专利名称：包含巴比妥酸衍生物的改进成象剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及体内成象的诊断成象剂。该成象剂包含用适用于体内诊断成象的成象部分在5-位标记的合成巴比妥酸(barbituric acid)衍生物。
背景技术：
巴比妥酸，或嘧啶-2，4，6-三酮是为已知药物。其衍生物，特别是5 巴比妥酸位(即嘧啶环的CH2)引入取代基产生的那些衍生物也是已知药物。巴比妥(即5，5-二乙基巴比妥酸)就是实例。
Grigsby等[J.Nucl.Med.，22(6)，摘要第12页(1981)]公开了用亲脂性75Se和123mTe标记的巴比妥(barbiturate)衍生物，其中放射性同位素为5位芳烷基取代基的部分，为潜在的局部脑血流成象放射药物。
US 3952091公开了用于巴比妥药物的体外放射免疫测定的化合物，其包含用放射性同位素125I在5位标记的巴比妥酸。
US 4244939公开了用于巴比妥药物的体外放射免疫测定的化合物，其包含用放射性同位素125I或131I任选通过连接基团在1-或3-位(即环氮)标记的巴比妥酸。
WO 01/60416公开了基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂的螯合剂轭合物，以及它们在制备含诊断金属的金属络合物中的用途。所述MMP抑制剂的具体类别有异羟肟酸酯(盐)，特别为琥珀酰基异羟肟酸酯(盐)。
本发明已经发现，用成象部分在5位标记的合成巴比妥酸基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂对于哺乳动物体内成象是有用的诊断成象剂。对于选择的MMP特别对于明胶酶(MMP-2和MMP-9)以及膜结合的MT-MMP1(MMP-14)和3(MMP-16)加MMP-8，巴比妥酸MMP抑制剂(即嘧啶-2，4，6-三酮)可比异羟肟酸衍生物显示出更强的选择性。对于成象剂来说，这导致降低不必要的背景活动，并因而改善了信噪。巴比妥酸衍生物比异羟肟酸或肽基MMP抑制剂更具亲脂性，这意味着由于其亲脂性，本发明成象剂能更好地通过细胞膜或血脑屏障。因此，预计本发明成象剂也可用于脑病(例如脑肿瘤、肌萎缩性脊髓侧索硬化、阿尔茨海默病)或脑内其它MMP活性部位成象。
本发明成象剂用于疾病(炎性、恶性和变性疾病)范围内的体内诊断成象，已知其中涉及具体基质金属蛋白酶。这些疾病包括(a)动脉粥样硬化，其中各种MMPs过度表达。在人动脉粥样硬化性斑块中已经检测出MMP-1、3、7、9、11、12、13和MT1-MMP的水平提高[S.J.George，Exp.Opin.Invest.Drugs，9(5)，993-1007(2000)及其参考文献]。MMP-2[Z.Li等，Am.J.Pathol.，148，121-128(1996)]和MMP-8[M.P.Herman等，Circulation，104，1899-1904(2001)]在人粉瘤中的表达也有报道；(b)慢性心力衰竭(Peterson，J.T.等，开发基质金属蛋白酶抑制剂用于治疗心力衰竭，Drug Dev.Res.(2002)，55(1)，29-44报道了MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-8、MMP-9、MMP-13和MMP-14在心力衰竭中上调)；(c)癌症[Vihinen等，Iht.J.Cancer 99，p157-166(2002)涉及癌症的MMP综述，特别说明了MMP-2、MMP-3、MMP-7和MMP-9]；(d)关节炎[Jacson等，Inflamm.Res.50(4)，p183-186(2001)，″类风湿性关节炎中选择性基质金属蛋白酶抑制-靶向明胶酶A激活″，特别讨论了MMP-2]；(e)肌萎缩性脊髓侧索硬化[Lim等，J.Neurochem，67，251-259(1996)；其中涉及MMP-2和MMP-9]；(f)脑转移瘤，报道其中涉及MMP-2、MMP-9和MMP-13[Spinale，Circul.Res.，90，520-530(2002)]；(g)脑血管疾病，报道其中涉及MMP-2和MMP-9[Lukes等，Mol.Neurobiol.，19，267-284(1999)]；(h)早老性痴呆，在染病组织中鉴别出MMP-2和MMP-9[Backstrom等，J.Neurochem.，58，983-992(1992)]；(i)神经炎性疾病，其中涉及MMP-2、MMP-3和MMP-9[Mun-Bryce等，Brain.Res.，933，42-49(2002)]；(J)COPD(即慢性阻塞性肺病)，报道其中MMP-1、MMP-2、MMP-8和MMP-9上调[Segura-Valdez等，Chest，117，684-694(2000)]；(k)眼病变[Kurpakus-Wheater等，Prog.Histo.Cytochem.，36(3)，179-259(2001)]；(l)皮肤病[Herouy，Y.，Int.J.Mol.Med.，7(1)，3-12(2001)]。
发明详述一方面，本发明提供了一种成象剂，该成象剂包含用成象部分在巴比妥酸5-位标记的合成巴比妥酸基质金属蛋白酶抑制剂，其中成象部分可在体内给予哺乳动物所述标记的合成巴比妥酸基质金属蛋白酶抑制剂后检出，所述成象部分选自(i)放射性金属离子；(ii)顺磁性金属离子；(iii)发射γ射线的放射性卤素；(iv)发射正电子的放射性非金属；(v)超极化的NMR-活性原子核；
(vi)适用于体内光成象的指示器；(vii)适用于血管内检测的β-放射体。
合成巴比妥酸基质金属蛋白酶抑制剂的适合分子量为100-2000道尔顿，优选分子量为150-600道尔顿，最优选分子量为200-500道尔顿。
成象部分既可以由哺乳动物体外进行检测，也可以由为体内使用而设计的检测器检测，例如血管内辐射或光学检测器，如内窥镜，或由为手术中使用而设计的辐射探测器检测。优选的成象部分是那些在体内给予后可以非侵入性方式在外部检测的部分。最优选的成象部分为放射性、特别为放射性金属离子、发射γ射线的放射性卤素和发射正电子的放射性非金属，更特别为那些适用于使用SPECT或PET成象的部分。
当成象部分为放射性金属离子，即放射性金属时，合适的放射性金属既可以为正电子放射体，如64Cu、48V、52Fe、55Co、94mTc或68Ga；也可以为γ-放射体，例如99mTc、111In、113mIn或67Ga。优选的放射性金属为99mTc、64Cu、68Ga和111In。最优选的放射性金属为γ放射体，特别为99mTc。
当成象部分为顺磁性金属离子时，合适的这种金属离子包括Gd(III)、Mn(II)、Cu(II)、Cr(III)、Fe(III)、Co(II)、Er(II)、Ni(II)、Eu(III)或Dy(III)。优选的顺磁性金属离子为Gd(III)、Mn(II)和Fe(III)，特别优选Gd(III)。
当成象部分为发射γ射线的放射性卤素时，该放射性卤素适合选自123I、131I或77Br。优选的发射γ射线的放射性卤素为123I。
当成象部分为发射正电子的放射性非金属时，合适的这种正电子放射体包括11C、13N、15O、17F、18F、75Br、76Br或124I。优选的发射正电子的放射性非金属为11C、13N和18F，特别优选11C和18F，最特别优选18F。
当成象部分为超极化的NMR-活性原子核时，这种NMR-活性核具有非零核自旋，包括13C、15N、19F、29Si和31P。其中优选13C。术语“超极化”意思是该NMR-活性原子核的极化程度增强，超过其平衡极化程度。13C(相对于12C)的天然丰度为约1％，合适13C-标记的化合物在超极化之前，适合浓化至丰度为至少5％，优选至少50％，最优选至少90％。本发明巴比妥酸5-位含碳取代基中，至少有一个碳原子适合富含13C，并且随后超极化。
当成象部分为适用于体内光成象的指示器时，该指示器为在光成象过程中能直接或间接检测的任何部分。该指示器可以为光散射体(如有色或无色颗粒)、光吸收剂或光发射体。更优选指示器为染料，如发色团或荧光化合物。染料可为与波长为紫外光至近红外光的电磁谱中的光相互作用的任何染料。最优选指示器具有荧光特性。
优选的有机发色和荧光指示器包括具有广泛离域电子系统的指示器，例如菁蓝、份菁、吲哚菁、酞菁、萘酞菁、三苯基次甲基染料、卟啉、pyrilium染料、thiapyriliup染料、squarylium染料、croconium染料、azulenium染料、靛苯胺、苯并吩噁嗪鎓染料、苯并硫杂吩噻嗪鎓染料、蒽醌、napthoquinones、阴丹士林、邻苯二甲酰基吖啶酮、三(苯酚合苯醌)、偶氮染料、分子内和分子间电荷转移染料和染料络合物、环庚三烯酮、四嗪、二(二硫醇烯)络合物、双(苯-二硫羟酸盐)络合物、碘苯胺染料、二(S，O-二硫醇烯)络合物。荧光蛋白，如绿荧光蛋白(GFP)和具有不同吸收/发射特性的改性GFP也有用。某些情况下，会采用某些稀土金属(例如铕、钐、铽或镝)络合物，如荧光纳米晶体(量子点)。
可采用的发色团特别实例包括荧光素、磺基若丹明101(TexasRed)、若丹明B、若丹明6G、若丹明19、吲哚菁绿、Cy2、Cy3、Cy3.5、CY5、Cy5.5、Cy7、Marina Blue、Pacific Blue、Oregon Green 488、OregonGreen 514、四甲基若丹明和Alexa Fluor 350、Alexa Fluor 430、AlexaFluor 532、Alexa Fluor 546、Alexa Fluor 555、Alexa Fluor 568、Alexa Fluor594、Alexa Fluor 633、Alexa Fluor 647、Alexa Fluor 660、Alexa Fluor680、Alexa Fluor 700和Alexa Fluor 750。
特别优选的染料在3μm-400nm之间、特别在600-1300nm之间的可见或近红外区域有最大吸收。
光成象方式和测量技术包括但不限于发光成象、内窥镜、荧光内窥镜、光学相干性X线断层照相术、透射成象、时间分辨透射成象、同焦点成象、非线性显微镜、光声成象、声光成象、分光镜检查、反射光谱法、干扰量度法、相干性干扰量度法、漫射光X线断层照相术、荧光调节的漫射光X线断层照相术(连续波、时域和频域系统)和光散射、吸收、极化、发光、荧光寿命、量子产率、猝灭的测量。
当成象部分为适用于血管内检测的β-放射体时，合适的这类β-放射体包括放射性金属67Cu、89Sr、90Y、153Sm、186Re、188Re或192Ir，和非金属32P、33P、38S、38Cl、39Cl、82Br和83Br。
