专利名称：( 2 S )－N－5－[氨基(亚氨基)甲基]－2－噻吩基甲基－1－( 2 R ) －2－[(羧甲基 ...的制作方法
技术领域：
本发明涉及下式(1)表示的(2S)-N-5-[氨基(亚氨基)甲基]-2-噻吩基甲基-1-(2R)-2-[(羧甲基)氨基1-3，3-二苯基丙酰-2-吡咯烷甲酰胺·nH2O的新晶形[式1] 其中，n是每个分子化合水的数目并且表示0、1、3、4、6或7.5。
背景技术：
式(1)的游离化合物，即，没有对它添加酸的化合物，及其药物上可接受的盐、水合物、溶剂合物和异构体都是韩国专利公开发布No.2000-047461和WO 0039124的主题，而且可有效地用作新的凝血酶抑制剂。
药物的物理性质对它的原药的生产和开发过程以及它的终产品的开发过程具有重大影响。药物可根据它的结晶性大致分为晶形和无定形。一些药物既可呈晶形又可呈无定形获得，而其它药物只能以晶形或无定形获得。晶形和无定形可能在物理化学性质方面表现出大的差异。例如，有一个报导关于某些药物的经口吸收率或生物利用度不同是因为溶解度和溶出度不同，它们取决于药物是晶形还是无定形(参见，PharmaceuticalSolidsA Strategic Approach to Regulatory Considerations，Stephen Byrn等，Pharmaceutical Research，945，12(7)，1995)。药物的生物利用度与它的效果和副作用直接相关。换句话说，为了获得药物的所需效果，应当达到一定的所需血液浓度。如果血液浓度变得过高，就伴随副作用或毒性。生物利用度可通过选定合适的晶形来改善。于是，应当在药物的开发和审批过程中鉴定药物的晶形。
除了特别的情况以外，在药物的研究和开发过程中容易获得具有结晶性的药物。一个报导表明，药物的结晶性可能是一个重要的优点，因为在生产药物的最后步骤中，药物可能是通过重结晶单纯地获得的，重结晶是一种较容易的纯化方法，而且具有结晶性的药物，它的物理化学性质可轻易鉴定，甚至在它的生产过程的质量控制中也是有利的(参见，An integrated approach to the selection of optimal salt form for a newdrug candidate，Abu T.M.Serajuddin等，International Journal ofPharmaceutics，209，105，1994)。另一方面，一些具有结晶性的药物可能具有多晶型。一篇文章报导了，一般说来，当药物的晶体结构不同时，它的溶解度或其它物理性质可能不同，而且药物的晶形可能在一定条件下改变[Pharmaceutical SolidsA Strategic Approach to RegulatoryConsiderations，Stephen Byrn等，Pharmaceutical Research，945，12(7)，1995]。所以，当药物具有多晶型时，在药物的开发和生产中，单纯地获得药物的所有晶形和发现各晶形的物理性质都是很重要的。
发明概述因此，本发明人通过从上述式(1)的游离化合物获得各种晶形并鉴定它们的物理性质而发现了适用作凝血酶抑制剂的晶形。
所以，本发明的目的是提供下式(1)表示的(2S)-N-5-[氨基(亚氨基)甲基]2-噻吩基甲基-1-(2R)-2-[(羧甲基)氨基]-3，3-二苯基丙酰-2-吡咯烷甲酰胺·nH2O的晶形[式1]
其中，n是每个分子化合水的数目并且表示0、1、3、4、6或7.5。
附图简述
图1是(2S)-N-5-[氨基(亚氨基)甲基]-2-噻吩基甲基-1-(2R)-2-[(羧甲基)氨基]-3，3-二苯基丙酰-2-吡咯烷甲酰胺的晶形I的粉末X射线衍射图。
