专利名称：胰岛素口腔喷剂及其制备工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及药品及其生产方法，特别涉及用于人体口腔粘膜吸收的药物喷剂及其制备方法。
背景技术：
胰岛素在胃肠道内极易被胃酸及多种消化酶所降解，不能直接口服，只能注射给药。它须在餐前半小时注射，才能控制血糖，而且要终生给药，患者感到痛苦不便。因此研究安全、方便及有效，尤其是非注射途径给药制剂，将极大地方便疾病患者。胰岛素非注射给药途径在本世纪七十年代就开始成为国内外药学界竞相研究的热点课题，特别是九十年代来取得了较大的进展。目前可供选择的胰岛素给药途径有多种。例如在腹膜内埋入胰岛素泵的途径，被证明是安全有效的，国外已用于临床，但价格昂贵，不是一般病人所能承受的。也有结果表明通过支气管粘膜吸收胰岛素的方法有着诱人的应用前景，但这种方法还有一些难关要攻克。通过脂质体或聚合物等包埋胰岛素，然后做成口服剂使用，胰岛素由小肠粘膜细胞吸收进入血液达到降低血糖的效果，但是药剂的生物利用度低及药剂容易从给药部位被快速清除掉是口服胰岛素成功的重要障碍。目前正进行的较大量的研究工作集中在通过鼻、眼、肺、口的粘膜吸收给药途径上，这方面的工作经过十几年的探索取得一些进展，但由于胰岛素分子量较大，粘膜难以吸收，这些途径的临床应用仍存在生物利用度低的问题。因此选择适当的低毒高效的吸收促进剂以增加吸收，是提高胰岛素生物利用率的关键。
申请人在申请号00114318.2、公开号CN1264596名为“一种多肽类药物口腔喷雾剂”的发明专利申请中，提供了胰岛素口腔喷雾剂的组份为每1000ml内胰岛素5000u-80000u，大豆卵磷脂5-50g，丙二醇2-45g，乙醇0-15ml，冰片0-10g，苯酚0-8g，其余为PH＝6.8-7.8的磷酸盐缓冲溶液，这种喷雾剂的配制方法为按组方取大豆卵磷脂，加入丙二醇，冰片的乙醇溶液搅拌至大豆卵磷脂溶解；将胰岛素溶解在约为总量2/3的含苯酚的磷酸盐缓冲液中，在不断搅拌下，将上述溶液缓慢加入到大豆卵磷脂的丙二醇溶液中，再继续搅拌10～30分钟，再加磷酸盐缓冲液至全量。在这种制剂中，各组分的平均粒度为427.2nm，不仅影响提高吸收率，而且制剂稳定性不够，存放于2-8℃冰箱中1年即有少量沉淀发生。
发明内容
本发明提供一种胰岛素口腔喷剂及其制备工艺，要解决的问题是进一步提高胰岛素通过人类口腔粘膜吸收的生物利用度，同时增强制剂的稳定性。为此在00114318.2专利申请的基础上，进一步优化各组分配比，并对各组分采取超声处理以代替搅拌配制。
本发明的胰岛素口腔喷剂，为包括胰岛素、促进剂、助溶剂及缓冲溶液的微乳，每1000ml微乳中胰岛素为10000u-70000u，作为促进剂的大豆卵磷脂5-50g，作为助溶剂的丙二醇25-80g，其余为PH＝6.8-7.8的磷酸盐缓冲溶液。
所述的胰岛素口腔喷剂，其进一步的特征为每1000ml微乳内胰岛素为15000u-60000u，大豆卵磷脂为20-50g，丙二醇为40-80g，增加冰片一一乙醇溶液作为矫味剂，其中冰片1.2-10g，无水乙醇1-15ml；增加苯酚作为抑菌剂，其重量为2g-5g，其余为PH＝6.8-7.8的磷酸盐缓冲溶液。
