专利名称：环孢素a固体分散体及其制备方法
技术领域：
本发明属化学制药领域，具体涉及一种化合物环孢素A固体分散体及其制备方法。
背景技术：
环孢素A(英文名Cyclosporine A，Cyclosporin A)其化学名称为环[[(E)-(2S，3R，4R)-3-羟基-4-甲基-2-(甲氨基)-6-辛烯酰]-L-2氨基丁酰-N-甲基甘氨酰-N-甲基-L-亮氨酰-L-缬氨酰-N-甲基-L-亮氨酰-L-丙氨酰-D-丙氨酰-N-甲基-L-亮氨酰-N-甲基-L-亮氨酰-N-甲基-L-缬氨酰]，分子式C62H111N11O12；分子量1202.63，具有下述化学结构， 环孢素A是1772年从真菌(Tolypocladium Inflatum Gams)中提取出来的一种亲脂性环状多肽，由11个氨基酸组成，难溶于水，熔点148-151℃。1976年发现环孢素A具有免疫抑制作用，是一个强效的免疫抑制剂，1978年开始用于肾移植病人，20世纪80年代以来被广泛地应用于临床器官移植，用以提高移植后的存活率，已经成为当前最主要的免疫抑制剂之一。
环孢素A不但是器官移植后的常用药物，广泛用于防治实质性器官和骨髓等同种异体移植时的排斥反应，而且也逐渐应用于其它疾病的治疗，如自身免疫性疾病、皮肤科疾病、自身免疫性血液病、哮喘及多发性骨髓瘤等。目前临床上的主要剂型有软胶囊剂(微乳，新山地明)、口服液(油溶液)和注射剂。
环孢素A在水中溶解度极小，几乎不溶解，生物利用度低，无法由原料药直接制备成合格的口服制剂。
发明内容
本发明的目的是提供一种环孢素A固体分散体，具体涉及一种溶出快、生物利用度高的环孢素A固体分散体及其制备方法。本发明具有溶出快、生物利用度高的优点，便于制药企业生产多种固体剂型的环孢素A。
本发明采用环孢素A(广东省台山市化学制药有限公司)为活性成分，加入载体材料，包括聚维酮、聚乙二醇类、泊洛沙姆、Gelucire44/14和Gelucire50/13、聚氧乙烯硬脂酸酯类、甘露醇、微晶纤维素和环糊精及其衍生物，分别采用溶剂法、溶剂-熔融法、研磨法、喷雾干燥法、冷冻干燥法制备环孢素A固体分散体。
本发明的环孢素A固体分散体可分别按下述方法制备1、溶剂法亦称共沉淀法取载体材料与环孢素A，投料比为4∶1-20∶1，加入有机溶剂无水乙醇、氯仿、二氯甲烷、95％乙醇、丙酮或甲醇，搅拌，使溶解；于旋转蒸发仪上蒸去大部分溶剂，水浴温度为25-65℃，按投料量和水浴温度确定蒸发时间为0.1-4h；之后，置真空干燥箱中干燥10-30h，温度可在室温至60℃之间；干燥物经研磨后，过60-120目筛得粉末，即得本发明固体分散体。
所得固体分散体可制成片剂、胶囊剂、颗粒剂、栓剂或滴丸剂。其中制片剂和胶囊剂，可加入助流剂和润滑剂，包括滑石粉、聚乙二醇、十二烷基硫酸镁、硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、微粉硅胶或它们的混合物，用量为总处方量的0.1-5％；可加入崩解剂包括淀粉5-20％、羧甲基淀粉钠1-6％、交联聚维酮0.5-6％或低取代羟丙基纤维素2-5％；可加入其他辅料，包括预胶化淀粉、乳糖、微晶纤维素、淀粉、糊精或它们的混合物，用量占处方量的15-60％；载体材料可选择聚乙二醇、泊洛沙姆、聚维酮、聚氧乙烯硬脂酸酯类和甘露醇。
2、溶剂-熔融法取载体材料，于50-90℃水浴中加热使其熔融，滴加并搅拌用有机溶剂如无水乙醇、甲醇、95％乙醇、丙酮、氯仿或乙醚溶解的环孢素A，根据投料量继续搅拌30-150分钟，将熔融物倒入培养皿或不锈钢平板上平铺，-20℃冷冻2-8小时；置真空干燥箱干燥10-30小时，温度可在室温至65℃之间；或将冷冻物置于干燥器，室温放置1-5天；干燥物粉碎，过60-120目筛，即得本发明固体分散体。
