Δ9四氢大麻酚的制备的制作方法

专利名称：Δ9四氢大麻酚的制备的制作方法
技术领域：
本发明涉及Δ9四氢大麻酚(Δ9 THC)的制备，特别是涉及其从植物材料中的萃取和其纯化方法，以及含有萃取和纯化的Δ9 THC的组合物和药物组合物。
大麻类素(cannabinoids)是一类天然存在的唯一可从大麻中提出的C21萜酚化合物。马力求那(Marijuana)通常是指大麻(Cannabissativa)母本植株的叶与花序的混合物，从中可分离出四氢大麻酚(THC)。根据双键的位置不同，THC包含两种主要的同分异构形式。这些THC中双键的位置和立体化学已经通过核磁共振和X射线结构得以证实。
多年来THC已被用作幻觉剂，引起幻觉的活性主要归因于Δ9THC(比Δ8-THC大20倍)。在市场上销售的Δ9 THC如Marinol，是为遭受到严重的与癌症的化学疗法有关的恶心和呕吐的病人开的处方药。
存在于大麻中的大部分与Δ9-及Δ8-THC不同的大麻类素是大麻酚(CBN)，大麻二酚(CBD)和Δ9 THC羧酸，后者根据羧基的位置有两种不同的存在形式。大麻二酚(CBD)可能大量地存在于大麻中，但是其几乎没有活性。
大麻的主要组分是Δ9 THC羧酸，它们以两种同分异构形式存在，THCA-A和THCA-B，两者都无致幻活性。当在存储和迅速暴露于热量下(例如当抽烟)时，它可以转变为具有活性的组分Δ9 THC。在新鲜的干燥的马力求那中，95％的大麻类素以THCA-A的形式存在。由于羟基和羧基之间的氢键作用，THCA-A的极性低于THCA-B。由于存在氢键作用，所以只有THCA-A可以很容易地脱羧形成Δ9 THC。
已经知道，可使用乙醇或者乙醇和水的混合物从大麻植物材料中萃取活性成分。萃取物一般包含大量的Δ9 THC和Δ9 THC羧酸，通过在乙醇中回流大麻萃取物而将该酸转化为Δ9 THC。然后纯化Δ9 THC。
但在这一萃取和纯化工艺中却存在许多难点。
首先，针对被称为屈大麻酚的包含Δ9 THC的药物组合物，在USP技术规范规定了大麻类素的最大杂质含量。按照常规方法从大麻中萃取活性成分的步骤会萃取出许多难以从成品中脱除的杂质，因此，为满足USP的要求，需要许多纯化步骤，包括昂贵的柱层析。
现有的方法依赖于蒸馏/回流步骤来把酸转化为活性成分。这一步骤在高温和低真空下进行，相当耗时，且会导致一些活性成分损失。
当萃取了活性成分时，植物材料不可避免地会成为萃取物的组成部分，其结果是具有焦油状的稠度且难以处理。此外，焦油状的植物材料毫无疑问必须脱除，否则它将可能严重地阻碍后面的纯化步骤。
从植物材料中萃取THC的其它方法也是已知的。当植物材料的THC含量高时，将植物材料加热使THC脱羧。当植物材料中THC含量低时，用石油醚或者苯在碱性条件(pH＝13.9)下，在亚硫酸钠的存在下萃取非活性的大麻二醇酸，酸化并用乙醚/氯仿萃取。使用不确定的溶剂例如石油醚的问题在于不能进行工艺控制，因此，杂质含量高。将这样得到的大麻二醇酸混合物酯化并在碱性条件下脱羧。
Tetrahedron(1965)第21卷，1223-1229页描述了在碱性条件(pH＝13.5)下使用石油醚从大麻粉中进行萃取的方法。使用乙醚/氯仿萃取出THC-酸的混合物粗品。在THC-酸萃取到醚中时涉及到的问题是，杂质，特别是大麻二酚与酸一起被萃取出来。然后，将THC-酸酯化，并通过在碱性条件下加热将大麻酚酸甲酯脱羧，形成THC。
Pharm.Weekblad(1972)第107卷，415-416页也描述了使用己烷在pH＝13.5条件下从大麻粉中进行萃取的方法。使用的这一萃取法形成三层——己烷层和水层被包含有尤其是大麻类酸的中间油层分离开来。这一中间油层包含有诸如大麻二酚的杂质，并形成粘性胶质，倾向于附着在分离器的壁上，这使得相分离很困难。将油层和水层合并用乙醚萃取。随后使用硅胶柱除去植物材料。
