专利名称：诱导癌细胞死亡和肿瘤消退的方法
技术领域：
本发明描述了治疗患有癌症，包括肿瘤和转移性疾病的个体的新方法。本发明特别提供了治疗癌症的方法，包括联合使用(1)法尼基蛋白转移酶(“FPT”)抑制剂和(2)其它的Ras信号传导途径抑制剂以诱导协同水平的癌细胞死亡(特别是细胞程序死亡)，由此使得能够采用低剂量治疗方案。
背景技术：
本说明书附
图1是导致细胞增殖的信号传导途径的简化的线性描述图。该途径在本文中称为“Ras信号传导途径”，因为Ras是该途径中的关键转播子，其从上游元件(例如生长因子受体)接受信号，并将它们传送到下游元件上。
现在正在研究导致细胞增殖，以及在某些情况下导致恶性转化的由生长因子受体引发的信号传导途径。许多生长因子受体例如表皮生长因子(EGF)和血小板衍生生长因子(PDGF)的受体以及与EGF受体相关的分子(例如Her-2/Neu/ErbB2)具有内在的酪氨酸激酶活性，这样的活性是通过配体诱导的受体二聚作用激活的(Heldin，1995)。这导致酪氨酸残基上的受体发生自磷酸化以及含有Src-同源性2(SH2)域的蛋白结合。两种这样的SH2蛋白是Grb2和SHC，它们间接激活与质膜结合的小的GTP-结合蛋白Ras。Ras激活也出现在应答与七种跨膜域G-蛋白偶合受体结合的受体时。(例如，Gutkind，1998)。Ras和其它生长因子受体调控的信号传导途径的激活最终导致细胞增殖、分化和转化所需的细胞骨架和基因表达发生改变(见Campbell等人，1998中的综述)。
3种人ras基因(Ha-Ras、N-Ras和Ki-Ras)编码4种蛋白(由于Ki-RasmRNA的可变剪接所致)。在正常环境下，Ras蛋白在活性(结合GTP的)状态和失活(结合GDP的)状态之间循环。Ras激活是通过用GTP交换结合的GDP来进行的，这种交换是由鸟嘌呤核苷酸交换因子家族促进的。Ras失活是通过将结合的GTP水解成GDP来进行的。该反应是由GTP酶激活蛋白(GAP)促进的(Trahey和McCormick，1987)。在许多人类癌症中，Ras蛋白由于突变而变成致癌性地激活，这些突变破坏其GTP酶活性，并因此失去调控Ras信号传导的能力(见Campbell等人，1998中的综述)。
存在多个候选的Ras效应子，它们可在信号传导和致癌转化中作用于Ras的下游，并包括小GTP酶的RHo家族的成员、磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)和丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶c-Raf-1(见Campbell等人，1998中的综述)。Raf介导的信号传导是Ras效应子途径的最佳特征。激活的Ras将Raf募集到膜上，Raf在膜上激活。激活的Raf是激酶级联—促分裂原激活蛋白激酶(MAPK)级联(见Lowy和Willumsen，1993；Campbell等人，1998中的综述)。Raf磷酸化和激活MEK1和MEK2(MAPK/ERK激酶)蛋白激酶，MEK1和MEK2蛋白激酶又磷酸化和激活细胞外信号调控激酶ERK1和ERK2(也称为MAPK1和MAPK2)。与其下游靶目标ERK1，2不同，MEK1，2蛋白是高度特异性的酶，其唯一的已知底物是ERK1，2蛋白。在激活后，ERK1和ERK2磷酸化(并因此调控)包括核转录因子在内的各种靶蛋白，导致最终的细胞应答。附图1描绘了Ras信号传导的这种线性途径。
下述发现表明了这些信号传导途径在癌细胞的异常生长中的重要性生长因子受体和Ras途径组分在癌中经常突变和/或过度表达。例如，Ras在大约30％的人癌中被突变性地激活，这些癌包括高百分比的大部分上皮癌例如肺癌、结肠癌和胰腺癌。此外，多种癌中发生了生长因子受体的过度表达(例如在约30％的人乳腺癌中发生了Her-2/Neu受体的过度表达)。这些观察已引导人们寻求和开发设计用来阻断任一信号传导途径的个体组分的活性剂。虽然这样的活性剂有可能用作新的癌症治疗剂，但是据信多种信号传导抑制剂通过阻断经由细胞周期的细胞进行而以细胞静止而不是细胞毒害方式起作用。它们与传统的癌症化疗药物的区别在于具有小小的毒性，但是也具有较弱的抗肿瘤活性。
因此，对于提供新的改善的癌症治疗方法仍然有挑战。例如，为了治疗致瘤性癌细胞，非常需要提供能显著且选择性地诱导癌细胞死亡，同时将对正常未转化细胞的可能毒性副作用降至最小的新方法。本发明刚好提供了这样的治疗方法。
发明概述本发明提供了在需要这样的治疗的患者(例如哺乳动物如人)中治疗癌症的方法，包括施用有效量的(1)法尼基蛋白转移酶(FPT)抑制剂和(2)其它的Ras信号传导途径抑制剂。本发明方法实现了意料不到的显著的诱导癌细胞死亡(特别是细胞程序死亡)的作用。这些作用是协同的、高度选择性的抗转化细胞(特别是致肿瘤性癌细胞)的作用，由此使得能够使用低剂量，以将对正常未转化细胞的可能毒性副作用降至最小。此外，令人惊奇地发现，本发明方法具有长久的、持续的阻断细胞信号传导的作用，同时也将对正常未转化细胞的可能毒性副作用降至最小。无论其大小如何，这些作用都不能从本发明之前的现有技术预测到。另外，利用本发明的令人惊奇的协同且持续、长久的作用，本发明提供了特殊的低剂量方法，这样能有效地实现癌细胞死亡，同时将对正常未转化细胞的可能毒性副作用保持在低危险性水平上。本发明方法可特别用于治疗各种致肿瘤性癌症，尤其是上皮癌(例如胰腺癌、卵巢癌、前列腺癌、肺癌、乳腺癌、结肠直肠癌和膀胱癌)和黑素瘤。
附图简述附图1Ras信号传导用图表示了RAS/MAPK信号传导途径的组分。从生长因子受体到ERK激活的线性途径是第一个所要说明的Ra s介导的途径。还显示了通过各种抑制剂，包括FPT抑制剂SCH 66336、MEK抑制剂PD098059和U0126以及非受体酪氨酸激酶抑制剂STI-571的靶向的步骤。
发明详述本发明提供了联合使用(1)法尼基蛋白转移酶(FPT)抑制剂和(2)Ras信号传导途径抑制剂来治疗癌症的新方法。(1)“法尼基蛋白转移酶抑制剂”或“FPT抑制剂”或“FTI”在本文中定义为这样的化合物(i)有效地抑制FPT(但是优选在体外不抑制香叶基香叶基蛋白转移酶I)；(ii)阻断是法尼基受体的转化H-ras形式引起的表型改变(但优选不是通过基因工程加工成香叶基香叶基受体的转化H-ras形式引起的)；(iii)阻断细胞内ras法尼基化；和(iv)阻断异常细胞生长。(2)“Ras信号传导抑制剂”在本文中定义为阻断附图1所示信号传导途径中的任何蛋白活性的物质。特别优选的Ras信号传导途径抑制剂是“MEK抑制剂”，其在本文中定义为这样的物质，其阻断MEK(MAPK/ERK激酶)蛋白(优选抑制MEK1和MEK2)的体外酶活性，并由此阻断MAPK蛋白的激活，其中阻断MAPK蛋白的激活是通过阻断MAPK蛋白的磷酸化来证实的。这可通过用于磷酸化MAPK的Western印迹法来检测，例如在Dudley等人，Proc Natl Acad Sci.927686-7689(1995)和Favata等人，J Bio Chem.27318623-32(1998)中描述的那些。1.FPT抑制剂作为单一活性剂或者与化疗联合使用的活性剂(参见例如Liu等人，1998)，FPT抑制剂代表阻断Ras癌蛋白质功能的主要途径。FPT催化异戊二烯基脂质部分加成到接近Ras蛋白的羧基末端的半胱氨酸残基上。这是翻译后加工途径的第一个步骤，是Ras膜结合与Ras诱导的致癌转化所必需的。已经报道了多种FPT抑制剂，包括各种肽模拟抑制剂以及其它小分子抑制剂，最有名的是三环类FPT抑制剂，其实例是SCH 66336。FPT抑制剂干扰Ras蛋白在细胞中的翻译后加工，并且在多种体外和体内癌模型中表现出抗肿瘤活性(Bishop等人，1995；Liu等人，1998)。SCH 66336的抗肿瘤活性包括抑制各种人肿瘤细胞系在体外的不依赖于贴壁的生长及其作为异种移植在免疫缺陷小鼠中的生长(Liu等人，1998)。人肿瘤细胞系在其对FPT抑制剂的生长影响的敏感性方面显著不同。敏感性或抗药性与Ras突变状态无关。
