专利名称：一种治疗膨胀症的中药组合物及其制备方法和质量控制方法
技术领域：
本发明涉及一种中药组合物，特别涉及治疗臌胀症的中药组合物，同时涉及该组合物的制备方法和质量控制方法。
本发明药物组合物的原料药组成及配比如下(按重量份)皂矾150-250重量份 甘遂15-25重量份 大枣150-250重量份木香15-25重量份小麦60-130重量份。
本发明药物组合物的原料药组成优选配比为(按重量份)皂矾230重量份甘遂23重量份大枣180重量份木香23重量份小麦80重量份。
本发明药物组合物的原料药组成优选配比为(按重量份)皂矾180重量份甘遂18重量份大枣230重量份木香18重量份 小麦120重量份。
本发明药物组合物的原料药组成优选配比为(按重量份)皂矾200重量份甘遂20重量份大枣200重量份木香20重量份 小麦100重量份。以上所述皂矾以生用为佳，大枣以去核炒为佳，小麦以炒为佳。
按药剂学方法，可以将本发明药物组合物制备成多种临床药物剂型，包括口服制剂或非肠道给药的剂型。所说的口服制剂选自于片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、混悬剂、滴丸、口服液体制剂当中的一种；所说的非肠道给药剂型选自于注射剂、气雾剂、栓剂或皮下给药剂型当中的一种。
本发明药物还可加入常规的药物赋形剂，如溶剂、崩解剂、矫味剂、防腐剂、着色剂等。
本药物组合物的制备方法以上五味，粉碎成细粉，过筛，混匀；用热水合坨制丸，60-70℃以下干燥，最后经过常规工序直接或加入药学上可接受的赋型剂制成临床可接受的剂型，如丸剂、片剂、口服液体制剂、胶囊、颗粒剂。
本组合物制成的药剂采用如下一种和/或几种鉴别方法进行质量控制a.取本组合物制剂1g，研细，加水10ml，煮沸8-12分钟，滤过，取滤液1ml，加铁氰化钾试液2-3滴，即生成蓝色沉淀，分离，沉淀在稀盐酸中不溶解，加氢氧化钠试液，呈棕色沉淀；b.取本组合物制剂15g，研细，加60-90℃石油醚50ml，浸渍25-35分钟，超声处理25-35分钟，滤过，滤液挥干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取木香对照药材0.5g，加醋酸乙酯10ml，超声处理25-35分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以8-12∶0.5-1.5环己烷一丙酮为展开剂，展开，取出晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，至板面完全湿润；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；c.取本组合物制剂20g，研细，加乙醇60ml，加热回流0.5-2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用醋酸乙酯提取三次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘遂对照药材2g，加乙醇40ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药2000年版一部附录V1B)试验，吸取供试品溶液10μl、对照药材溶液2μl，分别点于同一以羧甲基纤维钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以18-25∶1-3∶1.5-1.5氯仿-醋酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。所述质量控制方法中有赋型剂的制剂，可以按常规方法先去除其赋型剂。
本发明组合物在治疗臌胀症中，具有利水消肿、除湿健脾功效，对胸腹胀满、四肢浮肿、大便秘结、小便短赤病症有很好的效果。以下通过药效学、临床实验研究进一步说明本发明。实验例1本组物制剂(臌症丸)的药效学研究试验材料1.动物小鼠昆明种小鼠，雄，体重20-22g。购自北京医科大学实验动物科学部，一级，合格证号医动字第01-3049号。大鼠Wistar种大鼠，雄，体重150-200g。购自北京医科大学实验动物科学部，一级，合格证号医动字第01-3056号。2.受试药物臌症丸药粉，过100目，邯郸制药有限公司提供.3.试剂及药品氢氯噻嗪片，25mg/片，唐山市渤海制药厂，批号970801。甲基硫酸新斯的明注射液，0.5mg/ml，中国上海信谊药厂，批号960404。阿拉伯树胶粉，上海化学试剂公司分装，批号880414。碳末北京化学试剂公司产品。总蛋白(TP)测定试剂盒(又缩脲法)，批号990921；白蛋白(ALB)试剂盒，批号991008尿素氮(BUN)试剂盒(二乙酰一肟法)，批号991228；肌酐(Cr)试剂盒(苦味酸不除蛋白法)，批号991028。均为北京北化精细化学品有限责任公司产品。其他试剂均为分析纯，购自北京化学试剂公司。一、 对正常小鼠的利尿及峻泻作用(一)臌症丸对正常小鼠的泻下作用及利尿作用1.方法昆明种小鼠，雄，禁食12h，试验动物分为6组，正常对照组20只，臌症丸0.7g/kg、1.0g/kg、1.4g/kg 3组、氢氯噻嗪30mg/kg、60mg/kg2组，给药各组每组10只动物。实验前轻压动物下腹部，排尽余尿。每鼠腹腔注射2ml，37℃温盐水作为水负荷，同时ig药物0.2ml/10g体重，记录给药后0-2h、2-6h尿量，以组间t检验比较差异的显著性，记录给药6h内各组泻下动物数，以X2检验进行统计学比较。
