专利名称：提高机体免疫功能药物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种可提高机体免疫功能药物，特别是一种以中草药及其提取物为原料制备的中药组合物，本发明还涉及该药物的制备方法。
背景技术：
本发明药物根据《治症准绳》和《古今录验方》中的枸杞丸，加减而成。同时，亦参照了《太平圣惠方》中枸杞粥。
无花果《纲目》“甘、平，无毒”归经“手足太阴，手阳明经”《随息居食谱》曰“健胃、清热、润肠”等功能。有补益中气，养血安神，缓和药性，久服延年益寿之功。枸杞子，其性平味甘，入肝肾经，有滋肝补肾，益经养血，有延年益寿之功。甘草《本径》曰性“味甘，平”；《别录》“无毒”《珍珠》“生甘，平，炙甘，温”，具有和中缓急，润肺，解毒，调和诸药的功效。甘草于无花果、枸杞子配伍可以提高疗效，降低毒性。大豆提取物含有大豆异黄酮类物质，是天然的植物雌激素，此外具有抗氧化、抗癌、改善血液流体动力学、降低血脂、防止骨质疏松等明显的保健作用，并且无毒物副作用。
发明内容
本发明药物是由下列组分为原料制成的(用量为重量份)无花果40-60，枸杞子20-30，甘草25，大豆提取物3，淀粉10，甜味剂1-3制备本发明药物的原料优选重量(份)配比是无花果50，枸杞子25，甘草25，大豆提取物3，淀粉10，甜味剂2所述大豆提取物是将大豆用水煮沸、离心过滤后，经吸附树脂洗脱，然后喷雾干燥而得到的；
所述甜味剂是蔗糖、葡萄糖、果糖、阿斯巴甜(Aspartame)低聚糖、木糖醇。
本发明药物中，无花果为君药，枸杞子为臣药，甘草为佐药，大豆提取物作为使药。
本发明所述药物的剂型是冲剂、颗粒剂、粉剂、片剂或胶囊。
将上述各组分制成本发明药物的制备方法是1、无花果、枸杞子、甘草有效成分提取取无花果、枸杞子、甘草，加8倍药量的水煮沸，2小时后倾出上清液，反复3次；将上述煎煮液离心过滤。滤液减压浓缩，加入95％乙醇至醇的浓度为50％，滤除上清液，沉淀用水溶解，再加入95％食用乙醇至醇的浓度为50％，沉淀经喷雾干燥得到有效成分；2、大豆提取物的制备将大豆加8倍药量的水煮沸，1小时后倾出上清液，反复3次。将上述煎煮液离心过滤；滤液减压浓缩，然后加在吸附树脂上，用10％的乙醇洗脱，经喷雾干燥得到大豆提取物；3、制粒将淀粉、甜味剂与上述二提取物混合、制粒，得到本发明药物。
本发明药物可用下述两种方法进行定性分析，方法是1、硫酸——苯酚反应取本发明药物0.1g，用少量蒸馏水溶解，置试管中，加入10％的硫酸——乙醇液。水浴100℃10分钟，显红棕色。
2、三氯化铁反应称三氯化铁0.1g，用30％的乙醇定容于50ml，将本发明药物0.1g用少量蒸馏水溶解，用毛细管点在滤纸上，喷洒三氯化铁试剂，加热，显蓝黑色斑点。
对本发明药物进行了下述药理、药效学实验，1、抗体生成细胞(PFC)检测 当小鼠口服剂量1.5g/日/kg时，与对照相比较有显著性差异(p＜0.05)，当小鼠剂量3g/日/kg时与对照相比较有非常显著性差异(p＜0.01)。
2、血清溶血素的测定 当小鼠口服剂量3g/日/kg时，与对照相比较有显著性差异(p＜0.05)，当小鼠剂量10g/日/kg时与对照相比较有非常显著性差异(p＜0.01)。
3、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验 当小鼠剂量3g/日/kg时，与对照相比较有显著性差异(p＜0.05)，当小鼠口服剂量10g/日/kg时与对照相比较有非常显著性差异(p＜0.01)。
4、小鼠碳廓清实验 经口给予小鼠不同剂量的受试物4周后，与对照组比较，当计量10g/日/kg时，小鼠吞噬指数( )提高19％(p＜0.01)。
5、大鼠高血脂试验 经口服给药3g/日/kg，4周后，与高血脂动物组比较血小板凝集率、6-酮-PGF1α和TXB2均有明显下降有显著性差异(p＜0.05)或非常显著性差异(p＜0.01)。
上述结果表明本发明药物具有明显提高机体免疫功能并且可改善血液中血小板、6-酮-PGF1和TXB2功能及改善红细胞指数作用。
具体实施例方式