在几个转基因小鼠肿瘤模型(例如MMTV-H-Ras、WAP-H-Ras、TGFα和TGFα/neu)中，通过给药FPT抑制剂诱导了显著的肿瘤消退作用。这些消退作用与细胞程序死亡的增加有关(Liu等人，1998；Barrington etal.，1998；Norgaard等人，1999)。FPT抑制剂还可以在培养基中诱导转化细胞程序死亡。已经报道了对于低血清中的必需生长或悬浮液中的强制生长的细胞程序死亡作用(Hung和Chaung，1998Lebowitz等人，1997；Suzuki等人，1998)。
还已表明给予FPT抑制剂降低了Ha-Ras-转化Rat1细胞中的MAPK途径的活性(例如James等人，1994)。这降低了与细胞生长疾病有关的MAPK活性。FPT抑制剂不降低未转化Rat1细胞中的MAPK活性。
在本文中称为“SCH 66336”的一种优选的FPT抑制化合物如下 (+)-对映体2.以MEK为靶目标的活性剂已经将MAPK途径作为开发抗癌治疗剂的钯目标研究过，并且描述了该途径的特异性抑制剂对肿瘤细胞系的作用(Dudley等人，1995；Favata等人，1998)。特征确定最完整的MEK抑制剂是PD098059，它是一个小分子，对于任一种底物(ATP或ERK蛋白)以非竞争的方式通过直接结合抑制MEK1和MEK2的活性。这导致MEK1和MEK2磷酸化减少以及MEK底物ERK1和ERK2的激活降低。PD098059治疗阻断Ras转化细胞的生长因子介导的增殖和不依赖于贴壁的生长(Alessi等人，1995，J Biol Chem.270-27489-27494)。
最近报道了以高于PD098059的亲和力与MEK结合的一种新的MEK抑制剂，U0126(Favata等人，1998)。关于MEK抑制剂以及制备MEK抑制剂的方法的更详细的信息可参见例如国际专利出版物WO99/01421(1999年1月14日)和WO 99/01426(1999年1月14日)。3.以生长因子受体为靶目标的活性剂已经采用了2种主要方法来阻断生长因子受体信号传导途径(i)直接抗该受体的单克隆抗体；(ii)受体酪氨酸激酶活性抑制剂；和(iii)阻断蛋白表达的反义核酸。抗受体单克隆抗体包括以erbB2受体为靶目标的那些(例如Genentech′s HERCEPTIN/trastuzumab)和以EGF受体为靶目标的那些。特征确定最完整的抗-EGF受体抗体是嵌合抗体C225(Goldstein等人(1995)，Clin Cancer Res.11311-1318)。HERCEPTIN和C225都已在其中表达其关联受体的临床前肿瘤模型中表现出效力。
已经报道了酪氨酸激酶活性的小分子抑制剂，至少有两种这些化合物已经在人临床试验中测试过Sugen′s PDGF受体抑制剂—SU101，其正处于关于神经胶质瘤的III期临床试验以及关于其它癌症适应征的早期阶段试验中，和Pfizer′s EGF受体抑制剂—CP-358，774，其正处于早期临床试验中(Moyer等人(1997)，Cancer Res.574838-4848)。4.以非受体酪氨酸激酶为靶目标的活性剂当与法尼基转移酶抑制剂联合使用时表现出附加益处的另一类信号传导抑制剂是非受体酪氨酸激酶抑制剂。象受体酪氨酸激酶一样，非受体酪氨酸激酶位于Ras信号传导途径的上游，并导致Ras激活。与受体酪氨酸激酶不一样，非受体酪氨酸激酶不位于细胞膜上，而是位于胞浆中的可溶性蛋白。这些激酶的实例包括src和abl酪氨酸激酶。在患有慢性骨髓性白血病的几乎所有患者中，abl酪氨酸激酶都由于恶性细胞中的染色体易位导致bcr-abl融合蛋白生成而失去调控(即组成性地激活)。
最近，已经开发了抑制bcr-abl融合蛋白的激酶活性的小分子，并且目前正处于临床试验中。这类小分子的一个实例是STI571(CGP57148)—一种2-苯基氨基嘧啶衍生物(参见Buchdunger等人(1996).Cancer Research 56100-104；Druker等人(1996)NatureMedicine 2561-566；Weisberg & Griffin(2000)Blood953498-3505)。STI 571具有下述结构 最近的研究令人惊奇地表明，法尼基转移酶抑制剂SCH 66336与STI571的组合具有增强的抗bcr-abl转化细胞的活性，大于单独使用任一种活性剂所观察到的活性。5.其它信号传导拮抗剂除了上述方法以外，已经将目标定在Ras信号传导途径和其它信号传导途径的元件上来开发癌症药物。联系生长因子受体与Ras激活的SH2蛋白(SHC和Grb2)已经成为阻断SH2域与含有磷酸酪氨酸的蛋白序列结合的肽模拟物质的靶目标。
联系Ras与MEK1，2激活的蛋白激酶Raf也已经成为小分子激酶抑制剂与反义手段的靶目标。近来的手段(ISIS-5132)正处于II期临床试验(Monia等人，1996)。
其它相关细胞内信号传导目标包括磷酸脂激酶PI3K(磷脂酰肌醇-3激酶)和蛋白激酶C。
在优选的实施方案中，本发明方法可用于治疗致肿瘤癌细胞，这是因为对于癌细胞，其具有显著的致细胞死亡作用(例如通过细胞程序死亡)(即超过仅仅抑制生长的显著的致细胞死亡作用)，同时可以以较低剂量施用活性剂(和/或以较低频率)将对正常未转化细胞的可能毒性副作用降至最小。此外，本发明提供了治疗癌症的新方法，包括提供更长久的、持续更长的阻断细胞信号传导的作用，同时将对正常细胞的可能毒性副作用降至最小。
因此，本发明还提供了在癌症患者中诱导协同水平的癌细胞死亡(例如细胞程序死亡)的方法，包括并行或依次施用有效量的(1)FPT抑制剂和(2)Ras信号传导途径抑制剂(即足以诱导通过例如下述方法测定的协同水平的癌死亡的量Dengler等人，(1995)AnticancerDrugs.6522-32中描述的propidium iodide荧光测定法)。类似地，本发明提供了杀死癌症患者中癌细胞(如通过Dengler等人，1995的方法测定的)的方法，包括施用有效量的(1)FPT抑制剂和(2)Ras信号传导途径抑制剂。
此外，在优选的实施方案中，本发明方法包括在有此需要的患者(例如哺乳动物如人)中治疗肿瘤和抑制肿瘤体积(例如通过CAT扫描测定的体积)的方法，包括并行或依次施用足以实现所述目的的量的(1)FPT抑制剂和(2)Ras信号传导途径抑制剂。可治疗的肿瘤的实例包括上皮癌例如前列腺癌、肺癌(例如肺腺癌)、胰腺癌(例如胰腺癌如外分泌性胰腺癌)、乳腺癌、结肠癌(例如结肠直肠癌如结肠腺癌和结肠腺瘤)、卵巢癌、膀胱癌和肝癌。可治疗的其它癌症包括黑素瘤、骨髓性白血病(例如急性骨髓性白血病)、肉瘤、甲状腺滤泡性癌和脊髓发育不良综合征。
本发明还提供了用于治疗癌症(包括诱导癌细胞死亡和肿瘤抑制)的药物组合物，其中包含FPT抑制剂和Ras信号传导途径抑制剂，以及制备这样的组合物的方法。
