专利名称：作为治疗纤维蛋白溶解系统损伤和血栓形成的pai－1抑制剂的4－(1－苯并呋喃－3－基 ...的制作方法
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背景本发明一般涉及取代的苯并呋喃肟和使用它们的方法。
丝氨酸蛋白酶抑制剂PAI-1是纤维蛋白溶解系统的主要抑制剂之一。纤维蛋白溶解系统包括通过两种组织类型纤溶酶原激活剂之一t-PA或u-PA转化为活性酶的酶原纤溶酶原。PAI-1是t-PA和u-PA的主要的生理抑制剂。纤维蛋白溶解系统中纤溶酶的主要功能之一是在血管损伤部位消化纤维蛋白。但是，纤维蛋白溶解系统不仅负责从循环中除去纤维蛋白，而且还参于几个其它的生物学过程，包括排卵、胚胎发育、内膜增生、血管发生、肿瘤发生和动脉粥样硬化。
高PAI-1水平与与多种疾病和病症有关，包括与纤维蛋白溶解系统损伤有关的那些疾病。例如，高PAI-1水平涉及血栓形成疾病，例如特征为局部阻塞血管血流或分开(detaches)和发生栓塞(embolizes)阻塞血流下游的形成血栓的疾病。(Krishnamurti，Blood，69，798(1987)；Reilly，Arteriosclerosis and Thrombosis，11，1276(1991)；Carmeliet，Journal of Clinical Investigation，92，2756(1993)，Rocha，Fibrinolysis，8，294，1994；Aznar，Haemostasis 24，243(1994))。抗体抑制PAI-1活性导致促使内源性血栓溶解和再灌注(Biemond，Circulation，91，1175(1995)；Levi，Circulation 85，305，(1992))。高PAI-1水平还涉及疾病例如多囊性卵巢综合征(Nordt，Journal of Clinical Endocrinology andMetabolism，85，4，1563(2000))、雌激素缺乏引起的骨质流失(Daci，Journal of Bone and Mineral Research，15，8，1510(2000))、囊性纤微化、糖尿病、慢性牙周炎、淋巴瘤、与胞外基质蓄积有关的疾病、癌和与新血管形成有关的疾病、炎性疾病、与感染有关的血管损伤和与uPA水平升高有关的疾病，例如乳腺和卵巢癌。
鉴于上述原因，需要鉴定PAI-1活性抑制剂和在患者中用已鉴定的抑制剂调节PAI-1表达或活性，以治疗与高PAI-1水平有关病症的方法。
概述本发明提供取代的苯并呋喃肟和使用它们的方法。在某些实施方案中，本发明的取代的苯并呋喃肟包括那些下式化合物 式1其中R1是连接A的直接键、C1-C4亚烷基或-O-C1-C4亚烷基；R2和R3独立是氢、卤素、C1-C4烷基、C1-C3全氟烷基、-O-C1-C3全氟烷基、C1-C3烷氧基、-OH、-NH2、-NO2、芳基、杂芳基、-O(CH2)p-芳基、-O(CH2)p-杂芳基、-NH(CH2)p-芳基、-NH(CH2)p-杂芳基、-NH(CO)-芳基、-NH(CO)-杂芳基、-O(CO)-芳基、-O(CO)-杂芳基、-NH(CO)-CH＝CH-芳基或-NH(CO)-CH＝CH-杂芳基；
p是0-6的整数；R4是氢、C1-C8烷基或C3-C6环烷基；A是-COOH或酸类似物(acid mimic)；X是C1-C8亚烷基、C3-C6亚环烷基、-(CH2)mO-或-(CH2)mNH-；m是1-6的整数；和R5是氢、C1-C8烷基、C3-C6环烷基、-CH2-C3-C6环烷基、杂芳基、-CH2-杂芳基、芳基或苄基；R6和R7独立是氢、卤素、C1-C6烷基、C1-C6全氟烷基、-O-C1-C6全氟烷基、C1-C6烷氧基、-OH、-NH2、-NO2、-O(CH2)n-芳基、-O(CH2)n-杂芳基、芳基或杂芳基；和n是0-6的整数。
在某些示例性实施方案中，R1是连接A的直接键或C1-C3亚烷基。R2可以是氢、卤素、C1-C3烷基、C1-C3全氟烷基、芳基、杂芳基、-O-C1-C3全氟烷基、C1-C3烷氧基、-OH、-O(CH2)p-芳基、-NH(CO)-芳基或-NH(CO)-杂芳基。R3可以是氢、卤素、C1-C3烷基、C1-C3全氟烷基、芳基、杂芳基、-O-C1-C3全氟烷基、C1-C3烷氧基、-OH、-O(CH2)p-芳基、-NH(CO)-芳基或-NH(CO)-杂芳基。R4可以氢或C1-C4烷基。R5可以是氢、C1-C8烷基或C3-C6环烷基；R6可以氢、卤素、C1-C6烷基、C1-C6全氟烷基、-O-C1-C6全氟烷基或C1-C6烷氧基。R7可以是氢、卤素、C1-C6烷基、C1-C6全氟烷基、-O-C1-C6全氟烷基或C1-C6烷氧基。A可以是-COOH或四唑。X可以是-CH2-、-CH2-CH2-O-或-CH2-CH2-CH2-O-。
R7和R8适宜均为氢。R5适宜为C1-C4烷基例如正丁基。R4适宜为氢。R2和R3各自适宜选自氢、羟基、卤代苯基和4-三氟苯基。
尤其是，本发明还提供式1-4化合物的药学上可接受的盐或酯形式。
尤其是，本发明还提供使用取代的苯并呋喃肟的方法。在本发明的一方面，给予患者治疗有效量的一种或多种本发明化合物以治疗PAI-1相关病症，例如通过抑制患者中PAI-1活性。PAI-1活性与多种疾病和病症有关。例如在本发明的一个实施方案中，PAI-1活性与纤维蛋白溶解系统损害有关。在其它实施方案中，PAI-1活性与例如以下的血栓形成有关静脉血栓形成、动脉血栓形成、脑血栓形成和深静脉血栓形成、心房纤维性颤动、肺纤维化、手术血栓栓塞并发症、心血管病，例如心肌缺血、动脉粥样硬化斑块形成；慢性阻塞性肺病、肾纤维化、多囊卵巢综合征、阿尔茨海默氏病或癌症。
详述A.总览本发明提供抑制PAI-1活性的化合物，制备此类化合物的方法，含此类化合物的药用组合物以及在医学治疗中使用此类化合物的方法。这些化合物具有可用于治疗(包括预防和抑制)多种疾病和病症的性质，这些疾病涉及PAI-1产生和/或作用的那些。这些疾病包括由纤维蛋白溶解系统损伤导致的疾病，它们包括但不限于血栓形成、冠心病、肾纤维化、动脉粥样硬化斑块形成、肺病、心肌缺血、心房纤维性颤动、凝血综合征、手术的血栓栓塞并发症、外周动脉闭塞和肺纤维化。其它病症包括但不限于多囊卵巢综合征、阿尔茨海默氏病和癌症。
本文中所用的术语“烷基”和“亚烷基”，无论单独或作为另一个基团的一部分使用均指取代的或未取代的脂族烃链，区别是烷基本质上是单价(即端基)，而亚烷基是双价，因而通常用作连接键(linker)。除另有说明外，两者均包括但不限于含1-约12个碳原子例如1-8个碳原子，优选1-6个碳原子，更优选1-4个碳原子的直链和支链。例如术语“烷基”包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基和叔丁基。那些任选取代的脂族烃链尤其包括在“烷基”定义中。代表性的任选取代基包括但不限于羟基、酰氧基、烷氧基、氨基、1-6个碳原子的1或2个烷基取代的氨基、氨酰基、酰氨基、1-6个碳原子的硫代烷氧基、取代的1-6个碳原子的硫代烷氧基和三卤甲基。
用于本文定义中的碳数目是指碳骨架和碳分支，但不包括取代基的碳原子，例如烷氧基取代等。
