专利名称：二羧酸醚钙、其制备方法、和用其治疗血管疾病和糖尿病的方法
技术领域：
本发明涉及6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐(1∶1)，6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐(1∶1)溶剂化物，制备结晶形式的6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐(1∶1)的方法，制备结晶形式的6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐(1∶1)醇溶剂化物的方法，以及用其治疗疾病的方法。特别是，本发明6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐(1∶1)及其溶剂化物可用于降低动物中的一些血浆脂质，包括Lp(a)、甘油三酯、VLDL-胆固醇、和LDL-胆固醇，以及增加HDL-胆固醇。本发明化合物还可用于治疗糖尿病。
背景技术：
在全球范围内，血管疾病例如冠心病、中风、再狭窄、和外周血管疾病仍然是死亡和病废的首要原因。在美国，每年约有一百五十万人仅是由于充血性心力衰竭所导致的心肌梗塞而死亡。而饮食和生活方式可加速血管疾病的发作，导致血脂异常的遗传素因是血管相关性糖尿病和死亡中的重要因素。“血脂异常”是指血浆中异常水平的脂蛋白。
有几种危险的因素与血管疾病的危险性增大有关。其中有高水平的低密度脂蛋白(LDL)和低水平的高密度脂蛋白(HDL)。HDL-胆固醇与LDL-胆固醇的比例通常被用于评价血管疾病的危险性。高的HDL/LDL胆固醇比例是希望的。因此，能通过降低LDL或增加HDL或者既降低LDL又增加HDL来增加该比例的化合物是有益的。
研究还表明，称为“Lp(a)”的改性形式的LDL的水平增加是有害的。据表明，Lp(a)的水平增加与下列疾病的形成有关动脉粥样硬化、冠心病、心肌梗塞、中风、脑梗塞、和气囊式血管成形术后发生的再狭窄。实际上，Lp(a)似乎是中风可能性的良好预测指标。因此，高浓度的Lp(a)形式的胆固醇是心脏病致死的一个主要因素。因此，降低Lp(a)的化合物是有益的。
U.S.专利5,648,387公开了6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸及其降低Lp(a)的血浆浓度和增加HDL的有效性。还描述了由该羧酸形成可药用盐，例如通过与碱，包括氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、碳酸钠、三乙胺、吡啶、和氨反应来形成盐。由于该羧酸的熔点较低，并且其所考虑的盐缺乏结晶性以及具有吸湿性，因此大量产物例如大批量生产的干燥和结晶一直不稳定。所以需要这样的该羧基烷基醚的盐能有效地提高HDL，降低血浆Lp(a)，能够结晶，可以以商业规模生产和加工，并且非常适于制成治疗血管疾病的药物制剂。本发明提供了满足这些需要的盐形式。
发明概述本发明提供了新的化合物，所述化合物是二羧酸醚钙。本发明更特别提供了特征为溶剂化或未溶剂化形式的6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐的化合物。本发明的钙盐还称为“CI-1027”。本发明化合物具有式II 其中R1是H或低级烷基例如甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、和1-丁基，且x是0-10的数字。其中R1是H的化合物是优选的。
优选的化合物是CI-1027晶形1，其中R1是H，且x相当于约3％-约6％的水分含量，并具有附
图1的XRD。
另一优选的化合物是CI-1027晶形2，其中R1是H，且x相当于约3％-约6％的水分含量，并具有附图15的XRD。
还优选的是未溶剂化的形式，即其中x是0。
本发明还提供了由有机醇干燥钙盐的方法。结晶钙盐的方法是另一实施方案。
本发明提供了合成式II二羧酸醚一钙盐的方法。所述方法包括将在有机醇溶剂中将二链烷醚酸与氧化钙接触。反应足够长的时间后，取出固体产物并干燥，获得了与醇R1OH形成溶剂化物的二羧酸醚一钙盐，其中钙与二羧酸醚的化学计量比为1∶1。可通过用真空干燥室的润湿作用干燥来除去醇R1OH溶剂化物。其中钙与二羧酸醚的化学计量比为1∶1的二羧酸醚钙盐可通过蒸汽结晶作为一水合物结晶出来，所述蒸汽结晶是这样进行的用水/水蒸汽于压力、搅拌下在50℃-150℃加热，然后真空干燥。第二种结晶水合物形式可这样获得将第一种形式在水中加热较长时间，或者将式I游离酸直接与氢氧化钙和水在约80℃的高温下反应，并通过常规过滤收集固体。
本发明化合物可以作为活性组分与可药用稀释剂、载体、和赋形剂一起用于治疗血管疾病。本发明还描述了二羧酸醚钙盐或其水合物或醇溶剂化物在制备用于治疗血脂异常例如血管疾病的组合物中的应用。本发明还描述了二羧酸醚钙盐或其水合物或醇溶剂化物在制备用于治疗糖尿病的组合物中的应用。
附图简述通过下面的详细描述和附图，可更好地理解本发明的其它优点。在这些附图中，术语“d(A)”是指以埃为单位的d-间距。“P％”是指各个峰相对于最强峰的百分比，其中最强峰等于100％。“面积”是指曲线或峰下的面积。“FWHM”是指极大值的一半处的全宽度。
附图1是二羧酸醚一钙盐CI-1027水合物晶形1的X-射线粉末衍射二维图。
附图1A是附图1所示的峰的数值(每个标记A的附图是该附图所指的XRD踪迹的数值例如2A、3A等)。
附图2是二羧酸醚一钙盐CI-1027的乙醇溶剂化物的X-射线粉末衍射二维图。
附图3是将二羧酸醚一钙盐的乙醇溶剂化物润湿和干燥后，CI-1027晶形1(3.25％水)的X-射线粉末衍射二维图。
附图4是CI-1027的甲醇溶剂化物的X-射线粉末衍射二维图。
附图5是将二羧酸醚一钙盐的甲醇溶剂化物润湿和干燥后，CI-1027水合物晶形1的X-射线粉末衍射二维图。
附图6是CI-1027的1-丙醇溶剂化物的X-射线粉末衍射二维图。
附图7是将该1-丙醇溶剂化物润湿和干燥后，CI-1027晶形1(3.98％水)的X-射线粉末衍射二维图。
附图8是CI-1027的2-丙醇溶剂化物的X-射线粉末衍射二维图。
附图9是将二羧酸醚一钙盐的2-丙醇溶剂化物润湿和干燥后，CI-1027水合物晶形1式II化合物的X-射线粉末衍射二维图。
附图10是CI-1027的1-丁醇溶剂化物的X-射线粉末衍射二维图。
附图11是将该1-丁醇溶剂化物润湿和干燥后，CI-1027水合物晶形1的X-射线粉末衍射二维图。
附图12是本发明结晶化合物的(a)甲醇、(b)乙醇、(c)1-丙醇、(d)2-丙醇、和(e)1-丁醇溶剂化物的X-射线粉末衍射图的三维比较。
附图13是得自附图12中描绘的溶剂化物(a)-(e)的CI-1027水合物晶形1的X-射线粉末衍射图的三维比较。
附图14是由不同醇溶剂化物获得的不含有机溶剂的6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐的X-射线衍射图的二维覆盖。
附图15是将CI-1027水合物晶形1与水加热并分离和干燥后，CI-1027水合物(晶形2)的X-射线衍射二维图。
发明详述本发明化合物是由二烷基羧酸醚前体制得的。U.S.专利5,648,387中描述了二烷基羧酸醚前体的合成，将该文献引入本发明以作参考。二烷基羧酸醚前体具有式I 式I二酸是6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸。其还称为“72953”。
本发明式II钙盐是通过将前体二烷基羧酸醚(I)72953与钙碱例如氧化钙或氢氧化钙反应而制得的。氧化钙是优选的。在氧化钙中可存在小百分比含量的水分(最高达约5％)。该反应优选在溶解二烷基羧酸醚(I)、并且至少对钙碱仅有最低程度的反应性的溶剂中进行。碱例如氧化钙优选也部分溶于溶剂中。在本发明中使用的溶剂是链烷醇，例如包括C1-C12醇，例如甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、丁醇、戊醇、环戊醇、己醇、环己醇等。溶剂优选为C1-C6无水醇，更优选为C1-C4醇。
二烷基羧酸醚(I)与氧化钙的反应易于在室温或较高压力下进行，反应温度一般优选大于约25℃。然而，应当理解，通过将该反应混合物加热至溶剂的回流温度或者甚至在压力下更高将有利于该反应。搅拌将进一步促进整个反应混合物进行均匀反应。为了确保大部分二烷基羧酸醚(I)转化成一钙盐，氧化钙与二烷基羧酸醚(I)的摩尔比应当为大约0.95-约1.05摩尔当量。将二烷基羧酸醚(I)与氧化钙反应足够长时间后，形成了固体产物，并收集。在回流的溶剂中该反应一般在约4-约96小时完成。生成了具有下式的本发明化合物 其中R1是H或低级烷基，例如甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、1-丁基，且x是0-约10的数字。在优选的实施方案中，R1是H(即水合物)。在优选的盐形式中，水存在的量为约3％-约6％(例如x＝0.03-0.06)。