除非另有说明，否则在本文中使用的下列术语具有下述含义“生长因子受体抑制剂”阻断生长因子受体信号传导性质的物质。如Levitzki和Gazit，1995(Science.2671782-1788)中所述，它们可作为受体酪氨酸激酶活性的直接抑制剂起作用，或者通过抑制配体刺激的受体激酶活性的激活来起作用。
“酪氨酸激酶抑制剂”如Levitzki和Gazit，1995所述，通过与ATP竞争或者通过与酶别构作用来阻断酪氨酸磷酸化活性的物质。
“蛋白激酶抑制剂”如Levitzki和Gazit，1995所述，阻断蛋白对丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸残基的磷酸化活性的物质。
“p185 erbB2/HER2/neu受体抑制剂”或“erbB2受体抑制剂”如Levitzki和Gazit，1995所述，通过抑制受体酪氨酸激酶活性或者阻断配体刺激受体激酶活性来阻断erbB2受体的信号传导性质的物质。
“PDGF受体酪氨酸激酶抑制剂”如Kovalenko，M.，等人(1994).Cancer Res.546106-6114中所述，通过抑制受体酪氨酸激酶活性或通过阻断PDGF刺激受体激酶活性来阻断血小板衍生生长因子(PDGF)的信号传导性质的物质。
“EGF受体酪氨酸激酶抑制剂”如Fry等人(1994)，Science91093-1095中所述，通过抑制受体酪氨酸激酶活性或通过阻断EGF刺激受体激酶活性来阻断上皮生长因子(EGF)的信号传导性质的物质。
“直接抗生长因子受体细胞外域的抗体”如Mendelsohn，J.(1992)J Nat′l Cancer Inst Monogr 13125-131中所述，这样的抗体通过抑制受体酪氨酸激酶与配体结合和/或阻止配体刺激的受体酪氨酸激酶激活来阻断生长因子受体的生物活性。
“以p185 erbB2/HER2/neu受体为靶目标的单克隆抗体”或“以erbB2受体为靶目标的单克隆抗体”如Pegram等人，1998中所述，这样的抗体通过抑制生长因子受体激酶与配体结合和/或阻止配体刺激的生长因子受体激酶激活来阻断HER2受体的生物活性；还参见Carter等人.(1992)，Proc.Nat′l Acad.Sci.894285-4289。
“以EGF受体为靶目标的单克隆抗体”如Mendelsohn，J.(1992)J Nat’l Cancer Inst Monogr 13125-131中所述，抑制EGF结合和/或EGF刺激的激酶活性的单克隆抗体。
“直接抗生长因子受体或Ras信号途径中的其它元件的反义分子”如Wang等人，1998或Resnicoff，1998所述，干扰该途径中的任何蛋白元件的信使RNA翻译(以及因此蛋白表达)的修饰的低聚核苷酸。关于反义技术的一般讨论参见例如Antisense DNA and RNA，(Cold Spring Harbor Laboratory，D.Melton，ed.，1988)。
“并行”(1)在时间上同时，或(2)在共同的治疗方案期间的不同时间；“依次”(1)施用方法的一个组分((a)FPT抑制剂或(b)其它的Ras途径抑制剂)，然后施用其它组分；施用一个组分后，第二个组分可在基本上施用第一个组分之后立即施用，或者第二个组分可在施用第一个组分之后的有效时间后施用；有效时间是对于施用第一个组分而实现的最大有益效果所给定的时间。
“下游”在本文中定义为由Ras调控的蛋白活性(在Ras信号传导途径内)，其中Ras是经由蛋白蛋白结合直接调控，或者通过Ras-调控的效应子蛋白来间接调控。因此，参见附图1，“Ras的下游元件”可以是例如Mek1，2或Erk1，2。
“上游”在本文中定义为由Ras调控的蛋白活性(在Ras信号传导途径内)，其中Ras是经由蛋白蛋白结合直接调控，或者通过调控与ras直接结合并调控Ras活性的另一蛋白来间接调控。因此，“Ras的上游元件”可以是例如erbB2、PDGF受体、IGF受体或EGF受体。
如本文所述的“细胞死亡”是如Raff，M.(1998).Nature.396119-122中所述的，在生理条件下引起的或者由于急性损伤所致的细胞的细胞器和蛋白的分解和代谢过程消失所引起的细胞死亡。细胞死亡可通过例如Dengler等人，(1995)Anticancer Drugs.6522-32中描述的propidium iodide流动细胞计数法来测定。
如本文所述的“细胞程序死亡”是如Raff，M.(1998).Nature.396119-122中所述的，表现出定型形态改变的细胞死亡形式(程序化细胞死亡)。细胞程序死亡可通过例如Dengler等人，(1995)Anticancer Drugs.6522-32中描述的propidium iodide流动细胞计数法来测定，或者通过Gorczyca，(1993)Cancer Res 531945-51中描述的原位末端脱氧核苷酸转移酶和切口移位测定(TUNEL分析)来测定。
“协同”或“协同水平”在本文中定义为由两种组分的组合所获得的大于单独使用这两种组分所实现的作用的加合(组分的量保持不变)的作用。因此，例如术语“引起协同水平的癌细胞死亡的有效量”是指两种组分的量是这样的其获得大于单独使用这两种组分所实现的作用的加合癌细胞死亡水平(例如通过Dengler等人，(1995)Anticancer Drugs.6522-32中描述的propidium iodide流动细胞计数法，或者通过Gorczyca，(1993)Cancer Res 531945-51中描述的原位末端脱氧核苷酸转移酶和切口移位测定(TUNEL分析)来测定的细胞程序死亡形式的细胞死亡)。
“持续作用”在本文中定义为，与单一治疗相比，对FPT I和MEK1，2抑制剂的联合治疗表现出的延长的/增强的细胞程序死亡反应。“持续作用”的后果可以通过测定MAPK活性或如上所述的细胞死亡或细胞程序死亡来监测。单一药物抑制MAPK途径的有效时间过程是剂量依赖性的。然而，本发明中的实验表明，MEK1，2抑制剂在治疗时或者在治疗开始后6小时能最佳地抑制MAPK途径，而SCH 66336在治疗12-18小时后表现出最佳的MAPK途径抑制作用。据表明，SCH 66336的MAPK抑制作用在治疗后持续长达72小时。因此，这两种药物的组合可在长时间内，优选在治疗开始时或临开始时至治疗后6小时的时间内，并优选在持续到治疗后36小时、更优选72小时的时间内带来对MAPK途径的“持续”抑制作用(参见例如附图6)。
术语“杀死癌细胞”是指引起转化的致肿瘤性癌细胞的癌细胞死亡。
FPT抑制剂的更详细描述可用作FPT抑制剂的化合物种类包括稠合环的三环苯并环庚二烯并吡啶类(benzocycloheptapyridine)、寡肽、肽模拟化合物、法尼基化肽模拟化合物、羰基哌嗪基化合物、羰基哌啶基化合物、法尼基衍生物和天然产物和衍生物。
