专利名称：干扰素－人参二醇皂甙缓释片剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及重组人α干扰素—人参二醇皂甙片剂的配方，生产工艺及适应症。
背景技术：
干扰素是具有多种生物活性的多肽，根据其结构不同，可分为α型、β型、γ型、ω型等，它主要是作用于机体细胞，使细胞产生各种抗病毒蛋白，抑制病毒繁殖，从而达到抗病毒作用。
人参二醇皂甙是人参皂甙的一个成份，它含有Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Rg3等多种皂甙单位。目前发现人参二醇皂甙的生理活性主要有抗休克和抗应激效应；对受损细胞有保护作用；能改善微循环，防止血小板聚集；具有激活SOD，减少过氧化脂质，从而保护细胞与亚细胞结构的作用。
在临床上，疾病的发生、发展有一定的规律，SARS作为一种新发现的传染病，其在机体内的致病过程已基本搞清，SARS是由SARS病毒引发的一种传染病，它在人体内引起一种类似于感染猪或牛的冠状病毒所致的肺部病理改变，由于损伤部位主要位于终末细支气管上皮细胞及肺泡上皮，严重影响呼吸黏膜的外呼吸功能，故出现进行性呼吸窘迫症、低血糖症等急性呼吸衰竭的临床过程。
冠状病毒的spike蛋白与其它属的同类病毒同源性低，此外SARS病毒还编码5种未知功能的蛋白，相对新的结构蛋白与功能未知蛋白构成一种“超抗原(super antigen)”，能够引起局部肺组织的超强免疫反应。炎症细胞因子及趋化因子MCP释放，导致肺血管内皮细胞及肺泡上皮细胞损伤，基底塌陷，从而诱导炎症细胞聚集，产生过量蛋白酶，进一步增加肺损伤。
目前对SARS病治疗的方法和手段较多，但公认的治疗方案一般为抗病毒药物，提高机体免疫功能的药物，抗炎药物及减轻炎症对机体损伤的激素类药物。其中，抗病毒药物和激素药物的组合较为常用。目前存在的问题是激素药物如地塞米松，使用的剂量难以掌握，如量小，不足以减轻症状，稍一过量，则会引起严重的后遗症如股骨头坏死，给患者造成新的病痛。
本申请人经过努力，研究成了一种即可抗病毒，又可发挥激素类药物，减轻病理损害的新型制剂IFN-PDS缓释片剂。该片剂可经口含或口服发挥药效作用，对人体无毒副作用，使用方便效果好。
发明内容
本发明目的之一是提供一种新型缓释片剂的配方本发明另一目的之一是提供一种新型缓释片剂本发明又一目的是提供这种片剂的应用本发明的其它目的，在下面对本发明的具体描述中体现出来。
附图1是本发明的制备IFN-PDS缓释片剂的示意图。
本发明的IFN-PDS片剂采用固体配方，可在口腔中与上皮黏膜充分接触，也可在肠道中与肠黏膜充分接触，但不溶于胃液中。药物通过与黏膜接触，引起黏膜上皮细胞被动吸收，发挥药物作用。
根据本发明，一种IFN-PDS片剂的固体配方，含重组人干扰素α，含量为200-1×106IU/ml，黏膜吸收促进剂，浓度为1-10％(W/W)，保护剂，浓度为8-15％(W/W)，缓释剂，浓度为20-30％(W/W)，缓冲液，PH值6.5-8.5。
根据本发明，黏膜吸收促进剂的浓度优选为3-8％(W/W)，保护剂的浓度，优选为9-13％，缓释剂，优造为21.5-24％(W/W)。重组人干扰素α可以是干扰素α2a、干扰素α2b、干扰素α2c或干扰素α1b，优选的干扰素α是干扰素α2b。
根据本发明，黏膜吸收促进剂为吐温-80，终浓度1-10％(W/W)，优选为3-8％(W/W)；缓冲液为0.85％生理盐水；保护剂为人血白蛋白，终浓度为8-15％，优选为9-13％W/W)。