图2是(2S)-N-5-[氨基(亚氨基)甲基]-2-噻吩基甲基-1-(2R)-2-[(羧甲基)氨基]-3，3-二苯基丙酰-2-吡咯烷甲酰胺的晶形II的粉末X射线衍射图。
图3是(2S)-N-5-[氨基(亚氨基)甲基]-2-噻吩基甲基-1-(2R)-2-[(羧甲基)氨基]-3，3-二苯基丙酰-2-吡咯烷甲酰胺的晶形III的粉末X射线衍射图。
图4是(2S)-N-5-[氨基(亚氨基)甲基]-2-噻吩基甲基-1-(2R)-2-[(羧甲基)氨基]-3，3-二苯基丙酰-2-吡咯烷甲酰胺的晶形IV的粉末X射线衍射图。
图5是(2S)-N-5-[氨基(亚氨基)甲基]-2-噻吩基甲基-1-(2R)-2-[(羧甲基)氨基]-3，3-二苯基丙酰-2-吡咯烷甲酰胺的晶形V的粉末X射线衍射图。
图6是(2S)-N-5-[氨基(亚氨基)甲基]-2-噻吩基甲基-1-(2R)-2-[(羧甲基)氨基]-3，3-二苯基丙酰-2-吡咯烷甲酰胺的晶形VI的粉末X射线衍射图。
详细描述上式(1)的游离化合物可根据已知方法制备(参见韩国专利公开发布No.2000-047461和WO 0039124)。
从上述游离化合物或其它晶形获得的本发明式(1)的多种晶形呈脱水物或具有不同的化合水的水合物形式存在。优选地，根据重结晶方法和化合水的数目，可获得晶形I(n＝7.5)、晶形II(n＝4)、晶形III(n＝6)、晶形IV(n＝3)、晶形V(n＝0)和晶形VI(n＝1)。例如，可通过将式(1)的游离化合物在加热下溶于水和甲醇或乙醇的混合溶剂再将它重结晶而获得晶形IV。
晶形V可通过真空干燥晶形IV获得。晶形VI可通过晶形V的水分吸收获得。然而，晶形I可通过在水中搅拌晶形VI获得。晶形II可通过真空干燥晶形I获得。而且，晶形III可通过晶形II的水分吸收获得。由于上述游离化合物的分子量是533.65，式(1)的这些水合物的理论水含量对于其中n分别是0、1、3、4、6和7.5的式(1)的水合物来说分别是0、3.3、9.2、11.9、16.8和20.2％。但是，通常的情况是，实际获得的样品的水含量偏离上述理论值，这取决于制备时的干燥条件和干燥时间，表面吸收的表面水分的量等。所以，其中n是0的式(1)的水合物(即，式(1)的脱水物)水含量可能是0～3％，其中n是1的水合物的水含量可能是2～9％，其中n是3的水合物的水含量可能是4～11％，其中n是4的水合物的水含量可能是9～15％，其中n是6的水合物的水含量可能是12～20％，而且其中n是7.5的水合物的水含量可能是16～26％。于是，为鉴定式(1)的晶形，就应当鉴定水含量，进行粉末X射线衍射检验。
可通过粉末X射线衍射检验时所示的特征峰辨别各晶形。例如，如表1、2、4、5、6和7所示，晶形I在7.3°、9.1°、18.0°和28.8°处，晶形II在7.0°、12.2°、19.2°和20.0°处，晶形III在10.6°、19.4°、20.9°、21.6°和24.4°处，晶形IV在10.0°、16.7°、20.8°、21.9°和26.0°处，晶形V在15.8°、18.3°、20.3°、20.8°和26.5°处，晶形VI在13.6°、14.7°、23.2°和27.5°处具有不同于其它晶形的特征峰。此外，如图1～6中所示，在粉末X射线衍射图中可以确定的是，上述各晶形彼此具有不同的晶体结构。
一种晶形可能随贮存条件例如相对湿度等而改变。所以，重要的是确定晶形随贮存条件的稳定性。在上述晶形中，晶形VI被鉴定为稳定的水合物，它的晶体结构在任何相对湿度下都不改变。