所得固体分散体可制成片剂、颗粒剂、胶囊剂、栓剂或滴丸剂。其中制片剂和胶囊剂，可加入助流剂和润滑剂，包括滑石粉、十二烷基硫酸镁、硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、微粉硅胶或它们的混合物，用量为总处方量的0.1-5％；可加崩解剂，包括淀粉5-20％、羧甲基淀粉钠1-6％、交联聚维酮0.5-6％或低取代羟丙基纤维素2-5％；可加其他辅料，包括预胶化淀粉、乳糖、微晶纤维素、淀粉、糊精或它们的混合物，用量占处方量的15-60％；载体材料可选择聚乙二醇、泊洛沙姆、聚氧乙烯(40)硬脂酸酯、聚氧乙烯(50)硬脂酸酯、Gelucire44/14和Gelucire50/13，或其中任意两种或三种载体混合使用。
3、研磨法取载体材料与环孢素A，混匀，置研钵中研磨，转速100-600rpm，研磨时间10-60min。取出，过80-100目筛，即得本发明固体分散体。
所得固体分散体可直接压片、制备胶囊剂或湿法制颗粒压片。其中载体材料与药物的投料质量比为4∶1-20∶1，所述载体材料可选用聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、艾维素PH102、艾维素PH101、艾维素PH301、艾维素PH302、艾维素PH M06、艾维素PH M15、艾维素PH M25、艾维素KG801、艾维素RC A591NF、环糊精及其衍生物、聚维酮类和乳糖。
4、喷雾干燥法取载体材料与环孢素A，混匀，加入60-90％乙醇，搅拌使溶解。喷雾干燥，得本发明固体分散体。所得固体分散体可进一步制成片剂或胶囊剂。
其中载体材料与药物的投料重量比为4∶1-20∶1，所述载体材料可选用聚维酮、聚乙二醇6000、聚乙二醇4000、环糊精及其衍生物、聚氧乙烯硬脂酸酯类、乳糖和甘露醇。
5、冷冻干燥法取载体材料，加蒸馏水，搅拌，使溶解，将此溶液与药物环孢素A共置研钵中，研磨，转速100-600rpm，研磨时间为20-70min。冷冻干燥，冻干时间为15-48h。取出，研磨，过60-100目筛，即得本发明固体分散体。
所得固体分散体可装胶囊、压片。其中，载体材料与药物的投料重量比为4∶1-20∶1，蒸馏水量为载体材料重的10-100倍。所述载体材料可选用聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、聚氧乙烯硬脂酸酯类、聚维酮类、乳糖和甘露醇。
本发明环孢素A固体分散体能增大药物的溶解度，加快药物的溶出速度。药物在水中的溶解度和在溶出介质中60分钟累积溶出百分率分别比原料药物提高5-300倍和3-15倍。经大鼠灌胃给药，体内药动学实验结果表明该发明与新山地明(Neoral)生物等效。
本发明采用差示扫描量热分析(DSC)、X-射线衍射分析对所制备的各类固体分散体进行考察。DSC结果显示，所述固体分散体中均未观察到药物的熔点峰，提示不宜采用DSC方法对此固体分散体进行鉴定。X-射线衍射结果表明环孢素A原料药在5-30°间有强衍射峰，制成固体分散体后，除了以泊洛沙姆188为载体制备的固体分散体外(载体与药物之比为8∶1)，药物的结晶衍射峰消失，表明药物高度分散在载体材料中，以分子形式或无定型状态分散于其中。
本发明采用体外溶出度实验测定药物的溶出情况，结果表明，其在体外溶出情况良好，较原料药有明显改善。结果如下1、体外溶出度实验按中国药典2000年版附录中第二法或第三法(小杯法)测定药物体外溶出度。介质为0.01％W/V聚山梨酯80、0.1N HCl/乙腈(7/3，体积比)、0.1％的十二烷基硫酸钠(SDS)水溶液、pH7.4磷酸盐缓冲液或蒸馏水，转速100rpm，温度37±0.5℃。
2、体外溶出度实验以环孢素A原料药为对照，测定本发明环孢素A固体分散体在体外的溶出情况。结果表明本发明固体分散体60分钟体外累积溶出百分率为55.79-100.33％(标示量)，较原料药物有显著性提高。其中以泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、聚氧乙烯(40)硬脂酸酯、Gelucire 50/13和Gelucire 44/14为载体制备的固体分散体，溶出速率提高尤为显著。