因此，本发明的目的在于提供另外一种制备Δ9 THC的方法，其包括另外的萃取方法和另外的纯化方法，该方法克服了本领域的困难。本发明特定实施方案的目的在于提供一种收率增加和/或最终产品中杂质减少的制备方法。本发明特定实施方案的另一个目的在于提供一种改进的用较少和/或较简单的步骤得到最终产品的制备方法。
因此，本发明提供一种制备Δ9 THC的方法，其中，从植物材料中萃取出Δ9 THC羧酸，然后将其转化为Δ9 THC，得到的活性成分其杂质含量要比现有技术的杂质含量低。优选，Δ9 THC羧酸在脱羧之前纯化，纯化的物质需要较少的另外的步骤来获得满足USP要求的产品。
在本发明的第一方面，制备Δ9 THC的方法包括从植物材料中萃取Δ9 THC和Δ9 THC羧酸，形成Δ9 THC羧酸的盐，并使用溶剂萃取该盐，其中所述溶剂相对于Δ9 THC来说优先溶解所述盐。
本发明的一个优点是大麻酚和大麻二酚(先有技术制备过程中主要的杂质)倾向于显示出Δ9 THC的溶解度分布图。因此，使用相对于Δ9 THC来说优先溶解Δ9 THC羧酸盐的溶剂将萃取出大部分Δ9 THC羧酸(以盐的形式)，而优先留下这些杂质。这一萃取方法也将Δ9 THC留下，但是因为Δ9 THC仅占所考虑的可萃取物质的一小部分，因此，可以将其牺牲以便使最初萃取的产品含有提高纯度的酸，这种酸反过来可以转化为具有提高纯度的Δ9 THC，或者可以用较少步骤转化为具有可接受纯度的Δ9 THC。特别适合于这一萃取的溶剂是碱性水溶液。
最初从植物材料中萃取Δ9 THC和其酸的溶剂适宜为非极性溶剂或者非极性溶剂的混合物，如下所述的烷烃特别适合作为溶剂组分。许多非极性溶剂都适合于这一萃取，这些溶剂包括直链和支链烷烃，特别是戊烷，己烷，庚烷，辛烷，和壬烷，其它的石油级分及其他不与水混溶的溶剂。在以下详细说明的本发明的实施例中，使用庚烷已经得到了特别好的结果。
与先有技术的萃取物相比，本发明的另一个优点是使用这些非极性溶剂倾向于使得萃取物包含有非常少量的植物材料。这样将便于在后来的萃取物加工中除去残余的植物材料。此外，萃取物比先有技术的萃取物较少焦油状，并更易于处理。
本发明第一方面的另一个方法中，从植物材料中萃取出Δ9 THC和其酸，在第一个萃取步骤之后，接着进行另一个步骤，其中Δ9 THC羧酸被转化成衍生物，该衍生物是萃取物本身与第二种溶剂的衍生物。这一进一步的步骤所具有的优点是，用一般来说是诸如烷烃的非极性溶剂的第一种溶剂，所萃取的杂质并不萃取到第二种溶剂中，所述第二种溶剂通常是极性溶剂，从而实现了酸的进一步纯化。例如，通过使用含水溶剂(aqueous solvent)和与第一萃取溶剂相比优先溶于水相中的衍生物已经得到了好的结果。然后可以把衍生物转化回Δ9 THC羧酸或者可以转化为Δ9 THC。在本发明的实施方案中使用Δ9 THC羧酸的盐，因为它可有效地萃取到碱性水相中。
本发明的第二方面，提供一种由同时包含Δ9 THC和Δ9 THC羧酸的植物材料制备Δ9 THC的方法，其包括将植物材料至少分离成第一和第二级分，所述第一级分包含大量的来自于植物材料的Δ9 THC，所述第二级分包含大量的来自植物材料的Δ9 THC羧酸，放弃第一级分而保留第二级分。
在最初的分级中，Δ9 THC完全或者部分损失，但是却得到低杂质含量的保留的Δ9 THC羧酸，其随后的纯化简单并得到高纯度的成品。当在这种方法中使用溶剂萃取时，第一级分处于植物材料的有机溶剂萃取物内，而第二级分则处于水提物内。
在如下更详细描述的本发明应用中，所述方法纯化Δ9 THC羧酸，然后将纯化后的酸转化为Δ9 THC。现已发现纯化酸的化学过程并不复杂，它的进行可以获得高纯度的酸，一般至少为90重量％或者更多的大麻类素。