本发明成象剂优选式I[{抑制剂}-(A)n]m-[成象部分] (I)其中{抑制剂}为合成巴比妥酸基质金属蛋白酶抑制剂；-(A)n-为连接基团，其中各A独立为-CR2-、-CR＝CR-、-C≡C-、-CR2CO2-、-CO2CR2-、-NRCO-、-CONR-、-NR(C＝O)NR-、-NR(C＝S)NR-、-SO2NR-、-NRSO2-、-CR2OCR2-、-CR2SCR2-、-CR2NRCR2-、C4-8亚杂环烷基、C4-8亚环烷基、C5-12亚芳基或C3-12亚杂芳基、氨基酸或单分散聚乙二醇(PEG)结构单元；其中R独立选自H、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4烷氧基烷基或C1-4羟基烷基；n为0-10的整数，和m为1、2或3。
应认识到式I中连接基团-(A)n-的作用为使成象部分远离巴比妥金属蛋白酶抑制剂的活性部位。当成象部分体积相对大时(如金属络合物)尤其重要，这样可使抑制剂与MMP酶之间的结合不被削弱。这可通过柔性结合(如单烷基链)来实现，以使体积大的基团具有使自己位于离开活性部位的自由度和/或刚性，如可定向使金属络合物离开活性部位的环烷基或芳基间隔。
连接基团性质也可用于改变成象剂的生物分布。因而，例如在连接基团中引入醚基，有助于使血浆蛋白结合最小化。当-(A)n-包含单分散聚乙二醇(PEG)结构单元或1-10个氨基酸残基肽链时，连接基团可起改变成象剂体内药代动力学和血液清除率的作用。这样的“生物改性剂”连接基团可促进成象剂从背景组织(如肌肉或肝脏)和/或血液中清除，由于减少背景干扰，因而得到更好的诊断影像。生物改性剂连接基团也可用于跟踪排泄的特殊路线，例如与经肝脏相对，经肾脏排泄。
当-(A)n-包含1-10个氨基酸残基肽链时，氨基酸残基优选选自甘氨酸、赖氨酸、天冬氨酸或丝氨酸。当-(A)n-包含PEG部分时，优选包含衍生自单分散PEG样结构下式II 17-氨基-5-氧代-6-氮杂-3，9，12，15-四氧杂十七烷酸的聚合单元 其中n等于1-10的整数，C端单元(*)连接成象部分。
当连接基团不包含PEG或肽链时，优选的-(A)n-基团具有2-10个原子的组成-(A)n-部分的连接原子主链，更优选2-5个原子，最优选2-3个原子。2个原子的最小连接基团主链具有的优点为把成象部分与巴比妥酸金属蛋白酶抑制剂完全分开，以便任何相互作用最小化。
例如亚烷基或亚芳基的非肽连接基团具有的优点为与共轭巴比妥酸MMP抑制剂无有效氢键合相互作用，以便连接基团不能环绕在巴比妥酸MMP抑制剂上。优选的亚烷基间隔基团为-(CH2)q-，其中q为2-5。优选的亚芳基间隔为下式
其中a和b独立为0、1或2。
连接基团-(A)n-优选衍生自谷氨酸、琥珀酸、聚乙二醇基单元或式II的PEG样单元。
当成象部分包含金属离子时，该金属离子作为金属络合物存在。因此，这种与金属离子轭合的巴比妥酸金属蛋白酶抑制剂轭合物合适为式Ia[{抑制剂}-(A)n]m-[金属络合物] (Ia)其中A、n和m的定义同上述式I。
术语“金属络合物”是指金属离子与一种或多种配体的配位络合物。对于金属配位位置来说，特别优选金属络合物为“抗转移螯合”，即不容易与其它潜在竞争配体进行配体交换。潜在竞争配体包括巴比妥酸部分自身加体外制剂的其它赋形剂(例如用于制剂中的放射防护剂或抗微生物防腐剂)或体内内源性化合物(例如谷胱甘肽、转铁蛋白或血浆蛋白)。
式I的金属络合物衍生自式Ib的配体轭合物[{抑制剂}-(A)n]m-[配体] (Ib)式I、Ia和Ib中，m优选为1或2，最优选为1。
用于本发明中、形成抗转移螯合的金属络合物的合适配体包括螯合剂，其中2-6、优选2-4个金属配位原子排列形成5-或6-元螯形环(具有连接金属配位原子的碳原子或非配位杂原子非配位骨架)；或包含配位原子的单齿配体，牢固结合至金属离子，例如异腈、膦或二氮烯化物，作为螯合剂部分牢固结合至金属的配位原子类实例为胺、硫醇类、酰胺、肟和膦。膦形成牢固金属络合物以致于即使单配位基或二配位基膦也形成合适的金属络合物。异腈和二氮烯化物的线形几何结构使得它们自己不容易结合至螯合剂，因此典型地用作单齿配体。合适的异腈实例包括简单烷基异腈，如叔丁基异腈和醚取代的异腈，如mibi(即1-异氰基-2-甲氧基-2-甲基丙烷)。合适的膦实例包括替曲膦和单配位基膦，例如三(3-甲氧基丙基)膦。合适的二氮烯化物实例包括HYNIC系列配体，即肼取代的吡啶或烟酰胺。
形成抗转移螯合金属络合物的合适锝螯合剂实例包括但不限于(i)下式的二胺二肟 其中E1-E6各自独立为R′基团；各R′为H或C1-10烷基、C3-10烷基芳基、C2-10烷氧基烷基、C1-10羟基烷基、C1-10氟代烷基、C2-10羧基烷基或C1-10氨基烷基，或2个或多个R′基团与它们所连接的原子形成碳环、杂环饱和或不饱和环，并且其中一个或多个R′基团轭合至巴比妥酸MMP抑制剂；Q为式-(J)f-的桥连基；其中f为3、4或5，并且各J独立为-O-、-NR′-或-C(R′)2-，条件是-(J)f-含一个最大的J基团，该基团为-O-或-NR′-。
优选的Q基团如下Q＝-(CH2)(CHR′)(CH2)-即丙二胺肟或PnAO衍生物；Q＝-(CH2)2(CHR′)(CH2)2-即戊二胺肟或PentAO衍生物；Q＝-(CH2)2NR′(CH2)2-。
E1至E6优选选自C1-3烷基、烷基芳基、烷氧基烷基、羟基烷基、氟代烷基、羧基烷基或氨基烷基。最优选各E1至E6基为CH3。
巴比妥酸MMP抑制剂优选在E1或E6R′基团、或Q部分的R′基团轭合。最优选巴比妥酸MMP抑制剂轭合至Q部分的R′基。当巴比妥酸MMP抑制剂轭合至Q部分的R′基团时，R′基团优选在桥头位置。在那种情况下，Q优选为-(CH2)(CHR′)(CH2)-、-(CH2)2(CHR′)(CH2)2-或-(CH2)2NR′(CH2)2-，最优选为-(CH2)2(CHR′)(CH2)2-。一个特别优选的双官能二胺二肟螯合剂为式III(螯合剂1)
从而合成巴比妥酸MMP抑制剂通过桥头-CH2CH2NH2基团轭合。
(ii)N3S配体，具有硫醇三酰胺给体组件(set)如MAG3(巯基乙酰基次氨基三乙酸)及相关配体；或具有二酰胺吡啶硫醇给体组件如Pica；(iii)N2S2配体，具有二胺二硫醇给体组件如BAT或ECD(即乙基半胱氨酸盐二聚物)，或酰胺胺二硫醇给体组件如MAMA；(iv)N4配体，为具有四胺、酰胺三胺或二酰胺二胺给体组件的开链或大环配体，如cyclam、单氧代cyclam或二氧代cyclam；(v)N2O2配体，具有二胺二酚给体组件。
上述配体特别适用于络合锝如94mTc或99mTc，并且由Jurisson等在[Chem.Rev.，99，2205-2218(1999)]中更详尽地描述。这些配体也适用于其它金属，例如铜(64Cu或67Cu)、钒(例如48V)、铁(例如52Fe)或钴(例如55Co)。在Sandoz的WO 91/01144中也描述了其它合适的配体，包括的配体特别适用于铟、钇和钆，特别是大环氨基羧酸盐和氨基膦酸配体。形成钆的非离子(即中性)金属络合物的配体是已知的，并且在US 4885363中描述。当放射性金属离子为锝时，配体优选为四配位基螯合剂。锝优选的螯合剂为二胺二肟，或上述具有N2S2或N3S给体组件的那些螯合剂。锝特别优选的螯合剂为二胺二肟。
特别优选合成巴比妥酸基质金属蛋白酶抑制剂以这样方式键合至金属络合物这种键合在血液中不容易代谢，否则标记的金属蛋白酶抑制剂在到达所需体内靶位之前，就会导致金属络合物裂解。因此，合成巴比妥酸基质金属蛋白酶抑制剂优选经不容易代谢的键合方式共价键合至本发明金属络合物。
当成象部分为放射性卤素例如碘时，合适选择的巴比妥酸MMP抑制剂包括非放射性卤素原子，如芳基碘化物或溴化物(允许放射性碘交换)；活化芳环(例如酚基)；有机金属前体化合物(如三烷基锡或三烷基甲硅烷基)；或例如三氮烯的有机前体。Bolton[J.Lab.Comp.Radiopharm.，45，485-528(2002)]描述了引入放射性卤素(包括123I和18F)的方法。放射性卤素特别碘可连接的合适芳基实例如下 两者都含取代基，该取代基允许放射性碘容易置换到芳环上。经放射性卤素交换，通过直接碘化作用，可合成含放射性碘的可供选择的取代基，例如 当成象部分为碘的放射性同位素时，该放射性碘原子优选经直接共价键连接至芳环如苯环，或乙烯基，因为众所周知键合至饱和脂族系统中的碘原子易于在体内代谢，并因此丢失放射性碘。
当成象部分包含氟的放射性同位素(如18F)时，该放射性碘原子可采用18F-氟化物与适当前体的反应直接标记来实现，该前体具有优异的离去基团，例如烷基溴化物、甲磺酸烷基酯或甲苯磺酸烷基酯。18F也可通过胺前体与例如18F(CH2)3OMs(其中Ms为甲磺酸酯)的烷化剂N-烷基化来引入，得到N-(CH2)318F，或与18F(CH2)3OMs或18F(CH2)3Br进行羟基的O-烷基化。对于芳基系统，18F-氟化物从芳基重氮盐中置换氮，对芳基-18F衍生物来说是很好的路线。参见Bolton，J.Lab.Comp.Radiopharm.，45，485-528(2002)中对18F-标记衍生物路线的描述。
优选的本发明合成巴比妥酸基质金属蛋白酶抑制剂为下式IV
其中R1为R″或Z基团；R2为R″、Y或-NR4R5，其中R4为H或R″基团，R5为H、C2-14酰基、C2-10氨基烷基、(N-C2-14酰基)C2-10氨基烷基或R″基团，或R4和R5与它们连接的N原子一起形成任选(N-C2-14)酰化的C2-8环状氨基亚烷基(cycloaminoalkylene)环；R″独立为C1-14烷基、C3-8环烷基、C2-14烯基、C1-14氟代烷基、C1- 14全氟代烷基、C6-14芳基、C2-14杂芳基或C7-16烷基芳基；Z为式-A1O[A2O]pR3的基团，其中p为1或0，A1和A2独立为C1-10亚烷基、C3-8亚环烷基、C1-10全氟代亚烷基、C6-10亚芳基或C2-10亚杂芳基，并且R3为R基，其中R独立选自H、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4烷氧基烷基或C1-4羟基烷基；Y为下式基团 其中E为CR2、O、S或NR6；并且R6为C2-14酰基、R″或Z基团。
在式IV中，R2优选为Y或-NR4R5。当成象剂包含式IV的巴比妥酸MMP抑制剂时，成象部分为发射γ射线的放射性卤素或发射正电子的放射性非金属，成象部分既可连接在R1取代基上，也可连接在R2取代基上。当成象部分为放射性或顺磁性金属离子时，式IV的R2取代基优选连接或包含成象部分。
本发明特别优选的合成巴比妥酸基质金属蛋白酶抑制剂为式V
其中E为CHR或NR6，并且R1为C6-14正烷基或C6-14芳基。优选的式V合成巴比妥酸基质金属蛋白酶抑制剂为那些具有E＝NR6和R6＝C2-14酰基的抑制剂；-(CH2)dOH，其中d为2、3、4或5；或-C6H4X，其中X为H、C1-4烷基、Hal、OR、NR2、NO2或SO2NR7R8，其中R7和R8独立为R基，并且R如式IV(上述)中定义。
特别优选的式V合成巴比妥酸基质金属蛋白酶抑制剂为其中R1为正辛基、正癸基、联苯基、C6H5X或-C6H4-O-C6H4X的那些抑制剂，其中X如上定义。
通过尿素与单或双取代丙二酸酯衍生物的缩合，制备本发明巴比妥酸MMP抑制剂化合物。Foley等描述的更详尽[Bioorg.Med.Chem.Lett，11，969-972(2001)]。式V MMP抑制剂化合物可通过Grams等的方法制备[Biol.Chem.382，1277-1285(2001)]。