本文中所用的术语“链烯基”，无论单独或作为另一个基团的一部分使用均指取代的或未取代的脂族烃链，包括但不限于(除另有说明外)具有2-约10个碳原子的直链和支链并含至少一个双键。优选链烯基部分具有1或2个双键。此类链烯基部分可存在E或Z构象，而本发明化合物包括两种构象。尤其包括在“链烯基”定义中的是那些任选取代的脂族烃链。代表性的任选取代基包括但不限于羟基、酰氧基、烷氧基、氨基、1-6个碳原子的1或2个烷基取代的氨基、氨酰基、酰氨基、1-6个碳原子的硫代烷氧基、取代的1-6个碳原子的硫代烷氧基和三卤代甲基。杂原子例如与链烯基连接的O或S不应与连接双键的碳原子连接。
本文中所用的术语“炔基”无论单独或作为另一个基团的一部分使用均指取代的或未取代的脂族烃链，包括但不限于(除另有说明外)具有2-约10个碳原子的直链和支链并含至少一个三键。优选炔基部分具有约3-6个碳原子。在某些实施方案中，炔基可含有一个以上三键，在此类情形中，炔基必须含至少3个碳原子。尤其包括在“炔基”定义中的是那些任选取代的脂族烃链。代表性的任选取代基包括但不限于羟基、酰氧基、烷氧基、氨基、1-6个碳原子的1或2个烷基取代的氨基、氨酰基、酰氨基、1-6碳个原子的硫代烷氧基、取代的1-6个碳原子的硫代烷氧基和三卤代甲基。杂原子例如与炔基连接的O或S不应与连接三键的碳原子连接。
本文中所用的术语“环烷基”无论单独或作为另一个基团的一部分均指取代的或未取代的具有3-约20个碳原子，优选3至约6个碳原子(除另有说明外)。“环烷基”定义特别包括那些被任选取代的脂环烃基。例如，在本发明的某些实施方案中，环烷基环可任选被1-3个选自以下的基团取代卤素、C1-C6烷基、C1-C3全氟烷基、-O-C1-C3全氟烷基、C1-C3烷氧基、-OH、-NH2或-NO2。
术语“芳基”用于本文时，无论是单独或是作为另一个基团的部分使用，都定义为取代或未被取代的芳族烃环基团，其含有5至约50个碳原子，优选从约6至约14个碳原子。“芳基”可具有单环或多稠环。术语“芳基”包括但不限于苯基、α-萘基、β-萘基、联苯基、蒽基、四氢萘基、芴基、茚满基、亚联苯基和苊基。“芳基”定义特别包括那些被任选取代的芳基。因此，本文中所述的芳基是指未取代的或取代的芳基。例如，术语苯基是指取代的和未取代的苯基。在本发明的代表性实施方案中，任选“芳基”被1-5个选自以下的取代基取代酰氧基、羟基、酰基、1-6个碳原子的烷基、1-6个碳原子的烷氧基、2-6个碳原子的链烯基、2-6个碳原子的炔基、氨基、1-6个碳原子的1或2个烷基取代的氨基、氨酰基、酰氨基、叠氮基、氰基、卤素、硝基、1-6个碳原子的硫代烷氧基、取代的1-6个碳原子的硫代烷氧基和三卤甲基。本文中芳基上的示例性取代基包括烷基、烷氧基、卤素、氰基、硝基、三卤素甲基和硫代烷氧基。在本发明的某些实施方案中，可任选芳基环被1-3个选自以下的基团取代卤素、C1-C6烷基、C1-C6全氟烷基、-O-C1-C6全氟烷基、C1-C6烷氧基、-OH、-NH2、-NO2、-CN、芳基、-O-芳基、-NH-芳基、-NH-CO-烷基或-NH-CO-芳基。
术语“杂芳基”用于本文时，无论是单独或是作为另一个基团的部分使用，都定义为取代或未被取代的芳族杂环系统(单环或双环)。杂芳基可具有例如从约3至约50个碳原子(除非另外明确指定)，优选从约4至约10个。在一些实施方案中，杂芳基是具有约4至约14个环原子的芳族杂环系统，且含有碳原子和1、2、3或4个选自氧、氮或硫的杂原子。代表性的杂芳基是呋喃、噻吩、吲哚、氮杂吲哚、唑、噻唑、异唑、异噻唑、咪唑、N-甲基咪唑、吡啶、嘧啶、吡嗪、吡咯、N-甲基吡咯、吡唑、N-甲基吡唑、1，3，4-二唑、1，2，4-三唑、1-甲基-1，2，4-三唑、1H-四唑、1-甲基四唑、苯并唑、苯并噻唑、苯并呋喃、苯并异唑、苯并咪唑、N-甲基苯并咪唑、氮杂苯并咪唑、吲唑、喹唑啉、喹啉和异喹啉。双环芳族杂芳基包括与下列环稠合的苯基、吡啶、嘧啶或哒嗪(pyridizine)环(a)具有一个氮原子的6元芳族(不饱和)杂环；(b)具有二个氮原子的5元或6元芳族(不饱和)杂环；(c)具有一个氮原子和一个氧或一个硫原子的5元芳族(不饱和)杂环；或(d)具有一个选自O、N或S的杂原子的5元芳族(不饱和)杂环。“杂芳基”定义特别包括那些被1至5个取代基取代的芳族杂环，这些取代基选自酰氧基、羟基、酰基、1至6个碳原子的烷基、1至6个碳原子的烷氧基、2至6个碳原子的烯基、2至6个碳原子的炔基、取代的烷基、取代的烷氧基、取代的烯基、取代的炔基、氨基、1-6个碳原子的1或2个烷基取代的氨基、氨酰基、酰氨基、叠氮基、氰基、卤素、硝基、从1至6个碳原子的硫代烷氧基、从1至6个碳原子的取代的硫代烷氧基和三卤代甲基。在本发明示例性实施方案中，杂芳基环可任选被选自以下的1-3个基团取代卤素、C1-C6烷基、C1-C6全氟烷基、-O-C1-C6全氟烷基、C1-C6烷氧基、-OH、-NH2、-NO2、-CN、芳基、-O-芳基、-NH-芳基、-NH-CO-烷基或-NH-CO-芳基。
本文中使用的术语“烷氧基”是指-O-Ra基团，其中Ra是以上定义的烷基。
在上述烷基、链烯基、炔基、硫代烷氧基和烷氧基上的示例性取代基包括但不限于卤素、-O-C1-C6烷基、-NH-C1-C6烷基、-CN、-OH和氨基。
本文中使用的术语“芳基烷基”无论单独或作为另一个基团的一部分使用均指-Ra-Rb基团，其中Ra是被Rb取代的以上定义的烷基、以上定义的芳基。芳基烷基部分的实例包括但不限于苄基、1-苯基乙基、2-苯基乙基、3-苯基丙基、2-苯基丙基等。
本文中使用的术语“烷基杂芳基”无论单独或作为另一个基团的一部分使用均指-Rc-Ra基团，其中Rc是被以上定义的Ra烷基取代的以上定义的杂芳基。
本文中使用的术语“杂环”无论单独或作为另一个基团的一部分使用均指稳定的含碳原子和选自氮、磷、氧和硫的1-3个杂原子的3-8元环。本发明杂环可以是单环或双环系统，且可以是饱和或部分饱和的。杂环基包括但不限于吖啶基、氮杂环丁烷基、1，4-二氧六环基、六氢吖庚因基、哌嗪基、哌啶基、吡咯烷基、吗啉基、硫代吗啉基、二氢苯并咪唑基、二氢苯并呋喃基、二氢苯并噻吩基、二氢苯并唑基、二氢呋喃基、二氢咪唑基、二氢吲哚基、二氢异唑基、二氢异噻唑基、二氢二唑基、二氢唑基、二氢吡嗪基、二氢吡唑基、二氢吡啶基、二氢嘧啶基、二氢吡咯基、二氢喹啉基、二氢四唑基、二氢噻二唑基、二氢噻唑基、二氢噻吩基、二氢三唑基、二氢氮杂环丁烷基、二氢-1，4-二氧六环基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢喹啉基和四氢异喹啉基。
本文中使用的术语“全氟烷基”无论单独或作为另一个基团的一部分使用均指具有1-约6个碳原子和2个或更多个氟原子的饱和脂烃，且包括但不限于直链或支链，例如-CF3、-CH2CF3、-CF2CF3和-CH(CF3)2。
术语“卤素”或“卤代”是指氯、溴、氟和碘。
在本发明中，″n″可以是0、1、2、3、4、5或6。″m″可以是1、2、3、4、5或6。
