嘧啶并化合物的制作方法

专利名称：嘧啶并化合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及新型的下式的嘧啶并化合物 其中R1选自-H，-(CH2)n-杂环，烷基，环烷基，链烯基，和炔基，其中n是0、1、2或3，并且杂环、烷基、环烷基、链烯基和炔基各自独立，任选被最多3个选自下列的基团所取代-OR9，-COR10，-CO2R10，-CONR10R11，-SO2NR10R11，-SO2R10和-CN；R2和R3独立地选自
-H，-OR9，-卤素，-COR10，-CO2R10，-(CH2)n-杂环，-烷基，-环烷基，-链烯基，和-炔基，其中n是0、1、2或3，并且杂环、烷基、环烷基、链烯基和炔基各自独立，任选被最多3个选自下列的基团所取代-OR9，卤素，-COR10和-CO2R10；R4、R5、R6、R7和R8各自独立地选自-H，-任选可以被羟基或烷氧基取代的低级烷基，-OR12，-卤素，-COR13，和-CO2R13；R9选自-H，-COR10，任选可以被羟基或烷氧基取代的低级烷基，任选可以被羟基、烷氧基和低级烷基取代的环烷基，和任选可以被羟基、烷氧基或低级烷基取代的杂环；R10和R11各自独立地选自-H，任选可以被羟基或烷氧基取代的低级烷基，任选可以被羟基、烷氧基或低级烷基取代的环烷基，和任选可以被羟基、烷氧基或低级烷基取代的杂环；R12选自-H，低级烷基和-COR13；且R13选自-H和低级烷基；或其可药用的盐。
已经发现式I化合物抑制KDR(含激酶插入结构域的受体)和FGFR(成纤维细胞生长因子受体)激酶。这些化合物和它们的可药用盐具有抗增殖活性，可用于治疗或控制癌症，特别是实体瘤。另外，这些化合物具有有利的生物利用度曲线。本发明还涉及包含这种化合物的药物组合物和治疗或控制癌症的方法，最特别的是治疗或控制乳房、肺、结肠和前列腺瘤。
蛋白激酶是一类调节多种细胞功能的蛋白(酶)。这是通过蛋白底物上特定氨基酸的磷酸化，导致底物蛋白的构象变化而完成的。构象变化调节了底物的活性或其和其他结合伴侣相互作用的能力。蛋白激酶的酶活性指的是激酶将磷酸根基团加到底物上的速度。该活性可以通过，例如测定转化成产物的底物数量随时间的变化情况来测量。底物的磷酸化发生在蛋白激酶的活性位点。
酪氨酸激酶是催化三磷酸腺苷(ATP)的末端磷酸根向蛋白底物上的酪氨酸残基转移的蛋白激酶子集。这些激酶在导致细胞增殖、分化和移动的生长因子信号转导的传播中起重要作用。
例如，成纤维细胞生长因子(FGF)和脉管内皮生长因子(VEGF)已经被公认是肿瘤促进的血管生成的重要介导物。VEGF通过两种高亲和力受体发出信号激活内皮细胞，上述两种受体之一是含激酶插入结构域的受体(KDR)。参见Hennequin L.F.等，J.Med.Chem.2002，45(6)，1300页。FGF通过FGF受体(FGFR)发出信号激活内皮细胞。实体瘤依赖于形成新的血管(血管生成)而生长。因此，对受体FGFR和KDR的抑制干扰了生长信号转导，因而减缓或防止了血管生成，是预防和治疗实体瘤的有用试剂。参见Klohs W.E.等，Current Opinion in Biotechnology 1999，10，544页。
已有几个蛋白激酶催化活性的小分子抑制剂的实例。具体而言，小分子抑制剂典型地通过和蛋白激酶ATP结合位点(或“活性位点”)紧密相互作用而阻断底物的磷酸化。参见WO 98/24432和Hennequin L.F.等，J.Med.Chem.2002，45(6)，1300页。这些化合物中有一些抑制多个靶对象。例如，WO99/61444(Warner-Lambert)公开了如下通式的双环嘧啶和双环3，4-二氢嘧啶 这些化合物据称抑制细胞周期蛋白依赖型激酶Cdk1、Cdk2和Cdk4以及生长因子受体酪氨酸激酶PDGFR和FGFR。一些化合物还据称抑制Cdk6。
美国专利6,150,373(Hoffmann-La Roche Inc.)公开了如下通式的双环氮杂环 这些化合物据称抑制T-细胞酪氨酸激酶p56lck。
WO 01/29041Al和WO 01/29042(F.Hoffmann-La Roche AG)公开了如下通式的烷基氨基取代的双环氮杂环 和
这些化合物据称抑制p38介导的细胞功能，因而是细胞增殖抑制剂。
WO 01/64679A1(SmithKline Beecham)公开了如下通式的1，5-二取代的-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-D]嘧啶-2-酮化合物 这些化合物据称可用于治疗CSBP/P38激酶介导的疾病。
对有效抑制蛋白激酶，特别是FGFR和KDR激酶催化活性以治疗一种和多种实体瘤的易合成的小分子化合物有持续的需求。特别需要提供对FGFR和KDR具有选择性的小分子抑制剂。这是因为抑制多个靶对象可能存在潜在的伴随毒性和其他不希望有的并发症。优选这样的小分子抑制剂还具有有利的生物利用度曲线。因此，本发明的一个目的是提供这样的化合物和包含这些化合物的药物组合物。
本发明涉及能够选择性抑制KDR和FGFR活性的新型嘧啶并化合物。这些化合物可用于治疗或控制癌症，特别是治疗或控制实体瘤。
具体而言，本发明涉及下式的化合物
或其可药用的盐，其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7和R8定义如下。
本发明还涉及包含治疗有效量的一种或多种式I化合物，和/或其可药用的盐，以及可药用载体或赋形剂的药物组合物。
本发明还涉及通过将有效量的式I化合物和/或其可药用盐向需要这种治疗的人患者给药，治疗或控制实体瘤，特别是治疗或控制乳房、肺、结肠和前列腺瘤，最特别的是治疗或控制乳房或结肠瘤的方法。
本发明还涉及制备式I化合物的方法，以及可用于制备式I化合物的新型中间体化合物。
此处使用的如下术语应当具有如下定义。
“烷基”表示含有1到10个、优选1到6个、更优选1到4个碳原子的直链或支链饱和脂肪烃。含有1到6个碳原子的烷基在此也称作“低级烷基”。典型的低级烷基包括甲基，乙基，丙基，异丙基，丁基，叔丁基，2-丁基，戊基和己基。此处使用的示例名称C1-4烷基是指含有1到4个碳原子的烷基。
“链烯基”表示含有2到10个、优选2到6个碳原子，并且至少含有一个碳-碳双键的直链或支链脂肪烃，例如乙烯基，2-丁烯基和3-甲基-丁烯基。
“炔基”表示含有2到10个、优选2到6个碳原子，并且至少含有一个碳-碳三键的直链或支链脂肪烃，例如乙炔基和2-丁炔基。
“烷氧基”是指通过氧(-OR)连在分子其余部分上的烷基，例如甲氧基，乙氧基。
“环烷基”是指含有3到10个、优选3到6个原子的非芳香族的、部分或完全饱和的环状脂肪烃基。环烷基的实例包括环丙基，环戊基和环己基。
“有效量”或“治疗有效量”是指明显抑制肿瘤细胞，包括人肿瘤细胞系增殖的至少一种式I化合物或其可药用盐的量。
“卤素”是指氟，氯，溴或碘，优选氯或氟。
“杂原子”是指选自N、O和S的原子，优选N。如果杂原子是N，其可以以-NH-或-N-低级烷基-形式存在。如果杂原子是S，则可以以S、SO或SO2形式存在。
“杂环”或“杂环基”是指含有1到4个选自氮、氧或硫的杂原子或者它们的组合的3元到10元饱和或部分不饱和的非芳香族一价环状基。优选的杂环实例为哌啶，哌嗪，吡咯烷和吗啉。在杂环的杂原子是硫的情况下，硫原子可以被一个或两个氧原子取代，即可以是基团＞S＝O或＞S(＝O)2。优选的含有＞S(＝O)2基的杂环是1，1-二氧代-四氢噻吩。
“羟基”是表示存在一价OH基团的词头。
“IC50”是指抑制50％具体测量活性所需的本发明特定化合物的浓度。其中如以下实施例41和42中所述，可以测量IC50。
“可药用的盐”是指保持了通式I化合物生物效力和性质的常规酸加成盐或碱加成盐，这些盐是从合适的无毒有机或无机酸或者有机或无机碱形成的。酸加成盐的实例包括那些衍生自无机酸的盐，所述无机酸如盐酸，氢溴酸，氢碘酸，硫酸，氨基磺酸，磷酸和硝酸，以及衍生自有机酸的盐，所述有机酸如对甲苯磺酸，水杨酸，甲磺酸，草酸，琥珀酸，柠檬酸，苹果酸，乳酸，富马酸等。碱加成盐的实例包括衍生自铵，钾，钠和氢氧化季铵，例如氢氧化四甲基铵的盐。将药物化合物(例如药物)化学改性成盐是药物化学家熟知的技术，其目的是获得改善的物理和化学稳定性，吸湿性，流动性和化合物的溶解度。参见例如H.Ansel等，Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems，(第6版，1995)196和1456-1457页。
“可药用的”，例如可药用的载体、赋形剂等，是指药学上可接受的，并且对具体化合物给药的对象基本上无毒。
“取代的”如在取代的烷基中，是指取代可以发生在一个或多个位置上，并且除非另外声明，每个取代位点上的取代基都是独立地选自所规定的选项。
在一个实施方案中，本发明涉及下式的化合物 其中R1选自-H，-(CH2)n-杂环，烷基，环烷基，链烯基，和炔基，其中n是0、1、2或3，并且杂环、烷基、环烷基、链烯基和炔基各自独立，任选被最多3个选自下列的基团所取代-OR9，-COR10，-CO2R10，-CONR10R11，-SO2NR10R11，-SO2R10和-CN；R2和R3独立地选自
-H，-OR9，-卤素，-COR10，-CO2R10，-(CH2)n-杂环，-烷基，-环烷基，-链烯基，和炔基，其中n是0、1、2或3，并且杂环、烷基、环烷基、链烯基和炔基各自独立，任选被最多3个选自下列的基团所取代-OR9，-卤素，-COR10和-CO2R10；R4、R5、R6、R7和R8各自独立地选自-H，-任选可以被羟基或烷氧基取代的低级烷基，-OR12，-卤素，-COR13，和-CO2R13；R9选自-H，-COR10，任选可以被羟基或烷氧基取代的低级烷基，任选可以被羟基、烷氧基和低级烷基取代的环烷基，和任选可以被羟基、烷氧基或低级烷基取代的杂环；R10和R11各自独立地选自-H，任选可以被羟基或烷氧基取代的低级烷基，任选可以被羟基、烷氧基或低级烷基取代的环烷基，和任选可以被羟基、烷氧基或低级烷基取代的杂环；R12选自-H，低级烷基和-COR13；且R13选自-H和低级烷基；或其可药用的盐。
此处公开的并且为上述式I所涵盖的化合物可以表现出互变异构现象或结构异构现象。意指本发明包括这些化合物的任何互变异构或结构异构形式，或者这些形式的混合物(例如外消旋混合物)，并且不限于上面式I所述的任何一种互变异构或结构异构形式。
在式I化合物的优选实施方案中，R1选自环烷基，-OH取代的环烷基，杂环，低级烷基，-OH取代的低级烷基。
在式I化合物的另一优选实施方案中，R2是-H或-OCH3。
在式I化合物的另一优选实施方案中，R3是-H、F或-OCH3。
在式I化合物的另一优选实施方案中，R2和R3都是-H。
在式I化合物的另一优选实施方案中，R4、R5和R7都是-H。
在式I化合物的另一优选实施方案中，R6选自OR12，优选-OCH3，低级烷基，优选甲基，或者卤素，优选F。
在式I化合物的另一优选实施方案中，R8是-H或-F。
在式I化合物的另一优选实施方案中，R9、R10和R11独立地选自-H，低级烷基，或者被羟基取代的低级烷基，最优选为-H。
在式I化合物的另一优选实施方案中，R12和R13独立地选自-H和低级烷基，最优选为-H。
在特别优选的实施方案中，本发明涉及式I化合物，其中R1选自-H，被-OH，COR10，-CN，-CONH2取代的-低级烷基，-(CH2)n-杂环，被-COR10，-CO2R10，(＝O)2取代的-(CH2)n-杂环，环烷基，和被-OH取代的环烷基；R2是H或-OCH3；
R3是H、F或-OCH3；R4、R5和R7是H；R6是-OCH3或低级烷基；R8是H或F，优选H；R10是被烷氧基取代的低级烷基；且n是0或1，优选0。
如下化合物是依照本发明的优选实施方案1-环己基-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例1e)，3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-1-哌啶-4-基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例2b)，1-(反式-4-羟基-环己基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例3c)，3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-1-哌啶-3-基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例4b)，1-环戊基-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例5)，1-(1，1-二氧代-四氢噻吩-3-基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例6)，3-[3-(4-甲氧基-苯基)-2-氧代-7-苯基氨基-3，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-1-基]-哌啶-1-甲醛(实施例7)，3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-1-(四氢-吡喃-4-基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例8)，(±)-1-(反式-3-羟基-环戊基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例9d)，(±)-顺式-1-(3-羟基-环戊基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例10e)，(R)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-1-(四氢-呋喃-3-基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例11b)，(R)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-1-吡咯烷-3-基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例12)，(±)-7-(4-氟-苯基氨基)-1-(反式-3-羟基-环戊基)-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例13c)，(±)-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-1-(反式-3-羟基-环戊基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例14d)，(S)-(+)-1-(2-羟基-1-甲基-乙基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例15d)，(S)-(+)-7-(4-氟-苯基氨基)-1-(2-羟基-1-甲基-乙基)-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例16)，3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-1-(反式-4-羟基-环己基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例17d)，3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-1-(反式-4-羟基-环己基)-7-(3，4-二甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例18)，3-(4-甲氧基-苯基)-1-(反式-4-羟基-环己基)-7-(3，4-二甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例19c)，3-(4-甲氧基-苯基)-1-(反式-4-羟基-环己基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例20b)，(S)-(+)-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-(4-氟-苯基氨基)-1-(2-羟基-1-甲基-乙基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例21b)，(S)-(+)-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-1-(2-羟基-1-甲基-乙基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例22)，(R)-(-)-1-(2-羟基-1-甲基-乙基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例23d)，3-(4-甲氧基-苯基)-1-甲基-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例24b)，1-(2-甲氧基-乙氧甲基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例25)，3-[-3-(4-甲氧基-苯基)-2-氧代-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-1-基]-丙腈(实施例26)，(+)-(1R，3R)-1-(3-羟基-环戊基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例27f)，(R)-1-(2-羟基-丙基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例28d)，(-)-(1S，3S)-1-(3-羟基-环戊基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例29h)，3-[-3-(4-甲氧基-苯基)-2-氧代-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-1-基]-丙酰胺(实施例30)，(S)-(+)-1-(2-羟基-丙基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例31d)，1-(顺式-3，5-二羟基-环己基)-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-(4-甲氧基苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例32f)，1-(顺式-3，5-二羟基-环己基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例33c)，1-(顺式-3，5-二羟基-环己基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-(4-氟-3-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例34f)，1-(顺式-3，5-二羟基-环己基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例35b)，1-(顺式-3，5-二羟基-环己基)-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例36b)，1-(顺式-3，5-二羟基-环己基)-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-(4-氟-3-甲氧基苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例37b)，(R)-3-(4-乙基-苯基)-7-(4-氟-苯基氨基)-1-(2-羟基-1-甲基-乙基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例38g)，(±)-3-(4-乙基-苯基)-7-(4-氟-苯基氨基)-1-(反式-3-羟基-环戊基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例39d)，和1-环丙基甲基-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例40)。
本发明化合物对FGF和KDR激酶是选择性的。这些化合物可用于治疗或控制癌症，特别是治疗或控制实体瘤，具体地有乳房、肺、结肠和前列腺瘤。这些化合物对细胞膜有高度渗透性，因此具有有利的生物利用度曲线，例如改善的口服生物利用度。
在选择性的实施方案中，本发明涉及包含至少一种式I化合物，和/或其可药用的盐，以及可药用载体或赋形剂的药物组合物。
这些药物组合物可以口服，例如以片剂、包衣片剂、糖锭剂、硬或软明胶胶囊、溶液剂、乳剂或悬浮剂形式口服。还可以进行直肠给药，例如以栓剂形式，或者可以肠胃外给药，例如以注射液形式。
可以用本领域已知的方法制造包含式I化合物和/或其可药用盐的本发明药物组合物，例如通过常规的混合，胶囊化，溶解，造粒，乳化，包埋，制糖锭或冻干方法。这些药物制剂可以和治疗惰性的无机或有机载体配方。可以使用乳糖，玉米淀粉或其衍生物，滑石，硬脂酸或其盐作为用于片剂、包衣片剂、糖锭剂和硬明胶胶囊的这种载体。软明胶胶囊的合适载体包括植物油，蜡和脂肪。根据活性物质的性质，软明胶胶囊通常不需要载体。制造溶液或糖浆的合适载体为水，多元醇，蔗糖，转化糖和葡萄糖。注射剂的合适载体为水，醇，多元醇，甘油，植物油，磷脂和表面活性剂。栓剂的合适载体为天然或硬化油，蜡，脂肪和半液体多元醇。
这些药物制剂还可以包含防腐剂，增溶剂，稳定剂，湿润剂，乳化剂，甜味剂，着色剂，食用香料，用于改变渗透压的盐，缓冲剂，包衣材料或抗氧化剂。还可以包含其他有治疗价值的物质，包括式I化合物以外的其他活性成分，特别是其他肿瘤药剂。
在进一步的实施方案中，本发明还涉及通过将有效量的式I化合物和/或其盐向需要这种治疗的人患者给药，用以治疗癌症，特别是乳房、结肠、肺或前列腺癌的式I化合物的用途。
如上所述，本发明化合物，包括式I化合物和/或其可药用盐，可用于治疗或控制细胞增殖失调，特别是肿瘤失调。这些化合物和包含所述化合物的配方在实体瘤，例如乳房、结肠、肺和前列腺瘤的治疗或控制中特别有用。因此，本发明还涉及通过将有效量的式I化合物和/或其可药用盐向需要这种治疗的患者给药来治疗实体瘤的方法。
依照本发明的化合物的治疗有效量是指有效预防、减轻或消除疾病症状或者延长治疗对象生存时间的化合物的量。治疗有效量的确定属于本领域的技术范畴。
本发明化合物的治疗有效量或剂量可以在宽的限度内变化，并且可以用本领域已知的方法测定。在各个特定案例中这种剂量将根据个体需要而调整，包括给药的具体化合物，给药途径，治疗条件，以及受治患者。通常，对于体重约70-75kg的成年人而言，口服或肠胃外给药的每日剂量为约10mg到约10,000mg，优选约200mg到约1,000mg，最优选300mg到600mg应当是合适的，尽管遵医嘱可以超过其上限。每日剂量可以单剂量给药，也可以分剂量给药，或者对于肠胃外给药，可以连续灌输给药。
在另一实施方案中，本发明涉及制备式I化合物的方法，该方法包括将下式化合物 其中X是Cl或SO2CH3，且R1、R4、R5、R6、R7和R8如此前所定义，和下式的苯胺衍生物反应 其中R2和R3如此前所定义，以获得下式化合物
并且如果需要，将式I化合物转化成可药用的盐。
本发明还涉及可用于合成式I化合物的如下新型中间体4-[3-(4-甲氧基-苯基)-2-氧代-7-苯基氨基-3，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-1-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例2a)，1-[反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例3b)，3-[3-(4-甲氧基-苯基)-2-氧代-7-苯基氨基-3，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-1-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例4a)，(±)-3-顺式-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例10d)，(R)-2-甲硫基-4-(四氢-呋喃-3-基氨基)-嘧啶-5-羧酸乙酯(实施例11a)，(±)-4-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基氨基]-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛(实施例13a)，(±)-1-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-甲硫基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例13b)，(±)-[3-反式-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-{5-[(2-氟-4-甲氧基-苯基氨基)-甲基]-2-甲硫基-嘧啶-4-基}-胺(实施例14b)，(±)-1-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-甲硫基-3，4-二氢-IH-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例14c)，
(S)-1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例15c)，1-[反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己基]-7-氯-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例17c)，1-[反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例19a)，1-[反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-(3，4-二甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例19b)，1-[反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例20a)，(S)-1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-7-氯-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例21a)，(R)-1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例23c)，3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例24a)，(+)-(1R，3R)-4-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基氨基]-2-甲硫基-嘧啶-5-羧酸乙酯(实施例27d)，(-)-(1R，3R)-1-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例27e)，(R)-1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-丙基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例28c)，(-)-(1S，3S)-4-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基氨基]-2-甲硫基-嘧啶-5-羧酸乙酯(实施例29d)，(-)-(1S，3S)-4-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基氨基]-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛(实施例29e)，(-)-(1S，3S)-1-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-甲硫基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例29f)，(-)-(1S，3S)-1-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例29g)，