当本发明成象剂包含放射性或顺磁性金属离子时，金属离子适合以金属络合物形式存在。这样的金属络合物适于通过式Ib与适当的金属离子通过轭合反应制备。式Ib巴比妥酸MMP抑制剂的配体轭合物或轭合剂轭合物可通过双官能的螯合方法制备。因此，熟知制备连接官能团的配体或螯合剂(分别为“双官能连接基团”或“双官能螯合物”)。连接的官能团包括胺、硫氰酸酯、马来酰亚胺和活性酯，例如N-羟基琥珀酰亚胺或五氟苯酚。本发明螯合剂1为胺官能化的双官能螯合物实例。这种双官能螯合物可与巴比妥酸基质金属蛋白酶抑制剂上的合适官能团反应，生成需要的轭合物。在巴比妥酸上这种合适的官能团包括
羧基(用于与胺官能化的双官能螯合剂成酰胺键)；胺(用于与羧基或活性酯官能化的双官能螯合剂成酰胺键)；卤素、甲磺酸酯和甲苯磺酸酯(用于胺官能化的双官能螯合剂的N-烷基化)和硫醇(用于与马来酰亚胺官能化的双官能螯合剂的反应)。
本发明特别优选的巴比妥MMP抑制剂的放射性标记可采用“前体”方便进行。当成象部分包含金属离子时，这种前体适当地包含带有配体的巴比妥MMP抑制剂的“轭合物”，如下第四个实施方案中描述。当成象部分包含非金属放射性同位素，即发射γ射线的放射性卤素或放射正电子的放射性非金属时，这类“前体”适当地包含非放射性物质，其设计使与简便化学形式的所需非金属放射性同位素的化学反应可以最少的步骤(理想为一步)进行，并且不需要显著纯化(理想为不再纯化)，即可得到需要的放射性产物。这类前体可以高化学纯度方便获得，任选以无菌形式提供。
可认识到用于放射性标记本发明特别优选的巴比妥MMP抑制剂的“前体”(包括配体轭合物)如下制备 其中g＝2或3式VI式VI化合物的末端-OH可转化为甲苯磺酰基、甲磺酰基或溴衍生物，然后其与氨基官能化的螯合剂轭合(见流程1，g＝2)
流程1 化合物2另一方面，所述前体的甲苯磺酸酯、甲磺酸酯或溴基可用[18F]氟化物置换，得到18F标记的PET成象剂。
放射性碘衍生物可由相应的酚前体制备 另一种方法将采用化合物23[Grams等，Biol.Chem.，382，1277-1285(2001)和实施例5步骤(h)]用于胺官能化螯合剂的N-烷基化
流程2 化合物23化合物23也可与胺反应，得到适用于放射性碘化的前体，例如 已制备非放射性碘化相似化合物24 化合物24化合物23也可转化为放射性碘化的芳基三甲基甲硅烷基(TMS)前体 前体 碘化衍生物化合物23可转化为用于放射性氟化的芳基重氮鎓前体，见流程6
流程6 另一种方法将采用C-5位氨基。这样可期望螯合剂通过连接基团轭合(流程3)流程3 这种伯胺取代的巴比妥可通过以下方法制备化合物23与苄基胺烷基化，随后在标准条件下除去苄基保护基，如采用钯/炭催化剂氢化。
另一种方法将采用哌嗪衍生物(化合物6，实施例7)连接螯合物。这种方法可通过哌嗪取代基仲胺与羧基或活性酯官能化的双官能螯合剂直接轭合，或通过连接基团。后者如流程4所示，其中胺官能化的螯合剂将连接在连接基团的侧链羧基官能团
流程4 化合物6化合物6可酰化得到适用于放射性碘化的前体 前体 碘化衍生物化合物6也可与烷化剂反应得到相应N-官能化的具有N(CH2)218F取代基的哌嗪衍生物，该烷化剂适用于18F标记，例如18F(CH2)2OTS(其中TS为甲苯磺酸酯基)或18F(CH2)2OMs(其中Ms为甲磺酸酯基)。或者，化合物6可先与氯乙酰氯反应，得到N(CO)CH2Cl N-衍生化哌嗪(化合物11)，随后与HS(CH2)318F反应
流程5 化合物11当本发明成象剂包含放射性或顺磁性金属离子时，该金属离子适合以金属络合物形式存在。这种金属络合物适合通过式Ib与合适金属离子轭合反应制备。式Ib的巴比妥酸MMP抑制剂的配体轭合物或螯合剂轭合物可通过双官能螯合方法制备。因此，制备连接官能团的配体或螯合剂(分别为“双官能连接基团”或“双官能螯合物”)的方法是熟知的。连接的官能团包括胺、硫氰酸酯、马来酰亚胺和活性酯，例如N-羟基琥珀酰亚胺或五氟苯酚。本发明螯合剂1为胺官能化的双官能螯合物实例。这类双官能螯合物可与巴比妥酸基质金属蛋白酶抑制剂上的合适官能团反应，得到需要的轭合物。在巴比妥酸上这类合适官能团包括羧基(用于与胺官能化的双官能螯合剂成酰胺键)；胺(用于与羧基或活性酯官能化的双官能螯合剂成酰胺键)；卤素、甲磺酸酯和甲苯磺酸酯(用于胺官能化的双官能螯合剂的N-烷基化)和硫醇(用于与马来酰亚胺官能化的双官能螯合剂的反应)。
本发明放射性金属络合物可按以下方法制备用合适氧化态的放射性金属溶液与合适PH下的式Ia配体轭合物反应。该溶液优选含弱络合金属的配体(如葡萄糖酸盐(酯)或柠檬酸盐(酯))，即放射性金属络合物通过配体交换或转移螯合来制备。这种情况用于抑制不需要的副反应，例如金属离子水解。当放射性金属离子为99mTC时，常用原料为来自99Mo发生器的高锝酸钠。锝以Tc(VII)氧化态的99mTc-高锝酸盐存在，相对不反应。因此为便于络合，较低氧化态Tc(I)至Tc(V)的锝络合物的制备，通常需要加入合适的药学可接受的还原剂，例如氢硫化钠、亚硫酸氢钠、抗坏血酸、甲脒亚磺酸、亚锡离子、Fe(II)或Cu(I)。药学可接受的还原剂优选为亚锡盐，最优选为氯化亚锡、氟化亚锡或酒石酸亚锡。
当成象部分为超极化的NMR-活性原子核例如超极化的13C原子时，所需超极化化合物可通过从超极化气体(如129Xe或3He)至合适的13C-富含的巴比妥酸衍生物极化交换来制备。
第二方面，本发明提供一种药用组合物，该组合物包含上述成象剂以及生物相容的载体，其形式适用于哺乳动物给药。“生物相容载体”为流体，特别为液体，成象剂可混悬或溶解于其中，以便组合物为生理上可耐受，即给予哺乳动物后没有毒性或感到不适。生物相容载体为适合的可注射载体液体，例如无菌、无热原注射用水；例如盐水的水溶液(可最后为平衡以便注射剂最终产品等渗或不低渗)；一种或多种调节张力物质的水溶液(如具有生物相容抗衡离子的等离子阳离子盐)，糖(如葡萄糖或蔗糖)，糖醇(如山梨醇或甘露糖醇)，甘醇(如甘油)或其它非离子多元醇物质(如聚乙二醇、丙二醇等)。
第三方面，本发明提供一种放射药用组合物，该组合物包含其中成象部分为放射性的上述成象剂以及生物相容载体(如上述定义)，其形式适用于哺乳动物给药。这种放射药物可适当以具有密封的容器提供，该密封适用于皮下注射针单次或多次刺穿(如咬口(crimped-on)隔膜密封)，同时保持完全无菌。这种容器可含单个或多个患者剂量。优选的多剂量容器包含单体积小瓶(如10-30cm3体积)，含有多个患者剂量，因而，符合临床要求的制剂在有效期内，在各时间间隔可将单患者剂量抽取进临床级注射器中。预填充注射器设计为含有单人剂量，并且因此优选一次性或其它适用于临床应用的注射器。为防止操作者免受放射剂量，该预填充注射器可任选提供注射器防护物。合适的这种放射药物注射器防护物为本领域所熟知，并优选包含铅或钨。
当成象部分包含99mTc时，适用于诊断成象的放射药物的放射性含量为99mTc的180-1500MBq，这取决于体内成象部位、摄取和靶对背景的比率。
第四方面，本发明提供了合成巴比妥酸基质金属蛋白酶抑制剂与配体的轭合物，其中巴比妥酸包含5-位取代基，并且所述5位取代基包含配体。所述配体轭合物用于制备放射性金属离子或顺磁性金属离子标记的合成巴比妥酸基质金属蛋白酶抑制剂。优选配体轭合物为上述定义式Ib。最优选配体轭合物的合成巴比妥酸MMP抑制剂为上述定义式IV。理想地是配体轭合物的合成巴比妥酸MMP抑制剂为上述定义式V。本发明第四方面的轭合物配体优选为螯合剂。优选螯合剂具有二胺二肟、N2S2或N3S给体组件。
第五方面，本发明提供用于制备放射药物制剂的前体，其中成象部分包含非金属放射性同位素，即发射γ射线的放射性卤素或发射正电子的放射性非金属。这类“前体”适当地包含合成巴比妥基质金属蛋白酶抑制剂物质的非放射性衍生物，其设计使与简便化学形式的所需非金属放射性同位素的化学反应可以最少的步骤(理想为一步)进行，并且不需要显著纯化(理想为不再纯化)，即可得到需要的放射性产物。这类前体可以高化学纯度方便获得。合适的前体衍生物见Bolton，J.Lab.Comp.Radiopharm.，45 485-528(2002)一般描述。
该实施方案中优选的前体包含以下的衍生物进行亲电性或亲核性卤化；容易与烷化剂进行烷基化，该烷化剂选自烷基或氟代烷基卤化物、甲苯磺酸酯、三氟甲磺酸酯或甲磺酸酯；或形成硫醚键的烷基化硫醇部分。第一类实例为(a)有机金属衍生物，如三烷基锡烷(如三甲基锡烷基或三丁基锡烷基)，或三烷基硅烷(如三甲基甲硅烷基)；(b)用于卤素交换的烷基或芳基碘化物或溴化物，用于亲核性卤化的甲苯磺酸烷基酯或甲磺酸酯；(c)活化用于亲电性卤化的芳环(如酚)，和活化用于亲核性卤化的芳环(如芳基碘、芳基重氮鎓或硝基芳基化合物)。
优选的容易进行烷基化的衍生物有醇、酚或胺基，特别是酚和无空间位阻的伯或仲胺。
优选的烷基化含放射性同位素的硫醇反应物的衍生物为N-卤乙酰基，特别为N-氯乙酰基和N-溴乙酰基衍生物。
优选的理想非金属放射性同位素的适当的化学形式包括(a)卤离子(例如123I-碘化物或18F-氟化物)，特别是在含水介质中，用于取代反应；(b)11C-甲基碘化物或18F-氟亚烷基化合物，用有效离去基团例溴化物、甲磺酸酯或甲苯磺酸酯官能化；(c)HS(CH2)318F，用于与烷基化前体N-氯乙酰基或N-溴乙酰基衍生物的S-烷基化反应。
这种“前体”合适的实例及其制备方法在上述第一实施方案中描述。
第六方面，本发明提供用于制备上述放射性金属离子放射药用组合物的非放射性试剂盒，该试剂盒包含合成巴比妥酸基质金属蛋白酶抑制剂和配体的轭合物。配体轭合物及其优选的方面在上述第四实施方案中描述。这种试剂盒设计用于得到适用于人给药的无菌放射药物产物，如通过直接注射至血液。该试剂盒优选冻干并且设计为与方便的无菌放射性金属源[例如来自99mTc-放射性同位素发生器的99mTc-高锝酸盐(TcO4)]重新组成，得到的溶液适用于人体给药而无须进一步处理。合适的试剂盒包含含游离碱或者酸式盐形式的配体或螯合剂轭合物的容器(如隔膜密封的小瓶)。或者试剂盒可任选含金属络合物，一旦加入放射性金属，该金属络合物可进行金属转移(即金属交换)，得到所需产品。
当放射性金属为99mTc时，优选试剂盒还包含生物相容的还原剂，例如氢硫化钠、亚硫酸氢钠、抗坏血酸、甲脒亚磺酸、亚锡离子、Fe(II)或Cu(I)。生物相容还原剂优选为亚锡盐，如氯化亚锡或酒石酸亚锡。
非放射性试剂盒还可任选包含其它成分，例如转移螯合剂、辐射防护剂、抗微生物防腐剂、pH调节剂或填充剂。
“转移螯合剂”为这样化合物该化合物与放射性金属迅速反应形成弱络合物，然后被“轭合物”的配体置换。这样可使形成放射性杂质的危险性最小化，例如减少由于同锝络合的竞争高锝酸盐迅速减少导致减少的水解锝(RHT)。这种合适的转移螯合剂为有机弱酸(pKa为3-7的有机酸)与生物相容阳离子的盐。合适的这类有机弱酸为醋酸、柠檬酸、酒石酸、葡萄糖酸、葡康糖酸、苯甲酸、苯酚或膦酸。因此，合适的盐为醋酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、葡萄糖酸盐、葡庚糖酸盐、苯甲酸盐、酚盐或膦酸盐。优选的这类盐为酒石酸盐、葡萄糖酸盐、葡庚糖酸盐、苯甲酸盐或膦酸盐，更优选为膦酸盐，最优选为二膦酸盐。优选的这类转移螯合剂为MDP即亚甲基二膦酸与生物相容阳离子的盐。