术语“治疗”或“医治”是指任何成功缓解损伤、病变或病症的标记，它包括任何目的或客观参数，例如消除；减轻；减少症状或使患者可更耐受损伤、病变或病症；减慢变性或衰退的速度；使变性的终点较少衰退；或改善患者的身体或精神健康。可根据目的或客观参数进行治疗或缓解症状；这些目的或客观参数包括体检结果、神经学检查和/或精神病学评价。“治疗”或“治疗PAI-1相关病症”包括预防可能易感染PAI-1相关疾病，但尚未经历或出现所述疾病症状的患者的症状发生(预防性治疗)、抑制疾病症状(减缓或阻止其发展)、提供缓解疾病的症状或副作用(包括缓解治疗)和/或解除疾病症状(导致消退)。因此，术语“治疗”包括给予患者本发明的化合物或药物，预防或延迟、缓解或阻止，或抑制与PAI-1相关疾病例如与癌症有关的肿瘤生长的病症或症状发展。熟练的医务专业人员将知道如何使用标准方法，例如通过检查患者或通过确定疑似患有已知与PAI-1相关的疾病的个体的血浆或组织中的PAI-1水平，将疑似患有PAI-1相关疾病的个体的血浆或组织中的PAI-1水平与健康个体的血浆或组织中的PAI-1水平作比较，以确定患者是否患有与高PAI-1的水平和/或活性有关的疾病。升高的PAI-1水平是这些疾病的指征。因此，本发明尤其提供给予患者本发明化合物的方法和测定患者中PAI-1水平的方法。在给予该化合物前和/或后，可测定患者中的PAI-1水平。
在健康个体中，发现血浆中的PAI-1水平低(例如约5-26ng/mL)，但它在许多PAI-1相关疾病中升高，这些疾病包括例如动脉粥样硬化(Schneiderman J.等，Proc Natl Acad Sci 896998-7002，1992)、深静脉血栓形成(Juhan-Vague I，等，Thromb Haemost 5767-72，1987)和非胰岛素依赖型糖尿病(Juhan-Vague I，等，Thromb Haemost 78565-660，1997)。PAI-1稳定动脉和静脉血栓、分别导致心肌梗死后冠脉栓塞(Hamsten A，等Lancet 23-9，1987)和整形外科手术恢复后形成静脉血栓(Siemens HJ等，J Clin Anesthesia 11622-629，1999)。例如在绝经后妇女中血浆PAI-1也升高，有人认为，它在该类群体中增加心血管病疾病的发生率(Koh K等，N Engl J Med 336683-690，1997)。
术语“PAI-1相关疾病或疾病”是指与增加或增强PAI-1的表达和活性有关的，或与增加或增强或基因编码PAI-1的表达和活性有关的任何疾病或病症。这种增加活性或表达的实例可包括以下一种或多种蛋白活性或基因编码蛋白表达增加超过正常受试者的水平；在正常受试者中不能正常检出其器官、组织或细胞中的蛋白活性或基因编码蛋白表达(即改变蛋白质的空间分布或基因编码蛋白的表达)；当蛋白活性或基因编码蛋白表达存在于器官、组织或细胞的时间比在正常受试者中长时，蛋白活性或基因编码蛋白表达增加(即蛋白活性或基因编码蛋白表达期延长)。正常或健康受试者是未患有PAI-1相关疾病和疾病的受试者。
术语“药学上可接受的赋型剂”表示通常是安全、无毒和需要的可用于制备药用组合物的赋型剂，包括兽用和人的药用可接受的赋型剂。此类赋型剂可以是固体、液体、半固体，或在气雾剂组合物的情况下为气态。
“药学上可接受的盐和酯”是指药学上可接受的且具有需要的药理性质的盐和酯。此类盐包括例如其中存在于化合物中的酸性质子能与无机或有机碱反应可形成的盐。适宜的无机盐包括例如与碱金属或碱土金属例如钠和钾、镁、钙和铝形成的那些无机盐。适宜的有机盐包括例如与有机碱例如胺碱例如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨丁三醇、N-甲基葡糖胺等形成的那些有机盐。药学上可接受的盐还可包括由母体化合物中的碱性部分例如胺与无机酸(例如盐酸和氢溴酸)和有机酸(例如乙酸、柠檬酸、马来酸和烷烃-和芳烃-磺酸例如甲磺酸和苯磺酸)反应形成的酸加成盐。药学上可接受的酯包括由存在于所述化合物中的羧基、磺酰氧基和膦酰氧基形成的酯，例如C1-6烷基酯。当有两个酸性基团存在时，药学上可接受的盐和酯可以是单酸单盐和单酯或双盐或双酯；同样当有两个以上的酸性基团存在时，某些或所有此类基团可以成盐或酯化。在本发明中提及的化合物可存在未成盐或未酯化形式，或成盐和/或酯化形式，提及的此类化合物应包括原始(未成盐或未酯化)化合物及其药学上可接受的盐和酯。在本发明中命名的某些化合物也可存在1个以上的立体异构形式，因而提及的此类化合物应包括此类立体异构体的所有单一立体异构体和所有混合物(无论外消旋或其它)。
表达或活性的“抑制剂”、“激活剂”和“调节剂”分别指用于表示用体外和体内的表达或活性测定鉴定的抑制、激活或调节分子。本发明抑制剂是抑制PAI-1表达或结合、部分或完全阻断刺激、减少、防止、延迟激活、钝化、脱敏或下调PAI-1活性的组合物。可用本发明组合物处理含PAI-1的样品或进行测定，并与无本发明组合物的对照样品对比。可将对照样品(未用本发明组合物处理)定为相对活性值100％。在某些实施方案中，当相对于对照的活性值为约80％或更低，任选50％或25、10％、5％或1％时，实现抑制PAI-1。
当它们指组合物、载体、稀释剂和试剂时，术语“药学上可接受的”、“生理上可耐受的”及其各种语法形式可互换使用，代表可给予人而无不需要的在某种程度上妨碍给予化合物的生理作用例如恶心、头晕、反胃等的物质。
“治疗有效量”或“药物有效量”表示给予患者时产生使用它而引起的作用的量。例如，当给予患者抑制PAI-1活性时，“治疗有效量”足以抑制PAI-1活性。当给予患者治疗疾病时，“治疗有效量”足以有效治疗该疾病。
除注明外，术语“受试者”或“患者”互换使用，且指哺乳动物例如人类患者和非人灵长类动物以及实验动物例如兔、大鼠、小鼠和其它动物。因此，本文中使用的术语“受试者”或“患者”表示本发明化合物可给予的任何哺乳动物患者或受试者。在本发明的一个示例性实施方案中，为鉴定按本发明方法治疗的患者，使用公认的筛选方法以确定与靶标的或疑似的疾病或病症有关的风险因素，或测定患者现有疾病或病症的状态。这些筛选方法包括例如常规病情检查，以确定可与靶标的或疑似的疾病或病症有关的风险因素。这些和其它常规方法使得临床医师选择需要用本发明方法和制剂治疗的患者。
本发明提供取代的苯并呋喃肟。优选给予此类化合物以抑制患者中的PAI-1表达或活性，最终治疗患者的与PAI-1活性增加有关的疾病或病症，例如PAI-1相关疾病。
B.取代的苯并呋喃肟本发明提供取代的苯并呋喃肟。优选给予此类化合物抑制患者的PAI-1表达或活性，最终治疗患者的与PAI-1活性增加有关的疾病或病症，例如PAI-1相关病症。
取代的苯并呋喃肟包括那些下式化合物 式1其中R1是连接A的直接键、C1-C4亚烷基或-O-C1-C4亚烷基；R2和R3独立是氢、卤素、C1-C4烷基、C1-C3全氟烷基、-O-C1-C3全氟烷基、C1-C3烷氧基、-OH、-NH2、-NO2、芳基、杂芳基、-O(CH2)p-芳基、-O(CH2)p-杂芳基、-NH(CH2)p-芳基、-NH(CH2)p-杂芳基、-NH(CO)-芳基、-NH(CO)-杂芳基、-O(CO)-芳基、-O(CO)-杂芳基、-NH(CO)-CH＝CH-芳基或-NH(CO)-CH＝CH-杂芳基；p是0-6的整数；R4是氢、C1-C8烷基或C3-C6环烷基；A是-COOH或酸类似物；X是C1-C8亚烷基、C3-C6亚环烷基、-(CH2)mO-或-(CH2)mNH-；m是1-6的整数；和
R5是氢、C1-C8烷基、C3-C6环烷基、-CH2-C3-C6环烷基、吡啶基、-CH2-吡啶基、苯基或苄基；R6和R7独立是氢、卤素、C1-C6烷基、C1-C6全氟烷基、-O-C1-C6全氟烷基、C1-C6烷氧基、-OH、-NH2、-NO2、-O(CH2)n-芳基、-O(CH2)n-杂芳基、芳基或杂芳基；和n是0-6的整数。
本发明化合物还包括式1的前药、立体异构体或其药学上可接受的盐或酯形式。