2.结果见表1，臌症丸剂量0.7g/kg单次灌胃给药后显著增加给药后2-6h间动物排尿量，但无明显量效关系。臌症丸1.4g/kg剂量，半数动物排稀便，与正常对照组比，排稀便动物数显著增加(P＜0.01)。
表1 臌症丸对正常小鼠的泻下作用及利尿作用尿量ml组别动物数 剂量g/kg 泻下动物1-2h ＞2-6h正常对照组20 - 02.77±0.841.34±0.50臌症丸10 0.7 02.07±0.472.49±0.638*臌症丸10 1.0 12.26±0.482.14±0.51臌症丸10 1.4 5** 1.87±0.762.49±0.69氢氯噻嗪 10 0.03 03.40±1.011.70±0.38氢氯噻嗪 10 0.06 03.17±0.551.97±0.51注与正常对照组比*P＜0.05，**P＜0.01。
3.结论臌症丸对正常小鼠有利尿作用及致泻作用。(二)对正常小鼠碳末推进及肠道内含水量的影响1.方法昆明种小鼠，雄性，禁食24h后称体重，随机分为5组，每组10只动物。依次为正常对照组、臌症丸0.7g/kg、1.0g/kg、1.4g/kg、新斯的明0.1mg/kg组，灌胃给药0.2ml/10g。2h后ig 5％碳末0.2ml/只，给碳末20min后处死动物，取小肠全长(幽门到回盲部)及大肠(回盲部到直肠)全长，测碳末推进长度、小肠湿重、大肠湿重。肠管于80℃烤干后，再称取各段干重，按下列公式计算碳末推进百分率，小肠内水分含量百分率，大肠内水分含量百分率。以组间t检验比较组间差异的显著性。碳末推进百分率＝碳末在小肠内推进距离(cm)/小肠全长(cm)×100％ 2.结果(1)对小肠推进功能的影响，见表2，臌症丸在0.7g/kg-1.4g/kg显著促进小肠碳末推进百分率(与正常对照比P＜0.05或P＜0.01)。
表2 臌症丸单次给药对正常小鼠小肠推进功能的影响组别 动物数 剂量g生药/kg 碳末推进百分率％正常对照组 12- 46.17±13.61臌症丸 100.774.95±15.05*臌症丸 101.073.93±13.45*臌症丸 101.482.20±11.12**新斯的明 100.0001 75.57±8.34**注与正常对照组比*P＜0.05，**p＜0.01。
(2)对肠道含水量的影响，见表3、4，臌症丸在0.7g/kg-1.4g/kg显著增加小肠肠道水分含量(P＜0.001)，并增加小肠湿重。
表3 臌症丸单次给药对正常小鼠肠道含水量的影响肠道水分含量(％)组别 动物数 剂量g/kg小肠 大肠正常对照组 12 - 79.30±0.84 92.75±4.28臌症丸 10 0.7 82.46±0.91*** 94.75±0.12臌症丸 10 1.0 81.75±0.87*** 94.25±0.67臌症丸 10 1.4 81.81±0.80*** 94.15±0.65新斯的明10 0.0001 79.15±3.97 94.09±1.14注与正常对照组比***P＜0.001。
表4 臌症丸单次给药对肠道湿重的影响组别 动物数 剂量g/kg 小肠湿重(g) 全肠道湿重(g)正常对照组 12 - 1.78±0.20 2.52±0.25臌症丸 100.72.25±0.21* 2.96±0.26臌症丸 101.02.15±0.15 2.93±0.18臌症丸 101.41.89±0.18 2.64±0.25新斯的明100.0001 1.82±0.25 2.59±0.30注与正常对照组比*p＜0.05。
3.结论臌症丸给小鼠单次灌胃给药，0.7g/kg有明显利尿作用，0.7g/kg-1.4g/kg给药2小时后显著促进小肠推进功能，增加小肠水份含量，1.4g/kg有明显致泻作用。根据以上试验结果臌症丸对正常小鼠有利尿作用与峻泻作用。
二、臌症丸对正常大鼠的利尿作用1.方法选取150-200g雄性Wistar种大白鼠，预先使之适应代谢笼的生活环境1-2日。实验前动物称体重，ig 25ml/kg 38℃温水收集2h尿量，选尿量达所灌入量40％以上的动物用于利尿实验。实验前动物禁食18h。水负荷用38℃ 生理盐水25ml/kg ig每小时1次，共2次。于第2次水负荷时ig给臌症丸0.34g/kg、0.49g/kg、0.7g/kg、1.0g/kg共4个剂量组，阳性药氢氯噻嗪15mg/kg。各组给药体积为1ml/100g，正常对照组给与同体积常水。实验开始时轻压动物下腹，排尽余尿。将动物放入代谢笼中，观察用药后1、2、4、6、8、12、24h尿量；24h大便总湿重、总干重；24h饮水量。以组间t检验比较组间差异的显著性。
2.结果臌症丸单次ig给药0.49g/kg、1.0g/kg剂量，给药后6-24h尿量较正常对照组显著增加(P＜0.05或P＜0.01)，0.49g/g组尿比重显著降低(P＜0.01)，见表5。阳性药氢氯噻嗪组给药后6h内尿量较对照组显著增加(P＜0.01)，但6-24h则显著降低(P＜0.05)。臌症丸1.0g/kg对动物大便湿重及干重无明显影响(P＞0.05)，见表6。臌症丸给药各组动物饮水量有增加趋势，但尚未达到统计学显著差别(P＞0.05)，见表7。