术语“辐射防护剂”指通过捕获高反应性自由基如水辐射分解产生的含氧自由基来抑制降解反应例如氧化还原过程的化合物。本发明辐射防护剂合适选自抗坏血酸、对氨基苯甲酸(即4-氨基苯甲酸)、龙胆酸(即2，5-二羟基苯甲酸)和这些酸与上述生物相容阳离子的盐。
术语“抗微生物防腐剂”指可抑制潜在有害微生物如细菌、酵母或霉菌生长的试剂。抗微生物防腐剂也表现出某些杀菌性质，这取决于剂量。本发明抗微生物防腐剂的主要作用为抑制任何这类微生物在放射药用组合物重新组成后(即在放射性诊断产品自身)的生长。然而，抗微生物防腐剂也可任选用于抑制潜在有害微生物在重新组成前的本发明非放射性试剂盒中一种或多种成分中的生长。合适的抗微生物防腐剂包括对羟基苯甲酸酯，即对羟基苯甲酸的甲酯、乙酯、丙酯、丁酯或其混合物；苯甲醇；苯酚；甲酚；溴化十六烷基三甲铵和硫柳汞。优选的抗微生物防腐剂为对羟基苯甲酸酯。
术语“PH调节剂”指用于确保重新组成的试剂盒pH在人或哺乳动物给药可接受的范围内(pH大约为4.0-10.5)的化合物或化合物混合物。这种合适的pH调节剂包括药学可接受的缓冲剂，例如三(羟甲基)甲基甘氨酸(tricine)、磷酸盐或TRIS[即三(羟甲基)氨基甲烷]；和药学可接受碱，例如碳酸钠、碳酸氢钠及其混合物。当轭合物采用酸式盐形式时，pH调节剂可任选以单独小瓶或容器提供，以便试剂盒的使用者可调节pH，这作为多步骤操作过程的一部分。
术语“填充剂”指药学可接受的增量剂，该增量剂在制备和冷冻干燥时可便于操作物料。合适的填充剂包括无机盐(如氯化钠)、水溶性糖或糖醇，例如蔗糖、麦芽糖、甘露糖醇或海藻糖。
第七方面，本发明提供用于制备放射药物制剂的试剂盒，其中成象部分包含非金属放射性同位素，即发射γ射线的放射性卤素或发射正电子的放射性非金属。这类试剂盒包含第五实施方案的“前体”，优选无菌无热原形式，以便用最少操作步骤，同无菌源的放射性同位素反应得到所需放射药物。这种考虑尤为重要放射药物中的放射性同位素半衰期相对短，容易处理，因此降低对放射药剂师的辐射剂量。因此，用于这些试剂盒重新组成的反应介质优选为水溶液，并以适用于哺乳动物给药的形式。
试剂盒的“前体”优选以共价连接至固体支持基质的形式提供。那样，需要的放射药物产品在溶液中形成，而起始原料和杂质仍键合至固相。在WO 03/002489中描述了用于18F-氟化物的固相亲电氟化的前体。在WO 03/002157中描述了用于18F-氟化物的固相亲核氟化的前体。因此，试剂盒可含可插入适当调节自动化合成仪的盒。除固体支持物结合的前体外，该盒可含除去不需要氟化物离子的柱，和合适连接以使反应混合物蒸发并且使产物按照所需进行配制的容器。也可包括合成中所必需的试剂、溶剂及其它消耗品和带软件的压缩盘，使合成工作人员可以满足消费者对放射浓度、体积和释放时间等要求的方式操作。方便的是试剂盒所有组分均为一次性使用，以使操作间污染可能性最小化并将保证无菌和质量。
第八方面，本发明公开上述合成巴比妥酸基质金属蛋白酶抑制剂成象剂用于动脉粥样硬化、特别是不稳定性易损斑块中的诊断成象用途。
再一方面，本发明公开了上述合成巴比妥酸基质金属蛋白酶抑制剂成象剂用于其它炎性疾病、癌症或变性疾病中的诊断成象途。
再一方面，本发明公开了上述合成巴比妥酸基质金属蛋白酶抑制剂成象剂用于动脉粥样硬化、特别是不稳定性易损斑块中的血管内检测的用途，采用近程检测。这类近程检测可采用血管内装置如导管或手术中采用的手持检测器(如γ检测器)完成。当成象部分为适用于体内光成象的信息基团或β-发射体时，这类血管内检测特别有用，因为这些部分在哺乳动物体外不易检测，但适用于近程检测。
本发明通过以下详述的非限定性实施例来说明。实施例1描述化合物1，1，1-三(2-氨基乙基)甲烷的合成。实施例2提供了1，1，1-三(2-氨基乙基)甲烷的另一种合成方法，该合成方法避免使用具潜在危险的叠氮化物中间体。实施例3描述氯亚硝基烷前体的合成。实施例4描述本发明优选的胺取代的双官能二胺二肟(螯合剂1)的合成。实施例5提供非放射性碘化巴比妥(化合物4)的合成。实施例6描述化合物4的放射性碘化125I类似物(化合物5)的合成。实施例7描述哌嗪取代的巴比妥(化合物6)的合成，其中哌嗪胺可用于进一步轭合(如螯合剂的轭合)。实施例8描述氟丙基衍生物(化合物7)的合成，并且实施例9对应于18F类似物。实施例10提供硫醚连接的氟丙基衍生物(化合物9)，并且实施例11对应18F衍生物(化合物10)。实施例12提供氯乙酰基中间体(化合物11)的合成。实施例13和14提供本发明螯合剂轭合物(化合物16和17)的合成。实施例15提供三丁基甲锡烷基放射性碘化前体(化合物18)的合成。实施例16描述溴乙基衍生物(化合物13)的合成，该衍生物作为前体用于相应18F类似物与[18F]氟化物经氟脱溴化的放射合成。实施例17提供各种苯基哌嗪衍生物(化合物19-22)的合成。实施例18描述化合物24的合成。实施例19和20描述评价本发明化合物对特定金属蛋白酶抑制活性的体外试验。表1和表2显示本发明非放射性碘化、氟化和螯合衍生物实例关于MMP-2、MMP-9和MMP-12的抑制试验结果。结果显示大多数化合物相对于现有技术比较化合物2和化合物3具有相似的抑制活性。这表明螯合剂或成象部分(如碘原子或氟原子)可在不损害巴比妥MMP抑制剂生物活性下引入。实施例21描述了本发明99mTc放射性标记的螯合剂轭合物。实施例22描述了本发明合适的非放射性前体的放射性碘化通用方法。
图1显示了本发明几种化合物的化学结构。
实施例11，1，1-三(2-氨基乙基)甲烷的合成步骤1(a)3-(甲氧碳基亚甲基)戊二酸二甲酯用3-氧代戊二酸二甲酯(87g，0.5mol)处理甲酯基亚甲基三苯基正膦(167g，0.5mol)甲苯(600ml)溶液，氮气气氛下，反应物于120℃油浴加热至100℃，保持36h。然后于真空浓缩反应物，将油状剩余物用600ml石油醚(petrol ether)/乙醚(40/60)的1∶1混合物研磨。沉淀出氧化三苯膦，将上层液体倾倒/过滤。真空蒸发得到的剩余物在高真空Bpt下进行Kugelrohr蒸馏(烘箱温度180-200℃，压力0.2托)，得到3-(甲氧碳基亚甲基)戊二酸二甲酯(89.08g，53％)。
NMR1H(CDCl3)δ3.31(2H，s，CH2)，3.7(9H，s，3xOCH3)，3.87(2H，s，CH2)，5.79(1H，s，＝CH，)ppm.
NMR13C(CDCl3)，δ36.56，CH3，48.7，2xCH3，52.09和52.5(2xCH2)；122.3和146.16C＝CH；165.9，170.0和170.5 3xCOOppm.
步骤1(b)3-(甲氧碳基亚甲基)戊二酸二甲酯的氢化在氢气气氛下(3.5巴)，将3-(甲氧碳基亚甲基)戊二酸二甲酯(89g，267mmol)的甲醇(200ml)溶液与钯/碳(10％∶50％水)(9g)一起振摇30h。将溶液经硅藻土过滤，并真空浓缩，得到油状3-(甲氧碳基甲基)戊二酸二甲酯84.9g，收率94％。
NMR1H(CDCl3)，δ2.48(6H，d，J＝8Hz，3xCH2)，2.78(1H，六重峰，J＝8Hz CH，)3.7(9H，s，3xCH3).
NMR13C(CDCl3)，δ28.6，CH；37.50，3xCH3；51.6，3xCH2；172.28，3xCOO.
步骤1(c)三甲基酯还原酯化为三乙酸酯氮气气氛下，2L三颈圆底烧瓶中，1h内小心用三(甲氧碳基甲基)甲烷(40g，212mmol)四氢呋喃(200ml)溶液处理氢化铝锂(20g，588mmol)四氢呋喃(400ml)溶液。反应发生剧烈放热，引起溶剂剧烈回流。该反应在90℃油浴上加热回流3天。通过小心地逐滴加入醋酸(100ml)直至没有氢气产生为止，将该反应淬灭。以引起温和回流的速度，用醋酸酐溶液(500ml)小心处理搅拌的反应混合物。该烧瓶装上蒸馏装置并搅拌，然后90℃加热(油浴温度)以蒸馏出四氢呋喃。再加入另一部分醋酸酐(300ml)，将反应再恢复至回流状态，在140℃油浴中加热搅拌5h。反应物冷却并过滤。用乙酸乙酯洗涤氧化铝沉淀，合并的滤液在50℃水浴用旋转蒸发仪真空(5mmHg)浓缩，得到油状物。将油状物溶于乙酸乙酯(500ml)中，并用饱和碳酸钾水溶液洗涤。将乙酸乙酯溶液分离，用硫酸钠干燥，并真空浓缩，得到油状物。将该油状物在高真空下Kugelrohr蒸馏，得到三(2-乙酰氧基乙基)甲烷45.3g，收率96％，呈油状物，0.1mmHg沸点(Bp.)为220℃。
NMR1H(CDCl3)，δ1.66(7H，m，3xCH2，CH)，2.08(1H，s，3xCH3)；4.1(6H，t，3xCH2O).
NMR13C(CDCl3)，δ20.9，CH3；29.34，CH；32.17，CH2；62.15，CH2O；171，CO.
步骤1(d)从三乙酸酯中除去乙酸酯基将三(2-乙酰氧基乙基)甲烷(45.3g，165mM)的甲醇(200ml)和880氨水(100ml)溶液在80□油浴加热2天。该反应物用另一部分880氨水(50ml)处理，在油浴中80□加热24h。再加入另一部分880氨水(50ml)，将该反应物在80□加热24h。然后将该反应物真空浓缩以除去所有溶剂，得到油状物。将该油状物溶于880氨水(150ml)中，在80□加热24h。然后将反应物真空浓缩以除去所有溶剂，得到油状物。Kugelrohr蒸馏得到乙酰胺，0.2mm沸点(Bp.)为170-180。将装有乙酰胺的圆形瓶洗涤干净，并继续蒸馏。蒸馏得到三(2-羟基乙基)甲烷22.53g，收率92％，0.2mm沸点(Bp.)为220℃。
NMR1H(CDCl3)，δ1.45(6H，q，3xCH2)，2.2(1H，五重峰，CH)；3.7(6H，t 3xCH2OH)；5.5(3H，brs，3xOH).
NMR13C(CDCl3)，δ22.13，CH；33.95，3xCH2；57.8，3xCH2OH.
步骤1(e)三元醇转化为三(甲磺酸酯)氮气下，以保持不高于15℃温度的速率，向搅拌下冰冷却的三(2-羟基乙基)甲烷(10g，0.0676mol)的二氯甲烷(50ml)溶液中缓慢滴加甲磺酰氯(40g，0.349mol)二氯甲烷(50ml)溶液。然后以保持不高于15℃温度的速率，滴加入吡啶(21.4g，0.27mol，4eq)的二氯甲烷(50ml)溶液，出现放热反应。反应物在室温下搅拌24小时，然后用5N盐酸溶液(80ml)处理，分层。用另外的二氯甲烷(50ml)萃取水层，合并有机萃取液，硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到包含过量甲磺酰氯杂质的三[2-(甲磺酰基氧基)乙基]甲烷。理论产量为25.8g。
NMR1H(CDCl3)，δ4.3(6H，t，2xCH2)，3.0(9H，s，3xCH3)，2(1H，六重峰，CH)，1.85(6H，q，3xCH2).