卡尔-费歇尔滴定法被广泛用来测定样品中的水含量(参见，Quantitative Chemical Analysis，第4版，I.M.Koltmoff等，858，TheMacmman Company，1969)。当将卡尔-费歇尔滴定法应用于上述晶形时，证实晶形VI的水含量是3.5％，它对应于式(1)的n是1时水分子的重量比。另一方面，证实了晶形I的水含量是20.2％，它对应于式(1)的n是7.5时水分子的重量比。
即使将样品真空干燥也不能完全除去样品中包含的水分。为了完全除去水分，应当在真空下将各种干燥剂与样品一起放置。各种干燥剂都可用于本发明硫酸钙、硫酸钠、氯化钙等。应用最广的干燥剂是P2O5(参见，MIT Laboratory techniques manual，MIT dept.ofChemistry，1043，1979)。如果在P2O5用作干燥剂的干燥器中将晶形I真空干燥，就可除去该晶形中包含的水分。于是，通过粉末X射线衍射检验证实该晶形改变了，而且改变后的晶形被鉴定为晶形II。晶形II通过吸附水分而变得稳定，而且它的水含量是10.8％，它对应于4个水分子的重量比。如果将晶形II放置在高相对湿度中，该晶形就变成晶形III，而且它的水含量是16.9％，它对应于6个水分子的重量比。
从上述结果可见，晶形I、晶形II和晶形III分别是其中n是7.5、4和6的水合物。
重结晶应用的溶剂可以是通常可获得类别的醇，它们是具有1～8个碳原子的链烷醇，例如甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、异丙醇和辛醇等，但是甲醇和乙醇是优选的，而且甲醇是最优选的，但不限于它们。此外，作为用来将上述游离化合物重结晶的溶剂，除了上述列举的醇以外，还可应用水和有机溶剂，例如正己烷、乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙腈、氯仿、乙醚、丙酮等，以及其它通常可获得的溶剂。通过利用上述一种溶剂或呈混合物形式的一种以上溶剂，可溶解或加热溶解上述游离化合物并且可重结晶。
如果将上述几种晶形溶于醇，在其中添加适当量的水，再将混合物重结晶，就可获得晶形IV-另一种晶形。X射线晶体结构法将该晶形鉴定为其中n是3的水合物。在P2O5存在下将晶形IV真空干燥而获得晶形V，它是脱水物。晶形V通过吸收水分而变成晶形VI。晶形VI具有3.5％水含量，而且是其中n是1的稳定水合物。
应力稳定性试验表明，上述式(1)化合物的晶形在物理化学上比无定形更稳定。无定形显示，在4周的贮存(特别是在70℃下)后，残余含量只有87％而且脱色。然而，晶形I和IV稳定而不脱色。
如韩国专利公开发布No.2000-047461和WO 0039124所公开的，本发明的式(1)的游离化合物被有效地用作凝血酶抑制剂。所以，它的晶形也适用作凝血酶抑制剂。
下面，将参照如下实施例、对比实施例和检验实施例更详细地解释本发明。但是应懂得，这些实施例是作为本发明优选的特定实施方案描述的，而不希望以任何方式限制本发明的范围。本发明的其它方面对于本发明所属领域的技术人员而言是显而易见的。
实施例实施例1(2S)-N-5-[氨基(亚氨基)甲基]-2-噻吩基甲基-1-(2R)-2-[(羧甲基)氨基]-3，3-二苯基丙酰-2-吡咯烷甲酰胺的晶形II的制备在P2O5存在下将下文的实施例8中制备的晶形I真空干燥一天，然后在75％相对湿度下放置一天而获得标题的晶形II。
实施例2(2S)-N-5-[氨基(亚氨基)甲基]-2-噻吩基甲基-1-(2R)-2-[(羧甲基)氨基]-3，3-二苯基丙酰-2-吡咯烷甲酰胺的晶形III的制备在93％相对湿度下将上述实施例1中制备的晶形II放置一天，然后取出并在64％相对湿度下放置一天而获得标题的晶形III。