因此，本发明提供一种新的在本领域中未预计到的获得纯Δ9 THC的化学方法，它是通过使用第一溶剂从植物材料中萃取Δ9 THC羧酸，把其转化为盐并用第二溶剂萃取所述盐来实现的。采用经由Δ9 THC羧酸盐的纯化过程的益处在于，可以使用酸和盐的不同化学溶解度来提高最终产品的纯度，或者至少使获得这一纯度所需的步骤简单化。
在本发明的一个操作实例中，使用第一溶剂从大麻植物材料中萃取Δ9 THC羧酸，其中第一溶剂是非极性溶剂或者非极性溶剂的混合物，将其转化成盐，然后使用第二含水溶剂萃取从第一溶剂得到的盐。从起始植物材料萃取到非极性溶剂中的杂质倾向于不萃取到水相中。把盐转化回酸是很简单的。在一个实施例中，Δ9 THC羧酸被转化为酸的钠加成盐，虽然如此，还可以使用镁、锂或者钾盐。在制备盐时，使用强碱性的pH，适宜的是pH为12-14，特别是约12.5-13.5，还发现，在实例中可以使用减少乳化现象形成的试剂-氯化钠，但是，其它的试剂也将是适合的。
Δ9 THC羧酸加成盐需要转化为Δ9 THC，这通常是通过盐的脱羧完成的，优选在高温下进行脱羧。在本发明的具体实施方案中，该盐被萃取到第三溶剂中，在第三溶剂中进一步纯化，然后进行脱羧，这样做的好处是在脱羧之前不需要进行溶剂交换。优选脱羧在碱性溶液，典型地是碱性水溶液的存在下进行。
在纯化过程中，Δ9 THC羧酸和Δ9 THC两者都可能会对氧化敏感，因此，优选在惰性气体气氛中实施该方法。氮气就很适合。
在储存用于另外的加工之前，对纯化的Δ9 THC可以进一步用硅藻土进行处理，以除去大麻类素。
在使用本发明时，Δ9 THC酸在多步工艺中被萃取、纯化然后转化成活性成分Δ9 THC。在本发明制备方法的优选实例中，把大麻(叶和花序)研磨均匀，然后在室温下(15-25℃)用庚烷萃取。得到的庚烷级分萃取物包含大麻类素的混合物，主要成分是Δ9-四氢大麻酚羧酸(Δ9THC酸)。把Δ9 THC酸以其钠盐的形式萃取到稀的氯化钠/氢氧化钠溶液中，接着把盐萃取到异丙醚(IPE)中。出乎意料的是，Δ9 THC酸钠盐在IPE中比其在碱性水溶液中溶解得更好，因此，从碱性水相中萃取到IPE中。这一步骤在本领域已知的把酸萃取到醚或者说乙醚中的方法里未曾出现。把盐萃取到IPE中具有额外的、令人惊奇的优点，即使得纯化得以进一步改进，因为杂质(特别是大麻二酚)在Δ9 THC酸钠盐萃取到IPE中的同时保留在水相中，而Δ9 THC酸钠盐被萃取到IPE中。在IPE中的Δ9 THC酸钠盐用2％w/v的氢氧化钠/氯化钠水溶液洗涤，然后用稀盐酸酸化(pH＜3)。因此，本发明包括把盐萃取到第三溶剂中，任选洗涤，然后酸化的步骤。相反，本领域的方法在萃取到醚中之前酸化，这样导致纯化的效率比较低。
第三溶剂适宜的是极性溶剂。使用IPE已经得到了很好的结果，但也可以使用其它极性溶剂，包括乙醚、二甲醚及其他醚、氯仿、以及这些溶剂的混合物。
在一种具体的萃取中，IPE-萃取的盐的组成被测定为96.4％的盐，0.5％的CBD和0.8％的CBN，这表明按照这一盐萃取步骤会得到高纯度。
Δ9 THC酸溶液可以很方便地通过经由硅酸镁载体(florisil)床而得到处理，以除去在IPE中不溶的植物材料。在用硅酸镁载体处理之前，需要对Δ9 THC酸钠盐进行酸化，因为盐不能通过所述床。然后，通过在22％的氢氧化钠水溶液的存在下，使所述溶液回流大约10小时而使Δ9 THC酸的IPE溶液脱羧。通过HPLC分析确定反应完成。所得Δ9 THC在IPE中经活性炭处理，然后浓缩，分离出Δ9 THC(粗品)。在纯化之前，Δ9 THC(粗品)在-20℃下储存。