用于本发明的R1可以是连接A的直接键、C1-C4亚烷基或-O-C1-C4亚烷基。式2的代表性R1基团包括但不限于C1-C4亚烷基、C1-C3亚烷基-O-C1-C3亚烷基或任选被选自C1-C4烷基、芳基或苄基的1-3个基团取代的-O-C1-C4亚烷基，在某些实施方案中，R1是直接键或甲基。在此类实施方案中，本文中R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、A、p、m和n如同对式2的定义。
R2可以是氢、卤素、C1-C4烷基、C1-C3全氟烷基、-O-C1-C3全氟烷基、C1-C3烷氧基、-OH、-NH2、-NO2、芳基、杂芳基、-O(CH2)p-芳基、-O(CH2)p-杂芳基、-NH(CH2)p-芳基、-NH(CH2)p-杂芳基、-NH(CO)-芳基、-NH(CO)-杂芳基、-O(CO)-芳基、-O(CO)-杂芳基、-NH(CO)-CH＝CH-芳基或-NH(CO)-CH＝CH-杂芳基。式2的代表性R2基团包括但不限于芳基、杂芳基、-O(CH2)p-芳基、-O(CH2)p-杂芳基、-NH(CH2)p-芳基、-NH(CH2)p-杂芳基、-NH(CO)-芳基或-NH(CO)-杂芳基，它们任选被1-3个选自以下的基团取代卤素、C1-C6烷基、C1-C3全氟烷基、-O-C1-C3全氟烷基、C1-C3烷氧基、-OH、-NH2、-NO2或-CN。在本发明的某些实施方案中，R2是氢、卤素、-OH、CF3取代的芳基或叔丁基取代的-NHC(O)-芳基。在此类实施方案中，R1、R3、R4、R5、R6、R7、X、A、p、m和n如同本文对式1的定义。
R3可以是氢、卤素、C1-C4烷基、C1-C3全氟烷基、-O-C1-C3全氟烷基、C1-C3烷氧基、-OH、-NH2、-NO2、芳基、杂芳基、-O(CH2)p-芳基、-O(CH2)p-杂芳基、-NH(CH2)p-芳基、-NH(CH2)p-杂芳基、-NH(CO)-芳基、-NH(CO)-杂芳基、-O(CO)-芳基、-O(CO)-杂芳基、-NH(CO)-CH＝CH-芳基或-NH(CO)-CH＝CH-杂芳基。式2的代表性R3基团包括但不限于-O(CH2)p-芳基、-O(CH2)p-杂芳基、芳基、杂芳基、-NH(CH2)p-芳基、-NH(CH2)p-杂芳基、-NH(CO)-芳基或-NH(CO)-杂芳基，其中任选芳基和杂芳基环被1-3个选自以下的基团取代卤素、C1-C6烷基、C1-C3全氟烷基、-O-C1-C3全氟烷基、C1-C3烷氧基、-OH、-NH2、-NO2或-CN。在某些化合物中，R3是氢、卤素、-OH、CF3取代的芳基或叔丁基取代的-NHC(O)-芳基。在此类化合物中，R1、R2、R4、R5、R6、R7、X、A、p、m和n如同本文对式1的定义。
R4是氢、C1-C8烷基、C3-C6环烷基或芳基。在本发明的某些实施方案中，R4是氢。在此类实施方案中，R1、R2、R3、R5、R6、R7、X、A、p、m和n如同本文对式1的定义。
R5可以是氢、C1-C8烷基、C3-C6环烷基、-CH2-C3-C6环烷基、杂芳基、-CH2-杂芳基、芳基或苄基。式1的代表性R5包括但不限于C3-C6环烷基、-CH2-C3-C6环烷基、吡啶基、-CH2-吡啶基、苯基或苄基，其中环烷基、吡啶基、苯基和/或苄基的环被选自以下的1-3个基团取代卤素、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C3全氟烷基、-O-C1-C3全氟烷基、C1-C3烷氧基、-OH、-NH2、-NO2或-CN。在本发明的某些实施方案中，R5是烷基或氢。在此类实施方案中，R1、R2、R3、R4、R6、R7、X、A、p、m和n如同本文对式1的定义。
R6可以是氢、卤素、C1-C6烷基、C1-C6全氟烷基、-O-C1-C6全氟烷基、C1-C6烷氧基、-OH、-NH2、-NO2、-O(CH2)n-芳基、-O(CH2)n-杂芳基、芳基或杂芳基。式1的代表性R6基团包括但不限于-O(CH2)n-芳基、-O(CH2)n-杂芳基、芳基或杂芳基，其中芳基和/或杂芳基的环被选自以下的1-3个基团取代卤素、C1-C6烷基、C1-C3全氟烷基、-O-C1-C3全氟烷基、C1-C3烷氧基、-OH、-NH2、-NO2或-CN。在本发明的某些实施方案中，R6是烷基或氢。在此类实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5、R7、X、A、p、m和n如同本文对式1的定义。
R7可以是氢、卤素、C1-C6烷基、C1-C6全氟烷基、-O-C1-C6全氟烷基、C1-C6烷氧基、-OH、-NH2、-NO2、-O(CH2)n-芳基、-O(CH2)n-杂芳基、芳基或杂芳基。式1的代表性R7基团包括但不限于-O(CH2)n-芳基、-O(CH2)n-杂芳基、芳基或杂芳基，其中芳基和/或杂芳基的环任选被选自以下的1-3个基团取代卤素、C1-C6烷基、C1-C3全氟烷基、-O-C1-C3全氟烷基、C1-C3烷氧基、-OH、-NH2、-NO2或-CN。在本发明的某些实施方案中，R7是烷基或氢。在此类实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、X、A、p、m和n如同本文对式1的定义。
X可以是C1-C8烷基、-(CH2)mO-或-(CH2)mNH-。式1的代表性X基团包括但不限于C1-C6亚烷基、C1-C6支链亚烷基和C3-C6亚环烷基。在某些实施方案中，X是-CH2-、-CH2-CH2-O、-CH2-CH2-CH2-O-。在此类实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、A、p、m和n如同本文对式1的定义。
A可以是COOH或酸类似物。式1的代表性A基团包括但不限于-COOH、四唑、-SO3H、-PO3H2、-PO3H-C1-C4-烷基、特窗酸、酰基特窗酸、方形酸、二唑二酮(oxadiazolidenedione)和噻唑烷二酮(thiazolidenedione)。
在本发明的某些实施方案中，取代的苯并呋喃肟包括以下化合物
式2 式3 式4其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、A、p、m和n如同本文对式1的定义。
本发明的实例性取代的苯并呋喃肟包括但不限于4-[3-({[(1E)-(2-丁基-1-苯并呋喃-3-基)亚甲基]氨基}氧基)丙氧基]-2-[(4-叔丁基苯甲酰基)氨基]-苯甲酸或其药学上可接受的盐或酯形式；{4-[3-({[(1E)-(2-丁基-1-苯并呋喃-3-基)亚甲基]氨基}氧基)丙氧基]苯基}乙酸或其药学上可接受的盐或酯形式；4-[3({[(1E)-(2-丁基-1-苯并呋喃-3-基)亚甲基(methylidene)]氨基}氧基)丙氧基]-2-羟基苯甲酸或其药学上可接受的盐或酯形式；4-[2-({[(1E)-(2-丁基-1-苯并呋喃-3-基)亚甲基]氨基}氧基)乙氧基]-3-氯苯甲酸或其药学上可接受的盐或酯形式；2-溴-4-[({[(1E)-(2-丁基-1-苯并呋喃-3-基)亚甲基]氨基}氧基)甲基]苯甲酸或其药学上可接受的盐或酯形式；和6-[3-({[(1E)-(2-丁基-1-苯并呋喃-3-基)亚甲基]氨基}氧基)丙氧基]-4′-(三氟甲基)-1，1′-联苯基-3-羧酸或其药学上可接受的盐或酯形式。
本发明还提供含取代的苯并呋喃肟包括那些式1-4化合物或其立体异构体或药学上可接受的盐和一种和多种药学上可接受的载体、赋型剂或稀释剂的组合物。此类组合物包括用于治疗或控制与PAI-1活性增加有关的疾病状态或病症。在某些实施方案中，这些组合物含一种或多种取代的苯并呋喃肟的混合物。
