵30 40%混和得海参肠卵混合物，再在海参肠卵混合物中加入混合物重量3 4倍的体积百分比浓度为6 8%的乙醇水溶液，最后破碎成 120 220目的流体。 具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步详细说明。
实施例1、本例提供的海参多肽的制备方法是
(1)取新鲜剔除泥沙的海参肠70kg，海参卵30kg，用绞肉机绞成碎末，得海参肠卵碎末100kg。分别放入5个120kg容量的不锈钢桶内，每桶放20kg海参肠卵碎末。然后往各桶中加入60kg的6% (体积比)乙醇水溶液，搅拌均勻。启动TM — 2型胶体磨，分别将每桶混合液在其中反复研磨两次，第一次设定出料粒度120目，第二次设定出料粒度220目， 得海参肠卵混合流体400kg。
(2)启动浓浆泵将上步所得的海参肠卵混合流体输入外置式600L真空超声波反应釜内，封闭罐口。调节反应釜超声波功率为1200W，发射频率为35kHz，发射端向功率密度为90W/cm2，脉冲周期频率为10次/秒，声速为2000米/秒，同时对反应釜抽真空达相对真空度为_120Pa，控制反应釜温度为40°C。在反应釜内，海参肠卵混合流体经过两次处理， 第一次处理50min，然后停止lOmin，第二次再处理40min。超声波处理结束后，用循环泵将真空超声波反应釜中的超声波处理完成液输入180目过滤器过滤，得海参肠卵活性多肽液 400kgo
(3)用循环泵将上步所得的海参肠卵活性多肽液送入高速碟式离心机，在8000r/ min的转速下离心分离6min，得上清海参肠卵多肽分离液380kg。再将海参肠卵多肽分离液输入至容积为1200L的稀释罐内，加入3% (体积比)乙醇水溶液380kg，在相对真空度为-100 下搅拌稀释30min，得海参肠卵活性肽稀释液760kg。启动循环泵调节到相对压力为0. 6MPa，将海参肠卵活性多肽稀释液先后经组合过滤器和超微纯化膜过滤，其中组合微滤器的通过孔径是1. 2 μ m和1. 0 μ m，超微膜的截留分子量为10000道尔顿，最终分离出分子量小于等于10000道尔顿的海参肠卵活性多肽纯化液730kg，超微膜通过率为96%。
(4)启动循环泵控制相对压力为0. 6MPa，将上步所得的海参肠卵多肽纯化液经截留分子量为200道尔顿的卷式纳米膜过滤，滤出分子量为200道尔顿以下的乙醇水溶液，收集分子量为200道尔顿以上的液体，获得分子量为200 10000道尔顿的海参肠卵活性多肽浓缩液，即液态的海参肠卵活性多肽制品38^g，浓缩率为53%。
(5)如要得到粉质产品，可继续将海参肠卵活性多肽浓缩液平均加入48个不锈钢冷冻干燥盘中，液体厚度约为50mm，放入冻干仓内后，封闭仓门。启动冷冻压缩机组， 在-30°C中速冻3小时，再启动真空泵抽真空到相对真空度为-lOOPa，控制加热器使冻干仓内温度为50°C时升华干燥20小时，然后在60°C中解吸1小时，获得海参肠卵活性多肽冻干粉，即粉质的海参肠卵活性多肽制品16Kg，干燥得率为4. 1%，相对新鲜海参肠卵的得率为16%。
实施例2、本例提供的海参多肽的制备方法是
(1)制海参肠卵混合流体
将新鲜或冷冻的海参肠卵，剔除肠中泥沙，清洗干净，肠卵配比为海参肠60kg，海参卵为40kg，采用绞肉机绞成碎末，按海参肠卵重量比例加入400kg的8% (体积比)乙醇水溶液，通过胶体磨预制成120 220目的海参肠卵混合流体500kg。
(2)制海参肠卵活性多肽液
将上步所得的海参肠卵混合流体用浓浆泵输入真空超声波反应釜内，设定电动力超声波功率1000W，发射频率为20kHz，脉冲频率为14次/秒，声速1000米/秒，在超声波空化作用下处理两次，每次40min，间隔时间15min，同时控制物料温度为60°C，反应釜相对真空度在-160Pa。随后，用220目的过滤器过滤得海参肠卵活性多肽液500kg。
(3)制海参肠卵活性多肽纯化液
将上步所得的海参肠卵活性多肽液在高速碟式离心机中以lOOOOr/min的转速离心分离8min，收集上层清液输入稀释罐内，加入2倍于上层清液重量的2% (体积比)乙醇水溶液，在相对真空度为-80 下搅拌稀释50min，得海参肠卵多肽稀释液1200kg。再将稀释液用循环泵在相对压力为0. 下先后通过微滤器(组合介质，通过孔径分别为1. Ομπι 和1. 2 μ m)和超微膜纯化(截留分子量为10000道尔顿)，获得分子量小于等于10000道尔顿的海参肠卵活性多肽纯化液1100kg。