实施例3(2S)-N-5-[氨基(亚氨基)甲基]-2-噻吩基甲基-1-(2R)-2-[(羧甲基)氨基]-3，3-二苯基丙酰-2-吡咯烷甲酰胺的晶形IV(1)的制备将(2S)-N-5-[氨基(亚氨基)甲基]-2-噻吩基甲基-1-(2R)-2-[(羧甲基)氨基]-3，3-二苯基丙酰-2-吡咯烷甲酰胺的游离化合物(1g)放入一个玻璃容器，然后在其中添加甲醇(5.0ml)。在搅拌下，将混合物加热而获得清亮的溶液。往该溶液中添加水(0.5ml)，随后在室温下冷却该溶液。从其中获得了白色晶体。将晶体过滤，再用水洗涤。将它们在空气中干燥(0.85g，产率85％)。
实施例4(2S)-N-5-[氨基(亚氨基)甲基]-2-噻吩基甲基-1-(2R)-2-[(羧甲基)氨基]-3，3-二苯基丙酰-2-吡咯烷甲酰胺的晶形IV(2)的制备将(2S)-N-5-[氨基(亚氨基)甲基]-2-噻吩基甲基-1-(2R)-2-[(羧甲基)氨基]-3，3-二苯基丙酰-2-吡咯烷甲酰胺的游离化合物(1g)放入一个玻璃容器，通过添加甲醇(6.0毫升)、水(1.5毫升)和6 N盐酸溶液(0.65毫升)使它溶解。随后，往其中添加10N氢氧化钠溶液(0.2毫升)并搅拌。又往其中添加10N氢氧化钠溶液(0.4毫升)后，将溶液在室温下放置而获得了白色针形晶体。将晶体过滤，用水洗涤，然后将它们在空气中干燥(0.8g，产率80％)。
实施例5(2S)-N-5-[氨基(亚氨基)甲基]-2-噻吩基甲基-1-(2R)-2-[(羧甲基)氨基]-3，3-二苯基丙酰-2-吡咯烷甲酰胺的晶形V的制备在P2O5存在下将实施例3或4中制备的晶形IV真空干燥一天而获得标题的晶形V。
实施例6(2S)-N-5-[氨基(亚氨基)甲基]-2-噻吩基甲基-1-(2R)-2-[(羧甲基)氨基]-3，3-二苯基丙酰-2-吡咯烷甲酰胺的晶形VI(1)的制备将实施例5中制备的晶形V在53％相对湿度下放置一天而获得标题的晶形VI。
实施例7(2S)-N-5-[氨基(亚氨基)甲基]-2-噻吩基甲基-1-(2R)-2-[(羧甲基)氨基]-3，3-二苯基丙酰-2-吡咯烷甲酰胺的晶形VI(2)的制备将实施例5中制备的晶形V放在一个玻璃容器中，将用水饱和的氮气通过该容器一小时而获得标题的晶形VI。
实施例8(2S)-N-5-[氨基(亚氨基)甲基]-2-噻吩基甲基-1-(2R)-2-[(羧甲基)氨基]-3，3-二苯基丙酰-2-吡咯烷甲酰胺的晶形I的制备将水加到除晶形I以外的所有晶形中，将混合物搅拌一小时或更久而获得标题的晶形I。
对比实施例1无定形(2S)-N-5-[氨基(亚氨基)甲基]-2-噻吩基甲基-1-(2R)-2-[(羧甲基)氨基]-3，3-二苯基丙酰-2-吡咯烷甲酰胺的制备在P2O5存在下将实施例2中获得的晶形III真空干燥两天而获得标题的无定形。
检验实施例1(2S)-N-5-[氨基(亚氨基)甲基]-2-噻吩基甲基-1-(2R)-2-[(羧甲基)氨基]-3，3-二苯基丙酰-2-吡咯烷甲酰胺的游离化合物的粉末X射线衍射检验分别将40mg在实施例8和实施例3或4中制备的晶形I和晶形IV薄薄地涂在持样器上，随后按下列条件进行粉末X射线衍射检验。通过利用Rigaku Geigeflex D/max-III C装置，在35kV、20mA下进行了检验。
扫描速度(2Θ)5°/分钟取样时间0.03sec扫描方式连续Cu-靶(Ni滤色片)对晶形I和晶形IV的粉末X射线衍射检验的结果示于图1和4。上述图中示出的峰位置列于表1和2。如各结果中所示，每种晶形具有不同的结晶度。
