专利名称：羟基吗啉酮衍生物及其医药用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及具有钙蛋白酶抑制活性的新羟基吗啉酮衍生物。更具体地，本发明涉及一种包含新羟基吗啉酮衍生物的药物。
背景技术：
钙蛋白酶是细胞质中的一种蛋白水解酶，其广泛分布在活有机体中并被钙离子激活。目前，已经阐明这种钙蛋白酶的异常激活涉及多种疾病如中风、蛛网膜下出血、阿耳茨海默氏病、局部缺血性疾病、肌营养不良、白内障、血小板聚集、关节炎等[Trends in Pharmacological Sciences，vol.15，p.412(1994)]。另一方面，已经清楚钙蛋白酶抑制剂可有效地保持实验性白内障模型晶状体培养中的晶状体透明[Curr.Eye Res.，vol.10，pp.657-666(1994)]，并可用作白内障的治疗药物(WO93/23032)等。作为以前报道的钙蛋白酶抑制剂，包括肽卤代甲烷衍生物(JP-B-6-29229)、肽重氮甲烷衍生物[Biochem.J.，vol.253，pp.751-758(1988)，J.Med.Chem.，vol.35，pp.216-220(1992)]、肽基醛衍生物(EP771565，USP6057290等)等。但是，实际情况是，这些抑制剂没有付诸实际应用。
发明内容
本发明者进行了大量的研究试图提供一种具有钙蛋白酶抑制活性的化合物，合成一种具有强钙蛋白酶抑制活性的化合物以及更深入的研究以完成本发明。
因此，本发明涉及(1)式(I)表示的化合物或其盐
其中R1和R2各自为任选具有取代基的低级烷基，(2)上述(1)的化合物或其盐，其中R2为被芳香烃基取代的低级烷基，(3)式(I)表示的化合物或其盐 其中R1为任选具有取代基的低级烷基，R2为低级烷基，(4)上述(3)的化合物或其盐，其中R2为具有3～4个碳原子的低级烷基，(5)上述(4)的化合物，其中低级烷基为异丙基或异丁基，或其盐，(6)上述(1)-(5)中任一项的化合物或其盐，其中R1为具有取代基的低级烷基，(7)上述(6)的化合物或其盐，其中低级烷基具有的取代基为任选具有取代基的芳香烃基，(8)上述(7)的化合物，其中芳香烃基为被选自羟基、低级烷氧基、环己基甲氧基、卤原子以及苯基的取代基取代的芳香烃基，(9)上述(7)或(8)的化合物，其中芳香烃基为苯基或2-萘基，(10)(2S，5S)-5-苄基-6-羟基-2-(2-甲氧基丙基)-3-吗啉酮，(11)一种包括式(I)表示的化合物或其盐的药物 其中R1和R2各自为任选具有取代基的低级烷基，(12)上述(11)的药物，其为钙蛋白酶抑制剂，(13)上述(12)的药物，其为预防或治疗其中钙蛋白酶参与的疾病的药物
(14)一种药物组合物，包括式(I)表示的化合物或其盐以及可药用载体， 其中R1和R2各自为任选具有取代基的低级烷基，(15)上述(14)的药物组合物，其为钙蛋白酶抑制剂，(16)一种治疗其中钙蛋白酶涉及的疾病的方法，包括向需要的哺乳动物施用有效量的下式(I)表示的化合物或其盐 其中R1和R2各自为任选具有取代基的低级烷基，以及(17)下式(I)表示的化合物作为钙蛋白酶抑制剂的用途 其中R1和R2各自为任选具有取代基的低级烷基，或其盐。
在本发明中，“低级烷基”指具有1～6个碳原子的线性或支链烷基(如，甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、新戊基、叔戊基、己基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2，2-二甲基丁基、3，3-二甲基丁基、2-乙基丁基等)，“芳香烃基”指具有6～10个碳原子的单环或稠合的多环芳香烃基(如，苯基、萘基、2-萘基等)，“脂环烃基”指具有3～10个碳原子的单环或稠合的多环脂环烃基(如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基等)，并且“杂环基”指具有1～2个氮原子和/或一个硫原子和/或一个氧原子的单环或稠合的多环的芳香或非芳香杂环基(如，3-吲哚基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-咪唑基、4-咪唑基、5-咪唑基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-吡咯基、3-吡咯基、2-喹啉基、异喹啉基等)。
在上述式(I)中，作为R1表示的低级烷基，可以提及上述的烷基。优选具有1～4个碳原子的烷基，并具体地优选甲基、乙基、丙基以及丁基。
作为R2表示的低级烷基，可以提及上述烷基。优选具有1～4个碳原子的烷基，具体地优选的为具有3-4个碳原子的烷基，并且最优选的为异丙基和异丁基。
作为R1和R2表示的低级烷基可具有的取代基，例如，下述1)-19)的基团1)任选具有取代基的芳香烃基[如，苯基、2-萘基等，作为取代基，例如，羟基、低级烷氧基(如，具有1～6个碳原子的线性或支链烷氧基如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、戊基氧基、异戊基氧基、己氧基等可以提及，优选地具有1～4个碳原子的烷氧基，并具体地优选地甲氧基和丁氧基)，环己基甲氧基，卤原子(如，氟、氯、溴、碘等可以提及，优选氟和氯)，芳基(如，苯基等)，等]；2)脂环烃基；3)杂环基；4)氢原子、芳香烃基、脂环烃基以及杂环基中任一基团的氧基基团[如，羟基、芳氧基(苯氧基、萘氧基、2-萘氧基等)、烷氧基(环己基氧基等)、3-吲哚基氧基、2-吡啶基氧基、3-吡啶基氧基、4-吡啶基氧基、2-咪唑基氧基、4-咪唑基氧基、5-咪唑基氧基等]；5)任选被芳香烃基、脂环烃基以及杂环基中任一基团取代的低级烷氧基[如，烷氧基(甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、戊基氧基、己氧基、环己基甲氧基等)、芳烷氧基(苄氧基、苯基乙氧基、萘基甲氧基、2-萘基甲氧基、2-萘基乙氧基等)、3-吲哚基乙氧基、2-吡啶基甲氧基、3-吡啶基乙氧基、4-吡啶基丙氧基、2-咪唑基甲氧基、4-咪唑基乙氧基、5-咪唑基丙氧基等]；6)任选被芳香烃基、脂环烃基以及杂环基中任一基团取代的氨基甲酰基(如，氨基甲酰基、苯基氨基甲酰基、萘基氨基甲酰基、环己基氨基甲酰基、3-吲哚基氨基甲酰基、2-吡啶基氨基甲酰基、3-吡啶基氨基甲酰基、4-吡啶基氨基甲酰基、2-咪唑基氨基甲酰基、4-咪唑基氨基甲酰基、5-咪唑基氨基甲酰基等)；7)任选被芳香烃基、脂环烃基以及杂环基中任一基团取代的低级烷基氨基甲酰基(如，甲基氨基甲酰基、乙基氨基甲酰基、丙基氨基甲酰基、丁基氨基甲酰基、戊基氨基甲酰基、己基氨基甲酰基、苄基氨基甲酰基、苯乙基氨基甲酰基、萘基甲基氨基甲酰基、2-萘基乙基氨基甲酰基、环己基甲基氨基甲酰基、3-吲哚基乙基氨基甲酰基、2-吡啶基甲基氨基甲酰基、3-吡啶基乙基氨基甲酰基、4-吡啶基丙基氨基甲酰基、2-咪唑基甲基氨基甲酰基、4-咪唑基乙基氨基甲酰基、5-咪唑基丙基氨基甲酰基等)；8)任选被芳香烃基、脂环烃基以及杂环基中任一基团酯化的羧基(如，羧基、苯氧基羰基、萘氧基羰基、2-萘氧基羰基、环己基氧基羰基、3-吲哚基氧基羰基、2-吡啶基氧基羰基、3-吡啶基氧基羰基、4-吡啶基氧基羰基、2-咪唑基氧基羰基、4-咪唑基氧基羰基、5-咪唑基氧基羰基等)；9)任选被芳香烃基、脂环烃基以及杂环基中任一基团取代的低级烷基酯化的羧基(如，甲氧基羰基、乙氧基羰基、丙氧基羰基、丁氧基羰基、戊基氧基羰基、己氧基羰基、苄氧基羰基、苯基乙氧基羰基、萘基甲氧基羰基、2-萘基甲氧基羰基、2-萘基乙氧基羰基、环己基甲氧基羰基、3-吲哚基乙氧基羰基、2-吡啶基甲氧基羰基、3-吡啶基乙氧基羰基、4-吡啶基丙氧基羰基、2-咪唑基甲氧基羰基、4-咪唑基乙氧基羰基、5-咪唑基丙氧基羰基等)；10)任选被芳香烃基、脂环烃基以及杂环基中任一基团取代的硫基(如，硫基、苯硫基、萘硫基、环己硫基、3-吲哚硫基、2-吡啶硫基、3-吡啶硫基、4-吡啶硫基、2-咪唑硫基、4-咪唑硫基、5-咪唑硫基等)；11)具有任选被芳香烃基、脂环烃基以及杂环基中任一基团取代的低级烷基的硫基(如，甲硫基、乙硫基、丙硫基、丁硫基、戊硫基、己硫基、苄硫基，苯乙硫基、萘基甲硫基、2-萘基乙硫基、环己基甲硫基、3-吲哚基乙硫基、2-吡啶基甲硫基、3-吡啶基乙硫基、4-吡啶基丙硫基、2-咪唑基甲硫基、4-咪唑基乙硫基、5-咪唑基丙硫基等)；12)任选被芳香烃基、脂环烃基以及杂环基中任一基团取代的氨基(如，氨基、苯胺基、萘基氨基、环己基氨基、3-吲哚基氨基、2-吡啶基氨基、3-吡啶基氨基、4-吡啶基氨基、2-咪唑基氨基、4-咪唑基氨基、5-咪唑基氨基等)；13)具有任选被芳香烃基、脂环烃基以及杂环基中任一基团取代的低级烷基的氨基(如，甲基氨基、乙基氨基、丙基氨基、丁基氨基、戊基氨基、己基氨基、苄基氨基、苯乙基氨基、萘基甲基氨基、2-萘基乙基氨基、环己基甲基氨基、3-吲哚基乙基氨基、2-吡啶基甲基氨基、3-吡啶基乙基氨基、4-吡啶基丙基氨基、2-咪唑基甲基氨基、4-咪唑基乙基氨基、5-咪唑基丙基氨基等)；14)具有芳香烃基、脂环烃基以及杂环基中任一基团的酰基氨基(如，苯甲酰基氨基、萘酰基氨基、2-萘酰基氨基、环己基羧酰胺、3-吲哚基羧酰胺、2-吡啶基羧酰胺、3-吡啶基羧酰胺、4-吡啶基羧酰胺、2-咪唑基羧酰胺、4-咪唑基羧酰胺、5-咪唑基羧酰胺等)；15)具有任选被芳香烃基、脂环烃基以及杂环基中任一基团取代的低级烷基的酰基氨基(如，乙酰基氨基、丙酰基氨基、丁酰基氨基、异丁酰基氨基、戊酰基氨基、异戊酰基氨基、新戊酰基氨基、己酰基氨基、庚酰基氨基、苯基乙酰基氨基、苯基丙酰基氨基、萘基乙酰基氨基、萘基丙酰基氨基、环己基乙酰基氨基、3-吲哚基丙酰基氨基、2-吡啶基乙酰基氨基、3-吡啶基丙酰基氨基、4-吡啶基丁酰基氨基、2-咪唑基乙酰基氨基、4-咪唑基丙酰基氨基、5-咪唑基丁酰基氨基等)；16)具有芳香烃基、脂环烃基以及杂环基中任一基团的磺酰基氨基(如，苯磺酰基氨基、萘磺酰基氨基、2-萘磺酰基氨基、环己基磺酰基氨基、3-吲哚基磺酰基氨基、2-吡啶基磺酰基氨基、3-吡啶基磺酰基氨基、4-吡啶基磺酰基氨基、2-咪唑基磺酰基氨基、4-咪唑基磺酰基氨基、5-咪唑基磺酰基氨基等)；17)具有任选被芳香烃基、脂环烃基以及杂环基中任一基团取代的低级烷基的磺酰基氨基(如，甲磺酰氨基、乙基磺酰基氨基、丙基磺酰基氨基、丁基磺酰基氨基、戊基磺酰基氨基、己基磺酰基氨基、苄基磺酰基氨基、苯乙基磺酰基氨基、萘基甲基磺酰基氨基、2-萘基乙基磺酰基氨基、环己基甲基磺酰基氨基、3-吲哚基乙基磺酰基氨基、2-吡啶基甲基磺酰基氨基、3-吡啶基乙基磺酰基氨基、4-吡啶基丙基磺酰基氨基、2-咪唑基甲基磺酰基氨基、4-咪唑基乙基磺酰基氨基、5-咪唑基丙基磺酰基氨基等)；18)任选被芳香烃基、脂环烃基以及杂环基中任一基团取代的脲基(如，脲基、苯基脲基、萘基脲基、2-萘基脲基、环己基脲基、3-吲哚基脲基、2-吡啶基脲基、3-吡啶基脲基、4-吡啶基脲基、2-咪唑基脲基、4-咪唑基脲基、5-咪唑基脲基等)；以及19)具有任选被芳香烃基、脂环烃基以及杂环基中任一基团取代的低级烷基的脲基(如，甲基脲基、乙基脲基、丙基脲基、丁基脲基、戊基脲基、己基脲基、苄基脲基、苯乙基脲基、萘基甲基脲基、2-萘基乙基脲基、环己基甲基脲基、3-吲哚基乙基脲基、2-吡啶基甲基脲基、3-吡啶基乙基脲基、4-吡啶基丙基脲基、2-咪唑基甲基脲基、4-咪唑基乙基脲基、5-咪唑基丙基脲基等)。
甚至当在上述具体地提及，上述芳香烃基、脂环烃基、杂环基和低级烷基在其可合成以及可取代的位置可具有取代基(如，烷基、酰基、氧代基团、任选酯化的羧基、任选取代的氨基、任选取代的羟基、任选取代的硫基、卤原子、硝基等)。
作为R1表示的低级烷基具有的取代基，任选具有取代基的芳香烃基、芳烷氧基以及具有芳香烃基的酰基氨基是具体地优选的。具体地，苯基、2-萘基以及被羟基、低级烷氧基(具体地，甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基)、环己基甲氧基、卤原子(具体地，氟、氯)以及苯基取代的苯基是优选的。
作为R2表示的低级烷基具有的取代基，芳香烃基是优选的并且苯基是特别地优选的。