因此，上述实施方案能够制备出与药理学标准样品相比相对粗制的Δ9 THC制品。为了用于药物组合物，通常需要额外的纯化。Δ9 THC的最后纯化适宜使用中压层析单元进行。在33kg预装的反相柱中，使用等浓度的乙腈/水洗脱液体系，每批用五到七个柱操作，得到单一批量的屈大麻酚。在层析后，合并适当纯度的级分，进行浓缩，萃取到甲基叔丁基醚(MTBE)中，用活性炭处理，最后在50-55℃下进行高真空蒸馏，直到剩余溶剂＜5000ppm(4-4.5小时)。最终产品在低于室温下为粘性油，在惰性气氛(氩气)下存储在低于-20℃的PTFE或者褐色玻璃容器中。
相应的，本发明的另一个方面在于Δ9 THC的纯化方法，其包括测量含Δ9 THC的组合物中大麻酚的量，如果该量超过预定阈值，则对组合物进行处理以进一步纯化Δ9 THC，并重复该方法。通常，大麻酚的浓度为0.5％或者更大是无法接受的，产品优选包含0.3％，更具体地说为0.2％或者更少的大麻酚时，可满足进入后续处理步骤的标准。
本发明的一个特征在于得到的产品的纯度，且纯化典型地在含Δ9THC的组合物中进行，该组合物中Δ9 THC的最低纯度为85重量％，甚至为90重量％，最优选98重量％，可通过先于本发明的制备方法达到这一纯度。
优选的进一步的纯化步骤包括用于纯化Δ9 THC的活性炭过滤和反相层析，典型的结果是Δ9 THC的纯度为98重量％或者99重量％或者更高，最优选99.5重量％的纯度。
然后，可以将最终纯化的Δ9 THC与药学可接受的载体结合。
本发明更进一步的方面在于根据所公开的方法得到的产品和中间体。因此，本发明还提供其纯度至少为95重量％，优选至少98重量％，更优选至少99重量％，最优选至少99.5重量％的纯Δ9 THC，其任选与药学可接受的载体结合。
本发明还提供Δ9 THC羧酸盐，优选其纯度至少为75重量％，更优选至少90重量％，最优选至少95重量％。在本发明另外的组合物中，该盐可以溶于溶剂中。本发明另外的组合物是所述盐的水溶液，其中所述盐的纯度至少为75重量％，优选至少90重量％，更优选至少95重量％。
本发明的再一方面提供了纯度至少为85重量％，优选至少90重量％，最优选至少95重量％的Δ9 THC羧酸。该酸可以呈油状形式或者可以溶于含水或者非水溶液中。
在以下实施例详细描述的本发明进一步的具体实施方案中，将大麻植物研磨，然后使用庚烷从其中萃取Δ9 THC羧酸，处理掉残余的固体物料。向庚烷萃取物中加入氯化钠水溶液，通过加入氢氧化钠溶液将pH调节到约13，典型地是12.7-13.2，从而制得Δ9 THC羧酸的钠盐。使用氯化钠有助于避免在该过程中产生乳化现象。必需严格地控制pH以确保有效萃取，特别是该方法在成比例放大时。使用12.7-13.2范围内的pH时，观察到形成两层，下部的水层和上部包含杂质的有机层，将有机层丢弃。相反，已知方法使用非常碱性的pH(通常其pH范围为13.5-13.9)，这样导致形成3层体系，Δ9 THC酸性盐在有机层和水层之间″渗油″，这导致在随后的相分离中产生加工问题。我们已经发现，使用这种高pH也可能导致降解以及所需THC-酸的脱羧，从而降低Δ9THC的收率。然而，我们也已发现，如果使用的pH太低(典型地低于pH12.7)，将不会完全萃取Δ9 THC酸性盐，导致在水相中存在高浓度的杂质大麻二酚。因此，通常，把Δ9 THC酸由第一溶剂萃取到水相中优选在12.7-13.2的pH范围内进行。
把酸转化成其钠盐说明Δ9 THC盐现在优先溶于水相中。因此，因为溶于庚烷级分的杂质保留在该级分中，而所需的物料则进入到水相中，因此实现了进一步的纯化。因此，下一步是丢弃庚烷相。
然后使用异丙醚萃取Δ9 THC酸的钠盐，丢弃水相。之后，把异丙醚用含有氢氧化钠和氯化钠的水溶液洗涤，加入稀盐酸将pH降低到3或者更低，进一步用氯化钠水溶液洗涤，结果是将酸的钠盐转化回Δ9 THC酸。丢弃废水溶液。之后，将Δ9 THC酸进行硅酸镁载体处理，除去植物材料，并通过真空蒸馏浓缩。之后，在处于异丙醚中的Δ9 THC酸中加入氢氧化钠溶液，并将整个混合物回流脱羧，得到Δ9 THC。此后，用活性炭过滤，和真空蒸馏浓缩。接着，真空除去溶剂，得到Δ9 THC粗品。