某些式1-4的化合物含stereogenic碳原子或其它手性元素，因而产生立体异构体，包括对映体和非对映体。本发明包括所有式1-4的立体异构体和这些立体异构体的混合物。在本申请全文中，其中未注明不对称中心的绝对构型的产物名称应包括单一立体异构体和立体异构体的混合物。
当优选对映体时，在某些实施方案中，可提供基本上无相对对映体的对映体。因此，基本无对比对映体的对映体是指通过分离技术分离或分开的化合物，或制备的无相对对映体的化合物。本文中使用的″基本无″表示化合物由显著较高比例的一种对映体组成。在优选的实施方案中，所述化合物由至少约90％重量优选的对映体组成。在本发明的其它实施方案中，所述化合物由至少约99％重量优选的对映体组成。可通过本领域技术人员已知的任何方法包括高效液相色谱(HPLC)和形成和结晶手性盐，由外消旋混合物分离优选的对映体，或可通过本文中所述方法制备优选的对映体。例如在Jacques等，Enantiomers，Racemates and Resolutions(Wiley Interscience，New York，1981)；Wilen，S.H.等，Tetrahedron 332725(1977)；Eliel，E.L.Stereochemistry of Carbon Compounds(McGraw-Hill，NY，1962)；和Wilen，S.H.Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions第268页(E.L.Eliel编辑，Univ.of Notre Dame Press，Notre Dame，IN 1972)中描述的用于制备优选的对映体的方法。
本文中化合物的示例性盐的形式包括但不限于钠盐和钾盐。这些化合物的其它示例性盐形式包括但不限于用本领域中已知的药学上可接受的无机和有机碱形成的那些盐。用无机碱制备的盐形式包括理论上可接受的碱金属或碱土金属例如钠、钾、锂、镁、钙等的氢氧化物、碳酸盐和碳酸氢盐。可结束的有机碱包括胺，例如苄胺、单、二和三烷基胺，优选具有1-6个碳原子，更优选1-3个碳原子的烷基的那些胺，例如甲胺、二甲胺、三甲胺、乙胺、二乙胺、三乙胺、单、二-和三乙醇胺。示例性盐还包括含至多6个碳原子的亚烷基二胺，例如六亚甲基二胺；含至多6个碳原子的饱和或不饱和环状碱，包括吡咯烷、哌啶、吗啉、哌嗪及其N-烷基和N-羟烷基衍生物，例如N-甲基吗啉和N-(2-羟乙基)-哌啶或吡啶。还可形成季盐，例如四烷基形式，例如四甲基形式、烷基-链烷醇形式，例如甲基-三乙醇或三甲基-一乙醇形式和环状铵盐形式，例如N-甲基吡啶、N-甲基-N-(2-羟乙基)-吗啉、N，N-二甲基吗啉、N-甲基-N-(2-羟乙基)-吗啉或N，N-二甲基-哌啶盐形式。可用式1-4的酸性化合物和本领域已知方法制备这些盐形式。
本发明化合物的示例性酯形式包括但不限于具有从1至6个碳原子的直链烷基酯或含有1至6个碳原子的支链烷基酯，包括甲基、乙基、丙基、丁基、2-甲基丙基和1，1-二甲基乙基酯、环烷基酯、烷芳基酯、苯甲基酯等。其它的示例性酯包括但不限于那些式-COOR12的酯，其中R12选自下式 其中R8、R9、R10、R11独立地选自氢、从1至10个碳原子的烷基、从6至12个碳原子的芳基、从6至12个碳原子的芳基烷基；杂芳基或烷基杂芳基，其中所述杂芳基环通过1至6个碳原子的烷基链连接。
根据本发明，酸和酸类似物被定义为供给质子或氢的基团。本发明的示例性酸类似物或酸模拟物(mimetics)包括药学上有用的羧酸和本领域已知的酸类似物或酸模拟物，例如那些在R.Silverman，TheOrganic Chemistry of Drug Design and Drug Action(药物设计和药物作用的生物化学)，Academic Press(1992)及其它中描述的酸。示例性酸类似物或酸模拟物包括四唑、特窗酸、酰基特窗酸和具有下式的基团 其中R13是C1-C6烷基、C2-C6链烯基、C3-C6环烷基、-CH2-(C3-C6环烷基)、C3-C6环烯基、-CH2-(C3-C6环烯基)、任选取代的芳基或杂芳基，或任选取代的芳基(C1-C6)烷基或杂芳基(C1-C6)烷基，芳基和杂芳基的定义同本文。
优选的本发明化合物抑制PAI-1活性。因此，这些化合物可用于治疗包括防止、抑制和/或缓解患者的PAI-1相关疾病，包括例如治疗非胰岛素依赖型糖尿病；治疗心血管病和治疗与冠状动脉和脑血管病有关的血栓形成事件。在使用本发明方法中，熟练医学从业者会懂得如何给予患有任何与PAI-1活性或表达增加有关的疾病例如糖尿病或心血管病的患者取代的苯并呋喃肟包括式1-4代表的那些化合物，以有效治疗该疾病。
在一示例性实施方案中，给予患者取代的苯并呋喃肟以便治疗涉及血栓形成和促血栓形成状态的疾病过程，血栓形成和促血栓形成状态包括但不限于形成动脉粥样硬化噬斑、静脉和动脉血栓形成、心肌缺血、房颤、深静脉血栓形成、凝血综合征、肺血栓、脑血栓、手术(例如关节和髋置换)所致血栓栓塞并发症和外周动脉闭塞。
可用取代的苯并呋喃肟治疗患者与PAI-1活性或表达增加有关的任何疾病。示例性疾病和病症包括中风，例如与房颤有关或由房颤导致的中风；与胞外基质蓄积有关的疾病，包括但不限于肾纤维化、慢性阻塞性肺病、多囊卵巢综合征、再狭窄、肾血管病(renovascular)和器官移植排斥；与新血管形成有关的疾病，包括但不限于糖尿病性视网膜病；阿尔茨海默氏病，例如通过使患者中血纤维蛋白溶酶浓度水平增加或恢复正常；骨髓完全发育时的骨髓纤维变性，例如通过调节基质细胞增生和在胞外基质蛋白增加。
可用本发明化合物治疗例如糖尿病性肾病和与肾病有关的肾透析；恶性肿瘤和癌症，包括但不限于白血病、乳腺癌和卵巢癌；肿瘤，包括但不限于脂肉瘤和上皮瘤；败血症；肥胖；胰岛素抵抗；增殖性疾病包括但不限于银屑病；与异常凝血体内平衡有关的病症；低级血管炎症；脑血管病；高血压；痴呆；骨质疏松；关节炎；呼吸疾病，例如哮喘；心力衰竭；心律失常；绞痛包括但不限于心绞痛；动脉粥样硬化和后遗症；肾衰竭；多发性硬化症；骨质疏松；骨质减少；痴呆；外周血管病；外周动脉病；急性血管综合征；微血管病包括但不限于肾病、神经病、视网膜病和肾病综合征；高血压；I和II型糖尿病和相关疾病；高血糖；高胰岛素血；恶性损害(malignant lesions)；恶性前损害(premalignant lesions)；胃肠恶性肿瘤；冠心病，包括但不限于一级和二级预防心肌梗死、稳定性和非稳定性绞痛、一级预防冠心病发作、二级预防心血管事件；和炎性疾病，它们包括但不限于败血症休克和与感染有关的血管损伤。
本发明化合物也可与第二种治疗药物联合给予患者，它们包括但不限于促血栓溶解(prothrombolytic)、溶解纤维蛋白和抗凝血药物，或与其它疗法例如含蛋白酶抑制剂的高活性抗逆转录病毒疗法(HAART)联合治疗由感染HIV-1患者的纤维蛋白溶解损害和超凝固性产生的疾病。在某些实施方案中，可与涉及维持血管开放的过程或方法联合给予和/或按照涉及维持血管开放的过程或方法给予本发明化合物，这些方法包括但不限于血管手术、血管移植物和移植片固定模开放、器官、组织和细胞植入和移殖。本发明化合物也可用于处理用于透析、流体相血液储存、尤其离体血小板凝集的血液和血液制品。本发明化合物也可作为激素替代药物给予患者，或减少炎性标记物或C-活性蛋白。可给予这些化合物以改善凝血的体内平衡，改善内皮功能，或用作局部使用治愈损伤例如防止结疤。可给予患者本发明化合物，以减少经历心肌换血管术方法的风险。在医院环境中进行血化学分析时，也可将本发明化合物加入人血浆中测定其纤维蛋白溶解能力。在某些实施方案中，本发明化合物可用作鉴定转移性肿瘤的显影剂。
