专利名称:一种富含多肽和游离氨基酸的酶解血球粉及其制备方法
技术领域：
本发明属于生物工程技术领域：
及畜禽血处理加工领域，具体地说涉及一种富含多肽和游离氨基酸和酶解血球粉及其制备方法。
背景技术：
动物血液潜在的营养价值很高，开发和利用猪血粉是缓解蛋白质饲料资源不足的一条有效途径。然而目前对动物血液的利用还十分不充分，并且现今的血粉产品问题较多(主要是血液中的血球蛋白部分)，如消化吸收率不高，营养平衡性不佳，以及血腥味比较大、适口性差等。为解决上述问题，许多科研工作者对喷雾干燥法、化学处理法、生物处理法(酶解法、发酵法)等工艺进行了研究。喷雾干燥法目前使用较为普遍，适应工业化生产的要求。化学处理法是利用酸碱水解血球蛋白，这种处理方法能耗大，严重腐蚀设备和污染环境。但是，上述两种方法还是无法解决血球蛋白使用过程中面临的问题。生物处理法为目前可以选择的对环境和谐的方法，而酶解处理为较为高效的方法。随着酶制剂工业的发展，酶制剂产品的成本逐渐降低，这也促进了酶在酶解血球蛋白中的利用。
酶解血球蛋白可以起到很好的脱色的效果(公开号为CN1283397A，CN101375702A, CN101366943A, CN101623043A)，可以去除腥味，改善血球粉的适口性，同时可以将大分子的血红蛋白降解成小分子的多肽(公开号为CN1283397A，CN101375702A,CN101366943A, CN101623043A)和游离的氨基酸(公开号为CN101623043A)，提高血球粉的营养利用价值。由于酶的种类不同，其在酶解血球粉的条件不同，且对血球粉的酶解效果也不同。本发明选择了从现有的工业蛋白酶制剂中选出一种可以高效酶解血球粉的蛋白酶-碱性蛋白酶(来源于地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis) 2709,购自Amresco公司)。前期根据该碱性蛋白酶的相关性质进行探讨得到其最佳的反应条件。再以该反应条件来制备酶解血球粉产品。
发明内容
本发明目的在于提供一种富含多肽和游离氨基酸的酶解血球粉及其制备方法。该血球粉的多肽和氨基酸有利于动物机体的吸收和利用，可广泛地利用于饲料领域。
本发明涉及一种富含多肽及游离氨基酸的酶解血球粉及其制备方法，包括以下步骤:
(I)、向新鲜动物血液中加入质量百分含量为0.5%的柠檬酸钠充分混合后，进行离心分离得到血球液；
(2)、向血球液中加入pH = 10.0,0.02mol/L的甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液，将最终pH值调整为10.0，且血球蛋白的重量浓度调整为1%，并在50°C水浴中保温，使温度至恒定;
(3)、按照碱性蛋白酶与血球蛋白的质量比为0.0266: I比例向步骤⑵的血红蛋白溶液中加入碱性蛋白酶，然后在50°C的水浴中反应12小时，为了促进反应的进行，将容器置于恒温振荡器中或者用搅拌装置进行搅匀；
(4)、反应完毕后，将整个容器置于95 100°C保温lOmin，然后将反应溶液进行喷雾干燥即可制得产品。
本发明还具有如下特征:
1、如上所述步骤(I)中所用的新鲜动物血液为猪血。
2、如上所述所述步骤(2)中所用的碱性蛋白酶购自Amresco,来源于地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis) 2709,酶活为 383830U/g。
3、如上所述所述的步骤(2)中恒温振荡器的转速为150r/min。
4、按如上所述的制备方法制得的一种富含多肽和游离氨基酸的酶解血球粉。
本发明相对于现有技术，具有如下的优点及有益效果:(I)本发明脱色效果好，所得酶解血球粉颜色浅，无腥味，可广泛地利用于食品领域；(2)本发明是经过食品级蛋白酶在温和条件下获得的，其安全性高，无副作用。无不良风味。(3)本发明产生大量的不同分子量的肽及游离氨基酸，有利于动物机体的吸收利用，同时酶解产生的多肽类物质可提高仔猪肠道粘膜免疫，保护了肠道健康，提高了动物的生产性能。(4)本发明的酶解效果好，适用于大规模工业化生产。
具体实施方式
实施例1酶解血球粉的制备