表5 臌症丸单次灌胃给药对正常大鼠尿量的影响(n＝10 X±SD)剂量 尿量(ml)组别尿比重g/kg 0-6h 6-24h 0-24h正常对照组- 5.65±1.25 6.62±1.19 12.28±1.20 1.0315±0.0045臌症丸0.34 5.19±1.97 8.37±2.18 13.57±3.34 1.0404±0.0067*臌症丸0.49 3.08±2.03* 15.83±6.95*18.91±8.23 1.0141±0.0072**臌症丸0.70 3.02±1.21**9.30±4.73 12.32±4.32 1.0278±0.0068臌症丸1.00 5.84±1.57 11.55±2.57** 17.39±3.05**1.0262±0.0138氢氯噻嗪 0.01 10.65±1.31** 4.88±1.18* 15.53±2.42**1.0119±0.0063**注与同期正常对照组比*P＜0.05，**P＜0.01。
表6 臌症丸单次灌胃给药对正常大鼠大便量及含水量的影响(n＝10 X±SD)24h烘便重量(g)组别 剂量g/kg总湿重 总干重正常对照组 -3.04±0.48 1.40±0.38臌症丸 0.34 3.60±0.75 1.69±0.45臌症丸 0.49 2.95±0.85 1.36±0.60臌症丸 0.70 3.03±0.97 1.25±0.55臌症丸 1.00 2.57±0.80 1.24±0.33氢氯噻嗪0.01 4.12±1.32 1.43±0.35表7 臌症丸单次灌胃给药对正常大鼠饮水量的影响(n＝10 X±SD)组别 剂量g/kg 24h饮水量(ml)正常对照组 - 14.1±10.6臌症丸 0.34 13.0±6.6臌症丸 0.49 25.1±15.2臌症丸 0.70 19.7±12.8臌症丸 1.00 20.9±8.1氢氯噻嗪 0.015 12.1±4.63.结论臌症丸单次灌胃给药0.49g/kg/1.0g/kg剂量，于给药后6-24h显著增加大鼠尿量(与正常对照组比P＜0.05或P＜0.01)，并降低尿比重。三、对大白鼠血红蛋白尿急性肾衰模型的治疗作用1.方法Wistar种雄性大白鼠，体重170-220g，置于代谢笼中，记录正常饮水量及尿量。于造模前动物禁水24h，选体重减轻30g以上动物，肌肉注射50％甘油，按10ml/kg分别在大鼠两侧后肢肌肉注射。注射后让大鼠自由进食及饮水。50％甘油造型30h经眼眶静脉取血测定BUN、Cr。造型33h后分组给药，分别为正常对照组，50％甘油造型组，50％甘油造型臌症丸0.25g/kg、0.5g/kg、1.0g/kg剂量治疗组及氢氯噻嗪10mg/kg剂量治疗组。每组10只动物，连续灌胃给药3d，灌胃体积为10ml/kg，对照组给同体积常水。动物置代谢笼中记录每日饮水量、尿量、尿比重、pH，于末次给药后24h，经眼眶静脉取血测定TP、ALB、BUN、SCr及血Na+、K+。然后活杀全部动物，取肾脏称重并固定于10％甲醛中，经石蜡切片，HE染色，显微镜下动物，取肾脏称重并固定于10％甲醛中，经石蜡切片，HE染色，显微镜下观察肾脏病变程度。计量资料以组间t检验进行统计比较，肾脏组织病理学改变级别以秩和检验进行统计比较。
2.结果(1)对肾衰大鼠尿量、比重、pH的影响，见表8，9，10。臌症丸0.25g/kg-1.0g/kg对急性肾衰大鼠尿量、尿比重及pH无明显影响。
表8 臌症丸对50％甘油致急性肾衰大鼠尿量的影响(n＝10)剂量 尿量(ml)组别g/kg 24h 48h 72h正常对照组 - 3.06±1.90 7.09±6.39 8.6±6.8250％甘油造型0.34 20.62±7.33##19.69±12.31#15.43±8.79急性肾衰+臌症丸 0.25 22.57±6.58 23.00±11.19 20.29±9.91急性肾衰+臌症丸 0.50 15.83±11.62 15.83±11.62 18.20±11.48急性肾衰+臌症丸 1.00 19.75±6.16 19.29±7.09 13.00±6.03急性肾衰+氢氯噻嗪 0.01 15.71±8.48 19.25±2.99 13.20±2.17注与同期正常对照组比#P＜0.05，##P＜0.01。
表9 臌症丸对50％甘油致急性肾衰大鼠尿比重的影响(n＝10)剂量 尿比重(g/ml)组别g/kg 24h 48h 72h正常对照组 - 3.060±0.0091.078±0.0271.077±0.0205％甘油造型0.341.029±0.009##1.040±0.098##1.037±0.013##急性肾衰+臌症丸0.251.027±0.0061.039±0.0061.035±0.009急性肾衰+臌症丸0.501.024±0.0081.036±0.0111.039±0.009急性肾衰+臌症丸1.001.035±0.0141.032±0.0051.038±0.007急性肾衰+氢氯噻嗪 0.011.026±0.0111.029±0.006*1.032±0.007注与同朋正常对照组比#P＜0.05，##P＜0.01。
与同期50％甘油造型造型组比*P＜0.05。
