专利名称：灯盏花素脂质体及其制备方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，确切地说它是一种灯盏花素脂质体(包括前体脂质体)及其制备方法。
背景技术：
灯盏花素是从中草药灯盏花[Erigeron breriscapus(vant)Handmazz]中提取分离的黄酮类有效成分，在治疗脑血栓形成、脑梗塞、中风后瘫痪、冠心病心绞痛等心脑血管疾病上有非常显著的效果，大量临床研究表明，其治疗效果显著优于复方丹参。药理研究表明，灯盏花素具有扩张脑血管、舒张冠状动脉的作用，能降低脑血管阻力，提高血脂屏障通透性，显著增加脑血流量和心脏冠脉流量，改善微循环并有对抗血小板聚集，抑制体内凝血功能，促进纤溶活性。临床上主要用来治疗脑血栓形成、脑梗塞、冠心病和心绞痛等心脑血管疾病，疗效确切。
但灯盏花素口服生物利用度低。灯盏花素为灯盏花乙素为主和含有少量灯盏花甲素的混合物，灯盏花乙素的化学结构为4’，5，6-三羟基黄酮-7-葡萄糖醛酸苷，含有一个羧基，口服时在胃和小肠中主要以洲离的分子形式存在而难以溶解，造成吸收差，生物利用度低。有专利(公开号CN1228959)将灯盏花素制成软胶囊，速溶片(公开号CN12552277A)和磷脂复合物(公开号CN1359682A)，改善灯盏花素的溶出速度。灯盏花素注射剂稳定性差，易缓慢水解、氧化和沉淀，较难解决澄明度差或易变的问题。为提高稳定性，有专利(公开号CN118356)在注射液处方中加入亚硫酸氢钠等抗氧剂。也有专利(公开号CN1133180)注射用灯盏花素冻干剂及制备工艺；公开号CN1095934灯盏花素粉针剂及制备方法)将灯盏花素制成冻干粉针。而将灯盏花素制成脂质体和前体脂质体未见报道。
发明内容
本发明的目的是提供灯盏花素脂质体和前体脂质体及其制备方法，以改善灯盏花素口服吸收差，生物利用度低；灯盏花素注射剂稳定性差的缺陷。同时，作为膜材的磷脂，本身无毒，而且能增强人体免疫力，具有许多保健功能。大量研究证明，磷脂可降低血清胆固醇、甘油三酯含量，预防动脉硬化并可清扫血管使其柔软，能显著减轻动脉粥状硬化及心肌缺血——再灌注损伤程度，清除动脉硬化引发的心脑血管疾病等多种慢性病变的诱发因素。因此磷脂对心脑血管疾病有积极的预防治疗作用，将灯盏花素制成脂质体，磷脂能与灯盏花素发挥协同和辅助治疗作用。增加灯盏花素对心脑血管疾病的疗效。
本发明是由灯盏花素与磷脂加胆固醇(也可不加胆固醇)等辅料制备而成的脂质体(含纳米脂质体)。制备方法可以采用前体脂质体法、乙醇注入法、薄膜分散法、反相蒸发法、pH梯度法、挤出法、机械法(包括使用均质机、乳匀机、高压乳匀机、挤出仪、纳米机、匀浆机、高压微射流等各种机械设备制备脂质体的方法)等制备脂质体和纳米脂质体的各种方法。制备脂质体的磷脂，可以是大豆卵磷脂、氢化大豆磷脂，也可以是合成磷脂，由乙醇注入法、薄膜分散法、反相蒸发法、挤出法、机械法制备灯盏花素脂质体，其组成包括灯盏花素和磷脂、胆固醇、VE等辅料。其中磷脂与灯盏花素的重量比为0.1∶1～50∶1，胆固醇与磷脂的重量比为0～2∶1。