二烷基羧酸醚(I)与氧化钙的反应之后，可通过加入第二种溶剂来稀释该反应。第二种溶剂(也称为后处理(work-up)溶剂)优选可以与反应溶剂混溶，这样溶解在反应溶剂中的任何钙盐会从溶剂混合物中沉淀出来，并且任何未反应的有机物质保留在溶液中。应当理解，将含有二羧酸醚一钙盐(II)的初始溶剂系统或者混合溶剂系统冷却会进一步引起沉淀。加入的溶剂的种类部分由反应溶剂的种类决定。例如，当反应溶剂是醇时，甲基叔丁基醚是代表性后处理(或第二种)溶剂。其它后处理溶剂可包括乙醚、四氢呋喃、和C5-C12混合烷烃。然而，可使用任何后处理溶剂，只要二烷基羧酸醚一钙盐(II)在其中基本上不溶解，并且可易于通过使用常规条件干燥来除去即可。在分离CI-1027钙盐，例如通过将固体产物过滤或离心来分离时，可任选用新鲜的后处理溶剂洗涤盐(II)，然后干燥以除去大部分残余的水和溶剂混合物。可通过将盐(II)加热至大于室温但是小于盐(II)分解温度的温度来促进干燥。可用热空气、热惰性气体、或在真空条件下进行干燥。优选将CI-1027盐(II)加热至约60℃-约100℃。约1-3个小时后，产物基本上不含溶剂。更优选地，将盐在真空下加热以进一步促进除去挥发性溶剂。
令人惊奇的是，现在发现，在水存在下加热和搅拌无定形形式的二羧酸醚一钙盐(II)不仅除去了挥发性溶剂，而且还使得二烷基羧酸醚一钙盐(II)的结晶性变得更高。
在真空盘式干燥器中将钙盐(II)润湿有助于进一步除去所有挥发性溶剂以产生结晶形式的二烷基羧酸醚钙盐(II)。润湿可在将二烷基羧酸醚一钙盐(II)完全干燥之前或之后进行。优选在完全干燥之前将固体一钙盐(II)进行润湿操作，以有助于将挥发性溶剂除至所需限度以下(例如低于约5％)和提高结晶性。
因此，将盐在加热的真空室中部分干燥之后，向部分干燥的二烷基羧酸醚一钙盐(II)中引入水和水蒸气。两个干燥操作都优选在搅拌下进行。润湿后，在施以真空直至盐(II)达到稳定的重量。润湿操作后所获得的二烷基羧酸醚一钙盐(II)具有很高的结晶性，并且轻叩后的堆密度为约0.3g/mL-约0.52g/mL，平均为约0.4g/mL。相反，无定形形式的CI-1027钙盐(II)的堆密度为约0.2g/mL-约0.4g/mL，平均为约0.3gm/mL。
在优选的实施方案中，本发明提供了两种不同的多晶型物，即CI-1027晶形1和CI-1027晶形2。将一钙盐晶形1在水中的悬浮液在约60℃-90℃加热约6-约48小时，将其转化成称为晶形2的第二种晶形。如果需要，晶形2产物可通过将二烷基羧酸醚(I)与氢氧化钙在水中反应而直接制得。这些形式可通过它们各自的如附图1和15所示的X-射线衍射图案彼此区别开。
晶形1和2是优选的实施方案，因为与没有进行润湿而干燥的式II盐相比，它们保持静电荷的能力要差得多。通过进行润湿操作和最终的干燥之后所获得的二烷基羧酸醚一钙盐(晶形1和2)的良好结晶性是通过X-射线衍射(XRD)分析证实的。溶剂化盐(II)的X-射线衍射图如附图所示，并表明了在固体产物内由甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、和1-丁醇形成的溶剂化物。对润湿后干燥的二烷基羧酸醚一钙盐(II)的其它分析表明了盐的形成，其中所述盐与约0.1-约1摩尔当量水/当量二烷基羧酸醚钙盐(II)结合，例如如附图1和15所示。
本领域内公认的是，独特的晶体和多晶型形式的化合物可通过X-射线衍射图中的一个或多个独特的2-θ值来表征。虽然附图列举了几个2-θ值，但是一个2-θ值即足以鉴定独特的结构。这样的独特结构还可由NMR例如13C NMR光谱中的特征共振峰来鉴定。
本发明式II化合物是有用的药物活性剂。据表明这样的化合物能提高HDL和降低甘油三酯、LDL和VLDL(参见U.S.专利5,783,600)。它们还能降低Lp(a)(U.S.专利5,750,569)，因此可用于治疗非胰岛素依赖性糖尿病(U.S.专利5,756,544)。
目前正在评价CI-1027在治疗血管疾病方面的临床应用。因此本发明晶形具有特别重要的价值，这是由于它们能促进商业生产和救生医药应用。本发明另一个实施方案是治疗血管疾病和糖尿病的方法，包括给需要治疗的哺乳动物施用治疗有效量的式II化合物。“有效量”是治疗或预防哺乳动物的血管疾病或糖尿病所需的剂量。本发明化合物通常以约50-约5000mg/天、更通常约50-2000mg/天的剂量施用。常用剂量为50-900mg/天。采用这些相同的剂量水平来治疗和预防血管疾病，特异性地降低Lp(a)水平和提高HDL-胆固醇水平，以及治疗和预防糖尿病。
本发明另外的实施方案是药物组合物，其中包含式II化合物和可药用赋形剂、载体、或稀释剂。将化合物配制成适于经口、非胃肠道、或直肠施用的形式，其中经口给药是优选的。常用于口服制剂的载体和赋形剂包括乳糖、蔗糖、淀粉例如玉米淀粉和土豆淀粉；纤维素衍生物例如甲基纤维素和乙基纤维素；明胶；滑石粉；油例如植物油、芝麻油、棉籽油；和二醇例如聚乙二醇。口服制剂一般呈片剂、胶囊、乳剂、溶液等形式。还可以使用控释制剂，例如使用聚合基质或渗透泵等的控释制剂。一般的制剂含有约5％-95％重量的与赋形剂或载体一起施用的式II化合物。可掺入矫味剂例如樱桃矫味剂或橙矫味剂。
对于非胃肠道给药，可任选用稀释剂例如等渗盐水、5％葡萄糖水溶液等配制化合物，以便于进行肌内和静脉内给药。还可以任选将化合物与蜡和明胶配制成栓剂的形式。也可以根据常规方法制备局部施用组合物例如霜剂和皮肤贴剂。
为了更全面地证实本发明优点，提供下述详细的实施例。应当理解，下述实施例仅是举例说明，不应当理解为对本发明范围的限制。所有引用文献，包括专利在内，都引入本发明以作参考。
实施例1制备6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐水合物，晶形1 经由乙醇溶剂化物制备CI-1027水合物晶形1的中试规模实施例。向750L玻璃衬里的蒸馏器中加入6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸；(72953)-54.4Kg，179.9mol；氧化钙98％-10.2Kg，178.2mol；纯的无水乙醇-392Kg，497L。开始搅动(搅拌)，并将该混合物加热至回流(76-80℃)。将反应混合物回流96小时。冷却至45℃。向反应混合物中加入甲基叔丁基醚(MTBE)-128Kg，163L。将反应混合物冷却至20℃-25℃，并搅拌约1小时。通过离心过滤固体产物，获得了CI-1027乙醇溶剂化物(式II，R1是CH3CH2-)。用MTBE-307Kg，391L洗涤固体产物。从离心机中取出产物离心块。将溶剂润湿的产物离心块(CI-1027乙醇溶剂化物)置于400L搅拌盘式干燥器中。将干燥器密封，并给该系统施加真空。将夹套温度设置为85℃。在85℃和完全真空下保持约1小时后开始搅拌。将产物在85℃和完全的真空下搅拌12-16小时。将夹套温度设置为100℃。关闭真空源的阀。经由注射喷口通过真空加入水，HPLC级-6.4Kg。水分将蒸发并润湿该系统。将该密封的润湿系统搅拌4小时。再施加真空，并将产物干燥18-24小时。将系统冷却至25℃。用氮气吹扫以御除真空。从干燥器中取出干燥产物，获得了CI-1027水合物晶形1，为白色固体。经由具有#1A筛的Fitzmill(The Fitzmill Company.Elmhurst，Illinois)研磨干燥的产物。总产量55.2Kg(未按照4.04％水分校正)，90.9％。分析结果C16H28O5Ca.H2O-红外(KBr)1107.3，1416.2，1477.9，1552cm-1鉴定(1H NMR)(CDCl3)δ7.2，3.4，1.5，1.2。鉴定(HPLC保留时间)-Waters Symmetry C18柱；150×4.6mm8.46分钟分析(HPLC wt/wt％)-99.30％乙醇含量(wt％VPC)-0.06％通过热重量分析法(TGA)测定的水分含量-3.45％钙含量(通过电感耦合等离子体法[ICP]测定的，按照水份校正的)-12.91％钠含量-0.08％XRD-CI-1027水合物晶形1，参见附图1。13C NMR(固态)ppm 189.6；186.2；71.4；43.4；30.1；28.4；25.2*；23.1*是指该晶形1所具有的独特的共振。中试规模数据在按比例增大上述CI-1027水合物晶形1生成方法的规模时，终产物的干燥遇到了困难。如上所述在回流的乙醇中形成了一钙盐乙醇溶剂化物。经证实，使用一般的最大干燥条件(100℃，完全真空)和真空盘式干燥器，从分离的CI-1027水合物晶形1产物中除去乙醇在较大规模时非常困难。试验不同类型的搅拌干燥器。虽然将某些小规模批量干燥至可接受水平的乙醇，但是结果不稳定，并且所采用的条件不能适用于按比例增大的生产规模。参见关于干燥实施例的表A。不同的批次(都是基本上如上所述制备的)用“CD-数字”表示。