此外，本发明包括式(I)表示的化合物及其盐(下文有时指本发明的化合物)，以及各种溶剂合物、多晶型以及本发明化合物的前药。作为本发明化合物的盐，优选生理可接受盐，如与无有机碱形成的盐、与有机碱形成的盐、与无机酸形成的盐、与有机酸形成的盐、与碱性或酸性氨基酸形成的盐等。作为与无机碱形成的盐的优选实例，例如，碱金属盐，如钠盐、钾盐等；碱土金属盐如钙盐、镁盐等；以及铝盐、铵盐等可以提及。作为与有机碱形成盐的优选实例，例如，与三甲基胺、三乙基胺、吡啶、甲基吡啶、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二环己基胺、N，N’-二苄基乙二胺等形成的盐可以提及。作为与无机酸形成盐的优选实例，例如，与盐酸、氢溴酸、硝酸、硫酸、磷酸等形成的盐可以提及。作为与有机酸形成盐的优选实例，例如，与甲酸、乙酸、三氟乙酸、富马酸、草酸、酒石酸、马来酸、柠檬酸、琥珀酸、苹果酸、甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸等形成的盐可以提及。作为与碱性氨基酸形成盐的优选实例，例如，与精氨酸、赖氨酸、鸟氨酸等形成的盐可以提及，并且作为与酸性氨基酸形成盐的优选实例，例如，与天(门)冬氨酸、谷氨酸等形成的盐可以提及。
本发明的化合物可利用，例如下述反应流程进行制备 其中各符号如上定义。通过包括R3表示的保护基导入至下式表示(II)的化合物[下文有时指化合物(II)]氨基醇的氨基，可以得到下式(III)表示的化合物[下文有时指化合物(III)]。作为R3表示的保护基，肽合成领域中通常使用的那些保护基如苄氧基羰基(下文有时指Z基团)、9-芴基甲氧基羰基(下文有时指Fmoc基团)、叔丁氧基羰基(下文有时指Boc基团)等可以提及。当Z基团用作保护基的时候，例如，将化合物(II)溶解在通常使用的有机溶剂[如，对反应无不利影响的常规溶剂如四氢呋喃(THF)、二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、乙酸乙酯等或其混合溶剂]中，在有或无合适的碱存在的条件下并加入N-苄氧羰基氧基(carbobenzoxyoxy)琥珀酰亚胺得到化合物(III)。尽管反应温度没有具体地限制，一般在冷却、室温或加热条件下，优选地在冰冷至室温的温度范围内。当Fmoc基团用作保护基的时候，此外，如利用Z基团类似的处理，利用N-(9-芴基甲氧基羰基氧基)琥珀酰亚胺得到化合物(III)。
下式(IV)表示的化合物[下文有时指化合物(IV)]可通过将化合物(III)进行氧化而得到。作为氧化方法，例如，可以使用本身已知的方法，如重铬酸吡啶盐(PDC)氧化、氯铬酸吡啶盐(PCC)氧化、归类为铬酸氧化的Jones氧化以及Collins氧化，或Swern氧化、DMSO-三氧化硫吡啶复合物氧化、DMSO-DCC氧化以及归类为二甲基亚碸(DMSO)氧化的DMSO-草酰氯氧化或次卤酸氧化、N-卤代羧酰胺(halogenocarboxamide)氧化等，优选DMSO-三氧化硫吡啶复合物氧化。利用DMSO-三氧化硫吡啶复合物的氧化可按下述方式进行将化合物(III)溶解在DMSO或DMSO和通常使用的有机溶剂(如，四氢呋喃、二氯甲烷、乙酸乙酯等)的混合溶剂中，并在碱如二异丙基乙基胺、三乙基胺等存在下进一步加入三氧化硫吡啶复合物。尽管反应温度没有具体地限制，通常在冷却、室温或加热条件下，优选地在冰冷却至室温的条件下进行。
下式(V)表示的化合物[下文有时指化合物(V)]为其中化合物(IV)的醛通过用乙二醇的化合物形成环状缩醛进行保护。该反应可按下列方式进行将化合物(IV)溶解在通常使用的有机溶剂中，加入乙二醇并在甲苯磺酸-吡啶-盐的存在下搅拌。作为通常使用的有机溶剂，例如，对反应无不利影响的常规溶剂，如N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亚碸、四氢呋喃、二氯甲烷、甲醇、乙醇、苯、甲苯、乙酸乙酯等、或其混合溶剂可以提及，优选甲苯。乙二醇的使用量为约1-约20-倍，优选地约3-约6-倍，的化合物(IV)当量。也可能使用乙醇代替乙二醇进行类似的反应并形成二乙基缩醛以保护化合物(IV)的醛官能团。此外，可利用有机酸如对甲苯磺酸、三氟乙酸、乙酸、甲酸等或无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸以及通常用作为酸催化剂的酸等代替对甲苯磺酸-吡啶-盐进行类似的反应。反应温度为约20-约200℃，优选地约50-约150℃。
对于下式(VI)表示的化合物[下文有时指化合物(VI)]，R3，其为化合物(V)的保护基，可通过选择对使用的保护基适当的方法并利用氨基保护基解离反应的常规方法进行解离。例如，当R3为Z基团的时候，通过在常规金属催化剂(如，钯炭，Raney-镍等)存在下催化还原进行。反应温度没有具体地限制只要不发生不利的副反应，并且该反应通常在冷却、室温或加热的条件下进行。当R3为Fmoc基团的时候，R3通过在常规碱试剂(如，哌啶、吗啉、三乙基胺、氢氧化钠、哌啶聚合物等)存在下搅拌发生解离。尽管反应温度没有具体地限制，通常在冷却、室温或加热的条件下进行，优选地在冰冷却至室温的范围内进行。当R3为Boc基团的时候，R3可按下列方式解离将化合物(V)溶解在通常使用的有机溶剂(如，对反应无不利影响的常规溶剂如四氢呋喃、二氯甲烷、乙酸乙酯等或其混合溶剂)中并在酸存在下搅拌。作为酸，盐酸、三氟乙酸、对甲苯磺酸等可以提及。此外，市售的氢氯酸在乙酸乙酯或二氧六环中的溶液等也可用于解离。尽管反应温度没有具体地限制，通常在冷却、室温或加热的条件下进行，优选地在冰冷却至室温的范围内进行。化合物(VI)可不经过分离和纯化用于下一反应只要不影响下一反应。
下式(VIII)表示的化合物[下文有时指化合物(VIII)]可通过化合物(VI)以及下式(VII)表示的化合物或其盐或其反应性衍生物进行的酰胺化反应制备得到。通过利用脱水缩合剂的一般肽合成方法等进行该酰胺化反应。作为优选的活性衍生物，酰氯、酸酐、活泼酰胺、活泼酯等可以提及。作为活泼衍生物的优选实例，酰氯；酸叠氮化物；与酸如取代膦酸(如，二烷基膦酸、苯基膦酸、二苯基膦酸、二苄基膦酸、膦酰氯等)的混合酸酐、二烷基亚磷酸酯、亚硫酸、硫代硫酸、硫酸、磺酸(如，甲磺酸等)、脂肪族羧酸(如，乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、新戊酸、戊酸、异戊酸、三氯乙酸等)或芳香羧酸(如，苯甲酸等)形成的混合酸酐；对称酸酐；与咪唑、4-取代的咪唑、二甲基吡唑、三唑或四唑形成的活泼酰胺；或活泼酯(如，氰基甲基酯，甲氧基甲基酯，二甲基亚胺基甲基酯、乙烯基酯、炔丙基酯、对硝基苯基酯、三氯苯基酯、五氯苯基酯、甲磺酰苯基酯、苯基偶氮苯基酯、苯硫基酯、对硝基苯硫基酯、对羟甲苯基(cresyl)硫酯、羧基甲硫基酯、吡喃基酯、吡啶基酯、哌啶基酯、8-喹啉基硫酯等)，或与N-羟基化合物(如，N，N-二甲基羟基1胺，1-羟基-2-(1H)-吡啶酮、N-羟基琥珀酰亚胺、N-羟基邻苯二甲酰亚胺、1-羟基苯并三唑等)形成的酯；等可以提及，优选1-羟基苯并三唑。作为脱水缩合剂，1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐或，N，N-二环己基碳二亚胺等是优选的。作为用于该反应的有机溶剂，N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亚碸、四氢呋喃、二氯甲烷、甲醇、乙醇、苯、甲苯、乙酸乙酯、其混合溶剂等可以提及，优选N-二甲基甲酰胺。反应温度没有具体地限制，通常在冷却、室温或加热的条件下进行，优选地在冰冷却至室温的范围内进行。
下式(I)表示的化合物可通过将化合物(VIII)的脱缩醛反应得到。这种脱缩醛反应可按照下述方式进行将化合物(VIII)溶解在通常使用的有机溶剂或有机溶剂以及水的混合溶剂中，加入酸并搅拌混合物。作为使用的酸，有机酸如对甲苯磺酸、三氟乙酸、乙酸、甲酸等，以及无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸等可以提及，特别提及盐酸。优选的盐酸浓度约1M-约6M。反应温度没有具体地限制并且反应在冷却、室温或加热条件下进行。反应时间为约1-约48小时。利用公知的分离或纯化方式进行分离或纯化因此得到的羟基吗啉酮衍生物，如浓缩、减压浓缩、溶剂萃取、结晶、重结晶、相转移、层析等。
作为上述方法制备的化合物，例如，(2S，5S)-5-苄基-6-羟基-2-(2-甲基丙基)-3-吗啉酮、(2S，5S)-6-羟基-2-(2-甲基丙基)-5-(2-苯基乙基)-3-吗啉酮、(2S，5S)-6-羟基-2-(2-甲基丙基)-5-(2-萘基甲基)-3-吗啉酮、(2S，5R)-5-苄基-6-羟基-2-(2-甲基丙基)-3-吗啉酮、(2S，5S)-5-苄基-6-羟基-2-(1-甲基乙基)-3-吗啉酮、(2S，5S)-6-羟基-2-(1-甲基乙基)-5-(2-苯基乙基)-3-吗啉酮、(2S，5S)-2，5-二苄基-6-羟基-3-吗啉酮、(2S，5S)-6-羟基-5-((4-羟基苯基)甲基)-2-(2-甲基丙基)-3-吗啉酮、(2S，5S)-6-羟基-5-((4-甲氧基苯基)甲基)-2-(2-甲基丙基)-3-吗啉酮、(2S，5S)-5-((4-丁氧基苯基)甲基)-6-羟基-2-(2-甲基丙基)-3-吗啉酮、(2S，5S)-5-((4-(环己基甲氧基)苯基)甲基)-6-羟基-2-(2-甲基丙基)-3-吗啉酮、(2S，5S)-5-((2-氟苯基)甲基)-6-羟基-2-(2-甲基丙基)-3-吗啉酮、(2S，5S)-5-((2-氯苯基)甲基)-6-羟基-2-(2-甲基丙基)-3-吗啉酮、(2S，5S)-5-苄氧基甲基-6-羟基-2-(2-甲基丙基)-3-吗啉酮、(2S，5S)-5-((4-联苯基)甲基)-6-羟基-2-(2-甲基丙基)-3-吗啉酮、(2S，5S)-5-(4-(苯甲酰基氨基)丁基)-6-羟基-2-(2-甲基丙基)-3-吗啉酮等可以提及。具体地优选(2S，5S)-5-苄基-6-羟基-2-(2-甲基丙基)-3-吗啉酮。
当本发明化合物具有立体异构体的时候，本发明化合物包括所有异构体以及这些异构体的混合物。
本发明化合物为新化合物，没有在任何参考文献中记载，由于其具有如下面实验例中显示的优良的钙蛋白酶抑制活性，本发明的化合物可用作为钙蛋白酶抑制剂药物，通过将作为活性成分的化合物与需要的下述载体等进行混合得到。下述实施例中公开的化合物结构式显示在表1中。
表1.实施例化合物的结构式
包含本发明化合物的药物可用来预防或治疗其中钙蛋白酶涉及的疾病，如缺血性疾病、免疫疾病、阿耳茨海默(氏)病、骨质疏松症、缺血性脑病、白内障、青光眼、视网膜(脉络膜)疾病、由光凝固术(如，黄斑水肿、视网膜脱落等)产生的眼睛后段的并发症等，以及抑制和治疗哺乳动物(如，人、大鼠、小鼠、兔、牛、猪、狗、猫等)中的血管发生等。此外，由于本发明化合物的水溶性通常优于相同种类的常规化合物，因此使利用本发明的化合物制备成常规化合物难以提供的水性液体成为可能。此外，本发明的化合物具有优良的组织渗透性以及吸收性，显示出极低的毒性并具有优良的安全性。
包含本发明化合物的药物可经全身或局部方式给药。对于全身给药，可经口服或可经静脉注射、皮下注射、肌肉内注射等进行肠胃外给药。可经皮肤、粘膜、鼻内、眼内等方式进行局部给药。
作为包含本发明化合物的医用剂型，固体物质如散剂、颗粒剂、片剂、胶囊、栓剂等、液体如糖浆剂、注射剂、滴眼剂、滴鼻剂等等可以提及。为了制备颗粒剂或片剂，例如，利用赋形剂(乳糖、蔗糖、葡萄糖、淀粉、结晶纤维素等)、润滑剂(硬脂酸镁、滑石、硬脂酸、硬脂酸钙等)、崩解剂(淀粉、羧甲醚纤维素钠碳酸钙等)、粘合剂(淀粉液体、羟基丙基纤维素液体、羧甲醚纤维素液体、阿拉伯树胶液体、明胶液体、藻酸钠液体等)等可形成任何剂型。对于颗粒剂和片剂，可用合适的包衣剂(明胶、蔗糖、阿拉伯树胶、巴西棕榈蜡等)、肠包衣剂(如，酞酸醋酸纤维素、甲基丙烯酸共聚物、酞酸羟基丙基纤维素、羧甲基乙基纤维素等)等形成那包衣。制备胶囊的时候，合适的赋形剂，如改善流动性以及润滑性的镁硬脂酸、硬脂酸钙、滑石、轻质无水硅酸等，改善压制流动性的结晶纤维素、乳糖等以及上述崩解剂等适当地加入并均匀地混合或加工成颗粒剂或粒状形式，用适当的包衣剂形成包衣，并将形成的产物填充在胶囊中，或者可为用胶囊基质形成包封，胶囊基质可通过将甘油、山梨醇等加入到适当的胶囊基质(明胶等)以增加成塑性。这些胶囊可包含必需的着色剂、防腐剂[二氧化硫、对羟基苯甲酸酯(对羟基苯甲酸甲基酯、对羟基苯甲酸乙基酯、对羟基苯甲酸丙基酯)]等。胶囊也可制备成常规胶囊以及肠包衣胶囊、胃内抗性胶囊或缓释胶囊。当制备肠溶胶囊的时候，化合物或包含上述适当的赋形剂化合物，其已经用肠包衣剂进行包衣，填充在常规胶囊中，或胶囊自身可用肠溶包衣剂进行包衣，或肠溶聚合物可用作要形成的基质。
当要制备栓剂的时候，可适当地选择栓剂基质(如，可可脂、聚乙二醇等)并进行应用。
当要制备糖浆剂的时候，例如，可适当地选自稳定剂(依地酸钠等)、助悬剂(阿拉伯树胶、羧甲醚纤维素等)、矫正剂(简单的糖浆剂、葡萄糖等)、芳香等并进行应用。