通过前体脂质体法制备脂质体的处方为灯盏花素、支持剂、磷脂、胆固醇、VE等。磷脂与灯盏花素的重量比为0.1∶1～50∶1，胆固醇与磷脂的重量比为0～2∶1，支持剂与磷脂的比例为0.01∶1～500∶1。支持剂可以是山梨醇、甘露醇、蔗糖、氯化钠、水溶性淀粉、右旋糖苷、甜菊糖、葡萄糖、乳糖等所用可用于冻干支持剂的药用材料或药用辅料。制备前体脂质体的方法，可以采用减压旋转薄膜法、喷雾干燥法、流化床法或冻干法等各种造粒方法和干燥及包衣方法。前体脂质体使用前加水或缓冲液通过振摇、搅拌、超声水化形成脂质体，或制备成胶囊剂、片剂、颗粒剂等。在消化道中遇水直接自发形成脂质体。
用灯盏花素脂质体(或前体脂质体)可以制成口服液、口服乳、胶囊剂、片剂、颗粒剂、注射液、冻干粉针、输液乳剂、微乳剂、粉针剂等剂型。
本发明的优点是改善了灯盏花素口服吸收差，生物利用度低的不足，提高了灯盏花素注射剂的稳定性，利用磷脂作膜材，将灯盏花素制成脂质体，磷脂能与灯盏花素发挥协同和辅助作用，提高灯盏花素对心脑血管疾病的疗效。
具体实施例方式本发明的具体制备方法，由下列实施实例举例说明，但本发明的保护范围，不局限于此。
实施例1乙醇注入法制备灯盏花素脂质体取大豆磷脂，胆固醇，VE加无水乙醇溶解后注入灯盏花素水溶液中，恒温高速搅拌，减压蒸发除去乙醇，过微孔滤膜整粒，即得灯盏花素脂质体，包封率为64.8％。
实施例2薄膜分散法制备灯盏花素脂质体取大豆磷脂，胆固醇，VE用15ml氯仿溶解于150ml茄形瓶中，在旋转薄膜蒸发器上减压成膜并除尽有机溶剂，加10ml灯盏花素水溶液水化，过微孔滤膜整粒，得灯盏花素脂质体，包封率为59.2％。
实施例3反相蒸发法制备灯盏花素脂质体称取大豆磷脂、胆固醇、VE加5ml氯仿使溶解，再加入10ml乙醚，然后加入15ml灯盏花素的磷酸盐缓冲液中，浴式超声使形成均一单相体系，减压蒸发去除氯仿乙醚至凝胶形成，继续减压蒸发5～10分钟，涡旋振荡至水性悬浊液即脂质体形成。包封率为24.6％。
实施例4减压旋转薄膜法制备灯盏花素前体脂质体取山梨醇和灯盏花素以等量递加法混合均匀后置于100ml茄形瓶中，于一经改良的旋转蒸发仪上减压预热30min，取大豆磷脂、胆固醇、VE适量溶于乙醇中，分批加入磷脂的乙醇液，真空旋转蒸发。在乙醇液全部加完后继续减压蒸发30～40min，将粉末取出置于干燥器中过夜后过筛(40目，450μm)，即得灯盏花素前体脂质体。包封率为21.9％。
实施例5流化床法制备灯盏花素前体脂质体山梨醇和灯盏花素以等量递加法混合均匀后置于流化床中，取大豆磷脂、胆固醇、VE适量溶于无水乙醇中，通过流化床沸腾一步制粒，过筛，即得灯盏花素前体脂质体。
实施例6流化床法制备灯盏花素前体脂质体灯盏花素加蒸馏水，再加0.1N NaOH调pH使溶解，用蒸馏水调整体积(A液)；另取大豆磷脂、胆，固醇、VE溶于无水乙醇中(B液)，将B液在搅拌下缓慢加入A液中，喷于流化床中的乳糖中，通过流化床沸腾一步制粒，过20目和60目筛，即得灯盏花素前体脂质体颗粒。流化床沸腾制粒条件，仪器；日本产FD-MP-01型粉末包衣机。
实施例7喷雾干燥法制备灯盏花素前体脂质体灯盏花素加水，0.1N NaOH调pH使溶解，加入乳糖和EDTA并使溶解(A液)。另取大豆磷脂、胆固醇、VE溶于100ml无水乙醇中(B液)。将B液在搅拌下缓慢加入A液中，喷雾干燥制粒，过筛，即得灯盏花素胶体脂质体。
实施例8喷雾干燥法制备灯盏花素前体脂质体乙醇注入法、薄膜分散法制备的脂质体，喷雾干燥，即得灯盂花素前体脂质体。