图1是本发明固体分散体与Neoral大鼠体内血药浓度-时间曲线。
具体实施例方式
实施例1取1g环孢素A和8g聚氧乙烯(40)硬脂酸酯置烧杯中，加入15ml无水乙醇，搅拌使完全溶解。在40℃水浴中，用旋转蒸发仪蒸发25分钟，将溶剂蒸干。转移至真空干燥箱中继续干燥24h(室温)，取出，研磨，过80目筛，即得。该发明固体分散体60min体外累积溶出百分率为94.40±1.51％(n＝6)。
实施例2取1g环孢素A和8g聚维酮K-29/32置烧杯中，加入20ml无水乙醇，搅拌使完全溶解。在40℃水浴中，用旋转蒸发仪蒸发25分钟，将溶剂蒸干。转移至真空干燥箱中继续干燥24h(50℃)，取出，研磨，过80目筛，即得。该发明固体分散体60min体外累积溶出百分率为55.79±11.92％(n＝6)。
实施例3取1g环孢素A和10g泊洛沙姆407置烧杯中，加入25ml无水乙醇，搅拌使完全溶解。在40℃水浴中，用旋转蒸发仪蒸发25分钟，将溶剂蒸干。转移至真空干燥箱中继续干燥24h(40℃)，取出，研磨，过80目筛，即得。该发明固体分散体60min体外累积溶出百分率为91.83±5.19％(n＝6)。
实施例4取1g环孢素A和12g泊洛沙姆407置烧杯中，加入25ml无水乙醇，搅拌使完全溶解。在40℃水浴中，用旋转蒸发仪蒸发25分钟，将溶剂蒸干。转移至真空干燥箱中继续干燥24h(40℃)，取出，研磨，过80目筛，即得。该发明固体分散体60min体外累积溶出百分率为87.67±7.40％(n＝6)。
实施例5取10g泊洛沙姆188于烧杯中，置70℃水浴上，待完全熔融，边搅拌边加入用4ml无水乙醇溶解的药物1g，加毕，继续搅拌至溶剂挥去后，迅速倒入培养皿中平铺，于冰箱冷冻层放置4h，取出置真空干燥器中放置24h(35℃)，待脆化，取出粉碎后过80目筛，即得。该发明固体分散体60min体外累积溶出百分率为90.40±1.06％(n＝6)。
实施例6取11g泊洛沙姆188于烧杯中，置70℃水浴上，待完全熔融，边搅拌边加入用4ml无水乙醇溶解的药物1g，加毕，继续搅拌至溶剂挥去后，迅速倒入培养皿中平铺，于冰箱冷冻层放置4h，取出置真空干燥器中放置24h(35℃)，待脆化，取出粉碎后过80目筛，即得。该发明固体分散体60min体外累积溶出百分率为92.14±1.58％(n＝6)。
实施例7取12g泊洛沙姆188于烧杯中，置70℃水浴上，待完全熔融，边搅拌边加入用4ml无水乙醇溶解的药物1g，加毕，继续搅拌至溶剂挥去后，迅速倒入培养皿中平铺，于冰箱冷冻层放置4h，取出置真空干燥器中放置24h(35℃)，待脆化，取出粉碎后过80目筛，即得。该发明固体分散体60min体外累积溶出百分率为99.32±0.34％(n＝6)。
实施例8取8g泊洛沙姆407，于烧杯中，置于90℃水浴上，待完全熔融，边搅拌边加入用4ml无水乙醇溶解的药物1g，加毕，继续搅拌至溶剂挥去后，迅速倒入培养皿中平铺，于冰箱冷冻层放置4h，取出置真空干燥器中放置24h(40℃)，待脆化，取出粉碎后过80目筛，即得。该发明固体分散体60min体外累积溶出百分率为95.14±3.77％(n＝6)。
实施例9取5g泊洛沙姆407，于烧杯中，置于90℃水浴上，待完全熔融，边搅拌边加入用4ml无水乙醇溶解的药物1g，加毕，继续搅拌至溶剂挥去后，迅速倒入培养皿中平铺，于冰箱冷冻层放置4h，取出置真空干燥器中放置24h(40℃)，待脆化，取出粉碎后过80目筛，即得。该发明固体分散体60min体外累积溶出百分率为100.33±5.99％(n＝6)。
实施例10取6g聚氧乙烯(40)硬脂酸酯于烧杯中，置于70℃水浴上，待完全熔融，边搅拌边加入用4ml无水乙醇溶解的药物1g，加毕，继续搅拌至溶剂挥去后，迅速倒入培养皿中平铺，于冰箱冷冻层放置4h，取出置真空干燥器中放置24h，取出粉碎后过80目筛，即得。该发明固体分散体60min体外累积溶出百分率为87.28±4.19％(n＝6)。
实施例11