(S)-1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-丙基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例31c)，1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-7-氯-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例32d)，1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例32e)，1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例33a)，1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例33b)，1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-(4-氟-3-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例34e)，1-{顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例35a)，1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例36a)，1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-(4-氟-3-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例37a)，(2，4-二氯-嘧啶-5-基甲基)-(4-乙基-苯基)-胺(实施例38c)，(R)-3-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-1-(2，4-二氯-嘧啶-5-基甲基)-1-(4-乙基-苯基)-脲(实施例38d)，(R)-1-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-7-氯-3-(4-乙基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例38e)，(R)-1-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-3-(4-乙基-苯基)-7-(4-氟-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例38f)，(±)-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-{2-氯-5-[(4-乙基-苯基氨基)-甲基]-嘧啶-4-基}-胺(实施例39a)，
(±)-1-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-7-氯-3-(4-乙基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例39b)，和(±)-1-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-乙基-苯基)-7-(4-氟-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例39c)。
本发明化合物可以用任何常规的方式制备。在实施例中提供了合成这些化合物的合适方法。通常，可以按照下面描述的合成路线来制备式I化合物。
方案1
作为选择，可以用如下途径获得式I化合物方案2 作为选择，还可以通过如下途径获得式I化合物。
方案3 作为选择，可以通过如下途径从化合物4获得化合物6方案4
还可以通过如下途径从化合物4获得式I化合物方案5 实施例如下实施例举例说明了本发明优选的合成化合物的方法和配方。
实施例1实施例1a5-(羟甲基)-1，3-二氢嘧啶-2，4-二酮 向装备了机械搅拌器、温度计、冷凝器和氮气入口起泡器的2L三口烧瓶中加入尿嘧啶(185.0g，1650mmol)(Aldrich)、低聚甲醛(61.50g，2050mmol甲醛)(Aldrich)和氢氧化钾(86.9％，59.95g，928.5mmol)(Aldrich)的水(1.445L)溶液。将混合物在50-52℃下搅拌68小时。TLC分析显示反应完全。在60℃/14mmHg下浓缩至约500mL体积后，残余物用丙酮(500mL)稀释。将所得到的沉淀物过滤收集，用丙酮洗涤并抽气干燥，然后在50℃/25mmHg下得到粗制的5-(羟甲基)-1，3-二氢嘧啶-2，4-二酮(250g)白色固体。将合并的母液和洗涤液浓缩至约100mL体积，并且加入盐酸羟胺(27.52g，396.0mmol，Aldrich)的水(100mL)溶液。将所得到的沉淀物过滤收集，用丙酮洗涤并抽气干燥，得到第二批粗制的5-(羟甲基)-1，3-二氢嘧啶-2，4-二酮(34g)白色固体。将两批合并(244g，过重4％)，直接用于下一步。
实施例1b2，4-二氯-5-(氯甲基)嘧啶
向装备了机械搅拌器、加料漏斗、温度计和氮气入口起泡器的1L三口烧瓶中加入粗制的5-(羟甲基)-1，3-二氢嘧啶-2，4-二酮(50.25g，约340mmol)(来自上述实施例1a)、磷酰氯(164.8mL，1768mmol)(Aldrich)和甲苯(100mL)。在10分钟内向混合物中加入N，N-二异丙基乙胺(184.7mL，1060mmol)(Aldrich)，同时用水浴将混合物温度保持在70℃以下。加完后，移走冷却浴，将混合物加热回流(113-116℃)1小时。通过蒸馏除去一些甲苯(约35mL)，以将反应混合物温度升高到120℃，并将混合物在120-123℃下搅拌5小时。TLC分析显示反应完全。在让混合物冷却至室温过夜后，在67分钟内将混合物小心地加入到搅拌着的水(200mL)和乙酸异丙酯(150mL)的两相混合物中，同时用冰-水浴将温度保持在17℃至21℃之间。使用临时的冰-水冷却浴，在18-21℃下搅拌80分钟之后，将混合物用甲苯(4×150mL)萃取。将合并的有机层干燥(硫酸钠)，过滤然后减压浓缩至干，得到粗制的2，4-二氯-5-(氯甲基)嘧啶白色固体，该固体含有极性杂质。(产量56.1g，以尿嘧啶计算的产率为83.6％)。
将粗制的2，4-二氯-5-(氯甲基)嘧啶(70.39g)溶解在二氯甲烷(80mL)中，将所得到的溶液通过TLC级硅胶(100g)垫过滤。然后将硅胶用二氯甲烷∶己烷(1L，7∶3)洗涤，将合并的滤液和洗涤液减压浓缩至干，得到2，4-二氯-5-(氯甲基)嘧啶白色固体。(产量58.77g，回收率83.5％，以尿嘧啶计算的总产率为69.8％)。
实施例1c2，4-二氯-5-(碘甲基)嘧啶 向装备有磁力搅拌器、冷凝器和氮气入口起泡器的500mL圆底烧瓶中装入碘化钠(38.5g，256.9mmol)(Aldrich)和丙酮(300mL)。在获得澄清溶液后，一次性加入2，4-二氯-5-(氯甲基)嘧啶(50.0g，253.2mmol)(来自上述实施例1b)。在室温下搅拌20分钟后，将混合物加热至回流15分钟。NMR分析表明转化率为98％。待冷却到室温后，用中度烧结的玻璃漏斗过滤除去所得到的沉淀物(氯化钠)，并用丙酮洗涤。将合并的滤液和洗涤液浓缩至约重75g。将所得到的2，4-二氯-5-(碘甲基)嘧啶的丙酮浓缩溶液用甲苯(20mL)稀释。在浓缩至约85g重以除去残余丙酮后，将该2，4-二氯-5-(碘甲基)嘧啶的甲苯浓缩溶液直接用于下一步骤。
实施例1d[(2，4-二氯嘧啶-5-基)甲基](4-甲氧基苯基)胺 向装备有磁力搅拌器、温度计和氮气入口起泡器的500mL三口烧瓶中装入得自上一步骤的2，4-二氯-5-(碘甲基)嘧啶(85g，约253.2mmol)(来自上述实施例1c)的甲苯溶液(13.7mL)和甲苯(96.3mL，即共约110mL甲苯)。在用冰-水浴冷却后，加入对-茴香胺(31.18g，253.2mmol)(Aldrich)。在搅拌30分钟后，在8分钟内滴加氢氧化钠(13.54g，331.7mmol)的水(50mL)溶液，同时将反应混合物温度保持在10-15℃。加入己烷(55mL)，将混合物在10-15℃下搅拌45分钟，然后在室温下搅拌22小时，得到浆液。上清液的TLC分析表明反应完全。将浆液用水(100mL)稀释，过滤收集固体，用冷水和冷(-50℃)甲醇(100mL)洗涤并抽气干燥，得到[(2，4-二氯嘧啶-5-基)甲基](4-甲氧基苯基)胺灰白色固体，HPLC分析的纯度为97％。(产量59.87g，83.2％)。
实施例1e1-环己基-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮
将[(2，4-二氯嘧啶-5-基)甲基](4-甲氧基苯基)胺(200mg，0.70mmol)(来自上述实施例1d)的无水四氢呋喃溶液(24mL)用正丁基锂(1.6M己烷溶液，0.53mL，0.84mmol)(Aldrich)在-78℃下进行处理。随后加入异氰酸环己酯(90μL，88mg，0.70mmol)(Aldrich)。搅拌所得到的混合物并在2小时内缓慢升温到室温。然后将反应混合物在乙酸乙酯和盐水之间分配。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，残余物用硅胶柱色谱法纯化，用0-60％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱。将通过该步纯化得到的中间体溶解在苯胺中(2mL)(Aldrich)，加入催化量的4-(二甲基氨基)吡啶(Aldrich)，然后将混合物在100℃下加热。在搅拌过夜后，将混合物冷却，用硅胶柱色谱法纯化，用0-60％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱。将该步纯化获得的固体溶解在四氢呋喃中，然后用过量的戊烷沉淀，得到1-环己基-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮米色固体。(产量78mg，26％)。C25H27N5O2[M+]的HRMS m/z计算值429.2165。实测429.2165。IC50(KDR)＝0.025μM，IC50(FGFR)＝0.049μM。
实施例2a4-[3-(4-甲氧基-苯基)-2-氧代-7-苯基氨基-3，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-1-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯
在0℃下用20％的光气的甲苯溶液(1.47mL，2.99mmol)(Fluka)处理1-N-叔丁氧羰基-4-氨基哌啶(300mg，1.49mmol)(Astatech)和三乙胺(840μL，606mg，5.99mmol)(Aldrich)的无水二氯甲烷溶液(10mL)。在搅拌30分钟后，将混合物在0.5M盐酸水溶液和二氯甲烷之间分配。然后收集有机层，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并浓缩。将残余物溶解在乙醚(约6mL)中，将所得到的溶液过滤并浓缩。然后将残余物溶解在少量无水四氢呋喃(约3mL)中，并通过套管转移到-78℃的[(2，4-二氯嘧啶-5-基)甲基](4-甲氧基苯基)胺(300mg，1.06mmol)(来自上述实施例1d)和正丁基锂(2.5M己烷溶液，0.51mL，1.27mmol)的无水四氢呋喃(20mL)溶液中。让反应混合物缓慢升温到室温并搅拌4小时，之后在乙酸乙酯和盐水之间分配。然后收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残余物用硅胶柱色谱纯化，用0-60％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱。然后将该步纯化得到的产物溶解于苯胺(2mL)(Aldrich)，将所得到的溶液在80℃下加热12小时。然后冷却反应混合物，并用硅胶柱色谱纯化，用0-70％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱，得到产物。在用过量的戊烷沉淀出THF后，分离出4-[3-(4-甲氧基-苯基)-2-氧代-7-苯基氨基-3，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-1-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯灰白色固体。(产量74mg，13％)。
C29H34N6O4[M+]的HRMS m/z计算值530.2641。实测530.2640。
实施例2b3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-1-哌啶-4-基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮
在0℃下将4-[3-(4-甲氧基-苯基)-2-氧代-7-苯基氨基-3，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-1-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(70mg，0.13mmol)(来自上述实施例2a)溶解在含有100μL水的50％的三氟乙酸的二氯甲烷(6mL)溶液中。在搅拌1.5小时后，将混合物在乙酸乙酯和1N氢氧化钠水溶液之间分配，通过加入固体氢氧化钠将水层的pH调节到12。然后将有机层用水洗涤，硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过用过量的戊烷沉淀出四氢呋喃将粗制原料纯化，得到3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-1-哌啶-4-基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮灰白色固体。(产量42mg，75％)。
C24H27N6O2[(M+H)+]的HRMS m/z计算值431.2190。实测431.2190。
实施例3a反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己胺 向反式-4-氨基环己醇(5.0g，43.4mmol)(TCI US)的二氯甲烷(100mL)溶液中加入咪唑(14.78g，0.22mol)(Aldrich)和叔丁基二甲基甲硅烷基氯化物(19.63g，0.13mol)(Avocardo Research Chemicals)。将反应混合物在室温下搅拌1天，然后减压浓缩。将残余物在乙酸乙酯(100mL)和水(100mL)之间分配。有机层用1N氢氧化钠溶液、水和盐水洗涤，硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己胺。(产量7.62g，76.5％)。
实施例3b1-[反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 将反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己胺(350mg，1.53mmol)(来自上述实施例3a)的二氯甲烷溶液(10mL)用三乙胺(850μL，630mg，6.10mmol)(Aldrich)处理，然后在0℃下用光气的甲苯(20％，1.49mL，3.05mmol)(Fluka)溶液处理。在搅拌30分钟后，将反应混合物在二氯甲烷和0.5M盐酸水溶液之间分配。分离有机层，用盐水洗涤，硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残余物溶解在乙醚中，将所得到的溶液过滤并浓缩。然后将获得的残余物溶解在少量无水四氢呋喃(约3mL)中，并通过套管转移到-78℃的(2，4-二氯-嘧啶-5-基-甲基)-(4-甲氧基-苯基)-胺(340mg，1.19mmol)(来自上述实施例1d)和正丁基锂(2.5M的己烷溶液，0.61mL，1.52mmol)(Aldrich)的无水四氢呋喃(25mL)溶液中。让反应混合物缓慢升温到室温并搅拌2小时15分钟。将混合物在乙酸乙酯和盐水之间分配。分离有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，残余物用硅胶柱色谱纯化，用0-60％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱。将从该步纯化获得的中间体溶解在苯胺(3mL)(Aldrich)中，并将所得到的溶液在80℃下加热12小时。然后将混合物冷却并用硅胶柱色谱纯化，用0-50％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱，得到产物。在将乙醚用过量戊烷沉淀除去后，分离出1-[反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮灰白色固体。(产量139mg，21％)。C31H42N5O3Si[(M+H)+]的HRMS m/z计算值560.3052。实测560.3056。
实施例3c1-(反式-4-羟基-环己基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 在0℃下将1-[反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(来自上述实施例3b)(139mg，0.25mmol)溶解在含有水(330μL)的50％的三氟乙酸的二氯甲烷(5mL)溶液中。在搅拌1.5小时后，将反应混合物在乙酸乙酯和1N氢氧化钠水溶液之间分配，并通过加入固体氢氧化钠将水层的pH调节到12。然后将有机层用水洗涤，硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到粗产物。用硅胶柱色谱纯化，0-100％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱，接着用过量戊烷沉淀出四氢呋喃，得到1-(反式-4-羟基-环己基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮灰白色固体。(产量72mg，65％)。
C25H27N5O3[M+]的HRMS m/z计算值445.2114。实测445.2122。
实施例4a3-[3-(4-甲氧基-苯基)-2-氧代-7-苯基氨基-3，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-1-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯
在0℃下将1-N-叔丁氧羰基-3-氨基哌啶(350mg，1.75mmol)(Astatech)和三乙胺(710mg，970μL，7.00mmol)(Aldrich)在二氯甲烷(10mL)中的混合物用20％的光气的甲苯溶液(1.7mL，3.47mmol)(Fluka)处理。在搅拌30分钟后，过滤反应混合物，将滤液浓缩至小体积。加入苯(5mL)，再次过滤所得到的混合物并浓缩。将残余物溶解在少量无水四氢呋喃(约3mL)中，并通过套管转移到-78℃的(2，4-二氯-嘧啶-5-基甲基)-(4-甲氧基苯基)-胺(340mg，1.19mmol)(来自上述实施例1d)和正丁基锂(2.5M己烷溶液，0.70mL，1.75mmol)(Aldrich)的无水四氢呋喃(20mL)溶液中。让所得到的混合物缓慢升温到室温并搅拌过夜。次日早上将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残余物用硅胶柱色谱纯化，用0-70％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱。将该步纯化的产物溶解在苯胺(3mL)中，并将混合物在80℃下加热12小时。然后将混合物冷却并用硅胶柱色谱纯化，使用0-100％乙酸乙酯的己烷溶液到0-50％四氢呋喃的乙酸乙酯溶液梯度洗脱，得到产物。在用过量戊烷沉淀出THF后，分离出3-[3-(4-甲氧基-苯基)-2-氧代-7-苯基氨基-3，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-1-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯灰白色固体。(产量70mg，10％)。C29H34N6O4[(M+H)+]的HRMS m/z计算值531.2715。实测531.2725。
实施例4b3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-1-哌啶-3-基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮
在0℃下将3-[3-(4-甲氧基-苯基)-2-氧代-7-苯基氨基-3，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-1-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(70mg，0.13mmol)(来自上述实施例4a)溶解在含有水(300μL)的50％的三氟乙酸的二氯甲烷溶液(5mL)中。在搅拌1.5小时后，将反应混合物在乙酸乙酯和1N氢氧化钠水溶液之间分配并通过加入固体氢氧化钠将水层的pH调节到12。然后将有机层用水洗涤，硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到粗产物。将该原料溶解在四氢呋喃中并用过量戊烷沉淀，得到3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-1-哌啶-3-基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮灰白色固体。(产量47mg，84％)。
C24H27N6O2[(M+H)+]的HRMS m/z计算值431.2190。实测431.2193IC50(KDR)＝0.107μM，IC50(FGFR)＝0.158μM。
实施例51-环戊基-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 将(2，4-二氯-嘧啶-5-基-甲基)-(4-甲氧基苯基)-胺(350mg，1.23mmol)(来自上述实施例1d)的无水四氢呋喃溶液(30mL)用正丁基锂(2.5M己烷溶液，590μL，1.48mmol)(Aldrich)在-78℃下进行处理，然后加入异氰酸环戊酯(170μL，164mg，1.48mmol)(Aldrich)，让溶液缓慢升温到室温并搅拌5小时。然后将反应混合物在乙酸乙酯和盐水之间分配，收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，将残余物在硅胶柱上纯化，用0-50％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱。将该步纯化的中间体溶解在苯胺(3mL)(Aldrich)中，加入催化量的4-(二甲基氨基)吡啶(Aldrich)并将所得到的溶液在100℃下搅拌17小时。然后将反应混合物冷却并用硅胶柱色谱纯化，用0-50％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱，得到产物。在用过量戊烷沉淀出THF后，分离出1-环戊基-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮灰白色固体。(产量49mg，9％)。
C24H25N5O2[M+]的HRMS m/z计算值415.2008。实测415.2014。
实施例61-(1，1-二氧代-四氢噻吩-3-基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 在0℃下将1，1-二氧四氢噻吩-3-基胺(200mg，1.48mmol)(Salor)和三乙胺(590mg，820μl，5.9mmol)(Aldrich)在二氯甲烷(9mL)中的混合物用20％的光气的甲苯溶液(1.80mL，3.70mmol)(Fluka)处理。在30分钟后，过滤混合物并将滤液浓缩至小体积。加入苯(5mL)，再次过滤混合物，将滤液加入到(2，4-二氯-嘧啶-5-基-甲基)-(4-甲氧基苯基)-胺(230mg，1.43mmol)(来自上述实施例1d)的苯(5mL)溶液中。将所得到的溶液加热回流过夜。次日早上减压蒸发溶剂，残余物用硅胶柱色谱纯化，用0-100％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱。将该步纯化分离出的中间体溶解在无水四氢呋喃(15mL)中，在-78℃下将所得到的溶液冷却并用正丁基锂(2.5M己烷溶液，330μL，0.82mmol)(Aldrich)处理。让混合物缓慢升温到室温，搅拌5.5小时，然后在乙酸乙酯和盐水之间分配。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，并将所得到的残余物溶解在苯胺(3mL)(Aldrich)中。加入催化量的4-(二甲基氨基)吡啶(Aldrich)并将混合物在75℃下搅拌14小时。然后将混合物冷却并用硅胶柱色谱纯化，用0-100％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱，得到产物。在用过量戊烷沉淀出二氯甲烷后，分离出1-(1，1-二氧代-四氢噻吩-3-基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮灰白色固体。(产量152mg，23％)。
C23H23N5O4S[M+]的HRMS m/z计算值465.1471。实测465.1477。IC50(KDR)＝0.075μM，IC50(FGPR)＝0.226μM。
实施例73-[3-(4-甲氧基-苯基)-2-氧代-7-苯基氨基-3，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-1-基]-哌啶-1-甲醛 在室温下将3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-1-哌啶-3-基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(95mg，0.22mmol)(来自上述实施例4b)溶解在甲酸甲酯(5mL)(Aldrich)中。搅拌过夜后，将反应混合物浓缩成粗产物，将该粗产物用硅胶柱色谱纯化，用0-100％乙酸乙酯的己烷溶液然后是0-20％四氢呋喃的乙酸乙酯溶液梯度洗脱。在用过量戊烷沉淀出二氯甲烷后，分离出3-[3-(4-甲氧基-苯基)-2-氧代-7-苯基氨基-3，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-1-基]-哌啶-1-甲醛灰白色固体。(产量90mg，89％)。