C.合成取代的苯并呋喃肟有机合成领域技术人员可用使用易得试剂和原料的常规方法制备本发明化合物。可用以下合成流程制备本发明的代表性化合物。在以下合成流程中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X和A选自以上定义的基团。熟练的从业者会懂得如何利用各种形式的这些方法步骤，它们本身在本领域中是众所周知的。
在本发明的某些实施方案中，可用流程1或2制备代表性的取代的苯并呋喃肟。
流程1 在文献(Chim.Ther.1966，221-227)中阐述由适当的2-烷基苯并呋喃制备2-烷基-苯并呋喃3-甲醛1。在溶剂混合物如乙醇/水中，醛1可与盐酸羟胺、碱例如氢氧化钠反应生成肟2。在碱如碳酸铯或碳酸钾的存在下，在溶剂如丙酮中，肟2可与多种烷基二溴化物反应。得到溴化物3。在碱如碳酸铯或碳酸钾的存在下，在溶剂如丙酮中，溴化物3与酚4反应生成酯5。将酯5皂化，得到相应的酸衍生物(当X＝(CH2)mO)时。
流程2或者在流程II中，在碱如碳酸铯或碳酸钾的存在下，在溶剂如丙酮中，肟2可与适当取代的溴化物6反应生成酯7。将酯7皂化，得到相应的酸衍生物。
D.取代的苯并呋喃肟药用组合物本发明提供取代的苯并呋喃肟药物。在优选的实施方案中，将苯并呋喃肟配制成药物，例如通过抑制患者中的PAI-1活性治疗与PAI-1活性增加有关的疾病。
一般而言，可通过本领域中任何已知给予治疗药物的方法给予作为药物组分的取代的苯并呋喃肟，这些给药方法包括口服、含服、局部、全身(例如透皮、鼻内或通过栓剂)或肠胃外(例如肌内、皮下或静脉内注射)。这些组合物可采用片剂、丸剂、胶囊剂、半固体、粉末、缓释剂型、溶液、混悬液、乳液、糖浆、酏剂、气雾剂或任何其它适当组合物的形式；且含有与至少一种药学上可接受的赋型剂联合的至少一种本发明化合物。本领域普通技术人员熟知适宜的赋型剂，可在此类标准参考书如Alfonso ARRemington’sPharmaceutical Sciences，第17版，Mack Publishing Company，EastonPA，1985中找到这些赋型剂以及配制组合物的方法。尤其用于注射溶液的适宜的液体载体包括水、盐水溶液、葡萄糖水溶液和二醇。在本发明的一些实施方案中，适用于实施本发明的取代的联苯氧酸可单独或与至少一种本发明的其它化合物联合给予。适用于实施本发明的取代的联苯氧酸也可与至少一种用于治疗所述疾病的其它常规药物一起给予。
本发明含水混悬液可含与适宜制备含水混悬液的赋型剂混合的取代联苯氧酸。此类赋型剂可包括悬浮剂如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄芪胶、阿拉伯胶和分散剂或湿润剂如自然生成的磷脂(例如卵磷脂)、环氧烷与脂肪酸的缩合物(例如聚氧乙烯硬脂酸酯)、环氧乙烷与长链脂族醇的缩合物(例如十七乙烯氧基鲸蜡醇)、环氧乙烷与由脂肪酸和己糖醇衍生的偏酯的缩合物(例如聚氧乙烯山梨醇单油酸酯)，或环氧乙烷与由脂肪酸和己糖醇酐衍生的偏酯的缩合物(例如聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯)。水混悬液也可含一种或多种防腐剂例如对羟基苯甲酸乙酯或正丙酯、一种或多种着色剂、一种或多种矫味剂和一种或多种甜味剂，例如蔗糖、阿司帕坦或糖精。可调节剂型的克分渗透压浓度。
可通过使取代联苯氧酸悬浮在植物油例如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油中，或悬浮在矿物油例如液体石蜡中；或悬浮在它们的混合物中配制油混悬液。油混悬液可含增稠剂，例如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。可加入甜味剂例如甘油、山梨醇或蔗糖提供爽口的口服制剂。可通过加入抗氧剂例如抗坏血酸保存这些剂型。参见Minto，J.Pharmacol.Exp.Ther.28193-102，1997中的一个注射油溶媒的实例。本发明的药用剂型也可是水包油乳液形式。油相可以是上述植物油或矿物油或它们的混合物。适宜的乳化剂包括天然产生的胶例如阿拉伯胶和黄芪胶、天然产生的磷脂例如大豆卵磷脂、衍自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯如山梨醇酐单油酸酯及这些偏酯与环氧乙烷的缩合产物如聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯，如在糖浆和酏剂剂型中也可含甜味剂和矫味剂。此类剂型也可含缓和剂、防腐剂或着色剂。
可选择单独化合物或与其它适宜的成分联合制备成通过吸入给药的气雾剂制剂(即它们可以是“雾状”)。可将气雾剂制剂置于加压的可接受的抛射剂例如二氯二氟甲烷、丙烷、氮气等中。
用于肠胃外例如通过关节内、静脉内、肌内、皮内、腹膜内和皮下途径给药的制剂包括水和非水等渗无菌注射液，它可含抗氧剂、缓冲剂、抑菌剂、使剂型与预定接受者血液等渗的溶质和可包含悬浮剂、稳定剂、增稠剂、稳定剂和防腐剂的水和非水无菌混悬液。在可使用的可接受的溶媒和溶剂中，有水、林格氏液、等渗氯化钠。此外，通常可将无菌固定油用作溶剂或悬浮溶媒。为此目的，可使用任何调和固定油包括合成单或二甘油酯。此外，脂肪酸例如油酸同样可用于注射制剂。这些溶液是无菌，通常不含不需要的物质。当化合物足够可溶时，可使用或不使用合适的有机溶剂例如丙二醇和聚乙二醇将它们直接溶于正常盐水。可在水溶性淀粉或羧甲基纤维素钠，或在适宜的油例如花生油中制备细分散的化合物分散体。可通过常规的、熟知的消毒技术将这些制剂消毒。需要时，所述剂型可含接近生理条件的药学上可接受的辅助物质例如pH调节、缓冲剂、毒性(toxicity)调节剂例如乙酸钠、氯化钠、氯化钾、氯化钙、乳酸钠等。取代的联苯氧酸在这些制剂中的浓度可大不相同，主要根据流体体积、粘性、体重等，按照具体选择的给药途径和患者的需要选择。用于IV给药的制剂可以是无菌注射制剂，例如无菌注射水或油混悬液。可按已知技术，用那些适宜的分散剂、湿润剂和悬浮剂配制混悬液。无菌注射制剂也可以是无菌注射液，或无毒肠胃外可接受的稀释剂或溶剂例如1，3-丁二醇溶液的混悬液。推荐所述剂型可以以密封的单位剂量或多个剂量容器例如安瓿和小瓶中呈现。
可由前述种类的无菌粉末、颗粒和片剂制备注射液和混悬液。
可口服适用于实施本发明的取代的苯并呋喃肟。根据组合物的种类、单位剂量大小、赋型剂种类和本领域普通技术人员熟知的其它因素，组合物中本发明化合物的量可以很不相同。一般而言，最终组合物可含例如0.000001％重量(％w)-10％w取代的苯并呋喃肟，优选0.00001％w-1％w，其余是赋型剂。
可用本领域中熟知的适用于口服给予的剂型，用药学上可接受的载体配制口服给药的药物制剂。此类载体可使药物制剂配制成单位剂型，例如适宜患者消化的片剂、丸剂、散剂、糖锭剂、胶囊剂、液体、锭剂、凝胶剂、糖浆剂、结晶浆液、混悬液等。适宜口服的制剂可包括以下剂型(a)溶液，例如悬浮于稀释剂例如水、盐水或PEG 400的有效量的包装核酸；(b)各自含为液体、固体、颗粒或明胶的预定量活性成分的胶囊、小药囊或片剂；(c)适当液体的混悬液；和(d)合适的乳液。