取7g聚氧乙烯(40)硬脂酸酯于烧杯中，置于70℃水浴上，待完全熔融，边搅拌边加入用4ml无水乙醇溶解的药物1g，加毕，继续搅拌至溶剂挥去后，迅速倒入培养皿中平铺，于冰箱冷冻层放置4h，取出置真空干燥器中放置24h，取出粉碎后过80目筛，即得。该发明固体分散体60min体外累积溶出百分率为93.34±4.28％(n＝6)。
实施例12取5g Gelucire 50/13于烧杯中，置70℃水浴上，待完全熔融，加入3g微晶纤维素(艾维素PH302)，搅匀。边搅拌边加入用4ml无水乙醇溶解的药物1g，加毕，继续搅拌至溶剂挥去后，迅速倒入培养皿中平铺，于冰箱冷冻层放置4h，取出置真空干燥器中放置24h(室温)，待脆化，取出粉碎后过80目筛，即得。该发明固体分散体60min体外累积溶出百分率为80.12±5.22％(n＝6)。
实施例13取Gelucire 50/13和Gelucire 44/14各2.5g于烧杯中，置70℃水浴上，待完全熔融，加入3g微晶纤维素(艾维素PH302)，搅匀。边搅拌边加入用4ml无水乙醇溶解的药物1g，加毕，继续搅拌至溶剂挥去后，迅速倒入培养皿中平铺，于冰箱冷冻层放置4h，取出置真空干燥器中放置24h(室温)，待脆化，取出粉碎后过80目筛，即得。该发明固体分散体60min体外累积溶出百分率为85.34±4.12％(n＝6)。
实施例14取0.5g环孢素A和6g微晶纤维素(艾维素PH302)，共置研钵中，研磨，转速为200rpm，研磨时间为3h，过100目筛，即得。该发明固体分散体60min体外累积溶出百分率为72.96±5.09％(n＝6)。
实施例15取0.5g过80目筛的环孢素A，以90％乙醇50ml溶解，过滤，得药物组。取5g聚维酮K29/32，以75％乙醇500ml溶解，过滤，得载体材料溶液。将药物溶液与载体溶液在搅拌下混匀，用电热喷雾干燥器进行喷雾干燥。进风温度为60℃，加样速度20ml/min。制得干燥疏松的粉末状固体分散物。该发明固体分散体60min体外累积溶出百分率为71.46±8.8％(n＝6)。
实施例16
取0.25g环孢素A和5g聚维酮K29/32共置研钵中，研磨，转速300rpm，研磨时间3g，过100目筛，即得。该发明固体分散体60min体外累积溶出百分率为83.14±3.98％(n＝6)。
实施例17取1.5g聚乙二醇6000，加入蒸馏水150ml，搅拌使完全溶解，将此溶液与0.125g环孢素A共置于研钵中，研磨，转速200rpm，研磨时间80min。将药液转移至500ml圆底烧瓶中，预冻，冷冻干燥52h。取出，粉碎，过80目筛，即得。该发明固体分散体60min体外累积溶出百分率为67.77±2.52％(n＝6)。
实施例18取1.5g聚维酮K29/32，加入蒸馏水150ml，搅拌使完全溶解，将此溶液与0.125g环孢素A共置于研钵中，研磨，转速200rpm，研磨时间80min。将药液转移至500ml圆底烧瓶中，预冻，冷冻干燥50h。取出，粉碎，过80目筛，即得。该发明固体分散体60min体外累积溶出百分率为67.31±8.70％(n＝6)。
权利要求
1.环孢素A固体分散体，其特征是含有活性成分环孢素A和载体材料，所述载体材料包括聚维酮、聚乙二醇类、泊洛沙姆、Gelucire44/14和Gelucire50/13、聚氧乙烯硬脂酸酯类、甘露醇、微晶纤维素和环糊精及其衍生物。
2.按权利要求1所述的环孢素A固体分散体，其特征是所述的载体材料与药物的重量比为4∶1-20∶1。
3.按权利要求1所述的环孢素A固体分散体的制备方法，其特征是通过溶剂法或溶剂-熔融法或研磨法或喷雾干燥法或冷冻干燥法制备
4.按权利要求3的制备方法，其中溶剂法，是通过下述步骤，取载体材料与环孢素A，投料比为4∶1-20∶1，加入有机溶剂搅拌，使溶解；旋转蒸去溶剂，水浴25-65℃，蒸发0.1-4h，真空干燥10-30h，温度为室温至60℃，干燥物研磨，过60-120目筛得粉末。