是FPT抑制剂的化合物的实例以及涉及这些化合物的文件如下稠合环的三环苯并环庚二烯并吡啶类WO 95/10514；WO95/10515；WO 95/10516；WO 96/30363；WO 96/30018；WO 96/30017；WO 96/30362；WO 96/31111；WO 96/31478；WO 96/31477；WO 96/31505；WO 97/23478；国际专利申请PCT/US97/17314(WO 98/15556)；国际专利申请PCT/US97/15899(WO 98/11092)；国际专利申请PCT/US97/15900(WO 98/11096)；国际专利申请PCT/US97/15801(WO98/11106)；国际专利申请PCT/US97/15902(WO 98/11097)；国际专利申请PCT/US97/15903(WO 98/11098)；国际专利申请PCT/US97/15904；国际专利申请PCT/US97/15905(WO 98/11099)；国际专利申请PCT/US97/15906(WO 98/11100)；国际专利申请PCT/US97/15907(WO 98/11093)；国际专利申请PCT/US97/19976(WO98/11091)；第08/87704 9号U.S.申请；第08/877366号U.S.申请；第08/877399号U.S.申请；第08/877336号U.S.申请；第08/877269号U.S.申请；第08/877050号U.S.申请；第08/877052号U.S.申请；第08/877051号U.S.申请；第08/877498号U.S.申请；第08/877057号U.S.申请；第08/877739号U.S.申请；第08/877677号U.S.申请；第08/877741号U.S.申请；第08/877743号U.S.申请；第08/877457号U.S.申请；第08/877673号U.S.申请；第08/876507号U.S.申请；和第09/216,398号U.S.申请，某些FPT抑制剂是寡肽、尤其是式Cys-Xaa1-Xaa2-Xaa3所示四肽或其衍生物，其中Xaa3代表丝氨酸、蛋氨酸或谷氨酰胺残基，Xaa1和Xaa2可代表多种不同的氨基酸残基，但尤其是具有脂族侧链的氨基酸残基。其衍生物可具有或不具有3个肽键；因此已经发现，将肽键-CO-NH-还原成仲胺基，或者将肽链中的氮原子用碳原子替换(条件是一些因素例如分子的一般形状和末端分离大多保留)，获得了通常比寡肽更稳定，并且如果有活性的话具有更持久活性的化合物。这样的化合物在本文中称为肽模拟化合物。
包括式Cys-Xaa1-Xaa2-Xaa3的寡肽(主要是四肽，但是也包括五肽)EPA 461,489；EPA 520,823；EPA 528,486；和WO 95/11917。
肽模拟化合物—尤其是Cys-Xaa-Xaa-Xaa-模拟物EPA535,730；EPA 535,731；EPA 618,221；WO 94/09766；WO 94/10138；WO 94/07966；US 5,326,773；US 5,340,828；US 5,420,245；WO95/20396；US 5,439,918；和WO 95/20396。
法尼基化肽模拟化合物—尤其是法尼基化Cys-Xaa-Xaa-Xaa-模拟物GB-A 2,276,618。
其它肽模拟化合物US 5,352,705；WO 94/00419；WO 95/00497；WO 95/09000；WO 95/09001；WO95/12612；WO 95/25086；EPA 675,112；和FR-A 2,718,149。
法尼基衍生物EPA 534,546；WO 94/19357；WO 95/08546；EPA537,007；和WO 95/13059。
天然产物和衍生物WO 94/18157；US 5,430,055；GB-A2,261,373；GB-A 2,261,374；GB-A 2,261,375；US 5,420,334；US5,436,263。
其它化合物WO 94/26723；WO 95/08542；US 5,420,157；WO95/21815；WO 96/31501；WO 97/16443；WO 97/21701；U.S.5,578,629；U.S.5,627,202；WO 96/39137；WO 97/18813；WO97/27752；WO 97/27852；WO 97/27853；WO 97/27854；WO 97/36587；WO 97/36901；WO 97/36900；WO 97/36898；WO 97/36897；WO 97/36896；WO 97/36892；WO 97/36891；WO 97/36890；WO 97/36889；WO 97/36888；WO 97/36886；WO 97/36881；WO 97/36879；WO 97/36877；WO 97/36876；WO 97/36875；WO 97/36605；WO 97/36593；WO 97/36592；WO 97/36591；WO 97/36585；WO 97/36584；和WO 97/36583。
编码FPT的α-和β-单位的质粒及其测定的描述WO 94/10184。
还参考第09/217,335号U.S.申请和国际专利申请PCT/US98/26224，它们公开了联合使用FPT抑制剂和化疗剂和/或放疗来治疗增殖性疾病例如癌症的多种不同方法。
涉及FPT抑制剂化合物的所有上述文件都引入本发明。
Graham在Exp.Opin.Ther.Patents(1995)5(12)1269-1285中给出了关于多种这样的化合物的综述。
应当理解，专利说明书中化学式的宽度有可能使得不能将在标题下的所有化合物分类。例如，法尼基衍生物中的一萜烯基链可以延长，例如通过一定数目的亚甲基或甚至另一异戊二烯残基来延长。
式Cys-Xaa1-Xaa2-Xaa3四肽具有氨基末端半胱氨酸残基。这类四肽形成ras的羧基末端。这样的四肽能够与FPT结合并与ras竞争。具有类似结构，但是至少一个四肽的羰基被烃基例如亚甲基代替，并且如上所述被归为肽模拟化合物的化合物也能够与FPT结合并与ras竞争，但是通常在体内对酶降解的抗性更强。
FPT抑制剂—示例性化合物下列文件公开了用于本发明的优选的FPT抑制剂。这些文件还公开了使用其中所公开的化合物来抑制异常细胞生长(例如肿瘤)的方法。对于特定文件，其中所定义的基团和式命名仅适用于在该特定文件中描述的化合物。
出版于1995年4月20日的WO 95/10516和出版于1996年10月3日的WO 96/30363公开了式1.0化合物 或其可药用盐或溶剂化物，其中a、b、c和d当中有一个代表N或NR9，其中R9是O-、-CH3或-(CH2)nCO2H，其中n是1-3，且a、b、c和d当中其余符号代表CR1或CR2；或者每个a、b、c和d独立地选自CR1和CR2；每个R1和每个R2独立地选自H、卤素、-CF3、-OR10、-COR10、-SR10、-S(O)tR11(其中t是0、1或2)、-SCN、-N(R10)2、-NO2、-OC(O)R10、-CO2R10、-OCO2R11、-CN、-NHC(O)R10、-NHSO2R10、-CONHR10、-CONHCH2CH2OH、NR10COOR11、-SR11C(O)OR11、 -SR11N(R75)2(其中每个R75独立地选自H和-C(O)OR11)、苯并三唑-1-基氧基、四唑-5-基硫基、取代的四唑-5-基硫基、炔基、链烯基或烷基，所述烷基或链烯基可任选被卤素、-OR10或CO2R10取代；R3和R4相同或不同，并分别独立地代表H或R1和R2的任何取代基，或者R3与R4一起代表与苯环稠合的饱和或不饱和C5-C7环；每个R5、R6、R7和R8独立地代表H、-CF3、-COR10、烷基或芳基，所述烷基或芳基可任选被下列基团取代-OR10、-SR10、-S(O)tR11、-NR10COOR11、-N(R10)2、-NO2、-COR10、-OCOR10、-OCO2R11、-CO2R10或OPO3R10，或者R5、R6、R7和R8当中有一个可以与如下所定义的R40一起代表-(CH2)r-，其中r为1-4，并且-(CH2)r-可以被低级烷基、低级烷氧基、-CF3或芳基取代，或者R5与R6一起代表＝O或＝S，和/或R7与R8一起代表＝O或＝S；R10代表H、烷基、芳基或芳烷基；R11代表烷基或芳基；X代表N、CH或C，其中C可以在碳原子11之间含有由虚线代表的任选的双键；碳原子5与6之间的虚线代表任选的双键，这样当存在双键时，A和B独立地代表-R10、卤素、-OR11、-OCO2R11或-OC(O)R10，并且当在碳原子5与6之间不存在任何双键时，每个A和B独立地代表H2、-(OR11)2、(H和卤素)、两个卤素、(烷基和H)、(烷基)2、(H和OC(O)R10)、(H和-OR10)、＝O、(芳基和H)、＝NOR10或-O-(CH2)p-O-，其中p是2、3或4；R代表如下所定义的R40、R42、R44或R54；R40代表H、芳基、烷基、环烷基、链烯基、炔基或-D，其中-D代表 