形成水合物的优选方法是将CI-1027溶剂化物产物暴露于湿度。所施加的湿度大大地增加了乙醇的除去速度，并促进了水合物的生成。最初给真空盘式干燥器施用该方法取得了一些成功。给搅拌盘式干燥器施用该方法，结果乙醇易于在短时间内除去。该润湿干燥操作在短的循环时间内生成了稳定的结晶产物，因此证实了其在大规模生产应用方面的可行性。
最初的不使用润湿的干燥方法生成了如通过X-射线衍射所证实的具有无定形物理形式的CI-1027水合物产物(例如在表A中的CD-2969C-3111批次)。润湿操作包括在约80％-约95％相对湿度存在下、于约50℃-约150℃的高温下将醇溶剂化物干燥。将上面获得的乙醇溶剂化物在润湿的搅拌盘式干燥器中干燥，获得了具有如通过X-射线衍射所证实的晶形的CI-1027水合物晶形1。之后观察到，该晶形表现出显著优于无定形的优点。如表B所示，CI-1027水合物晶形1(在表A中的CD-3103-3243批次)的堆密度比无定形CI-1027高。观察到随着生产规模的增大，无定形形式的堆密度下降。然而，所生成的晶体形式一直具有高的堆密度，并且其静电性显著低于无定形形式，该特征显著地改善了散装产物的可处理性。应当指出，不含溶剂的无定形CI-1027产物也可以通过暴露于润湿条件下直接转化成CI-1027水合物晶形1。对于转化成晶形1产物，溶剂含量不是必需的。
总之，润湿操作和所生成的结晶产物的优点包括下列1.润湿操作使得在大规模情况下能有效地干燥CI-1027水合物晶形1。其在非常短的时间内制得了一致的、基本上不含醇溶剂的产物。2.所生成的不含醇溶剂的CI-1027水合物晶形1产物一般表现出高于无定形CI-1027的堆密度。随着按比例增大生产批量，高堆密度相当一致，而对于无定形产物，随着按比例增大生产批量，观察到堆密度下降。3.所生成的不含醇的CI-1027水合物晶形1产物的静电性显著低于无定形产物。这显著地改善了在大规模生产操作、以及随后的药物剂型的填充/完成操作中散装产物的可处理性。
表A干燥时间实验/结果批次ID 干燥方法 时间 溶剂含量(小时)CD-2969C 真空盘式干燥器 481.12％EtOH@72℃ 241.08％EtOH@80℃ 720.92％EtOH；2.84％H2OCD-3032 真空盘式干燥器 247.0％EtOH@82℃ 246.0％EtOH此时研磨 →@82℃245.5％EtOH@95℃ 244.4％EtOH@95℃ 720.9％EtOH；1.24％H2OCD-3044 真空盘式干燥器@60℃245.2％EtOH@82℃ 244.1％EtOH@101℃ 244.1％EtOH通氮气 →@102℃ 182.0％EtOH此时开始 @101℃ 720.2％EtOH@101℃ 720.1％EtOH；1.5％H2OCD-3055 真空盘式干燥器@60℃247.7％EtOH研磨的此时 →@82℃245.5％EtOH转移到旋转干 →@104℃ 244.7％EtOH燥器内 @105℃ 243.4％EtOH@104℃ 242.9％EtOH@101℃ 242.5％EtOH@104℃ 242.0％EtOH@101℃ 242.0％EtOH转移到托盘中 →@103℃ 240.3％EtOH@103℃ 240.1％EtOH；1.92％H2O
表A(续)干燥时间实验/结果批次ID 干燥方法 时间 溶剂含量(小时)CD-3082 真空盘式干燥器@82℃24 5.97％EtOH此时研磨→@98℃24 0.85％EtOH此时向托盘中→@97℃24 0.72％EtOH加入5L水@97℃ 24 0.41％EtOH再研磨的0.11％EtOH；1.59％H2OCD-3089 搅拌盘式干燥器@82℃ 24 7.1％EtOH@98℃ 24 5.5％EtOH@100℃ 24 5.1％EtOH转移到盘式干→@100℃ 20 1.8％EtOH燥器中。加入@101℃ 18 0.22％EtOH5L水@100℃ 24 0.01％EtOH；3.02％H2OCD-3102 真空盘式干燥器@84℃20 6.7％EtOH@95℃ 24 3.9％EtOH@95℃ 24 1.77％EtOH@95℃ 24 0.6％EtOH@95℃ 72 ND EtOH；2.12％H2OCD-3111 真空盘式干燥器@81℃24 5.4％EtOH10个没有盖子@98℃ 24 0.07％EtOH的托盘、托盘置 @97℃ 24 0.05％EtOH于烘箱顶部 研磨的 ND EtOH；1.94％H2O
表A(续)干燥时间实验/结果批次ID 干燥方法 时间 溶剂含量(小时)CD-3103*搅拌盘式干燥器@80℃ 245.4％EtOH此时加入→@80℃ 240.07％EtOH1Kg水 @100℃240.05％EtOH研磨的 0.06％EtOH；3.7％H2OCD-3130*搅拌盘式干燥器@85℃ 245.9％EtOH此时加入→@80℃ 240.04％EtOH2Kg水 @100℃240.06％EtOH研磨的 0.08％EtOH；4.15％H2OCD-3135*搅拌盘式干燥器@80℃ 245.76％EtOH此时加入→@99℃ 220.02％EtOH2Kg水 @98℃ 5.5 0.02％EtOH研磨的 ND EtOH；4.38％H2OCD-3172*搅拌盘式干燥器@80℃ 207.0％EtOH此时加入→@100-102℃ 190.2％EtOH4Kg水 @100℃240.2％EtOHCD-3321A*搅拌盘式干燥器@80-85℃ 186.27％EtOH此时加入→@96-97℃270.23％EtOH6.4Kg水 @97-98℃ 190.06％EtOH
表A(续)干燥时间实验/结果批次ID干燥方法时间 溶剂含量(小时)CD-3243*搅拌盘式干燥器@85-87℃19 7.22％EtOH此时加入 →@98-99℃ 16 0.09％EtOH6.4Kg水 @99℃ 18 0.06％EtOH除非用符号*指出，否则产物通过XRD证实是无定型的。从CD-3172获得的产物的量是35.1Kg；从CD-3221A获得的产物的量是53.9Kg；从CD-3243获得的产物的量是49.3Kg。*通过XRD分析证实的结晶产物。
在这些实施例中的额外干燥时间是由于乙醇分析需要24小时的运转时间。
表B堆密度结果批次ID堆密度堆密度XRD松散的(g/mL) 轻叩的(g/mL)CD-2969C 0.336 0.439 无定形CD-3032 0.239 0.306 无定形CD-3044 0.249 0.279 无定形CD-3055 0.280 0.315 无定形CD-3082 0.234 0.337 无定形CD-3089 0.292 0.337 无定形CD-3102 0.215 0.270 无定形CD-3111 0.218 0.264 无定形CD-3103 0.343 0.484 结晶CD-3130 0.311 0.496 结晶CD-3135 0.242 0.379 结晶CD-3172 0.281 0.438 结晶CD-3221A 0.372 0.521 结晶CD-3243 0.235 0.300 结晶实施例2制备6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2二甲基己酸一钙盐乙醇溶剂化物晶体 标准实验室方法向装配有加热套、回流冷凝器、和高架搅拌器的500mL三颈园底烧瓶中加入6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸；(72953)-25.0g，0.08267mol；氧化钙98％-1.0当量，0.08267mol，4.73g(按纯度校正的)；乙醇-187.5g，237mL。开始中等程度搅动(搅拌)，并将混合物加热至回流(76-80℃)。将反应混合物回流4-24小时。冷却至约45℃。向反应混合物中加入MTBE-60.0g，79.2mL。将反应混合物冷却至20℃-25℃，并搅拌约1小时。过滤出固体产物。用MTBE-40.0g，50mL洗涤固体产物。在60℃-100℃和完全真空下将产物干燥至恒重。从干燥器中取出，白色固体，总产量21g(按无水计为20g)(按照水分和乙醇含量校正的)。80％标题化合物。分析结果鉴定(IR)-KBr1107.3，1552cm-1鉴定(1H NMR)-(CDCl3)δ7.2。HPLC(面积％CI-1027)-99.738％乙醇含量(wt％VPC)-1.95％水分含量(KF滴定)-1.73％(3次测定的平均值)钙含量(ICP，按照水分校正的)-10.82％XRD-结晶溶剂化物，参见附图2。13C NMR(固态)ppm 189.9；186.7；71.6；58.5*；43.2；29.9；23.5*是指该晶形所具有的独特的共振。