实施例1药物(冲剂)的制备取无花果500g、枸杞子250g、甘草250g，加8倍药量的水煮沸3次，每次2小时。煎煮液用栏式离心机离心滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度d＝1.18，加入95％食用乙醇至醇的浓度为50％，滤除上清液，沉淀用水溶解，再加入95％食用乙醇至醇的浓度为50％，沉淀经喷雾干燥得到有效部位。
另取大豆1000g，加8倍药量的水煮沸3次，每次1小时。煎煮液用栏式离心机离心滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度d＝1.16，上大孔吸附树脂(型号AB-8，柱床φ10cm×50cm)用10％的乙醇洗脱，经喷雾干燥得到大豆提取物。
取药用淀粉，药用蔗糖，与上述二提取物混合，干法制粒，得到药物冲剂100袋×3克/袋。
实施例2药理、药效学实验一、实验方法及条件1.剂量 小鼠效剂量分为三个剂量组。低1.5g/日/kg体重、中3.0g/日/kg体重、高10.0g/日/kg采取灌胃法，每日灌胃一次，对照组灌蒸馏水。各组小鼠连续给予受试物4周后，测定各项指标。
2.仪器与试剂752分光光度计，AE100电子天平，电热三用水箱，隔水式恒温培养箱，螺旋测微器，KA-1000型台式离心机，80-2型台式离心机，玻片架，二氧化碳培养箱，超净工作台，24孔增养板，显微镜，实验数据用微软公司Excel软件进行方差分析统计。
二、实验项目与结果1.抗体生成细胞(PFC)检测腹腔注射0.2mL2％(V/V)SRBC免疫每只小鼠。5d后，取小鼠脾脏制成细胞浓度为5×106个/ml的脾细胞液。溶解琼脂糖制成1％的溶液，于48.0℃水浴保温，与等量2倍浓度的Hank’s液混合，分装至小试管中。每管0.50mL，加入0.050mL 10％SRBC和0.010mL脾细胞悬液，迅速混匀，倾倒在玻片上。于37.0℃恒温箱中温育1h，将补全体加在玻片槽中，再温育1.5h。计数空斑。
结果见表1。
表1 本发明药物对正常小鼠PFC的影响(X±SD)单位log10空斑数
*与对照相比较有显著性差异(p＜0.05)**与对照相比较有非常显著性差异(p＜0.01)2.血清溶血素的测定腹腔注射0.2mL2％(V/V)SRBC免疫每只小鼠。5d后，摘眼球取血于离心管内，放置1h，2000r/min离心10min，收集血清。小鼠血清用SA液稀释400倍，依次加入稀释的小鼠血清1.00mL、10％(v/v)的SRBC0.50mL、补体(用SA液1∶10稀释)1.00mL。另设不加血清的对照管(SA液代替)。置37.0℃水浴20min后冰水浴终止反应。2000r/min离心10min。取上清液1.00mL，都试剂3.00mL于试管内，同时取10％(v/v)的SRBC0.25ml加都试剂4.00mL作为半数溶血管。放置10min后，540nm波长处测定光密度值。试验结果以半数溶血值(HC50)表示。结果见表2
表2 本发明药物对正常小鼠血清溶血素的影响(X±SD)
*与对照相比较有显著性差异(p＜0.05)**与对照相比较有非常显著性差异(p＜0.01)3.小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验小鼠腹腔注射20％鸡红细胞悬液1.0mL，间隔30min，劲椎脱臼处死动物，剪开腹壁皮肤，腹腔注入Hank’s液2.0ml。按揉腹腔，吸出腹腔洗液1.0mL，分别滴于2张载玻片上，37.0℃恒温箱中温育30min然后经1∶1丙酮甲醇溶液固定，4％(v/v)Giesma-磷酸缓冲液染色，再用蒸馏水漂洗晾干。油镜下计数巨噬细胞，每张片计数100个。以吞噬百分率和吞噬指数表示小鼠巨噬细胞的吞噬能力。
结果见表3。
表3 本发明药物对正常小鼠的巨噬细胞吞噬率的影响
*与对照组比较有显著性差异(p＜0.05)**与对照组比较有非常显著性差异(p＜0.01)4.小鼠碳廓清实验对每只小鼠尾静脉注射稀释4倍的印度墨汁，0.1mL/10g体重。待墨汁注入后立即记时。分别于注入墨汁后1、10min取血0.020mL加至2.00mL碳酸钠溶液中，600nm波长处测定光密度值，以碳酸钠溶液作对照。另取肝脏和脾脏称重。以吞噬指数( )来表示巨噬细胞吞噬功能。结果见表4。