实施例9由前体脂质体制备灯盏花素脂质体取实施例7制得的前体脂质体2g，加水10ml振摇10min水化，即得灯盏花素脂质体，显微镜放大1000倍观察可看到脂质体。
实施例10冷冻干燥法制备灯盏花素前体脂质体大豆磷脂、胆固醇，适量VE加无水乙醇溶解后在高速搅拌缓慢注入灯盏花素水溶液中，减压蒸发除去乙醇。冷冻干燥24小时，得灯盏花素前体脂质体。
实施例11将灯盏花素脂质体过0.22μm微孔滤膜灭菌，充N2，灌封，得灯盏花素脂质体注射液。
实施例12将灯盏花素脂质体加入10％蔗糖，过0.22μm微孔滤膜灭菌，分装，冷冻干燥，得粉针剂。
实施例13将灯盏花素前体脂质体过筛，分装，得灯盏花素脂质体颗粒剂。
实施例14将灯盏花素前体脂质体过筛，装胶囊，得灯盏花素脂质体胶囊剂。
实施例15将灯盏花素前体脂质体过筛，压片，得灯盏花素脂质体片剂。
权利要求
1.灯盏花素脂质体及其制备方法，其特征在于由灯盏花素与磷脂等辅料制备而成的脂质体或前体脂质体。
2.根据权利要求1所述的灯盏花素脂质体，其特征在于其中可以加入胆固醇和支持剂。
3.根据权利要求1所述的灯盏花素脂质体或前体脂质体，其特征在于膜材磷脂可以采用天然磷脂，也可以采用氢化大豆磷脂和合成磷脂等。
4.根据权利要求1所述的灯盏花素脂质体或前体脂质体，其特征在于磷脂与药物的重量比为0.1∶1～50∶1。
5.根据权利要求2所述的灯盏花素脂质体或前体脂质体，其特征在于支持剂可以山梨醇、甘露醇、蔗糖、氯化钠、水溶性淀粉、右旋糖苷、甜菊糖、葡萄糖、乳糖等，其中支持剂与磷脂的比例为0.01∶1～500∶1。
6.根据权利要求1所述的灯盏花素脂质体和前体脂质体，其特征在于用该脂质体或前体脂质体可制得胶囊剂、片剂、颗粒剂、注射液、口服液、冻干粉针、输液等剂型。
7.一种如权利要求1所述的灯盏花素脂质体的制备方法，其特征在于制备方法可以采用前体脂质体法、乙醇注入法、薄膜分散法、反相蒸发法、挤出法、机械法，pH梯度法等；机械法包括使用均质机、乳匀机、挤出仪、纳米机、匀浆机、高压微射流等各种机械设备制备脂质体的方法。
8.一种如权利要求7所述的灯盏花素前体脂质体的制备方法，其特征在于采用前体脂质体法制备灯盏花素脂质体，先制备前体脂质体，由制备的前体脂质体在使用前形成脂质体，或前体脂质体制备成胶囊剂、片剂、颗粒剂等，在消化道中遇水直接自发形成脂质体。
全文摘要
本发明是灯盏花素脂质体及其制备方法，它克服了灯盏花素口服吸收差，生物利用度低的缺点，提高了灯盏花素注射剂的稳定性。由灯盏花素与磷脂、胆固醇等辅料制备而成的脂质体或前体脂质体，其中还可加入支持剂等辅料。膜材磷脂可以采用天然磷脂或合成磷脂，磷脂与药物的重量比为0.1∶1～50∶1。制备方法可以采用乙醇注入法、薄膜分散法、反相蒸发法、挤出法、机械法，支持剂可以是山梨醇、甘露醇、蔗糖、氯化钠、水溶性淀粉、右旋糖苷、甜菊糖、葡萄糖、乳糖等。支持剂与磷脂的比例为0.01∶1～500∶1。本发明可用于制备治疗脑血栓、冠心病等心脑血管疾病的药物。
文档编号A61K31/7042GK1444948SQ03111469
公开日2003年10月1日 申请日期2003年4月16日 优先权日2003年4月16日
发明者邓英杰, 钟海军 申请人:沈阳药科大学