当要制备注射剂、滴眼剂或滴鼻剂的时候，可通过将所述的化合物溶解或分散在适当包含可药用添加剂的溶液中进行制备，所述的添加剂如等张剂(氯化钠、氯化钾、甘油、甘露醇、山梨醇、硼酸、硼砂、葡萄糖、丙二醇等)、缓冲液(磷酸盐缓冲液、乙酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲剂、柠檬酸缓冲剂、Tris缓冲剂、谷氨酸、ε-氨基己酸等)、防腐剂(对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苄基醇、苯扎氯铵、甲醋吡喃酮钠、依地酸钠、硼酸、硼砂等)、增稠剂(羟基乙基纤维素、羟基丙基纤维素、聚乙烯基醇、聚乙二醇等)、稳定剂(亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、依地酸钠、柠檬酸钠、维生素C、二丁基羟基甲苯等)、pH调节剂(盐酸、氢氧化钠、膦酸、乙酸等)等。
在本发明化合物中，具有作为药物需要的合适水溶性的化合物可有利地以水溶液体使用，具体地用于上述药用制剂如糖浆剂、注射剂、滴眼剂、滴鼻剂等中。
尽管包含在上述糖浆剂、注射剂、滴眼剂或滴鼻剂中的添加剂的量随添加剂的种类、用途等而变，其只需要以能够实现添加剂目的的浓度加入，其中等张剂通常以约0.5-约5.0w/v％的浓度加入以使渗透压为约229-约343mOsm。缓冲剂以约0.01-约2.0w/v％加入；增稠剂以约0.01-约1.0w/v％加入；并且稳定剂以约0.001-约1.0w/v％加入。适当地加入pH调节剂并一般地调节至约pH 3-约9，优选地约4-约8。
尽管本发明化合物的剂量依据治疗的疾病、状况、给药的对象、给药方法等而发生变化，例如，在作为内用药物的情况下，约1-约200mg，优选地约10-约100mg的单剂量以一天数次施用于成人。在注射的情况下，约0.1-约50mg，优选地约1-约30mg以每天一次施用于成人。对眼睛进行局部使用的时候，包含约0.001-约1.0w/v％，优选地约0.01-约0.5w/v％化合物的本发明滴眼剂通常以每天数次滴到眼睛中，每滴约20-约50μL。
附图简述
图1显示化合物1对大鼠晶状体培养中木糖-诱导的晶状体浊斑的预防性作用，其中各数值为平均值±标准误差(n＝5)。
图2显示化合物1对在大鼠视网膜局部缺血模型中神经节细胞(ganglioncell)损伤的抑制作用，其中各数值为平均值±标准误差(n＝8)，并且*表示用Student’s T检验与对照组相比差异显著p＜0.05。
本发明的最佳实施方式本发明将参考下述参考例、实施例、实验例以及制剂例对本发明进行更详细的说明，但是不应该解释为对本发明的限制。
在实施例讨论的化合物的分析值中，利用Yanaco LID.Co.，Ltd制造的M对500V(未校准)测定熔点。利用Varian.Inc制造的Gemini2000测定核磁共振波谱(NMR)。利用Elementar Analysensysteme GmbH制造的Vario EL type进行元素分析。利用PerSeptive Biosystems，Inc制造的Voyager DE PRO测定基质辅助激光解吸离子化-时间飞行质谱(MALDI-TOF MS)。利用Horiba，Ltd.制造的SEPA-2000测定特定的旋光([α]D)。
参考例1高-L-苯基丙氨醇(参考化合物1)冰冷条件下，向硼氢化锂(3.6g，170mmol)在四氢呋喃的溶液(200mL)中加入三氯甲基甲硅烷(36g，340mmol)，并将混合物搅拌30分钟。向该溶液中，在同样条件下缓慢加入高-L-苯基丙氨酸(10g，56mmol)并将混合物搅拌18小时。向该溶液中加入甲醇直到停止产生氢气。减压浓缩后，加入5％氢氧化钠水溶液并将混合物用二氯甲烷萃取两次。将有机层在无水硫酸镁上干燥并减压浓缩得到无色固体的参考化合物1(9.2g，97％)。
mp 40.3-41.3℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.39(m，1H)，1.64(m，1H)，2.54-2.75(m，3H)，3.17(dd，1H，J＝7.7，4.1Hz)，3.26(m，3H)，3.29(dd，1H，J＝10.5，4.8Hz)，7.13-7.30(m，5H)。
参考例23-(2-萘基)-L-丙氨醇(参考化合物2)按照如参考例1中同样的操作，并使用3-(2-萘基)-L-丙氨酸代替高-L-苯基丙氨酸，提供为无色晶体的参考化合物2。
mp 94.1-95.8℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.36(s，2H)，2.58(dd，1H，J＝13.2，7.8Hz)，2.86(dd，1H，J＝13.2，5.4Hz)，2.97(m，1H)，3.20-3.31(m，2H)，4.61(s，1H)，7.38-7.51(m，3H)，7.70(s，1H)，7.82-7.88(m，3H)。
参考例32-氟-L-苯基丙氨醇(参考化合物3)按照如参考例1中同样的操作，并使用2-氟-L-苯基丙氨酸代替高-L-苯基丙氨酸，提供为无色晶体的参考化合物3。
mp 86.5-88.5℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.46(dd，1H，J＝13.4，7.7Hz)，2.72(dd，1H，J＝13.7，5.9Hz)，2.84-2.92(m，1H)，3.19(dd，1H，J＝10.5，6.3Hz)，3.30(dd，1H，J＝10.2，4.8Hz)，7.09-7.15(m，2H)，7.21-7.33(m，2H)。
参考例42-氯-L-苯基丙氨醇(参考化合物4)按照如参考例1中同样的操作，并使用2-氯-L-苯基丙氨酸代替高-L-苯基丙氨酸，提供为无色晶体的参考化合物4。
mp 130.9-131.8℃1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.53(dd，1H，J＝13.2，7.8Hz)，2.83(dd，1H，J＝13.4，5.9Hz)，2.90-2.98(m，1H)，3.22(dd，1H，J＝10.5，6.6Hz)，3.32(dd，1H，J＝10.5，4.5Hz)，7.20-7.30(m，2H)，7.34-7.42(m，2H)。
参考例5O-苄基-L-丝氨醇(参考化合物5)按照如参考例1中同样的操作，并使用O-苄基-L-丝氨酸代替高-L-苯基丙氨酸提供为无色晶体的参考化合物5。
mp 62.1-63.3℃1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.84(m，1H)，3.21-3.27(m，2H)，3.32-3.39(m，2H)，4.45(s，2H)，7.23-7.36(m，5H)。
参考例6Nε-(叔丁氧基羰基)-L-赖氨醇(参考化合物6)按照如参考例1中同样的操作，并使用Nε-(叔丁氧基羰基)-L-赖氨酸代替高-L-苯基丙氨酸，提供为白色固体的参考化合物6。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.10-1.56(m，6H)，1.36(s，9H)，2.71(t，1H，J＝4.7Hz)，2.88(dd，2H，J＝10.0，6.1Hz)，3.19(dd，1H，J＝10.6，6.8Hz)，3.36(dd，2H，J＝10.6，4.4Hz)，6.74(brs，1H)。
参考例7N-(苄氧基羰基)-L-苯基丙氨醇(参考化合物7)在冰冷下，向L-苯基丙氨醇(25g，170mmol)在四氢呋喃中的溶液(250mL)中，加入N-苄氧羰基氧基(carbobenzoxyoxy)琥珀酰亚胺(41g，170mmol)以及三乙胺(25g，250mmol)。将该溶液室温搅拌18小时。减压浓缩并将残留物溶解在乙酸乙酯中。将溶液用1M盐酸、饱和的碳酸氢钠溶液以及饱和盐水洗涤，硫酸镁干燥并减压浓缩。将残留物用己烷结晶得到为无色晶体的参考化合物7(41g，87％)。
mp 90.2-91.0℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.58(dd，1H，J＝13.8，9.3Hz)，2.85(dd，1H，J＝3.8，5.5Hz)，3.27-3.42(m，2H)，3.66(m，1H)，4.76(t，1H，J＝5.5Hz)，4.91-5.00(m，2H)，7.12(d，1H，J＝8.4Hz)，7.16-7.37(m，10H)。
计算分析值C17H19NO3C，71.56；H，6.71；N，4.91。测量值C，71.45；H，6.72；N，4.68.
参考例8N-(苄氧基羰基)-高-L-苯基丙氨醇(参考化合物8)按照如参考例7中同样的操作，并使用参考化合物1代替L-苯基丙氨醇提供为无色晶体的参考化合物8。
mp 120.1-121.2℃1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.59(m，1H)，1.79(m，1H)，2.46-2.68(m，2H)，3.23-3.45(m，3H)，4.65(t，1H，J＝5.4Hz)，5.03(s，2H)，7.09-7.44(m，11H)。
计算分析值C18H21NO3C，72.22；H，7.07；N，4.68。测量值C，72.51；H，7.20；N，4.86.
参考例9N-(苄氧基羰基)-3-(2-萘基)-L-丙氨醇(参考化合物9)按照如参考例7中同样的操作，并使用参考化合物2代替L-苯基丙氨醇提供为无色晶体的参考化合物9。
mp 74.9-76.7℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.75(dd，1H，J＝14.1，9.0Hz)，3.04(dd，1H，J＝13.7，5.0Hz)，3.36-3.47(m，2H)，3.77(m，1H)，4.82(t，1H，J＝5.4Hz)，4.92(dd，2H，J＝18.5，13.1Hz)，7.18-7.25(m，6H)，7.39-7.51(m，3H)，7.71(s，1H)，7.81-7.89(m，3H)。
计算分析值C21H21NO3C，75.20；H，6.31；N，4.18。测量值C，74.84；H，6.34；N，3.99.
参考例10N-(苄氧基羰基)-D-苯基丙氨醇(参考化合物10)按照如参考例7中同样的操作，并使用D-苯基丙氨醇代替L-苯基丙氨醇提供为无色晶体的参考化合物10。
mp 75.8-76.2℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.58(dd，1H，J＝13.6，9.0Hz)，2.85(dd，1H，J＝13.6，5.3Hz)，3.27-3.42(m，2H)，3.66(m，1H)，4.75(t，1H，J＝5.7Hz)，4.91-5.00(m，2H)，7.11(d，1H，J＝8.4Hz)，7.16-7.37(m，10H)。
计算分析值C17H19NO3C，71.56；H，6.71；N，4.91。测量值C，71.38；H，6.63；N，5.00.
参考例11N-(苄氧基羰基)-L-酪氨酸甲基酯(参考化合物11)按照如参考例7中同样的操作，并使用L-酪氨酸甲基酯代替L-苯基丙氨醇提供为无色晶体的参考化合物11。
mp 85.9-86.4℃.
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.76(dd，1H，J＝13.7，10.1Hz)，2.92(dd，1H，J＝13.8，5.1Hz)，3.61(s，3H)，4.19(m，1H)，4.99(s，2H)，6.67(d，2H，J＝8.1Hz)，7.03(d，2H，J＝8.4Hz)，7.26-7.40(m，5H)，7.76(d，1H，J＝8.1Hz)，9.24(s，1H)。
计算分析值C18H19O5C，65.64；H，5.81；N，4.25。测量值C，65.31；H，5.79；N，4.15.
参考例12N-(苄氧基羰基)-O-甲基-L-酪氨酸甲基酯(参考化合物12)向参考化合物11(1.5g，4.6mmol)在丙酮中的溶液(20mL)中，加入无水碳酸钾(1.3g，9.1mmol)以及二甲基磺酸(0.60g，4.6mmol)，并将该溶液回流4小时。将混合物恢复至室温并加入水(1.0mL)。为了分解剩余的二甲基磺酸，将混合物搅拌2小时。滤出无机物并减压蒸除丙酮。将残留物溶解在二氯甲烷中，并将该溶液用水洗涤，无水硫酸镁干燥并减压浓缩得到为白色固体的参考化合物12(1.4g，90％)。
mp 83.9-87.9℃.