所述的胰岛素口腔喷剂的制备工艺，按组方比例取大豆卵磷脂，加入对应量的丙二醇搅拌均匀，再加入全量25％-60％的磷酸盐缓冲溶液构成赋形剂，对赋形剂进行超声处理0.5-2小时，获得微乳的油相；将组方比例的胰岛素溶解在占全量75％-40％的磷酸盐缓冲溶液中，再逐渐将其加入所述微乳的油相，继续超声处理2-10分钟。
增加矫味剂和抑菌剂时，所述的胰岛素口腔喷剂的制备工艺，可以是按组方比例取苯酚加入到全量的磷酸盐缓冲溶液中；按组方比例取大豆卵磷脂，加入对应量的丙二醇、冰片-乙醇溶液，搅拌均匀，再加入全量25％-60％的含苯酚磷酸盐缓冲溶液构成赋形剂，对赋形剂进行超声处理0.5-2小时，获得微乳的油相；将组方比例的胰岛素溶解在占全量75％-40％的含苯酚磷酸盐缓冲溶液中，再逐渐将其加入所述微乳的油相中，继续超声处理2-10分钟。
所述的胰岛素口腔喷剂的制备工艺，其进一步的特征在于所述超声处理超声频率为18-25KHz，超声条件占空比为30-90％。
所述的胰岛素口腔喷剂的制备工艺，配制过程中温度控制在2-70℃。
胰岛素是一种多肽类激素，直接经口腔粘膜给药的通透性差，为提高其生物利用度，必须选用合适的吸收促进剂。本发明使用大豆卵磷脂是作为一种无毒、安全有效的促进剂。由于大豆卵磷脂的水溶性差，需选择合适的助溶剂。本发明以降糖作用为指标，研究了丙二醇的助溶效果。实验结果表明，丙二醇能增加大豆卵磷脂促进口腔粘膜对胰岛素的吸收作用，通过正交实验确定了它们的最佳配比。胰岛素在大豆卵磷脂和丙二醇的系统中形成一种热力学稳定的微乳体系，大豆卵磷脂同时还在此药剂中作为表面活性剂和药物的载体，水溶性的胰岛素嵌在大豆卵磷脂的脂质双层的水溶液中。
本发明的胰岛素口腔喷剂无毒。胰岛素口腔喷剂大鼠局部给药的长期毒性试验，给药剂量为4.5、9.0、18.0u.kg-1，以生理盐水和赋形剂作对照组。进行6个月后，各给药组动物的局部和整体情况与生理盐水对照组比较，均未发现明显异常。
利用超声处理的方法制得的胰岛素口腔喷剂与其原来的方法比较，在药效和稳定性上有明显提高1.稳定性由于超声处理制得的胰岛素口腔喷剂的微乳，其颗粒的粒径明显变小，由原来平均粒度为427.2nm的颗粒变成了现在的纳米粒子，粒径小于100nm，粒度分布在70-90nm。这种纳米微乳既有利于粘膜吸收，而且提高了制剂的稳定性。从肉眼观察，超声处理制备的胰岛素口腔喷剂呈半透明状态，存放于2-8℃冰箱中1年，未见有沉淀产生，原来通过搅拌配制的胰岛素口腔喷剂呈不透明状态，存放于2-8℃冰箱中1年，有少量沉淀产生，可见超声处理的方法对制备微乳极其重要。