下一步是纯化产品粗品。在以下所列的具体实施方案中，产品粗品经活性炭过滤除去大麻类素，如果大麻酚浓度令人满意，即为0.2重量％或者更低，则将含有这一浓度大麻酚的产品进行进一步的纯化步骤，以得到最终的精制产品，其Δ9 THC浓度典型地为95重量％以上，或者一般为97重量％以上，往往可高达99重量％以上，最优选99.5重量％。其与芝麻籽油在软明胶胶囊中结合，得到最终产品，通常所说的最终产物屈大麻酚。
本发明的再一方面，提供一种通过用溶剂萃取植物材料而制备Δ9THC的方法，其中使用非极性溶剂或者非极性溶剂的混合物进行溶剂萃取。迄今为止已知的方法使用诸如水和乙醇和其混合物之类的溶剂，在萃取活性成分的同时也萃取出植物材料。使用非极性溶剂降低萃取物中的植物含量。先有技术的萃取物是焦油状的，难以加工，而使用非极性溶剂时，不再存在这种情况。优选的溶剂包括直链或支链的C5-C9烷烃，该溶剂优选基本上不含水和基本上不含乙醇。
通过下文的实施例，参考附图举例说明本发明，其中

图1是本发明制备Δ9 THC粗品的方法的流程图；图2是本发明用于将Δ9 THC粗品转化为最终产品的方法的流程图；实施例实施例-1植物的选择大麻的分析筛选程序设计由两个阶段组成。
阶段1包括从种子开始生长247株植物，4-6周后，通过GC分析植物叶部的杂质分布图和Δ9 THC含量。在GC操作条件下，所有的Δ9 THC羧酸均在柱中脱羧为Δ9 THC。根据阶段1的分析，选择少数植株(总共24株)进入下一阶段。
阶段2的程序包括在开始开花时分析这24颗选择株。把单独的花序磨碎并充分混合，得到均匀的物料，通过GC一式两份分析均质后的花序。
根据产品收率和杂质分布图进行所需的无性植株的选择。
在5周期间内进行阶段1的选择方法。样品的制备和GC分析方法按照改进的筛选方案进行。
在这一改进的方案中，将叶部在乙醇中的超声处理时间从30分钟降低到15分钟，把离心时间从15分钟降低到5分钟。使用改进的GC方案对最终的萃取物进行分析，表明Δ9 THC含量微不足道，这说明消耗叶要使用更短的加工时间。
对大麻叶样品最初的GC分析表明，Δ9 THC含量和Δ9 THC/大麻二酚的比例方面有很大的变异(大麻二酚是叶中主要的大麻类素杂质)。一式两份注入的样品被发现结果一致。
在选择了24株植物之后，在花序的均质样品上进行阶段2的分析。再一次，把许多样品一式两份注入，以确保分析有代表性，以及方法有可重复性。很明显，Δ9 THC含量有很大的变化，由GC面积表明其从77.0％变化到84.8％。对于不同的植物来说，杂质分布图方面也有很大的差异。根据筛选程序，选择植物397/92作为最终的无性系。
实施例2-萃取参考图1描述这一萃取过程。
磨碎大麻/用庚烷级分萃取使用粉碎机将大麻(125kg，叶和花序)粉碎。然后把粉碎后的物料加入到氮气吹扫过的容器中，然后加入庚烷级分(1250升)。内容物在低流量的氮气和室温(15-25℃)下搅拌4-4.5小时，然后过滤。滤饼抽吸干燥30分钟，然后把萃取的植物材料从过滤器中挖出，再加到容器中。加入庚烷级分(625升)，把容器内容物在室温(15-25℃)下搅拌30分钟，然后过滤。再一次将滤饼抽吸干燥30分钟。合并庚烷级分萃取物。
pH的调节制备1％w/v的氯化钠水溶液(375升)，加入包含庚烷级分萃取物的容器中，将容器中的内容物在室温(15-25℃)下搅拌10分钟。然后每次1升分批加入22％的氢氧化钠溶液，直到加入6升。通过使各层澄清测试水溶液的pH。加入另一部分的22％的氢氧化钠溶液(100毫升)，直到pH处于12.7-13.2范围内。使内容物沉降，将上面的有机层转为废物。