C25H26N6O3[M+]的HRMS m/z计算值458.2066。实测458.2062。
实施例83-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-1-(四氢-吡喃-4-基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 在0℃下将4-氨基四氢吡喃(300mg，2.88mmol)(Combi-Blocks)和三乙胺(1.61mL，11.52mmol)(Aldrich)在二氯甲烷(6mL)中的混合物用20％的光气的甲苯溶液(1.4mL，5.76mmol)(Fluka)处理。搅拌30分钟后，过滤混合物和将滤液浓缩至小体积。加入苯(5mL)并再次过滤混合物。浓缩滤液，将残余物溶解在无水四氢呋喃(约3mL)中并通过套管转移到-78℃的(2，4-二氯-嘧啶-5-基-甲基)-(4-甲氧基苯基)-胺(300mg，1.44mmol)(来自上述实施例1d)和正丁基锂(2.5M己烷溶液，460μL，1.44mmol)(Aldrich)的四氢呋喃(15mL)溶液中。让反应混合物缓慢升温到室温，搅拌过夜，然后在乙酸乙酯和盐水之间分配。收集乙酸乙酯层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，将残余物用使用0-70％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱的硅胶柱色谱纯化。将该步纯化获得的中间体溶解在苯胺(2mL)(Aldrich)中。加入催化量的4-(二甲基氨基)吡啶，将所得到的溶液在110℃下搅拌11小时。然后将反应混合物冷却并用硅胶柱色谱纯化，使用0-100％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱，得到产物。在用过量戊烷沉淀出二氯甲烷后，分离出3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-1-(四氢吡喃-4-基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮灰白色固体产物。(产量15mg，2％)。
C24H25N5O3[M+]的HRMS m/z计算值431.1957。实测431.1948。
实施例9a
(±)-顺式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊醇 将(±)-顺式-叔丁基-二甲基-(6-氧杂-双环[3.1.0]己-3-基氧基)-硅烷(2.15g，9.99mmol)(按照Hendrie，S.K.，Leonard，J.Tetrahedron，1987，43(14)，3289-3294的方法制备)溶解在乙醇(70mL)中。向该溶液加入10％Pd/C(500mg)(Aldrich)，将混合物在1大气压的氢气下氢化24小时，再在50psi下氢化24小时。加入另一部分的10％Pd/C(500mg)，将混合物在55psi下再氢化24小时。然后过滤氢化的混合物，固体用四氢呋喃(约60mL)洗涤，并将合并的有机层浓缩。将残余物用硅胶柱色谱纯化，用0-100％乙醚的己烷溶液洗脱，得到(±)-顺式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊醇无色粘稠油状物。(产量1.81g，83％)。
C11H24O2Si[(M+H)+]的HRMS m/z计算值217.1618。实测217.1619。
实施例9b(±)-反式-(3-叠氮基-环戊基氧基)-叔丁基-二甲基-硅烷 在0℃下向(±)-顺式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊醇(1.5g，6.93mmol)(来自上述实施例9a)和三苯膦(1.99g，7.63mmol)(Aldrich)在无水四氢呋喃(60mL)中的混合物中滴加偶氮二羧酸二乙酯(1.2mL，1.32g，7.63mmol)(Aldrich)。2分钟后，接着加入二苯基磷酰基叠氮化物(1.6mL，2.09g，7.63mmol)(Aldrich)，并将所得到的溶液缓慢升温到室温。在搅拌过夜后，将反应混合物在乙醚和水之间分配。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，将残余物用硅胶柱色谱纯化，使用0-20％的乙醚的己烷溶液梯度洗脱，得到(±)-反式-(3-叠氮基-环戊基氧基)-叔丁基-二甲基-硅烷无色液体。(产量1.2g，72％)。
实施例9c(±)-反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊胺 将(±)-反式-(3-叠氮基-环戊基氧基)-叔丁基-二甲基-硅烷(400mg，1.66mmol)(来自上述实施例9b)和氧化铂(38mg，0.17mmol)(Aldrich)在乙醇(6mL)中的混合物在1大气压的氢气下搅拌2小时。然后过滤反应混合物。固体用四氢呋喃(约40mL)洗涤，将合并的有机层减压蒸发，得到(±)-反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊胺无色液体。(产量270mg，76％)。
C11H25NOSi[(M+H)+]的HRMS m/z计算值216.1778。实测217.1780。
实施例9d(±)-1-(反式-3-羟基-环戊基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 在0℃下将(±)-反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊胺(270mg，1.25mmol)(来自上述实施例9b)和三乙胺(1.15mL，840mg，8.30mmol)(Aldrich)的二氯甲烷溶液(5mL)用20％的光气的甲苯溶液(2mL，4.15mmol)(Fluka)处理。在搅拌30分钟后，过滤混合物并将滤液浓缩至小体积。加入苯(5mL)，再次过滤混合物。浓缩滤液，将残余物溶解在少量无水四氢呋喃(约3mL)中，然后通过套管转移到-78℃的(2，4-二氯-嘧啶-5-基-甲基)-(4-甲氧基苯基)-胺(180mg，0.63mmol)(来自上述实施例1d)和正丁基锂(2.5M己烷溶液，250μL，0.63mmol)(Aldrich)的无水四氢呋喃(15mL)溶液中。让反应混合物缓慢升温到室温，搅拌5.5小时，然后在乙酸乙酯和水之间分配。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残余物用0-40％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱的硅胶柱色谱纯化。将该步纯化获得的中间体溶解在苯胺(2mL)(Aldrich)中，加入催化量的4-(二甲基氨基)吡啶(Aldrich)，并将所得到的溶液在80℃下搅拌7小时。然后将混合物冷却并用硅胶柱色谱纯化，使用0-40％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱。将该步纯化的产物溶解在乙腈(3mL)中，加入5％氢氟酸水溶液(50μL)，将混合物搅拌21小时。然后将反应混合物浓缩至小体积并用硅胶柱色谱纯化，使用0-100％四氢呋喃的己烷溶液梯度洗脱，得到产物。在用过量戊烷沉淀出二氯甲烷后，分离出(±)-1-(反式-3-羟基-环戊基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮白色固体产物。(产量23mg，8％)。
C24H25N5O3[(M+H)]+的HRMS m/z计算值480.1467。实测480.1471。
实施例10a(±)-反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊醇 向0℃的1，3-环戊二醇(5.0g，48.9mmol)(顺式/反式混合物，Aldrich)和咪唑(3.3g，48.5mmol)在四氢呋喃(100mL)的混合物中分批(每15分钟250mg)加入叔丁基二甲基甲硅烷基氯化物(5.2g，34.3mmol)(Aldrich)。所有加入完成后，让反应混合物缓慢升温到室温。在搅拌过夜后，将混合物在乙酸乙酯和水之间分配。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物用硅胶柱色谱纯化，用0-20％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱，得到(±)-反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊醇无色粘稠油状物(产量4.23g，57％)和(±)-顺式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊醇(产量420mg，6％)。
C11H24O2Si[M+H]+的HRMS m/z计算值217.1618。实测217.1621。
实施例10b(±)-顺式-2-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-异吲哚-1，3-二酮 将(±)-反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊醇(1.1g，5.08mmol)(来自上述实施例10a)、三苯膦(3.2g，12.20mmol)(Aldrich)和苯邻二甲酰亚胺(1.8g，12.20mmol)(Aldrich)的无水四氢呋喃(45mL)溶液冷却到0℃。向其中滴加偶氮二羧酸二乙酯(2.1mL，2.3g，12.20mmol)(Aldrich)，并让所得到的溶液缓慢升温到室温。在搅拌过夜后，将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩并将残余物用硅胶柱色谱纯化，使用0-35％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱，得到(±)-顺式-2-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-异吲哚-1，3-二酮白色固体。(产量1.52g，87％)。
C19H27NO3Si[M-CH3]+的HRMS m/z计算值330.1525。实测330.1523。
实施例10c(±)-顺式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊胺
向(±)-顺式-2-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-异吲哚-1，3-二酮(1.03g，2.98mmol)(来自上述实施例10b)在乙醇/四氢呋喃(2∶1，20mL)的混合物中加入无水肼(1.2mL，38.90mmol)(Aldrich)。在搅拌过夜后，过滤反应混合物。固体用乙醚(约30mL)洗涤，浓缩合并的滤液。残余物用乙醚(约30mL)再次处理，并将所得到的混合物过滤和浓缩，得到(±)-顺式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊胺无色油状物。(产量570mg，88％)。
C11H25NOSi[M+H]+的HRMS m/z计算值216.1778。实测216.1780。
实施例10d(±)-3-顺式-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 将0℃下的(±)-顺式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊胺(500mg，2.32mmol)(来自上述实施例10c)和三乙胺(1.62mL，1.2g，11.64mmol)(Aldrich)的二氯甲烷溶液(15mL)用20％的光气的甲苯溶液(2.8mL，5.80mmol)(Fluka)处理。在搅拌30分钟后，过滤混合物并将滤液浓缩至小体积。加入苯(5mL)，将该混合物再次过滤。然后浓缩滤液，将残余物溶解在无水四氢呋喃(约3mL)中，然后通过套管转移到-78℃的(2，4-二氯-嘧啶-5-基-甲基)-(4-甲氧基苯基)-胺(330mg，1.16mmol)(来自上述实施例1d)和正丁基锂(2.5M己烷溶液，460μL，1.16mmol)(Aldrich)的无水四氢呋喃(25mL)溶液中。让反应混合物缓慢升温到室温，搅拌48小时，然后在乙酸乙酯和水之间分配。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，将残余物用硅胶柱色谱纯化，使用0-30％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱。将该步纯化获得的中间体溶解在苯胺(2mL)(Aldrich)中。加入催化量的4-(二甲基-氨基)吡啶(Aldrich)，并将所得到的溶液在80℃下搅拌8小时。然后冷却反应混合物并用硅胶柱色谱纯化，使用0-100％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱，得到(±)-3-顺式-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮白色固体。(产量100mg，16％)。
C30H39N5O3Si[M+H]+的HRMS m/z计算值546.2895。实测546.2901。
实施例10e(±)-顺式-1-(3-羟基-环戊基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 向(±)-3-顺式-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(100mg，0.18mmol)(来自上述实施例10d)的乙腈溶液(3mL)中加入5％氢氟酸水溶液(110μL，0.275mmol)。在搅拌过夜后，将反应混合物浓缩至小体积(～1mL)并用硅胶柱色谱纯化，使用0-100％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱。在用过量戊烷沉淀出二氯甲烷后，分离出白色固体产物(±)-顺式-1-(3-羟基-环戊基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量60mg，77％)。
C24H25N5O3[M+H]+的HRMS m/z计算值432.2030。实测432.2033。
实施例11a(R)-2-甲硫基-4-(四氢呋喃-3-基氨基)-嘧啶-5-羧酸乙酯手性 将4-氯-2-甲硫基-5-嘧啶羧酸乙酯(897mg，3.86mmol)(Aldrich)和三乙胺(1.2mL，870mg，8.49mmol)(Aldrich)的二噁烷(20mL)溶液用(R)-3-氨基四氢呋喃对甲苯磺酸盐(1.0g，3.86mmol)(Fluka)处理。将混合物在回流下搅拌1小时，然后冷却并在盐水和乙酸乙酯之间分配。将有机层用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，并将残余物用硅胶柱色谱纯化，使用0-100％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱，得到(R)-2-甲硫基-4-(四氢呋喃-3-基氨基)-嘧啶-5-羧酸乙酯无色粘稠油状物。(产量1.0g，92％)。
C12H17N3O3S[M+]的HRMS m/z计算值283.0991。实测283.0989。
实施例11b(R)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-1-(四氢呋喃-3-基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮手性 向0℃下的(R)-2-甲硫基-4-(四氢呋喃-3-基氨基)-嘧啶-5-羧酸乙酯(1.0g，3.55mmol)(来自上述实施例11a)的无水四氢呋喃(60mL)溶液中分批加入固体氢化铝锂(400mg，10.65mmol)(Aldrich)。让所得到的浆液缓慢升温到室温。搅拌过夜后，将浆液缓慢倒入剧烈搅拌的乙酸乙酯和饱和酒石酸钠钾溶液的混合液中。分离有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到粗制的还原产物。将该粗制的中间体溶解在二氯甲烷(30mL)中并用二氧化锰(2.9g，34.27mmol)(Aldrich)处理。搅拌2小时后，过滤固体，用四氢呋喃(约30mL)洗涤，浓缩合并的滤液，并将残余物溶解在甲苯(40mL)中。然后将该溶液用对-茴香胺(470mg，3.77mmol)(Aldrich)处理，加入催化量的一水合对甲苯磺酸(Aldrich)，并使用Dean-Stark装置将混合物在回流下加热3小时。然后将混合物冷却并在乙酸乙酯和饱和碳酸钾水溶液之间分配。收集乙酸乙酯层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，然后将残余物溶解在四氢呋喃(40mL)中。将所得到的溶液在0℃下用氢化铝锂(390mg，10.28mmol)(Aldrich)处理。将浆液缓慢升温到室温，搅拌13.5小时后缓慢倒入剧烈搅拌的乙酸乙酯和饱和酒石酸钠钾水溶液的混合液中。分离有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，并将所得到的残余物用硅胶柱色谱纯化，使用0-70％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱。将该步纯化分离的中间体溶解在四氢呋喃(50mL)中。加入三乙胺(1mL)(Aldrich)，并将溶液冷却到0℃。接着滴加20％的光气的甲苯溶液(1.3mL，2.71mmol)(Fluka)，并在0℃下搅拌1.5小时。然后将混合物在乙酸乙酯和水之间分配。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，残余物用0-40％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱的硅胶柱色谱纯化。将该步纯化分离的中间体溶解在四氢呋喃(50mL)中，在0℃下将所得到的溶液冷却并用3-氯过氧苯甲酸(75％，1.13g，4.93mmol)(Aldrich)处理。让反应混合物缓慢升温到室温，并在搅拌过夜后将其在乙酸乙酯和水之间分配。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物溶解在苯胺(10mL)(Aldrich)中，加入催化量的盐酸苯胺(Aldrich)，将所得到的溶液在95℃下搅拌4.5小时。然后将混合物冷却，并用硅胶柱色谱纯化，使用0-100％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱，得到产物。用戊烷研磨，得到(R)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-1-(四氢呋喃-3-基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮灰白色固体。(产量740mg，50％)。
C23H23N5O3[M+H+]的HRMS m/z计算值418.1874。实测418.1877。IC50(KDR)＝0.091μM，IC50(FGFR)＝0.257μM。
实施例12
(R)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-1-吡咯烷-3-基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮手性 将0℃的(R)-1-N-叔丁氧羰基-3-氨基吡咯烷(350mg，1.88mmol)(AstaTech Inc.)和三乙胺(1.31mL，0.95g，9.4mmol)(Aldrich)的二氯甲烷溶液(6mL)用20％的光气的甲苯溶液(1.84mL，3.76mmol)(Fluka)处理。在搅拌30分钟后，过滤反应混合物并浓缩至小体积。加入苯(5mL)，再次过滤混合物。将滤液浓缩，溶解在少量无水四氢呋喃(约3mL)中，并通过套管转移到-78℃的(2，4-二氯-嘧啶-5-基-甲基)-(4-甲氧基苯基)-胺(270mg，0.94mmol)(来自上述实施例1d)和正丁基锂(2.5M己烷溶液，380μL，0.94mmol)(Aldrich)的无水四氢呋喃(12mL)溶液中。让反应混合物缓慢升温到室温，搅拌过夜，然后在乙酸乙酯和水之间分配。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，并将所得到的残余物用硅胶柱色谱纯化，使用0-70％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱。然后将该步纯化获得的中间体溶解在苯胺(2mL)(Aldrich)中，加入催化量的盐酸苯胺(Aldrich)，并将溶液在85℃下搅拌8小时。然后冷却混合物，并用0-70％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱的硅胶柱色谱纯化。在0℃下将该步纯化的产物溶解在含有水(300μL)的50％三氟乙酸的二氯甲烷溶液(6mL)中，并搅拌1.5小时。然后将反应混合物在乙酸乙酯和0.5N氢氧化钠水溶液之间分配。通过加入固体氢氧化钠将水层的pH调节到12。然后收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩至粗产物，将该粗产物用硅胶柱色谱纯化，使用0-100％甲醇的四氢呋喃溶液到0-20％三乙胺的甲醇溶液梯度洗脱。将含有产物的部分浓缩成固体，然后将其溶解在二氯甲烷(约5mL)中。过滤溶液，并用过量戊烷处理，沉淀出(R)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-1-吡咯烷-3-基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮灰白色固体。(产量14mg，2％)。
C23H24N6O2[M+H+]的HRMS m/z计算值417.2034。实测417.2038。IC50(KDR)＝0.190μM，IC50(FGFR)＝0.621μM。
实施例13a(±)-4-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基氨基]-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛外消旋 将4-氯-2-甲硫基-5-嘧啶羧酸盐(900mg，3.87mmol)(Aldrich)和三乙胺(1.1mL，870mg，7.74mmol)(Aldrich)的二噁烷(50mL)溶液用(±)-反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊胺(840mg，3.87mmol)(来自上述实施例9c)处理。将混合物在回流下搅拌1小时，然后冷却并在盐水和乙酸乙酯之间分配。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，将残余物用硅胶柱色谱纯化，使用0-20％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱。然后将该步纯化分离的产物溶解在无水四氢呋喃(80mL)中，并将所得到的溶液冷却到0℃。在分批加入氢化铝锂(440mg，11.61mmol)(Aldrich)后，让所得到的混合物升温至室温。在搅拌过夜后，将反应混合物缓慢倒入剧烈搅拌的乙酸乙酯和饱和酒石酸钠钾水溶液的混合液中。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤，并浓缩至灰白色固体。然后将该中间体溶解在二氯甲烷(80mL)中，将所得到的溶液用二氧化锰(3.36g，38.70mmol)(Aldrich)处理。搅拌过夜后，滤出固体，用四氢呋喃(约30mL)洗涤，浓缩合并的有机层，将残余物用0-50％乙醚的己烷溶液梯度洗脱的硅胶柱纯化，得到(±)-4-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基氨基]-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛粘稠无色油状物。(产量888mg，62％)。
C17H29N3O2SSi[M+H]+的HRMS m/z计算值368.1823。实测368.1826。
实施例13b(±)-1-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-甲硫基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮外消旋 使用Dean-Stark装置将(±)-4-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基-氨基]-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛(700mg，1.90mmol)(来自上述实施例13a)、对-茴香胺(230mg，1.90mmol)(Aldrich)和一水合对甲苯磺酸(50mg)(Aldrich)在苯中的混合物回流6小时。然后将混合物冷却并在乙酸乙酯和饱和碳酸钾水溶液之间分配。收集有机层，硫酸钠干燥，过滤并浓缩。然后将残余物溶解在无水四氢呋喃(60mL)，并向0℃的该溶液中小量分批加入氢化铝锂(216mg，5.70mmol)(Aldrich)。让形成的浆液缓慢升温到室温，在搅拌过夜后，将其缓慢倒入剧烈搅拌的乙酸乙酯和饱和酒石酸钠钾水溶液的混合液中。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物用HPLC纯化，使用50％乙醚的己烷溶液作为洗脱溶剂。将该步纯化获得的中间体溶解在二氯甲烷(100mL)中，接着加入三乙胺(500μL，660mg，6.52mmol)(Aldrich)并冷却到0℃。然后滴加20％的光气的甲苯溶液(640μL，1.31mmol)(Fluka)，将所得到的混合物在0℃下搅拌30分钟，在室温下搅拌1小时。然后将混合物在乙酸乙酯和水之间分配。分离有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，残余物用0-60％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱的硅胶柱色谱纯化，得到(±)-1-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-甲硫基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮白色固体。(产量543mg，57％)。
C25H36N4O3SSi[M+H]+的HRMS m/z计算值501.2350。实测501.2353。
