专利名称：治疗慢性心力衰竭的医药组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及慢性心力衰竭患者的特定症状的改善剂，尤其是慢性心力衰竭患者的运动耐量改善剂、心肌梗塞后的慢性心力衰竭患者的生存期延长剂、慢性心力衰竭患者的左心室的扩张机能和收缩机能低下的改善剂或慢性心力衰竭患者心肌梗塞后的心肌重构抑制剂。
背景技术：
国际专利公开第97/22595号公报记载了N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺及其盐，揭示其具有抑制ET-1与内皮素ETA受体的结合以及抑制ET-1诱发的血管收缩、升压的作用，暗示可用于以心血管疾病为代表的与内皮素有关的各种疾病的治疗。
本发明者以创制新型治疗药为目的，深入研究了N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺或其盐对更具体的疾病进行治疗的可能性。
发明的揭示本发明者发现N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺或其盐能有效地改善慢性心力衰竭患者的特定症状，从而完成了本发明。
本发明者发现，N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺或其盐能有效地改善慢性心力衰竭的运动耐量，从而完成了本发明。尚未见报道内皮素受体拮抗剂能改善慢性心力衰竭的运动耐量。从下述试验例1所示的心力衰竭的大鼠的长期口服试验中能够获知，本发明的有效成分以1mg/kg·日的极低剂量就显示了改善运动耐量低下的作用。
而且，本发明者发现，N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺或其盐能有效地延长心肌梗塞后的慢性心力衰竭的生存期，从而完成了本发明。对ETA受体及ETB受体无选择性的拮抗剂波生坦(bosentan)对心肌梗塞后心力衰竭模型进行口服9个月的长期试验中，30mg/kg·日时无效，而100mg/kg·日时据报道能显著改善死亡率(Circulation，96(6)1976-1982，1997)。另一方面，国际专利公开第97/22595号公报中，作为本发明的有效成分的实施例2的化合物在口服时对于脊髓被破坏的大鼠，用约1/50的波生坦剂量对big ET-1的升压作用显示同等的抑制作用。如下述试验例1及例2所示的长期口服试验中，本发明的有效成分对心肌梗塞后心力衰竭模型用1mg/kg·日的极低剂量就显示改善死亡率的作用。
而且，本发明者发现，N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺或其盐，能有效地改善慢性心力衰竭患者的左心室的扩张机能及收缩机能低下，从而完成了本发明。对ETA受体和ETB受体无选择性的拮抗剂波生坦在大鼠心力衰竭模型的长期口服试验中，能改善作为左心室扩张机能指标的左心室舒张末期压(LVEDP)，但据报道对作为左心室收缩机能指标的左心室收缩期压力最大变化率(LVdP/dtmax)得出无效的结果(Circulation，96(6)1976-1982，1997)。另外，ETA受体拮抗剂达卢生坦(darusentan)在大鼠心力衰竭模型的10周口服试验中虽能改善左心室的舒张末期压(LVEDP)，但据报道对左心室收缩期压力最大变化率(LVdP/dtmax)和心肥大无效(Cardiovascular Research，39600-608，1998)。如下述试验例2所示，在大鼠心力衰竭模型的长期口服试验中，本发明的有效成分以1mg/kg·日的极低剂量对作为左心室扩张机能指标的左心室舒张末期压(LVEDP)和作为左心室收缩机能指标的左心室收缩期压力最大变化率(LVdP/dtmax)均显示接近正常大鼠的相同程度的改善作用。