溶剂洗涤/萃取用IPE(4×100升)萃取水提物(约380升)，合并的IPE萃取物用2％w/v的氢氧化钠/氯化钠水溶液洗涤(3×390升)，然后用1N盐酸酸化。使水层澄清，检测其pH以确保pH＜3。之后把IPE萃取物用2％w/v的氯化钠水溶液水洗直到水溶液的pH＞5。
硅酸镁载体处理将硅酸镁载体(60kg)和IPE一起搅拌，形成浆液，并把浆液转入Nutche过滤器。在施加真空之前，使IPE萃取物在重力作用下渗过硅酸镁载体床。
然后，让IPE洗涤液通过硅酸镁载体床，并把硅酸镁载体在真空下抽吸干燥。
批量浓缩将合并的IPE萃取物真空浓缩到大约300升，确保批料温度保持在低于40℃。
脱羧/活性炭处理将氢氧化钠溶液(22％w/w，S.G.1.24)(100升)加入到包含IPE萃取物的容器中，把容器内容物搅拌并温和回流加热10小时。低流量的氮气吹过容器以限制脱羧期间的氧化。有规则地控制体积和容器内容物的温度，确保容器体积不显著减少，以及容器内容物保持在低于68℃。10小时之后，将容器内容物冷却，并把工艺用水加入到容器中。内容物在室温下搅拌，然后将水溶液废弃。加入活性炭，把容器内容物在室温下搅拌30-40分钟。将容器内容物精炼过滤，真空浓缩到大约100升，确保容器内容物保持在低于45℃。将该批料冷却到＜20℃，转移到用于最后浓缩的25升容器中。
Δ9 THC(粗品)的分离将IPE萃取物(约100升)在buchi旋转蒸发器上真空浓缩，确保水浴温度保持低于45℃，一旦容器内容物达到8-10升，就将溶液转移到20升带有夹套的容器中，并在45℃以下真空浓缩，直到不再有溶剂蒸馏出来。然后，将容器内容物在55-60℃转移到用氩气吹扫的3升玻璃容器中，得到大约5×1公斤部分的Δ9 THC(粗品)。将内容物冷却到室温(15-25℃)并用氩气吹扫，在-20℃以下贮存。
实施例-3参考图2描述这一纯化过程。
Δ9 THC(粗品)的纯化将Δ9 THC(粗品)从致冷器中取出。
柱层析/活性炭处理/最终的批量浓缩将Δ9 THC(粗品，约1公斤部分)在超声作用下溶于乙腈/水(60∶40)(2体积)中，并转移到层析法储样器中。然后把样品溶液负载到柱上，收集级分。通过HPLC分析级分，柱的操作重复4-6次，并真空浓缩相应纯度的级分，温度保持在40-45℃之间，直到原始体积的三分之一。在把Δ9 THC萃取到甲基叔丁基醚(MTBE)中之前，用氮气解除真空。所得Δ9 THC溶液在室温下与纯水搅拌25-35分钟。弃去水层，用活性炭处理Δ9 THC的MTBE溶液。将该溶液在35-45℃的温度下真空浓缩，然后一旦体积＜10升，就通过精炼过滤装置转移到成品车间用于蒸馏的容器中。在确保批量温度低于45℃的情况下真空蒸馏溶剂。连接高真空泵并使批料在50-55℃，在低于10毫巴的压力下保持4-4.5小时，一次蒸出所有的溶剂。取出样品分析残余的溶剂，一旦浓度在所限定的范围之内，则把该批料在50-55℃下转移到氩气吹扫的容器中。一旦转移全部完成，就将容器用氩气吹扫，密封并在低于-20℃的温度下贮存。
结果通过HPLC分析不同批量试验在脱除剩余溶剂之后Δ9 THC的含量，表明，Δ9 THC的含量为99.3％(大麻酚约0.2％，其它杂质约0.5％，所有的都是通过峰面积得到的)。
实施例-4用于纯化Δ9 THC(粗品)的另外的方法在第一次使用之前，将柱(Flash 75L，在二氧化硅上有1,200克C18)用8升99％的甲醇、4升50∶50的甲醇/水和8升75∶25的甲醇/水洗涤。通过超声处理把粗品THC 0005(约54克)溶于30毫升甲醇中，然后加入10毫升水。把样品溶液负载到柱上，并用75％的甲醇/25％的水(55psi，200毫升/分钟)洗脱。收集单一的大量的(8或者12升)和23-27的1升级分。根据HPLC示踪结果(解析或者梯度法)选择级分。