步骤1(f)1，1，1-三(2-叠氮基乙基)甲烷的制备在氮气下，15分钟内分次加入叠氮化钠(30.7g，0.47mol)来处理搅拌下的三[2-(甲磺酰氧基)乙基]甲烷[来自步骤1(e)，含过量甲磺酰氯杂质](25.8g，67mmol，理论量)的无水DMF(250ml)溶液。观测放热，并将反应物置于冰浴中冷却。30分钟后，将反应混合物在50℃油浴加热24h。反应物变为棕色。将反应物冷却，用稀碳酸钾溶液(200ml)处理，并用40/60石油醚/乙醚(10∶1，3×150ml)萃取3次。用水(2×150ml)洗涤有机萃取液，硫酸钠干燥，过滤。将200ml乙醇加入到汽油(petrol)/醚溶液中以使三叠氮化物保持在溶液中，真空浓缩至体积不少于200ml。加入200ml乙醇，再真空浓缩以除去残余微量汽油，剩余乙醇溶液不少于200ml。该三叠氮化物乙醇溶液直接用于步骤1(g)。
注意不能除去所有溶剂，因为叠氮化物有潜在爆炸危险，并应当一直保持在稀溶液中。
将少于0.2ml的溶液真空蒸发以除去乙醇，并用该少量样品进行NMR测试NMR1H(CDCl3)，δ3.35(6H，t，3×CH2)，1.8(1H，七重峰，CH，)，1.6(6H，q，3×CH2)。
步骤1(g)1，1，1-三(2-氨基乙基)甲烷的制备用10％钯/碳(2g，50％水溶液)处理三(2-叠氮基乙基)甲烷(15.06g，0.0676mol)(假定前步反应的收率为100％)的乙醇(200ml)溶液，并氢化12h。反应容器每2小时排空以除去反应产生的氮气并再用氢气填充。取样进行NMR分析，以确定三叠氮化物完全转化为三胺。
小心未还原的叠氮化物可在蒸馏时爆炸。
反应物通过硅藻土垫过滤以除去催化剂，并真空浓缩，得到油状物三(2-氨基乙基)甲烷。油状物在bp.180-200℃、0.4mm/Hg下，经Kugelrohr蒸馏进一步纯化，得到无色油状物(8.1g，以三元醇计总收率为82.7％)。
NMR1H(CDCl3)，2.72(6H，t，3xCH2N)，1.41(H，七重峰，CH)，1.39(6H，q，3xCH2).
NMR13C(CDCl3)，δ39.8(CH2NH2)，38.2(CH2.)，31.0(CH).
实施例21，1，1-三(2-氨基乙基)甲烷的替代制备方法步骤2(a)三甲酯与对甲氧基-苄胺的酰胺化三(甲氧基羰基甲基)甲烷[2g，8.4mmol；按上述步骤1(b)方法制备]溶于对甲氧基苄基胺(25g，178.6mmol)中。通入氮气下，搭起蒸馏装置并加热至120℃，保持24h。通过收集甲醇的量监控反应进程。将反应混合物冷却至环境温度，并加入乙酸乙酯30ml，然后搅拌三酰胺产物沉淀30分钟。过滤分离该三酰胺化合物，滤饼用足量的乙酸乙酯洗涤几次，以除去过量的对甲氧基-苄基胺。干燥后得到白色粉末4.6g，100％。所得高度不溶性产物直接用于下一步骤，无须进一步纯化或表征。
步骤2(b)1，1，1-三[2-(对甲氧基苄基氨基)乙基]甲烷的制备在冰水浴中冷却的1000ml三颈圆底烧瓶中，小心将步骤2(a)的三酰胺(10g，17.89mmol)加入250ml 1M硼烷溶液(3.5g，244.3mmol)硼烷中。加毕，撤掉冰水浴，并将该反应混合物缓慢加热至60℃。反应混合物在60℃下搅拌20小时。取反应混合物样品1ml，与0.5ml 5N HCL混合并放置30分钟。将0.5ml的50NaOH加到样品中，随后加入2ml水并搅拌溶液，直至所有白色沉淀溶解。用5ml醚萃取该溶液，并蒸发。将剩余物溶于乙腈中，浓度1mg/ml，并通过MS分析。如果在MS谱中发现单或二酰胺(M+H/z＝520和534)，则反应不完全。为完成反应，再加入100ml 1M硼烷THF溶液，并将该反应混合物在60℃再搅拌6小时，并按照上次取样方法取新样品。如需要，继续加入1M硼烷THF溶液，直至完全转化为三胺。
将反应混合物冷却至环境温度，缓慢加入5N HCl，(注意剧烈的泡沫形成！)。加盐酸至观察不到气体产生。将混合物搅拌30分钟，然后蒸发。将饼状物混悬于NaOH水溶液(20-40％；1∶2w/v)中，搅拌30分钟。然后将混合物用3体积的水稀释。然后用乙醚(2×150ml)萃取混合物(注意不能用卤代溶剂)。合并的有机相用水(1×200ml)、盐水(150ml)洗涤，硫酸镁干燥。蒸发后得油状物7.6g，收率84％。
NMR1H(CDCl3)，δ1.45，(6H，m，3xCH2；1.54，(1H，七重峰，CH)；2.60(6H，t，3xCH2N)；3.68(6H，s，ArCH2)；3.78(9H，s，3xCH3O)；6.94(6H，d，6xAr).7.20(6H，d，6xAr).
NMR13C(CDCl3)，δ32.17，CH；34.44，CH2；47.00，CH2；53.56，ArCH2；55.25，CH3O；113.78，Ar；129.29，Ar；132.61；Ar；158.60，Ar；步骤2(c)1，1，1-三(2-氨基乙基)甲烷的制备将1，1，1-三[2-(对甲氧基苄基氨基)乙基]甲烷(20.0g，0.036mol)溶于100ml甲醇中，加入Pd(OH)2(5.0g)。该混合物在高压釜中氢化(3巴，100℃)，并搅拌5小时。在10、15小时后，分别再加入2部分(2×5g)Pd(OH)2。将反应混合物过滤，滤液用甲醇洗涤。将合并的有机相蒸发，剩余物真空蒸馏(1×10-2，110℃)，得到2.60g(50％)1，1，1-三(2-氨基乙基)甲烷，与前述实施例1一致。
实施例33-氯-3-甲基-2-亚硝基丁烷的制备将2-甲基丁-2-烯(147ml，1.4mol)与亚硝酸异戊酯(156ml，1.16mol)混合物在cardice和甲醇浴中冷却至-30℃，顶置空气搅拌器剧烈搅拌，用浓盐酸(140ml，1.68mol)以保持温度低于-20℃的速率滴加处理。由于大量放热，该过程大约需要1小时，并且注意必须防止过热。为减少加料结束形成的浆状物的粘度，加入乙醇100ml，反应物在-20℃至-10℃下再搅拌2小时以完成反应。真空下过滤收集沉淀物，并用4×30ml冷(-20℃)乙醇和100ml冰冷却的水洗涤，真空干燥，得到3-氯-3-甲基-2-亚硝基丁烷，呈白色固体。将乙醇滤液与洗液合并，用200ml水稀释，冷却，并在-10℃下放置1小时，这时又结晶出3-氯-3-甲基-2-亚硝基丁烷。过滤收集沉淀物，用少量水洗涤，真空干燥，得到3-氯-3-甲基-2-亚硝基丁烷共115g(0.85mol，73％)，NMR测得纯度＞98％。
NMR1H(CDCl3)，为异构体混合物(异构体1，90％)1.5d，(2H，CH3)，1.65d，(4H，2×CH3)，5.85，q，和5.95，q一起1H.(异构体2，10％)，1.76s，(6H，2×CH3)，2.07(3H，CH3)。
实施例4二[N-(1，1-二甲基-2-N-羟基亚胺丙基)2-氨基乙基]-(2-氨基乙基)甲烷(螯合剂1)的合成在室温、氮气气氛下，剧烈搅拌下向三(2-氨基乙基)甲烷(4.047g，27.9mmol)的无水乙醇(30ml)溶液中加入无水碳酸钾(7.7g，55.8mmol，2eq)。3-氯-3-甲基-2-亚硝基丁烷(7.56g，55.8mol，2eq)溶液溶于100ml无水乙醇，将75ml该溶液缓慢滴入反应混合物中。随后反应物经硅胶进行TLC[板以二氯甲烷∶甲醇∶浓氨水(0.88sg)展开；100/30/5且TLC板通过喷茚三酮并加热显示斑点]。发现单、二、三烷基化产物且RF值顺序增加。进行HPLC分析，使用RPR反相柱，梯度为7.5-75％的乙腈/3％氨水。反应物真空浓缩以除去乙醇，并混悬在水(110ml)中。用100ml醚萃取含水浆状物以除去某些三烷基化化合物和亲脂性杂质，将单烷基化和所需二烷基化产物留在水层。水溶液以乙酸铵(2eq，4.3g，55.8mmol)缓冲，以确保好的层析效果。水溶液在4℃贮存过夜，然后通过自动制备HPLC纯化。收率(2.2g，6.4mmol，23％)。
质谱正离子10V锥电压(cone voltage)，实测值344；理论值M+H＝344。
NMR1H(CDCl3)，δ1.24(6H，s，2xCH3)，1.3(6H，s，2xCH3)，1.25-1.75(7H，m，3xCH2，CH)，(3H，s，2xCH2)，2.58(4H，m，CH2N)，2.88(2H，t，CH2N2)，5.0(6H，s，NH2，2xNH，2xOH).
NMR1H((CD3)2SO)δ1.14xCH；1.29，3xCH2；2.1(4H，t，2xCH2)；NMR13C((CD3)2SO)，δ9.0(4xCH3)，25.8(2xCH3)，31.02xCH2，34.6CH2，56.82xCH2N；160.3，C＝N.
HPLC条件流速8ml/min，采用25mm PRP柱A＝3％氨溶液(sp.gr＝0.88)/水；B＝乙腈时间％B0 7.515 75.020 75.022 7.530 7.5每次洗脱用水溶液3ml，收集12.5-13.5min时段的流份。
实施例5非放射性碘巴比妥(化合物4)的合成步骤(a)1-[4-(4-碘-苯氧基)苯基]乙酮4-氟苯乙酮25.0g(181mmol)溶于DMF(180ml)中，然后加入4-碘苯酚(39.8g，181mmol)和碳酸钾(30.0g，217mmol)。将混合物回流约7h，冷却至室温，用水稀释。然后用二氯甲烷或氯仿萃取3次，合并的有机相用水洗涤一次，用硫酸钠干燥。真空除去溶剂，得到粗品。该粗品为褐色油状剩余物，用己烷/乙酸乙酯(7∶3)重结晶，得到呈淡棕色结晶固体的纯品48.8g，收率80％，mp99-101℃。
步骤(b)2-[4-(4-碘-苯氧基)苯基]-1-吗啉-4-基-乙硫酮的制备将1-[4-(4-碘-苯氧基)苯基]乙酮(23.0g，68.0mmol)、硫(5.45g，170mmol)和吗啉(11.8g，135mmol)的混合物在150℃加热2.5h。然后冰浴冷却，混合物用乙醇处理30-60min时间。经抽滤收集淡黄色固体沉淀，用乙醇重结晶。该产物包含一定量的硫。得到芥末黄色固体26.3g，收率88％。mp123-127℃。
步骤(c)[4-(4-碘-苯氧基)苯基]-乙酸将2-[4-(4-碘-苯氧基)苯基]-1-吗啉-4-基-乙硫酮(26.9g，61.1mmol)与冰醋酸(54ml)、水(12ml)、浓硫酸(8ml)的混合物一起在150℃加热12h。然后冷却至室温，反应混合物用水(约10ml/mmol)稀释，并用乙酸乙酯萃取3次。用水洗涤合并的有机萃取液，用硫酸钠干燥，真空蒸发溶剂，得到淡棕色固体20.1g，收率93％，Mp148-150℃。
步骤(d)[4-(4-碘-苯氧基)-苯基]-乙酸甲酯将17.3g(48.9mmol)[4-(4-碘-苯氧基)-苯基]-乙酸的甲醇(125ml)溶液冷却至-10℃。然后加入亚硫酰氯(11.6g，7.1ml，97.8mmol)，并将反应混合物加热回流1h。然后将浓缩剩余物用醚溶解。用水洗涤醚相，用硫酸钠干燥，蒸发溶剂，得到粘性、棕红色油状物13.6g，收率76％。
1H-NMR(300MHz，CDCl3，TMS内标)δ[ppm]7.49(d，3J＝8.9Hz，2H，H芳基)，7.15(d，3J＝8.9Hz，2H，H芳基)，6.84(d，3J＝8.9Hz，2H，H芳基)，6.66(d，3J＝8.9Hz，2H，H芳基)，3.59(s，3H，COOCH3)，3.50(s，2H，CH2).
步骤(e)4-(4-碘-苯氧基)苯基)-丙二酸二甲酯将NaH(680mg，28.3mmol)与碳酸二甲酯(8.16g，90.6mmol)的无水二噁烷(70ml)混悬液加热至100-120℃，然后1h内滴加入[4-(4-碘-苯氧基)苯基]-乙酸甲酯(5.21g，14.2mmol)的无水二噁烷(30ml)溶液。继续回流3h，然后将反应混合物冷却至室温过夜。将混合物倾入冰水中，随后用二氯甲烷萃取3次。合并的有机相用水洗1次、盐水洗1次，用硫酸钠干燥并浓缩，得到粘性、棕红色油状物5.25g，收率87％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3，TMS内标)δ[ppm]7.53(d，3J＝8.7Hz，2H，H芳基)，7.29(d，3J＝8.7Hz，2H，H芳基)，6.89(d，3J＝8.7Hz，2H，H芳基)，6.70(d，3J＝8.7Hz，2H，H芳基)，4.71(s，1H，CH)，3.68(s，6H，COOCH3).