实施例3制备6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐水合物，晶形1标准实验室方法(这是按照相同操作的重复反应的概要)向装配有顶部搅拌器、真空计量器、水注射喷口、和外置温度浴的夹套的500mL三颈园底烧瓶中加入如实施例2所述制得的50g 6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐乙醇溶剂化物。将反应器密封，并开始搅拌(60-100rpm)。将该系统完全抽真空。将夹套温度设置为60℃。在60℃和完全真空下将产物搅拌18小时。关闭真空源的阀。经由注射喷口通过真空加入水-20g。水分将蒸发并润湿该系统。将该密封的润湿系统搅拌4小时。再施加真空，并将产物干燥20.5小时。将系统冷却至30℃以下。用氮气吹扫以御除真空。从反应器中取出干燥产物。产物是白色块状固体。总产量24.89g本标题产物。分析结果HPLC(面积％CI-1027)-99.725％乙醇含量(wt％VPC)-0.0％水分含量(KF滴定)-3.25％XRD分析表明该产物是CI-1027晶形1。参见附图3。
实施例4制备6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐甲醇溶剂化物结晶 甲醇溶剂化物标准实验室方法向装配有加热套、回流冷凝器、和顶部搅拌器的500mL三颈园底烧瓶中加入6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸；CI-1027步骤1(72953)-25.0g，0.08267mol；氧化钙98％-1.0当量，0.08267mol，4.73g(按纯度校正的)；甲醇-187.5g，237mL。开始中等程度搅动(50-60rpm搅拌)，并将混合物加热至回流(64-66℃)。将反应混合物回流21小时。冷却至45℃。向反应混合物中加入MTBE-60.0g，79.2mL。将反应混合物冷却至20℃-25℃，并搅拌约1小时。过滤出固体产物。用MTBE-40.0g，50mL洗涤固体产物。产物是具有灰色结块的白色固体-50.87g将产物在60℃和完全真空下干燥3小时至一定重量(21.75g)。在80℃干燥16小时至重量为16.34g。在100℃干燥4.5小时至重量为10.97g。从干燥器中取出。产物为白色固体结晶。分析结果HPLC(面积％CI-1027)-99.737％水分含量(KF滴定)-3.36％-4.94％(3次的范围)钙含量(ICP，按照水分校正的)-11.00％-11.22％(水分含量范围)XRD-CI-1027甲醇溶剂化物结晶，参见附图4。13C NMR(固态)ppm189.6；186.2；71.4；43.2；29.6；23.5实施例5由甲醇溶剂化物制备6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐，晶形1标准实验室方法向装配有顶部搅拌器、真空计量器、水注射喷口、和外置温度浴的夹套的500mL三颈园底烧瓶中加入在实施例4中制备的6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐甲醇溶剂化物。将反应器密封，并开始搅拌(60-100rpm)。将该系统完全抽真空。将夹套温度设置为100℃。关闭真空源的阀。经由注射喷口通过真空加入水-10g。水分将蒸发并润湿该系统。将该密封的润湿系统搅拌60分钟。再施加真空，并将产物干燥2小时。将系统冷却至25℃。用氮气吹扫以御除真空。从反应器中取出干燥产物，获得了没有可流动粉末的白色结晶4.22g。分析结果HPLC(面积％CI-1027)-99.24％乙醇含量(wt％VPC)-0.0％水分含量(KF滴定)-3.84％钙含量(ICP，按照水分校正的)-11.52％XRD-晶形I，参见附图5。
实施例6制备6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2二甲基己酸一钙盐1-丙醇溶剂化物结晶 1-丙醇溶剂化物标准实验室方法向装配有加热套、回流冷凝器、和顶部搅拌器的500mL三颈园底烧瓶中加入6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸；CI-1027步骤1(72953)-25.0g，0.08267mol；氧化钙98％-1.0当量，0.08267mol，4.73g(按纯度校正的)；1-丙醇-187.5g，2 33mL。开始中等程度搅拌(50rpm)，并将混合物加热至回流(95-98℃)。将反应混合物回流21小时。冷却至50℃。向反应混合物中加入MTBE-60.0g，79.2mL。将反应混合物冷却至20℃-25℃，并搅拌约1小时。过滤出固体产物。用MTBE-40.0g，50mL洗涤固体产物。产物是粘土状白色固体-69.06g。将产物在60℃和完全真空下干燥16小时(重量为29.52g)。将产物在80℃干燥3.5小时至重量为23.53g。将产物在100℃干燥2小时至重量为18.03g。从干燥器中取出，获得了白色固体。分析结果HPLC(面积％CI-1027)-99.064％1-丙醇含量(TGA)-5.99％水分含量(KF滴定)-1.72％(2次的平均值)钙含量(ICP，按照水分校正的)-10.73％XRD-CI-1027 1-丙醇溶剂化物结晶，参见附图6。13C NMR(固态)ppm 189.9；186.0；71.6；43.2；29.6；23.8实施例7由1-丙醇溶剂化物制备6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐，晶形1标准实验室方法向装配有顶部搅拌器、真空计量器、水注射喷口、和外置温度浴的夹套的500mL三颈园底烧瓶中加入在实施例6中制备的6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐1-丙醇溶剂化物。将反应器密封，并开始搅拌(60-100rpm)。将该系统完全抽真空(最有效的)。将夹套温度设置为100℃。关闭真空源的阀。经由注射喷口通过真空加入水-10g。水分将蒸发并润湿该系统。将该密封的润湿系统搅拌30分钟。再施加真空，并将产物干燥2小时。将系统冷却至25℃以下。用氮气吹扫以御除真空。从反应器中取出产物，获得了白色粗糙粉末10.33g。分析结果HPLC(面积％CI-1027)-99.519％1-丙醇含量(TGA)-0.0％水分含量(KF滴定)-3.98％(2次的平均值)钙含量(ICP，按照水分校正的)-10.20％XRD-CI-1027晶形1，参见附图7。
实施例8制备6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2二甲基己酸一钙盐2-丙醇溶剂化物结晶 2-丙醇溶剂化物标准实验室方法向装配有加热套、回流冷凝器、和顶部搅拌器的500mL三颈园底烧瓶中加入6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸(72953)-25.0g，0.08267mol；氧化钙98％-1.0当量，0.08267mol，4.73g(按纯度校正的)；2-丙醇-187.5g，239mL。开始中等程度搅拌(50rpm)，并将混合物加热至回流(80-83℃)。将反应混合物回流24小时。冷却至40℃。向反应混合物中加入MTBE-60.0g，79.2mL。将反应混合物冷却至20℃-25℃，并搅拌约1小时。过滤出固体产物。用MTBE-40.0g，50mL洗涤固体产物。产物是白色固体-50.90g。将产物在60℃和完全真空下干燥3小时至重量为28.59g。在80℃干燥16小时至重量为23.27g。在100℃干燥4小时至重量为17.51g。从干燥器中取出，获得了白色固体结晶。分析结果HPLC(面积％CI-1027)-99.315％2-丙醇含量(TGA)-6.12％水分含量(KF滴定)-1.96％(3次的平均值)钙含量(ICP，按照水分校正的)-10.27％XRD-CI-10272-丙醇溶剂化物结晶，参见附图8。13C NMR(固态)ppm 189.4；187.7；70.9；69.4；66.5；63.8*；43.2；35.0；30.1；23.8；18.7*；14.3**是指该晶形的独特的共振。