表10 臌症丸对50％甘油致急性肾衰大鼠尿pH的影响(n＝10)组别剂量 尿比重(g/ml)g/kg 24h 48h 72h正常对照组 -8.79±0.03 8.72±0.068.79±0.0250％甘油造型 0.34 8.64±0.019#8.75±0.058.79±0.03急性肾衰+臌症丸0.25 8.73±0.05 8.72±0.078.78±0.05急性肾衰+臌症丸0.50 8.78±0.06 8.72±0.038.81±0.01急性肾衰+臌症丸1.00 8.72±0.12 8.73±0.038.76±0.04急性肾衰+氢氯噻嗪 0.01 8.69±0.09 8.69±0.078.80±0.02
注与同期正常对照组比#P＜0.05。
(2)对急性肾衰大鼠血液生化指标的影响，见表11。臌症丸在0.25g/kg-1.0g/kg对急性肾衰大鼠血清BUN、SCr、TP、ALB浓度无明显影响。
表11 臌症丸对50％甘油致急性肾衰大鼠血液生化指标的影响(n＝10)剂量 BUN SCr TP ALB组别g/kg Mmol/L μmol/L g/Lg/L正常对照组 - 7.53±1.34 108.99±12.42 71.56±4.3740.88±9.6450％甘油造型- 17.85±7.20##152.46±31.02#73.32±3.9739.60±1.87急性肾衰+臌症丸0.25 19.79±8.93161.24±5.51 72.52±3.6237.02±3.22急性肾衰+臌症丸0.50 23.71±8.09185.64±43.76 76.24±4.4439.26±1.04急性肾衰+臌症丸1.00 18.15±5.29135.83±18.48 73.96±6.6638.47±2.37急性肾衰+氢氯噻嗪 0.01 13.50±2.72156.53±15.27 73.12±3.6037.56±2.97注与正常对照组比#P＜0.05 ##P＜0.01。
(3)对急性肾衰大鼠血清Na+、K+浓度的影响，见表12。臌症丸有升高血清Na+、K+浓度的作用(与模型组比P＜0.05或P＜0.01)表12 臌症丸对50％甘油致急性肾衰大鼠血清Na+、K+浓度的影响(n＝10)剂量 Na+K+组别g/kg mmol/L mmol/L正常对照组 - 121.27±26.786.03±0.6850％甘油造型- 105.26±14.656.80±1.33急性肾衰+臌症丸 0.25 146.20±17.58#6.81±1.14急性肾衰+臌症丸 0.50 108.79±31.487.07±0.69急性肾衰+臌症丸 1.00 128.74±13.06#8.84±0.98##急性肾衰+氢氯噻嗪0.01 103.87±31.1613.77±2.71##注与50％甘油造型组比*P＜0.05。**P＜0.01。
(4)对急性肾衰大鼠肾脏病变程度的影响臌症丸0.25g/kg-1.0g/kg连续灌胃给药3天后，对50％甘油所致肾脏损伤引起的肾系数增大无明显影响，对肾脏病理组织学改变未见明显治疗作用，见表13。
表13 臌症丸对50％甘油致急性肾衰大鼠肾系数的影响(n＝10)剂量 肾系数组别g/kg g/100g体重正常对照组- 0.824±0.05850％甘油造型 - 1.418±0.235**急性肾衰+臌症丸0.25 1.418±0.187急性肾衰+臌症丸0.50 1.585±0.220急性肾衰+臌症丸1.00 1.504±0.218急性肾衰+氢氯噻嗪 0.01 1.336±0.165注与正常对照组比**p＜0.01。
3、结论臌症丸对50％甘油所致大鼠急性肾功能衰竭动物无明显利尿作用，对血液生化指标无明显响，但有升高血清Na+、K+的作用。四、臌症丸对癌性腹水动物腹水量的影响1.方法昆明种小鼠，70只，体重19-21g，雄、雌各半，除正常对照组动物外其余动物腹腔接种S180腹水癌，癌细胞浓度1.12×106/ml，每只0.2ml，将动物按体重随机分为5组，既荷瘤对照组，臌症丸0.25g/kg、0.5g/kg、1.0g/kg组，阳性药氢氯噻嗪15mg/kg组，ig给药0.2ml/10g体重，于荷瘤第8、9、10日，每日给药1次，于给药前称动物体重并禁食、禁水，给药后4-6小时，称体重，以体重差值作为排尿指标。于荷瘤第11天，称体重，处死动物，开腹，用注射器吸出腹水并测量体积。以组间t检验比较体重、腹水量、尿量差别的显著性。
2.结果臌症丸1g/kg剂量ig给药3天，可显著减少腹水癌小鼠腹水量(P＜0.01)，见表14；对荷瘤动物体重有降低趋势，但无统计学显著性。见表15；但每日给药后6小时内尿量与荷瘤组比无明显增加，见表16。臌症丸1.0g/kg组部分动物有稀便，阳性药氢氯噻嗪15mg/kg剂量有显著减少荷S180腹水癌动物腹水量的作用(P＜0.05)。见表14。
表14 臌症丸对荷S180腹水癌小鼠腹水量的影响组别 动物数 剂量g/kg 给药天数d 腹水量ml正常对照组 10-- -腹水癌模型组20-- 13.86±4.58荷瘤+臌症丸 9 0.25 3 12.67±2.74荷瘤+臌症丸 9 0.50 3 12.30±1.64荷瘤+臌症丸 9 1.00 3 9.19±2.68**荷瘤+氢氯噻嗪 9 0.015 3 9.05±2.97*
注于荷S180第8，9，10天给药，连续3d，第11d取腹水。与腹水癌模型组比*P＜0.05，**P＜0.01。