2.药效本发明以正常家兔为模型，采用酶联免疫法测定其体内胰岛素含量，研究了胰岛素口腔喷剂的药代动力学并计算其药代动力学参数，结果表明，对正常家兔口腔粘膜给药(1.5u·kg-1体重)后，其血清胰岛素浓度迅速升高，达峰时间为55-70分钟，峰浓度由141.6±6.4μ/ml提高到145.2±5.8μ/ml，4-6小时后逐渐降低到用药前的基础水平。与不含胰岛素的赋形剂组比较，胰岛素口腔粘膜给药组和胰岛素皮下注射对照组家兔的血清胰岛素浓度在30～120分钟内均具有显著性差异(p＜0.05)。在该剂量下，与胰岛素皮下注射对照组(0.5u·kg-1)相比，血清胰岛素的峰浓度和达峰时间基本相同，无显著性差别(p＞0.1)，00114318.2号专利申请的胰岛素口腔喷雾剂平均生物利用度为29.2％，本发明则提高到29.8％。
这种药物喷剂是一种微乳，具有与口粘膜接触面积大、吸收快、降糖作用较好、使用安全的特点，将这种制剂装入一种带有定量泵的包装瓶中，它可以将胰岛素像薄雾一样喷入口腔，胰岛素附着在口腔的粘膜上，通过粘膜可以迅速进入血液循环，提高吸收速度，而且，避免了肠、胃道的酸解和酶解以及肝脏的首过效应。是一种方便患者的新型非注射给药方式，将给糖尿病患者带来用药方便，减轻注射给药的痛苦，具有较大的社会效益与经济利益。
具体实施例方式
按本配方制得的胰岛素口腔喷剂存放于2-8℃冰箱中1年，无沉淀产生。
按本配方制得的胰岛素口腔喷剂具有较好的降血糖效果。用链脲佐霉素诱发的糖尿病大鼠的口腔给药剂量为1，3，9u·kg-1时，降糖率分别为21.8％，47.2％，56.2％。用四氧嘧啶诱发的糖尿病家兔的口腔给药剂量为0.5，1.5，4.5u·kg-1时，降糖率分别为28.6％，55.2％，60.7％。
胰岛素 40000u大豆卵磷脂 25.0g丙二醇 75.0g冰片 1.2g无水乙醇 4.0ml苯酚 2.0g磷酸盐缓冲液(pH＝7.4)适量全量 1000ml按组方取大豆卵磷脂，加入丙二醇及冰片的乙醇溶液，搅拌均匀加入540ml，pH＝7.4的含苯酚的磷酸盐缓冲液，上述组分作为胰岛素口腔喷剂配方中的赋形剂，进行超声处理1小时，超声条件是占空比为50％，温度控制在40-55℃，超声频率为20KHz。将胰岛素溶解在360ml的pH＝7.4的含苯酚的磷酸盐缓冲液中，并缓慢加入到超声处理的赋形剂溶液中，继续超声处理5分钟。
按本配方制得的胰岛素口腔喷剂存放于2-8℃冰箱中1年，无沉淀产生。
按本配方制得的胰岛素口腔喷剂具有较好的降血糖效果。用链脲佐霉素诱发的糖尿病大鼠的口腔给药剂量为1，3，9u·kg-1时，降糖率分别为21.3％，49.8％，60.2％。用四氧嘧啶诱发的糖尿病家兔的口腔给药剂量为0.5，1.5，4.5u·kg-1时，降糖率分别为29.6％，55.4％，62.2％。
无水乙醇 4.0ml苯酚 2.0g磷酸盐缓冲液(pH＝7.4)适量全量 1000ml按组方取大豆卵磷脂，加入丙二醇及冰片的乙醇溶液，搅拌均匀加入545ml，pH＝7.4的含苯酚的磷酸盐缓冲液，上述组分作为胰岛素口腔喷剂配方中的赋形剂，进行超声处理2小时，超声条件是占空比为70％，温度控制在55℃-70℃，超声频率为25KHz。将胰岛素溶解在360ml的pH＝7.5的含苯酚的磷酸盐缓冲液中，并缓慢加入到超声处理的赋形剂溶液中，继续超声处理3分钟。
按本配方制得的胰岛素口腔喷剂存放于2-8℃冰箱中1年，无沉淀产生。