实施例9由2-丙醇溶剂化物制备6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐，晶形1标准实验室方法向装配有顶部搅拌器、真空计量器、水注射喷口、和外置温度浴的夹套的500mL三颈园底烧瓶中加入在实施例8中制备的6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐2-丙醇溶剂化物。将反应器密封，并开始搅拌(60-100rpm)。将该系统完全抽真空。将夹套温度设置为100℃。关闭真空源的阀。经由注射喷口通过真空加入水-10g。水分将蒸发并润湿该系统。将该密封的润湿系统搅拌60分钟。再施加真空，并将产物干燥12小时。将系统冷却至30℃以下。用氮气吹扫以御除真空。从反应器中取出产物，获得了可自由流动的粉末9.01g。分析结果HPLC(面积％CI-1027)-99.611％2-丙醇含量(TGA)-0.0％水分含量(KF滴定)-4.04％(2次的平均值)钙含量(ICP，按照水分校正的)-10.93％XRD-CI-1027晶形1，参见附图9。
实施例10制备6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐1-丁醇溶剂化物结晶 1-丁醇溶剂化物标准实验室方法向装配有加热套、回流冷凝器、和顶部搅拌器的500mL三颈园底烧瓶中加入6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸(72953)-25.0g，0.08267mol；氧化钙98％-1.0当量，0.08267mol，4.73g(按纯度校正的)；1-丁醇-187.5g，231.5mL。开始中等程度搅拌，并将混合物加热至回流(117-120℃)。将反应混合物回流12小时。冷却至50℃以下。向反应混合物中加入MTBE-60.0g，79.2mL。将反应混合物冷却至20℃-25℃，并搅拌约1小时。过滤出固体产物。用甲基叔丁基醚-40.0g，50mL洗涤固体产物。产物是白色粗糙固体-44.16g。将产物在60℃和完全真空下干燥16小时至重量为29.04g。在80℃干燥3.5小时至重量为23.83g。在100℃干燥2小时至重量为18.43g。从干燥器中取出，获得了白色固体结晶。分析结果HPLC(面积％CI-1027)-99.560％1-丁醇含量(TGA)-9.02％水分含量(KF滴定)-1.93％(2次的平均值)钙含量(ICP，按照水分校正的)-9.65％XRD-CI-1027 1-丁醇溶剂化物结晶，参见附图10。13C NMR(固态)ppm 189.9186.0；71.6；43.2；29.9；23.8实施例11由1-丁醇溶剂化物制备6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐，晶形1标准实验室方法向装配有顶部搅拌器、真空计量器、水注射喷口、和外置温度浴的夹套的500mL三颈园底烧瓶中加入在实施例10中制备的6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐1-丁醇溶剂化物。将反应器密封，并开始搅拌(60-100rpm)。将该系统完全抽真空(最有效的)。将夹套温度设置为100℃。关闭真空源的阀。经由注射喷口通过真空加入水-10g。水分将蒸发并润湿该系统。将该密封的润湿系统搅拌30分钟。再施加真空，并将产物干燥2小时。将系统冷却至25℃。用氮气吹扫以御除真空。从反应器中取出干燥产物，获得了粗糙的粒状固体10.35g。分析结果HPLC(面积％CI-1027)-99.374％1-丁醇含量(TGA)-0.0％水分含量(KF滴定)-3.96％(3次的平均值)钙含量(ICP，按照水分校正的)-10.70％XRD-CI-1027晶形1，参见附图11。
实施例12通过水蒸煮制备6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐，晶形2标准实验室方法向200mL园底烧瓶中加入6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐使用实施例1的中试规模方法制得的CI-1027晶形1-24.4g水-100g将含有浆状液的该园底烧瓶与旋转蒸发仪连接，并开始缓慢的旋转(120rpm)。然后将含有浆状液的该园底烧瓶浸没在温度设置为60℃的水浴中。将该水悬浮液在常压下搅拌7天，然后将该混合物冷却至20℃-25℃。通过过滤收集固体，并用50g新鲜的水洗涤。将固体产物在完全真空下于90℃干燥至恒重，获得了CI-1027晶形2水合物，为白色固体-21.3g，按无水计为20.6g(按照水分校正的)。84％。分析结果HPLC(面积％CI-1027)-100.06％乙醇含量(wt％VPC)-0.04％水分含量(KF滴定)-3.47％钙含量(ICP，按照水分校正的)-10.78％XRD-CI-1027水合物晶形2，参见附图15。13C NMR(固体)ppm 190.9；189.6；186.2；120.4；72.7*；44.7*44.2；43.0；42.3；39.3；37.9；31.8；30.9；29.6；27.7；26.2*；25.3；24.0；22.9；21.5；和20.2。*是指该晶形的独特的共振。
实施例13通过与氢氧化钙在水中反应来制备6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2二甲基己酸钙盐，晶形2 标准实验室方法向装配有加热套、回流冷凝器、和顶部搅拌器的500mL三颈园底烧瓶中加入6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸(72953)-25.0g，0.08267mol，氢氧化钙粉末-1.0当量，0.08267mol，6.13g(未按照纯度校正)，水-175g，175mL。开始搅拌，并将混合物加热至80℃。将反应混合物在80℃搅拌12小时。将反应混合物冷却至0-5℃。加入40mL水以维持可搅拌的混合物。过滤出固体产物。白色固体-49.34g。在95℃和完全真空下将产物干燥24小时。从干燥器中取出块状白色固体。在装瓶前粉碎-14.62g。分析结果HPLC(面积％CI-1027)-99.60％水分含量(KF滴定)-4.93％(2次的平均值)钙含量(ICP，按照水分校正的)-10.52％XRD-CI-1027晶形2，参见附图15。
如前述实施例所指出的那样，各种溶剂化形式的式II钙盐是固体，并且很多具有高结晶性，因此使得它们尤其可用于商业生产和配制加工。本发明钙盐的这种独特的固体性质和结晶性是令人惊奇的，因为其它常见的盐形式具有不希望的物理性质例如吸湿性和/或非结晶性。对于大规模生产和配制加工操作，这样的吸湿性以及非结晶性盐形式是不能接受的。下面的实施例进一步举例说明了本发明钙盐优于其它盐形式的优点。
实施例14比较一碱土金属盐和其它盐按照实施例1的一般方法，将72953与氢氧化钠、氢氧化钾、和乙酰胆碱以1∶1每个二链烷酸分子和2∶1每个二链烷酸分子的化学计算比例反应。比较由此制得并进行完全干燥的固体与实施例1钙盐(CI-1027)的性质。结果如表1所示。
表1盐形式和吸湿状况制得的盐物理形式 固体的物理性质二钠盐 固体 非常强的吸湿性二钾盐 固体 非常强的吸湿性一胆碱盐油状物 -二胆碱盐油状物 -一钠盐 固体 吸湿性一钾盐 固体 非常强的吸湿性一钙盐 固体和/或结晶无吸湿性-轻微的吸湿性实施例15在两个高Lp(a)模型中通过下述体内分析测定式II CI-1027，晶形1对Lp(a)和其它脂蛋白参数的影响通过口服管饲法给Cynomolgus猕猴和Lp(a)转基因小鼠施用CI-1027，剂量为3、10、30、100、或300mg/kg，施用2周。Lp(a)降低是剂量依赖性的(对于3、10、30、100、和300mg/kg/天的剂量，分别是-9、-23、-64、-68、和-87％)。在这些实验中，总的血浆和HDL胆固醇下降了。在转基因小鼠实验中，将雌性小鼠分配到具有相同Lp(a)水平的5个组中，并通过口服管饲法仅施用载体或者施用载体加CI-1027(3、10、30、和100mg/kg/天)。每周采集一次血样(治疗前2周、进行治疗的2周)。在该实验开始时，各组的血浆Lp(a)平均为40mg；(1dL)。一周后，与仅施用载体的小鼠相比，CI-1027引起血浆Lp(a)的剂量依赖性下降(对于3、10、30、和100mg/kg/天的剂量水平分别是-15、-41、-54、和-61％)。还引起了总的血浆胆固醇的剂量依赖性下降，100mg/kg/天的剂量引起了3％的最大下降。通过HPLC确定的脂蛋白状况证实了胆固醇下降主要是由于LDL胆固醇的显著下降所致。HDL胆固醇保持不变。治疗后，HDL胆固醇与VLDL+LDL胆固醇的比例提高了，从0.39的对照值提高至0.65。血浆apoB也下降了最高达30％。第二周的治疗后发生了类似变化。