或 其中R3和R4如上所定义，且W代表O、S或NR10，其中R10如上所定义；所述R40代表环烷基、链烯基和炔基，所述基团可任选被1-3个选自下列的基团取代卤素、-CON(R10)2、芳基、-CO2R10、-OR12、-SR12、-N(R10)2、-N(R10)CO2R11、-COR12、-NO2或D，其中所述-D、R10和R11如上所定义，且R12代表R10、-(CH2)mOR10或-(CH2)qCO2R10，其中R10如上所定义，m是1-4，q是0-4；所述链烯基和炔基R40分别不在含有双键或三键的碳上含有-OH、-SH或-N(R10)2；或者R40代表被选自下列的基团取代的苯基-SO2NH2、-NHSO2CH3、-SO2NHCH3、-SO2CH3、-SOCH3、-SCH3和-NHSO2CF3，其中所述取代基优选位于苯环的对位；或者R40代表 或 R42代表 其中R20、R21和R46分别独立地选自(1)H；(2)-(CH2)qSC(O)CH3，其中q是1-3；(3)-(CH2)qOSO2CH3，其中q是1-3；(4)-OH；(5)-CS-(CH2)w-(取代的苯基)，其中w是1-3，并且在所述取代的苯基上的取代基与在下文(12)下面描述的关于取代的苯基的取代基相同；(6)-NH2；(7)-NHCBZ；(8)-NHC(O)OR22，其中R22是具有1-5个碳原子的烷基，或者R22代表被1-3个烷基取代的苯基；(9)烷基；(10)-(CH2)k-苯基，其中k是1-6；(11)苯基；(12)取代的苯基，其中所述取代基选自卤素、NO2、-OH、-OCH3、-NH2、-NHR22、-N(R22)2、烷基、-O(CH2)t-苯基(其中t为1-3)和-O(CH2)t-取代的苯基(其中t为1-3)；(13)萘基；(14)取代的萘基，其中取代基与在上文(12)下面描述的苯基的取代基相同；(15)具有5-10个碳原子的桥连多环烃；(16)具有5-7个碳原子的环烷基；(17)杂芳基；(18)羟基烷基；(19)取代的吡啶基或取代的吡啶基N-氧化物，其中所述取代基选自甲基吡啶基、吗啉基、咪唑基、1-哌啶基、1-(4-甲基哌嗪基)、-S(O)tR11，以及在上文(12)下面描述的苯基的任何取代基，并且所述取代基通过替代键合在所述碳上的氢来键合在环上； (23)-NHC(O)-(CH2)k-苯基或-NH(O)-(CH2)k-(取代的苯基)，其中所述k如上文(10)下面所定义；(24)哌啶环V 其中R50代表H、烷基、烷基羰基、烷氧基羰基、卤代烷基或-C(O)NH(R10)，其中R10是H或烷基；(25)-NHC(O)CH2C6H5或-NHC(O)CH2-(取代的C6H5)；(26)-NHC(O)OC6H5； (30)-OC(O)-杂芳基(例如吡啶-4-羰基氧基)；(31)-O-烷基(例如-OCH3)；(32)-CF3；(33)-CN；(34)下式所示的杂环烷基 和(35)下式所示的哌啶基， 其中R85是H、烷基或被-OH或-SCH3取代的烷基；或者R20与R21一起形成＝O，并且其余的R46如上所定义；或者R20、R21和R46当中有两个一起形成哌啶环 其中R50如上文(24)下面所定义；条件是选择R46、R20和R21，以使得它们所键合的碳原子不键合在一个以上的杂原子上；R44代表-NR25R48，其中R25代表杂芳基、N-甲基哌啶基或芳基，且R48代表H或烷基；R54代表式(i)、(ii)、(iii)或(iv)所示的N-氧化杂环基 或 其中R56、R58和R60相同或不同，并独立地选自H、卤素、-CF3、-OR10、-C(O)R10、-SR10、-S(O)eR11(其中e为1或2)、-N(R10)2、-NO2、-CO2R10、-OCO2R11、-OCOR10、烷基、芳基、链烯基和炔基，其中所示烷基可被-OR10、-SR10或-N(R10)2取代，所述链烯基可被OR11或SR11取代；或者R54表示式(ia)、(iia)、(iiia)或(iva)所示的N-氧化杂环基； 或 其中Y代表N+-O-，且E代表N；或者R54代表被一个所述N-氧化杂环基(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(ia)、(iia)、(iiia)或(iva)取代的烷基；且Z代表O或S，这样R的定义可以根据如上文所定义的R5、R6、R7或R8，或者R代表R40、R42、R44或R54。
出版于1997年7月3日的WO 97/23478(引入本发明以作参考)公开了下列化合物或其可药用盐 (-)-对映体； (+)-对映体； (+)-对映体； (-)-对映体； (-)-对映体； (+)-对映体； (-)-对映体； (+)-对映体； (-)-对映体； (-)-对映体； (+)-对映体； (-)-对映体； (+)-对映体； (+)-对映体； (-)-对映体； (+)-对映体； (-)-对映体； (+)-对映体； (+)-对映体； (-)-对映体； (+)-对映体； (-)-对映体； (+)-对映体； 和 在本发明方法中用作FPT抑制剂的优选化合物具有下式 即化合物4-[2-[4-[(8-氯-3，10-二溴-6，11-二氢-5H-苯并[5，6]环庚二烯并[1，2-b]吡啶-11-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙基]-1-哌啶甲酰胺，优选具有下述结构的其(+)-异构体 还参见U.S.专利5,719,148(公布于1998年2月17日)和5,874,442(公布于1999年2月23日)，二者引入本发明。
U.S.专利申请US SN 09/216,398(引入本发明以作参考)公开了可用于抑制FPT的下式所代表的化合物或其可药用盐或溶剂化物 