步骤(f)5-[4-(4-碘-苯氧基)苯基]-嘧啶-2，4，6-三酮将2当量的钠溶于乙醇(约10ml/mg)中，并加尿素(1.7eq.)至该溶液中。滴加入2-[4-(4-碘-苯氧基)-苯基]-丙二酸二甲酯(2.22g，5.21mmol)的乙醇溶液，并将反应混合物加热回流6h。然后冷却至室温，将该混合物倾入冰水中，并用稀盐酸调pH为2。抽滤收集沉淀物，并真空干燥，得到无定形固体。用甲醇/乙腈(1∶1)重结晶，得到棕黄色固体。产量480mg，收率22％。
Mp285-286℃(分解)。
步骤(g)5-溴-5-[4-(4-碘-苯氧基)苯基]-嘧啶-2，4，6-三酮将1.10g(2.61mmol)5-[4-(4-碘-苯氧基)苯基]-嘧啶-2，4，6-三酮、N-溴代琥珀酰亚胺(557mg，3.31mmol)、催化量的过氧化二苯甲酰(77mg)在四氯化碳(50ml)中的混悬液回流3h。冷却至室温后，将混合物浓缩，剩余物用水处理，然后用乙酸乙酯萃取3次。合并的萃取液用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并蒸发溶剂，得到粘性、棕色油状物，产量1.26g，收率96％。该产物无需进一步纯化即可用于下一步骤。
步骤(h)5-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]-5-[4-(4-碘-苯氧基)苯基]-嘧啶-2，4，6-三酮(化合物4)将5-溴-5-[4-(4-碘-苯氧基)苯基]-嘧啶-2，4，6-三酮(100mg，200μmol)的甲醇(5ml)溶液用N-(2-羟基乙基)哌嗪52.0mg(400μmol)处理，在室温下将混合物搅拌24h。约30-60分钟后形成沉淀，最后抽滤收集沉淀并真空干燥，得到产物为无色固体73.0mg，收率67％，mp255-257℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO-D6)δ[ppm]11.78(宽峰s，2H)，7.93(宽峰，d，3J＝8.9Hz，2H，H芳基)，7.63(宽峰，d，3J＝8.9Hz，2H，H芳基)，7.26(宽峰，d，3J＝8.9Hz，2H，H芳基)，7.09(宽峰，d，3J＝8.9Hz，2H，H芳基)，4.53(宽峰，s，1H，OH)，3.70-3.66(m，2H，CH2)，2.80-2.58(m，10H，CH2).
按Grams等的方法[Biol.Chem.，382，1277-1285(2001)]，分别以化合物23(即5-溴-5-[4-(4-溴-苯氧基)苯基]-嘧啶-2，4，6-三酮)和5-溴-5-[4-(4-甲氧基-苯氧基)苯基]-嘧啶-2，4，6-三酮为原料，用类似的方法制备化合物2(即5-[4-(4-溴-苯氧基)苯基]-5-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]-嘧啶-2，4，-三酮)和化合物3(即5-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]-5-[4-(4-甲氧基-苯氧基)苯基]-嘧啶-2，4，6-三酮)。
实施例65-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]-5-[4-(4-([125I]碘-苯氧基)苯基]-嘧啶-2，4，6-三酮(化合物5)的合成2，5-二羟基苯甲酸(0.6mg，3.9μmol)、抗坏血酸(0.8mg，4.5μmol)、注射用水(20μl)和5μl(65.3nmol)CuSO45H2O溶液(浓度＝3.26g/L，于注射用水中)加入锥形小瓶，该小瓶含有化合物2(50μl，209nmol；浓度＝2.10g/L EtOH)。
采用He气流将冰冷却的混合物脱气10分钟，然后加入4μl[125I]NaI的氢氧化钠溶液，涡旋该混合物。116℃加热混合物60分钟。冷却至室温后，用50μl注射用水稀释。将该溶液注射至梯度HPLC色谱仪，采用γ-和UV-检测器，Nucleosil 100 C-18 5μ250×4.6mm2柱，以及相应20×4.6mm2预柱。
HPLC条件洗脱液ACH3CN/H2O/TFA950/50/1洗脱液BCH3CN/H2O/TFA50/950/1梯度洗脱液B从92％至50％45min，然后从50％至92％10min流速1.5ml/min
λ254nmRt(产物流份)32.80-33.90min将部分流份(200μl)再注射至到梯度HPLC，采用上述相同条件。
Rt(化合物5)33.08min该产物的质量控制(HPLC，相同条件)，γ-频道下未显示任何杂质。而UV-频道检测出少量杂质(31.33min)，可能由前体化合物导致。通过第二次HPLC层析，可能从流份中除去该杂质。
通过在第二次质控注射中加入等分试样的非放射性碘标准品(化合物4)来确立Rt参数。
放射性化学物质的收率20％。
实施例75-[4-(4-溴-苯氧基)苯基]-5-哌嗪-1-基-嘧啶-2，4，6-三酮(化合物6)将5-溴-5-[4-(4-溴-苯氧基)苯基]-嘧啶2，4，6-三酮[化合物23，实施例5步骤(h)](200mg，440μmol)溶于无水甲醇(5ml)中，用哌嗪(75.8mg，880μmol)处理。约10分钟后，形成无色沉淀。在室温下将反应混合物搅拌24h，然后抽滤收集沉淀，于甲醇中搅拌1h，真空干燥，得到160mg无色固体，收率79％。
mp265-266℃(分解)。
1H-NMR(300MHz，DMSO-D6)δ[ppm]7.34(宽峰，d，3J＝8.7Hz，2H，H芳基)，7.22(宽峰，d，3J＝8.7Hz，2H，H芳基)，6.82(宽峰，d，3J＝8.7Hz，2H，H芳基)，6.79(宽峰，d，3J＝8.7Hz，2H，H芳基)，2.55-2.23(宽峰，m，8H，CH2).
实施例85-[4-(4-溴苯氧基)苯基]-5-[4-(3-氟丙基)-哌嗪-1-基)-嘧啶2，4，6-三酮(化合物7)室温、氮气气氛下，向化合物6(10mg，2.2×10-5mol)吡啶(2ml)溶液中加入3-氟丙基甲苯磺酸酯(1.1当量)。将反应物搅拌16h。将混合物浓缩，并溶于5ml甲醇中。该混合物经HPLC(C18，150×10mm)纯化，并在约13min后洗脱出产物。除去溶剂，得到灰白色固体(收率38％)。通过质谱[ES(+ve)521.1]和1H NMR分析确定结构。
实施例918F标记衍生物，化合物8的合成步骤(a)甲苯磺酸3-[18F]氟丙基酯的合成 在玻璃小瓶中制备Kryptofix 222(10mg)乙腈(300μl)溶液和碳酸钾(4mg)水(300μl)溶液，使用塑料注射器(1ml)通过二通接头将溶液转移到铜加热器中的碳玻璃反应容器中。然后通过此二通接头，加入18F-氟化物(185-370MBq)靶水(0.5-2ml)溶液。加热器设定在125℃并开启计时器。15分钟后，以1分钟时间间隔，加入3等分试样乙腈(0.5ml)。18F-氟化物共40分钟后干燥完全。40分钟后，用压缩空气将加热器冷却，将罐盖打开，加入1，3-丙二醇-二-对甲苯磺酸酯(5-12mg)和乙腈(1ml)。重新盖上盖子，并将管道用塞子缝住。加热器设定在100℃，以100℃/10分钟标记。标记后，通过Gilson RP HPLC采用以下条件分离甲苯磺酸3-[18F]氟丙基酯色谱柱u-bondapak C18 7.8×300mm洗脱液水(泵A)∶乙腈(泵B)回路体积1ml泵速4ml/min波长254nm梯度5-90％洗脱液B，经20min产物Rt12min一旦分离，取样品(约10ml)用水(10ml)稀释，并装进处理的C18 seppak柱。该柱用氮气干燥15分钟，并用有机溶剂吡啶(2ml)、乙腈(2ml)或DMF(2ml)洗脱。大约99％的活性成分被洗脱出。
步骤(b)化合物6的烷基化 化合物6 化合物8化合物6通过与甲苯磺酸3-[18F]氟丙基酯在吡啶中回流烷基化，得到化合物8。
实施例105-[4-(4-溴苯氧基)苯基]-5-{4-(2-氟丙基硫基)乙酰基]-哌嗪-1-基}-嘧啶-2，4，6-三酮(化合物9)步骤(a)3-三苯甲基硫基-丙-1-醇[Ph3CS(CH2)3OH]将三苯甲醇(390.6mg，1.5mmol)的TFA(10ml)溶液滴加到搅拌中的3-巯基丙-1-醇(129.6μl，1.5mmol)的TFA(10ml)溶液。加完后，减压蒸发TFA，粗产物立即使用反相制备色谱法纯化(Phenomenex Luna C18柱，00G-4253-V0；溶剂A＝水/0.1％TFA和B＝CH3CN/0.1％TFA；梯度70-80％B，60min；流速50ml/min；检测波长254nm)，得到纯化合物372mg(74％)(分析HPLCVydac C18柱，218TP54溶剂A＝水/0.1％TFA和B＝CH3CN/0.1％TFA；梯度70-80％B，20min；流速1.0ml/min；保留时间5.4min，检测波长214和254nm)。通过NMR确定结构。
步骤(b)甲磺酸3-三苯甲基硫基-丙基酯[Ph3CS(CH2)3OMs]向3-三苯甲基硫基-丙-1-醇(372.0mg，1.11mmol)的THF(10ml)溶液加入三乙胺(151.7mg，209μl，1.5mmol)和甲磺酰氯(171.9mg，116.6μl，1.5mmol)。1小时后过滤出沉淀，减压下蒸发THF，粗产物经反相制备色谱法纯化(Phenomenex Luna C18柱，00G-4253-V0；溶剂A＝水/0.1％TFA和B＝CH3CN/0.1％TFA；梯度80-100％B，60min；流速50ml/min；检测波长254nm)。得到318mg(69％)纯合物(分析HPLCVydacC18柱，218TP54溶剂A＝水/0.1％TFA和B＝CH3CN/0.1％TFA；梯度60-70％B，20min；流速1.0ml/min；保留时间18.7min，检测波长214和254nm)。通过NMR确定结构。
步骤(c)(3-氟丙基硫基)三苯基甲烷[Ph3CS(CH2)3F]将氟化钾(1.4mg，0.024mmol)和kryptofix 222(9.0mg，0.024mmol)溶于0.2ml乙腈中(加热)。加入甲磺酸3-三苯甲基硫基-丙基酯(5mg，0.012mmol)的乙腈(0.2ml)溶液。将反应混合物加热至80℃，保持90min。粗产物经反相制备色谱法纯化(Vydac C18柱，218TP1022；溶剂A＝water/0.1％TFA和B＝CH3CN/0.1％TFA；梯度40-90％B，40min；流速10ml/min；检测波长214nm)。得到2.5mg(62％)的纯化物质(分析HPLCPhenomenex Luna C18柱，00B-4251-E0溶剂A＝水/0.1％TFA和B＝CH3CN/0.1％TFA；梯度40-80％B，10min；流速2.0ml/min；保留时间8.2min，检测波长214和254nm)。由NMR确定结构。
步骤(d)5-[4-(4-溴苯氧基)苯基]-5-{4-(2-氟丙基硫基)乙酰基}-哌嗪-1-基}-嘧啶-2，4，6-三酮(化合物9)3-氟-三苯甲基硫基-丙烷(4.1mg，0.021mmol)与TFA(100μl)、三异丙基硅烷(10μl)和水(10μl)一起搅拌。加入300μl水，随后加入200μl碳酸钾(aq)。加入化合物11(3.25mg，0.0061mmol)的CH3CN(500μl)溶液。用碳酸钾(aq)调PH至10。将混合物加热至75℃，保持半小时。粗产物经反相制备色谱法纯化(Phenomenex Luna C18柱，00G-4253-N0；溶剂A＝水/0.1％TFA和B＝CH3CN/0.1％TFA；梯度20-70％B，30min；流速5ml/min；检测波长254nm)。得到2mg(55％)的纯化物质(分析HPLCVydac C18柱，218TP54溶剂A＝水/0.1％TFA和B＝CH3CN/0.1％TFA；梯度20-70％B，20min；流速1.0ml/min；保留时间17.4min，检测波长214和254nm)。
1H NMR(CHCl3-d1，TMS对照)δ2.01(m，2H)，δ2.72(宽峰t，2H)，δ2.75(t，2H)，δ2.79(宽峰t，2H)，δ3.30(s，2H)，δ3.30(宽峰t，2H)，δ3.51(s，2H)，δ3.64(宽峰t，2H)，δ4.53(dt，2H)，δ6.93(复合峰d，2H)，δ6.99(复合峰d，2H)，δ6.93(复合峰d，2H)，δ7.46(复合峰d，2H)，δ7.48(复合峰d，2H)，δ7.77(复合峰d，2H).