5.按权利要求4的制备方法，其中所述有机溶剂为无水乙醇、氯仿、二氯甲烷、95％乙醇、丙酮和甲醇，所述载体材料是聚维酮、聚乙二醇类、泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、聚氧乙烯硬脂酸酯类。
6.按权利要求3的制备方法，其中溶剂-熔融法，是通过下述步骤，取载体材料，50-90℃水浴加热使其熔融，滴加环孢素A液，搅拌30-150分钟，将熔融物倒出平铺，置-20℃冷冻2-8小时；真空干燥10-30小时，温度为室温至60℃之间；或将冷冻物置干燥器中，室温下放置1-5天；粉碎干燥物，过60-120目筛。
7.按权利要求6的制备方法，其中所述载体材料是聚维酮、聚乙二醇类、泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、Gelucire 44/14、Gelucire 50/13和聚氧乙烯硬脂酸酯类。
8.按权利要求3的制备方法，其中研磨法，是通过下述步骤，取载体材料与环孢素A，混匀，共置研钵中，研磨，转速100-600rpm，研磨时间10-60min。取出，过80-100目筛。
9.按权利要求8的制备方法，其中所述载体材料是艾维素PH101、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、艾维素PH102、艾维素PH301、艾维素PH302、艾维素PH M06、艾维素PH M15、艾维素PH M25、艾维素KG801、艾维素RC A591NF、环糊精及其衍生物、聚维酮类和乳糖。
10.按权利要求3的制备方法，其中喷雾干燥法，是通过下述步骤，取载体材料与环孢素A，混匀，加入60-90％乙醇，搅拌使溶解，喷雾干燥。
11.按权利要求10的制备方法，其中所述载体材料是聚维酮、聚乙二醇类、聚氧乙烯硬脂酸酯类、环糊精及其衍生物、乳糖和甘露醇。
12.按权利要求3的制备方法，其中冷冻干燥法，是通过下述步骤，取载体材料，加入蒸馏水，搅拌，使溶解，将溶液与药物环孢素A共置于研钵中，研磨，转速100-600rpm，研磨20-70min，冷冻干燥，15-48h，取出，再研磨，过60-100目筛。
13.按权利要求12的制备方法，其中所述载体材料是聚乙二醇类、泊洛沙姆407、环糊精及其衍生物、聚维酮类、乳糖和甘露醇。
14.按权利要求1所述的环孢素A固体分散体，可制成片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂或栓剂。
15.按权利要求14所述的环孢素A固体分散体，其中制片剂和胶囊剂，可加入助流剂和润滑剂，包括滑石粉、聚乙二醇、十二烷基硫酸镁、硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、微粉硅胶或它们的混合物，用量为总处方量的0.1-5％；可加入崩解剂，包括淀粉5-20％、羧甲基淀粉钠1-6％、交联聚维酮0.5-6％或低取代羟丙基纤维素2-5％；可加入其他辅料，包括预胶化淀粉、乳糖、微晶纤维素、淀粉、糊精或它们的混合物，用量占处方量的15-60％。
全文摘要
本发明属化学制药领域，具体涉及一种免疫抑制剂环孢素A固体分散体及其制备方法。本发明采用环孢素A为药物活性成分，加入载体材料，分别采用溶剂法、溶剂—熔融法、研磨法、喷雾干燥法、冷冻干燥法制备环孢素A固体分散体，固体分散体可进一步制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、栓剂和滴丸剂。本发明能增大药物溶解度和溶出速度，药物在水中的溶解度和在溶出介质中60分钟累积溶出百分率分别比原料药物提高5－300倍和3－15倍，能提高药物在体内的吸收。
文档编号A61K38/12GK1559606SQ20041001644
公开日2005年1月5日 申请日期2004年2月19日 优先权日2004年2月19日
发明者柳晨, 裴元英, 林富源, 冯明发, 柳 晨 申请人:复旦大学, 台山市化学制药有限公司