表4本发明药物对正常小鼠的碳廓清的影响(X±SD)
**与对照组比较有显著性差异(p＜0.01)
5.大鼠血小板凝聚试验大鼠分为三组。I组正常基础饲料，II组高脂肪饲料(正常饲料+5％猪油+1.5％胆固醇)，III组高脂肪饲料+“本发明药物”冲剂，3g/日/kg，4周。采用ADP诱导比浊法，测定各组大鼠血小板凝聚率，ADP诱导浓度为4μM。血浆中6-酮-PGF1α和TXB2水平的测定在试验进行4周时取血，用放免分析方法测定。
结果见表5。
表5本发明药物对大鼠血小板凝聚的影响
**与I组比较有显著性差异(p＜0.01)##与II组比较有显著性差异(p＜0.01)三、结论上述药理研究表明1、本发明药物剂量1.5g/日/kg时，能够显著提高小鼠抗体生成细胞(PFC)数，与对照相比较有显著性差异(p＜0.05)，当小鼠剂量3g/日/kg时与对照相比较有非常显著性差异(p＜0.01)；2、本发明药物能够提高小鼠血清溶血素的百分数，当小鼠口服剂量3g/日/kg时，与对照相比较有显著性差异(p＜0.05)，当小鼠剂量10g/日/kg时与对照相比较有非常显著性差异(p＜0.01)；3、本发明药物能够提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力，当小鼠剂量3g/日/kg时，与对照相比较有显著性差异(p＜0.05)，当小鼠口服剂量10g/日/kg时与对照相比较有非常显著性差异(p＜0.01)；4、本发明药物能够提高小鼠吞噬指数( )，当计量10g/日/kg时，小鼠吞噬指数( )提高1 9％(p＜0.01)；本发明药物经大鼠口服给药3g/日/kg，4周后，与高血脂动物组比较血小板凝集率、6-酮-PGF1和TXB均有明显下降，且有非常显著性差异(p＜0.01)。
权利要求
1.一种提高机体免疫功能药物，其特征在于它是由下述重量配比的原料制成无花果40-60，枸杞子20-30，甘草25，大豆提取物3，淀粉10，甜味剂1-3。
2.根据权利要求1所述的药物，其原料优选重量(份)配比是无花果50，枸杞子25，甘草25，大豆提取物3，淀粉10，甜味剂2。
3.根据权利要求1所述的药物，所述大豆提取物是将大豆用水煮沸、离心过滤后，经吸附树脂洗脱，然后喷雾干燥而得到的。
4.根据权利要求1所述的药物，所述甜味剂是蔗糖、葡萄糖、果糖、阿斯巴甜、低聚糖、木糖醇。
5.根据权利要求1所述的药物，其剂型是冲剂、颗粒剂、粉剂、片剂或胶囊。
6.根据权利要求1所述的药物的制备方法是取无花果、枸杞子、甘草，加8倍药量的水煮沸，2小时后倾出上清液，反复3次；将上述煎煮液离心过滤。滤液减压浓缩，加入95％乙醇至醇的浓度为50％，滤除上清液，沉淀用水溶解，再加入95％食用乙醇至醇的浓度为50％，沉淀经喷雾干燥得到有效成分；将大豆加8倍药量的水煮沸，1小时后倾出上清液，反复3次，将上述煎煮液离心过滤，滤液减压浓缩，然后加在吸附树脂上，用10％的乙醇洗脱，经喷雾干燥得到大豆提取物；将淀粉、甜味剂与上述二提取物混合、制粒。
全文摘要
一种提高机体免疫功能药物及其制备方法。本发明药物由无花果40－60，枸杞子20－30，甘草25，大豆提取物3，淀粉10，甜味剂1－3为原料制成(用量为重量份)。该药物的制备方法是取无花果、枸杞子、甘草，加水煮沸，将煎煮液离心过滤。滤液减压浓缩，加入95％乙醇，滤除上清液，沉淀用水溶解，沉淀经喷雾干燥得到有效成分；将大豆加水煮沸，将煎煮液离心过滤，滤液减压浓缩，然后加在吸附树脂上洗脱，经喷雾干燥得到大豆提取物；将淀粉、甜味剂与上述二提取物混合、制粒。本发明的药物具有明显提高机体免疫功能并且可改善血液中血小板、6－酮－PGF
文档编号A61P37/04GK1507904SQ0215662
公开日2004年6月30日 申请日期2002年12月17日 优先权日2002年12月17日
发明者杨霁初, 张诗梦, 刘海燕, 马芳 申请人:杨霁初, 张诗梦, 刘海燕, 马芳