(I)向新鲜的猪血中加入质量百分含量为0.5%的柠檬酸钠充分混合后，进行离心分离得到血球液；取Ig血球液，溶于99ml的pH = 10.0,0.02mol/L的甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液中，得重量浓度I %的血红蛋白溶液，利用lmol/L的甘氨酸或lmol/L HCl调节体系PH值为10.0，在50°C水浴中保温，使温度至恒定。
(2)向血红蛋白溶液中加入0.0266g碱性蛋白酶(购于Amresco公司，酶活为383830U/g)，在50°C水浴，转速150r/min，pH为10.0的条件下水解12小时，然后在95 100°C下恒温lOmin，最后将整个溶液体系进行喷雾干燥即可制得酶解血球粉。同时设置空白对照，以不加碱性蛋白酶的样品为空白样，其余操作步骤如前所述。与血球粉相比，经过酶解制得的酶解血球粉的颜色得到很好的改善，其腥味也得到很高的改善。利用MinoltaChroma Meter II全自动色度仪来测定两种产品，结果见表I。结果显示，经碱性蛋白酶酶解后，血球粉的亮度(L*值)、红度(a*值)、黄度(b*值)得到了很大的提高，总色差也提高。由于使用的碱性蛋白酶为食品级的，而血球粉本身也是食品级的，因此制备得到的酶解血球粉安全性高，无副作用，无不良风味。
表I血球粉和酶解血球粉的色度测定
权利要求
1.一种富含多肽和游离氨基酸的酶解血球粉的制备方法，其特征在于，方法如下 (1)、向新鲜动物血液中加入质量百分含量为O.5%的柠檬酸钠充分混合后，进行离心分离得到血球液； (2)、向血球液中加入pH= 10. 0,0. 02mol/L的甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液，将最终pH值调整为10. 0，且血球蛋白的重量浓度调整为1%，并在50°C水浴中保温，使温度至恒定； (3)、按照碱性蛋白酶与血球蛋白的质量比为O.0266 I比例向步骤(2)的血红蛋白溶液中加入碱性蛋白酶，然后在50°C的水浴中反应12小时，为了促进反应的进行，将容器置于恒温振荡器中或者用搅拌装置进行搅匀； (4)、反应完毕后,将整个容器置于95 100°C保温IOmin,然后将反应溶液进行喷雾干燥即制得产品。
2.根据权利要求
I所述一种富含多肽和游离氨基酸的酶解血球粉的制备方法，其特征在于，所述步骤(I)中所述的新鲜动物血液为猪血。
3.根据权利要求
I所述的一种富含多肽和游离氨基酸的酶解血球粉的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中所用的碱性蛋白酶购自Amresco,来源于地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis) 2709，酶活为 383830U/g。
4.根据权利要求
I所述的一种富含多肽和游离氨基酸的酶解血球粉的制备方法，其特征在于，所述的步骤(2)中恒温振荡器的转速为150r/min。
5.如权利要求
1-4任一项所述的富含多肽和游离氨基酸的酶解血球粉的制备方法制得的一种富含多肽和游离氨基酸的酶解血球粉。
专利摘要
一种富含多肽和游离氨基酸的酶解血球粉的制备方法，如下1、向新鲜动物血液中加入柠檬酸钠充分混合后，进行离心分离得到血球液；2、向血球液中加入甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液，将最终pH值调整为10.0，血球蛋白的重量浓度调整为1％，并在水浴中保温，使温度至恒定；3、向步骤2的血红蛋白溶液中加入碱性蛋白酶，然后在50℃的水浴中反应12小时，将容器置于恒温振荡器中或者用搅拌装置进行搅匀；4、反应完毕后，然后将反应溶液进行喷雾干燥即可制得产品。本发明脱色效果好，无腥味；安全性高，无副作用，无不良风味，保护了肠道健康，提高了动物的生产性能；可广泛应用于食品领域。另外，酶解效果好，适用于大规模工业化生产。
文档编号A23K1/04GKCN103250869SQ201310196036
公开日2013年8月21日 申请日期2013年5月24日
发明者单安山, 郑燕斌, 陈秋石, 张 浩 申请人:东北农业大学导出引文BiBTeX, EndNote, RefMan