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.80(dd，1H，J＝13.5，10.5Hz)，2.97(dd，1H，J＝13.4，5.0Hz)，3.62(s，3H)，3.72(s，3H)，4.22(m，1H)，4.99(s，2H)，6.84(d，2H，J＝8.4Hz)，7.16(d，2H，J＝8.4Hz)，7.26-7.38(m，5H)，7.78(d，1H，J＝8.1Hz)。
参考例13N-(苄氧基羰基)-O-丁基-L-酪氨酸甲基酯(参考化合物13)向参考化合物11(18g，55mmol)在N，N-二甲基甲酰胺中的溶液(70mL)中，加入无水碳酸钾(15g，110mmol)以及正丁基溴(11g，82mmol)。将该溶液室温搅拌18小时。滤出无机物质并将滤液减压浓缩。将残留物溶解在乙酸乙酯中，并将溶液用1M盐酸和饱和的盐水洗涤，无水硫酸镁干燥并减压浓缩得到无色油状的参考化合物13(20g，95％)。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.93(t，3H，J＝7.2Hz)，1.37-1.49(m，2H)，1.63-1.72(m，2H)，2.79(dd，1H，J＝13.5，10.2Hz)，2.97(dd，1H，J＝13.7，5.0Hz)，3.57-3.62(m，3H)，3.92(t，2H，J＝6.5Hz)，4.21(m，1H)，4.99(s，2H)，6.81-6.84(m，2H)，7.12-7.15(m，2H)，7.26-7.38(m，5H)，7.78(d，1H，J＝8.1Hz)。
参考例14N-(苄氧基羰基)-O-环己基甲基-L-酪氨酸甲基酯(参考化合物14)按照如参考例13中同样的操作，并使用甲基环己烷溴代替正丁基溴提供无色油状的参考化合物14。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.96-1.81(m，11H)，2.77(m，1H)，2.93(m，1H)，3.56-3.63(m，3H)，3.73(d，2H，J＝5.7Hz)，4.19(m，1H)，4.97-4.98(m，2H)，6.65-6.83(m，2H)，7.01-7.14(m，2H)，7.28-7.32(m，5H)，7.74-7.79(m，1H)。
参考例15N-(苄氧基羰基)-L-酪氨醇(参考化合物15)向参考化合物11(18g，55mmol)的四氢呋喃溶液(100mL)中加入无水氯化锂(7.0g，160mmol)以及硼氢化钠(6.2g，160mmol)。进一步加入乙醇(200mL)并将混合物搅拌18小时。加入10％柠檬酸将反应混合物调节至pH 4，并减压蒸发四氢呋喃。将得到的产物用二氯甲烷萃取，并将溶液用硫酸镁干燥并减压浓缩。将残留物从己烷中结晶得到为无色晶体的参考化合物15(16g，91％)。
mp 66.9-68.2℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.46(m，1H)，2.72(dd，1H，J＝14.0，5.0Hz)，3.34(m，1H)，3.51-3.61(m，2H)，4.69(t，1H，J＝5.3Hz)，4.96(dd，2H，J＝17.4，12.6Hz)，6.63-6.67(m，2H)，6.97-7.04(m，3H)，7.25-7.37(m，5H)，9.13(s，1H)。
计算分析值C17H19NO4C，67.76；H，6.36；N，4.65。测量值C，67.09；H，6.32；N，4.54。
参考例16N-(苄氧基羰基)-O-甲基-L-酪氨醇(参考化合物16)按照如参考例15中同样的操作，并使用参考化合物12代替参考化合物11，提供为无色晶体的参考化合物16。
mp 81.7-83.6℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.51(m，1H)，2.78(dd，1H，J＝14.0，5.3Hz)，3.25-3.40(m，2H)，3.60(m，1H)，3.72(s，3H)，4.72(t，1H，J＝5.6Hz)，4.96(dd，2H，J＝15.6，12.9Hz)，6.80-6.85(m，2H)，7.05-7.13(m，3H)，7.25-7.36(m，5H)。
计算分析值C18H21NO4C，68.55；H，6.71；N，4.44。测量值C，68.41；H，6.63；N，4.37.
参考例17N-(苄氧基羰基)-O-丁基-L-酪氨醇(参考化合物17)按照如参考例15中同样的操作，并使用参考化合物13代替参考化合物11，提供为无色晶体的参考化合物17。
mp 64.7-65.3℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.93(t，3H，J＝7.4Hz)，1.37-1.49(m，2H)，1.63-1.73(m，2H)，2.50(m，1H)，2.77(dd，1H，J＝13.5，5.1Hz)，3.26-3.41(m，2H)，3.61(m，1H)，3.92(t，2H，J＝6.3Hz)，4.72(t，1H，J＝5.6Hz)，4.96(dd，2H，J＝16.8，12.6Hz)，6.78-6.83(m，2H)，7.05-7.15(m，3H)，7.24-7.37(m，5H)。
参考例18N-(苄氧基羰基)-O-环己基甲基-L-酪氨醇(参考化合物18)按照如参考例15中同样的操作，并使用参考化合物14代替参考化合物11，提供为无色晶体的参考化合物18。
mp 56.0-57.2℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.97-1.82(m，11H)，2.49(m，1H)，2.77(dd，1H，J＝14.0，5.0Hz)，3.25-3.40(m，2H)，3.60(m，1H)，3.72(d，2H，J＝6.0Hz)，4.73(t，1H，J＝5.6Hz)，4.90-5.00(m，2H)，6.79-6.81(m，2H)，7.01-7.10(m，3H)，7.24-7.36(m，5H)。
参考例19N-(9-芴基甲氧基羰基)-2-氟-L-苯基丙氨醇(参考化合物19)向参考化合物3(3.0g，18mmol)在四氢呋喃中的溶液(30mL)中，加入N-(9-芴基甲氧基羰基氧基)琥珀酰亚胺(Fmoc-OSu)(6.0g，17mmol)以及三乙基胺(2.7g，27mmol)并将混合物室温搅拌18小时。减压浓缩并将残留物溶解在乙酸乙酯中。将该溶液用1M盐酸、饱和的碳酸氢钠溶液以及饱和的盐水洗涤，无水硫酸镁干燥并减压浓缩。将残留物用水和甲醇溶液洗涤得到为无色晶体的参考化合物19(6.9g，49％)。
参考例20N-(9-芴基甲氧基羰基)-2-氯-L-苯基丙氨醇(参考化合物20)按照如参考例19中同样的操作，并使用参考化合物4代替参考化合物3提供参考化合物20为无色晶体的。
mp 158.1-159.8℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.66(dd，1H，J＝13.8，9.9Hz)，3.07(m，1H)，3.32-3.47(m，2H)，3.78(m，1H)，4.08-4.23(m，3H)，4.86(t，1H，J＝5.6Hz)，7.17-7.44(m，9H)，7.64(t，2H，J＝7.7Hz)，7.88(d，2H，J＝7.5Hz)。
参考例21
N-(9-芴基甲氧基羰基)-O-苄基-L-丝氨醇(参考化合物21)按照如参考例19中同样的操作，并使用参考化合物5代替参考化合物3提供为无色晶体的参考化合物21。
mp 178.1-184.8℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ3.41-3.52(m，4H)，3.69(m，1H)，4.20-4.35(m，3H)，4.48(s，2H)，4.70(t，1H，J＝5.7Hz)，7.17(d，1H，J＝8.4Hz)，7.27-7.45(m，9H)，7.73(d，2H，J＝7.2Hz)，7.89(d，2H，J＝7.5Hz)。
参考例22N-(9-芴基甲氧基羰基)-L-联苯基丙氨醇(参考化合物22)在冰浴下，向Fmoc-L-联苯基丙氨酸(9.0g，19mmol)的二甲氧基乙烷(50mL)的溶液中加入N-甲基吗啉(2.0g，19mmol)以及异丁基氯甲酸酯(2.4g，19mmol)。将该溶液搅拌1小时，并将反应混合物过滤并将滤液冷却。向该溶液中加入硼氢化钠(1.1g，29mmol)的水溶液(5.0mL)，并进一步加入水(150mL)。过滤收集沉淀并用甲醇洗涤得到为无色晶体的参考化合物22(8.7g，99％)。
mp 170.5-171.1℃1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.65(dd，1H，J＝13.7，9.2Hz)，2.91(dd，1H，J＝13.8，4.8Hz)，3.32-3.46(m，2H)，3.69(m，1H)，4.12-4.26(m，3H)，4.81(m，1H)，7.20-7.46(m，10H)，7.52-7.68(m，6H)，7.88(d，2H，J＝7.8Hz)。
参考例23Nα-苄氧基羰基-Nε-(叔丁氧基羰基)-L-赖氨醇(参考化合物23)按照如参考例7中同样的操作，并使用参考化合物6代替L-苯基丙氨醇提供为无色晶体的参考化合物23。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.24-1.54(m，6H)，1.37(s，9H)，2.88(dd，2H，J＝12.7，6.6Hz)，3.19-3.39(m，3H)，4.59(t，1H，J＝5.7Hz)，5.01(s，2H)，6.74(m，1H)，6.93(d，1H，J＝8.2Hz)，7.33-7.37(m，5H)。
参考例24Nα-苄氧基羰基-Nε-苯甲酰基-L-赖氨醇(参考化合物24)
在冰浴下，向参考化合物23(6.3g，17mmol)中加入(5.0mL)的20％三氟乙酸/二氯甲烷。将该溶液室温搅拌18小时。减压蒸发溶剂并加入氯仿。再次减压蒸发。将残留物悬浮在乙酸乙酯(100mL)中，并加入苯甲酰氯(2.4g，17mmol)以及三乙基胺(5.2g，51mmol)。将该溶液室温搅拌3小时，用1M盐酸、饱和的碳酸氢钠溶液以及饱和的盐水洗涤，无水硫酸镁干燥并减压浓缩。将残留物经柱层析[柱；UltraPack硅胶300mm×37mm(由YAMAZENCORPORATION制造)，洗脱剂，乙酸乙酯∶己烷＝2∶1]纯化得到为无色晶体的参考化合物24(1.1g，18％)。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.24-1.59(m，6H)，3.22-3.43(m，5H)，4.60(t，1H，J＝5.6Hz)，5.00(s，2H)，6.95(d，1H，J＝9.2Hz)，7.29-7.53(m，8H)，7.81-7.84(m，2H)，8.42(m，1H)。
参考例25N-(苄氧基羰基)-L-苯基丙氨醛(参考化合物25)将参考化合物7(40g，140mmol)溶解在二甲基亚碸(160mL)以及二氯甲烷(80mL)中，并将混合物冰浴冷却。向其中加入(80mL)的N，N-二异丙基乙基胺(54g，420mmol)以及三氧化硫吡啶复合物(67g，420mmol)在二甲基亚碸中的悬浮液。将该溶液在冰浴下搅拌30分钟。将该反应混合物用乙酸乙酯稀释，用1M盐酸、饱和的碳酸氢钠溶液以及饱和的盐水洗涤，无水硫酸镁干燥并减压浓缩。将残留物从己烷/乙酸乙酯混合溶液结晶得到为无色晶体的参考化合物25(30g，76％)。
mp 66.2-66.9℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.72(dd，1H，J＝14.1，10.4Hz)，3.15(dd，1H，J＝14.1，4.2Hz)，4.2(m，1H)，4.96-5.05(m，2H)，7.19-7.39(m，10H)，7.76(d，1H，J＝7.8Hz)，9.57(s，1H)。
计算分析值C17H17NO3C，72.07；H，6.05；N，4.94。测量值C，71.69；H，6.30；N，4.76.
参考例26N-(苄氧基羰基)-高-L-苯基丙氨醛(参考化合物26)按照如参考例25中同样的操作，并使用参考化合物8代替参考化合物7提供浅黄色油状的参考化合物26。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.75(m，1H)，2.02(m，1H)，2.55-2.73(m，2H)，3.91(m，1H)，5.08(s，2H)，7.17-7.45(m，10H)，7.85(d，1H，J＝7.2Hz)，9.49(s，1H)。
参考例27N-(苄氧基羰基)-3-(2-萘基)-L-丙氨醛(参考化合物27)按照如参考例25中同样的操作，并使用参考化合物9代替参考化合物7提供为无色晶体的参考化合物27。
mp 65.0-66.9℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.82(m，1H)，3.02(dd，1H，J＝13.7，5.3Hz)，3.74(m，1H)，4.88-4.99(m，2H)，7.14-7.52(m，8H)，7.72(s，1H)，7.80-7.89(m，4H)，9.63(s，1H)。
参考例28N-(苄氧基羰基)-D-苯基丙氨醛(参考化合物28)按照如参考例25中同样的操作，并使用参考化合物10代替参考化合物7提供为无色晶体的参考化合物28。
mp 66.2-66.9℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.72(dd，H，J＝14.0，10.4Hz)，3.15(dd，H，J＝14.0，4.7Hz)，4.20(m，1H)，4.96-5.05(m，2H)，7.19-7.39(m，10H)，7.75(d，1H，J＝7.8Hz)，9.57(s，1H)。
计算分析值C17H17NO3C，72.07；H，6.05；N，4.94。测量值C，72.09；H，6.01；N，5.05.