实施例13c(±)-7-(4-氟-苯基氨基)-1-(反式-3-羟基-环戊基)-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 将(±)-1-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-甲硫基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(40mg，0.08mmol)(来自上述实施例13b)的四氢呋喃(6mL)溶液用3-氯过氧苯甲酸(75％，39mg，0.17mmol)(Aldrich)在室温下进行处理。搅拌3小时后，将反应混合物在乙酸乙酯和饱和碳酸钾水溶液之间分配。分离有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物溶解在4-氟苯胺(3mL)(Aldrich)，并搅拌8小时。然后将混合物冷却并用硅胶柱色谱纯化，使用0-70％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱。在0℃下将该步纯化分离的产物溶解在含有水(500μL)的20％的三氟乙酸的二氯甲烷溶液(5mL)中。在搅拌30分钟后，将反应混合物在乙酸乙酯和1N氢氧化钠水溶液之间分配。通过加入固体氢氧化钠将水层的pH调节到12。分离有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物用硅胶柱色谱纯化，使用0-100％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱，得到产物。在用过量戊烷沉淀出二氯甲烷后，分离出(±)-7-(4-氟-苯基氨基)-1-(反式-3-羟基-环戊基)-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮白色固体。(产量25mg，69％)。
C24H24FN5O3[M+H]+的HRMS m/z计算值450.1936。实测450.1940。
实施例14a2-氟-4-甲氧基苯胺
将3-氟-4-硝基苯酚(10.17g，64.7mmol)(Aldrich)溶解在二甲基甲酰胺(210mL)中。加入碳酸钾(45g，323mmol)和甲基碘(5mL，77.64mmol)(Aldrich)，将反应混合物在室温下搅拌过夜。(TLC20％乙酸乙酯的己烷溶液显示转化完全)。将反应混合物通过C盐_垫过滤并减压浓缩。用乙醚研磨粗制原料，过滤除去不溶物。将滤液减压浓缩，得到橙色固体。将该原料(11.43g)溶解在甲醇(150mL)中，在Parr仪中，在10％碳载钯(1.5g)(Aldrich)存在下，在50psi下氢化1.5小时。(TLC20％乙酸乙酯的己烷溶液显示完全转化)。将反应混合物通过C盐_过滤，用乙酸乙酯洗涤，然后减压浓缩，得到2-氟-4-甲氧基苯胺固体。(产量3.81g，26.99mmol)。
实施例14b(±)-[3-反式-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-{5-[(2-氟-4-甲氧基-苯基氨基)-甲基]-2-甲硫基-嘧啶-4-基}-胺外消旋 将(±)-4-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基-氨基]-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛(171mg，0.46mmol)(来自上述实施例13a)、一水合对甲苯磺酸(10mg)(Aldrich)和2-氟-4-甲氧基苯胺(79mg，0.56mmol)(来自上述实施例14a)在苯(30mL)中的混合物在Dean-Stark装置中回流8小时。然后将混合物冷却并在乙酸乙酯和饱和碳酸钾水溶液之间分配。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物溶解在无水四氢呋喃(50mL)中，在0℃下向该溶液小量分批加入氢化铝锂(53mg，1.40mmol)(Aldrich)。让浆液缓慢升温到室温，在搅拌过夜后，将其倒入剧烈搅拌的乙酸乙酯和饱和酒石酸钠钾水溶液的混合液中。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，残余物用硅胶柱色谱纯化，用0-60％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱，得到(±)-[3-反式-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-{5-[(2-氟-4-甲氧基-苯基氨基)-甲基]-2-甲硫基-嘧啶-4-基}-胺无色粘稠油状物。(产量187mg，83％)。
C24H37FN4O2SSi[M+H]+的HRMS m/z计算值493.2464。实测493.2472。
实施例14c(±)-1-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-甲硫基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮外消旋 向冷却到0℃的(±)-[3-反式-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-{5-[(2-氟-4-甲氧基-苯基氨基)-甲基]-2-甲硫基-嘧啶-4-基}-胺(179mg，0.36mmol)(来自上述实施例14b)和三乙胺(152μL，110mg，1.08mmol)(Aldrich)在二氯甲烷(30mL)中的混合液中滴加20％的光气的甲苯溶液(265μL，0.54mmol)(Fluka)。让所得到的混合物缓慢升温到室温并搅拌4.5小时。然后将混合物在乙酸乙酯和水之间分配。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，残余物用0-10％乙醚的甲苯溶液梯度洗脱的硅胶柱色谱纯化，得到(±)-1-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-甲硫基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮灰白色泡沫状固体。(产量84mg，45％)。
C25H35FN4O3SSi[M+H]+的HRMS m/z计算值519.2256。实测519.2263。
实施例14d(±)-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-1-(反式-3-羟基-环戊基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮外消旋 向(±)-1-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-甲硫基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(80mg，0.15mmol)(来自上述实施例14c)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入酸(75％，75mg，0.32mmol)(Aldrich)。将反应混合物搅拌5.5小时，然后在乙酸乙酯和饱和碳酸钾水溶液之间分配。分离有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，将所得到的残余物溶解在苯胺(2mL)(Aldrich)中。在90℃下搅拌该溶液8小时，然后冷却并用硅胶柱色谱纯化，使用0-50％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱。在0℃下将其溶解在含有水(300μL)的20％的三氟乙酸的二氯甲烷溶液(5mL)中。搅拌25分钟后，将混合物在乙酸乙酯和0.5N氢氧化钠水溶液之间分配。通过加入固体氢氧化钠将水层的pH调节到12。然后分离有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩至粗产物。在用0-100％乙酸乙酯的己烷溶液的硅胶柱色谱纯化，并用过量戊烷沉淀出二氯甲烷后，分离出白色固体产物(±)-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-1-(反式-3-羟基-环戊基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量45mg，65％)。C24H24FN5O3[M+H]+的HRMS m/z计算值450.1935。实测450.1941。
实施例15a(S)-3-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-2-甲基丙酸手性 将(S)-(+)-3-羟基-2-甲基丙酸甲酯(1.06g，8.99mmol)(Aldrich)溶解在二氯甲烷(10mL，经过分子筛干燥)中。加入咪唑(0.85g，12.41mmol)(Aldrich)和叔丁基二苯基甲硅烷基氯化物(2.30mL，8.85mmol)(Aldrich)，并将混合物在环境温度下搅拌3小时。将反应物用另外的二氯甲烷稀释，用水和盐水洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩，得到(S)-3-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-2-甲基-丙酸甲酯油状物。(产量3.17g，98.8％)。
将该酯(3.15g，8.85mmol)溶解在3∶1的四氢呋喃-甲醇(30mL)中，在环境温度下用氢氧化钠水溶液(1.0N，10.0mL，10.0mmol)皂化过夜。浓缩后，将残余物在乙酸乙酯和水之间分配，然后用0.5N盐酸水溶液酸化(到pH4-5)。将有机相用水和盐水洗涤，硫酸钠干燥并浓缩。用使用Biotage系统运行的多个快速色谱进行纯化。将每次运行获得的纯的部分合并并浓缩，得到(S)-3-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-2-甲基丙酸油状物，该油状物冷却时凝固成发粘的白色固体。(产量2.10g，69.2％)。
实施例15b(S)-叔丁基-2-异氰酸根合-丙氧基二苯基硅烷手性 将(S)-3-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-2-甲基丙酸(0.44g，1.20mmol)(来自上述实施例15a)溶解在二氯甲烷(3mL，经过分子筛干燥)中。加入三乙胺(0.36mL，2.58mmol)(Aldrich)，将溶液在冰-水浴冷却。滴加氯甲酸乙酯(0.16mL，1.67mmol)(Aldrich)，并将混合物在冷却条件下搅拌1小时。然后将混合物用另外的二氯甲烷稀释，用水和盐水洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩，得到粗制的混合酸酐。
向混合酸酐中间体的丙酮(4mL)溶液中加入叠氮化钠(0.25g，3.85mmol)的水(4mL)溶液。将混合物搅拌10分钟，然后用二氯甲烷和水稀释。有机相用盐水洗涤，硫酸镁干燥并浓缩，得到(S)-3-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-2-甲基丙酰基叠氮化物。
将该叠氮化物溶解在甲苯(2mL)并在120℃油浴中加热。快速剧烈地放出氮气，从而通过Curtius重排得到所需的(S)-叔丁基-2-异氰酸根合-丙氧基-二苯基硅烷。
实施例15c(S)-1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮手性 将(S)-叔丁基-2-异氰酸根合-丙氧基-二苯基硅烷(从0.55g，1.61mmol的(S)-3-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-2-甲基丙酸(来自上述实施例15b)在原位生成)在120℃的热甲苯(2.5mL)溶液中用[(2，4-二氯嘧啶-5-基)甲基](4-甲氧基-苯基)胺(0.41g，1.45mmol)(来自上述实施例1d)处理。将溶液在120℃下加热35分钟，然后冷却到室温并浓缩，得到中间体脲。
将该中间体脲溶解在无水四氢呋喃(5mL)中，并在冰-水浴中冷却。滴加叔丁醇钾(1.0M的四氢呋喃溶液，1.5mL，1.50mmol)，并在冷却条件下连续搅拌15分钟。通过硅胶垫过滤混合物并用乙酸乙酯洗脱。用快速色谱(Biotage 40M，25∶75乙酸乙酯-己烷)纯化，得到(S)-1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-4-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮，还有未环化的中间体，(S)-3-[2-叔丁基-二苯基-硅烷基氧基-1-甲基-乙基]-1-(2，4-二氯嘧啶-5-基-甲基)-1-(4-甲氧基苯基)-脲，产物和中间体脲的比率为～2∶1。
将该混合物(0.66g)溶解在无水四氢呋喃(5mL)中，并用冰-水浴冷却。向该溶液中加入叔丁醇钾(1.0M的四氢呋喃溶液，1.0mL，1.00mmol)。将混合物在冷却条件下搅拌15分钟，然后移走浴液，并继续搅拌5分钟。通过硅胶垫过滤混合物并用乙酸乙酯洗脱。用快速色谱(Biotage 40M，40∶60乙酸乙酯-己烷)纯化，得到(S)-1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量0.38g，40.2％)。
实施例15d(S)-(+)-1-(2-羟基-1-甲基-乙基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮手性 将(S)-1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(0.50g，0.85mmol)(来自上述实施例15c)和苯胺(0.50mL，5.49mmol)(Aldrich)合并，并在85℃的油浴中加热3小时。将混合物冷却到室温，用乙酸乙酯稀释并用水和盐水洗涤。将有机相用无水硫酸钠干燥并浓缩。用快速色谱(Biotage 40S，乙酸乙酯-己烷梯度洗脱[20-40％乙酸乙酯])得到(S)-1-(2-叔丁基-二苯基-硅烷基氧基-1-甲基-乙基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量0.44g，76.1％)。
将该甲硅烷基-保护的产物(0.43g，0.67mmol)溶解在无水四氢呋喃(5mL)中，用四丁基铵氟化物(1.0M的四氢呋喃溶液，2.70mL，2.70mmol)(Aldrich)在室温下处理5小时。然后将反应物浓缩。将残余物再溶解在乙酸乙酯中，并用水和盐水洗涤。将有机相用无水硫酸钠干燥并浓缩。经快速色谱(Biotage 40S，乙酸乙酯-己烷梯度洗脱[75-90％乙酸乙酯])纯化，接着在乙酸乙酯-己烷中结晶，得到(S)-(+)-1-(2-羟基-1-甲基-乙基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量0.209g，77.2％)。熔点140-147℃。
C22H23N5O3[M+H]+的HR-MS(ES+)m/z计算值406.1874。实测406.1878。IC50(KDR)＝0.042μM，IC50(FGFR)＝0106μM。
实施例16(S)-(+)-7-(4-氟-苯基氨基)-1-(2-羟基-1-甲基-乙基)-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮手性 将(S)-1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(0.38g，0.64mmol)(来自上述实施例15c)和4-氟苯胺(0.30mL，3.20mmol)(Aldrich)合并，并在95℃的油浴中加热4.5小时。将混合物冷却到室温并用己烷研磨。将油状残余物溶解在乙酸乙酯中，并用水和盐水洗涤。有机相用无水硫酸钠干燥并浓缩。用快速色谱(Biotage 40M，乙酸乙酯-己烷梯度洗脱[35-45％乙酸乙酯])纯化得到(S)-7-(4-氟-苯基氨基)-1-(2-叔丁基-二苯基-硅烷基氧基-1-甲基-乙基)-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量0.306g，72.3％)。
将(S)-7-(4-氟-苯基氨基)-1-(2-叔丁基-二苯基-硅烷基氧基-1-甲基-乙基)-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(0.30g，0.45mmol)溶解在无水四氢呋喃(3.5mL)中，用四丁基铵氟化物(1.0M的四氢呋喃溶液，1.80mL，1.80mmol)(Aldrich)在室温下处理6小时。然后浓缩反应物。将残余物再溶解在乙酸乙酯中，并用水和盐水洗涤。将有机相用无水硫酸钠干燥并浓缩。用快速色谱(Biotage 40S，乙酸乙酯-己烷梯度洗脱[60-100％乙酸乙酯])纯化，接着在乙酸乙酯-己烷中结晶，得到(S)-(+)-1-(2-羟基-1-甲基-乙基)-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量0.13g，66.2％)。熔点188-198℃。C22H22FN5O[M+H]+的HR-MS(ES+)m/z计算值424.1780。实测424.1783。
实施例17a[(2，4-二氯嘧啶-5-基)甲基]-(4-甲氧基苯基)-胺 将2，4-二氯-5-氯甲基-嘧啶(3.70g，18.7mmol)(来自上述实施例1b)、2-氟-4-甲氧基-苯胺(2.40g，17.0mmol)(来自上述实施例14a)和碳酸钾(4.70g，34.0mmol)在丙酮(100mL)中的混合物在室温下搅拌18小时。滤出沉淀物，将溶液减压浓缩。将残余物用乙酸乙酯稀释，并用水和盐水洗涤，硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。将残余物用快速色谱纯化，用乙酸乙酯-己烷(1∶4)洗脱，得到[(2，4-二氯嘧啶-5-基)甲基]-(4-甲氧基苯基)-胺。(产量3.99g，78％)。
实施例17b叔丁基-(反式-4-异氰酸根合-环己基氧基)-二甲基-硅烷
向0℃下的反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己胺(1.0g，4.36mmol)(来自上述实施例3a)和三乙胺(3.04mL，21.8mmol)(Burdick&Jackson)的二氯甲烷(30mL)溶液中一次性加入光气(～20％的甲苯溶液，6.4mL，13.1mmol)(Fluka)。将反应混合物在0℃下搅拌40分钟，接着加入0.5N盐酸水溶液(50mL)。将有机相用盐水洗涤，硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。将残余物用快速色谱纯化，用乙酸乙酯-己烷(1∶9)洗脱，得到叔丁基-(反式-4-异氰酸根合-环己基氧基)-二甲基-硅烷。(产量0.90g，81％)。
实施例17c1-[反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己基]-7-氯-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 向-78℃下的(2，4-二氯-嘧啶-5-基-甲基)-(2-氟-4-甲氧基-苯基)胺(1.1g，3.64mmol)(来自上述实施例17a)的四氢呋喃(50mL)溶液中加入正丁基锂(2.5M的己烷溶液，1.75mL，4.37mmol)(Aldrich)。在-78℃下搅拌40分钟后，加入叔丁基-(反式-4-异氰酸根合-环己基氧基)-二甲基-硅烷(1.12g，4.37mmol)(来自上述实施例17b)。将混合物在-70℃下搅拌1小时，然后在室温下搅拌3小时。将其用乙酸乙酯稀释，盐水洗涤，硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。将残余物用快速色谱纯化，用乙酸乙酯-己烷(3∶7然后2∶3)洗脱，得到1-[反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己基]-7-氯-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量0.60g，33％)。
实施例17d3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-1-(反式-4-羟基-环己基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 将1-[反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己基]-7-氯-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(0.20g，0.38mmol)(来自上述实施例17c)、对-茴香胺(61.Smg，0.50mmol)(Aldrich)和一水合对甲苯磺酸(95.1mg，0.50mmol)(Aldrich)在2-丙醇(4mL)中的混合物放入微波反应器(SmithSynthesizerTM)中。将反应混合物在160℃下加热15分钟。待冷却后，将其减压浓缩并用RP-HPLC(C-18，乙腈-水洗脱)纯化，得到3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-1-(反式-4-羟基-环己基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量0.12g，61％)。C26H28FN5O4[(M+H)+]的HRMS m/z计算值494.2198。实测494.2206。IC50(KDR)＝0.018μM，IC50(FGFR)＝0.050μM。
实施例183-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-1-(反式-4-羟基-环己基)-7-(3，4-二甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮
将1-[反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己基]-7-氯-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(0.20g，0.38mmol)(来自上述实施例17c)、4-氨基-藜芦醚(76.6mg，0.50mmol)(Aldrich)和一水合对甲苯磺酸(95.1mg，0.50mmol)(Aldrich)在2-丙醇(4mL)中的混合物放入微波反应器(SmithSynthesizerTM)中。将反应混合物在160℃下加热15分钟。待冷却后，将其减压浓缩并用RP-HPLC(C-18，乙腈-水洗脱)纯化，得到3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-1-(反式-4-羟基-环己基)-7-(3，4-二甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量0.13g，63％)。C27H30FN5O5[(M+H)+]的HRMS m/z计算值524.2304。实测524.2311。
实施例19a1-[反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 向-78℃下的[(2，4-二氯嘧啶-5-基)甲基](4-甲氧基-苯基)胺(1.0g，3.52mmol)(来自上述实施例1d)的四氢呋喃(50mL)溶液中加入正丁基锂(2.5M己烷溶液，1.7mL，4.22mmol)(Aldrich)。在-78℃下搅拌20分钟后，加入叔丁基-(反式-4-异氰酸根合-环己基氧基)-二甲基-硅烷(1.1g，4.22mmol)(来自上述实施例17b)。将混合物在-70℃下搅拌1小时，然后在室温下搅拌3小时。将反应混合物用乙酸乙酯稀释，盐水洗涤，硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。将残余物用快速色谱纯化，用乙酸乙酯-己烷(3∶7然后2∶3)洗脱，得到1-[反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量0.61g，34％)。
实施例19b1-[反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-(3，4-二甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 将1-[反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(0.20g，0.40mmol)(来自上述实施例19a)和4-氨基-藜芦醚(80.0mg，0.52mmol)(Aldrich)在2-丙醇(4mL)中的混合物放入微波反应器(SmithSynthesizerTM)中。将反应混合物在160℃下加热10分钟。待冷却后，将其减压浓缩。将残余物用快速色谱纯化，乙酸乙酯-己烷(3∶7然后2∶3)洗脱，得到1-[反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-(3，4-二甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(产量0.09g，36％)。
实施例19c3-(4-甲氧基-苯基)-1-(反式-4-羟基-环己基)-7-(3，4-二甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 在0℃下向1-[反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-(3，4-二甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(90mg，0.24mmol)(来自上述实施例19b)的二氯甲烷溶液(5mL)中加入三氟乙酸(2.0mL)(Aldrich)。将混合物在0℃下搅拌2小时。将反应混合物用乙酸乙酯(15mL)稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。将残余物用乙酸乙酯洗脱的快速色谱纯化，得到粗产物，将该粗产物在乙酸乙酯-己烷中重结晶，得到3-(4-甲氧基-苯基)-1-(反式-4-羟基-环己基)-7-(3，4-二甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量41mg，59％)。
C27H31N5O5[(M+H)+]的HRMS m/z计算值506.2398。实测506.2404。
实施例20a1-[反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮
将1-[反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(0.20g，0.40mmol)(来自上述实施例19a)和对-茴香胺(63.6mg，0.52mmol)(Aldrich)在2-丙醇(4mL)中的混合物放入微波反应器(SmithSynthesizerTM)中。将反应混合物在160℃下加热10分钟。待冷却后，将其减压浓缩。将残余物用快速色谱纯化，乙酸乙酯-己烷(3∶7然后2∶3)洗脱，得到1-[反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量0.14g，58％)。
实施例20b3-(4-甲氧基-苯基)-1-(反式-4-羟基-环己基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 在0℃下向1-[反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(0.14g，0.15mmol)(来自上述实施例20a)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入三氟乙酸(2.5mL)。将混合物在0℃下搅拌2小时。将反应混合物用乙酸乙酯(15mL)稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。将残余物用快速色谱纯化，乙酸乙酯洗脱，得到粗产物，将该粗产物在乙酸乙酯-己烷中重结晶得到3-(4-甲氧基-苯基)-1-(反式-4-羟基-环己基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量61mg，55％)。