实施例115-[4-(4-溴苯氧基)-苯基]-5-{4-(2-[18F]-氟丙基硫基)-乙酰基]-哌嗪-1-基}-嘧啶-2，4，6-三酮(化合物10)步骤(a)3-[18F]氟-三苯甲基硫基-丙烷的制备 在玻璃小瓶中制备Kryptofix 222(10mg)乙腈(800μl)溶液和碳酸钾(1mg)水(50μl)溶液，使用塑料注射器(1ml)通过二通接头将溶液转移到铜加热器中的碳玻璃反应容器中。然后也通过此二通接头，加入18F-氟化物(185-370MBq)靶水(0.5-2ml)溶液。加热器设定在125℃并开启计时器。15分钟后，以1分钟时间间隔，加入3等分试样乙腈(0.5ml)。干燥18F-氟化物最长共可达40分钟。40分钟后，用压缩空气将加热器冷却，将罐盖打开，加入三甲基-(3-三苯甲基硫基-丙氧基)硅烷(1-2mg)和DMSO(0.2ml)。盖上盖子，并将管道用塞子封闭。加热器设定在80℃，并以80℃/5min标记。标记后，通过RP HPLC采用以下HPLC条件分析色谱柱u-bondapak C18 7.8×300mm洗脱液0.1％TFA/水(泵A)∶0.1％TFA/乙腈(泵B)回路体积100μl泵速4ml/min波长254nm梯度1min 40％B15min 40-80％B5min 80％B将反应混合物用DMSO/水(1∶1v/v，0.15ml)稀释，并装入处理的t-C18 sep-pak柱。该柱用10ml水洗涤，氮气干燥，用4等分试样乙腈(每等分试样0.5ml)稀释3-[18F]氟-1-三苯甲基硫基-丙烷。
步骤(b)3-[18F]氟-丙-1-硫醇的制备 采用100℃/10min的氮气流，蒸发3-[18F]氟-1-三苯甲基硫基-丙烷的乙腈(1-2ml)溶液至干。加入TFA(0.05ml)、三异丙基硅烷(0.01ml)和水(0.01ml)的混合物，随后以80℃/10min加热，制备3-[18F]氟-丙-1-硫醇。
步骤(c)与化合物11反应 化合物11化合物10标记氯乙酰基前体的通用方法用压缩空气冷却含有来自步骤(b)的3-[18F]氟-1-硫基-丙烷的反应容器，然后加氨水(27％，0.1ml)和化合物11前体(1mg)水(0.05ml)溶液。将混合物以80℃/10min加热。
实施例125-[4-(4-溴苯氧基)-苯基]-5-[4-(2-氯乙酰基)-哌嗪-1-基)嘧啶-2，4，6-三酮(化合物11)向装有氮气和化合物6(50mg，1.1×10-4mol)的烧瓶中加入二氯甲烷(15ml)。将该反应混合物在冰/水浴中冷却。依次加入氯乙酰氯(14μl)和三乙胺(14μl)。10分钟后移去冰浴，混合物温热至环境温度。18小时后将样品浓缩。加入2ml甲醇，并将该混合物通过HPLC(C18，150×10mm)分离。在17.5min洗脱出产物，收率52％。通过质谱[ES(-ve)535.1]和1H NMR分析确定结构。
实施例133-(4-{5-[4-(4-溴苯氧基)-苯基]-2，4，6-三氧代六氢嘧啶-5-基}-哌嗪-1-基)-N-{5-(2-羟基亚氨基-1，1-二甲基丙基氨基)-3-[2-(2-羟基氨基-1，1-二甲基丙基氨基)-乙基]-戊基}-丙酰胺(化合物16)步骤(a)5-[4-(4-溴-苯氧基)-苯基]-5-[4-(2-羧基乙基)哌嗪-1-基]-嘧啶-2，4，6-三酮(化合物14)将200mg(440μmol)5-溴-5-[4-(4-溴-苯氧基)苯基]-嘧啶-2，4，6-三酮(化合物23，实施例5)溶于2ml无水甲醇中，并用83.5mg(5.28mmol，1.2eq.)3-(哌嗪-1基)丙酸处理。将反应混合物加热回流6h，然后浓缩。将黄色固体剩余物在水中重结晶，得到170mg(320μmol，72％)无色无定形固体。
mp208-210℃(分解)1H-NMR(300MHz，DMSO-D6)δ[ppm]7.64(宽峰，d，3J＝8.6Hz，2H，H芳基)，7.50(宽峰，d，3J＝8.6Hz，2H，H芳基)，7.14(宽峰，d，3J＝8.6Hz，2H，H芳基)，7.10(宽峰，d，3J＝8.6Hz，2H，H芳基)，2.75-2.39(m，12H，CH2).
步骤(b)氮气气氛下，依次向化合物14(53mg)的N，N-二甲基甲酰胺(10ml)溶液中加入TBTU(85mg)和N-甲基吗啉(0.01ml)。10分钟后，加入螯合剂1(35mg)并将反应混合物在室温下搅拌24小时。减压除去溶剂，并将混合物溶于5ml甲醇中。粗品经HPLC分离。在约10分钟后洗脱出产物，收率75％。通过质谱[ES(+ve)858.1]和1H NMR分析确定结构。
实施例14化合物17的合成步骤(a)5-[4-(2-氨基乙基)哌嗪-1-基]-5-[4-(4-溴-苯氧基)苯基]嘧啶-2，4，6-三酮(化合物12)将200mg(440μmol)5-溴-5-[4-(4-溴-苯氧基)苯基]嘧啶-2，4，6-三酮(化合物23，实施例5)溶于2ml无水甲醇中，用125mg(127μl，9.67μmol)N-(2-氨基乙基)哌嗪处理。将反应混合物在室温下搅拌，约30分钟后，生成无色沉淀。继续搅拌16h，然后通过抽滤收集沉淀，真空干燥，得到100mg(200μmol，45％)无色固体。
熔点220-223℃(分解)1H-NMR(300MHz，DMSO-D6)δ[ppm]7.67(宽峰，d，3J＝9.0Hz，2H，H芳基，邻-C-Br)，7.55(宽峰，d，3J＝9.0Hz，2H，H芳基，邻-Cquart.连接Pyr.-C5)，7.15(宽峰，d，3J＝9.0Hz，2H，H芳基，间-Cquart连接Pyr.-C5)，7.12(宽峰，d，3J＝9.0Hz，2H，H芳基，间-C-Br)，2.89-2.79(m，2H，CH2-NH2)，2.77-2.65(m，4H，N1-CH2)，2.39-2.58(m，6H，N4-CH2)。
步骤(b)4-[2-(4-{5-[4-(4-溴苯氧基)苯基]-2，4，6-三氧代六氢嘧啶-5-基}-哌嗪-1-基)-乙基氨基甲酰基]-丁酸(化合物15)氮气气氛下，依次向化合物12的N，N-二甲基甲酰胺(30ml)溶液中加入戊二酸酐(11mg)和三乙胺(0.01ml)。24小时后减压除去溶剂。将粗品溶于5ml甲醇中并经HPLC分离。12分钟后洗脱出产物，收率50％。通过质谱[ES(+ve)617.9]和1H NMR分析确定结构。
步骤(c)4-[2-(4-{5-[4-(4-溴苯氧基)-苯基]-2，4，6-三氧代六氢嘧啶-5-基}-哌嗪-1-基)-乙基氨基甲酰基]-丁酸与螯合剂1的轭合氮气气氛下，向化合物15(11mg)的二氯甲烷(5ml)溶液中加入TBTU(8mg)和N-甲基吗啉(0.1ml)。5分钟后加入螯合剂1(6mg)，并将该混合物搅拌24小时。减压除去溶剂，并将混合物溶于5ml甲醇中。该混合物经HPLC分离，约10分钟后洗脱出产物，收率58％。通过质谱[ES(+ve)943.2]和1H NMR分析确定结构。
实施例155-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]-5-[4-(4-三丁基甲锡烷基苯氧基)-苯基]-嘧啶-2，4，6-三酮(化合物18)氮气气氛下，向化合物2(80mg)的甲苯混悬液中加入Pd(PPh3)4(200mg)和六丁基二锡(0.2ml)。将黄色混合物加热回流24小时。之后该反应混合物变成黑色。将该反应混合物过滤并减压除去溶剂。将粗品混合物溶于甲醇中并经HPLC纯化，收率45％。通过质谱[ES(+ve)715.1]和1H NMR分析确定结构。
实施例165-[4-(2-溴乙基)哌嗪-1-基]-5-[4-(4-溴-苯氧基)苯基]-嘧啶-2，4，6-三酮(化合物13)向化合物2(1.40g，2.78mmol)的80ml乙腈混悬液中加入1.46g(5.56mmol)三苯基膦和1.84g(5.56mmol)四溴化碳。将该混合物加热回流18h，冷却至室温并在-30℃贮存过夜。抽滤收集冷却后产生的固体沉淀物，得到920mg的淡棕色固体，收率58％。
1H-NMR(300MHz，DMSO-D6)δ[ppm]7.56(d，3J＝9.0Hz，2H，H芳基)，7.40(d，3J＝8.7Hz，2H，H芳基)，7.09(d，3J＝9.0Hz，2H，H芳基)，7.02(d，3J＝8.7Hz，2H，H芳基)，3.83-2.70(m，12H，CH2).
实施例17苯基-哌嗪衍生物(化合物19-22)的合成(a)通用方法化合物19-21将相应的苯基哌嗪(2.0eq.)分次加入到化合物23[实施例5，步骤(h)](1.0eq.)的无水甲醇(约2-3ml/mmol)溶液中。将该反应混合物在室温下搅拌20h。抽滤收集沉淀，并用甲醇洗涤。
采用该方法制备5-[4-(4-溴-苯氧基)-苯基]-5-[4-(4-硝基苯基)哌嗪-1-基]-嘧啶-2，4，6-三酮(化合物19)400mg(880μmol)化合物2与365mg(1.76mmol)1-(4-硝基苯基)哌嗪在4ml甲醇中反应，20h后得到320mg浅黄色反应产物，收率63％。
1H-NMR(400MHz，DMSO-D6)δ[ppm]8.22-7.04(m，12H，H芳基)，3.80-2.77(m，8H，CH2)。
5-[4-(4-溴-苯氧基)苯基]-5-[4-(4-氟苯基)哌嗪-1-基]-嘧啶-2，4，6-三酮(化合物20)400mg(880μmol)化合物2与317mg(1.76mmol)1-(4-氟苯基)哌嗪在2.5ml甲醇中反应，在氯仿中重结晶后，得到290mg无色反应产物，收率60％，mp247-249.5℃。
1H-NMR(400MHz，DMSO-D6)δ[ppm]11.66(s，2H，NH)，7.59-6.92(m，12H，H芳基)，3.33-2.74(m，8H，CH2)。
5-[4-(4-溴-苯氧基)-苯基]-5-[4-(4-三甲基甲硅烷基-苯基)哌嗪-1-基]-嘧啶-2，4，6-三酮(化合物21)400mg(880μmol)化合物2与413mg(1.76mmol)1-(4-三甲基甲硅烷基苯基)哌嗪在2.5ml甲醇中反应，得到440mg无色反应产物，收率82％。
mp205-210℃。
1H-NMR(400MHz，DMSO-D6)δ[ppm]7.93-6.77(m，12H，H芳基)，3.64-2.66(m，8H，CH2)，0.20(s，9H，SiCH3)。
(b)5-[4-(4-溴-苯氧基)-苯基]-5-[4-(4-碘苯基)哌嗪-1-基]-嘧啶-2，4，6-三酮(化合物22)在-70℃、氩气气氛下，40min内向280mg(460μmol)化合物21的甲醇(25ml)混悬液中加入一氯化碘300mg(1.84mmol)的甲醇(5ml)溶液。将橙色溶液在1.5h内温热至室温，用二氯甲烷稀释，用10％硫代硫酸钠水溶液洗涤至无色。用二氯甲烷萃取水相3次，用盐水洗涤，并用硫酸钠干燥。蒸发溶剂，剩余物真空干燥，得到粗产物230mg。
用甲醇重结晶，得到62mg无色结晶产物，收率20％。
mp210-211℃.