参考例29N-(苄氧基羰基)-L-酪氨醛(参考化合物29)按照如参考例25中同样的操作，并使用参考化合物15代替参考化合物7提供无色油状的参考化合物29。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.59(m，1H)，3.03(dd，1H，J＝14.0，4.1Hz)，4.14(m，1H)，4.94-5.12(m，2H)，6.67-6.75(m，2H)，7.02-7.04(m，2H)，7.31-7.40(m，5H)，7.70(d，1H，J＝7.5Hz)，9.24(s，1H)，9.56(m，1H)。
参考例30N-(苄氧基羰基)-O-甲基-L-酪氨醛(参考化合物30)按照如参考例25中同样的操作，并使用参考化合物16代替参考化合物7提供无色油状的参考化合物30。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.66(dd，1H，J＝14.1，10.2Hz)，3.07(dd，1H，J＝14.1，4.5Hz)，3.72(s，3H)，4.15(m，1H)，4.92-5.05(m，2H)，6.81-6.86(m，2H)，7.11-7.19(m，2H)，7.23-7.39(m，6H)，9.56(s，1H)。
参考例31N-(苄氧基羰基)-O-丁基-L-酪氨醛(参考化合物31)按照如参考例25中同样的操作，并使用参考化合物17代替参考化合物7提供无色油状的参考化合物31。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.93(t，3H，J＝7.2Hz)，1.37-1.49(m，2H)，1.63-1.72(m，2H)，2.65(dd，1H，J＝14.0，10.1Hz)，3.07(dd，1H，J＝14.3，4.7Hz)，3.92(t，2H，J＝6.3Hz)，4.15(m，1H)，5.01(s，2H)，6.80-6.85(m，2H)，7.11-7.14(m，2H)，7.27-7.39(m，5H)，7.71(d，1H，J＝7.5Hz)，9.56(s，1H)。
参考例32N-(苄氧基羰基)-O-环己基甲基-L-酪氨醛(参考化合物32)按照如参考例25中同样的操作，并使用参考化合物18代替参考化合物7提供无色油状的参考化合物32。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.97-1.31(m，5H)，1.64-1.82(m，6H)，2.65(dd，1H，J＝14.0，10.1Hz)，3.06(dd，1H，J＝14.1，4.5Hz)，3.73(d，2H，J＝6.3Hz)，4.15(m，1H)，4.96-5.01(m，2H)，6.79-6.83(m，2H)，7.10-7.14(m，2H)，7.28-7.38(m，5H)，7.69-7.77(m，1H)，9.56(s，1H)。
参考例33N-(9-芴基甲氧基羰基)-2-氟-L-苯基丙氨醛(参考化合物33)按照如参考例25中同样的操作，并使用参考化合物19代替参考化合物7提供为无色晶体的参考化合物33。
mp 64.0-64.6℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.78(dd，1H，J＝14.1，10.5Hz)，3.20(dd，1H，J＝14.1，4.2Hz)，4.08-4.38(m，4H)，7.06-7.45(m，9H)，7.63-7.67(m，2H)，7.87-7.91(m，2H)，9.53(s，1H)。
参考例34N-(9-芴基甲氧基羰基)-2-氯-L-苯基丙氨醛(参考化合物34)按照如参考例25中同样的操作，并使用参考化合物20代替参考化合物7提供为无色晶体的参考化合物34。
mp 87.1-88.2℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.82(dd，1H，J＝14.0，11.0Hz)，3.21(m，1H)，4.09-4.40(m，4H)，7.09-7.45(m，9H)，7.63-7.67(m，2H)，7.88-7.91(m，2H)，9.54(s，1H)。
参考例35N-(9-芴基甲氧基羰基)-O-苄基-L-丝氨醛(参考化合物35)按照如参考例25中同样的操作，并使用参考化合物21代替参考化合物7提供无色油状的参考化合物35。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ3.50(m，1H)，3.74-3.75(m，2H)，4.22-4.35(m，3H)，4.50(dd，2H，J＝15.6，12.3Hz)，7.29-7.45(m，10H)，7.70-7.76(m，2H)，7.89-7.95(m，2H)，9.52(s，1H)。
参考例36N-(9-芴基甲氧基羰基)-L-联苯基丙氨醛(参考化合物36)按照如参考例25中同样的操作，并使用参考化合物22代替参考化合物7提供为无色晶体的参考化合物36。
mp 68.5-69.1℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.76(dd，1H，J＝14.7，9.3Hz)，3.19(dd，1H，J＝14.3，3.8Hz)，4.08-4.39(m，4H)，7.28-7.49(m，10H)，7.53-7.69(m，6H)，7.83-7.91(m，2H)，9.57(s，1H)。
参考例37Nα-苄氧基羰基-Nε-苯甲酰基-L-赖氨醛(参考化合物37)按照如参考例25中同样的操作，并使用参考化合物24代替参考化合物7提供为无色晶体的参考化合物37。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.30-1.59(m，5H)，1.71-1.83(m，1H)，3.22-3.28(m，2H)，3.89-3.96(m，1H)，5.05(s，2H)，7.30-7.37(m，5H)，7.42-7.54(m，3H)，7.72(d，1H，J＝7.5Hz)，7.82-7.85(m，2H)，8.44(t，1H，J＝5.6Hz)，9.48(d，1H，J＝0.6Hz)。
参考例38N-((1S)-1-(2，5-二氧环戊基)-2-苯基乙基)(苄氧基)甲酰胺(参考化合物38)向参考化合物25(29g，100mmol)在甲苯的溶液(500mL)中，加入乙二醇(31g，510mmol)以及对甲苯磺酸吡啶盐(5.1g，20mmol)。将该溶液在80℃搅拌18小时。反应完成后，将该溶液用1M盐酸、饱和的碳酸氢钠溶液以及饱和的盐水洗涤，无水硫酸镁干燥并减压浓缩。将残留物从己烷/乙酸乙酯混合溶液中结晶得到为无色晶体的参考化合物38(33g，75％)。
mp 88.2-92.2℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.62(dd，1H，J＝14.0，11.0Hz)，2.84(dd，1H，J＝14.0，3.8Hz)，3.78-3.96(m，5H)，4.82(d，1H，J＝3.6Hz)，4.90(d，1H，J＝12.9Hz)，4.96(d，1H，J＝13.2Hz)，7.19-7.35(m，11H)。计算分析值C19H21NO4C，69.71；H，6.47；N，4.28。测量值C，69.68；H，6.49；N，3.99.
参考例39N-((1S)-1-(2，5-二氧环戊基)-3-苯基丙基)(苄氧基)甲酰胺(参考化合物39)按照如参考例38中同样的操作，并使用参考化合物26代替参考化合物25提供为无色晶体的参考化合物39。
mp 111.3-112.4℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.59-1.78(m，2H)，2.49(m，1H)，2.65(m，1H)，3.57(m，1H)，3.75-3.87(m，4H)，4.74(d，1H，J＝3.9Hz)，5.05(s，2H)，7.15-7.38(m，11H)。
计算分析值C20H23NO4C，70.36；H，6.79；N，4.10。测量值C，70.55；H，6.78；N，3.96.
参考例40N-((1S)-1-(2，5-二氧环戊基)-2-(2-萘基)乙基)(苄氧基)甲酰胺(参考化合物40)按照如参考例38中同样的操作，并使用参考化合物27代替参考化合物25提供为无色晶体的参考化合物40。
mp 128.0-128.6℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.79(dd，1H，J＝13.8，10.8Hz)，3.02(dd，1H，J＝14.0，3.8Hz)，3.83-4.04(m，5H)，4.82-4.94(m，3H)，7.09-7.22(m，5H)，7.38-7.51(m，4H)，7.73(s，1H)，7.80-7.90(m，3H)。
参考例41N-((1R)-1-(2，5-二氧环戊基)-2-苯基乙基)(苄氧基)甲酰胺(参考化合物41)按照如参考例38中同样的操作，并使用参考化合物28代替参考化合物25提供为无色晶体的参考化合物41。
mp 120.9-122.0℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.62(dd，1H，J＝14.1，10.8Hz)，2.84(dd，1H，J＝14.1，4.1Hz)，3.78-3.96(m，5H)，4.82(d，1H，J＝3.6Hz)，4.90(d，1H，J＝12.9Hz)，4.96(d，1H，J＝12.9Hz)，7.19-7.34(m，11H)。
计算分析值C19H21NO4C，69.71；H，6.47；N，4.28。测量值C，69.68；H，6.49；N，4.32.
参考例42N-((1S)-1-(2，5-二氧环戊基)-2-(4-羟基苯基)乙基)(苄氧基)甲酰胺(参考化合物42)按照如参考例38中同样的操作，并使用参考化合物29代替参考化合物25提供无色油状的参考化合物42。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.52(m，1H)，2.75(m，1H)，3.58(m，1H)，3.81(m，1H)，4.79(d，4H，J＝3.3Hz)，4.89-5.01(m，2H)，6.64-6.67(m，2H)，7.00-7.02(m，2H)，7.19-7.35(m，6H)，9.16(s，1H)。
参考例43N-((1S)-1-(2，5-二氧环戊基)-2-(4-甲氧基苯基)乙基)(苄氧基)甲酰胺(参考化合物43)按照如参考例38中同样的操作，并使用参考化合物30代替参考化合物25提供为无色晶体的参考化合物43。
mp 55.8-58.6℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.55(m，1H)，2.77(dd，1H，J＝13.7，3.8Hz)，3.72(s，3H)，3.76-3.95(m，5H)，4.80(d，1H，J＝3.9Hz)，4.94(dd，2H，J＝19.4，12.8Hz)，6.79-6.83(m，2H)，7.12-7.14(m，2H)，7.19-7.35(m，6H)。
计算分析值C20H23NO5C，67.21；H，6.49；N，3.92。测量值C，66.85；H，6.45；N，3.86.
参考例44N-((1S)-2-(4-丁氧基苯基)-1-(2，5-二氧环戊基)乙基)(苄氧基)甲酰胺(参考化合物44)按照如参考例38中同样的操作，并使用参考化合物31代替参考化合物25提供为无色晶体的参考化合物44。
mp 64.5-66.0℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.93(t，3H，J＝7.4Hz)，1.37-1.50(m，2H)，1.63-1.73(m，2H)，2.54(m，1H)，2.77(dd，1H，J＝14.1，3.6Hz)，3.72-3.95(m，7H)，4.79(m，1H)，4.94(dd，1H，J＝21.8，13.1Hz)，6.80(d，2H，J＝8.4Hz)，7.11(d，2H，J＝8.4Hz)，7.18-7.35(m，6H)。
参考例45N-((1S)-2-(4-(环己基甲氧基)苯基)-1-(2，5-二氧环戊基)乙基)(苄氧基)甲酰胺(参考化合物45)
按照如参考例38中同样的操作，并使用参考化合物32代替参考化合物25提供为无色晶体的参考化合物45。
mp 61.3-62.4℃.
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.98-1.32(m，5H)，1.64-1.82(m，6H)，2.55(m，1H)，2.76(dd，1H，J＝13.8，3.9Hz)，3.71-3.77(m，3H)，3.79-3.95(m，4H)，4.80(d，1H，J＝3.9Hz)，4.88-4.99(m，2H)，6.78-6.81(m，2H)，7.09-7.12(m，2H)，7.18-7.35(m，6H)。
参考例46N-((1S)-1-(2，5-二氧环戊基)-2-(2-氟苯基)乙基)(9-芴基甲氧基羰基)甲酰胺(参考化合物46)按照如参考例38中同样的操作，并使用参考化合物33代替参考化合物25提供为无色晶体的参考化合物46。
mp 67.8-71.7℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.65(m，1H)，2.97(dd，1H，J＝13.8，3.0Hz)，3.82-4.00(m，5H)，4.08-4.19(m，3H)，4.86(d，1H，J＝3.9Hz)，7.01-7.45(m，9H)，7.60-7.65(m，2H)，7.87-7.89(m，2H)。
参考例47N-((1S)-2-(2-氯苯基)-1-(2，5-二氧环戊基)乙基)(9-芴基甲氧基羰基)甲酰胺(参考化合物47)按照如参考例38中同样的操作，并使用参考化合物34代替参考化合物25提供为无色晶体的参考化合物47。
mp 65.6-66.1℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ3.07(dd，1H，J＝13.8，3.3Hz)，3.84-3.98(m，5H)，4.07-4.14(m，3H)，4.87(d，1H，J＝4.2Hz)，7.14-7.46(m，9H)，7.60-7.66(m，2H)，7.87-7.89(m，2H)。
参考例48N-((1S)-2-苄氧基-1-(2，5-二氧环戊基)乙基)(9-芴基甲氧基羰基)甲酰胺(参考化合物48)
按照如参考例38中同样的操作，并使用参考化合物35代替参考化合物25提供无色油状的参考化合物48。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ3.44-3.58(m，2H)，3.79-4.05(m，5H)，3.99-4.32(m，3H)，4.48-4.51(m，2H)，7.15-7.44(m，10H)，7.69-7.75(m，2H)，7.89(d，2H，J＝7.5Hz)。
参考例49N-((1S)-2-(4-联苯基)-1-(2，5-二氧环戊基)乙基)(9-芴基甲氧基羰基)甲酰胺(参考化合物49)按照如参考例38中同样的操作，并使用参考化合物36代替参考化合物25提供为无色晶体的参考化合物49。
mp 101.5-103.3℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ3.44-3.58(m，2H)，3.79-3.92(m，5H)，4.19-4.32(m，3H)，4.48-4.51(m，2H)，7.15-7.44(m，10H)，7.69-7.75(m，2H)，7.89(d，2H，J＝7.5Hz)。
参考例50N-((1S)-5-(苯甲酰基氨基)-1-(2，5-二氧环戊基)戊基)(苄氧基)甲酰胺(参考化合物50)按照如参考例38中同样的操作，并使用参考化合物37代替参考化合物25提供为无色晶体的参考化合物50。
mp 103.7-104.2℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.21-1.60(m，6H)，3.20-3.26(m，2H)，3.51-3.61(m，1H)，3.75-3.90(m，4H)，4.72(d，1H，J＝4.0Hz)，5.01(m，2H)，7.12(d，2H，J＝9.2Hz)，7.30-7.38(m，5H)，7.41-7.54(m，3H)，7.80-7.83(m，2H)，8.43(t，1H，J＝6.3Hz)。
参考例51(1S)-1-(2，5-二氧环戊基)-2-苯基乙基胺(参考化合物51)将参考化合物38溶解在乙酸乙酯(250mL)中，并在钯碳(Pd；10％)(15g)存在下在大气压力下进行催化还原。搅拌18小时后，滤出钯碳并浓缩滤液得到无色油状的参考化合物51(19g，95％)。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.21(s，2H)，2.44(dd，1H，J＝13.3，9.3Hz)，2.79(dd，1H，J＝13.3，4.4Hz)，2.88(m，1H)，3.80-3.97(m，4H)，4.61(d，1H，J＝3.9Hz)，7.15-7.31(m，5H)。
参考例52(1S)-1-(2，5-二氧环戊基)-3-苯基丙基胺(参考化合物52)按照如参考例51中同样的操作，并使用参考化合物39代替参考化合物38提供无色油状的参考化合物52。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.32(s，2H)，1.45(m，1H)，1.73(m，1H)，2.54-2.56(m，2H)，2.79(m，1H)，3.75-3.90(m，4H)，4.58(d，1H，J＝4.2Hz)，7.13-7.30(m，5H)。