C26H29N5O4[(M+H)+]的HRMS m/z计算值476.2293。实测476.2299。IC50(KDR)＝0.041μM，IC50(FGFR)＝0.023μM。
实施例21a(S)-1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-7-氯-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 将120℃下的(S)-叔丁基-2-异氰酸根合-丙氧基-二苯基硅烷[从1.05g，3.07mmol的(S)-3-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-2-甲基丙酸(来自上述实施例15b)在原位产生]的热甲苯(5mL)溶液用(2，4-二氯-嘧啶-5-基甲基)-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-胺(0.84g，2.77mmol)(来自上述实施例17a)处理。将该溶液在120℃下加热40分钟，然后冷却到室温并浓缩，得到粗制的(S)-3-[2-叔丁基-二苯基-硅烷基氧基-1-甲基-乙基]-1-(2，4-二氯嘧啶-5-基-甲基)-1-(2-氟-4-甲氧基苯基)-脲。将该脲溶解在无水四氢呋喃(10mL)中并用冰-水浴冷却。滴加叔丁醇钾(1.0M的四氢呋喃溶液，3.2mL，3.20mmol)(Aldrich)。将混合物在冷却条件下搅拌15分钟，然后移走浴液，并继续搅拌5分钟。将混合物通过硅胶垫过滤，用乙酸乙酯洗脱。粗产物的NMR显示产物和未环化的中间体的比率为～2∶1，所述未环化的中间体为(S)-3-[2-叔丁基-二苯基-硅烷基氧基-1-甲基-乙基]-1-(2，4-二氯嘧啶-5-基-甲基)-1-(2-氟-4-甲氧基苯基)-脲。
将粗混合物再溶解在无水四氢呋喃(10mL)中，并用冰-水浴冷却。加入叔丁醇钾(1.0M的四氢呋喃溶液，1.5mL，1.50mmol)(Aldrich)，将混合物在冷却条件下搅拌15分钟。移走冷却浴，并继续搅拌5分钟。将混合物通过硅胶垫过滤，用乙酸乙酯洗脱。经快速色谱(Biotage 40S，乙酸乙酯-己烷梯度洗脱[25-38％乙酸乙酯])纯化，得到(S)-1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-7-氯-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量0.53g，31.7％)。
部分(S)-1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-7-氯-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮仍然含有约20％的中间体脲。将该原料通过用叔丁醇钾(1.0M的四氢呋喃溶液，0.65mL，0.65mmol)再次处理循环利用，得到(S)-1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-7-氯-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量0.19g，11.2％)。
实施例21b(S)-(+)-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-(4-氟-苯基氨基)-1-(2-羟基-1-甲基-乙基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮手性 将(S)-1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-7-氯-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(0.40g，0.66mmol)(来自上述实施例21a)和4-氟苯胺(0.50mL，5.28mmol)(Aldrich)合并，并在105℃的油浴中加热2小时。将混合物冷却到室温，用己烷研磨。然后将不溶残余物置于乙酸乙酯中，滤出盐酸苯胺。将滤液用快速色谱(Biotage 40S，30∶70乙酸乙酯-己烷)纯化。将不纯部分通过另一快速色谱再循环利用。这样纯化的材料仍然被少量4-氟苯胺所污染。将该污染物通过再用己烷研磨而除去，得到(S)-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-(4-氟-苯基氨基)-1-(2-叔丁基-二苯基-硅烷基氧基-1-甲基-乙基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量0.34g，71.8％)。
将(S)-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-(4-氟-苯基氨基)-1-(2-叔丁基-二苯基-硅烷基氧基-1-甲基-乙基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(0.33g，0.46mmol)溶解在无水四氢呋喃(3.5mL)中，并用四丁基铵氟化物(1.0M的四氢呋喃溶液，1.90mL，1.90mmol)(Aldrich)处理。将反应物在保持在25-35℃范围内的水浴中搅拌。4小时后反应完全，将反应物浓缩。将残余物再溶解在乙酸乙酯中，并用水和盐水洗涤。将有机相用无水硫酸钠干燥并浓缩。用快速色谱(Biotage 40S，75∶25乙酸乙酯-己烷)纯化，接着在乙酸乙酯-己烷中结晶，得到(S)-(+)-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-(4-氟-苯基氨基)-1-(2-羟基-1-甲基-乙基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮白色固体。(产量0.18g，83.5％)。熔点173-177℃。
C22H21F2N5O3[M+H]+的HR-MS(ES+)m/z计算值442.1685。实测442.1691。
实施例22(S)-(+)-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-1-(2-羟基-1-甲基-乙基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 将(S)-1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-7-氯-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(0.30g，0.50mmol)(来自上述实施例21a)溶解在甲苯(0.5mL)中，并在105℃的油浴中用对-茴香胺(0.15g，1.19mmol)处理。2小时后，仍存在相当数量的原材料。加入另外的对-茴香胺(0.11g，0.92mmol)，并再继续加热2小时。然后将混合物冷却到室温，并用己烷研磨，以除去过量的对-茴香胺。将不溶残余物用快速色谱(Biotage 40M，乙酸乙酯-己烷梯度洗脱[25-40％乙酸乙酯])纯化。该纯化材料仍被少量对-茴香胺污染。将该污染物通过用己烷再次研磨除去，得到(S)-3-(2-氟-4-甲氧基苯基)-1-(2-叔丁基-二苯基-硅烷基氧基-1-甲基-乙基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量0.26g，72.2％)。
将(S)-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-1-(2-叔丁基-二苯基-硅烷基氧基-1-甲基-乙基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(0.25g，0.35mmol)溶解在无水四氢呋喃(2.5mL)中，并用四丁基铵氟化物(1.0M的四氢呋喃溶液，1.40mL，1.400mmol)处理。将反应物在保持在30-40℃范围内的水浴中搅拌。4小时后反应完全，将反应物浓缩。将残余物再溶解在乙酸乙酯中，并用水和盐水洗涤。将有机相用无水硫酸钠干燥并浓缩，然后用快速色谱(Biotage 40S，75∶25乙酸乙酯-己烷)纯化，得到(S)-(+)-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-1-(2-羟基-1-甲基-乙基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮浅黄色泡沫。(产量0.14g，85.1％)。
C23H24FN5O4[M+H]+的HR-MS(ES+)m/z计算值454.1885。实测454.1890。
IC50(KDR)＝0.045μM，IC50(FGFR)＝0.111μM。
实施例23a(R)-3-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-2-甲基丙酸手性 将(R)-(-)-3-羟基-2-甲基丙酸甲酯(0.82g，6.92mmol)(Aldrich)溶解在二氯甲烷(8mL，经过分子筛干燥)中。加入咪唑(0.67g，9.68mmol)(Aldrich)。当全都溶解时，加入叔丁基二苯基甲硅烷基氯化物(1.80mL，6.92mmol)(Aldrich)，并将混合物在环境温度下搅拌3小时。将反应物用另外的二氯甲烷稀释，用水和盐水洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩，得到(R)-3-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-2-甲基-丙酸甲酯油状物。(产量2.42g，98％)。
将(R)-3-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-2-甲基-丙酸甲酯(2.42g，7.05mmol)溶解在3∶1的四氢呋喃-甲醇(24mL)中，用氢氧化钠水溶液(1.0N，7.9mL，7.90mmol)在40℃下皂化3小时，然后在环境温度下过夜。浓缩反应混合物。将残余物溶解在乙酸乙酯中，然后用1.0N盐酸水溶液(～8mL)酸化。将有机相用盐水(3x)洗涤，用无水硫酸钠干燥并浓缩。经过快速色谱(Biotage 40L，20∶80乙酸乙酯-己烷)纯化，得到(R)-3-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-2-甲基丙酸油状物，该油状物凝固成粘稠的白色固体。(产量1.60g，67.6％)。
实施例23b(R)-叔丁基-2-异氰酸根合-丙氧基二苯基硅烷手性 将(R)-3-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-2-甲基丙酸(0.51g，1.48mmol)(来自上述实施例23a)溶解在二氯甲烷(4mL，经过分子筛干燥)中。加入三乙胺(0.42mL，2.98mmol)(Aldrich)，并将溶液在冰-水浴中冷却。滴加氯甲酸乙酯(0.17mL，1.78mmol)(Aldrich)，将混合物在冷却条件下搅拌50分钟。将反应混合物另加二氯甲烷稀释，并用水然后是盐水洗涤。将有机相用硫酸钠干燥并浓缩，得到混合酸酐。
向该混合酸酐的丙酮(5mL)溶液中加入叠氮化钠(0.29g，4.41mmol)(Aldrich)的水(5mL)溶液。将混合物在室温下搅拌10分钟，然后另加二氯甲烷和水稀释。有机相用盐水洗涤，硫酸镁干燥并浓缩，得到(R)-3-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-2-甲基丙酰基叠氮化物。
将(R)-3-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-2-甲基丙酰基叠氮化物溶解在甲苯(～5mL，用4A分子筛干燥)，并在120℃的油浴中加热。剧烈的氮气快速放出，导致通过Curtius重排得到(R)-叔丁基-2-异氰酸根合-丙氧基-二苯基硅烷。将该混合物不经进一步纯化直接使用。
实施例23c(R)-1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮手性 将120℃的(R)-叔丁基-2-异氰酸根合-丙氧基-二苯基硅烷[从0.51g，1.48mmol的(R)-3-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-2-甲基丙酸]在原位生成]的热甲苯(～5mL)溶液(来自上述实施例23b)用[(2，4-二氯嘧啶-5-基)甲基](4-甲氧基苯基)胺(0.38g，1.34mmol)(来自上述实施例1d)处理。将溶液在120℃下加热45-50分钟，然后冷却到室温并浓缩，得到中间体脲。
将粗制的脲中间体溶解在无水四氢呋喃(5mL)中，并用冰-水浴冷却。在约5分钟内滴加叔丁醇钾(1.0M的四氢呋喃溶液，1.4mL，1.4mmol)(Aldrich)。将混合物在冷却条件下搅拌15分钟，然后除去冷却浴，再继续搅拌3-4分钟。将混合物通过硅胶塞过滤，用乙酸乙酯洗脱。粗产物用快速色谱(Biotage 40M，乙酸乙酯-己烷梯度洗脱[30-40％乙酸乙酯])纯化，得到(R)-1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮泡沫。(产量0.57g，62.4％)。
实施例23d(R)-(-)-1-(2-羟基-1-甲基-乙基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮手性
将1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(0.56g，0.92mmol)(来自上述实施例23c)和苯胺(0.50mL，5.49mmol)(Aldrich)合并，并在110℃的油浴中加热1.5小时。将混合物冷却到室温，并在己烷中研磨。将残余物溶解在乙酸乙酯中，过滤除去不溶的盐酸苯胺。将滤液用快速色谱(Biotage 40M，40∶60乙酸乙酯-己烷)纯化。产物仍被少量苯胺污染。将该污染物再用己烷研磨除去，得到(R)-1-(2-叔丁基-二苯基-硅烷基氧基-1-甲基-乙基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量0.55g，89.1％)。
将(R)-1-(2-叔丁基-二苯基-硅烷基氧基-1-甲基-乙基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(0.55g，0.80mmol)溶解在无水四氢呋喃(6mL)中，并用四丁基铵氟化物(1.0M的四氢呋喃溶液，3.2mL，3.20mmol)(Aldrich)在40℃下处理3小时，然后在室温下处理2小时。浓缩反应物。将残余物再溶解在乙酸乙酯中，并用水和盐水洗涤。将有机相用无水硫酸钠干燥并浓缩。用快速色谱(Biotage 40M，乙酸乙酯-己烷梯度洗脱[75-85％乙酸乙酯])纯化，接着在乙酸乙酯-己烷中结晶，得到(R)-(-)-1-(2-羟基-1-甲基-乙基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮白色固体。(产量0.26g，79.9％)。熔点156-163℃。
C22H23N5O3[M+H]+的HR-MS(ES+)m/z计算值406.1874。实测406.1878。
实施例24a3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 向[(2，4-二氯嘧啶-5-基)甲基](4-甲氧基-苯基)胺(2.84g，10.0mmol)(来自上述实施例1d)在叔丁基甲基醚(30mL)中的悬浮液中加入异氰酸苯甲酰酯(90％，1.80g，11.0mmol)(Aldrich)，将反应混合物在回流条件下加热过夜。将反应混合物减压浓缩，得到粗制的脲衍生物，将该脲衍生物溶解在无水四氢呋喃(20mL)中，并将溶液冷却到0℃。向溶液中加入叔丁醇钾(1.0M的四氢呋喃溶液，10mL，10.0mmol)(Aldrich)，并将反应混合物在室温下搅拌4小时。然后将反应混合物用乙酸乙酯(150mL)稀释，用饱和氯化铵水溶液(50mL)、水(30mL)和盐水(30mL)依次洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。将残余物用快速柱纯化，得到一氯化物白色固体。(产量1.15g，29.1％，两步)。
将该一氯化物(0.40g，1.0mmol)和苯胺(0.28g，3.0mmol)(Aldrich)的混合物在120℃下加热10分钟。然后将反应混合物用乙酸乙酯(50mL)和水(30mL)稀释。过滤这样获得的悬浮液并收集固体，用丙酮、乙酸乙酯和乙醚洗涤，得到3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮白色固体。(产量201mg，57.9％)。将滤液在减压条件下部分浓缩并过滤，得到1-苯甲酰基-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮白色固体。(产量86.0mg，19.0％)。
实施例24b3-(4-甲氧基-苯基)-1-甲基-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 方法A向3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(34.7mg，0.1mmol)(来自上述实施例24a)在四氢呋喃(5mL)中的悬浮液中加入氢化钠(60％，10mg，0.25mmol)(Aldrich)，接着一次性加入甲基碘(0.032mL，0.5mmol)(Aldriich)。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后在回流下加热5小时。然后用饱和氯化铵水溶液淬灭反应，并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。过滤合并的有机萃取物，得到3-(4-甲氧基-苯基)-1-甲基-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮白色固体。(产量20.9mg，57.9％)。
方法B向[(2，4-二氯嘧啶-5-基)甲基](4-甲氧基-苯基)胺(198mg，0.7mmol)(来自上述实施例1d)的正丁醇(5mL)溶液中加入甲胺(20％的甲醇溶液，0.7mL，1.4mmol)(Aldrich)，接着一次加入N，N-二异丙基乙胺(130mg)(Aldrich)。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后用水淬灭，并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机萃取物依次用水(10mL)和盐水(10mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到粗制的一氯化物无色油状物，该油状物不经进一步纯化直接用于下一步。
向该粗制一氯化物(195mg，0.7mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液中加入三乙胺(0.3mL，2.1mmol)(Aldrich)，接着滴加光气的甲苯溶液(20％溶液，0.5mL，0.98mmol)(Fluka)。将反应混合物在室温下搅拌15分钟。然后将反应混合物倒入冰-冷的水(50mL)中，并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机萃取物依次用水(10mL)和盐水(10mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到粗制的中间体，将该中间体再溶解在二氯甲烷(5mL)中，并在4-(二甲基氨基)吡啶(20mg)(Aldrich)存在下加热回流过夜。将反应混合物用水淬灭，并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机萃取物依次用水(10mL)和盐水(10mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到粗产物，将该粗产物用制备型薄层色谱纯化，得到7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量79mg，37％，3步)。
将7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(65mg，0.21mmol)的苯胺(1.0mL)(Aldrich)混合物加热到120℃1小时。待冷却后，将反应混合物用己烷(100mL×4)洗涤，在乙酸乙酯-己烷中重结晶粗产物，得到3-(4-甲氧基-苯基)-1-甲基-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮灰白色固体。(产量76.0mg，98.7％)。
实施例251-(2-甲氧基-乙氧甲基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 向3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(70mg，0.2mmol)(来自上述实施例24a)的四氢呋喃(10mL)悬浮液中加入氢化钠(60％，20mg，0.5mmol)(Aldrich)，接着一次加入2-甲氧基乙氧基甲基氯化物(0.032mL，2.4mmol)(Aldrich)。将反应混合物在回流下加热5小时，得到黄色溶液。然后用饱和氯化铵水溶液淬灭反应，并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。过滤合并的有机萃取物，得到原材料，为白色固体(33.1mg，47.1％)，将滤液依次用水(10mL)和盐水(10mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到粗产物，将该粗产物用制备型薄层色谱纯化，得到1-(2-甲氧基-乙氧甲基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮白色无定形固体。(产量30.5mg，35.0％)。
实施例263-[-3-(4-甲氧基-苯基)-2-氧代-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-1-基]-丙腈
向[(2，4-二氯嘧啶-5-基)甲基](4-甲氧基苯基)胺(198mg，0.7mmol)(来自上述实施例1d)的正丁醇(5mL)溶液中加入3-氨基丙腈(98mg，1.4mmol)(Fluorochem Ltd.)，接着一次加入N，N-二异丙基乙胺(0.13mL)(Aldrich)。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后用水淬灭，并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机萃取物依次用水(10mL)和盐水(10mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到粗制的一氯化物无色油状物(产量220mg)，将该一氯化物不经进一步纯化地用于下一步骤。
向0℃下的该粗制一氯化物(212mg)的二氯甲烷(20mL)溶液中加入三乙胺(0.29mL，2.1mmol)(Aldrich)，接着滴加光气的甲苯溶液(20％溶液，1.44mL，2.94mmol)(Fluka)。将反应混合物在0℃下搅拌10分钟，然后在室温下搅拌1.5小时。然后将反应混合物倒入冰-冷的水(50mL)中，并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机萃取物依次用水(10mL)和盐水(10mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到粗制中间体。将该中间体溶解在二氯甲烷(5mL)中，并在4-(二甲基氨基)吡啶(120mg，0.98mmol)(Aldrich)存在下加热回流1.5小时。将反应混合物用水淬灭，用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机萃取物依次用水(10mL)和盐水(10mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到粗产物，将该粗产物用制备型薄层色谱纯化，得到7-氯-1-环丙基甲基-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量104mg，43.2％，3步)。
将7-氯-1-环丙基甲基-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(104mg，0.30mmol)在苯胺(2.0mL)(Aldrich)中的混合物加热到120℃1.5小时。待冷却后，将反应混合物用己烷(4×100mL)洗涤，粗产物通过在甲醇-乙酸乙酯中重结晶纯化，得到3-[-3-(4-甲氧基-苯基)-2-氧代-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-1-基]-丙腈白色固体。(产量111mg，91.7％)。
实施例27a(-)-(1R，4S)-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊-2-烯醇
向(1R，3S)-(+)-4-环戊烯-1，3-二醇1-乙酸酯(1.0g，7.03mmol)(Aldrich)和咪唑(960mg，14.06mmol)(Aldriich)的四氢呋喃(35mL)溶液中加入叔丁基二甲基甲硅烷基氯化物(1.27g，8.44mmol)(Aldrich)。让混合物缓慢升温至室温，搅拌过夜，然后在乙酸乙酯和水之间分配。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，将残余物溶解在甲醇(45mL)中。向该溶液中加入碳酸钾(1.17g，8.44mmol)，并将混合物搅拌过夜。次日早上将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，残余物用硅胶柱色谱纯化，用0-30％乙醚的己烷溶液梯度洗脱，得到(-)-(1R，4S)-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊-2-烯醇无色油状物。(产量1.29g，85％)。
C11H22O2Si[M+Na]+的HRMS m/z计算值237.1281。实测237.1284。
实施例27b(-)-(1S，3R)-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊醇 将(-)-(1R，4S)-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊-2-烯醇(1.2g，5.6mmol)(来自上述实施例27a)和Wilkinson催化剂(520mg，0.56mmol)(Aldrich)的甲苯(30ml)溶液在大气压下氢化16小时。将反应混合物过滤，并在乙酸乙酯和水之间分配。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。所得到的残余物用硅胶柱色谱纯化，使用0-30％乙醚的己烷溶液梯度洗脱，得到(-)-(1S，3R)-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊醇无色油状物。(产量790mg，65％).