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ[ppm]11.55(s，2H，NH，7.50-6.63(m，12H，H芳基)，3.03(s，4H，CH2)，2.63(s，4H，CH2).
实施例185-[4-(4-溴苯氧基)-苯基]-5-(4-碘苯基氨基)-嘧啶-2，4，6-三酮(化合物24)向化合物23(实施例5，90mg)二氯甲烷(20ml)溶液中加入1.1当量的4-碘苯胺(50mg)和三乙胺(0.2ml)。氮气气氛下，将反应物搅拌16h。减压除去溶剂。将剩余物溶于2ml甲醇中。粗品混合物经HPLC分离，大约20.5min后洗脱出新化合物。减压除去溶剂，得到灰白色固体，收率85％。通过质谱[ES(-ve)591.9]和1H NMR分析确定结构。
实施例19体外金属蛋白酶抑制试验采用Huang W.等[J Biol Chem.272，22086-22091(1997)]的方法，研究化合物2-4和20。
因此，一定浓度的荧光底物(1μM)和各MMP(1nM)与增加量的MMP抑制剂(100pM-100μM)一起温育，以测定它们的IC50值。其结果见表1表1
实施例20另外体外金属蛋白酶抑制试验采用下述可买到的Biomol分析试剂盒筛选化合物MMP-2比色分析试剂盒-目录编号AK-408，MMP-9比色分析试剂盒-目录编号AK-410，MMP-12比色分析试剂盒-目录编号AK-402，它们可从Affiniti Research Products Ltd.(Palatine House，MatfordCourt，Exeter，EX2 8NL，UK)得到。
(a)试验化合物制备抑制剂以粉末形式提供，在4℃贮存。制备每种抑制剂1mM的DMSO储备溶液，分成20μl等分试样，并将这些等分试样贮存在-20℃。将储备溶液稀释得到8种抑制剂浓度(推荐浓度50μM、5μM、500nM、50nM、5nM、500pM、50pM和5pM)。稀释液用试剂盒分析缓冲液制备。加入分析孔时，抑制剂储备溶液五倍稀释，因此最终浓度范围为10μM-1pM。
(b)实验步骤商品试剂盒可提供详细资料，但可概括如下-按上述方法制备试验化合物稀释液；-板加入分析缓冲液；-板加入试验化合物；-制备标准试剂盒抑制剂NNGH(见稀释因子的试剂盒)；-加NNGH到对照抑制剂孔中；-制备MMP酶(见稀释因子的试剂盒)；-加MMP到板；-板在37℃温育约15min；-制备thiopeptolide底物(见稀释因子的试剂盒)；-加底物到板；-于37℃、414nm，在Labsystems iEMS板读出器上每2分钟读数，持续1hr。
(c)结果结果见表2
表2
实施例21化合物16和17的99mTc放射性标记该99mTc络合物以相同方法制备，将以下物质加入到通入氮气的的P46小瓶中1ml通入氮气的甲醇；100μg化合物16(或17)的甲醇(100μl)溶液；0.5ml Na2CO3/NaHCO3缓冲液(pH9.2)；来自Tc发生器的0.5ml TcO4-；0.1ml SnCl2/MDP溶液；(100ml通入氮气的盐水溶液，含10.2mg SnCl2和101mg亚甲基二膦酸)。
对于99mTc-化合物16，溶液活性测定为216MBq，且溶液加热至37℃保持33min。采用SG板，流动相为MeOH/(NH4OAc 0.1M)1∶1，ITLC(快速(Instant)薄层层析)显示原点处RHT(减少的水解Tc)为1％。HPLC分析显示93％的99mTc-化合物16，RCP为92％。
以类似方法制备99mTc-化合物17。测得络合物溶液的活性为203MBq。ITLC得到4％胶体，HPLC分析显示93％的99mTc-化合物17，RCP为89％。
HPLC分析采用Xterra RP18，3.5μm，4.6×150mm柱进行，采用0.06％NH4OH的水性流动相(溶剂A)和乙腈的有机流动相(溶剂B)，流速1ml/min。所用典型梯度如下0-5min(10-30％B)、5-17min(30％B)、17-18min(30-100％B)、18-22min(100％B)和22-24min(100-10％B)。99mTc-化合物16的保留时间为7.6min，而99mTc-化合物17的保留时间为7.5min。
实施例22巴比妥前体亲电放射性碘化的通用方法将新鲜制备的10μL 0.01M过乙酸水溶液(1×10-7mol)加入到硅烷化小瓶中，小瓶包含前体底物(1×10-7mol)适当溶剂的溶液以及200μL0.2M NH4OAc缓冲液(pH＝4)、100μL Na127I(1×10-7mol)和Na123I。反应温和搅拌，产物经HPLC纯化。
权利要求
1.一种成象剂，所述成象剂包含用成象部分在巴比妥酸5位标记的合成巴比妥酸基质金属蛋白酶抑制剂，给予所述标记的合成巴比妥酸基质金属蛋白酶抑制剂至哺乳动物体内后可检测到所述成象部分，所述成象部分选自(i)放射性金属离子；(ii)顺磁性金属离子；(iii)发射γ射线的放射性卤素；(iv)发射正电子的放射性非金属；(v)超极化的NMR-活性核；(vi)适用于体内光成象的指示器；(vii)适用于血管内检测的β-发射体。
2.权利要求1的成象剂，其中所述合成巴比妥酸基质金属蛋白酶抑制剂配体轭合物为式I[{抑制剂}-(A)n]m-[成象部分](I)其中{抑制剂}为所述合成巴比妥酸基质金属蛋白酶抑制剂；-(A)n-为连接基团，其中各A独立为-CR2-、-CR＝CR-、-C≡C-、-CR2CO2-、-CO2CR2-、-NRCO-、-CONR-、-NR(C＝O)NR-、-NR(C＝S)NR-、-SO2NR-、-NRSO2-、-CR2OCR2-、-CR2SCR2-、-CR2NRCR2-、C4-8亚杂环烷基、C4-8亚环烷基、C5-12亚芳基或C3-12亚杂芳基、氨基酸或单分散聚乙二醇(PEG)结构单元；R独立选自H、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4烷氧基烷基或C1-4羟基烷基；n为0-10的整数；和m为1、2或3。
3.权利要求1或2的成象剂，其中所述合成巴比妥酸基质金属蛋白酶抑制剂与配体轭合，并且所述配体与放射性金属离子或顺磁性金属离子形成金属络合物。
4.权利要求3的成象剂，其中所述配体为螯合剂。
5.权利要求3或4的成象剂，其中所述放射性金属离子为γ放射体或正电子放射体。
6.权利要求5的成象剂，其中所述放射性金属离子为99mTc、111In、64Cu、67Cu、67Ga或68Ga。
7.权利要求1或2的成象剂，其中所述发射γ的放射性卤素成象部分为123I。
8.权利要求1或2的成象剂，其中所述发射正电子的放射性非金属选自18F、11C或13N。
9.权利要求1-8的成象剂，其中所述合成巴比妥酸基质金属蛋白酶抑制剂为式IV 其中R1为R″或Z基团；R2为R″、Y或-NR4R5，其中R4为H或R″基团，R5为H、C2-14酰基、C2-10氨基烷基或(N-C2-14酰基)C2-10氨基烷基或R″基团，或R4和R5与它们连接的N原子一起形成任选(N-C2-14)酰基化的C2-8环状氨基亚烷基环；R″独立为C1-14烷基、C3-8环烷基、C2-14烯基、C1-14氟代烷基、C1-14全氟代烷基、C6-14芳基、C2-14杂芳基或C7-16烷基芳基；Z为式-A1O[A2O]PR3的基团，其中p为0或1，并且A1和A2独立为C1-10亚烷基、C3-8亚环烷基、C1-10全氟代亚烷基、C6-10亚芳基或C2-10亚杂芳基，并且R3为R基团，其中R独立选自H、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4烷氧基烷基或C1-4羟基烷基；Y为下式基团 其中E为CR2、O、S或NR6；并且R6为C2-14酰基、R″或Z基团。
10.权利要求9的成象剂，其中R2为Y或-NR4R5。
11.权利要求9或10的成象剂，其中所述成象部分连接R2取代基。
12.权利要求9-11的成象剂，所述成象剂为式V 其中E为CHR或NR6，并且R1为C6-14正烷基或C6-14芳基。
13.权利要求12的成象剂，其中E为NR6，并且R6为C2-14酰基；-(CH2)dOH，其中d为2、3、4或5；或-C6H4X，其中X为H、C1-4烷基、Hal、OR、NR2、NO2或SO2NR7R8，其中R7和R8独立为R基团，并且R如权利要求9中定义。
14.权利要求12或13的成象剂，其中R1为正辛基、正癸基、联苯基、C6H5X或-C6H4-O-C6H4X，其中X如权利要求13中定义。
15.一种药用组合物，所述药用组合物包含权利要求1-14的成象剂以及生物相容载体，其形式适用于哺乳动物给药。
16.一种放射药用组合物，所述组合物包含权利要求1-14的其中所述成象部分为放射性的成象剂以及生物相容载体，其形式适用于哺乳动物给药。
17.权利要求16的放射药用组合物，其中所述成象部分包含放射性金属离子。
18.权利要求16的放射药用组合物，其中所述成象部分包含发射正电子的放射性非金属或发射γ射线的放射性卤素。
19.一种带有配体的合成巴比妥酸基质金属蛋白酶抑制剂的轭合物，其中所述巴比妥酸包含5-位取代基，并且所述5-位取代基包含能与放射性或顺磁性金属离子形成金属络合物的配体。
20.权利要求19的轭合物，所述轭合物为下式Ib[{抑制剂}-(A)n]m-[配体](Ib)，其中{抑制剂}、A、n和m如权利要求2中定义。
21.权利要求19或20的轭合物，其中所述合成巴比妥酸基质金属蛋白酶抑制剂为权利要求9-14的式IV或式V化合物。
22.权利要求19-21的轭合物，其中所述配体为螯合剂。
23.权利要求22的轭合物，其中所述螯合剂具有二胺二肟、N2S2或N3S给体组件。
24.一种用于制备权利要求18的放射药用组合物的前体，所述前体包含权利要求1-14的巴比妥酸基质金属蛋白酶抑制剂的非放射性衍生物，其中所述非放射性衍生物能与发射正电子的放射性非金属或发射γ射线的放射性卤素源反应，得到所需的放射药物。
25.权利要求24的前体，其中所述发射正电子的放射性非金属或发射γ射线的放射性卤素源选自(i)卤离子；(ii)F+或I+；或(iii)烷化剂，该烷化剂选自烷基或氟代烷基卤化物、甲苯磺酸酯、三氟甲磺酸酯或甲磺酸酯；(iv)HS(CH2)318F。
26.权利要求24和25的前体，其中所述非放射性衍生物选自(i)有机金属衍生物，例如三烷基锡烷或三烷基硅烷；(ii)用于亲核取代的衍生物，该衍生物含烷基或芳基碘化物或溴化物、甲苯磺酸烷基酯或甲磺酸烷基酯；(iii)含活化用于亲核或亲电取代的芳环衍生物；(iv)含易进行烷基化官能团的衍生物；(v)与烷基硫醇进行烷基化得到硫醚的衍生物。
27.一种用于制备权利要求17的放射药用组合物的试剂盒，所述试剂盒包含权利要求19-23的轭合物。
28.权利要求27的试剂盒，其中所述放射性金属离子为99mTc，并且所述试剂盒还包含生物相容还原剂。
29.一种用于制备权利要求18的放射药用组合物的试剂盒，所述试剂盒包含权利要求24-26的前体。
30.权利要求29的试剂盒，其中所述前体结合至固相。
31.权利要求1-14的成象剂用于动脉粥样硬化诊断成象的用途。
32.权利要求1-14的成象剂用于不稳定性斑块诊断成象的用途。
33.权利要求1-14的成象剂用于动脉粥样硬化血管内检测的用途。
全文摘要
本发明涉及用于体内成象的诊断成象剂。所述成象剂包含用适用于体内诊断成象的成象部分在5－位标记的合成巴比妥酸衍生物。本发明也提供包含所述成象剂的药物和放射药用组合物，以及制备放射药物的试剂盒。本发明也描述了巴比妥酸衍生物的螯合剂轭合物，其适用于包含放射性或顺磁性金属离子的成象剂的制备。该成象剂用于包括动脉粥样硬化的各种疾病的体内诊断成象。
文档编号A61K51/04GK1720050SQ200380105207
公开日2006年1月11日 申请日期2003年10月8日 优先权日2002年10月8日
发明者K·科普卡, H·－J·布雷霍尔茨, S·瓦纳, M·谢菲尔斯, B·勒夫考, B·吉贝尔特, D·怀恩 申请人:阿默沙姆公开有限公司