实施例16CI-1027晶形1对胰岛素敏感性的影响在使用3T3-LI脂肪细胞的标准测定中评价CI-1027，3T3-LI脂肪细胞对胰岛素特别敏感，即糖摄取可被胰岛素迅速激活15-20倍。Frost.等人在J Biol.Chem.19852602646-2652中更前面地描述了该测定所使用的方法。具体来说，3T3-L1成纤维细胞得自AmericanType Culture Collection(ATCC.Rockville.MD)。让细胞生长至融合，并分化成脂肪细胞。在第0天，用167mm胰岛素、0.25μM地塞米松、和0.5mM甲基异丁基甲基黄嘌呤在含有Dulbecco’s改性Eagle’s培养基(DMEM)的10％胎牛血清(FBS)中处理融合的细胞。2天后，将培养基换成含有167nm胰岛素和10％FBS的DMEM。然后将培养基换成10％DMEM，并每隔一天换一次直至收集。在第0天将溶解在二甲亚砜中的CI-1027加到培养基中，并用随着每次培养基改变进行补充。通过目测检验细胞内脂肪小滴的聚集来评价分化。在第9天，按照Sandouk.等人在Endocrinoloy，1993133352-359中描述的方法，通过定量测定掺入到分化细胞中的[14C]去氧葡萄糖来测定葡萄糖运输。
实施例17[14C]CI-1027的药动学和代谢正在临床上评价CI-1027提高增加高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和降低致动脉粥样化脂蛋白Lp(a)来治疗血脂异常和动脉粥样硬化的作用。CI-1027在大鼠、狗和猴子中迅速被吸收。口服生物利用度似乎很高，虽然CI-1027的药动学是非线性的，并且该药物似乎经历了肠肝再循环。很明显，在大鼠中的静脉内(IV)和经口(PO)消除半衰期值(5-7小时)比在狗(17-31小时)或猴子(9-15小时)中的半衰期值小。在体外与血浆蛋白的结合是种属和浓度依赖性的。白蛋白似乎是主要的结合蛋白。使用放射标记的化合物用大鼠、狗、和猴子肝细胞进行的体外实验显示了两个主要的14C峰，即完整的药物和葡萄糖醛酸化物缀合物。在完整的和胆汁瘘管插套管的大鼠与猴子中，施用10mg/kg[14C]后的平均回收率(％14C剂量)如表2所示。
表2以10mg/kg和14C剂量的百分比表示的平均回收率排泄物 完整大鼠 瘘管大鼠 猴子瘘管猴子胆汁 87.5 42.0尿 37.0 10.5 78.1 62.2粪便56.9 0.72 17.3 3.82总共93.9 98.7 95.4 108用放射检测法通过HPLC进行代谢物测定，并且通过LC/RAM/MS/MS鉴定代谢物。基本上100％血浆放射性是未改变的药物。因为在胆汁和尿中检测到了酰基葡萄糖醛酸化物，所以进行LC/NMR分析来测定可能的酰基迁移产物。
实施例18胶囊制剂组分 量6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2- 1000g二甲基己酸一钙盐水合物晶形1乳糖 960g硬脂酸镁 40g
将各组分混合至均匀，并填充到#4硬明胶胶囊中。每粒胶囊填充200mg混合物，并含有100mg活性二羧酸醚一钙。将胶囊以每天1-3粒的剂量施用给成人以降低血浆Lp(a)。
实施例19片剂组分 量6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)- 3000g2，2-二甲基己酸一钙盐水合物晶形2乳糖 750g玉米淀粉 300g明胶 120g水1000cc硬脂酸镁 20g用明胶水溶液将该二烷基醚盐、乳糖、和150g玉米淀粉混合。将湿的颗粒过筛、干燥、再过筛。将干燥颗粒与硬脂酸镁和余下的玉米淀粉混合，并用15/32英寸标准凹面冲压机将该混合物压制成698mg的片剂。每片含有500mg二烷基醚盐。
实施例20口服液制剂组分 量6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)- 4.0g2，2-二甲基己酸一钙盐水合物晶形1聚氧乙烯脱水山梨醇一硬脂酸酯 0.1cc羧甲基纤维素钠 0.3g硅酸镁铝络合物 0.5g糖 10g甘油 2cc苯甲酸钠 0.5g柠檬酸钠 0.2g批准的红色染料 1mg樱桃矫味剂 0.02cc蒸馏水适量至 100cc
聚氧乙烯脱水山梨醇一硬脂酸酯是产品例如聚山梨醇酯60或吐温60。硅酸镁铝络合物是凝胶形成剂例如Vcegum H.V。将该物质在10cc蒸馏水中水合过夜。用聚氧乙烯脱水山梨醇一硬脂酸酯、樱桃模拟矫味剂、30cc蒸馏水、和二羧酸醚碱土金属盐制备混合物，并过匀化器。在剧烈搅拌下加入糖、甘油、柠檬酸钠、苯甲酸钠、和羧甲基纤维素钠，然后加入水合的硅酸镁铝络合物以及红色染料在2cc水中的溶液。将所得悬浮液均化，用柠檬酸调节至pH 5.0，并用蒸馏水稀释至终体积为100cc。一个55-cc口服剂量单位的该悬浮液含有100mg二烷基酸醚盐。如果需要的话，可不加入红色染料和樱桃模拟矫味剂。或者用其它着色剂和矫味剂代替。
实施例21包衣片剂组分 1000片的量片剂核6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)- 168.922，2-二甲基-1-己酸一钙盐(CI-1027)乳糖一水合物NF 36.00羟丙基纤维素 18.80交联羧甲基纤维素钠 9.40硬脂酸镁(nonbovine)1.88纯化水USP 适量235.00g在流化床制粒机中制备片剂核。将羟丙基纤维素在水中的粘合剂水溶液置于低剪切混合器中。在流化床制粒机中将CI-1027与乳糖一水合物混合在一起。将粘合剂溶液喷雾到在流化床制粒机中的混合物的上部，以制得颗粒。收集颗粒并过Comil。将过筛的颗粒与交联羧甲基纤维素钠在混合器中混合至均匀。将硬脂酸镁加到该混合器中，并将该混合物搅拌至均匀。使用标准压片机将该混合物压制成1000片。在包衣锅中将这些片剂与7.00g Opandry White YS-1-7040(Colorcon Inc..West Point.Pennsylvania)溶液和0.05g二甲基硅油乳液USP(30％，在水中)混合。然后用有助于贮存和给药的膜将片剂包衣。每片含有168.92mg CI-1027，相当于150mg 72953(游离酸)。
说明书以全面、清楚、简明、和精确的术语描述了本发明及其制备和使用方式与方法，以使得本领域技术人员能够制备和使用它们。应当理解，上文描述了本发明的优选实施方案，并且可在不背离由权利要求书所限定的本发明实质或范围的情况下对其作出改变。为了特别指出并清楚地要求本发明的主题，权利要求书对说明书作出了结论。
权利要求
1.式II化合物6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐 其中R1是H或低级烷基，且x是0-10的数字。
2.化合物6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐。
3.化合物6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐水合物。
4.化合物6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐晶形1，其具有基本上包含下列特征的X-射线粉末衍射图案#2-θ d(A)峰P％ 面积 面积％FWHM16.760 13.0648 5106 100.0 1497 100.0 0.23428.183 10.7953 1743 34.1 435 29.1 0.20038.560 10.3207 1866 36.5 543 36.3 0.23349.239 9.5638 234 4.6 29 1.9 0.09659.760 9.0546 972 19.0 220 14.7 0.181610.5698.3634 156 3.1 12 0.8 0.061711.1417.9353 178 3.5 29 1.9 0.130813.7606.4304 266 5.2 46 3.1 0.138915.5995.6761 338 6.6 63 4.2 0.14810 16.7405.2917 433 8.5 64 4.3 0.11811 17.4205.0866 1890 37.0 689 46.0 0.29112 20.6394.3000 523 10.2 128 8.5 0.19613 21.3914.1505 188 3.7 20 1.3 0.08514 22.1394.0119 445 8.7 74 4.9 0.13215 31.5592.8326 270 5.3 24 1.6 0.070
5.化合物6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐，其具有以ppm表示的189.6；186.2；71.4；43.4；30.1；28.4；25.2；23.1的13C NMR(固态)。