而且，本发明者发现，N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺或其盐，能有效地抑制心肌梗塞后的慢性心力衰竭患者的心肌重构，从而完成了本发明。心肌重构是指心肌梗塞后发生的梗塞区变薄、非梗塞区离心性肥大、内腔扩大等一系列变化。心肌梗塞后的长期预后与左心室机能不全的程度相关，但抑制心肌重构对左心室机能的保持十分重要(Circulation，811161-1172，1990，Circulation，963294-3299，1997)。如下述试验例2所示，在大鼠心肌梗塞后的心力衰竭模型的长期口服试验中，本发明的有效成分以1mg/kg·日的极低剂量即显示出抑制心肌重构的作用。
即，本发明涉及以N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺或其制药学上容许的盐为有效成分的医药组合物，该医药组合物可用于慢性心力衰竭患者的选自以下(1)～(4)的特定症状的改善。
(1)运动耐量低下，(2)心肌梗塞后的生存期缩短，(3)左心室扩张机能及收缩机能低下，(4)心肌梗塞后的心肌重构。
本发明涉及以N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺或其制药学上容许的盐为有效成分、用于改善慢性心力衰竭患者的运动耐量的医药组合物；用于延长心肌梗塞后慢性心力衰竭患者的生存期的医药组合物；用于改善慢性心力衰竭患者的左心室扩张机能及收缩机能低下的医药组合物；或者用于抑制心肌梗塞后慢性心力衰竭患者的心肌重构的医药组合物。
而且，本发明涉及N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺或其制药学上容许的盐在制备慢性心力衰竭患者的选自上述(1)～(4)的特定症状的改善剂中的应用。本发明涉及N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺或其制药学上容许的盐在制备慢性心力衰竭患者的运动耐量改善剂、心肌梗塞后慢性心力衰竭患者的生存期延长剂、慢性心力衰竭患者的左心室扩张机能及收缩机能低下的改善剂或心肌梗塞后慢性心力衰竭患者的心肌重构抑制剂中的应用。
此外，本发明涉及包括给患者服用治疗有效量的N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺或其制药学上容许的盐的改善慢性心力衰竭患者的选自上述(1)～(4)的特定症状的方法。本发明涉及包括给患者服用治疗有效量的N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺或其制药学上容许的盐的改善慢性心力衰竭患者的运动耐量的方法、延长心肌梗塞后慢性心力衰竭患者的生存期的方法、改善慢性心力衰竭患者的左心室扩张机能和收缩机能低下的方法或抑制心肌梗塞后慢性心力衰竭患者的心肌重构的方法。
此外，本发明的有效成分由于口服吸收性良好，所以可制成有效的口服治疗药。
以下，对本发明进行更详细的说明。
本发明的医药有效成分是N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺或其制药学上容许的盐。这样的盐可列举前述国际专利公开第97/22595号记载的盐，具体包括与盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、硝酸、磷酸等无机酸及与甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、天冬氨酸、谷氨酸等有机酸的酸加成盐，与钠、钾、镁、钙、铝等无机碱及与甲胺、乙胺、乙醇胺、赖氨酸、鸟氨酸等有机碱形成的盐和铵盐等。特别好的是钾盐。
而且，本发明的有效成分包括所有的各种异构体的混合物及分离的异构体、水合物、溶剂合物。且本发明的有效成分中也存在多晶型化合物，包括所有结晶型。
这些化合物根据上述国际专利公开第97/22595号记载的制法或以该制法为基准能够很容易地制得。