表15 臌症丸对荷S180腹水癌小鼠体重的影响组别动物数 剂量g/kg 给药前体重g荷瘤天体重g正常对照组 10 - 20.5±1.1 29.7±3.7腹水癌模型组20 - 20.7±1.1 33.6±3.5荷瘤+臌症丸 9 0.25 20.7±1.1 34.4±2.9荷瘤+臌症丸 9 0.50 20.7±1.1 33.8±5.5荷瘤+臌症丸 9 1.00 20.9±1.0 30.1±4.3荷瘤+氢氯噻嗪 9 0.015 20.7±1.1 28.4±4.4表16 臌症丸对荷S180腹水癌小鼠尿量的影响6h尿量(g)组别 动物数 剂量g/kg第1天 第2天 第3天正常对照组 10 - 4.12±0.564.34±0.534.00±0.36腹水癌模型组20 0.34 3.97±0.602.88±0.77##2.59±1.07##荷瘤+臌症丸 9 0.25 3.83±0.872.94±0.412.52±0.89荷瘤+臌症丸 9 0.50 2.96±1.312.89±0.752.60±0.96荷瘤+臌症丸 9 1.00 3.04±1.222.58±0.621.98±0.62荷瘤+氢氯噻嗪 9 0.01 4.69±0.913.08±0.942.01±0.77注与同期正常对照组比##P＜0.053.结论臌症丸1g/kg灌胃给药3天，显著减少荷S180腹水癌小鼠腹水量(P＜0.01)。
试验结论1.臌症丸单次灌胃给药，在0.7g/kg-1.4g/kg对正常小鼠有利尿作用及致泻作用(P＜0.05或P＜0.01)，并促进小肠碳末推进功能(P＜0.05或P＜0.01)。2.臌症丸单次灌胃给药在0.49g/kg、1.0g/kg剂量对正常大鼠有利尿作用，显著增加给药后6-24h尿量(P＜0.05或P＜0.01)。3.臌症丸灌胃给药连续3天，0.25g/g-1.0g/kg对50％甘油致急性肾功能衰竭大鼠未显示明显利尿作用，但可显著增加血Na+、K+浓度。4.臌症丸灌胃给药1.0g/kg连续3天，对荷S180腹水癌小鼠有显著减少腹水量的作用(P＜0.01)。实验例2本组物制剂(臌症丸)的临床实验研究一、一般资料根据“临床验证方案”要求，认真选择符合标准的纳入病例共400例，采用临床随机分组方法，分为治疗组300例，对照组100例。
1.别分布见表1表1 两组性别分布情况组别例数 男(％) 女(％)治疗组 300 219(73.0) 81(27.0)对照组 100 76(76.0)24(24.0)两组病例性别分布经统计学处理(P＞0.05)，无显著性，有可比性。
2.年龄分布见表2表2 两组年龄分布情况组别 例数 ＜30岁 31～40岁 41～50岁 51～60岁 ＞60岁治疗组300 19 77 1117914对照组100 7 29 36 244两组病例年龄最小20岁，最大65岁，平均年龄治疗组44.94±8.59岁，对照组44.51±8.93岁，经统计学处理(P＞0.05)，无显著性差异，有可比性。
3.职业分布见表3表3 两组职业分布情况组别 例数 干部(％) 工人(％)农民(％)治疗组30077(25.67)111(37.0) 112(37.33)对照组10031(31.0) 37(37.0) 32(32.0)两组病例职业分布经统计学处理(P＞0.05)，无显著性，具有可比性。
4.病程分布见表4表4 两组病程分布情况组别例数 ＜1年(％) 1～5年(％)6～10年(％) ＞10年(％)治疗组 30061(20.33) 125(41.67)65(21.67) 49(16.33)对照组 10018(18.0)45(45.0) 24(24.0) 13(13.0)
两组病例病程最短0.5年，最长30年，平均病程治疗组7.16±3.71年，对照组7.08±3.55年，经统计学处理(P＞0.05)，无显著性，具有可比性。
5.中医主症分布见表5表5 两组中医主症轻、中、重度分布情况组别例数 轻度(％)中度(％) 重度(％)治疗组 300 63(21.0)166(55.33)71(23.67)对照组 100 22(22.0)52(52.0) 26(26.0)两组中医主症轻、中、重度分布经统计学处理(P＞0.05)，无显著性差异，有可比性。
6.西医临床类型分布见表6表6 两组西医临床类型分布情况活动性肝硬化 稳定性肝硬化组别 例数(％) (％)治疗组 300203(67.67)97(32.33)对照组 10070(70.0) 26(26.0)两组西医临床类型分布经统计学处理(P＞0.05)，无显著性差异，有可比性。
7.临床分期分布见表7表7 临床分期分布情况组别例数 早期(％) 中晚期(％)治疗组 300161(53.67)139(46.33)对照组 10055(55.0) 45(45.0)两组临床分期分布，经统计学处理(P＞0.05)，无显著性差异，有可比性。
二、病例选择标准依据卫生部制定的《中药新药临床研究指导原则》，并参照现行大学教材等书籍中的有关内容，结合该药的特点拟定。
1.中医辨病辨证诊断标准(1)辨病臌症。(2)辨证脾虚湿盛、水液停滞兼湿热互结证。主症腹部膨胀如鼓，或胸腹胀满。兼症饮食减少，或不思饮食，或食后腹胀。下肢浮肿，或周身浮肿。小便短少，或小便短赤。大便不爽，或大便秘结。舌脉舌边尖红，苔白腻或黄腻，脉弦或弦数。
(3)诊断凡具备上述主症1项，兼症2项以上，及相应的舌脉，即可做出诊断。
2.主症病情程度分级标准腹部胀大轻度(+)时感腹胀，按之尚柔软，叩之如鼓，或见胁下胀满。中度(++)腹大胀满，按之如囊裹水，转侧时有振水声，或见胸腹胀满。重度(+++)腹部胀大绷急，按之坚满，脐心突出，或见青筋暴露。