可通过使本发明化合物和固体赋型剂混和，任选粉碎得到的混合物，处理颗粒混合物，酌情加入适宜的其它化合物后得到片剂或糖衣锭剂核，得到口服使用的药用制剂。适宜的固体赋型剂是糖类或蛋白质填充剂，包括但不限于糖包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨醇；玉米、小麦、大米、马铃薯或其它植物的淀粉；纤维素例如甲基纤维素、羟甲基纤维素、羟基丙基甲基-纤维素或羧甲基纤维素钠；和胶质包括阿拉伯胶和黄芪胶；以及蛋白质例如明胶和胶原。如果需要，加入崩解剂或增溶剂，例如交联聚乙烯吡咯烷酮、琼脂、藻酸或其盐例如藻酸钠。片剂形式可包括一种或多种乳糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、磷酸钙、玉米淀粉、马铃薯淀粉、微晶纤维素、明胶、胶体二氧化硅、滑石粉、硬脂酸镁、硬脂酸和其它赋型剂、着色剂、填充剂、粘合剂、稀释剂、缓冲剂、润湿剂、防腐剂、矫味剂、染料、崩解剂和药学上可接受的可配伍的载体。锭剂形式可包括在矫味剂例如蔗糖中的活性成分、在惰性基质例如明胶和甘油或蔗糖中含活性成分的锭剂、含除活性成分之外的本领域中已知的载体的阿拉伯胶乳液、凝胶等。
也可以以用于直肠给药的栓剂形式给予本发明的取代的苯并呋喃肟。可通过将药物与适宜的非刺激性赋型剂混和制备这些制剂，这些赋型剂在常温下为固体，而在直肠温度下为液体，因而在直肠中熔化而释放出药物。此类物质是可可豆脂和聚乙二醇。
也可通过鼻内、眼内、阴道内和直肠内途径，包括栓剂、吸入剂、粉末和气雾剂制剂(例如类固醇吸入剂，参见RohatagiJ.Clin.Pharmacol.351187-1193，1995；Tjwa，Ann.Allergy Asthma Immunol.75107-111，1995)给予本发明化合物。
可通过局部途径将配制成涂药棒、溶液、悬浮液、乳液、凝胶、霜剂。软膏、糊剂、凝胶、涂剂、粉末和气雾剂的本发明取代的苯并呋喃肟透皮递药。
微囊化物质也可和本发明化合物一起使用，术语“组合物”应包括与微囊化物质联合的含或不含其它载体的活性成分的制剂。例如，本发明化合物也可以作为用于体内缓释的微球传递。在一个实施方案中，可通过透皮注射在皮下缓慢释放的含药物的微球(参见Rao，J.Biomater Sci.Polym.第7版623-645，1995；作为可生物降解的和可注射的凝胶制剂(参见例如Gao，Pharm.Res.12857-863，1995)；或作为口服的微球(参见例如Eyles，J.Pharm.Pharmacol.49669-674，1997)给予微球。透皮和皮内途径提供数周或数月的恒定释药。扁囊剂也可用于递送本发明化合物例如抗动脉动脉粥样硬化药。
在另一个实施方案中，可通过使用与细胞膜融合或被胞饮(endocytosed)的脂质体即通过使用与脂质体连接，或直接和与在胞饮中产生的细胞的表面膜蛋白受体结合的寡核苷酸连接的配体递送本发明化合物。通过使用脂质体，尤其当脂质体表面携带靶细胞的特异性配体，或另外优先导向专一器官时，可在体内将化合物集中递送到靶细胞中(参见例如Al-Muhammed，J.Microencapsul.13293-306，1996；Chonn，Curr.Opin.Biotechnol.6698-708，1995；Ostro，Am.J.Hosp.Pharm.461576-1587，1989)。
在其它情形中，优选的制剂可以是冻干粉末，该粉末在pH 4.5-5.5范围内可含例如以下任何一种成分或全部成分1mM-50mM组氨酸、0.1％-2％蔗糖、2％-7％甘露醇，临用前与缓冲液混和。
除取代的联苯氧酸外，本发明的组合物还可任选含至少一种可用于治疗与PAI-1活性增加有关的疾病或病症的其它治疗药物。
药用组合物通常配制为无菌、基本上等渗并完全符合美国食品与药品管理局的药品生产质量管理规范。
E.确定取代的苯并呋喃肟的给药方案本发明提供用取代的苯并呋喃肟抑制患者的PAI-1活性，治疗与PAI-1活性增加有关的疾病或病症的方法。在本发明的一个示例性实施方案中，熟练的从业者会用本发明化合物治疗患有与高PAI-1水平和/或活性有关的疾病的患者。
用于治疗目的时，可按单次大剂量递药，通过长时间连续递药(例如连续透皮、粘膜或静脉递药)，或按重复给药方案(例如每小时、每日或每周重复给药方案)，给予患者本文中公开的组合物或化合物。可按例如每日一次或多次，每周三次或每周一次给予本发明的药物制剂。在本发明的示例性实施方案中，每日一次或两次通过口服给予本发明的药物制剂。
在本文中，生物学活性药物的治疗有效剂量可包括能产生缓解与PAI-1活性增加有关的一种或多种症状或可检测病症的临床显著结果的在长期治疗方案中的重复剂量。在本文中，通常根据动物模型研究，随后通过人临床试验确定有效剂量，并受测定明显减少患者的目标暴露症状和病症的发生或严重程度的有效剂量和给药方案的指导。该方面的适宜的模型包括例如小鼠、大鼠、猪、猫科动物、非人灵长类动物和本领域中已知的其它公认的动物模型受试者。或者，有效剂量可用体外模型测定(例如免疫学和组织病理学测定法)。用此类模型，通常仅需要普通计算和调整以确定给予治疗有效量的生物活性药物(例如鼻内有效、透皮有效、静脉内有效或肌内有效发挥所需反应的量)的适当浓度和剂量。在备选的实施方案中，“有效量”或“有效剂量”的生物活性药物可完全抑制或提高与上述疾病或病症有关的一种或多种选择的生物学活性，用于治疗或诊断目的。
生物活性药物实际剂量的变化当然取决于因素例如暴露程度和患者的具体状态(例如患者年龄、体重、健康状况、症状的严重程度、敏感因素等)、给药次数和途径，及同时给予的其它药物或治疗。可调整剂量方案，提供最佳预防或治疗反应。在此“治疗有效量”表示给予时可产生作用的剂量。更具体地说，优选本发明化合物的治疗有效剂量缓解与PAI-1活性增加有关的疾病的症状、并发症或生化指标。确切的剂量取决于治疗目的，本领域技术人员可用已知技术(见例如Lieberman，Pharmaceutical Dosage Forms(第1-3卷，1992)；Lloyd，1999，The Art，Science，and Technology of Pharmaceutical Compounding；和Pickar，1999，Dosage Calculations)确定。治疗有效剂量也是其中活性药物的治疗有益作用在临床条件下超过其任何毒性和有害副作用的剂量。还要指出，应评价用于每一具体患者的具体剂量方案，按个体需要和给予或监督给予化合物的人的专业判断随时调整。
在本发明的示例性实施方案中，制备用于标准给药方案的化合物单位剂型。这样在医师的指导下，可容易将组合物细分为更小的剂量。例如，单位剂量可由袋装粉末、小瓶或安瓿组成，且优选为胶囊或片剂形式。根据患者的特殊需要，存在于这些组合物的单位剂型中的活性化合物的量可以为例如约1克-约15克或更多，以用于每日单次或多次给药。通过用约1克的最小日剂量开始治疗，可用PAI-1的血液水平和患者症状缓解分析来确定是否需要更大或更小的剂量。可按约0.1mg/kg/日-约1,000mg/kg/日的口服剂量有效给予本发明化合物。优选给药剂量为约10mg/kg/日-约600mg/kg/日，更优选约25-约200mg/kg/日，而甚至更优选约50mg/kg/日-约100mg/kg/日。在某些实施方案中，提供约1mg/kg-约250mg/kg的日剂量。