采用适于口服或非口服的有机或无机载体、赋形剂和其他添加剂，根据常法可制备作为本发明的药物的口服固体制剂、口服液体制剂或注射剂。本发明的医药有效成分因具有优良的口服吸收性，所以适于制备口服制剂。最好是患者自己容易服用，且便于保存和运输的口服固体制剂。
口服固体制剂可以是片剂、散剂、细粒剂、颗粒剂、胶囊剂、丸剂、缓释制剂等。这些固体制剂中，一种或以上的活性物质与至少一种惰性稀释剂，例如乳糖、甘露醇、葡萄糖、微晶纤维素、淀粉、玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、铝硅酸镁混合。根据常法，组合物可含有惰性稀释剂以外的添加剂，例如，羟丙纤维素、羟丙甲纤维素(HPMC)等粘合剂，硬脂酸镁、聚乙二醇、淀粉和滑石粉等润滑剂，纤维素乙醇酸钙等崩解剂，氧化钛、滑石、黄色氧化铁等着色剂。片剂或丸剂必要时可用蔗糖、明胶、琼脂、果胶、羟丙纤维素、羟丙甲纤维素邻苯二甲酸酯等糖衣或胃溶性或肠溶性薄膜包衣。
口服液体制剂包括制药学上容许的乳浊剂、溶液剂、悬浮剂、糖浆剂、酏剂等，含有通常使用的惰性稀释剂，例如精制水、乙醇。这些组合物可含有惰性稀释剂以外的湿润剂和悬浮剂等助剂、甜味剂、调味剂、芳香剂、防腐剂。
静注、肌注、皮下注射等注射剂包括无菌的水性或非水性的溶液剂、悬浮剂、乳剂。水性溶液剂、悬浮剂的稀释剂包括注射用蒸馏水及生理盐水。非水溶性的溶液剂、悬浮剂的稀释剂有丙二醇、聚乙二醇、橄榄油等植物油，乙醇等醇类，聚山梨酯80等。这些组合物中还可含有防腐剂、湿润剂、乳化剂、分散剂、稳定剂(如乳糖)、增溶剂(如谷氨酸、天冬氨酸)等助剂。它们可经除菌滤器过滤，然后加入杀菌剂或经照射而灭菌。它们也可制成无菌的固体组合物，于使用前溶于无菌水或无菌的注射用溶剂而使用。
本发明的有效成分化合物的给药量可根据给药途径、疾病症状、给药对象的年龄、性别等各种情况而决定，但通常口服时成人的有效成分约0.1～500mg/日，较好为1～250mg/日，将其分1～2次给药。
此外，本发明的药剂可与其他治疗慢性心力衰竭的药物同时或间隔一段时间合并使用。可与本发明的药剂并用的药物包括马来酸依那普利、赖诺普利等ACE抑制剂，螺内酯、坎利酸钾(potassium canrenoate)、氨苯蝶啶等醛固酮拮抗药，呋塞米、布美他尼、依他尼酸、阿佐塞米等髓袢利尿药，氢氯噻嗪、三氯噻嗪、美托拉宗(metolazone)、曲帕胺(tripamide)、美夫西特(mefruside)等噻嗪类利尿药，硝酸异山梨酯、硝酸甘油、肼屈嗪、卡培立肽等血管扩张药，盐酸多巴酚丁胺、盐酸多巴胺、米力农、盐酸Olprinone、匹莫苯、地诺帕明、地高辛、洋地黄毒苷、维司力农等强心药，卡维地洛、酒石酸美托洛尔等β阻滞剂，氨氯地平等钙拮抗剂，胺磺酮等抗心律失常药。
附图的简单说明
图1表示长期(24周)服用化合物1对经行走训练的心肌梗塞后的心力衰竭大鼠的生存率的改善作用。
图2表示长期(30周)服用化合物1对心肌梗塞后心力衰竭的大鼠的生存率的改善作用。
图3表示长期服用化合物1对心肌梗塞后心力衰竭的大鼠的心功能的改善作用(A.左心室压力最大变化率(LV+dp/dtmxa)、B.左心室舒张末期压(LVEDP)、C.右心室收缩压(RVSP)、D.中心静脉压(CVP))。
图4表示长期服用化合物1对心肌梗塞后心力衰竭的大鼠的心肌重构的抑制作用。
实施发明的最佳方式根据以下实施例和试验例对本发明作更详细的说明，但本发明不限于这些实施例等。此外，以下实施例等使用的化合物1为N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺钾盐。
实施例1 胶囊剂表1
将上述成分混合，充填胶囊，制得胶囊剂。