本发明的IFN-PDS缓释片，含有重组人干扰素α，含量为2×102-106IU/ml，人参二醇皂甙，含量为0.04-0.1g/片；黏膜吸收促进剂吐温-80，终浓度1-10％(W/W)，优选为3-8％(W/W)，缓冲液为0.85％生理盐水；保护剂为人血白蛋白，终浓度为8-15％(W/W)，优选为9-13％(W/W)；缓冲剂聚乙烯醇20-30％(W/W)，优选为21.5-24％(W/W)。
本发明的IFN-PDS缓释片，通过将IFN和PDS与适量的保护剂，黏膜吸收促进剂，缓释剂混合而制成，其制备工艺的一种方案，可参见附图1。用于本发明的片剂包装材料，均为国家批准使用的无毒，无刺激，性质稳定与主药及敷料不起理化作用的材料制造。
例如，本发明缓释片剂的成品可以是规格0.25mg/片(含重组人干扰素α2×102-106IU/ml，人参二醇皂甙0.04-0.1mg)。
储藏2-8℃冷暗处。
包装无毒塑料泡罩。
有效期18个月。
本发明的IFN-PDS片剂，可以增强机体免疫力，预防和治疗SARS病及其它上呼吸道病毒感染性疾病，如病毒性感冒。
本发明的IFN-PDS片剂配方，可用于制备本发明的片剂，片剂可用于预防和治疗呼吸道病毒感染性疾病。
具体实施例方式
实施例1取一般药用敷料淀粉40g，依次加入聚乙烯醇25g，吐温-80 6g，白蛋白10g，人参二醇皂甙20g，搅拌混匀，再加入干扰素1.6×105IU/5ml其余部分加入0.85％生理盐水混匀后制粒，压片。
实施例2取一般药用敷料淀粉40g，依次加入取一般药用敷料淀粉40g，依次加入聚乙烯醇25g，吐温-80 6g，白蛋白10g，人参二醇皂甙20g，搅拌混匀，再加入干扰素1.6×106IU/5ml其余部分加入0.85％生理盐水混匀后制粒，压片。
实施例3取一般药用敷料淀粉40g，依次加入取一般药用敷料淀粉40g，依次加入聚乙烯醇25g，吐温-80 6g，白蛋白10g，人参二醇皂甙20g，搅拌混匀，再加入干扰素1.6×107IU/5ml其余部分加入0.85％生理盐水混匀后制粒，压片。
一、本发明IFN-PDS缓释片剂稳定性试验材料和方法(一)材料本发明的IFN-PDS缓释片剂，为连续产生的三批制品，批号为20040601 20040602 20040603，试验前于4℃冰箱保存。
(二)方法将上述三批样品，分批分别存放于4-8℃、20-25℃和37℃条件下，放置当时及放置后不同时间分别抽样进行IFN活性测定，微生物限度检查，外观和片重差异检查。
1.IFN生物活性测定采用Wish细胞-VSV检测系统，微量细胞病变抑制法测定IFN生物活性单位，用中国药品生物制品检定所频发的干扰素标准品效正。
2.PDS含量检查采用薄层层析扫描法进行检查。
3.微生物限度检查按《中华人民共和国药典》二部2000年版要求进行4.外观检查按《药剂学》方法进行。
5.片重差异按《中华人民共和国药典》二部2000年版要求进行。
结 果1.在不同温度条件下，保存不同时间的重组人干扰素α2b片剂三批IFN生物学活性测定见表1表1 本发明IFN-PDS缓释片剂稳定性测定结果
由表1可见重组人干扰素α2b片剂在4-8℃条件放置当时和放置12个月后的IFN生物活性基本一致，未见下降；在20-25℃条件下放置4个月后的生物活性未见下降；37℃条件下放置1个月生物活性未见下降。上述三批间结果基本一致，说明该制剂IFN生物活性十分稳定，在4-8℃条件下可保存12个月以上。
2.PDS含量检查取纯PDS为对照，检查片剂中PDS含量，取10片IFN-PDS片剂溶于10ml水中，用硅胶板展开进行层析，将层析好的板进行显色，扫描，扫描结果表明，片剂中人参二醇皂甙的含量与计算的理论数值基本一致。
3.生物限度检查按《中华人民共和国药典》二部2000年版要求进行，结果表明，片剂中所含细菌总数，大肠杆菌数，霉菌数均符合要求。
4.差异试验任取20个片剂分别称重重量，计算其平均数，X＝0.24±0.015mg/片，符合药典要求。