C11H24O2Si[M+Na]+的HRMS m/z计算值239.1438。实测239.1441。
实施例27c(-)-(1R，3R)-(3-叠氮基-环戊基氧基)-叔丁基-二甲基-硅烷 向在0℃下冷却的(-)-(1S，3R)-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊醇(670mg，3.09mmol)(来自上述实施例27b)和三苯膦(1.06g，4.02mmol)(Aldrich)在无水四氢呋喃(60mL)中的混合物中滴加偶氮二羧酸二乙酯(640μL，0.70g，4.02mmol)(Aldrich)。2到3分钟后，接着滴加二苯基磷酰基叠氮化物(860μL，1.1g，4.02mmol)(Aldrich)。让混合物缓慢升温到室温，在搅拌过夜后，在乙酸乙酯和水之间分配。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，残余物用硅胶柱色谱纯化，使用0-20％乙醚的己烷溶液梯度洗脱，得到(-)-(1R，3R)-(3-叠氮基-环戊基氧基)-叔丁基-二甲基-硅烷无色液体。(产量540mg，72％)。
实施例27d(+)-(1R，3R)-4-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基氨基]-2-甲硫基-嘧啶-5-羧酸乙酯
向(-)-(1R，3R)-(3-叠氮基-环戊基氧基)-叔丁基-二甲基-硅烷(540mg，2.24mmol)(来自上述实施例27c)的乙醇(30mL)溶液中加入氧化铂(51mg，0.22mmol)(Aldrich)，将混合物在1大气压的氢气下氢化过夜。然后过滤混合物，固体用四氢呋喃(约25mL)洗涤，浓缩合并的滤液，将残余物溶解在二噁烷(50mL)中。向该溶液中加入三乙胺(620μL，450mg，4.48mmol)(Aldrich)和4-氯-2-甲硫基-5-嘧啶羧酸乙酯(520mg，2.24mmol)(Aldrich)，并将混合物在回流下搅拌1小时。然后将反应混合物冷却，并在乙酸乙酯和水之间分配。收集乙酸乙酯层，用硫酸钠干燥并浓缩，残余物用0-20％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱的硅胶柱色谱纯化，得到(+)-(1R，3R)-4-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基氨基]-2-甲硫基-嘧啶-5-羧酸乙酯无色粘稠油状物。(产量710mg，77％)。
实施例27e(-)-(1R，3R)-1-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮手性 向0℃下的(+)-(1R，3R)-4-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基氨基]-2-甲硫基-嘧啶-5-羧酸乙酯(710mg，1.73mmol)(来自上述实施例27d)在无水四氢呋喃(50mL)中的混合物中分批加入氢化铝锂(196mg，5.19mmol)(Aldrich)。让所得到的浆液缓慢升温到室温，在搅拌5.5小时后，分批倒入剧烈搅拌的乙酸乙酯和饱和酒石酸钠钾水溶液的混合液中。然后收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩至固体残余物，将其溶解在二氯甲烷(50mL)中。向该溶液中加入二氧化锰(1.5g，17.30mmol)(Aldrich)，将所得到的浆液搅拌3.5小时，然后过滤。固体用四氢呋喃(约30mL)洗涤，浓缩合并的滤液，并将残余物溶解在苯(60mL)中。将该溶液用对-茴香胺(180mg，1.49mmol)(Aldrich)和一水合对甲苯磺酸(25mg)(Aldrich)处理，使用Dean Stark装置回流过夜。然后将混合物冷却，在乙酸乙酯和水之间分配，收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物溶解在无水四氢呋喃(50mL)中，将所得到的溶液在0℃下冷却。向该溶液中少量多次加入氢化铝锂(150mg，4.08mmol)，并让形成的浆液缓慢升温到室温。在搅拌过夜后，将浆液分批倒入乙酸乙酯和饱和酒石酸钠钾水溶液的混合液中。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，残余物用硅胶柱色谱纯化，用0-30％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱。然后将该步纯化获得的中间体溶解在二氯甲烷(80mL)中，将该溶液用三乙胺(490μL，0.35g，3.47mmol)(Aldrich)处理，并在0℃下冷却。接着滴加20％的光气的甲苯溶液(570μL，1.16mmol)(Fluka)。将反应混合物在0℃下搅拌20分钟，在室温下搅拌1小时，然后在乙酸乙酯和水之间分配。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物用0-30％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱的硅胶柱色谱纯化。将该步纯化的中间体溶解在四氢呋喃(50mL)中。然后将该溶液用3-氯过氧-苯甲酸(75％，320mg，1.43mmol)(Aldrich)处理，搅拌过夜，并在乙酸乙酯和饱和碳酸钾水溶液之间分配。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩至固体残余物。将该残余物溶解在苯胺(3mL)(Aldrich)中，并在75℃下搅拌16.5小时。然后将混合物冷却，用硅胶柱色谱纯化，用0-20％乙醚的甲苯溶液梯度洗脱，得到(-)-(1R，3R)-1-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮灰白色固体。(产量152mg，68％)。
C30H39N5O3Si[M+H]+的HRMS m/z计算值546.2895。实测546.2901。
实施例27f(+)-(1R，3R)-1-(3-羟基-环戊基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮手性 在0℃下将(-)-(1R，3R)-1-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(148mg，0.27mmol)(来自上述实施例27e)溶解在含有水(300μL)的25％的三氟乙酸的二氯甲烷(5mL)溶液中。在搅拌30分钟后，将反应混合物在乙酸乙酯和0.5N氢氧化钠水溶液之间分配。通过加入固体氢氧化钠将水层的pH调节到12。然后收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到粗产物。用硅胶柱色谱纯化，使用0-100％乙酸乙酯的己烷溶液到0-40％四氢呋喃的乙酸乙酯溶液梯度洗脱，接着用过量戊烷沉淀出二氯甲烷，得到(+)-(1R，3R)-1-(3-羟基-环戊基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮白色固体。(产量92mg，86％)。
C24H25N5O3[M+H]+的HRMS m/z计算值432.2030。实测432.2035。IC50(KDR)＝0.013μM，IC50(FGFR)＝0.035μM。
实施例28a(R)-3-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-丁酸 将(R)-(-)-3-羟基丁酸甲酯(0.31g，2.61mmol)(Aldrich)溶解在二氯甲烷(3.5mL，经过分子筛干燥)中。加入咪唑(0.25g，3.66mmol)(Aldrich)。当全都溶解时，滴加叔丁基二苯基甲硅烷基氯化物(0.69mL，2.63mmol)(Aldrich)，并将混合物在室温下搅拌4.5小时。将反应混合物另加二氯甲烷稀释，用水(2×)和盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。用快速色谱(Biotage 40M，5∶95乙酸乙酯-己烷)纯化，得到(R)-3-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-丁酸甲酯。(产量0.85g，91.2％)。
将被保护的酯(0.84g，2.36mmol)溶解在3∶1四氢呋喃-甲醇中，用氢氧化钠水溶液(1.0N，3.0mL，3.00mmol)在～42℃处理过夜。浓缩反应物。将残余物在乙酸乙酯和水之间分配，并用1N盐酸水溶液酸化。有机相用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。用快速色谱(Biotage 40M，20∶80乙酸乙酯-己烷)纯化，得到(R)-3-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-丁酸。(产量0.63g，69.9％)。
实施例28b(R)-叔丁基-(2-异氰酸根合-1-甲基-乙氧基)-二苯基-硅烷 将(R)-3-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-丁酸(0.81g，2.25mmol)(来自上述实施例28a)溶解在二氯甲烷(8mL，经过分子筛干燥)中。加入三乙胺(0.63mL，4.52mmol)(Aldrich)，将所得到的溶液在冰-水浴中冷却。然后滴加氯甲酸乙酯(0.26mL，2.72mmol)(Aldrich)，将混合物在冷却条件下搅拌50分钟。将反应混合物另加二氯甲烷稀释，用水和盐水洗涤。将有机相用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到中间体混合酸酐。
将该中间体混合酸酐溶解在丙酮(8mL)中，用叠氮化钠溶液(0.44g，6.76mmol)(Aldrich)处理。在室温下搅拌10分钟后，将反应物用二氯甲烷和水稀释。有机相用盐水洗涤，硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到(R)-3-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-丁酰叠氮化物。将该粗制的叠氮化物溶解在甲苯(6mL)中，在120℃的油浴中加热。剧烈的氮气快速放出，导致通过Curtius重排得到所需的(R)-叔丁基-(2-异氰酸根合-1-甲基-乙氧基)-二苯基-硅烷。该原料原样用于下一步骤中。
实施例28c(R)-1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-丙基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮手性 将(R)-叔丁基-(2-异氰酸根合-1-甲基-乙氧基)-二苯基-硅烷(从0.81g，2.25mmol的(R)-3-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-丁酸在原位产生)(来自上述实施例28b)的热甲苯(6mL)溶液用[(2，4-二氯嘧啶-5-基)甲基](4-甲氧基苯基)胺(0.57g，2.02mmol)(来自上述实施例1d)处理。将溶液在120℃加热45分钟，然后冷却到室温并浓缩，得到中间体脲。
将该脲溶解在无水四氢呋喃(7.5mL)中，并在冰-盐水浴中冷却。滴加叔丁醇钾(1.0N的四氢呋喃溶液，2.15mL，2.15mmol)(Aldrich)。将混合物在冷却条件下搅拌15分钟，然后移走浴液，再继续搅拌5分钟。将反应混合物通过硅胶垫过滤，用乙酸乙酯洗脱。经快速色谱(Biotage 40M，乙酸乙酯-己烷梯度洗脱[20-40％乙酸乙酯])纯化，得到所需的中间体，该中间体被未环化的脲中间体所污染。
将纯化的混合物(1.02g)溶解在无水四氢呋喃(6mL)中，并如上再用叔丁醇钾(1.4mL，1.40mmol)处理。(Biotage 40M，乙酸乙酯-己烷梯度洗脱(30-40％乙酸乙酯)纯化得到(R)-1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-丙基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量0.78g，65.0％)。
实施例28d
(R)-1-(2-羟基-丙基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮手性 将(R)-1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-丙基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(0.71g，1.15mmol)(来自上述实施例28c)和苯胺(1.00mL，10.97mmol)(Aldrich)合并，在110℃的油浴中加热75分钟。待冷却到室温后，将残余物用己烷研磨。丢弃上清液，将残余物溶解在乙酸乙酯中，用水和盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。用快速色谱(Biotage 40M，乙酸乙酯-己烷梯度洗脱[20-40％乙酸乙酯])纯化，得到中间体(R)-1-(2-叔丁基-二苯基-硅烷基氧基-丙基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量0.73g，91.9％)。
将(R)-1-(2-叔丁基-二苯基-硅烷基氧基-丙基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮溶解在无水四氢呋喃(7mL)中，用四丁基铵氟化物(1.0M的四氢呋喃溶液，4.2mL，4.20mmol)(Aldrich)在45℃的油浴中处理过夜。浓缩反应混合物，将残余物溶解在乙酸乙酯中，并用水和盐水洗涤。将有机相用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗制原料用快速色谱(Biotage 40M，80∶20乙酸乙酯-己烷)纯化，在乙酸乙酯-己烷中结晶，得到(R)-(-)-1-(2-羟基-丙基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量0.25g，58.9％)。
熔点189-193℃。
C22H23N5O3[M+H]+的HR-MS(ES+)m/z计算值406.1874。实测406.1878。
实施例29a(+)-(1S，4R)-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊-2-烯醇
向0℃下的(1R，4S)-4-乙酰氧基-2-环戊烯-1-醇(1.0g，7.03mmol)(Fluka)和咪唑(960mg，14.06mmol)(Aldrich)的四氢呋喃(65mL)溶液中加入叔丁基二甲基甲硅烷基氯化物(1.27g，8.44mmol)(Aldrich)。让混合物缓慢升温至室温，搅拌过夜，然后在乙酸乙酯和水之间分配。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，将残余物溶解在甲醇(约45mL)中。向该溶液中加入碳酸钾(1.17g，8.44mmol)，将混合物搅拌过夜。然后将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，残余物用0-30％乙醚的己烷溶液梯度洗脱的硅胶柱色谱纯化，得到(+)-(1S，4R)-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊-2-烯醇无色油状物。(产量1.43g，95％)。
实施例29b(+)-(1R，3S)-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊醇 对(+)-(1S，4R)-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊-2-烯醇(1.43g，6.67mmol)(来自上述实施例29a)和威尔金森催化剂(Wilkinson′s catalyst)(1.23g，1.33mmol)(Aldrich)的甲苯(55mL)溶液进行常压氢化16.5小时。然后将反应混合物过滤，浓缩至小体积，用硅胶柱色谱纯化，用0-25％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱，得到(+)-(1R，3S)-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊醇无色油状物。(产量745mg，61％)。
实施例29c(+)-(1S，3S)-(3-叠氮基-环戊基氧基)-叔丁基-二甲基-硅烷 向0℃的(+)-(1R，3S)-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊醇(745mg，3.44mmol)(来自上述实施例29b)和三苯膦(1.17g，4.47mmol)(Aldrich)的无水四氢呋喃(60mL)溶液中滴加偶氮二羧酸二乙酯(710μL，780mg，4.47mmol)(Aldrich)。2到3分钟后，滴加二苯基磷酰基叠氮化物(950μL，1.23g，4.47mmol)(Aldrich)。让混合物缓慢升温到室温，搅拌过夜，然后在乙酸乙酯和水之间分配。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，将所得到的残余物进行硅胶柱色谱，用0-20％乙醚的己烷溶液梯度洗脱，得到(+)-(1S，3S)-(3-叠氮基-环戊基氧基)-叔丁基-二甲基-硅烷无色液体。(产量589mg，70％)。
C11H23N3OSi[M]+的HRMS m/z计算值241.1610。实测241.1613。
实施例29d(-)-(1S，3S)-4-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基氨基]-2-甲硫基-嘧啶-5-羧酸乙酯 向(+)-(1S，3S)-(3-叠氮基-环戊基氧基)-叔丁基-二甲基-硅烷(580mg，2.40mmol)(来自上述实施例29c)的乙醇(30mL)溶液中加入氧化铂(55mg，0.24mmol)(Aldrich)。将混合物在1个大气压的氢气下氢化过夜。然后将反应混合物过滤，固体用四氢呋喃(约30mL)洗涤，浓缩合并的滤液，并将残余物溶解在二噁烷(50mL)中。向该溶液中加入三乙胺(970μL，705mg，6.96mmol)(Aldrich)和4-氯-2-甲硫基-5-嘧啶羧酸乙酯(594mg，2.55mmol)(Aldrich)，将混合物加热回流45分钟，然后冷却并在乙酸乙酯和水之间分配。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，残余物用硅胶柱色谱纯化，0-20％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱，得到(-)-(1S，3S)-4-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基氨基]-2-甲硫基-嘧啶-5-羧酸乙酯无色粘稠油状物。(产量910mg，95％)。
C19H33N3O3SSi[M+H]+的HRMS m/z计算值412.2085。实测412.2088。
实施例29e(-)-(1S，3S)-4-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基氨基]-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛手性 向0℃下的(-)-(1S，3S)-4-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基氨基]-2-甲硫基-嘧啶-5-羧酸乙酯(910mg，2.21mmol)(来自上述实施例29d)的四氢呋喃(55mL)溶液中分批加入氢化铝锂(250mg，6.63mmol)(Aldrich)。让反应混合物缓慢升温到室温。在搅拌过夜后，将反应混合物分批倒入剧烈搅拌的乙酸乙酯和饱和酒石酸钠钾水溶液的混合液中。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩至固体，然后将固体溶解在二氯甲烷(55mL)中。向该溶液中加入二氧化锰(1.92g，22.11mmol)(Aldrich)，将混合物搅拌过夜。过滤浆液，固体用四氢呋喃(约25mL)洗涤，蒸发合并的有机层，残余物用硅胶柱色谱纯化，0-50％乙醚的己烷溶液梯度洗脱，得到(-)-(1S，3S)-4-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基氨基]-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛粘稠无色油状物。(产量615mg，76％)。
C17H29N3O2SSi[M+H]+的HRMS m/z计算值368.1823。实测368.1825。
实施例29f(-)-(1S，3S)-1-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-甲硫基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 将(-)-(1S，3S)-4-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基氨基]-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛(596mg，1.62mmol)(来自上述实施例29e)、对-茴香胺(210mg，1.70mmol)(Aldrich)和催化量的一水合对甲苯磺酸(25mg)(Aldrich)的混合物使用Dean Stark装置加热回流16小时。然后将混合物冷却，并在乙酸乙酯和水之间分配。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物溶解在无水四氢呋喃(60mL)中，将所得到的溶液冷却到0℃。接着分批加入氢化铝锂(184mg，4.87mmol)，让形成的浆液缓慢升温到室温。在搅拌过夜后，将反应混合物分批加入到剧烈搅拌的乙酸乙酯和饱和酒石酸钠钾水溶液的混合液中。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，和将残余物用硅胶柱色谱纯化，用0-30％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱。将该步纯化的产物溶解在二氯甲烷(50mL)中。向该溶液中加入三乙胺(910μL，0.66g，6.54mmol)(Aldrich)，将混合物冷却到0℃。随后滴加20％的光气的甲苯溶液(670μL，1.37mmol)(Fluka)。在0℃下搅拌20分钟后，在室温下搅拌1小时，将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，残余物用硅胶柱色谱纯化，0-30％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱，得到(-)-(1S，3S)-1-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-甲硫基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮灰白色泡沫状固体。(产量620mg，76％)。
C25H36N4O3SSi[M+H]+的HRMS m/z计算值501.2350。实测501.2358。
实施例29g(-)-(1S，3S)-1-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮手性 将(-)-(1S，3S)-1-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-甲硫基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(610mg，1.22mmol)(来自上述实施例29f)的二氯甲烷(50mL)溶液用3-氯过氧苯甲酸(75％，590mg，2.56mmol)(Aldrich)处理。在搅拌过夜后，将混合物在乙酸乙酯和饱和碳酸钾水溶液之间分配。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩至固体，将固体溶解在苯胺(7mL)(Aldrich)中。将该溶液在95℃下搅拌6小时，然后冷却并进行硅胶柱色谱，用0-20％乙醚的甲苯溶液梯度洗脱，得到(-)-(1S，3S)-1-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮白色固体。(产量450mg，68％)。
C30H39N5O3Si[M+H]+的HRMS m/z计算值546.2895。实测546.2902。
实施例29h(-)-(1S，3S)-1-(3-羟基-环戊基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮
在0℃下将(-)-(1S，3S)-1-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(445mg，0.82mmol)(来自上述实施例29g)溶解在25％的三氟乙酸的二氯甲烷溶液(5mL)和水(300μL)中。在搅拌30分钟后，将混合物在乙酸乙酯和1N氢氧化钠水溶液之间分配，并通过加入固体氢氧化钠将水层的pH调节到12。收集有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，残余物用硅胶柱色谱纯化，0-100乙酸乙酯的己烷溶液到0-40％四氢呋喃的乙酸乙酯溶液梯度洗脱，得到(-)-(1S，3S)-1-(3-羟基-环戊基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮白色固体。(产量307mg，86％)。
C24H25N5O3[M+H]+的HRMS m/z计算值432.2030。实测432.2036。
实施例303-[-3-(4-甲氧基-苯基)-2-氧代-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-1-基]-丙酰胺 向0℃下的3-[-3-(4-甲氧基-苯基)-2-氧代-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-1-基]-丙腈(60mg，0.15mmol)(来自上述实施例26)的二甲亚砜(2mL)溶液中加入1.0N氢氧化钠水溶液(0.42mL，0.42mmol)，接着加入35％过氧化氢水溶液(0.35mL)(Fisher)。将反应混合物在0℃下搅拌2小时，然后在室温下搅拌过夜。将反应物用乙酸乙酯(50mL)稀释，用水(3×20mL)洗涤。将有机层用盐水(10mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到粗制的固体(71mg)，将该固体在己烷-乙酸乙酯中重结晶，得到3-[-3-(4-甲氧基-苯基)-2-氧代-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-1-基]-丙酰胺灰色固体。(产量28.3mg，45.1％)。
实施例31a(S)-3-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-丁酸 将(S)-(+)-3-羟基丁酸甲酯(0.48g，4.04mmol)(Aldrich)溶解在二氯甲烷(6mL，经过分子筛干燥)中。加入咪唑(0.39g，5.65mmol)(Aldrich)。当全都溶解时，滴加叔丁基二苯基甲硅烷基氯化物(1.05mL，4.04mmol)，将混合物在室温下搅拌4.5小时。将反应混合物另加二氯甲烷稀释，用水(2×)和盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。经快速色谱(Biotage 40M，5∶95乙酸乙酯-己烷)纯化得到(S)-3-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-丁酸甲酯。(产量1.33g，92.4％)。
将该甲酯(1.33g，3.73mmol)溶解在3∶1的四氢呋喃-甲醇(12mL)中，用氢氧化钠水溶液(1N，4.3mL，4.30mmol)在45℃下处理过夜。17小时后浓缩反应混合物。将残余物在乙酸乙酯和水之间分配，用1N盐酸水溶液酸化。有机相用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。经快速色谱(Biotage 40M，20∶80乙酸乙酯-己烷)纯化得到(S)-3-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-丁酸。(产量0.89g，62.2％)。
实施例31b(S)-叔丁基-(2-异氰酸根合-1-甲基-乙氧基)-二苯基-硅烷
将(S)-3-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-丁酸(0.88g，2.51mmol)(来自上述实施例31a)溶解在二氯甲烷(8mL，经过分子筛干燥)中。加入三乙胺(0.71mL，5.06mmol)(Aldrich)，将所得到的溶液在冰-水浴中冷却。滴加氯甲酸乙酯(0.29mL，3.03mmol)(Aldrich)，将混合物在冷却条件下搅拌50分钟。将反应混合物另加二氯甲烷稀释，并用水和盐水洗涤。将有机相用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到粗制的混合酸酐。
将中间体混合酸酐溶解在丙酮(10mL)中，用叠氮化钠溶液(0.50g，7.53mmol)(Aldrich)处理。在室温下搅拌15分钟后，将反应物用二氯甲烷和水稀释。有机相用盐水洗涤，硫酸镁干燥，过滤，浓缩，并在高真空下简短干燥，得到(S)-3-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-丁酰基叠氮化物。
将粗制的叠氮化物溶解在甲苯(7mL)中，在115-120℃的油浴中加热70分钟。剧烈的氮气快速放出，导致通过Curtius重排得到(S)-叔丁基-(2-异氰酸根合-1-甲基-乙氧基)-二苯基-硅烷。将该原料不经进一步纯化地用于下一步。
实施例31c(S)-1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-丙基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮
将(S)-叔丁基-(2-异氰酸根合-1-甲基-乙氧基)-二苯基-硅烷(从0.88g，2.51mmol(S)-3-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-丁酸在原位产生)(来自上述实施例31b)的热甲苯(7mL)溶液用[(2，4-二氯嘧啶-5-基)甲基](4-甲氧基苯基)胺(0.63g，2.23mmol)(来自上述实施例1d)处理。将溶液在120℃下加热50分钟，然后冷却到室温。将反应混合物用快速色谱(Biotage 40M，30∶70乙酸乙酯-己烷)纯化，得到脲中间体。
将纯化的脲中间体(1.32g)溶解在无水四氢呋喃(5mL)中，在冰-盐水浴中冷却，并用叔丁醇钾(1.0M的四氢呋喃溶液，2.1mL，2.1mmol)(Aldrich)处理。将混合物在冷却条件下搅拌15分钟，然后移走浴液，再继续搅拌5分钟。通过硅胶垫过滤混合物，用乙酸乙酯洗脱。[Biotage 40M，乙酸乙酯-己烷梯度洗脱(30-35％乙酸乙酯)]纯化得到(S)-1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-丙基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量0.97g，59.4％)。
实施例31d(S)-(+)-1-(2-羟基-丙基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮手性 将(S)-1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-丙基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(0.97g，1.65mmol)(来自上述实施例31c)和苯胺(1.00mL，10.97mmol)(Aldrich)合并，在110℃的油浴中加热。75分钟后，将反应混合物冷却到室温，用乙酸乙酯稀释，并用水和盐水洗涤。将有机相用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将粗制原料和另一实验的原料合并。合并后，用快速色谱(Biotage 40M，乙酸乙酯-己烷梯度洗脱[20-35％乙酸乙酯])纯化，然后在乙酸乙酯-己烷中结晶，得到中间体(S)-1-(2-叔丁基-二苯基-硅烷基氧基-丙基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量0.70g，59.1％)。
将中间体(S)-1-(2-叔丁基-二苯基-硅烷基氧基-丙基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(0.69g，1.08mmol)溶解在无水四氢呋喃(7mL)中。加入四丁基铵氟化物(1.0M的四氢呋喃溶液，4.3mL，4.30mmol)(Aldrich)，将反应混合物在43-50℃的油浴中加热过夜。待冷却到室温后，浓缩反应物。然后将残余物置于乙酸乙酯中，并用水和盐水洗涤。有机相用无水乙酸钠干燥。将该原料用快速色谱(Biotage 40M，80∶20乙酸乙酯-己烷)纯化，在乙酸乙酯-己烷中结晶。产物还是被极性更大的杂质所污染。将该原料和从另一反应获得的可比原料合并，在乙酸乙酯中重结晶，得到(s)-(+)-1-(2-羟基-丙基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮白色固体。(产量0.19g，28.1％)。熔点188-193℃。
C22H23N5O3[M+H]+的HR-MS(ES+)m/z计算值406.1874。实测406.1878。IC50(KDR)＝0.137μM，IC50(FGFR)＝0.612μM。