3.西医诊断标准(1)西医诊断本证所涉及到的西医疾病，如肝硬化，主要以肝炎性肝硬化、酒精性肝硬化、寄生虫性肝硬化等较单纯的或稳定性肝硬化失代偿期，临床可见腹部胀满，尿量减少，腹部移动性浊音阳性，两下肢水肿，肝功能异常，血清白蛋白在30g几以下。B型超声波显示肝脏缩小，门静脉直径增宽，脾脏增大，有腹水暗区。或x线检查有右侧胸腔积液。其它情况按该病的临床相应诊断标准执行。
(2)临床类型(参照1995年北京第五次全国传染病会议修订方案)活动性肝硬化慢性肝炎的临床表现依然存在，特别是转氨酶增高、黄疸、白蛋白减低、肝脏质地变硬、脾大、门脉高压。稳定性肝硬化有或无肝脏病史，转氨酶正常，无明显黄疸、脾大伴门脉高压，低白蛋白血症。
(3)临床分期早期第一次出现腹水双下肢水肿，一般状况好，未经任何利尿药治疗，白蛋白在28-30g几之间。中、晚期反复发作2次以上，或腹水经利尿剂治疗持续2个月以上不消退者，白蛋白在25g/L以下。
三、试验病例标准1.纳入病例标准凡符合臌症上述中医辩证诊断标准者，均可纳入试验病例。
2.排除病例标准(包括不适应症或剔除病例)(1)辨证诊断不明确或有过多兼挟证者。(2)年龄在18岁以下，或65岁以上者，妊娠期或哺乳期妇女，对本药过敏者。(3)合并心、脑、肾和造血系统等重要脏器有严重原发性疾病及精神病患者。(4)合并有原发性腹膜炎，原发性肝癌，或原因不明的血性、乳糜性腹水患者。(5)不符合纳入标准，未按规定用药，无法判断疗效或资料不全等影响疗效或安全性判断者。
四、观测指标1.安全性观测一般体检项目。(2)血、尿、便常规化验。(3)心、肝、肾功能检查。
2.疗效性观测(1)腹部胀大等主症的变化情况。(2)饮食、二便等情况的变化。(3)体征，舌象，脉象及24小时尿量变化情况。(4)B型超声波检查肝、脾、腹水变化情况。
五、疗效判定标准1.显效主症消失或减轻(++)以上，轻重程度由(+++)转变为(+)，或(++)消失，其他症状、体征明显好转或消失，尿量明显增加。2.有效主症减轻(+)以上，轻重程度由(+++)转变为(++)，或(++)转变为(+)，或(+)转变(-)，其他症状、体征有所好转，尿量增加。3.无效症状、体征减轻达不到上述标准者，或较治疗前无变化，或有所加重者。
六、验证方法临床验证采用随机单盲法对照原则进行，入选病例依据就诊顺序编号，按随机数字表分配为治疗组与对照组。1.治疗组臌症丸(河北省邯郸制药有限公司生产)，口服，每次10粒，每日3次。2.对照组安体舒通，口服，每次40mg，每日3次。3.疗程1周为一个疗程，一疗程后改服健康补脾丸，配合卧床休息，限制水盐摄入，可间断输白蛋白，以善其后。
七、统计学处理验证结果，各种数据均经统计学处理，计量资料用t检验，计数资料用X2检验，P＜0.05为显著性差异。
八、验证结果1.临床总疗效见表8表8 两组总疗效比较组别 例数显效(％)有效(％) 无效(％)总有效率(％)治疗组300163(54.33) 111(37.0) 26(8.67)274(91.33)对照组10034(34.0)39(39.0)27(27.0)73(73.0)两组总疗效经统计学处理，X2＝25.4013，P＜0.01，有显著性差异。
2.治疗前后中医主症变化见表9表9 两组治疗前后中医主症变化情况比较组别例数主症治疗前治疗后轻度(％)63(21.0) 189(63.0)治疗组 300中度(％)166(55.33)65(21.67)重度(％)71(23.67) 25(8.33)轻度(％)22(22.0) 53(53.0)对照组 100中度(％)52(52.0) 27(27.0)重度(％)26(26.0) 13(13.0)两组治疗前后中医主症轻、中、重度变化，经统计学处理，治疗组X2＝150.2018，P＜0.01；对照组X2＝32.0581，P＜0.01，两组均有显著性。
3.治疗前后兼证及体征变化见表10表10 两组治疗前后兼证及体征变化比较组别 例数 兼证及体征治疗前治疗后饮食减少 260(86.67) 72(24.0)浮肿 228(76.0) 57(19.0)治疗组300大便异常 147(49.0) 51(17.0)小便少 279(93.0) 27(9.0)饮食减少 87(87.0) 33(33.0)对照组100 浮肿 73(73.0) 30(30.0)大便异常 50(50.0) 24(24.0)小便少 92(92.0) 27(27.0)两组治疗前后兼证及体征变化，经统计学处理，治疗组X2＝209.7011，P＜0.01对照组X2＝44.2907，P＜0.01，两组均有显著性。
4.治疗前后体重、腹围、24h尿量变化见表11表11 治疗前后体重、腹围、24h尿量变化(x±s)组别例数主要体征治疗前治疗后t值P值体重(kg) 71.96±3.6262.55±4.043.16 ＜0.01治疗组 300 腹围(cm) 106.39±7.85 92.22±4.493.81 ＜0.01尿量(ml/24h) 539.68±86.9 1622±185.56.49 ＜0.01体重(kg) 70.88±3.7966.22±9.942.19 ＜0.05对照组 100 腹围(cm) 103.8±8.2196.11±6.052.06 ＜0.05尿量(ml/24h) 532.78±89.3 1149±221.54.14 ＜0.015、治疗前后肝功能变化见表12