试验例1长期服用化合物1对心肌梗塞后慢性心力衰竭的大鼠的运动耐量低下和生存率的改善效果(方法)(1)心力衰竭模型大鼠的制作用冠状动物结扎引起的心肌梗塞后的心力衰竭模型大鼠作为实验性心力衰竭大鼠(Circ.Rse.，44(4)503-512，1979/Circulation，72406-412，1984)。采用6周龄的SD系雄性大鼠(120～150g)制作冠状动脉结扎大鼠。大鼠在乙醚麻醉下开胸，用钳子将肋间切开部扩大，剪开心包膜后将心脏从切口推出。用结扎线结扎左冠状动脉降支后，迅速让心脏返回胸腔内。其后在胸壁外侧轻轻加压使胸腔内不残留空气，闭胸。用伤口夹(wound crip)缝合皮肤。术后1周内对生存大鼠进行心电图检查，从心电图上异常Q波的出现确定有无心肌梗塞以及梗塞区的大小。手术后1周内因急性心肌梗塞、心律失常等的死亡率约为60％。
(2)给药将心肌梗塞大鼠分成2组，使梗塞区大小均等，在冠状动脉结扎10日后的24周内，只给对照组(21只)连续饮用蒸馏水，给试验组(14只)连续口服化合物1的0.2mg/ml溶液，每次5ml/kg，每日1次。另对12只大鼠以同样的术式进行不结扎冠状动脉的假手术，作为正常组同样连续饮用蒸馏水，持续24周。
(3)运动负荷试验为使大鼠预先习惯踏旋器行走试验，在给药期间每周进行短时间(5～10分左右)的行走训练。在24周给药之后，对生存大鼠用踏旋器行走装置进行运动负荷试验。将以一定行走速度(25m/min)行走至不能行走时的行走时间用于评价运动耐量，并算出各组的死亡率。
(4)统计处理对生存率及运动耐量测定结果进行统计学分析。在化合物1的组与对照组中进行对数秩和检验(Log rank test)，生存率检定的风险率不到5％的情况认为有显著差异。对运动耐量测定结果在正常组、对照组和试验组中进行单因素方差分析后分别进行不成对的多重比较(Fisher’s LSD method)，风险率(P)不到5％的情况认为有显著差异。
(结果)(1)对运动耐量的影响如表2所示，对心力衰竭模型进行运动负荷试验的结果与做假手术的大鼠(正常组)相比，心力衰竭大鼠(对照组)行走时间显著缩短。另一方面，试验组比对照组的行走时间显著延长。
以上显示长期服用化合物1能显著改善慢性心力衰竭大鼠的运动耐量。
表2
**与正常组比较P＜0.01，#与对照组比较p＜0.05(2)对死亡率的影响按图1所示，正常组未见一例死亡，与此相比，对照组的死亡率在开始给药的第24周为47.6％。另一方面，化合物1组死亡率为0.7％，这说明长期服用化合物1能明显减少死亡率(p＝0.013)。
以上显示使进行行走训练的慢性心力衰竭大鼠长期服用化合物1能使死亡率显著降低。
试验例2长期服用化合物1以改善心肌梗塞后心力衰竭大鼠的生存率及心功能的效果(方法)(1)心力衰竭模型大鼠的制作与试验例1同样制作冠状动脉结扎所致心肌梗塞后心力衰竭大鼠，用于实验。
(2)将心肌梗塞大鼠分成2组使梗塞面积均等，在冠状动脉结扎10天后开始约30周内，只给对照组(33只)饮用蒸馏水，给试验组(21只)口服化合物1的0.2mg/ml溶液，每次5ml/kg，每日1次，连续口服。以同样的术式经不结扎冠状动脉的假手术的大鼠作为正常组(17只)，在约30周内同样连续给它们饮用蒸馏水。
(3)心功能测定算出各组的死亡率，对长期给药后生存的大鼠进行心重量及心脏血流动力学测定(血压、左心室收缩压、左心室舒张末期压、LV+dP/dtmax、右心室收缩压、中心静脉压等)。因正常组所有动物均生存，随机选出9只进行心重量及心血流动力学测定。
(4)组织学检查进行心血流动力学测定和心重量测定后，在左心室标本冠状动脉结扎部位与心尖部之间制作2mm间隔的切片。将含乳头肌的一切片以10％中性缓冲甲醛溶液固定后，切成3μm薄片。将薄切片贴附于载玻片，进行马松三色(Masson trichrome)染色，将纤维组织染成蓝色。在实体显微镜下(2.5倍)和光学显微镜下(200倍)观察染色后的组织切片心肌细胞肥大和心肌纤维化情况。
(5)统计处理对生存率和心功能测定结果进行统计学分析。生存率检定在对照组和化合物1组中进行对数秩和检验，风险率不到5％的情况认为有显著差异。心功能测定结果在正常组、对照组和化合物1组中在单因素方差分析后分别进行不成对的多重比较(Fisher’s LSD method)，风险率(P)不到5％的情况认为有显著差异。
