专利名称：马卡纳米脂质体及其制备方法
技术领域：
本发明属于纳米医学领域，特别涉及一种将植物性药物马卡加工成物理性质稳定的纳米脂质体的方法。
背景技术：
植物性药物马卡是从南美安第斯高山地区盛产一种被称为安第斯人参的名贵药材马卡中，对植物生理活性成分进行提取得到的棕黄色难溶于水的油状物。马卡可使体力增强、精力充沛、消除焦虑、提高性功能。最近，马卡频繁出现于因特网或国内外的报刊杂志上，说明其保健作用在全球范围内受到青睐。但是针对新药开发中，其主要成分(马卡烯、马卡酰胺和脂肪酸等)的难溶性，以及由此引起的生物利用度问题成为越来越严重的技术瓶颈。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种工艺简单、药物利用率高、物理性质稳定，并能显著提高马卡主要成分水溶性的纳米脂质体及其制备方法。
本发明的马卡纳米脂质体，其表面为磷脂双分子层，双分子层外部的亲水基团形成一个亲水的帽冠，双分子层内部的亲水基团构成一个内水相，双分子层间的疏水基团产生一个疏水区域，因而一个纳米脂质体可以同时包埋疏水性成分和亲水性成分；马卡中主要成分是疏水性的，其以纳米级包埋于纳米脂质体的磷脂双层间，而马卡的亲水性成分也载入内水相。其制备方法为以生物相容性较好的大豆磷脂为载体，以葡萄糖液作为分散介质，采用旋转薄膜蒸发法制备了包载难溶植物性药物马卡的马卡纳米脂质体。
其具体步骤如下①按如下质量百分比配比下列原料大豆磷脂50％-80％；胆固醇15％-45％；马卡2％-30％；②将上述配比的大豆磷脂、胆固醇、马卡置于圆底烧瓶中，加入体积比为5∶1的氯仿与乙醇混合液溶解；③旋转蒸发仪上减压蒸发除去氯仿和乙醇，使马卡等在瓶壁形成均匀的薄膜；④加入葡萄糖液作为分散介质，使大豆磷脂的总质量百分比少于2％，得脂质体初混液；⑤在冰水浴条件下探针式超声5-20min得马卡纳米脂质体胶体溶液。
采用本发明的马卡纳米脂质体及其制备方法具有以下特点1、该制备方法简便易行，制备过程中药物损失量少；原材料大豆磷脂有良好的生物相容性，可生物降解，材料来源广，成本低；2、针对植物性药物的成分的复杂性，纳米脂质体中可以同时包载亲水和疏水性药物成分；药物中的疏水性成分以纳米级包埋于纳米脂质体的磷脂双层间，能够增强马卡中疏水性成分的水溶性；3、马卡纳米脂质体的物理稳定性较好，经过一段时间保存后未见分层、凝絮，粒径大小变化不大；4、马卡被大豆磷脂包埋成为纳米级微粒，使得药物在体内缓慢释放，同时可以大大提高药物的机体吸收率和生物利用度。
图1为马卡纳米脂质体结构示意图。
图中1 马卡的疏水成分 2 马卡的亲水成分3 磷脂双分子层 4 亲水基团5 疏水基团图2为纳米脂质体的原子力形貌表征图。
图3为马卡纳米脂质体的数量粒径分布图。
图4为马卡纳米脂质体混悬液的Zeta电位图。
图5为被脂质体包被前后溶液中的马卡的溶解度对比图。
图中 6 为马卡纳米脂质体通过0.45μm微孔滤膜前相关的马卡浓度7 为马卡纳米脂质体通过0.45μm微孔滤膜后相关的马卡浓度8 为饱和的马卡溶液通过0.45μm微孔滤膜后相关的马卡浓度图6为马卡纳米脂质体储存一个月中的平均粒径变化图。
图7为马卡纳米脂质体储存一个月前后的粒径数量分布对比图。
图中 9新制的马卡纳米脂质体10储存1个月后的马卡纳米脂质体
具体实施例方式实施例1称取马卡30mg、胆固醇50mg、大豆磷脂200mg置于圆底烧瓶中，加入体积比为5∶1的氯仿与乙醇混合液30ml溶解，于旋转蒸发仪上减压蒸发除去氯仿和乙醇。加入60g/L葡萄糖液10ml作为分散介质得脂质体初混液，冰水浴超声10min，得到20-220nm的脂质体。
所制备的马卡纳米脂质体的分析结果如图2-7所示。
实施例2称取马卡5mg、胆固醇50mg、大豆磷脂200mg置于圆底烧瓶中，加入体积比为5∶1的氯仿与乙醇混合液30ml溶解，于旋转蒸发仪上减压蒸发除去氯仿和乙醇。加入60g/L葡萄糖液10ml作为分散介质得脂质体初混液，冰水浴超声10min，得到20-220nm的脂质体。
实施例3称取马卡75mg、胆固醇50mg、大豆磷脂200mg置于圆底烧瓶中，加入体积比为5∶1的氯仿与乙醇混合液30ml溶解，于旋转蒸发仪上减压蒸发除去氯仿和乙醇。加入60g/L葡萄糖液10ml作为分散介质得脂质体初混液，冰水浴超声10min，得到220-220nm的脂质体。
实施例4称取马卡150mg、胆固醇250mg、大豆磷脂1000mg置于圆底烧瓶中，加入体积比为5∶1的氯仿与乙醇混合液30ml溶解，于旋转蒸发仪上减压蒸发除去氯仿和乙醇。加入60g/L葡萄糖液50ml作为分散介质得脂质体初混液，冰水浴超声20min，得到20-220nm的脂质体。