其中a、b、c和d当中有一个代表N或N+O-，且a、b、c和d当中其余符号代表CR1或CR2；或者每个a、b、c和d独立地选自CR1或CR2；当任选的双键(由虚线代表)不存在时，X代表N或CH，当任选的双键存在时，X代表C；碳原子5与6之间的虚线代表任选的双键，这样当存在双键时，A和B独立地代表-R15、卤素、-OR16、-OCO2R16或-OC(O)R15，并且当在碳原子5与6之间不存在任何双键时，A和B分别独立地代表H2、-(OR16)2、H和卤素、两个卤素、烷基和H、(烷基)2、-H和-OC(O)R15、H和-OR15、＝O、芳基和H、＝NOR15或-O-(CH2)p-O-，其中p是2、3或4；每个R1和每个R2独立地选自H、卤素、-CF3、-OR15(例如-OCH3)、-COR15、-SR15(例如-SCH3和-SCH2C6H5)、-S(O)tR16(其中t是0、1或2，例如-SOCH3和-SO2CH3)、-N(R15)2、-NO2、-OC(O)R15、-CO2R15、-OCO2R16、-CN、-NR15COOR16、-SR16C(O)OR16(例如-SCH2CO2CH3)、-SR16N(R17)2，其中每个R17独立地选自H和-C(O)OR16，条件是R16不是-CH2-(例如-S(CH2)2NHC(O)O-叔丁基和-S(CH2)2NH2)，苯并三唑-1-基氧基、四唑-5-基硫基、或取代的四唑-5-基硫基(例如烷基取代的四唑-5-基硫基如1-甲基-四唑-5-基硫基)、炔基、链烯基或烷基，所述烷基或链烯基可任选被卤素、-OR15或-CO2R15取代；R3和R4相同或不同，并分别独立地代表H、或R1和R2的任何取代基，或者R3与R4一起代表与苯环(环III)稠合的饱和或不饱和C5-C7环；R5、R6和R7分别独立地代表H、-CF3、-COR15、烷基或芳基，所述烷基或芳基可任选被下列基团取代-OR15、-SR15、-S(O)tR16、-NR15COOR16、-N(R015)C、-NO2、-COR15、-OCOR15、-OCO2R16、-CO2R15、OPO3R15，或者R5与R6一起代表＝O或＝S；R8选自H、C3-C4烷基(优选支链烷基、最优选C4-C7支链烷基)、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、环烷基、环烷基烷基、取代的烷基、取代的芳基、取代的芳基烷基、取代的杂芳基、取代的杂芳基烷基、取代的环烷基、取代的环烷基烷基；R8的取代基选自烷基、芳基、芳基烷基、环烷基、-N(R18)2、-OR18、环烷基烷基、卤素、CN、-C(O)N(R18)2、-SO2N(R18)2或-CO2R18；条件是-OR18和-N(R18)2取代基不键合于与-C(O)NR18-部分的N键合的碳上；每个R18独立地选自H、烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基或环烷基；R9和R10独立地选自H、烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、环烷基或-CON(R18)2(其中R18如上所定义)；可被取代的R9和R10可任选被一个或多个(例如1-3个)选自下列的取代基取代烷基(例如甲基、乙基、异丙基等)、环烷基、芳基烷基或杂芳基烷基(即除了R9和/或R10是H时，R9和/或R10可未取代或者被1-3个上述取代基取代)；或者R9和R10与它们所键合的碳原子一起形成C3-C6环烷基环；R11和R12独立地选自H、烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、环烷基、-CON(R18)2-OR18或-N(R18)2；其中R18如上所定义；条件是-OR18和-N(R18)2不键合在与氮原子相邻的碳原子上；并且其中所述可取代的R11和R12可任选被一个或多个(例如1-3个)选自下列的取代基取代烷基(例如甲基、乙基、异丙基等)、环烷基、芳基烷基或杂芳基烷基；或者R11和R12与它们所键合的碳原子一起形成C3-C6环烷基环；R13是选自下列的咪唑基环 其中R19选自(1)H、(2)烷基、(3)烷基、(4)芳基、(5)芳基烷基、(6)取代的芳基烷基，其中所述取代基选自卤素(例如F和Cl)或CN，(7)-C(芳基)3(例如-C(苯基)3，即三苯甲基)或(8)环烷基；所述咪唑基环2.0或2.1可任选被一个或两个取代基取代，并且所述咪唑环4.0可任选被1-3个取代基取代，所述咪唑环4.1可任选被一个取代基取代，其中所述环2.0、2.1、4.0和4.1的任选的取代基键合在所述咪唑环的碳原子上，并独立地选自-NHC(O)R18、-C(R34)2OR35、-OR18、-SR18、F、Cl、Br、烷基、芳基、芳基烷基、环烷基或-N(R18)2；R18如上所定义；每个R34独立地选自H或烷基(优选-CH3)，优选H；R35选自H、-C(O)OR20或-C(O)NHR20，且R20如上所定义(R20优选为烷基或环烷基，最优选为环戊基或环己基)；Q代表芳基环(例如苯基)、环烷基环(例如环戊基或环己基)或杂芳基环(例如呋喃基、吡咯基、噻吩基、噁唑基或噻唑基)；(-C(R34)2OR35的实例包括-CH2OH、-CH2OC(O)OR20和-CH2OC(O)NHR20)；R14选自 或 R15选自H、烷基、芳基或芳基烷基；R16选自烷基或芳基；R20选自H、烷基、烷氧基、芳基、芳基烷基、环烷基、杂芳基、杂芳基烷基或杂环烷基，条件是当R14是基团5.O或8.0时，R20不是H；当R20不是H时，所述R20可任选被一个或多个(例如1-3个)选自下列的取代基取代卤素、烷基、芳基、-OR18或-N(R18)2，其中每个R18相同或不同，并且其中R18如上所定义，条件是所述任选的取代基不键合在与氧原子或氮原子相邻的碳原子上；R21选自H、烷基、芳基、芳基烷基、环烷基、杂芳基、杂芳基烷基或杂环烷基；当R21不是H时，所述R21可任选被一个或多个(例如1-3个)选自下列的取代基取代卤素、烷基、芳基、-OR18或-N(R18)2，其中每个R18相同或不同，并且其中R18如上所定义，条件是所述任选的取代基不键合在与氧原子或氮原子相邻的碳原子上；n是0-5；对于每个n(即对于每个-C(R32)(R32)-基团)，每个R32和R33独立地选自H、烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、环烷基、-CON(R18)2、-OR18或-N(R18)2；其中R18如上所定义；并且其中所述可取代的R32和R33可任选被一个或多个(例如1-3个)选自下列的取代基取代烷基(例如甲基、乙基、异丙基等)、环烷基、芳基烷基或杂芳基烷基；或者R32和R33与它们所键合的碳原子一起形成C3-C6环烷基环；且R36选自环烷基、杂环烷基或芳基(例如苯基)；且条件是(1)当R14选自基团6.0、7.0、7.1或8.0，且X是N时，则R8选自C3-C10烷基、取代的C3-C10烷基、芳基烷基、取代的芳基烷基、杂芳基烷基、取代的杂芳基烷基、环烷基烷基或取代的环烷基烷基；(2)当R14选自基团6.0、7.0、7.1或8.0，X是N，且R8是H时，则R13(即咪唑环2.0、4.0或4.1)与酰胺部分(即-C(O)NR13基团)之间的烷基链被取代，即(a)R9、R10、R11、R12、R32或R33当中至少有一个不是H，和/或(b)R9与R10、和/或R11与R12一起形成环烷基环；(3)当R14是基团5.0，X是N，且R8是H时，则R13(即咪唑环2.0、4.0或4.1)与酰胺部分(即-C(O)NR18基团)之间的烷基链被取代，即(a)R9、R10、R11、R12、R32或R33当中至少有一个不是H，和/或(b)R9与R10、和/或R11与R12一起形成环烷基环。
优选的FPT抑制剂包括上述文件(已引入本发明以作参考)中公开的肽和肽模拟化合物以及稠合环三环化合物。更优选的是稠合环三环化合物，最优选的是WO 97/23478中公开的化合物。
在本发明中用作FPT抑制剂的化合物的FPT抑制和抗肿瘤活性可通过本领域已知的方法测定，参见例如在出版于1995年4月20日的WO 95/10516中描述的体外酶测定、基于细胞的测定、细胞基质(Mat)测定和体内抗肿瘤实验，和在出版于1997年7月3日的WO 97/23478中描述的软琼脂测定。使用作为本发明治疗中的另外的治疗剂的化疗和/或放疗可任选向本发明的治疗方案中加入化疗剂和/或放疗(除了(1)法尼基蛋白转移酶(FPT)抑制剂和(2)其它的Ras信号传导途径抑制剂的组合以外)。关于化疗和/或放疗与仅仅FPT抑制剂的联合使用，可参见Liu，M.，等人.Cancer Res.584947-4956(1998)和U.S.专利申请09/217,335(引入本发明以作参考)。