6.化合物6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐，其具有在2 5.2ppm的13C NMR峰。
7.权利要求1的结晶化合物，其中所述化合物包含6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐乙醇溶剂化物，其中R1是乙基。
8.结晶化合物6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐乙醇溶剂化物，其具有基本上包含下列特征的X-射线粉末衍射图案# 2-θ d(A) 峰 P％ 面积 面积％FWHM1 6.89912.8028 13186 100.03025 100.0 0.1842 8.26110.6945 5221 39.6 931 30.8 0.1433 8.8389.9969 2057 15.6 482 15.9 0.1874 11.061 7.9927 7856.0 160 5.3 0.1635 12.100 7.3086 1355 10.3 150 4.9 0.0886 13.619 6.4964 4503.4 89 2.9 0.1577 17.677 5.0132 7535.7 126 4.2 0.1348 18.180 4.8755 2011 15.3 588 19.4 0.2349 20.840 4.2588 4393.3 40 1.3 0.07210 21.334 4.1615 4273.2 67 2.2 0.125
9.权利要求8的结晶化合物，其具有ppm表示的189.9；186.7；71.6；58.5；43.2；29.9；23.5的13C NMR(固态)。
10.化合物6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐乙醇溶剂化物，其具有在58.5ppm的13C NMR峰。
11.结晶化合物6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐甲醇溶剂化物。
12.权利要求11的结晶化合物，其具有基本上包含下列特征的X-射线粉末衍射图案#2-θ d(A)峰 P％ 面积 面积％FWHM16.89612.8072 11991100.0 2593 100.0 0.17328.33910.5940 2046 17.1 334 12.9 0.13139.2199.5853 1438 12.0 281 10.8 0.156410.280 8.5979 632 5.3 180 6.9 0.227511.320 7.8105 1079 9.0 322 12.4 0.238615.800 5.6044 463 3.9 592.3 0.102716.741 5.2913 432 3.6 381.4 0.069818.160 4.8809 1260 10.5 599 23.1 0.380918.702 4.7408 700 5.8 184 7.1 0.2101019.816 4.4766 589 4.9 943.6 0.1271121.724 4.0876 510 4.3 963.7 0.150
13.权利要求12的结晶化合物，其具有以ppm表示的189.6；186.2；71.4；43.2；29.6；23.5的13C NMR(固态)。
14.化合物6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐1-丙醇溶剂化物。
15.权利要求14的结晶化合物，其具有基本上包含下列特征的X-射线粉末衍射图案#2-θ d(A)峰 P％面积 面积％FWHM16.899 12.8025 12371100.0 3495 100.0 0.22627.843 11.2637 4815 38.9 1119 32.0 0.18638.661 10.2009 1709 13.8 357 10.2 0.167411.3597.7833 771 6.2141 4.0 0.146512.3007.1900 752 6.1127 3.6 0.135613.1006.7528 517 4.2371.0 0.057718.2624.8540 1945 15.7 596 17.1 0.245820.7214.2832 828 6.7279 8.0 0.269921.7404.0847 573 4.6146 4.2 0.203
16.权利要求15的结晶化合物，其具有以ppm表示的189.6；186.2；71.4；43.2；29.6；23.5的13C NMR(固态)。
17.化合物6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐2-丙醇溶剂化物。
18.权利要求17的结晶化合物，其具有基本上包含下列特征的X-射线粉末衍射图案#2-θ d(A)峰 P％ 面积 面积％ FWHM16.918 12.7674 10028100.02562 100.0 0.20428.000 11.0427 3984 39.7 800 31.2 0.16138.619 10.2506 1619 16.1 346 13.5 0.171411.3387.7981 658 6.6 682.60.082511.7187.5459 236 2.4 281.10.093612.2417.2243 761 7.6 131 5.10.138715.3825.7557 610 6.1 107 4.20.140818.1624.8803 1937 19.3 441 17.2 0.182920.7794.2713 853 8.5 222 8.60.208
19.权利要求14的结晶化合物，其具有以ppm表示的189.4；187.7；70.9；69.4；66.5；63.8；43.2；35.0；30.1；23.8；18.7；14.3的13C NMR(固态)。
20.化合物6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐2-丙醇溶剂化物，其具有在63.8、18.7、或14.3ppm的13C NMR峰。
21.化合物6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐1-丁醇溶剂化物。
22.权利要求21的结晶化合物，其具有基本上包含下列特征的X-射线粉末衍射图案# 2-θ d(A)峰P％ 面积 面积％FWHM1 7.060 12.5101 19609 100.0 4796 100.0 0.1962 9.078 9.7332 3027 15.4 567 11.8 0.1503 11.1007.9644 924 4.7 164 3.4 0.1424 16.3615.4135 554 2.8 76 1.6 0.1095 18.0404.9133 2276 11.6 456 9.5 0.1606 18.8204.7112 1303 6.6 385 8.0 0.2367 19.9224.4532 1886 9.6 457 9.5 0.1938 21.5604.1183 853 4.4 205 4.3 0.1919 22.2813.9867 343 1.7 37 0.8 0.0861023.5213.7793 450 2.3 107 2.2 0.189
23.权利要求21的结晶化合物，其具有以ppm表示的189.9；186.0；71.6；43.2；29.9；23.8的13C NMR(固态)。
24.化合物6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐晶形2，其具有基本上包含下列特征的X-射线粉末衍射图案#2-θ d(A)峰P％面积 面积％FWHM17.259 12.1686 9283 100.0 2482 100.0 0.21428.739 10.1100 4191 45.1 603 24.3 0.11539.386 8.9628 967 10.4 161 6.5 0.133411.6597.5838 430 4.6491.9 0.089513.9556.3408 305 3.3582.3 0.151614.2206.2233 326 3.5732.9 0.178715.3875.7537 278 3.0190.7 0.053816.4615.3806 986 10.6 187 7.5 0.152917.3615.1039 1490 16.1 348 14.0 0.18710 18.0634.9069 1284 13.8 323 13.0 0.20111 19.3024.5947 871 9.4166 6.7 0.15212 19.8624.4664 686 7.4142 5.7 0.16613 20.2004.3923 457 4.9103 4.1 0.17914 21.1784.1918 656 7.1973.9 0.11715 21.6414.1031 167 1.86 0.2 0.02916 22.3003.9833 794 8.6192 7.7 0.19317 23.2183.8278 247 2.7230.9 0.07118 24.1003.6897 183 2.0341.3 0.14519 25.4813.4928 487 5.2141 5.7 0.23120 28.8003.0974 134 1.4140.6 0.08321 29.2973.0459 259 2.8281.1 0.08422 30.7002.9099 287 3.1200.8 0.055