5.观检查取50个片剂在灯光下检查，表面未发现有麻点、异物、黑点，外观合格。
上述结果表明，生产的IFN-PDS片剂工艺配方合理，生产方便，质量稳定，为制品将来大规模生产和运输保存提供了可靠的科学依据。
二.本发明IFN-PDS缓释片异常毒性试验(一)材料1、本发明使用的重组人干扰素α，效价为1×106IU/ml；人参二醇皂甙，剂量为40mg/只、80mg/只；重组人干扰素α-人参二醇皂甙合剂，剂量为干扰素106IU+人参二醇皂甙40mg/只。
2、试验动物豚鼠由长春生物制品研究所供应体重为250-300g。小白鼠KM种，由长春生物制品研究所供应，体重18-20g。
(二)试验方法每组剂量2只豚鼠，5只小白鼠，腹腔注射待检药物，注射前称量体重，注射后观察7天，动物不出现异常，体重不下降，判为药品安全性合格。
(三)结果按照《中国生物制品规程》2000版有关异常毒性试验的要求进行试验，结果见表2表2 IFN、PDS和IFN-PDS合剂对试验动物的异常毒性试验结果药物分组 动物(只) 给药前平 给药后平 体重差 动物状态均重量 均重量(g)(g) (g)IFN106IU 小鼠18.2 24.1 +5.9良好豚鼠260 328 +68 良好PDS80mg 小白鼠 19.0 26.0 +7.0良好豚鼠269 336 +67 良好
IFN+PDS小白鼠18.124.0+5.9良好豚鼠 255 325 +70 良好由表2结果可见，两种试验动物于观察期结束后，体重增长较明显，而且PDS剂量高者均比剂量低者体重增长快，说明PDS和IFN两者合剂对试验动物无异常毒性，经解刨后也未见注射部位和体内各脏器有任何改变，说明各组药品对动物是安全的。上述试验用药物剂量为实验使用药物剂量的二万倍。
三、本发明IFN-PDS缓释片抗病毒效果(一)材料1、本发明IFN-PDS缓释片2、流感强毒株为甲1型，LD50＝5.0由北京病毒学研究所提供3、试验动物KM小鼠体重13-15g每组20只(二)试验方法选取健康小鼠，每组20只，雌雄各半，于试验前一天给药，然后用流感强毒进行攻击，观察攻击后动物死亡率，以确定药物对动物的保护作用。
(三)结果动物感染流感强毒后，保护率见表3表3 IFN-PDS合剂不同剂量抗流感病毒感染的效果
上述结果可见IFN与PDS合用后，对动物保护作用非常好，与目前市场常用的抗病毒特效药利巴韦林疗效相当，明显高于对照组(未服药，只攻击病毒)的保护力，说明本发明抗病毒效果是肯定的，有效的。
权利要求
1.重组人干扰素-人参二醇皂甙(IFN-PDS)合剂的配方包含重组人干扰素α，含量200-1×106IU/ml；人参二醇皂甙含量0.04-0.1g/片黏膜吸收促进剂浓度为5-20％保护剂浓度为8-15％缓释剂浓度为1-10％缓冲液PH为6.5-8.5
2.权利要求1的配方，其中黏膜吸收促进剂为牛磺酸
3.权利要求1的配方，其中保护剂为人血白蛋白
4.权利要求1的配方，其中缓释剂为聚乙烯醇
5.缓冲液为磷酸缓冲生理盐水
6.权利要求1-5的配方在制备预防和治疗呼吸道病毒感染性疾病的片剂制剂中的应用
7.权利要求6的应用，其中呼吸道病毒感染性疾病为病毒性感冒，SARS病毒感染，扁桃体炎。
全文摘要
本发明提供了预防和治疗人上呼吸道病毒感染的固体制剂。本发明的制剂是一种重组人干扰素(IFN)原液与人参二醇皂甙(PDS)组合后再配以适当的敷料制成的固体制剂，该制剂的适应症为预防和治疗呼吸道病毒感染性疾病，如病毒性感冒、SARS病、扁桃体炎等。
文档编号A61K9/22GK1596973SQ20041007070
公开日2005年3月23日 申请日期2004年7月21日 优先权日2004年7月21日
发明者程晓耕, 赵学俭, 迟宝琦, 张淑洁, 王晓宇, 朱燕, 吉海滨, 贾国富, 曹杰 申请人:长春生物制品研究所