参考例53(1S)-1-(2，5-二氧环戊基)-2-(2-萘基)乙基胺(参考化合物53)按照如参考例51中同样的操作，并使用参考化合物40代替参考化合物38提供无色油状的参考化合物53。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.57(s，2H)，2.63(dd，1H，J＝13.1，8.9Hz)，2.94-3.05(m，2H)，3.79-4.02(m，4H)，4.68(d，1H，J＝3.6Hz)，7.41-7.51(m，3H)，7.73(s，1H)，7.82-7.88(m，3H)。
参考例54(1R)-1-(2，5-二氧环戊基)-2-苯基乙基胺(参考化合物54)按照如参考例51中同样的操作，并使用参考化合物41代替参考化合物38提供无色油状的参考化合物54。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.25(s，2H)，2.44(dd，1H，J＝13.2，9.3Hz)，2.79(dd，1H，J＝13.4，4.4Hz)，2.88(m，1H)，3.79-3.97(m，4H)，4.61(d，1H，J＝3.9Hz)，7.15-7.31(m，5H)。
参考例55(1S)-1-(2，5-二氧环戊基)-2-(4-羟基苯基)乙基胺(参考化合物55)
按照如参考例51中同样的操作，并使用参考化合物42代替参考化合物38提供无色油状的参考化合物55。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.34(dd，1H，J＝13.5，9.0Hz)，2.67(m，1H)，2.81(m，1H)，3.78-3.95(m，4H)，4.58(d，1H，J＝3.9Hz)，6.65-6.69(m，2H)，6.98-7.03(m，2H)。
参考例56(1S)-1-(2，5-二氧环戊基)-2-(4-甲氧基苯基)乙基胺(参考化合物56)按照如参考例51中同样的操作，并使用参考化合物43代替参考化合物38提供无色油状的参考化合物56。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.39(dd，1H，J＝13.5，9.0Hz)，2.72(dd，1H，J＝13.5，4.5Hz)，2.83(m，1H)，3.72(s，3H)，3.76-3.98(m，4H)，4.59(d，1H，J＝3.9Hz)，6.81-6.86(m，2H)，7.11-7.16(m，2H)。
参考例57(1S)-2-(4-丁氧基苯基)-1-(2，5-二氧环戊基)乙基胺(参考化合物57)按照如参考例51中同样的操作，并使用参考化合物44代替参考化合物38提供无色油状的参考化合物57。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.96(t，3H，J＝7.4Hz)，1.40-1.52(m，2H)，1.66-1.75(m，2H)，2.43(dd，1H，J＝9.2，13.7Hz)，2.75(dd，1H，J＝13.5，4.5Hz)，2.87(m，1H)，3.79-3.86(m，2H)，3.89-4.02(m，4H)，4.63(m，1H)，6.84-6.87(m，2H)，7.13-7.16(m，2H)。
参考例58(1S)-2-(4-(环己基甲氧基)苯基)-1-(2，5-二氧环戊基)乙基胺(参考化合物58)按照如参考例51中同样的操作，并使用参考化合物45代替参考化合物38提供无色油状的参考化合物58。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.96-1.31(m，6H)，1.63-1.81(m，5H)，2.37(dd，1H，J＝13.2，9.0Hz)，2.70(dd，1H，J＝13.5，4.5Hz)，2.81(m，1H)，3.71-3.73(m，2H)，3.75-3.98(m，4H)，4.58-4.59(m，1H)，6.80-6.83(m，2H)，7.09-7.12(m，2H)。
参考例59(1S)-1-(2，5-二氧环戊基)-2-(2-氟苯基)乙基胺(参考化合物59)将参考化合物46(0.80g，1.8mmol)溶解在哌啶(5.0mL)中，并将该溶液室温搅拌18小时并减压浓缩。将残留物经柱层析纯化(柱硅胶60N(40-50目)，洗脱剂二氯甲烷/甲醇/水(9∶1∶0.1))得到无色油状的参考化合物59(0.20g，51％)。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.28(s，2H)，2.47(m，1H)，2.83(m，1H)，3.80-3.96(m，5H)，4.65(d，1H，J＝3.6Hz)，6.99-7.15(m，4H)。
参考例60(1S)-2-(2-氯苯基)-1-(2，5-二氧环戊基)乙基胺(参考化合物60)按照如参考例59中同样的操作，并使用参考化合物47代替参考化合物46提供无色油状的参考化合物60。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.34(brs，2H)，2.57(m，1H)，2.96(m，1H)，3.75-3.97(m，5H)，4.69(d，1H，J＝3.6Hz)，7.19-7.42(m，4H)。
参考例61(1S)-2-苄氧基-1-(2，5-二氧环戊基)乙基胺(参考化合物61)按照如参考例59中同样的操作，并使用参考化合物48代替参考化合物46提供无色油状的参考化合物61。
参考例62(1S)-2-(4-联苯基)-1-(2，5-二氧环戊基)乙基胺(参考化合物62)按照如参考例59中同样的操作，并使用参考化合物49代替参考化合物46提供无色油状的参考化合物62。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.37(s，2H)，2.49(m，1H)，2.83(dd，1H，J＝13.2，4.2Hz)，2.92(m，1H)，3.78-4.00(m，4H)，4.65(m，1H)，7.31-7.66(m，9H)。
参考例63
(1S)-5-(苯甲酰基氨基)-1-(2，5-二氧环戊基)戊基胺(参考化合物63)按照如参考例59中同样的操作，并使用参考化合物50代替参考化合物38提供无色油状的参考化合物63。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.13-1.57(m，6H)，2.54-2.60(m，1H)，3.22-3.28(m，2H)，3.76-3.90(m，4H)，4.55(d，1H，J＝4.3Hz)，7.43-7.54(m，3H)，7.83(d，2H，J＝7.8Hz)，8.43(t，1H，J＝5.0Hz)。
参考例64(2S)-N-((1S)-1-(2，5-二氧环戊基)-2-苯基乙基)-2-羟基-4-甲基戊酰胺(参考化合物64)将参考化合物51(15g，78mmol)、L-亮氨酸(10g，78mmol)、1-羟基苯并三唑(12g，85mmol)以及三乙基胺(8.6g，85mmol)溶解在N，N-二甲基甲酰胺(120mL)中。在冰冷下，向其中加入(40mL)的1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(16g，85mmol)在二氯甲烷中的悬浮液。将该溶液室温搅拌18小时并减压浓缩。将残留物用乙酸乙酯稀释并将该溶液用1M盐酸、饱和的碳酸氢钠溶液以及饱和的盐水洗涤，无水硫酸镁干燥并减压浓缩。将残留物从乙酸乙酯中结晶得到为无色晶体的参考化合物64(18g，75％)。
mp 104.4-106.5℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.78(d，6H，J＝6.6Hz)，1.05-1.20(m，2H)，1.59(m，1H)，2.69(dd，1H，J＝14.1，10.2Hz)，2.86(dd，1H，J＝14.1，4.5Hz)，3.74-3.97(m，5H)，4.16(m，1H)，4.83(d，1H，J＝3.3Hz)，5.40(d，1H，J＝5.7Hz)，7.13-7.27(m，5H)，7.34(d，1H，J＝9.6Hz)。
计算分析值C17H25NO4C，66.43；H，8.20；N，4.56。测量值C，66.60；H，8.30；N，4.27.
参考例65(2S)-N-((1S)-1-(2，5-二氧环戊基)-3-苯基丙基)-2-羟基-4-甲基戊酰胺(参考化合物65)按照如参考例64中同样的操作，并使用参考化合物52代替参考化合物51提供为无色晶体的参考化合物65。
mp 86.5-87.8℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.89(d，3H，J＝6.6Hz)，0.90(d，3H，J＝6.6Hz)，1.36-1.53(m，2H)，1.64-1.84(m，3H)，2.46(m，1H)，2.60(m，1H)，3.75-3.97(m，6H)，4.80(d，1H，J＝3.3Hz)，5.47(d，1H，J＝6.3Hz)，7.14-7.19(m，3H)，7.25-7.30(m，2H)，7.41(d，1H，J＝9.3Hz)。
参考例66N-((1S)-1-(2，5-二氧环戊基)-2-(2-萘基)乙基)-2-羟基-4-甲基戊酰胺(参考化合物66)按照如参考例64中同样的操作，并使用参考化合物53代替参考化合物51提供为无色晶体的参考化合物66。
mp 141.6-142.7℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.61-0.65(m，6H)，0.94-1.01(m，2H)，1.46(m，1H)，2.85(dd，1H，J＝13.7，10.4Hz)，3.05(dd，1H，J＝14.0，4.4Hz)，3.72(m，1H)，3.81-3.99(m，4H)，4.27(m，1H)，4.90(d，1H，J＝3.6Hz)，5.41(d，1H，J＝5.7Hz)，7.36-7.48(m，4H)，7.67(s，1H)，7.77-7.86(m，3H)。
计算分析值C21H27NO4C，70.56；H，7.61；N，3.92。测量值C，70.21；H，7.64；N，3.80.
参考例67(2S)-N-((1R)-1-(2，5-二氧环戊基)-2-苯基乙基)-2-羟基-4-甲基戊酰胺(参考化合物67)按照如参考例64中同样的操作，并使用参考化合物54代替参考化合物51提供为无色晶体的参考化合物67。
mp 120.9-122.0℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.80(d，3H，J＝3.9Hz)，0.83(d，3H，J＝3.9Hz)，1.15-1.34(m，2H)，1.62(m，1H)，2.70(dd，1H，J＝14.1，10.1Hz)，2.86(dd，1H，J＝14.1，4.5Hz)，3.72-3.98(m，5H)，4.14(m，1H)，4.83(d，1H，J＝3.3Hz)，5.28(d，1H，J＝6.3Hz)，7.14-7.27(m，5H)，7.44(d，1H，J＝9.3Hz)。
计算分析值C17H25NO4C，66.43；H，8.20；N，4.56。测量值C，66.53；H，8.24；N，4.46。
参考例68(2S)-N-((1S)-1-(2，5-二氧环戊基)-2-苯基乙基)-2-羟基-3-甲基丁酰胺(参考化合物68)按照如参考例64中同样的操作，并使用(S)-(+)-2-羟基-3-甲基丁酸代替L-亮氨酸提供为无色晶体的参考化合物68。
mp 91.4-92.0℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.46(d，3H，J＝6.9Hz)，0.74(d，3H，J＝7.2Hz)，1.79(m，1H)，2.70(dd，1H，J＝13.9，10.5Hz)，2.87(dd，1H，J＝13.9，4.4Hz)，3.60(dd，1H，J＝6.0，3.6Hz)，3.79-3.97(m，4H)，4.22(m，1H)，4.83(d，1H，J＝3.6Hz)，5.31(d，1H，J＝5.7Hz)，7.13-7.26(m，5H)，7.33(d，1H，J＝9.3Hz)。计算分析值C16H23NO4C，65.51；H，7.90；N，4.77。测量值C，65.36；H，7.84；N，4.54.
参考例69(2S)-N-((1S)-1-(2，5-二氧环戊基)-3-苯基丙基)-2-羟基-3-甲基丁酰胺(参考化合物69)按照如参考例64中同样的操作，并使用参考化合物52代替参考化合物51以及(S)-(+)-2-羟基-3-甲基丁酸代替L-亮氨酸提供为无色晶体的参考化合物69。
mp 104.4-111.6℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.82(d，3H，J＝6.9Hz)，0.93(d，3H，J＝6.9Hz)，1.62-1.86(m，2H)，2.02(m，1H)，2.47(m，1H)，2.62(m，1H)，3.73-4.00(m，6H)，4.81(d，1H，J＝3.6Hz)，5.41(d，1H，J＝6.3Hz)，7.14-7.19(m，3H)，7.25-7.27(m，2H)，7.42(d，1H，J＝9.3Hz)。
计算分析值C17H25NO4C，66.43；H，8.20；N，4.56。测量值C，65.73；H，8.18；N，5.00.
参考例70N-((1S)-1-(2，5-二氧环戊基)-2-苯基乙基)-2-羟基-3-苯基丙酰胺(参考化合物70)按照如参考例64中同样的操作，并使用(S)-(-)-3-苯基乳酸代替L-亮氨酸提供为无色晶体的参考化合物70。
mp 119.2-121.0℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.43(dd，1H，J＝13.7，8.9Hz)，2.65-2.85(m，3H)，3.77-4.01(m，5H)，4.17(m，1H)，4.81(d，1H，J＝3.6Hz)，5.55(d，1H，J＝6.0Hz)，7.12-7.29(m，10H)，7.45(d，1H，J＝9.6Hz)。
计算分析值C20H23NO4C，70.36；H，6.79；N，4.10。测量值C，70.23；H，6.71；N，4.01.
参考例71N-((1S)-1-(2，5-二氧环戊基)-2-(4-羟基苯基)乙基)-2-羟基-4-甲基戊酰胺(参考化合物71)按照如参考例64中同样的操作，并使用参考化合物55代替参考化合物51提供为无色晶体的参考化合物71。
mp 71.4-74.4℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.77-0.85(m，6H)，1.14-1.37(m，2H)，1.64(m，1H)，2.57(m，1H)，2.73(m，1H)，3.73-3.96(m，5H)，4.06(m，1H)，4.79(d，1H，J＝3.0Hz)，5.35(m，1H)，6.61-6.64(m，2H)，6.95-6.99(m，2H)，7.31(m，1H)，9.12(d，1H，J＝6.0Hz)。
计算分析值C17H25NO5C，63.14；H，7.79；N，4.33。测量值C，62.78；H，7.73；N，4.39.
参考例72N-((1S)-1-(2，5-二氧环戊基)-2-(4-甲氧基苯基)乙基)-2-羟基-4-甲基戊酰胺(参考化合物72)按照如参考例64中同样的操作，并使用参考化合物56代替参考化合物51提供为无色晶体的参考化合物72。
mp 84.4-88.4℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.79(d，6H，J＝6.3Hz)，1.06-1.21(m，2H)，1.57(m，1H)，2.61(dd，1H，J＝14.0，10.4Hz)，2.79(dd，1H，J＝14.0，4.7Hz)，3.69(s，3H)，3.73-3.96(m，5H)，4.11(m，1H)，4.81(d，1H，J＝3.3Hz)，5.39(d，1H，J＝5.7Hz)，6.78-6.81(m，2H)，7.08-7.11(m，2H)，7.28(d，1H，J＝9.6Hz)。计算分析值C18H27NO5C，64.07；H，8.07；N，4.15。测量值C，63.56；H，7.43；N，4.25.
参考例73N-((1S)-2-(4-丁氧基苯基)-1-(2，5-二氧环戊基)乙基)-2-羟基-4-甲基戊酰胺(参考化合物73)按照如参考例64中同样的操作，并使用参考化合物57代替参考化合物51提供为无色晶体的参考化合物73。
mp 85.5-86.3℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.78(d，6H，J＝6.9Hz)，0.91(t，3H，J＝7.4Hz)，1.09-1.15(m，2H)，1.35-1.47(m，2H)，1.51-1.71(m，3H)，2.60(dd，1H，J＝14.0，10.4Hz)，2.79(dd，1H，J＝13.8，4.5Hz)，3.73-3.95(m，7H)，4.11(m，1H)，4.81(d，1H，J＝3.3Hz)，5.39(d，1H，J＝5.7Hz)，6.77-6.79(m，2H)，7.06-7.09(m，2H)，7.27(d，1H，J＝9.3Hz)。
计算分析值C21H33NO5C，66.46；H，8.76；N，3.69。测量值C，66.11；H，8.64；N，3.42.