(结果)(1)对死亡率的影响如图2所示，正常组未见一例死亡，与此相比，对照组的死亡率在开始给药第30周为81/8％。另一方面，化合物1组的死亡率为55.0％，这说明长期服用化合物1可显著降低死亡率(p＝0.0465)。
以上说明给慢性心力衰竭大鼠长期服用化合物1可使死亡率显著降低。
(2)对心功能的影响如图3所示，测定生存大鼠的心血流动力学的结果是，心力衰竭大鼠(对照组)比做假手术的大鼠(正常组)的左心室压力最大变化率(LV+dP/dtmax)显著降低，左心室舒张末期压(LVEDP)、右心室收缩压(RVSP)和中心静脉(CVP)显著上升，因此心力衰竭大鼠(对照组)的左心室收缩机能和扩张机能低下，出现肺动脉高血压和全身淤血。另一方面，试验组的心力衰竭大鼠的左心室扩张机能和收缩机能的改善程度与正常组相同，减轻了右心负荷(图3)。
以上说明给慢性心力衰竭大鼠长期服用化合物1能显著改善左心室扩张机能和收缩机能的低下。
(3)对心肥大和心肌重构的影响对生存大鼠测定心重量的结果是，心力衰竭大鼠(对照组)与做假手术的大鼠(正常组)相比，其左心室重量体重比[(LV+SEP)/BW]、右心室重量体重比(RV/BW)及肺湿重体重比(肺/BW)显著增大，心力衰竭大鼠(对照组)发生左心室及右心室肥大和肺淤血，这说明长期服用化合物1能显著抑制两心室肥大及肺淤血(表3)。
表3
**与正常组比较p＜0.01，##与对照组比较p＜0.01如图4所示，对生存大鼠的左心室组织标本以实体显微镜观察的结果是，与假手术大鼠(正常组)比较，心力衰竭大鼠(对照组)的左心室内腔扩大，这说明长期服用化合物1可抑制左心室内腔的扩大。以光学显微镜观察非梗塞区残存心肌的结果是，心力衰竭大鼠(对照组)与假手术大鼠(正常组)相比，出现各心肌细胞水平的伸长和肥大，且对照组的心肌细胞间隙的间质组织纤维化显著。这说明长期服用化合物1能显著抑制心力衰竭大鼠的心肌肥大和纤维化。
以上说明给心肌梗塞后的慢性心力衰竭大鼠长期服用化合物1能显著改善心肌重构。
产业上利用的可能性本发明能提供改善慢性心力衰竭患者的特定症状的优良治疗药。即，能提供慢性心力衰竭患者的运动耐量的改善剂、心肌梗塞后的慢性心力衰竭患者的生存期延长剂、慢性心力衰竭患者的左心室扩张机能及收缩机能低下的改善剂及/或心肌梗塞后的慢性心力衰竭患者的心肌重构抑制剂。
权利要求
1.医药组合物，其特征在于，以N-[6-甲氧基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-2-苯基乙烯磺酰胺或其制药学上容许的盐为有效成分，用于改善慢性心力衰竭患者的选自以下(1)～(4)的特定症状(1)运动耐量低下，(2)心肌梗塞后的生存期缩短，(3)左心室扩张机能及收缩机能低下，(4)心肌梗塞后的心肌重构。
2.如权利要求1所述的医药组合物，其特征还在于，它是用于改善慢性心力衰竭患者的运动耐量的医药组合物。
3.如权利要求1所述的医药组合物，其特征还在于，它是用于延长心肌梗塞后慢性心力衰竭患者的生存期的医药组合物。
4.如权利要求1所述的医药组合物，其特征还在于，它是用于改善慢性心力衰竭患者的左心室扩张机能和收缩机能低下的医药组合物。
5.如权利要求1所述的医药组合物，其特征还在于，它是用于抑制心肌梗塞后慢性心力衰竭患者的心肌重构的医药组合物。
6.如权利要求1～5中任一项所述的医药组合物，其特征还在于，所述组合物为口服制剂。
全文摘要
改善慢性心力衰竭患者的运动耐量的医药组合物，它以N－[6－甲氧基－5－(2－甲氧基苯氧基)－2－(2－嘧啶基)－4－嘧啶基]－2－苯基乙烯磺酰胺或其制药学上容许的盐为有效成分。
文档编号A61K31/506GK1491110SQ02804541
公开日2004年4月21日 申请日期2002年2月6日 优先权日2001年2月9日
发明者藤森明, 汤山弘法, 原田博规, 法, 规 申请人:山之内制药株式会社