实施例32a顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己烷羧酸甲酯 向顺式-3，5-二羟基-环己烷羧酸甲酯(1.0g，5.74mmol)(按照J.C.Pascal等，U.S.P 6191292，2001年2月20日制备)的二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入咪唑(1.02g，14.92mmol)(Aldrich)和叔丁基-二苯基甲硅烷基氯化物(3.58mL，13.8mmol)(Hüls America)。将反应混合物在室温下搅拌1天，然后用乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)稀释。水相用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的乙酸乙酯层用水和盐水洗涤，硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。将残余物用快速色谱纯化，乙酸乙酯-己烷(5∶95)洗脱，得到顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己烷羧酸甲酯。(产量3.75g，100％)。
实施例32b顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己烷羧酸 将顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己烷羧酸甲酯(2.65g，4.07mmol)(来自上述实施例32a)溶解在甲醇(13mL)、四氢呋喃(13mL)和水(4mL)的混合液中。加入氢氧化钠水溶液(2.5N，1.8mL，4.5mmol)。将混合物在室温下搅拌3天，然后减压浓缩。将残余物用水和二氯甲烷稀释。将水相用浓盐酸酸化到pH2，并用二氯甲烷(2×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩，得到顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己烷羧酸。(产量2.54g，98％)。
实施例32c顺式-1，3-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-5-异氰酸根合-环己烷 向0℃下的顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己烷羧酸(1.06g，1.66mmol)(来自上述实施例32b)的丙酮(10mL)溶液中加入三乙胺(0.28mL，2.0mmol)(Burdick & Jackson)和氯甲酸乙酯(0.19mL，2.00mmol)(Aldrich)。在0℃下将混合物搅拌40分钟后，加入叠氮化钠(1.06g，1.66mmol)(Aldrich)的水(5mL)溶液。将混合物在0℃下搅拌1小时，然后倒入冰-水(50mL)中。将其用乙酸乙酯(3×30mL)萃取，将合并的有机层用盐水洗涤，硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。将残余物溶解在甲苯中，在110℃下加热4小时并减压浓缩，得到顺式-1，3-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-5-异氰酸根合-环己烷。(产量0.91g，87％)。
实施例32d1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-7-氯-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 将(2，4-二氯-嘧啶-5-基-甲基)-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-胺(0.24g，0.73mmol)(来自上述实施例17a)和顺式-1，3-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-5-异氰酸根合-环己烷(0.46g，0.73mmol)(来自上述实施例32c)在甲苯(10mL)中的混合物在110℃下加热过夜。减压浓缩。将残余物溶解在四氢呋喃(5mL)中，并冷却到-30℃。加入叔丁醇钾(0.9mL，1M的四氢呋喃溶液，0.9mmol)(Aldrich)。将混合物在室温下搅拌过夜。将其通过硅胶过滤并减压浓缩。将残余物用快速色谱纯化，乙酸乙酯-己烷(1∶4)洗脱，得到1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-7-氯-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量0.21g，29％)。
实施例32e1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 将1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-7-氯-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(0.10g，0.11mmol)(来自上述实施例32d)和对-茴香胺(17.7mg，0.14mmol)(Aldrich)在2-丙醇(4mL)中的混合物放入微波反应器(SmithSynthesizerTM)中。将反应混合物在160℃下加热10分钟。待冷却后，将其减压浓缩。将残余物用快速色谱纯化，乙酸乙酯-二氯甲烷(5∶95)洗脱，得到1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量0.09g，60％)。
实施例32f1-(顺式-3，5-二羟基-环己基)-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-(4-甲氧基苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮
将1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(0.40g，0.041mmol)(来自上述实施例32e)和四丁基铵氟化物(0.12mL，1.0M的四氢呋喃溶液，0.12mmol)(Aldrich)的四氢呋喃(5mL)溶液在回流下加热3小时。待冷却后，将其减压浓缩。将残余物用快速色谱纯化，乙酸乙酯-二氯甲烷(5∶95)洗脱，得到1-(顺式-3，5-二羟基-环己基)-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-(4-甲氧基苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量10.0mg，48％)。
实施例33a1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 将[(2，4-二氯嘧啶-5-基)甲基](4-甲氧基苯基)胺(0.21g，0.75mmol)(来自上述实施例1d)和顺式-1，3-双-叔丁基-(5-异氰酸根合-环己基氧基)-二苯基-硅烷(0.45g，0.68mmol)(来自上述实施例32c)在甲苯(10mL)中的混合物加热到110℃过夜。将其减压浓缩。将残余物溶解在四氢呋喃(5mL)中，并冷却到-30℃。加入叔丁醇钾(0.9mL，1M的四氢呋喃溶液，0.9mmol)(Aldrich)。将混合物在室温下搅拌过夜。将其通过硅胶过滤并减压浓缩。将残余物用快速色谱纯化，乙酸乙酯-己烷(1∶4)洗脱，得到1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量0.29g，44％)。
实施例33b1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 将1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(0.15g，0.16mmol)(来自上述实施例33a)和对-茴香胺(25.9mg，0.21mmol)(Aldrich)在2-丙醇(4mL)中的混合物放入微波反应器(SmithSynthesizerTM)中。将反应混合物在160℃下加热10分钟。待冷却后，将其减压浓缩。将残余物用快速色谱纯化，乙酸乙酯-己烷(3∶7然后2∶3)洗脱，得到1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量0.09g，60％)。
实施例33c1-(顺式-3，5-二羟基-环己基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 将1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(0.09g，0.09mmol)(来自上述实施例33b)和四丁基铵氟化物(0.28mL，1.0M的四氢呋喃溶液，0.28mmol)(Aldrich)的四氢呋喃(5mL)溶液在回流下加热3小时。待冷却后，将其减压浓缩。将残余物用快速色谱纯化，乙酸乙酯-二氯甲烷(5∶95)洗脱，得到1-(顺式-3，5-二羟基-环己基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量18.0mg，39％)。
实施例34a4-氟-3-甲氧基苯甲酸甲酯 将4-氟-3-羟基苯甲酸(4.33g，27.7mmol)(Aldrich)溶解在无水二甲基甲酰胺(Aldrich)中。在室温下依次加入碳酸钾(38.3g，277mmol)和甲基碘(8.6mL，138.5mmol)(Aldrich)，并将混合物搅拌过夜。过滤后，将溶液用水洗涤，并用乙酸乙酯萃取。分离各层，将有机层用水、1N氢氧化钠水溶液、水和盐水依次洗涤。将有机层用无水硫酸钠干燥和减压浓缩，得到4-氟-3-甲氧基苯甲酸甲酯浅黄色油状物，该油状物放置后凝固。(产量4.72g，92％)。
实施例34b4-氟-3-甲氧基苯甲酸 将4-氟-3-甲氧基苯甲酸甲酯(2.55g，13.85mmol)(来自上述实施例34a)溶解在四氢呋喃(140mL)和水(70mL)的混合液中。加入一水合氢氧化锂(5.8g，138.5mmol)，并将混合物加热回流3.5小时。在用1N盐酸水溶液(150mL)淬灭后，用二氯甲烷萃取溶液。分离各相，将有机层用无水硫酸钠干燥。减压浓缩得到4-氟-3-甲氧基苯甲酸灰白色固体。(产量2.26g，96％)。
实施例34c(叔丁氧基)-N-(4-氟-3-甲氧基苯基)甲酰胺 将4-氟-3-甲氧基苯甲酸(1.00g，5.87mmol)(来自上述实施例34b)溶解在甲苯(30mL)中。在室温下依次加入三乙胺(3.2mL，23.48mmol)(Fisher)，二苯基磷酰基叠氮化物(2.5mL，11.74mmol)(Aldrich)和叔丁醇(6mL)(Fisher)。将反应混合物在回流下加热2小时，然后用1N盐酸水溶液(20mL)在室温下淬灭。用乙酸乙酯萃取混合物，分离各层。将有机层用饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥并过滤。将减压浓缩得到的黄色油状物用快速色谱(20％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到(叔丁氧基)-N-(4-氟-3-甲氧基苯基)甲酰胺白色固体。(产量0.98g，70％)。
实施例34d4-氟-3-甲氧基苯胺盐酸盐 将(叔丁氧基)-N-(4-氟-3-甲氧基苯基)甲酰胺(0.98g，4.06mmol)(来自上述实施例34c)用4N盐酸的二噁烷溶液(20mL)(Aldrich)在室温下处理过夜。过滤收集所得到的沉淀物，用干燥乙醚洗涤，得到4-氟-3-甲氧基苯胺盐酸盐白色结晶固体。(产量512mg，71％)。
实施例34e1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-(4-氟-3-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮
将1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(0.20g，0.23mmol)(来自上述实施例33a)和4-氟-3-甲氧基-苯胺盐酸盐(51mg，0.29mmol)(来自上述实施例34d)的2-丙醇(4mL)溶液放入微波反应器(SmithSynthesizerTM)中。将反应混合物在160℃下加热10分钟。待冷却后，将其减压浓缩。将残余物用快速色谱纯化，乙酸乙酯-己烷(3∶7然后2∶3)洗脱，得到1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-(4-氟-3-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量0.08g，35％)。
实施例34f1-(顺式-3，5-二羟基-环己基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-(4-氟-3-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 将1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-(4-氟-3-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(0.08g，0.08mmol)(来自上述实施例34e)和四丁基铵氟化物(0.24mL，1.0M的四氢呋喃溶液，0.24mmol)(Aldrich)的四氢呋喃(5mL)溶液在回流下加热3小时。待冷却后，将其减压浓缩。将残余物用快速色谱纯化，乙酸乙酯-二氯甲烷(5∶95)洗脱，得到1-(顺式-3，5-二羟基-环己基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-(4-氟-3-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量18.0mg，78％)。
实施例35a1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 将1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(0.20g，0.23mmol)(来自上述实施例33a)和苯胺(0.03mL，0.29mmol)(Aldrich)在2-丙醇(4mL)中的混合物放入微波反应器(SmithSynthesizerTM)中。将反应混合物在160℃下加热10分钟。待冷却后，将其减压浓缩。将残余物用快速色谱纯化，乙酸乙酯-己烷(3∶7然后2∶3)洗脱，得到1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量0.14g，64％)。
实施例35b1-(顺式-3，5-二羟基-环己基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮
将1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(0.14g，0.15mmol)(来自上述实施例35a)和四丁基铵氟化物(0.44mL，1.0M的四氢呋喃溶液，0.44mmol)(Aldrich)的四氢呋喃(5mL)溶液在回流下加热3小时。待冷却后，将其减压浓缩。将残余物用快速色谱纯化，乙酸乙酯-二氯甲烷(5∶95)洗脱，得到1-(顺式-3，5-二羟基-环己基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量42.0mg，61％)。IC50(KDR)＝0.075μM，IC50(FGFR)＝0.263μM。
实施例36a1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 将1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-7-氯-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(0.21g，0.23mmol)(来自上述实施例32d)和苯胺(0.03mL，0.30mmol)(Aldrich)在2-丙醇(4mL)中的混合物放入微波反应器(SmithSynthesizerTM)中。将反应混合物在160℃下加热10分钟。待冷却后，将其减压浓缩。将残余物用快速色谱纯化，乙酸乙酯-二氯甲烷(5∶95)洗脱，得到1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量0.21g，35％)。
实施例36b1-(顺式-3，5-二羟基-环己基)-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 将1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(0.21g，0.22mmol)(来自上述实施例36a)和四丁基铵氟化物(0.66mL，1.0M的四氢呋喃溶液，0.66mmol)(Aldrich)的四氢呋喃(5mL)溶液在回流下加热3小时。待冷却后，将其减压浓缩。将残余物用快速色谱纯化，乙酸乙酯-二氯甲烷(5∶95)洗脱，得到1-(顺式-3，5-二羟基-环己基)-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量82.0mg，78％)。
实施例37a1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-(4-氟-3-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 将1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-7-氯-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(0.22g，0.24mmol)(来自上述实施例32d)和4-氟-3-甲氧基-苯胺盐酸盐(56.3mg，0.32mmol)(来自上述实施例34d)在2-丙醇(4mL)中的混合物放入微波反应器(SmithSynthesizerTM)中。将反应混合物在160℃下加热10分钟。待冷却后，将其减压浓缩。将残余物用快速色谱纯化，乙酸乙酯-己烷(3∶7然后2∶3)洗脱，得到1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-(4-氟-3-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量0.15g，63％)。
实施例37b1-(顺式-3，5-二羟基-环己基)-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-(4-氟-3-甲氧基苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 将1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-(4-氟-3-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(0.15g，0.15mmol)(来自上述实施例37a)和四丁基铵氟化物(0.45mL，1.0M四氢呋喃溶液，0.45mmol)(Aldrich)的四氢呋喃(5mL)溶液在回流下加热3小时。待冷却后，将其减压浓缩。将残余物用快速色谱纯化，乙酸乙酯-二氯甲烷(5∶95)洗脱，得到1-(顺式-3，5-二羟基-环己基)-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-(4-氟-3-甲氧基苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量35.0mg，44％)。
实施例38a(R)-2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙胺手性 将D-阿兰醇盐酸盐(500mg，6.66mmol)(Aldrich)溶解在无水二甲基甲酰胺(10mL)(Aldrich)中。在室温下依次加入咪唑(544mg，8mmol)(Aldrich)和叔丁基二甲基甲硅烷基氯化物(1.05g，7mmol)(Aldrich)。将该混合物在室温下搅拌2小时，用水-饱和碳酸氢钠水溶液(5∶1，15mL)的溶液淬灭，并用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和盐水洗涤，硫酸钠干燥并减压浓缩，得到(R)-2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙胺无色油状物。(产量852mg，68％)。
实施例38b(R)-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-氨基甲酸4-硝基-苯基酯
将(R)-2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙胺(693mg，3，66mmol)(来自上述实施例38a)和三乙胺(0.77mL，5.5mmol)(Allied Signal)在二氯甲烷中的混合物用氯甲酸4-硝基苯酯(885mg，4.39mmol)(Aldrich)在室温下处理30分钟。用1N盐酸水溶液淬灭反应，然后用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用饱和碳酸氢钠水溶液然后是盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物用快速色谱(15％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到(R)-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-氨基甲酸4-硝基-苯基酯无色油状物，该油状物放置后凝固。(产量0.49g，38％)。
实施例38c(2，4-二氯-嘧啶-5-基甲基)-(4-乙基-苯基)-胺 将2，4-二氯-5-(碘甲基)嘧啶(31.07g，107.3mmol)(来自上述实施例1c)和碳酸钾(74g，536.5mmol)在丙酮(535mL)中的多相混合物用4-乙基苯胺(13.3mL，107.3mmol)(Aldrich)处理。将混合物在室温下搅拌过夜，然后用水(500mL)稀释并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层依次用1N盐酸水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。将粗制的混合物用快速色谱(20％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到(2，4-二氯-嘧啶-5-基-甲基)-(4-乙基-苯基)-胺米色固体。(产量21.4g，70％)。
实施例38d(R)-3-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-1-(2，4-二氯-嘧啶-5-基甲基)-1-(4-乙基-苯基)-脲
将(2，4-二氯-嘧啶-5-基-甲基)-(4-乙基-苯基)胺(620mg，2.19mmol)(来自上述实施例38c)、(R)-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-氨基甲酸4-硝基-苯基酯(778mg，2.19mmol)(来自上述实施例38b)和三乙胺(0.93mL，6.6mmol)(Allied Signal)的甲苯(20mL)溶液在回流下加热48小时。将反应混合物在室温下用1N盐酸水溶液淬灭，然后用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层依次用1N氢氧化钠水溶液和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。将残余物用快速色谱(30％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到(R)-3-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-1-(2，4-二氯-嘧啶-5-基-甲基)-1-(4-乙基-苯基)-脲。(产量383mg，36％)。
实施例38e(R)-1-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-7-氯-3-(4-乙基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮手性 将(R)-3-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-1-(2，4-二氯-嘧啶-5-基-甲基)-1-(4-乙基-苯基)-脲(380mg，0.76mmol)(来自上述实施例38d)的四氢呋喃(10mL)溶液在室温下用叔丁醇钾(160mg，1.14mmol)(Aldrich)处理。将混合物在室温下搅拌1.5小时。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭，并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。将残余物(395mg，黄色油状物)用快速色谱纯化，得到(R)-1-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-7-氯-3-(4-乙基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮无色油状物。(产量102mg，30％)。
实施例38f(R)-1-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-3-(4-乙基-苯基)-7-(4-氟-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮手性 将(R)-1-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-7-氯-3-(4-乙基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(100mg，0.21mmol)(来自上述实施例38e)悬浮在2-丙醇(2mL)(Fisher)中。加入4-氟苯胺(0.03mL，0.32mmol)(Aldrich)，将混合物在微波反应器(SmithSynthesizerTM)中加热到160℃30分钟。待冷却到室温后，将多相反应混合物用二氯甲烷稀释。所得到的溶液用1N盐酸水溶液洗涤。分离各层，将有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，然后减压浓缩，得到(R)-1-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-3-(4-乙基-苯基)-7-(4-氟-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮浅黄色固体。(产量107mg，91％)。
实施例38g(R)-3-(4-乙基-苯基)-7-(4-氟-苯基氨基)-1-(2-羟基-1-甲基-乙基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮手性 将(R)-1-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-3-(4-乙基-苯基)-7-(4-氟-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(100mg，0.18mmol)(来自上述实施例38f)的吡啶(1.5mL)(Fisher)溶液在室温下用氟化氢-吡啶(0.6mL)(Aldrich)处理15分钟。将反应混合物用1N盐酸水溶液在0℃下淬灭，然后用乙酸乙酯萃取。将有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。将残余物用快速色谱(50％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到(R)-3-(4-乙基-苯基)-7-(4-氟-苯基氨基)-1-(2-羟基-1-甲基-乙基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮无色粘稠油状物。(产量45mg，61％)。IC50(KDR)＝0.208μM，IC50(FGFR)＝0.329μM。
实施例39a(±)-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-{2-氯-5-[(4-乙基-苯基氨基)-甲基]-嘧啶-4-基}-胺外消旋 将(2，4-二氯-嘧啶-5-基-甲基)-(4-乙基-苯基)-胺(200mg，0.71mmol)(来自上述实施例38c)溶解在热正丁醇(2mL)(Aldrich)中。待冷却到室温后，依次加入三乙胺(0.20mL，0.92mmol)(Allied Signal)和(±)-反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊胺(198mg，0.91mmol)(来自上述实施例9c)，将混合物在室温下搅拌18小时。将混合物减压浓缩，用快速色谱(20％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到(±)-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-{2-氯-5-[(4-乙基-苯基氨基)-甲基]-嘧啶-4-基}-胺粘稠油状物。(产量272mg，84％)。
实施例39b(±)-1-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-7-氯-3-(4-乙基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮外消旋 将(±)-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-{2-氯-5-[(4-乙基-苯基氨基)-甲基]-嘧啶-4-基}-胺(270mg，0.58mmol)(来自上述实施例39a)和三乙胺(0.25mL，1.76mmol)(Allied Signal)在二氯甲烷(6mL)中的混合物冷却到0℃。滴加20％的光气的甲苯溶液(0.32mL，0.61mmol)(Fluka)，将混合物在0℃下搅拌1小时。让混合物升温至室温，加入4-(二甲基氨基)吡啶(15mg，0.12mmol)(Aldrich)。将反应物在室温下搅拌过夜，在回流下加热4小时，然后浓缩至干。将黄色残余物用快速色谱(20％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到(±)-1-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-7-氯-3-(4-乙基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量213mg，75％)。
实施例39c(±)-1-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-乙基-苯基)-7-(4-氟-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮外消旋 将(±)-1-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-7-氯-3-(4-乙基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(125mg，0.25mmol)(来自上述实施例39b)悬浮在2-丙醇(3mL)(Fisher)中。加入4-氟苯胺(0.036mL，0.38mmol)(Aldrich)和一水合对甲苯磺酸(12.5mg，0.05mmol)(Aldrich)，将混合物在微波合成器(SmithSynthesizerTM)中加热到160℃30分钟。待冷却到室温后，将多相反应混合物用二氯甲烷稀释。所得到的溶液用1N盐酸水溶液洗涤。分离各层，将有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，然后减压浓缩，得到(±)-1-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-乙基-苯基)-7-(4-氟-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮淡绿色固体。(产量123mg，85％)。
实施例39d(±)-3-(4-乙基-苯基)-7-(4-氟-苯基氨基)-1-(反式-3-羟基-环戊基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮外消旋 将(±)-1-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-乙基-苯基)-7-(4-氟-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(47mg，0.08mmol)的吡啶(1mL)(Fisher)溶液在室温下用氟化氢-吡啶(0.6mL)(Aldrich)处理20分钟。将反应混合物用1N盐酸水溶液在0℃淬灭，然后用乙酸乙酯萃取。将有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。将残余物用快速色谱(50％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到(±)-3-(4-乙基-苯基)-7-(4-氟-苯基氨基)-1-(反式-3-羟基-环戊基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮白色固体。(产量32mg，87％)。