参考例74N-((1S)-2-(4-(环己基甲氧基)苯基)-1-(2，5-二氧环戊基)乙基)-2-羟基-4-甲基戊酰胺(参考化合物74)按照如参考例64中同样的操作，并使用参考化合物58代替参考化合物51提供为无色晶体的参考化合物74。
mp 111.0-112.2℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.77-0.85(m，6H)，0.92-1.34(m，7H)，1.53-1.80(m，7H)，2.56-2.65(m，1H)，2.74-2.82(m，1H)，3.69-3.97(m，7H)，4.09(m，1H)，4.81(m，1H)，5.26(d，1H，J＝6.3Hz)，6.76-6.79(m，2H)，7.05-7.09(m，2H)，7.26(d，1H，J＝9.3Hz)。
参考例75N-((1S)-1-(2，5-二氧环戊基)-2-(2-氟苯基)乙基)-2-羟基-4-甲基戊酰胺(参考化合物75)按照如参考例64中同样的操作，并使用参考化合物59代替参考化合物51提供为无色晶体的参考化合物75。
mp 80.8-83.4℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.74(d，6H，J＝6.6Hz)，1.04(t，2H，J＝6.9Hz)，1.53(m，1H)，2.67(m，1H)，2.90(dd，1H，J＝14.1，3.9Hz)，3.72(t，1H，J＝6.6Hz)，3.77-3.94(m，4H)，4.19(m，1H)，4.84(d，1H，J＝3.6Hz)，7.01-7.09(m，2H)，7.16-7.27(m，2H)，7.32(d，1H，J＝9.9Hz)。
参考例76N-((1S)-2-(2-氯苯基)-1-(2，5-二氧环戊基)乙基)-2-羟基-4-甲基戊酰胺(参考化合物76)按照如参考例64中同样的操作，并使用参考化合物60代替参考化合物51提供为无色晶体的参考化合物76。
mp 58.7-60.2℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.76-0.78(m，6H)，1.08(t，2H，J＝6.8Hz)，1.54(m，1H)，2.79(m，1H)，3.04(dd，1H，J＝13.7，3.8Hz)，3.74(m，1H)，3.82-3.97(m，4H)，4.30(m，1H)，4.89(dd，1H，J＝3.3，1.2Hz)，5.43(d，1H，J＝5.4Hz)，7.18-7.23(m，2H)，7.29-7.41(m，3H)。
参考例77N-((1S)-2-苄氧基-1-(2，5-二氧环戊基)乙基)-2-羟基-4-甲基戊酰胺(参考化合物77)按照如参考例64中同样的操作，并使用参考化合物61代替参考化合物51提供为无色晶体的参考化合物77。
mp 78.9-80.7℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.85-0.87(m，6H)，1.30-1.47(m，2H)，1.75(m，1H)，3.51(m，2H)，3.76-3.92(m，5H)，4.13(m，1H)，4.43-4.51(m，2H)，4.94(d，1H，J＝3.6Hz)，5.53(d，1H，J＝6.0Hz)，7.26-7.41(m，6H)。
参考例78N-((1S)-2-(4-联苯基)-1-(2，5-二氧环戊基)乙基)-2-羟基-4-甲基戊酰胺(参考化合物78)
按照如参考例64中同样的操作，并使用参考化合物62代替参考化合物51提供为无色晶体的参考化合物78。
mp 124.8-128.9℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.75(d，6H，J＝9.9Hz)，1.13(t，2H，J＝6.9Hz)，1.56(m，1H)，2.74(dd，1H，J＝14.4，10.2Hz)，2.91(dd，1H，J＝14.1，4.8Hz)，3.75-3.98(m，5H)，4.21(m，1H)，4.87(d，1H，J＝3.6Hz)，5.41(d，1H，J＝5.7Hz)，7.27-7.47(m，6H)，7.53-7.64(m，4H)。
参考例79(2S)-N-((1S)-5-(苯甲酰基氨基)-1-(2，5-二氧环戊基)戊基)-2-羟基-4-甲基戊酰胺(参考化合物79)按照如参考例64中同样的操作，并使用参考化合物63代替参考化合物51提供为无色晶体的参考化合物79。
mp 115.9-116.2℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.84(d，3H，J＝6.6Hz)，0.85(d，3H，J＝6.6Hz)，1.28-1.58(m，8H)，1.68-1.80(m，1H，3.19-3.26(m，2H)，3.75-3.92(m，6H)，4.78(d，1H，J＝3.4Hz)，5.45(d，1H，J＝6.0Hz)，7.25(d，1H，J＝9.5Hz)，7.42-7.53(m，3H)，7.83(dd，2H，J＝8.2，1.5Hz)，8.41(t，1H，J＝5.2Hz)。
实施例1(2S，5S)-5-苄基-6-羟基-2-(2-甲基丙基)-3-吗啉酮(化合物1)向参考化合物64(2.0g，6.5mmol)在四氢呋喃中的溶液(150mL)中，加入6M盐酸(150mL)。将溶液室温搅拌18小时。减压蒸去四氢呋喃，并将溶液用乙酸乙酯萃取。将有机层用饱和的碳酸氢钠溶液以及饱和的盐水洗涤，无水硫酸镁干燥并减压浓缩。将残留物经HPLC体系[柱；YMC-Pack ODS-A250×20mm(由YMC Co.，Ltd.制造)，洗脱剂；乙腈/水/三氟乙酸＝30∶70∶0.1]纯化。收集主级分并用乙酸乙酯萃取。将有机层用饱和的碳酸氢钠溶液以及饱和的盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，并减压浓缩。将残留物从己烷/丙酮混合物结晶得到为无色晶体的化合物1(0.50g，29％)。
mp 84.0-84.5℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.88(d，3H，J＝6.6Hz)，0.90(d，3H，J＝7.2Hz)，1.44(m，1H)，1.59(m，1H)，1.79(m，1H)，2.71-2.81(m，2H)，3.37(m，1H)，4.09(dd，1H，J＝9.8，3.5Hz)，4.84(d，1H，J＝4.1Hz)，6.65(d，1H，J＝4.1Hz)，7.17-7.34(m，5H)，7.79(d，1H，J＝4.5Hz)。
计算分析值C15H21NO3C，68.42；H，8.04；N，5.32。测量值C，67.93；H，7.92；N，5.11。
MALDI-TOF MS[M+H]+计算值264.160，实测值264.192. D25-75.8((C＝0.219)。
实施例2(2S，5S)-6-羟基-2-(2-甲基丙基)-5-(2-苯基乙基)-3-吗啉酮(化合物2)按照如实施例1中同样的操作，并使用参考化合物65代替参考化合物64提供无色油状的化合物2。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.87(d，3H，J＝6.3Hz)，0.90(d，3H，J＝6.6Hz)，1.46-1.83(m，5H)，2.54-2.74(m，2H)，3.11(m，1H)，4.10(dd，1H，J＝9.6，3.6Hz)，4.96(d，1H，J＝4.2Hz)，6.67(d，1H，J＝4.2Hz)，7.15-7.31(m，5H)，8.01(d，1H，J＝3.6Hz)。
MALDI-TOF MS[M+H]+计算值278.176，实测值278.216。
D25-80.4°(C＝0.214)。
实施例3(2S，5S)-6-羟基-2-(2-甲基丙基)-5-(2-萘基甲基)-3-吗啉酮(化合物3)按照如实施例1中同样的操作，并使用参考化合物66代替参考化合物64提供无色油状的化合物3。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.82-0.88(m，6H)，1.41(m，1H)，1.59(m，1H)，1.78(m，1H)，2.89-2.97(m，2H)，3.49(m，1H)，4.11(dd，1H，J＝9.8，3.5Hz)，4.94(d，1H，J＝3.9Hz)，6.67(d，1H，J＝4.5Hz)，7.35-7.53(m，3H)，7.71(s，1H)，7.76-7.90(m，4H)。
实施例4(2S，5R)-5-苄基-6-羟基-2-(2-甲基丙基)-3-吗啉酮(化合物4)按照如实施例1中同样的操作，并使用参考化合物67代替参考化合物64提供无色油状的化合物4。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.85(d，3H，J＝4.2Hz)，0.87(d，3H，J＝4.5Hz)，1.47-1.65(m，2H)，1.74(m，1H)，2.71-2.82(m，2H)，3.41(m，1H)，3.66/4.67(m，1H)，3.86/4.10(dd，1H，J＝9.1，3.8Hz)，6.79/6.97(d，1H，J＝4.5/6.0Hz)，7.20-7.33(m，5H)，7.62(d，1H，J＝4.5Hz)。
MALDI-TOF MS[M+H]+计算值264.160，实测值264.193。
D25-95.0°(C＝0.200)。
实施例5(2S，5S)-5-苄基-6-羟基-2-(1-甲基乙基)-3-吗啉酮(化合物5)按照如实施例1中同样的操作，并使用参考化合物68代替参考化合物64提供为白色固体的化合物5。
mp 39.0-39.5℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.92(d，3H，J＝6.6Hz)，0.99(d，3H，J＝6.9Hz)，2.30(m，1H)，2.75-2.78(m，2H)，3.67(m，1H)，3.98(m，1H)，4.88(d，1H，J＝3.9Hz)，6.67(m，1H)，7.16-7.35(m，5H)，7.81(m，1H)。
MALDI-TOF MS[M+H]+计算值250.144，实测值250.187。
D25-108°(C＝0.209)。
实施例6(2S，5S)-6-羟基-2-(1-甲基乙基)-5-(2-苯基乙基)-3-吗啉酮(化合物6)按照如实施例1中同样的操作，并使用参考化合物69代替参考化合物64提供无色油状的化合物6。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.84(d，3H，J＝6.9Hz)，0.96(d，3H，J＝7.2Hz)，1.63-1.85(m，2H)，2.27(m，1H)，2.53-2.73(m，2H)，3.06(m，1H)，3.96(m，1H)，5.03(d，1H，J＝3.6Hz)，6.68(d，1H，J＝4.2Hz)，7.15-7.31(m，5H)，8.05(d，1H，J＝3.9Hz)。
MALDI-TOF MS[M+H]+计算值264.160，实测值264.190。
D25-66.1°(C＝0.233)。
实施例7
(2S，5S)-2，5-二苄基-6-羟基-3-吗啉酮(化合物7)按照如实施例1中同样的操作，并使用参考化合物70代替参考化合物64提供为无色晶体的化合物7。
mp 165.5-166.0℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.22-2.38(m，2H)，2.92-3.05(m，2H)，3.24(m，1H)，4.34(dd，1H，J＝6.3，4.2Hz)，4.77(d，1H，J＝3.6Hz)，6.66(d，1H，J＝3.9Hz)，6.99(d，2H，J＝7.5Hz)，7.17-7.33(m，8H)，7.83(d，1H，J＝4.5Hz)。
计算分析值C18H19NO3C，72.71；H，6.44；N，4.71。测量值C，72.72；H，6.67；N，4.70.