可用作化疗剂的化合物的种类包括烷化剂、抗代谢物、天然产物及其衍生物、激素和甾族化合物(包括合成类似物)和合成的化疗剂。下面给出这些种类内的化合物的实例。
烷化剂(包括氮芥类、乙烯亚胺衍生物、磺酸烷基酯类、硝基脲类和三氮烯类)尿嘧啶氮芥、氮芥，环磷酰胺(Cytoxan)、异环磷酰胺、美法仑、苯丁酸氮芥、哌泊溴烷、三亚乙基蜜胺、三亚乙基硫代磷酰胺、白消安、卡氮芥、罗氮芥、链脲霉素、达卡巴嗪和替莫唑胺。
抗代谢物(包括叶酸拮抗剂、嘧啶类似物、嘌呤类似物和腺苷脱氨基酶抑制剂)甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶、氟尿苷、阿糖孢苷、6-巯基嘌呤、6-硫代鸟嘌呤、磷酸氟达拉滨、喷司他丁和吉西他滨。
天然产物及其衍生物(包括长春花属生物碱、抗肿瘤性抗生素、酶、淋巴因子和表鬼臼毒素)长春花碱、长春新碱、长春地辛、博莱霉素、更生霉素、柔红霉素、阿霉素、表阿霉素、依达比星、紫杉醇(紫杉醇作为Taxol市售)、光辉霉素、去氧助间型霉素、丝裂霉素-C、L-天冬酰胺酶、干扰素(尤其是IFN-α)、依托泊苷和替尼泊苷。
激素和甾族化合物(包括合成类似物)17α-乙炔雌二醇、己烯雌酚、睾酮、强的松、氟甲睾酮、丙酸甲雄烷酮、睾内酯、醋酸甲地孕酮、他莫昔芬、甲泼尼龙、甲睾酮、强的松龙、去炎松、三对甲氧苯基氯乙烯、羟孕酮、氨鲁米特、雌莫司汀、醋酸甲羟孕酮、亮丙瑞林、氟他胺、托米芬、醋酸性瑞林。
合成的化疗剂(包括无机络合物例如铂配位络合物)顺铂、卡铂、羟基脲、安吖啶、丙卡巴肼、米托坦、米托蒽醌、左旋咪唑和六甲蜜胺。
安全且有效地施用大部分这些化疗剂的方法是本领域技术人员已知的。此外，标准文献中描述了其给药。例如，多种化疗剂的给药描述在“Physicians′Desk Reference”(PDR)，例如1996版(MedicalEconomics Company，Montvale，NJ 07645-1742，USA)；该文献的公开内容引入本发明以作参考。
药物组合物用于制备本文所述的FPT抑制剂和Ras信号传导途径抑制剂的药物组合物的可药用载体可以是固体或液体。固体制剂包括粉剂、片剂、分散粒剂、胶囊、扁囊剂和栓剂。粉剂和片剂可包含约5-约70％的活性组分。合适的固体载体是本领域已知的，例如碳酸镁、硬脂酸镁、滑石粉、糖和/或乳糖。片剂、粉剂、扁囊剂和胶囊可作为适于口服给药的固体剂型使用。
为了制备栓剂，首先将低熔点蜡例如脂肪酸甘油酯混合物或椰子油熔化，通过搅拌将活性组分均匀地分散在其中。然后将该熔化的均匀混合物倒入具有适宜大小的模子中，让其冷却，并因此固化。
液体制剂包括溶液、悬浮液和乳剂。可提及的实例有非胃肠道注射用的水或水-丙二醇溶液。液体制剂还包括用于鼻内给药的溶液。
适于吸入的气雾剂可包括溶液和粉末形式的固体，其可以与可药用载体例如惰性压缩气体联合使用。
还包括在临使用前转化成口服或非胃肠道给药用液体制剂的固体制剂。这样的液体形式包括溶液、悬浮液和乳剂。
本文所述的FPT抑制剂和Ras途径抑制剂还可以透皮给药。透皮给药组合物可呈霜剂、洗剂、气雾剂和/或乳剂的形式，并且可包含在用于此目的的本领域常规基质或贮药库型透皮贴剂内。
这些化合物优选口服给药。
药物制剂优选呈单位剂型的形式。对于这样的形式，制剂被细分成含有适当量的活性组分，例如实现预期目的的有效量的活性组分的单位剂量。
依据具体应用，活性化合物在单位剂量的制剂中的量可以在约0.5mg至1000mg、优选约1mg至300mg、更优选5mg至200mg之间改变或调节。
所用的实际剂量可根据患者的需求和所治疗病症的严重程度而变。特定情境下适当剂量的确定在本领域技术人员的能力范围内。一般情况下，用低于化合物的最佳剂量的较小剂量开始治疗。之后以小的增加量提高剂量直至在这些情境下达到最佳效果。方便起见。可将总的日剂量分成几份，然后在一天的期间内按照需要分批施用。
可依据临床医师(医生)考虑到诸如患者年龄、身体状况和体重以及所治疗疾病严重程度这样的因素而作的判断，来调节FPT抑制剂和Ras途径抑制剂的给药量和频率。一般情况下，当FPT抑制剂是稠合环三环苯并环庚二烯并吡啶时，FPT抑制剂(当用作单一治疗剂时)的剂量可具有2000mg/天的上限范围，优选为50-400mg/天。然而，在本发明联合治疗中，FPT抑制剂的优选的低剂量方案是例如以1.4-400mg/天、更优选1.4-350mg/天、甚至更优选3.5-70mg/天的剂量口服给药，优选采用B.I.D.给药方案。特别低的剂量范围可以是1.4-70mg/天。
其它的Ras途径抑制剂可依据本领域众所周知的治疗方案给药。参见例如Pegram，M.D.，等人.(1998).J Clin Oncol.162659-2671。对于本领域技术人员显而易见的是，Ras途径抑制剂的给药可依据所治疗的疾病和Ras途径抑制剂对该疾病的已知作用来改变。而且，依据医师的知识，可根据所观察到的施用的治疗剂(即Ras途径抑制剂)对患者的作用，以及所观察到的疾病对施用的治疗剂的反应来改变治疗方案(例如剂量和给药时间)。Ras途径抑制剂(当用作单一治疗剂时)的剂量一般可以为5-2000mg/天。然而，在本发明的联合治疗中，其它的Ras途径抑制剂(例如MEK抑制剂)的优选的低剂量方案是以1-350mg/天、更优选3.5-70mg/天的剂量给药，优选采用B.I.D.给药方案。特别低的剂量范围可以是1-70mg/天。
因此，在治疗癌症(例如胰腺癌、肺癌或膀胱癌)的联合治疗的优选实例中，FPT抑制剂可以是如上文所述的SCH66336，其在连续给药方案中以70mg/天的剂量口服施用，每天分两次施用；其它的Ras信号传导途径抑制剂可以是PD098059(或其类似物)，其在连续给药方案中以350mg/天的剂量施用，每天分两次施用。
在治疗癌症(例如胰腺癌、肺癌或膀胱癌)的联合治疗的另一优选实例中，FPT抑制剂是如上文所述的SCH 66336，其在连续给药方案中以70mg/天的剂量口服施用，每天分两次施用；其它的Ras信号传导途径抑制剂可以是U0126(或其类似物)，其在连续给药方案中以350mg/天的剂量施用，每天分两次施用。
在本发明方法中，将FPT抑制剂与其它的Ras途径抑制剂并行或依次给药。因此，例如Ras途径抑制剂与FPT抑制剂不用必须同时或基本上同时给药。同时或基本上同时给药的优点是医生众所周知的。
而且，一般情况下，FPT抑制剂与其它的Ras途径抑制剂不用必须在同一药物组合物中给药，并且由于具有的物理和化学特征，它们有可能必须通过不同途径施用。例如FPT抑制剂可以口服给药以产生并维持其良好的血液水平，而Ras途径抑制剂可静脉内给药。给药方式和给药适当性(如果可能的话在同一药物组合物中)的确定在医师的能力范围内。最初的给药可依据本领域已知的确认的方案来进行，然后医师可根据所观察到效果来改变剂量、给药方式和给药时间。
FPT抑制剂和其它的Ras途径抑制剂的特定选择将取决于临床医师的诊断及其对患者病症的判断和合适的治疗方案。
FPT抑制剂和其它的Ras途径抑制剂可并行(例如同时、基本上同时或在同一治疗方案内)或依次给药，这取决于增殖性疾病的性质、患者的状况以及与FPT抑制剂联合施用(即在一个治疗方案内)的Ras途径抑制剂的实际选择。