25.权利要求24的结晶化合物，其具有以ppm表示的190.9；189.6；186.2；120.4；72.7；44.7；44.2；43.0；42.3；39.3；37.9；31.8；30.9；29.6；27.7；26.2；25.3；24.0；22.9；21.5；和20.2的13C NMR(固态)。
26.化合物6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐晶形2，其具有在72.7、44.7、或26.2ppm的13C NMR峰。
27.权利要求1的化合物，其中所述晶体结构含有约0.1-约1.0个水分子/个盐离子。
28.制备式II稳定的结晶化合物的方法 其中R1是低级烷基，且x是0-10的数字，包括将式I化合物 与氧化钙在式R1OH链烷醇有机溶剂中反应，以生成固体产物；将固体产物干燥以获得其中钙与二羧酸的化学计量比约为1∶1的式II二羧酸醚一钙盐。
29.权利要求28的方法，其中所述有机溶剂是C1-C12醇。
30.权利要求28的方法，其中所述C1-C12醇基本上无水。
31.权利要求28的方法，其中所述醇是C1-C4链烷醇。
32.权利要求28的方法，其中还包括向有机醇溶剂中引入后处理溶剂的步骤，其中所述后处理溶剂引起至少一部分二羧酸醚一钙盐从有机醇溶剂中沉淀出来。
33.权利要求32的方法，其中所述后处理溶剂是甲基叔丁基醚。
34.权利要求32的方法，其中还包括在干燥前将固体产物从有机溶剂中过滤出来的步骤。
35.权利要求32的方法，其中还包括在过滤后用有机后处理溶剂洗涤固体产物的步骤。
36.制备式II结晶水合物的方法 其中R1是H，且x是0-10的数字，包括将其中R1是低级烷基的式II醇溶剂化物与水反应。
37.权利要求36的方法，其中在所述过滤步骤和所述干燥步骤之后，所述固体产物包含约0.1-约1.0当量水/当量二羧酸醚一钙盐。
38.权利要求28的方法，其中所述反应步骤在约15℃-链烷醇有机溶剂的回流点的温度于标准压力下进行。
39.权利要求28的方法，其中所述反应步骤在链烷醇有机溶剂的回流点-约150℃的温度于标准压力以上的压力下进行。
40.将化合物6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-5甲基己酸一钙盐水合物晶形1转化成化合物6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐水合物晶形2的方法，所述方法包括下列步骤将晶形1暴露于水；搅拌晶形1和水；将晶形1与水加热足够长时间以转化成晶形2；干燥固体产物，以获得其中钙与二羧酸盐形式的化合物的化学计量比为1∶1的6-(5-羧基-5-甲基己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐水合物晶形2。
41.权利要求40的方法，其中还包括在所述干燥步骤之前将晶形2从水中过滤出来的步骤。
42.药物组合物，其中包含化合物6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐与一种或多种可药用稀释剂、载体或赋形剂。
43.药物组合物，其中包含结晶形式的6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐与一种或多种可药用稀释剂、载体或赋形剂。
44.药物组合物，其中包含6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐水合物晶形1与一种或多种可药用稀释剂、载体或赋形剂。
45.药物组合物，其中包含6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐水合物晶形2与一种或多种可药用稀释剂、载体或赋形剂。
46.权利要求1的化合物在治疗血管疾病中的应用。
47.权利要求1的化合物在治疗糖尿病中的应用。
48.基本上如在本说明书任何实施例中所述的权利要求1的化合物。
49.在需要治疗的患者中治疗血管疾病的方法，所述方法包括给患者施用治疗有效量的6-(5-羧基-5-甲基-己氧基)-2，2-二甲基己酸一钙盐。
50.权利要求49的方法，其中所述化合物是具有基本上包含下列特征的X-射线粉末衍射图案的晶形1# 2-θ d(A) 峰P％面积 面积％FWHM1 6.760 13.06485106 100.0 1497 100.0 0.2342 8.183 10.79531743 34.1 435 29.1 0.2003 8.560 10.32071866 36.5 543 36.3 0.2334 9.239 9.5638 234 4.629 1.9 0.0965 9.760 9.0546 972 19.0 220 14.7 0.1816 10.5698.3634 156 3.112 0.8 0.0617 11.1417.9353 178 3.529 1.9 0.1308 13.7606.4304 266 5.246 3.1 0.1389 15.5995.6761 338 6.663 4.2 0.1481016.7405.2917 433 8.564 4.3 0.1181117.4205.0866 1890 37.0 689 46.0 0.2911220.6394.3000 523 10.2 128 8.5 0.1961321.3914.1505 188 3.720 1.3 0.0851422.1394.0119 445 8.774 4.9 0.1321531.5592.8326 270 5.324 1.6 0.070
51.权利要求49的方法，其中所述化合物是具有基本上包含下列特征的X-射线粉末衍射图案的晶形2# 2-θd(A)峰 P％ 面积 面积％ FWHM1 7.259 12.1686 9283 100.02482 100.0 0.2142 8.739 10.1100 4191 45.1 603 24.3 0.1153 93860 8.9628 967 10.4 161 6.50.1334 11.659 7.5838 430 4.6 491.90.0895 13.955 6.3408 305 3.3 582.30.1516 14.220 6.2233 326 3.5 732.90.1787 15.387 5.7537 278 3.0 190.70.0538 16.461 5.3806 986 10.6 187 7.50.1529 17.361 5.1039 1490 16.1 348 14.0 0.1871018.063 4.9069 1284 13.8 323 13.0 0.2011119.302 4.5947 871 9.4 166 6.70.1521219.862 4.4664 686 7.4 142 5.70.1661320.200 4.3923 457 4.9 103 4.10.1791421.178 4.1918 656 7.1 973.90.1171521.641 4.1031 167 1.8 6 0.20.0291622.300 3.9833 794 8.6 192 7.70.1931723.218 3.8278 247 2.7 230.90.0711824.100 3.6897 183 2.0 341.30.1451925.481 3.4928 487 5.2 141 5.70.2312028.800 3.0974 134 1.4 140.60.0832129.297 3.0459 259 2.8 281.10.0842230.700 2.9099 287 3.1 200.80.05全文摘要
6－(5－羧基－5－甲基－己氧基)－2，2－二甲基己酸一钙盐的醇溶剂化物和水合物是晶体，并且具有式(I)，其中R
文档编号A61K31/194GK1395555SQ01804045
公开日2003年2月5日 申请日期2001年1月11日 优先权日2000年1月25日
发明者H·Y·安杜, D·E·巴特勒, G·J·多兹曼 申请人:沃尼尔·朗伯公司