表12 两组治疗前后肝功能变化(x±s)组别 例数 主要体征 治疗前治疗后 t值 P值ALT(IU/L) 87.29±2.61 69.91±3.072.85 ＜0.01治疗组300 TBIL(Umol/L) 47.03±1.66 26.39±2.093.62 ＜0.01A(白蛋白)(g/L)26.28±1.34 35.77±1.562.74 ＜0.01ALT(IU/L) 83.33±2.81 76.56±2.492.14 ＜0.05对照组100 TBIL(Umol/L) 43.94±2.01 37.09±2.262.39 ＜0.05A(白蛋白)(g/L)26.17±1.43 31.26±1.022.07 ＜0.05九、验证总结1.通过对臌症丸300例临床观察，证实该药具有利水消肿、除湿健脾之功效。临床适用于臌症，胸腹胀满、四肢浮肿、大便秘结、小便短赤等病症。通过临床观察，两组在疗效方面，治疗组显效率和总有效率分别为54.33％和91.33％，明显优于对照组34.0％和73.0％，经统计学处理均有显著性差异(P＜0.01)。2.臌症丸可以明显改善肝硬化腹水病人的腹胀、浮肿、尿少、大便异常等症状，病人用药后尿量增加，腹水逐渐消退，腹围变小，体重减少，肝功能及各主证和兼证都有改善。两组比较各病情变化都明显优于服用安体舒通的对照组病人。3.临床观察的患者在用药前后均经必要的安全性理化检查，结果未见任何异常。患者在服药期间及用药后，亦未发现严重的毒副作用和不良反应。
下列实施例均能实现上述实验例的效果。实施例1 丸剂皂矾(醋制)200g 甘遂20g 大枣(去核炒)200g木香20g 小麦(炒)100g以上五味，粉碎成细粉，过筛，混匀；用热水合坨制丸，60℃以下干燥，包糖衣，即得，每10粒重1.3g。饭前服，一次10粒，一日3次，儿童酌减。不可与甘草同服，忌食盐与荞麦面。实施例2 胶囊剂皂矾230g 甘遂23g大枣180g木香23g小麦80g胶囊剂制法以上五味，粉碎成细粉，过筛，混匀；装胶囊即得，每粒重0.4g。饭前服，一次3粒，一日3次，儿童酌减。不可与甘草同服，忌食盐与荞麦面。实施例3 颗粒剂皂矾180g 甘遂18g大枣230g木香18g小麦120g颗粒剂制法以上五味，水煎煮2次，滤过，合并滤液，浓缩成膏，加入辅料，混匀，制粒，干燥，包装即得，每袋3-5g。饭前服用，一次1袋，一日3次，儿童酌减。不可与甘草同服，忌食盐与荞麦面。实施例4 丸剂的鉴别质量控制方法a.取本品1g，除去糖衣，研细，加水10ml，煮沸10分钟，滤过，取滤液1ml，加铁氰化钾试液2-3滴，即生成蓝色沉淀，分离，沉淀在稀盐酸中不溶解，加氢氧化钠试液，呈棕色沉淀；b.取本品15g，研细，加60-90℃石油醚50ml，浸渍30分钟，超声处理30分钟，滤过，滤液挥干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取木香对照药材0.5g，加醋酸乙酯10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以10∶1环己烷一丙酮为展开剂，展开，取出晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，至板面完全湿润；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；c.取本品20g，研细，加乙醇60ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用醋酸乙酯提取三次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘遂对照药材2g，加乙醇40ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药2000年版一部附录V1B)试验，吸取供试品溶液10μl、对照药材溶液2μl，分别点于同一以羧甲基纤维钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以20∶2∶1氯仿-醋酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
权利要求
1.治疗臌胀症的中药物组合物，其特征在于该药物组合物是由下述原料药制成的皂矾150-250重量份甘遂15-25重量份大枣150-250重量份木香15-25重量份 小麦60-130重量份。
2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物是由下述原料药制成的皂矾230重量份甘遂23重量份大枣180重量份木香23重量份小麦80重量份。
3.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物是由下述原料药制成的皂矾180重量份甘遂18重量份大枣230重量份木香18重量份小麦120重量份。
4.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物是由下述原料药制成的皂矾200重量份甘遂20重量份大枣200重量份木香20重量份小麦100重量份。
5.如权利要求1、2、3或4所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物中皂矾生用，大枣去核炒，小麦为炒小麦。