将选择的级分转移到三个2升buchi烧瓶的一个中，在45-50℃下真空除去溶剂。用2天(13小时)蒸出NJG 197，向每一个buchi烧瓶中加入25毫升甲醇，然后在室温下在黑暗中贮存一个周末，用2天(10小时)蒸出NJG 198，之后萃取。把每一实验的含水浓缩液转移到装有塔顶搅拌器的5升分液漏斗中。使用MTBE(600毫升)溶解buchi烧瓶中剩余的油，并将溶液加入到分离器中。向分离器中加入氯化钠(10g)以减少所产生界面乳化的量。
将混合物搅拌2分钟，使其沉降，把有机相转移到琥珀色瓶中并用氮气吹扫。然后将水相用MTBE萃取两次，每次500毫升。合并有机萃取物，用水(500ml)回洗。然后在40-45℃和工作真空下浓缩有机相。
Flash 75活性炭和浓缩(NJG 200)将Flash 75L实验产生的油(NJG 197和198，总共51.6克)溶于MTBE(150毫升)中并将其合并。把溶液负载到Flash 75S活性炭柱上(酸活化，并用500毫升MTBE固定和预洗)。用纯的MTBE(12psi，125毫升/分钟)对样品进行洗脱，可以收集到250毫升级分，收集在用氮气吹扫的琥珀色瓶中。通过解析和梯度HPLC法分析样品。
根据解析体系的浓度和纯度选择级分。将选定的级分(1,500毫升)合并，并在箔纸包的buchi烧瓶中，在45℃和工作真空下浓缩。油用氮气吹扫并保存在致冷器中过夜(在样品负载到柱上之后2小时40分钟)。
第二天，取油样进行梯度HPLC分析，并在45-50℃高真空(＜10毫巴)干燥4小时。
结果通过HPLC分析不同批量试验在脱除剩余溶剂之后Δ9 THC的含量，表明Δ9 THC的含量为99.7％。
因此，本发明提供了用于制备和纯化Δ9 THC的方法。
权利要求
1.一种制备Δ9 THC的方法，包括使用第一溶剂从植物材料中萃取Δ9 THC和Δ9 THC羧酸，使用第二溶剂萃取所述酸，其中与Δ9 THC相比，所述第二溶剂优先溶解所述酸，将所述Δ9 THC酸转化为其衍生物，并将该衍生物萃取到第三溶剂中。
2.根据权利要求1的方法，包括使用非极性溶剂或者非极性溶剂的混合物从植物材料中萃取Δ9 THC和Δ9 THC羧酸。
3.根据权利要求1或2的方法，包括将Δ9 THC羧酸转化为盐并用第三溶剂萃取该盐。
4.根据权利要求3的方法，其中所述盐是碱金属盐。
5.根据权利要求1-4任何一项的方法，包括在第三溶剂中将所述衍生物转化回Δ9 THC羧酸。
6.根据权利要求1-5任何一项的方法，其中所述的第二溶剂是极性溶剂或极性溶剂的混合物。
7.根据权利要求6的方法，其中所述的第二溶剂是碱性含水溶剂。
8.根据权利要求1-7任何一项的方法，包括纯化Δ9 THC羧酸并将纯化后的酸转化为Δ9 THC。
9.根据权利要求8的方法，包括将所述酸纯化到含95重量％或更多的大麻类素。
10.根据权利要求8的方法，包括将所述酸纯化到含97重量％或更多的大麻类素。
11.根据在前权利要求任何一项的方法，其中所述的溶剂包括直链或支链的C5-C9烷烃。
12.根据权利要求11的方法，其中所述的溶剂包括庚烷。
13.根据在前权利要求任何一项的方法，包括把所述的酸萃取到第二溶剂中以形成具有上部的有机层和下部的水层的两层体系。
14.根据在前权利要求任何一项的方法，包括在pH为12.7-13.2的条件下把所述的酸萃取到第二溶剂中。
15.一种制备Δ9 THC的方法，包括把Δ9 THC羧酸从有机溶剂萃取到含水溶剂中以形成具有上部的有机层和下部的水层的两层体系。
16.一种制备Δ9 THC的方法，包括在pH为12.7-13.2的条件下，把Δ9 THC羧酸从有机溶剂萃取到含水溶剂中。