实施例8(2S，5S)-6-羟基-5-((4-羟基苯基)甲基)-2-(2-甲基丙基)-3-吗啉酮(化合物8)按照如实施例1中同样的操作，并使用参考化合物71代替参考化合物64提供无色油状的化合物8。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.82-0.91(m，6H)，1.41-1.64(m，2H)，1.79(m，1H)，2.58-2.73(m，2H)，3.26(m，1H)，4.06(m，1H)，4.82(d，1H，J＝3.9Hz)，6.61(d，1H，J＝3.0Hz)，6.68-6.70(m，2H)，6.95-6.97(m，2H)，7.74(d，1H，J＝3.9Hz)，9.23(m，1H)。
实施例9(2S，5S)-6-羟基-5-((4-甲氧基苯基)甲基)-2-(2-甲基丙基)-3-吗啉酮(化合物9)按照如实施例1中同样的操作，并使用参考化合物72代替参考化合物64提供无色油状的化合物9。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.82-0.91(m，6H)，1.44(m，1H)，1.59(m，1H)，1.55(m，1H)，2.60-2.82(m，2H)，3.30(m，1H)，3.70-3.73(m，3H)，4.09(m，1H)，4.84(d，1H，J＝4.5Hz)，6.64(d，1H，J＝4.2Hz)，6.81-6.90(m，2H)，7.07-7.12(m，2H)，7.77(d，1H，J＝4.2Hz)。
实施例10
(2S，5S)-5-((4-丁氧基苯基)甲基)-6-羟基-2-(2-甲基丙基)-3-吗啉酮(化合物10)按照如实施例1中同样的操作，并使用参考化合物73代替参考化合物64提供无色油状的化合物10。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.80-0.95(m，9H)，1.36-1.49(m，3H)，1.54-1.72(m，3H)，1.78(m，1H)，2.63-2.76(m，2H)，3.30(m，1H)，3.93(t，2H，J＝6.5Hz)，4.08(dd，1H，J＝9.6，3.6Hz)，4.84(s，1H)，6.82-6.88(m，2H)，7.05-7.10(m，2H)，7.77(d，1H，J＝3.9Hz)。
实施例11(2S，5S)-5-((4-(环己基甲氧基)苯基)甲基)-6-羟基-2-(2-甲基丙基)-3-吗啉酮(化合物11)按照如实施例1中同样的操作，并使用参考化合物74代替参考化合物64提供无色油状的化合物11。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.86-0.90(m，6H)，0.97-1.31(m，5H)，1.36-1.63(m，2H)，1.67-1.81(m，7H)，2.63-2.73(m，2H)，3.29(m，1H)，3.71-3.74(m，2H)，4.08(m，1H)，4.84(d，1H，J＝4.5Hz)，6.62(d，1H，J＝4.2Hz)，6.82-6.87(m，2H)，7.05-7.09(m，2H)，7.76(d，1H，J＝3.9Hz)。
实施例12(2S，5S)-5-((2-氟苯基)甲基)-6-羟基-2-(2-甲基丙基)-3-吗啉酮(化合物12)按照如实施例1中同样的操作，并使用参考化合物75代替参考化合物64提供无色油状的化合物12。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.74-0.89(m，6H)，1.51(m，2H)，1.73(m，1H)，2.77-2.81(m，2H)，3.39(m，1H)，4.04(dd，1H，J＝10.1，3.8Hz)，4.87(brs，1H)，6.66(d，1H，J＝4.2Hz)，7.01-7.27(m，4H)，7.81(d，1H，J＝4.8Hz)。
实施例13(2S，5S)-5-((2-氯苯基)甲基)-6-羟基-2-(2-甲基丙基)-3-吗啉酮(化合物13)
按照如实施例1中同样的操作，并使用参考化合物76代替参考化合物64提供无色油状的化合物13。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.87-0.94(m，6H)，1.61(m，1H)，1.80(m，1H)，2.92(d，2H，J＝7.2Hz)，3.44(m，1H)，4.09(dd，1H，J＝10.1，3.5Hz)，6.71(d，1H，J＝3.9Hz)，7.24-7.45(m，4H)，7.86(d，1H，J＝4.5Hz)。
实施例14(2S，5S)-5-苄氧基甲基-6-羟基-2-(2-甲基丙基)-3-吗啉酮(化合物14)按照如实施例1中同样的操作，并使用参考化合物77代替参考化合物64提供无色油状的化合物14。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.82-0.89(m，6H)，1.41-1.65(m，2H)，1.74(m，1H)，3.25-3.52(m，3H)，4.11(dd，1H，J＝9.5，3.5Hz)，4.45-4.54(m，2H)，5.11(m，1H)，7.26-7.39(m，5H)，7.82(d，1H，J＝3.9Hz)。
实施例15(2S，5S)-5-((4-联苯基)甲基)-6-羟基-2-(2-甲基丙基)-3-吗啉酮(化合物15)按照如实施例1中同样的操作，并使用参考化合物78代替参考化合物64提供无色晶体的化合物15。
mp 46.7-48.8℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.87-0.90(m，6H)，1.60(m，1H)，1.78(m，1H)，2.81-2.83(m，2H)，3.41(m，1H)，4.10(dd，1H，J＝9.8，3.5Hz)，6.68(d，1H，J＝4.2Hz)，7.27-7.67(m，9H)，7.84(d，1H，J＝3.9Hz)。
实施例16(2S，5S)-5-(4-(苯甲酰基氨基)丁基)-6-羟基-2-(2-甲基丙基)-3-吗啉酮(化合物16)按照如实施例1中同样的操作，并使用参考化合物79代替参考化合物64提供为无色晶体的化合物16。
mp 128.4-129.0℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.86(d，3H，J＝5.8Hz)，0.88(d，3H，J＝6.4Hz)，1.37-1.65(m，8H)，1.71-1.84(m，1H)，3.06(m，1H)，3.26(m，2H)，4.07(dd，1H，J＝9.7，3.5Hz)，4.91(d，1H，J＝4.4Hz)，6.63(d，1H，J＝4.4Hz)，7.42-7.54(m，3H)，7.81-7.84(m，2H)，7.88(d，1H，J＝3.8Hz)，8.40(t，1H，J＝5.3Hz)。
实验例1μ-钙蛋白酶和m-钙蛋白酶抑制活性的测定μ-钙蛋白酶和m-钙蛋白酶抑制活性根据文献[Anal.Biochem.vol.208，387-392(1993)]中描述的方法进行测定。具体地，包含0.5mg/mL酪蛋白、50mM Tris-HCl缓冲液(pH 7.4)、20mM二硫苏糖醇以及0.03酶单位的μ-钙蛋白酶(从人红细胞得到，由Cosmo Bio Co.，Ltd.制造)或m-钙蛋白酶(从猪肾得到，由Cosmo Bio Co.，Ltd.制造)的反应混合物(200μL)、包含各种浓度的测试药物的二甲基亚碸溶液(2.5μL)以及20mM氯化钙水溶液(50μL)加到96孔板中。在30℃反应60分钟后，将反应混合物(100μL)转移到不同的96孔板中，并加入纯净水(50μL)以及50％考马斯亮蓝溶液(100μL)。将板室温放置15分钟并测量595nm处的吸光度。利用没有测试药物的同样方式处理测量得到的值作为对照值，并且通过加入1mM EDTA代替20mM氯化钙水溶液得到的值作为空白值，从下式中计算出抑制率，并确定50％抑制需要的浓度量(IC50)。
抑制率(％)＝{1-(测量值-空白值)/(对照值-空白值)}×100测试结果1测试结果显示在表1中。
表2.本发明化合物的μ-钙蛋白酶和m-钙蛋白酶抑制活性
结果本发明的化合物显示优良的钙蛋白酶抑制活性。
实验例2 对木糖诱导的大鼠晶状体培养中的晶状体浊斑的预防作用将雄性SD大鼠(5-周龄)杀死，并摘出晶状体在包含10％胎牛血清(FBS，GIBCO)]的基本培养溶液[Eagle’s无血清最低基本培养基(MEM，GIBCO)中培养。将取出的晶状体分成3组，并按如下的方式进行培养(37℃，5％CO2)。
(1)对于正常组，在整个实验阶段将晶状体在基本培养溶液中进行培养。
(2)对于对照组，将晶状体在补充了30mM木糖的基本培养溶液中进行培养。
(3)对于给药组，将晶状体在补充了30mM木糖和100μM化合物1的基本培养液(加药基本培养液)中进行培养。
培养3天后，将(2)换成无木糖的基本培养液，并将(3)换成加药但无木糖的基本培养溶液，并继续培养11天。培养结束后，在实体镜显微镜下利用视频相机将晶状体图象导入到计算机中，并且用图象分析测定晶状体中心浊斑。
测试结果2结果显示在图1中。正常组的晶状体透明。对照组的晶状体在中心有不透明的白斑。在加入化合物1的组(给药组)，浊斑显著地受到抑制。
上述结果暗示本发明化合物1对抑制木糖-诱导的白内障有效。
实验例3 角膜渗透性测试将兔用戊巴比妥处死，并取出眼球。沿缘环切(在从取出的眼球角膜缘的巩膜侧约5mm处)切割得到的角膜固定在并行的角膜渗透测试器具上。对于供体单元(donor cell)以及受体单元(receptor cell)，分别加入后述的制剂例4的滴眼剂以及包含下述成分的缓冲剂。将在该器具中的单元在34℃培养3小时，随时间对受体单元进行取样，并利用高效液相色谱定量测定渗透的化合物1的浓度。
(受体单元缓冲液的成分)氯化钙0.132g氯化钾0.4g七水硫酸镁0.2g二水磷酸二氢钠0.187g氯化钠7.87g葡萄糖1.0gpH7.2无菌纯净水适当量总量 1000mL从高效液相色谱定量测定的结果可知，累积渗透量-时间曲线的线性部分认定为恒稳态，测定的斜率作为渗透速率(dQ/dt)，并利用下式计算表观渗透性系数(P)。
P＝(dQ/dt)×(1/ΔC)P表观渗透性系数(cm/s)ΔC在供体单元中的药物浓度测试结果3化合物1的表观渗透性系数(P)为1.9×10-5cm/s。
实验例4 对大鼠视网膜局部缺血性疾病的作用使用雄性SD大鼠(体重150-200g，购自Charles River Japan，Inc.)。进行麻醉的时候，等量的50mg/mL克他命注射液以及20mg/mL甲苯噻嗪注射液的混合物以1.0mL/kg体重的剂量在缺血前15分钟经肌肉内注射大鼠腿节。为了实现局部缺血，包括视网膜中央动脉的视神经利用Sugita Clip微型(No.98)结扎，并且中断血流55分钟。对于正常组，视网膜中央动脉只暴露并且并不建立切局部缺血。缺血再灌注7天后，制备组织样本。为了制备组织样本，过量的戊巴比妥溶液经腹膜内对动物给药以处死动物，并取出左眼球。取出的眼球在2％多聚甲醛和2.5％戊二醛(0.1M磷酸盐缓冲液pH 7.4)的固定溶液中固定24小时。固定后，制备石蜡包埋块，在通过视神经盘中心截面以3μm厚度切片，并用苏木精以及曙红(HE)染色。在光学显微镜下对视神经盘中心1-2mm范围内的视网膜切片的每0.25mm宽度的视网膜神经节细胞进行计数。将羧甲基纤维素钠溶解在蒸馏水中得到的浓度为0.5％溶液(CMC溶液)经口服施用于对照组，并将化合物1悬浮在CMC溶液中得到的1.0％溶液，以使化合物1以100mg/kg体重进行给药，经口服对给药组给药，二者都在缺血前15分钟以及免除缺血后立即给药。
测试结果4结果显示在图2中。由于局部缺血，神经节细胞计数下降至约1/4正常组数值(对照组)。形成对照的是，化合物1给药(药物组)显著地抑制由于缺血导致的神经节细胞计数的下降。
上述结果暗示本发明化合物1具有改善视网膜局部缺血性疾病的作用。
实验例5 反向突变测试利用5株鼠伤寒沙门(氏)菌(Salmonella typhimurium)TA98株、TA1537株、TA100株、TA1535株以及大肠杆菌(Escherichia coli)WP2uvrA株通过预诱导方法(Maron，D.M.and Ames，B.N.Mutation Res.，113，173-215，1983)进行反向突变测试[-(S9)Mix]。同时在包括加入代谢活化体系[按照下述方式得到的上清液级分(S9)Mix通过腹膜内给药苯巴比妥(解剖前4天以0.03g/kg的剂量，解剖前3、2、1天以0.06g/kg的剂量)以及5，6-苯并黄酮(解剖前2天以0.08g/kg的剂量)对7-周龄Sprague Dawley大鼠，取出肝脏、制备匀浆并在9000×g离心分离]的条件下进行类似的测试[+(S9)Mix]。使用二甲基亚碸作为化合物1的溶剂以及阴性对照。
测试结果5(1)剂量设定测试化合物1的TA100株[-(S9)Mix]中最高的131(15.8μg/板)以及最低的115(158μg/板)在各剂量小于两倍的阴性对照值(119)。类似地，TA100株[+(S9)Mix]以及另外4种细菌株[-/+(S9)Mix]中的反向突变菌落数在各剂量小于阴性对照值的两倍。
(2)最大测试化合物1的TA100株[-(S9)Mix]中的最高147(78.1μg/板)以及最低110(125μg/板)在各剂量小于两倍的阴性对照值(132)。类似地，TA100株[+(S9)Mix]以及其他的4种细菌株[-/+(S9)Mix]的的反向突变菌落数在各剂量小于阴性对照值的两倍。
从上述结果可知，由于在剂量设定的测试以及最大测试的各剂量，化合物1显示出的反向菌落数都没有超过阴性对照值的两倍，因此可以下结论说化合物1在5种鼠伤寒沙门(氏)菌和大肠杆菌的细菌株中没有细菌诱变性。
制剂例1 片剂化合物5 5.0g淀粉 12.0g乳糖 27.2g硬脂酸镁 0.4g
将化合物5、乳糖以及淀粉进行充分混合得到按照湿法片剂制备方法需要的颗粒剂。加入硬脂酸镁并将混合物压片得到400片剂。必要的时候，片剂用肠溶包衣剂(甲丙烯酸共聚物)进行包衣。
制剂例2 注射剂化合物1 100mg氯化钠 900mg1N氢氧化钠 适当量注射用蒸馏水总量100mL利用常规方法将上述成分进行无菌混合得到注射剂。
制剂例3 滴眼剂化合物1 100mg硼酸700mg硼砂适当量氯化钠 500mg依地酸钠0.05mg苯扎氯铵0.0005mg无菌纯净水 总量100mL利用常规方法将上述成分进行无菌混合得到滴眼剂。
制剂例4 滴眼剂化合物1 50mg聚山梨酯80 100mg二水磷酸二氢钠 100mg氯化钠 900mg氢氧化钠适当量PH 7.0无菌纯净水 总量100mL
利用常规方法将上述成分进行无菌混合得到滴眼剂。
工业实用性由于本发明式(I)表示的化合物具有优良的钙蛋白酶抑制活性，其可用作预防或治疗其中钙蛋白酶涉及的多种疾病的药物，如局部缺血性疾病、免疫性疾病、阿耳茨海默(氏)病、骨质疏松症、脑部组织失调引起的疾病、白内障、青光眼、视网膜脉络膜疾病、从光凝固术引起的眼睛的后段的并发症、与血管发生有关的疾病等。
尽管本发明的一些具体实施方案在前面已经进行了详细的描述，对本领域普通技术人员而言在基本上不偏离本发明的新教导以及益处的范围内，对这里显示的具体的实施方案了可能进行不同的修改和改变。因此，本发明包含在如权利要求定义的精神和范围内的所有这些修饰和改变。
本申请基于在日本提交的专利申请2002-097186，其内容这里引入作为参考。
权利要求
1.下式(I)表示的化合物或其盐 其中R1和R2各自为任选具有取代基的低级烷基。
2.权利要求1的化合物，其中R2为被芳香烃基取代的低级烷基，或其盐。
3.下式(I)表示的化合物 其中R1为任选具有取代基的低级烷基，R2为低级烷基，或其盐。
4.权利要求3的化合物，其中R2为具有3或4个碳原子的低级烷基，或其盐。
5.权利要求4的化合物，其中低级烷基为异丙基或异丁基，或其盐。
6.权利要求1～5中任一项的化合物，其中R1为具有取代基的低级烷基，或其盐。
7.权利要求6的化合物，其中低级烷基的取代基为任选具有取代基的芳香烃基，或其盐。
8.权利要求7的化合物，其中芳香烃基为被选自羟基、低级烷氧基、环己基甲氧基、卤原子以及苯基取代的芳香烃基。
9.权利要求7或8的化合物，其中芳香烃基为苯基或2-萘基。
10.(2S，5S)-5-苄基-6-羟基-2-(2-甲基丙基)-3-吗啉酮。
11.一种药物，包括下式(I)表示的化合物或其盐 其中R1和R2各自为任选具有取代基的低级烷基。
12.权利要求11的药物，其为钙蛋白酶抑制剂。
13.权利要求12的药物，其为用于预防或治疗其中钙蛋白酶参与的疾病的药剂。
14.一种药物组合物，包括下式(I)表示的化合物或其盐以及可药用载体 其中R1和R2各自为任选具有取代基的低级烷基。
15.权利要求14的药物组合物，其为钙蛋白酶抑制剂。
16.一种治疗其中钙蛋白酶参与的疾病的方法，所述方法包括对需要这种治疗的哺乳动物施用有效量的下式(I)表示的化合物或其盐 其中R1和R2各自为任选具有取代基的低级烷基。
17.下式(I)表示的化合物或其盐作为钙蛋白酶抑制剂的用途， 其中R1和R2各自为任选具有取代基的低级烷基。
全文摘要
本发明提供了下式(I)表示的化合物或其盐，其中R
文档编号A61P27/12GK1656084SQ03812270
公开日2005年8月17日 申请日期2003年3月27日 优先权日2002年3月29日
发明者中村雅之, 井上淳 申请人:千寿制药株式会社