按本配方制得的胰岛素口腔喷剂具有较好的降血糖效果。用链脲佐霉素诱发的糖尿病大鼠的口腔给药剂量为1，3，9u·kg时，降糖率分别为18.3％，35.2％，44.2％。用四氧嘧啶诱发的糖尿病家兔的口腔给药剂量为0.5，1.5，4.5u·kg-1时，降糖率分别为20.1％，45.4％，52.2％。
权利要求
1.胰岛素口腔喷剂，为包括胰岛素、促进剂、助溶剂及缓冲溶液的微乳，每1000ml微乳中胰岛素为10000u-70000u，作为促进剂的大豆卵磷脂5-50g，作为助溶剂的丙二醇25-80g，其余为PH＝6.8-7.8的磷酸盐缓冲溶液。
2.如权利要求1所述的胰岛素口腔喷剂，其特征为每1000ml微乳内胰岛素为15000u-60000u，大豆卵磷脂为20-50g，丙二醇为40-80g，增加冰片-乙醇溶液作为矫味剂，其中冰片1.2-10g，无水乙醇1-15ml；增加苯酚作为抑菌剂，其重量为2g-5g，其余为PH＝6.8-7.8的磷酸盐缓冲溶液。
3.权利要求1所述的胰岛素口腔喷剂的制备工艺，按组方比例取大豆卵磷脂，加入对应量的丙二醇搅拌均匀，再加入全量25％-60％的磷酸盐缓冲溶液构成赋形剂，对赋形剂进行超声处理0.5-2小时，获得微乳的油相；将组方比例的胰岛素溶解在占全量75％-40％的磷酸盐缓冲溶液中，再逐渐将其加入所述微乳的油相，继续超声处理2-10分钟。
4.权利要求2所述的胰岛素口腔喷剂的制备工艺，按组方比例取苯酚加入到全量的磷酸盐缓冲溶液中；按组方比例取大豆卵磷脂，加入对应量的丙二醇、冰片-乙醇溶液，搅拌均匀，再加入全量25％-60％的含苯酚磷酸盐缓冲溶液构成赋形剂，对赋形剂进行超声处理0.5-2小时，获得微乳的油相；将组方比例的胰岛素溶解在占全量75％-40％的含苯酚磷酸盐缓冲溶液中，再逐渐将其加入所述微乳的油相中，继续超声处理2-10分钟。
5.权利要求3或4所述的胰岛素口腔喷剂的制备工艺，其特征在于所述超声处理超声频率为18-25KHz，超声条件占空比为30-90％。
6.权利要求3或4所述的胰岛素口腔喷剂的制备工艺，其特征在于配制过程中温度控制在2-70℃。
7.权利要求5所述的胰岛素口腔喷剂的制备工艺，其特征在于配制过程中温度控制在2-70℃。
全文摘要
胰岛素口腔喷剂及其制备工艺,涉及药品及其生产方法。其要解决的问题是提高胰岛素口腔粘膜吸收的生物利用度,增强制剂稳定性。本口腔喷剂每1000ml微乳内含胰岛素为10000u－70000u,大豆卵磷脂5－50g,丙二醇25－80g,可增加冰片1.2－10g,无水乙醇1－15ml,苯酚2－5g,其余为pH=6.8－7.8的磷酸盐缓冲溶液;其制备工艺为将大豆卵磷脂加入丙二醇、冰片－乙醇溶液搅拌均匀,再加入含苯酚的磷酸盐缓冲溶液并超声处理,获得微乳的油相,将胰岛素溶解在含苯酚的磷酸盐缓冲溶液中,再将其加入所述微乳的油相中,继续超声处理即可。本发明在药效和稳定性上有明显提高,所制喷剂用药方便,减轻注射痛苦。
文档编号A61L9/04GK1335182SQ0112832
公开日2002年2月13日 申请日期2001年8月8日 优先权日2001年8月8日
发明者徐辉碧, 黄开勋, 高秋华, 高中洪, 杨继林 申请人:华中科技大学, 湖北华工生化工程有限公司