实施例401-环丙基甲基-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 向[(2，4-二氯嘧啶-5-基)甲基](4-甲氧基-苯基)胺(198mg，0.7mmol)(来自上述实施例1d)的正丁醇(5mL)溶液中加入环丙烷甲胺(0.12mL，1.4mmol)(Aldrich)和N，N-二异丙基乙胺(10.13mL)(Aldrich)。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后用水淬灭，并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机萃取物依次用水(10mL)和盐水(10mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到粗制的一氯化物无色油状物(产量220mg)，将该产物不经进一步纯化被用于下一步。
向0℃下的粗制一氯化物(220mg)的二氯甲烷(20mL)溶液中加入三乙胺(0.3mL，2.1mmol)(Aldrich)，接着滴加20％的光气的甲苯溶液(0.5mL，0.98mmol)(Fluka)。将该混合物在室温下搅拌15分钟。然后将反应混合物倒入冰-水(50mL)中，并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机萃取物依次用水(10mL)和盐水(10mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到粗制的中间体，将该中间体再次溶解在二氯甲烷(5mL)中，在4-(二甲基氨基)吡啶(20mg)(Aldrich)存在下加热回流过夜。将反应混合物用水淬灭，并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机萃取物依次用水(10mL)和盐水(10mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到粗产物，然后用制备型薄层色谱分离，得到7-氯-1-环丙基甲基-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。(产量259mg，74.8％，3步)。
将7-氯-1-环丙基甲基-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(129mg，0.37mmol)在苯胺(1.0mL)(Aldrich)中的混合物加热到120℃5.5小时。待冷却后，将反应混合物用己烷(4×100mL)洗涤，粗产物用制备型薄层色谱纯化，得到1-环丙基甲基-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮灰白色固体。(产量20.6mg，13.7％)。
抗增殖活性本发明化合物的抗增殖活性是用如下实施例41和42证实的。这些活性表明本发明化合物可用于治疗癌症，特别是实体瘤，例如乳腺，肺，前列腺和结肠瘤，更特别的是乳腺和结肠瘤。
实施例41激酶试验为了测定对KDR、FGFR、EGFR和PDGFR活性的抑制作用，使用HTRF(均匀时间分辩的荧光)试验进行激酶试验。该试验描述于A.J.Kolb等，Drug Discovery Today，1998，3(7)，333页。
在激酶反应前，将重组EEE-标记的KDR在活化缓冲液(50mM HEPES，pH7.4，1mM DTT，10％甘油，150mM NaCl，0.1mM EDTA，26mM MgCl2和4mMATP)存在下活化。将该酶在4℃下温育1小时。
激酶活性试验是在96孔聚丙烯板(Falcon)上进行的，每个孔的总体积为90μL。每个孔中含有1μM KDR底物(生物素-EEEEYFELVAKKKK)，1nM活化KDR，以及从100μM到128pM(1∶5依次稀释)的8种试验浓度之一的测试化合物。激酶活性试验是在100mM HEPES，pH7.4，1mM DTT，0.1mM Na2VO4，25mM MgCl2，50mM NaCl(来自KDR储液)，1％DMSO(来自化合物)，0.3mM ATP(Km浓度)和0.02％BSA存在下进行的。将反应物在37℃下温育30分钟。为了终止KDR反应，将72μL反应混合物转移到含有18μL展示缓冲液(20mM EDTA，50mM HEPES，pH7.4，0.02％BSA，10nM Eu-标记的抗pY抗体(终浓度2nM)，以及100nM链霉抗生物素(终浓度20nM))的STOP板中。在混合后，将35μL溶液转移到384孔黑板(blackplate)(Costar)的两个相同孔中，在Wallac Victor 5读数器上于615/665nm处读数。
如上述KDR活性试验所述地进行FGFR、EGFR和PDGFR活性试验，但是有如下不同之处。在如下活化缓冲液中将GST-标记的FGFR酶在室温下活化1小时100mM HEPES，pH7.4，50mM NaCl，20mM MgCl2和4mMATP。激酶活性试验是用1μM底物(生物素-EEEEYFELV)，1.5nM活化FGFR和测试混合物在如下物质存在下进行的100mM HEPES，1mM DTT，0.4mM MgCl2，0.4mM MnCl2，50mM NaCl，1％DMSO，10μMATP(FGFR的Km＝8.5μM)，0.1mM Na2VO4和0.02％BSA，总体积90μL。试验其余部分是用和KDR试验相同的方式进行的。
EGFR激酶活性试验是用1μM底物(生物素-EEEEYFELV)，1.5nMEGFR，测试混合物，100mM HEPES，pH7.4，1mM DTT，5mM MgCl2，2mMMnCl2，1％ DMSO，0.5μM ATP(EGFR的Km)，0.1mM Na2VO4和0.02％BSA进行的。试验其余部分是用和KDR试验相同的方式进行的。
PDGFR激酶活性试验是用1μM底物(生物素-EEEEYFELV)，1.0nMPDGFR，测试混合物，100mM HEPES，pH7.4，1mM DTT，5mM MgCl2，2mMMnCl2，1％DMSO，2.3μMATP(PDGFR的Km)，0.1mM Na2VO4和0.02％BSA进行的。试验其余部分是用和KDR试验相同的方式进行的。
化合物IC50值是由成双数据组确定的，通过使用Excel并将数据拟合成方程式Y＝[(a-b)/1+(X/c)d]+b而计算的，其中a和b分别是没有测试抑制剂化合物和无限量的抑制剂测试化合物存在时的酶活性，c是IC50，而d是化合物响应的hill常数。IC50值是在所述测试条件下使酶活性降低50％的测试化合物的浓度。
本发明化合物上述酶抑制试验值的IC50值如下KDR小于0.50μM；FGFR小于2μM。
实施例42VEGF和FGF-刺激的HUVEC增殖试验细胞-基试验中本发明测试化合物的抗增殖活性是通过BrdU试验使用BrdU试剂盒(Roche Biochemicals 1-647-229)进行评估的。将人脐静脉内皮细胞(Clonetics CC-2519)培养于EGM-2(Clonetics CC-3162)培养基中，以每孔10000细胞、200μL EGM-2(Clonetics CC-3162)培养基接种在96孔平底板(Costar 3595)上过夜。在37℃、5％CO2条件下生长24小时后，通过吸气缓慢除去培养基，将每个孔的内容物用含有50μg/mL庆大霉素和50ng/mL两性霉素-B(Clonetics CC-4083)的300μL预温的EBM-2(Clonetics CC-3156)冲洗。接着，再次吸出剩余培养基，代替以160μL/孔的血清缺乏培养基(EBM-2，补充有1％热灭活的FBS(Clonetics CC-4102)，50μg/mL庆大霉素和50ng/mL两性霉素-B(Clonetics CC-4083)，10单位/mL的Wyeth-Ayerst肝素(NDC0641-0391-25)，以及2mM 1-谷氨酰胺(GIBCO25030-081))。在让细胞血清缺乏24小时后，将20μL以10×测试浓度包含在含有2.5％DMSO的血清缺乏培养基中的测试化合物加到合适的孔中。对照孔含有20μL含有2.5％DMSO的血清缺乏培养基。将该板送回培育器2小时。在细胞和测试化合物预先培育2小时后，加入20μL以10×试验浓度稀释于血清缺乏培养基中的生长因子，50ng/mL的FGF，或者200ng/mL的VEGF(R&D体系293-VE)。试验中FGF的终浓度为5ng/mL，而VEGF在试验中的终浓度为20ng/mL。不含生长因子的对照孔含20μL/孔的血清缺乏培养基，其中含有和生长因子孔等量的BSA。将该板送回培育器，再培育22小时。
BrdU ELISA在暴露于测试化合物24小时后，通过加入20μL/孔的已经稀释于血清缺乏培养基(1∶100)的BrdU标记试剂，将细胞用BrdU(Roche Biochemicals1-647-229)标记。然后将该板放回培育器培育4小时。通过将培养基吸到纸巾上来除去标记培养基。向每孔中加入200μL固定/变性溶液并在室温下培育45分钟，将细胞固定并使DNA变性。将固定/变性溶液吸到纸巾上，向每孔中加入100μL抗BrdU-POD，并在室温下将孔培育2小时。除去抗体溶液，每孔用300μL PBS冲洗3-4次。向每孔中加入100μL TMB底物溶液，并将孔在室温下培育5-8分钟。然后加入100μL/孔的1M磷酸终止反应。将该板在450nm处读数，以650nm为参比波长。每个测试化合物的抑制百分比是这样计算的从所有孔中减去空白(无细胞)孔的吸光度值，然后用1减去每一对测试样品平均吸光度除以对照组平均值的得数，最后乘以100(抑制％＝(1-每对测试样品平均吸光度/对照组平均值)×100)。IC50值是抑制50％BrdU标记的测试化合物的浓度，用于测量对细胞增殖的抑制作用。IC50值是通过浓度-抑制百分比的对数图的线性回归而测定的。
用如上所述方法测量的本发明化合物的VEGF和FGF-刺激的HUVEC增殖试验的IC50值如下HUVEC/VEFG小于1.00μM；HUVEC/bFGF小于1.00μM。
实施例43片剂配方
*化合物A表示本发明的化合物制造方法在合适的混合器中将1、2和3项混合15分钟。
用20％聚乙烯吡咯烷酮K30溶液(4项)将步骤1的粉末混合物造粒。
将步骤2的颗粒在50℃下干燥。
让步骤3的颗粒通过合适的磨碎设备。
将5项加入到步骤4的磨碎的颗粒中，并混合3分钟。
在合适的压力机上压缩步骤5的颗粒。
实施例44胶囊配方
*化合物A表示本发明的化合物制造方法在合适的混合器中将1、2和3项混合15分钟。
加入4和5项并混合3分钟。
装入合适的胶囊中。
实施例45注射液/乳剂
*化合物A表示本发明的化合物制造方法将1项溶解在2项中。
将3、4和5项加入到6项中，并且混合直至分散，然后匀质化。
将步骤1的溶液加入到步骤2的混合物中，并匀质化直至分散体透明。
用0.2μm过滤器无菌过滤，并装到小瓶中。
实施例46注射液/乳剂
*化合物A表示本发明的化合物制造方法将1项溶解在2项中。
将3、4和5项加入到6项中，并且混合直至分散，然后匀质化。
将步骤1的溶液加入到步骤2的混合物中，并匀质化直至分散体透明。
用0.2μm过滤器无菌过滤，并装到小瓶中。
尽管本发明已经参照具体和优选的实施方案进行了说明，但是本领域技术人员应该理解，可以通过常规实验进行变更和修改并实施本发明。因此，本发明不受上述描述限制，而是由所附权利要求和它们的同等物所限定的。
权利要求
1.下式的化合物 其中R1选自-H，-(CH2)n-杂环，烷基，环烷基，链烯基，和炔基，其中n是0、1、2或3，并且杂环、烷基、环烷基、链烯基和炔基各自独立，任选被最多3个选自下列的基团所取代-OR9，-COR10，-CO2R10，-CONR10R11，-SO2NR10R11，-SO2R10和-CN；R2和R3独立地选自-H，-OR9，-卤素，-COR10，-CO2R10，-(CH2)n-杂环，-烷基，-环烷基，-链烯基，和-炔基，其中n是0、1、2或3，并且杂环、烷基、环烷基、链烯基和炔基各自独立，任选被最多3个选自下列的基团所取代-OR9，-卤素，-COR10和-CO2R10；R4、R5、R6、R7和R8各自独立地选自-H，-任选可以被羟基或烷氧基取代的低级烷基，-OR12，-卤素，-COR13，和-CO2R13；R9选自-H，-COR10，任选可以被羟基或烷氧基取代的低级烷基，任选可以被羟基、烷氧基和低级烷基取代的环烷基，和任选可以被羟基、烷氧基或低级烷基取代的杂环；R10和R11各自独立地选自-H，任选可以被羟基或烷氧基取代的低级烷基，任选可以被羟基、烷氧基或低级烷基取代的环烷基，和任选可以被羟基、烷氧基或低级烷基取代的杂环；R12选自-H，低级烷基和-COR13；且R13选自-H和低级烷基；或其可药用的盐。
2.权利要求1的式I化合物，其中R1选自环烷基；-OH取代的环烷基；杂环；低级烷基；和-OH取代的低级烷基。
3.权利要求1的式I化合物，其中R2是-H或-OCH3。
4.权利要求1的式I化合物，其中R3是-H、F或-OCH3。
5.权利要求1的式I化合物，其中R2和R3都是-H。
6.权利要求1的式I化合物，其中R4、R5和R7都是-H。
7.权利要求1的式I化合物，其中R6是卤素或-OR12。
8.权利要求7的式I化合物，其中R6是-OCH3。
9.权利要求1的式I化合物，其中R8是-H或-F。
10.权利要求1的式I化合物，其中R9是-H，低级烷基，或者被羟基取代的低级烷基。
11.权利要求10的式I化合物，其中R9是-H。
12.权利要求1的式I化合物，其中R10是-H，低级烷基，或者被羟基取代的低级烷基。
13.权利要求12的式I化合物，其中R10是-H。
14.权利要求1的式I化合物，其中R11是-H，低级烷基，或者被羟基取代的低级烷基。
15.权利要求14的式I化合物，其中R11是-H。
16.权利要求1的式I化合物，其中R12是-H或低级烷基。
17.权利要求16的式I化合物，其中R12是-H。
18.权利要求1的式I化合物，其中R13是-H或低级烷基。
19.权利要求18的式I化合物，其中R13是-H。
20.权利要求1的式I化合物，选自1-环己基-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例1e)，3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-1-哌啶-4-基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例2b)，1-(反式-4-羟基-环己基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例3c)，3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-1-哌啶-3-基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例4b)，1-环戊基-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例5)，1-(1，1-二氧代-四氢噻吩-3-基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例6)，3-[3-(4-甲氧基-苯基)-2-氧代-7-苯基氨基-3，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-1-基]-哌啶-1-甲醛(实施例7)，3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-1-(四氢-吡喃-4-基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例8)，(±)-1-(反式-3-羟基-环戊基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例9d)，和(±)-顺式-1-(3-羟基-环戊基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例10e)。
21.权利要求1的式I化合物，选自(R)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-1-(四氢-呋喃-3-基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例11b)，(R)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-1-吡咯烷-3-基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例12)，(±)-7-(4-氟-苯基氨基)-1-(反式-3-羟基-环戊基)-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例13c)，(±)-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-1-(反式-3-羟基-环戊基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例14d)，(S)-(+)-1-(2-羟基-1-甲基-乙基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例15d)，(S)-(+)-7-(4-氟-苯基氨基)-1-(2-羟基-1-甲基-乙基)-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例16)，3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-1-(反式-4-羟基-环己基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例17d)，3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-1-(反式-4-羟基-环己基)-7-(3，4-二甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例18)，3-(4-甲氧基-苯基)-1-(反式-4-羟基-环己基)-7-(3，4-二甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例19c)，3-(4-甲氧基-苯基)-1-(反式-4-羟基-环己基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例20b)，和(S)-(+)-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-(4-氟-苯基氨基)-1-(2-羟基-1-甲基-乙基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例21b)。
22.权利要求1的式I化合物，选自(S)-(+)-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-1-(2-羟基-1-甲基-乙基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例22)，(R)-(-)-1-(2-羟基-1-甲基-乙基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例23d)，3-(4-甲氧基-苯基)-1-甲基-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例24b)，1-(2-甲氧基-乙氧甲基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例25)，3-[-3-(4-甲氧基-苯基)-2-氧代-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-1-基]-丙腈(实施例26)，(+)-(1R，3R)-1-(3-羟基-环戊基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例27f)，(R)-1-(2-羟基-丙基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例28d)，(-)-(1S，3S)-1-(3-羟基-环戊基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例29h)，3-[-3-(4-甲氧基-苯基)-2-氧代-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-1-基]-丙酰胺(实施例30)，和(S)-(+)-1-(2-羟基-丙基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例31d)。
23.权利要求1的式I化合物，选自1-(顺式-3，5-二羟基-环己基)-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-(4-甲氧基苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例32f)，1-(顺式-3，5-二羟基-环己基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例33c)，1-(顺式-3，5-二羟基-环己基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-(4-氟-3-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例34f)，1-(顺式-3，5-二羟基-环己基)-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例35b)，1-(顺式-3，5-二羟基-环己基)-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例36b)，1-(顺式-3，5-二羟基-环己基)-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-(4-氟-3-甲氧基苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例37b)，(R)-3-(4-乙基-苯基)-7-(4-氟-苯基氨基)-1-(2-羟基-1-甲基-乙基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例38g)，(±)-3-(4-乙基-苯基)-7-(4-氟-苯基氨基)-1-(反式-3-羟基-环戊基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例39d)，和1-环丙基甲基-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例40)。
24.具有如下化学式的权利要求1的式I化合物 其中R1选自-H，被-OH，COR10，-CN或-CONH2取代的低级烷基，-(CH2)n-杂环，被-COR10或-CO2R10取代的-(CH2)n-杂环，环烷基，被-OH取代的环烷基；R2是H或-OCH3；R3是H、F或-OCH3；R4、R5和R7都是H；R6是-OCH3或低级烷基；R8是H或F；R10是被烷氧基取代的低级烷基；且n是0或1。
25.一种药物组合物，该组合物包含治疗有效量的权利要求1到24任何一项的式I化合物和可药用载体或赋形剂。
26.权利要求25的药物组合物，其中所述化合物适合向癌症患者给药。
27.用作药物的权利要求1到24任何一项的式I化合物。
28.权利要求1到24任何一项的式I化合物用于制备治疗和控制癌症的药物的用途。
29.用于治疗和控制乳腺，肺，结肠或前列腺癌的权利要求28的用途。
30.权利要求28的用途，其中所述癌症是乳腺癌或结肠癌。
31.权利要求1的式I化合物的制备方法，该方法包括将下式的化合物 其中X是Cl或SO2CH3，且R1、R4、R5、R6、R7和R8如权利要求1所定义，和下式的苯胺衍生物反应 其中R2和R3如权利要求1所定义，以获得下式的化合物 并且如果需要，将式I化合物转化成可药用的盐。
32.用依照权利要求31的方法制备的权利要求1到24任何一项的式I化合物。
33.一种中间体化合物，选自4-[3-(4-甲氧基-苯基)-2-氧代-7-苯基氨基-3，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-1-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例2a)，1-[反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例3b)，3-[3-(4-甲氧基-苯基)-2-氧代-7-苯基氨基-3，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-1-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例4a)，(±)-3-顺式-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例10d)，(R)-2-甲硫基-4-(四氢-呋喃-3-基氨基)-嘧啶-5-羧酸乙酯(实施例11a)，(±)-4-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基氨基]-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛(实施例13a)，(±)-1-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-甲硫基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例13b)，(±)-[3-反式-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-{5-[(2-氟-4-甲氧基-苯基氨基)-甲基]-2-甲硫基-嘧啶-4-基}-胺(实施例14b)，(±)-1-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-甲硫基-3，4-二氢-IH-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例14c)，(S)-1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例15c)，1-[反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己基]-7-氯-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例17c)，1-[反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例19a)，1-[反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-(3，4-二甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例19b)，1-[反式-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例20a)，(S)-1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-7-氯-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例21a)，(R)-1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例23c)，3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例24a)，(+)-(1R，3R)-4-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基氨基]-2-甲硫基-嘧啶-5-羧酸乙酯(实施例27d)，(-)-(1R，3R)-1-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例27e)，(R)-1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-丙基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例28c)，(-)-(1S，3S)-4-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基氨基]-2-甲硫基-嘧啶-5-羧酸乙酯(实施例29d)，(-)-(1S，3S)-4-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基氨基]-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛(实施例29e)，(-)-(1S，3S)-1-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-甲硫基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例29f)，(-)-(1S，3S)-1-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例29g)，(S)-1-[2-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-丙基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例31c)，1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-7-氯-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例32d)，1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例32e)，1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-7-氯-3-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例33a)，1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-(4-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例33b)，1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-(4-氟-3-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例34e)，1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例35a)，1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-苯基氨基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例36a)，1-[顺式-3，5-双-(叔丁基-二苯基-硅烷基氧基)-环己基]-3-(2-氟-4-甲氧基-苯基)-7-(4-氟-3-甲氧基-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例37a)，(2，4-二氯-嘧啶-5-基甲基)-(4-乙基-苯基)-胺(实施例38c)，(R)-3-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-1-(2，4-二氯-嘧啶-5-基甲基)-1-(4-乙基-苯基)-脲(实施例38d)，(R)-1-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-7-氯-3-(4-乙基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例38e)，(R)-1-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-1-甲基-乙基]-3-(4-乙基-苯基)-7-(4-氟-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例38f)，(±)-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-{2-氯-5-[(4-乙基-苯基氨基)-甲基]-嘧啶-4-基}-胺(实施例39a)，(±)-1-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-7-氯-3-(4-乙基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例39b)，和(±)-1-[反式-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-环戊基]-3-(4-乙基-苯基)-7-(4-氟-苯基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(实施例39c)。
34.此前所述的新型化合物，药物组合物，方法和用途。
全文摘要
本发明公开的是新型的式(I)的嘧啶并化合物，所述化合物是KDR和FGFR激酶的选择性抑制剂。这些化合物和它们的可药用盐是抗增殖剂，可用于治疗或控制实体瘤，特别是乳腺，结肠，肺和前列腺瘤。还公开了包含这些化合物的药物组合物以及治疗癌症的用途。
文档编号A61K31/519GK1809569SQ200480009513
公开日2006年7月26日 申请日期2004年4月1日 优先权日2003年4月10日
发明者陈奕, A·德尔马塔基斯, 刘进军, 陆建春, C·米舒, P·L·罗斯曼 申请人:霍夫曼-拉罗奇有限公司