如果FPT抑制剂和其它的Ras途径抑制剂不是同时或基本上同时给药，则FPT抑制剂与其它的Ras途径抑制剂的初始给药顺序可能不重要。因此，可首先施用FPT抑制剂，然后施用其它的Ras途径抑制剂；或者可首先施用其它的Ras途径抑制剂，然后施用FPT抑制剂。这种交替给药可在一个治疗方案期间反复进行。在评价了所治疗的疾病和患者的状况之后，医师可以确定给药顺序以及治疗方案期间每种治疗剂的重复给药次数。例如，可首先施用其它的Ras途径抑制剂，然后继续通过施用FPT抑制剂来进行治疗，然后，如果经确定是有利的话，施用其它的Ras途径抑制剂，如此这样直至治疗方案完成。
因此，依据其经验和知识，随着治疗的进行，医师可根据个体患者的需要调节治疗组分(治疗剂--即FPT抑制剂、其它的Ras途径抑制剂)的每一给药方案。
在判断于给药剂量下治疗是否有效的过程中，临床医师将考虑患者的一般健康状况以及更明确的征状例如疾病相关症状的减轻、肿瘤生长的抑制、肿瘤的急性收缩或转移抑制。肿瘤的大小可通过标准方法例如放射实验如CAT或MRI扫描来测定，并且可使用连续测定来判断肿瘤生长是否已经被延迟或甚至是逆转。疾病相关症状例如疼痛的减轻和整个病症的改善也可用于帮助判断治疗的有效性(当然，如上所述，使用本发明方法的有效治疗优选导致协同水平的癌细胞死亡和/或肿瘤消退)。
下面是FPT抑制化合物的胶囊制剂(实施例1-4)的实施例 (+)-对映体实施例1和2胶囊制剂实施例1实施例2％组成mg/胶囊mg/胶囊组成固溶液 100 400.0 84.2二氧化硅NF(1)0.625 2.50.5硬脂酸镁NF(2)0.125 0.50.1交联羧甲基纤维素钠NF 11.000 44.0 9.3Pluronic F68 NF 6.250 25.0 5.3二氧化硅NF(3)0.625 2.50.5硬脂酸镁NF(4)0.125 0.50.1总共 118.750 475.00胶囊型号 No.4No.0方法(实施例1知2)制备固溶液％组成g/批组成FPT抑制化合物 80 33.3聚维酮NF K29/32 160 66.6二氯甲烷 5000mL 蒸发将晶状FPT抑制化合物与聚维酮溶解在二氯甲烷中。使用合适的溶剂喷雾干燥器将该溶液干燥。然后通过研磨将残余物加工成细颗粒。将粉末过30目筛。X-射线分析表明了所得粉末是非晶形的。
将该固溶液、二氧化硅(1)和硬脂酸镁(2)在合适的混合器中混合10分钟。使用合适的滚柱式压缩机将该混合物压缩，并用与30目筛网适合的研磨机研磨。将交联羧甲基纤维素钠、Pluronic F68和二氧化硅(3)加到该研磨的混合物中，并再混合10分钟。用硬脂酸镁(4)和相等份数的该混合物制备预混合物。将该预混合物加到上述混合物的剩余部分中，并混合5分钟，将混合物装到硬壳明胶胶囊的壳中。
实施例3和4胶囊制剂实施例3实施例4％组成mg/胶囊mg/胶囊组成固溶液 400 200.0 80.0二氧化硅NF(1)3.75 1.875 0.75硬脂酸镁NF(2)0.1250.625 0.25交联羧甲基纤维素钠NF 40.0020.00 8.0Pluronic F68 NF50.0025.00 10二氧化硅NF(3)3.75 1.875 0.75硬脂酸镁NF(4)1.25 0.625 0.25总共 500.00 250.00胶囊型号 No.0 No.2方法(实施例3和4)制备固溶液％组成g/批组成FPT抑制化合物 1550聚维酮NF K29/32 1550二氯甲烷140mL 蒸发甲醇60mL 蒸发将晶状FPT抑制化合物与聚维酮溶解在二氯甲烷与甲醇的混合物中。使用合适的溶剂喷雾干燥器将该溶液干燥。然后通过研磨将残余物加工成细颗粒。将粉末过30目筛。X-射线分析表明了所得粉末是非晶形的。
将该固溶液、二氧化硅(1)和硬脂酸镁(2)在合适的混合器中混合10分钟。使用合适的滚柱式压缩机将该混合物压缩，并用与30目筛网适合的研磨机研磨。将交联羧甲基纤维素钠、Pluronic F68和二氧化硅(3)加到该研磨的混合物中，并再混合10分钟。用硬脂酸镁(4)和相等份数的该混合物制备预混合物。将该预混合物加到上述混合物的剩余部分中，并混合5分钟，将混合物装到硬壳明胶胶囊的壳中。
根据配制制剂的信息还可以参见第08/997168和60/068387号(于1997年12月22日)美国专利申请，二者引入本发明以作参考。
本发明在其药物组合物方面的范围不受所提供的实施例的限制。
本文所引用的所有文件(例如出版物和专利申请)都引入本发明以作参考，引入的程度就像每个文件是特定且单独地引入。
虽然已经结合上文提供的具体实施方案描述了本发明，但是其许多替代形式、改变和变型对于本领域技术人员来说是显而易见的。所有这样的替代形式、改变和变型都在本发明实质和范围内。
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权利要求
1.治疗需要此治疗的患者癌症的方法，所述治疗包括施用(1)FPT抑制剂和(2)酪氨酸激酶抑制剂。
2.权利要求1的方法，其中所述FPT抑制剂是稠合环三环苯并环庚二烯并吡啶化合物。
3.权利要求1的方法，其中所述酪氨酸激酶抑制剂是2-苯基氨基嘧啶衍生物。
4.权利要求1的方法，其中所述FPT抑制剂是以1.4-400mg/天的剂量给药。
5.权利要求4的方法，其中所述FPT抑制剂是以3.5-70mg/天的剂量给药。
6.权利要求5的方法，其中所述酪氨酸激酶抑制剂是以3.5-70mg/天的剂量给药。
7.权利要求6的方法，其中所述FPT抑制剂与酪氨酸激酶抑制剂是同时给药。
8.权利要求7的方法，其中所述FPT抑制剂与酪氨酸激酶抑制剂是依次给药。
9.权利要求1的方法，其中所述癌症是肺癌、胰腺癌、结肠癌、卵巢癌、肝癌、骨髓性白血病、黑素瘤、甲状腺滤泡性癌、膀胱癌、神经胶质瘤、脊髓发育不良综合征、乳腺癌或前列腺癌。
10.权利要求1的方法，其中还包括施用化疗剂。
11.权利要求10的方法，其中所述化疗剂选自尿嘧啶氮芥、氮芥、环磷酰胺、异环磷酰胺、美法仑、苯丁酸氮芥、哌泊溴烷、三亚乙基蜜胺、三亚乙基硫代磷酰胺、白消安、卡氮芥、罗氮芥、5-氟尿嘧啶、氟尿苷、阿糖孢苷、6-巯基嘌呤、6-硫代鸟嘌呤、磷酸氟达拉滨、喷司他丁、吉西他滨、长春花碱、长春新碱、长春地辛、博莱霉素、更生霉素、柔红霉素、阿霉素、表阿霉素、依达比星、紫杉醇、光辉霉素、去氧助间型霉素、丝裂霉素-C、L-天冬酰胺酶、干扰素、依托泊苷、替尼泊苷、17α-乙炔雌二醇、己烯雌酚、睾酮、强的松、氟甲睾酮、丙酸甲雄烷酮、睾内酯、醋酸甲地孕酮、他莫昔芬、甲泼尼龙、甲睾酮、强的松龙、去炎松、三对甲氧苯基氯乙烯、羟孕酮、氨鲁米特、雌莫司汀、醋酸甲羟孕酮、亮丙瑞林、氟他胺、托米芬、性瑞林、顺铂、卡铂、羟基脲、安吖啶、丙卡巴肼、米托坦、米托蒽醌、左旋咪唑Navelbene、CPT-11、Anastrozole、来曲唑、Capecitabine、Reloxafine、Droloxafine、替莫唑胺或六甲蜜胺。
12.权利要求1的方法，其中还包括施用放射疗法。
13.治疗需要此治疗的患者癌症的方法，所述治疗包括并行或依次施用有效量的(1)FPT抑制剂 (+)-对映体和(2)酪氨酸激酶抑制剂
全文摘要
本发明描述了治疗癌症的方法，包括联合施用(1)法尼基蛋白转移酶抑制剂和(2)Ras信号传导途径抑制剂以诱导癌细胞死亡和肿瘤消退。
文档编号A61K31/505GK1479630SQ01820103
公开日2004年3月3日 申请日期2001年10月5日 优先权日2000年10月5日
发明者乔治Q·戴利, 乔治Q 戴利 申请人:乔治Q·戴利, 乔治Q 戴利