17.一种制备Δ9 THC的方法，包括用第一溶剂从植物材料中萃取Δ9THC羧酸，将Δ9 THC羧酸在第二溶剂中转化为盐并用第三溶剂萃取该盐。
18.根据权利要求17的方法，其中第一溶剂是非极性溶剂或非极性溶剂的混合物。
19.根据权利要求17或18的方法，其中第二溶剂是含水溶剂。
20.根据权利要求17-19任何一项的方法，包括将盐转化回Δ9 THC酸。
21.根据权利要求17-20任何一项的方法，其中所述盐是Δ9 THC羧酸的镁，钠，锂或钾盐。
22.根据权利要求17-21任何一项的方法，包括在碱性pH下，适宜的是pH为12.7-13.2的条件下形成所述盐。
23.根据权利要求17-22任何一项的方法，包括在减少乳化现象形成的试剂的存在下形成所述盐。
24.根据权利要求17-23任何一项的方法，包括将所述盐脱羧形成Δ9 THC。
25.根据权利要求24的方法，其中脱羧在第三溶剂中进行。
26.根据权利要求17-25任何一项的方法，该方法在惰性气体气氛中进行。
27.根据权利要求17-26任何一项的方法，包括使用硅藻土从所述酸中除去植物材料。
28.一种纯化Δ9 THC的方法，包括a.测量含Δ9 THC的组合物中大麻酚的量，b.如果该量超过预定阈值，则对组合物进行处理以进一步纯化Δ9THC，并重复步骤a和b。
29.根据权利要求28的方法，其中被纯化的组合物包括最低纯度为85重量％的Δ9 THC。
30.根据权利要求29的方法，其中Δ9 THC的最低纯度为90重量％。
31.根据权利要求30的方法，其中Δ9 THC的最低纯度为98重量％。
32.根据权利要求28-31任何一项的方法，其中所述处理包括用活性炭处理。
33.一种纯化Δ9 THC的方法，包括通过反相柱层析纯化Δ9 THC。
34.根据权利要求28-33任何一项的方法，该方法用于将Δ9 THC纯化到纯度为98重量％或更高。
35.根据权利要求34的方法，该方法用于将Δ9 THC纯化到纯度为99重量％或更高。
36.根据权利要求34的方法，该方法用于将Δ9 THC纯化到纯度为99.5重量％或更高。
37.根据权利要求28-36任何一项的方法，还包括将纯化的Δ9 THC与药学可接受的载体结合。
38.纯度至少为95重量％的纯化Δ9 THC。
39.根据权利要求38的纯化Δ9 THC，其纯度至少为98重量％。
40.根据权利要求38的纯化Δ9 THC，其纯度至少为99重量％。
41.根据权利要求38的纯化Δ9 THC，其纯度至少为99.5重量％。
42.一种组合物，其中包括权利要求38-41的Δ9 THC和药学可接受载体的组合。
43.Δ9 THC羧酸盐。
44.根据权利要求43的盐，其纯度至少为75重量％。
45.根据权利要求43的盐，其纯度至少为90重量％。
46.根据权利要求43的盐，其纯度至少为95重量％。
47.一种组合物，其中包括溶于溶剂中的权利要求43-46任何一项的盐。
48.纯度至少为90重量％的Δ9 THC羧酸。
49.根据权利要求48的Δ9 THC羧酸，其纯度至少为90重量％，处于水溶液中。
50.根据权利要求48的Δ9 THC羧酸，其纯度至少为90重量％，处于IPE中或者作为油状物。
全文摘要
从植物材料中获得Δ9 THC酸并在控制pH值的条件下将其萃取到含水溶剂中。把该酸转化为盐，并将该盐萃取到极性溶剂中，得到高纯度的酸。然后，把Δ9 THC酸转化为Δ9 THC，经进一步纯化并与载体结合用于药物用途。
文档编号A61K36/00GK1642934SQ03807416
公开日2005年7月20日 申请日期2003年2月3日 优先权日2002年2月1日
发明者N·J·古温, N·J·阿彻尔, C·默里, A·K·格林伍德, D·麦克哈蒂 申请人:分析化学品有限公司