(4)制海参肠卵多肽浓缩液
用循环泵将上步所得的海参肠卵活性多肽纯化液以截留分子量为300道尔顿的卷式纳米膜浓缩，滤出分子量在300道尔顿以下的乙醇水溶液，收集分子量在300道尔顿以上分子量的液体，获得经纳米膜浓缩后的、分子量在300 1000道尔顿的海参肠卵活性多肽浓缩液，即液态的海参肠卵活性多肽制品360kg。
(5)冷冻干燥
如将上述海参肠卵活性多肽浓缩液，加入冷冻干燥盘中，液体厚度控制在约40mm。 于冷冻干燥设备中，_35°C温度下，2h中冻结成固态；继而在60°C中升华18h ；最后在60°C 中解吸池；升华和解吸时控制相对真空度在-160 ；可获得海参肠卵活性多肽冻干粉，即粉质的海参肠卵活性多肽制品15kg。
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权利要求
1.海参多肽的制备方法，先对海参肠卵进行清洗后破碎制成海参肠卵混合流体，再进行分解，然后通过超滤纯化，最后经浓缩后制成或在浓缩后再经干燥后制成海参多肽成品， 其中所使用的分解工艺是先使用真空超声波反应釜对海参肠卵混合流体进行处理，处理时超声波功率为1000 1200W，发射频率为20 35kHz，脉冲周期频率为10 14次/秒，声速为1000 2000米/秒，温度为40 60°C，相对真空度为-120 _160Pa，所说超声波处理进行40 50min后间隔10 15min再进行40 50min，然后用180 220目的过滤器过滤得海参肠卵活性多肽液；超滤纯化前，先对海参肠卵活性多肽液经8000 lOOOOr/min 的转速离心分离6 8min，再按上清，即海参肠卵多肽分离液重量计加入1 2倍的体积比浓度为2 3%的乙醇水溶液进行稀释，稀释在相对真空度为-80 -100 下进行，时间 30 50min ；超滤时先以通过孔径为1. 0 1. 2 μ m的微滤器过滤，再以截留分子量为10000 道尔顿的超微膜过滤；所说的浓缩是纳米膜浓缩，即用截留分子量为200道尔顿的卷式纳米膜对纯化后的海参肠卵多肽纯化液进行过滤，以滤去200道尔顿以下的乙醇水溶液，获得200 10000道尔顿的海参肠卵活性多肽浓缩液。
2.如权利要求
1所述的海参多肽的制备方法，其特征是所说的干燥是冷冻干燥，即先将海参肠卵活性多肽浓缩液在-30 _35°C温度下，在2 池时间中冻结成固态，然后在 50 60°C温度中升华18 20h，最后在60°C中解吸1 池；升华和解吸的相对真空度为-100 -160Pa。
3.如权利要求
1所述的海参多肽的制备方法，其特征是所说的海参肠卵混合流体的制备是先按质量百分比将海参肠60 70%和海参卵30 40%混和得海参肠卵混合物，再在海参肠卵混合物中加入混合物重量3 4倍的体积百分比浓度为6 8 %的乙醇水溶液，最后破碎成120 220目的流体。
专利摘要
本发明提供的海参多肽的制备方法，经过破碎、分解、纯化、浓缩，其中所使用的分解工艺是先使用真空超声波反应釜对海参肠卵混合流体进行处理，处理时超声波功率为1000～1200W，发射频率为20～35kHz，脉冲周期频率为10～14次/秒，声速为1000～2000米/秒，温度为40～60℃，相对真空度为-120～-160Pa，所说超声波处理进行40～50min后间隔10～15min再进行40～50min，然后用180～220目的过滤器过滤得海参肠卵活性多肽液。与现有技术相比，不需要加入外源酶等外源物质，也不必经过高温灭酶操作，有利于海参肠卵活性成份的保留，可使海参肠卵的有效成份80％得到利用。
文档编号A23J3/22GKCN101773195 B发布类型授权 专利申请号CN 200910153282
公开日2012年5月30日 申请日期2009年10月30日
发明者夏芬, 李晓龙, 李长青, 王燕, 钱海彬 申请人:嵊泗海洋之星生物科技发展有限公司导出引文BiBTeX, EndNote, RefMan专利引用 (3), 非专利引用 (1),