上述实例所制备的马卡纳米脂质体其结构示意图见图1。马卡纳米脂质体材料其表面为磷脂双分子层3，磷脂双分子层3外部的亲水基团4形成一个亲水的帽冠，磷脂双分子层3内部的亲水基团4构成一个内水相，双分子层间的疏水基团5产生一个疏水区域，因此一个纳米脂质体可以同时包埋疏水成分和亲水成分；马卡中主要的成分呈疏水性，其疏水成分1以纳米级包埋于纳米脂质体的磷脂双分子层之间，而马卡的亲水成分2也载入内水相。
马卡纳米脂质体的形貌通过原子力扫描显微镜表征，结果见图2，本发明制备的马卡纳米脂质体呈完整的球形，分散性好，粒径较均匀。马卡纳米脂质体粒径分布与Zeta电位利用Malvren Zetasizer 3000HS分析仪测量，结果见图3、4。纳米颗粒的平均粒径为181nm，小于97nm占99％，其中35~55nm占71％。马卡纳米脂质体混悬液的Zeta电位为-39.1±1.6mV，纳米颗粒的Zeta电位的负电荷很小，颗粒之间有足够强的排斥力抑制颗粒的团聚，从而保持溶液稳定。
马卡与马卡纳米脂质体的相关浓度对比将过量的马卡和马卡纳米脂质体分别通过0.45μm微孔滤膜，除去未溶的物质，加入甲醇，溶解纳米脂质体。然后以λex＝448nm为激发波长，测量过滤后的马卡溶液和过滤前、后的马卡纳米脂质体在发射波长为508nm的荧光值，分别记为F1、F2、F3。将F2、F3扣除空白纳米脂质体相应的荧光值(F0)得F2’、F3’。经归一化处理，将F1、F2’、F3’与F2’比较即得图5，饱和马卡溶液中只有1.5％的马卡通过0.45μm的微孔滤膜，但经过将马卡包埋入纳米脂质体后，95％的马卡能够通过0.45μm的微孔滤膜。说明被脂质体包被后，马卡的疏水成分溶解度大大提高。
纳米脂质体的稳定性考察将制备的马卡纳米脂质体于4℃密封储存1个月。每7天观察马卡脂质体纳米的外观形态，并通过Malvren Zetasizer 3000HS分析仪检测平均粒径和粒度分布，见图6、7。纳米脂质体储存一个月以后，平均粒径从181nm增大到214nm，而新制的纳米颗粒的粒径分布最高峰为40nm，一个月后纳米颗粒的粒径分布最高峰略微偏移至49nm。而且马卡纳米脂质体储存一个月后未见分层、凝絮，外观和色泽均无明显变化，说明马卡纳米脂质体能在较长时间内保持良好的物理稳定性。
权利要求
1.一种马卡纳米脂质体，其特征为其表面为磷脂双分子层，双分子层外部的亲水基团形成一个亲水的帽冠，双分子层内部的亲水基团构成一个内水相，双分子层间的疏水基团产生一个疏水区域，因而一个纳米脂质体可以同时包埋疏水性成分和亲水性成分；马卡中主要成分是疏水性的，其以纳米级包埋于纳米脂质体的磷脂双层间，而马卡的亲水性成分也载入内水相。
2.一种如权利要求1所述的马卡纳米脂质体的制备方法，其特征在于以生物相容性较好的大豆磷脂为载体，以葡萄糖液作为分散介质，采用旋转薄膜蒸发法制备了包载难溶植物性药物马卡的马卡纳米脂质体。
3.根据权利要求2所述的马卡纳米脂质体的制备方法，其特征在于具体步骤为①按如下质量百分比配比下列原料大豆磷脂50％-80％；胆固醇15％-45％；马卡2％-30％；②将上述配比的大豆磷脂、胆固醇、马卡置于圆底烧瓶中，加入体积比为5∶1的氯仿与乙醇混合液溶解；③旋转蒸发仪上减压蒸发除去氯仿和乙醇，使马卡等在瓶壁形成均匀的薄膜；④加入葡萄糖液作为分散介质，使大豆磷脂的总质量百分比少于2％，得脂质体初混液；⑤在冰水浴条件下探针式超声5-20min可得马卡纳米脂质体胶体溶液。
全文摘要
本发明公开了一种马卡纳米脂质体及其制备方法，旨在提供一种工艺简单、药物利用率高、物理性质稳定，并能显著提高马卡主要成分水溶性的纳米脂质体及其制备方法。马卡纳米脂质体的特征为其表面为磷脂双分子层，双分子层外部的亲水基团形成一个亲水的帽冠，双分子层内部的亲水基团构成一内水相，双分子层间的疏水基团产生一疏水区域，因而一个纳米脂质体可以同时包埋疏水性成分和亲水性成分；马卡中主要成分是疏水性的，其以纳米级包埋于纳米脂质体的磷脂双层间，而马卡的亲水性成分也载入内水相。其制备方法是以生物相容性较好的大豆磷脂为载体，以葡萄糖液作为分散介质，采用旋转薄膜蒸发法制备包载难溶植物性药物马卡的马卡纳米脂质体。
文档编号A61K9/127GK1615965SQ20041004679
公开日2005年5月18日 申请日期2004年9月24日 优先权日2004年9月24日
发明者王柯敏, 谭蔚泓, 郑明彬, 吴萍, 龚萍, 何晓晓 申请人:湖南大学