(2S)-N-5-[氨基(亚氨基)甲基]-2-噻吩基甲基-1-(2R)-2-[(羧甲基)氨基]-3，3-二苯基丙酰-2-吡咯烷甲酰胺的晶形I的粉末X射线衍射峰峰2Θ7.3197.819.11710.0210.80811.39713.0113.73214.19215.34616.0516.53918.00319.42520.0121.11121.83222.22622.80223.21224.36824.78125.28926.12926.69827.25727.56828.80229.63230.867[表2](2S)-N-5-[氨基(亚氨基)甲基]-2-噻吩基甲基-1-(2R)-2-[(羧甲基)氨基]-3，3-二苯基丙酰-2-吡咯烷甲酰胺的晶形IV的粉末X射线衍射峰峰2Θ8.9239.96610.84511.72712.39513.33513.84314.77815.59116.68617.81918.36418.8519.41919.87120.83521.9223.0623.61724.62925.0926.01726.74627.52227.87229.0433030.64931.547检验实施例2(2S)-N-5-[氨基(亚氨基)甲基]-2-噻吩基甲基-1-(2R)-2-[(羧甲基)氨基]-3，3-二苯基丙酰-2-吡咯烷甲酰胺的晶形I的吸湿和去湿过程中粉末X射线衍射检验将40mg上述晶形I薄薄地涂在持样器上。在P2O5存在下真空干燥样品后，而且在将样品分别放在33％、53％、64％、75％和93％的相对湿度下两天或更久后，立即就按上述检验实施例1中给出的条件对样品进行粉末X射线衍射检验以观察吸湿过程中晶形的变化。在降低相对湿度时，重复相同的检验以观察去湿过程中晶形的变化。
为了达到上述各相对湿度，如下表所示，配制了盐的饱和水溶液，然后放入保干器中，并且密封保干器。
真空干燥到75％相对湿度后立即显示的晶形II的粉末X射线衍射检验结果，以及在64％～33％相对湿度下去湿过程中显示的晶形III的粉末X射线衍射检验结果被分别提供在图2和图3中。图中示出的峰位置列于下表4和5中。各结果表明，各晶形具有不同的结晶度。
(2S)-N-5-[氨基(亚氨基)甲基]-2-噻吩基甲基-1-(2R)-2-[(羧甲基)氨基]-3，3-二苯基丙酰-2-吡咯烷甲酰胺的晶形II的粉末X射线衍射峰峰2Θ7.0127.8229.73910.60711.4312.1513.84115.1716.38417.12217.80219.19820.05220.95421.88222.6823.71324.83725.43825.90226.38728.04628.50128.93529.30429.85630.86631.40532.09833.016 (2S)-N-5-[氨基(亚氨基)甲基]-2-噻吩基甲基-1-(2R)-2-[(羧甲基)氨基]-3，3-二苯基丙酰-2-吡咯烷甲酰胺的晶形III的粉末X射线衍射峰峰2Θ7.3359.099.80810.60111.20311.76113.4415.24515.75519.38920.8621.62924.43626.23627.15929.12329.7330.763检验实施例3(2S)-N-5-[氨基(亚氨基)甲基]-2-噻吩基甲基-1-(2R)-2-[(羧甲基)氨基]-3，3-二苯基丙酰-2-吡咯烷甲酰胺的晶形IV的吸湿和去湿过程中粉末X射线衍射检验将40mg上述晶形IV薄薄地涂在持样器上。在P2O5存在下真空干燥样品后，而且在将样品分别放在33％、53％、64％、75％和93％的相对湿度下吸湿两天或更久后，立即按上述检验实施例1中给出的条件进行样品的粉末X射线衍射检验以观察吸湿过程中晶形的变化。在降低相对湿度时，重复相同的检验以观察去湿过程中晶形的变化。