6.如权利要求5所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物还可加入赋型剂制成临床可接受的剂型。
7.如权利要求6所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法为以上五味，粉碎成细粉，过筛，混匀；用热水合坨制丸，60-70℃以下干燥，最后经过常规工序直接或加入药学上可接受的赋型剂制成临床可接受的剂型，如丸剂、片剂、口服液体制剂、胶囊、颗粒剂。
8.如利要求6所述的药物组合物的质量控制方法，其特征在于该方法中的鉴别方法包括如下鉴别中的一种或几种a.取本组合物制剂1g，研细，加水10ml，煮沸8-12分钟，滤过，取滤液1ml，加铁氰化钾试液2-3滴，即生成蓝色沉淀，分离，沉淀在稀盐酸中不溶解，加氢氧化钠试液，呈棕色沉淀；b.取本组合物制剂15g，研细，加60-90℃石油醚50ml，浸渍25-35分钟，超声处理25-35分钟，滤过，滤液挥干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取木香对照药材0.5g，加醋酸乙酯10ml，超声处理25-35分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以8-12∶0.5-1.5环己烷一丙酮为展开剂，展开，取出晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，至板面完全湿润；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；c.取本组合物制剂20g，研细，加乙醇60ml，加热回流0.5-2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用醋酸乙酯提取三次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘遂对照药材2g，加乙醇40ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药2000年版一部附录V1B)试验，吸取供试品溶液10μl、对照药材溶液2μl，分别点于同一以羧甲基纤维钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以18-25∶1-3∶1.5-1.5氯仿-醋酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
9.如利要求8所述的药物组合物的质量控制方法，其特征在于该方法中用于丸剂的鉴别方法包括如下鉴别中的一种或几种a.取丸剂1g，除去糖衣，研细，加水10ml，煮沸10分钟，滤过，取滤液1ml，加铁氰化钾试液2-3滴，即生成蓝色沉淀，分离，沉淀在稀盐酸中不溶解，加氢氧化钠试液，呈棕色沉淀；b.取丸剂15g，研细，加60-90℃石油醚50ml，浸渍30分钟，超声处理30分钟，滤过，滤液挥干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取木香对照药材0.5g，加醋酸乙酯10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以10∶1环己烷一丙酮为展开剂，展开，取出晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，至板面完全湿润；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；c.取丸剂20g，研细，加乙醇60ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用醋酸乙酯提取三次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘遂对照药材2g，加乙醇40ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药2000年版一部附录V1B)试验，吸取供试品溶液10μl、对照药材溶液2μl，分别点于同一以羧甲基纤维钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以20∶2∶1氯仿-醋酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
全文摘要
本发明公开了一种治疗臌胀症的中药组合物及其制备方法和质量控制方法；该组合物由皂矾、甘遂、大枣、木香、小麦五味药材组成；该中药组合物制备时碎成细粉，过筛，混匀；用热水合坨制丸，60－70℃以下干燥，最后经过常规工序直接或加入药学上可接受的赋型剂制成临床可接受的剂型，同时本发明还提供了对该组合物进行成分鉴别的质量控制方法；本组合物在治疗臌胀症中，具有很好利水消肿、除湿健脾功效。
文档编号A61P43/00GK1440772SQ03109399
公开日2003年9月10日 申请日期2003年4月8日 优先权日2003年4月8日
发明者陈致慜, 李春雷, 霍志金 申请人:邯郸制药有限公司