为了达到上述各相对湿度，如检验实施例2的表3中所示，配制了盐的饱和水溶液，然后放入保干器中，并且密封保干器。
分别在图5和6中提供了真空干燥后立即显示的晶形V的粉末X射线衍射检验结果和开始吸湿后显示的晶形VI的粉末X射线衍射检验结果。图中示出的峰位置列于下表6和7中。各结果表明，各晶形具有不同的结晶度。
(2S)-N-5-[氨基(亚氨基)甲基]-2-噻吩基甲基-1-(2R)-2-[(羧甲基)氨基]-3，3-二苯基丙酰-2-吡咯烷甲酰胺的晶形V的粉末X射线衍射峰峰2Θ8.7399.87810.78911.71612.45113.96514.56715.36815.85817.09317.75718.29619.67420.31920.79922.22723.11223.74224.59625.87326.45827.50227.93528.6829.358 (2S)-N-5-[氨基(亚氨基)甲基]-2-噻吩基甲基-1-(2R)-2-[(羧甲基)氨基]-3，3-二苯基丙酰-2-吡咯烷甲酰胺的晶形VI的粉末X射线衍射峰峰2Θ8.0428.71810.23110.7811.66812.44513.5614.68215.22215.86416.517.08417.81418.69819.22519.65920.32721.1422.54123.24624.65625.27525.8626.63627.45328.58429.14729.75530.793检验实施例4.关于无定形以及晶形I和晶形VI的应力稳定性试验为了对比实施例7、8和对比实施例1中制备的晶形VI、晶形I和无定形的物理化学稳定性，通过将它们的样品放在-20℃、50℃和70℃的温度下达4周而进行了应力稳定性试验。将结果归纳于下表8中。
工业适用性如上述结果所示，晶形I和晶形VI表现出比无定形显著优越的稳定性。无定形在-20℃和50℃不表现任何外观变化，但是在4周后显示96％的残余率。在70℃下，无定形显示87％的残余率和外观的变化。因此，可见本发明的晶形表现出比无定形优越的物理化学稳定性。
权利要求
1.下式(1)表示的(2S)-N-5-[氨基(亚氨基)甲基]-2-噻吩基甲基-1-(2R)-2-[(羧甲基)氨基]-3，3-二苯基丙酰-2-吡咯烷甲酰胺·nH2O的晶形[式1] 其中，n是每个分子化合水的数目并且表示0、1、3、4、6或7.5。
2.权利要求1的晶形，其中，n表示1。
3.权利要求1或权利要求2的晶形，其中，X射线衍射角是13.6°、14.7°、23.2°和27.5°。
4.权利要求1的晶形，其中，水含量是2～9％。
5.权利要求1的晶形，其中，n表示4。
6.权利要求1或权利要求5的晶形，其中，X射线衍射角是7.0°、12.2°和19.2°。
7.权利要求1的晶形，其中，水含量是9～15％。
8.权利要求1的晶形，其中，n表示7.5。
9.权利要求1或权利要求8的晶形，其中，X射线衍射角是7.3°、9.1°、18.0°和28.8°。
10.权利要求1的晶形，其中，水含量是16～26％。
全文摘要
本发明涉及(2S)－N－5－[氨基(亚氨基)甲基]－2－噻吩基甲基－1－(2R)－2－[(羧甲基)氨基]－3，3－二苯基丙酰－2－吡咯烷甲酰胺·nH
文档编号A61P7/02GK1642947SQ03806694
公开日2005年7月20日 申请日期2003年3月21日 优先权日2002年3月22日
发明者金爱梨, 朴宰玄, 尹奭均, 金奉赞, 金城智, 赵官衡 申请人:株式会社Lg生命科学