在某些实施方案中，本发明涉及式1-4的化合物的前药。本文中使用的术语“前药”表示可在体内通过代谢方式(例如通过水解)转化为式1-4化合物的化合物。本领域中已知各种形式的前药，例如在例如Bundgaard，(编辑)，Design of Prodrugs，Elsevier(1985)；Widder等(编辑)，Methods in Enzymology，第4卷，Academic Press(1985)；Krogsgaard-Larsen等(编辑)。″Design and Application of Prodrugs，Textbook of Drug Design and Development，第5章，113-191(1991)，Bundgaard等，Journal of Drug Delivery Reviews，81-38(1992)，Bundgaard，J.of Pharmaceutical Sciences，77285以及下列等等(1988)；和Higuchi和Stella(编辑)Prodrugs as Novel Drug Delivery Systems，American Chemical Society(1975)中论述的那些前药。
F.药剂盒当将含取代苯并呋喃肟的药物在适宜的载体中配制后，可将其置于适当的容器中，标注用于治疗PAI-1相关疾病例如白血病。此外，也可将另一种含至少一种用于治疗PAI-1相关疾病的其它治疗剂的药物置于容器中，标注所治疗的适应症。或者，可将含取代苯并呋喃肟和至少一种用于治疗PAI-1相关疾病的其它治疗剂的单一药物置于适当的容器中，标注治疗用途。对于给予含有取代的联苯氧酸的药物以及在单一药物中含有取代的联苯氧酸和至少一种用于治疗PAI相关疾病的其它治疗剂的药物，这种标注应包括例如关于给药量、次数和方法的说明书。同样，对于给予用容器提供的多种药物，这种标注应包括例如每种药物的给药量、给药次数和方法的说明书。
实施例实施例1合成4-[3-({[(1E)-(2-丁基-1-苯并呋喃-3-基)亚甲基]氨基}氧基)丙氧基]-2-[(4-叔丁基-苯甲酰基)氨基]-苯甲酸步骤1向4-硝基-邻氨基苯甲酸(2.200g，10.9mmol，1当量)的苯/甲醇(4/1)(100mL)溶液中加入TMSCHN2(2M的己烷溶液)(12mL，24mmol，2.2当量)。将反应物在室温下搅拌30分钟，然后真空浓缩。残留物用乙酸乙酯/己烷(20/80)快速层析纯化，得到4-硝基-邻氨基苯甲酸甲酯(1.841g，86％)，为鲜黄色固体。1H NMR(300MHz，CDCl3)；δ8.00(d，1H)，7.50(d，1H)，7.40(dd，1H)，3.92(s，3H)。
步骤2向4-硝基-邻氨基苯甲酸甲酯(5.060g，25.8mmol)的CH2Cl2(200mL)溶液中加入三乙胺(8mL)和4-叔丁基苯甲酰氯，将反应物在室温下搅拌过夜。然后将其倾入盐水，用乙酸乙酯萃取，经MgSO4干燥，真空浓缩。残留物用乙酸乙酯/己烷(20/80)快速层析纯化，得到2-(4-叔丁基-苯甲酰基氨基)-4-硝基-苯甲酸甲酯(1.841g，86％)，为黄色固体。熔点(″mp″)＝146.0-148.4℃；质谱(-ES，M-H)m/z 355。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)；δ11.60(bs，1H)，9.35(d，1H)，8.20(d，1H)，8.02(dd，1H)，7.90(d，2H)，7.64(d，2H)，3.95(s，3H)，1.36(s，9H)。元素分析理论值C19H20N2O5C，64.04；H，5.66；N，7.86，实测值C，64.04；H，5.79；N，7.76。
步骤3向帕尔(Parr)摇瓶中加入10％Pd/C(0.346g)，然后加入乙酸乙酯(50mL)，随后加入2-(4-叔丁基-苯甲酰基氨基)-4-硝基-苯甲酸甲酯(3.041g，8.53mmol)的乙酸乙酯(200mL)溶液。使反应物氢化过夜，通过高岭土和硅胶过滤，用乙酸乙酯洗涤，真空浓缩。残留物用乙酸乙酯/己烷(20/80)快速层析纯化，得到4-氨基-2-(4-叔丁基-苯甲酰基氨基)-苯甲酸甲酯(2.122，76％)，为黄色固体。
步骤4向冷却至0℃的4-氨基-2-(4-叔丁基-苯甲酰基氨基)-苯甲酸甲酯(0.711g，2.18mmol)的三氟乙酸溶液中加入NaNO2(0.182g，2.64mmol，1.21当量)的水(4mL)溶液，搅拌反应物5分钟。然后在65℃将其滴加至30％H2SO4(50mL)溶液，搅拌15分钟。用乙酸乙酯萃取，经MgSO4干燥，真空浓缩。残留物用乙酸乙酯/己烷(20/80)快速层析纯化，得到2-(4-叔丁基-苯甲酰基氨基)-4-羟基-苯甲酸甲酯(0.508，71％)，为白色固体。mp＝146.0-148.4℃；质谱(-ES，M-H)m/z 326。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)；δ11.95(bs，1H)，10.60(bs，1H)，8.26(d，1H)，7.88(m，3H)，7.62(d，2H)，6.58(dd，1H)，3.85(s，3H)，1.32(s，9H).
元素分析理论值C19H21NO4C，69.71；H，6.47；N，4.28，实测值C，69.20；H，6.54；N，4.17。
步骤5按类似于在Chim.Ther.1966，221-227中使用的方法，以2-丁基-苯并呋喃为原料，用二甲基甲酰胺和磷酰氯进行甲酰化，得到2-丁基-苯并呋喃-3-甲醛。
步骤62-丁基-苯并呋喃-3-甲醛肟。向2-丁基-苯并呋喃-3-甲醛(10.0g，49.4mmol)的4∶1的乙醇∶水(125mL)溶液中加入盐酸羟胺(5.63g，81.1mmol)和氢氧化钠颗粒(2.06g，301.6mmol)。将反应混合物加热至回流30分钟，任其冷却至室温。将水(约500mL)加入反应化合物直至开始形成沉淀。然后用2N盐酸将混合物调至pH 6-7。用两份乙酸乙酯萃取混合物。合并有机物，经无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩。粗油通过硅胶快速层析纯化，用乙酸乙酯/己烷(0/100-9/91梯度)洗脱，得到2-丁基-苯并呋喃-3-甲醛肟(10.0g，93％)，为澄清黄色油状物。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)；δ11.18(s，1H)，8.35(s，1H)，7.93(m，1H)，7.53(m，1H)，7.28(m，2H)，2.90(t，2H)，1.63(m，2H)，1.31(m，2H)，0.88(t，3H).向NMR管中加入D2O导致δ11.18峰消失。
步骤7向2-丁基-苯并呋喃-3-甲醛肟(2.662g，12.22e)的丙酮(75mL)溶液中加入碳酸铯(16.6g，50.9mmol)和二溴丙烷(5.0mL，49.1mmol)，将反应物在回流下加热过夜。然后将其冷却至室温，使其在盐水和乙酸乙酯之间分配。水层用乙酸乙酯萃取，用盐水洗涤，经MgSO4干燥，真空浓缩。残留物通过使用乙酸乙酯/己烷(10/90)的硅胶快速层析纯化，得到2-丁基-苯并呋喃-3-甲醛O-(3-溴-丙基)-肟(1.086g，44％)，为白色固体。
1H NMR(300MHz CDCl3)；δ8.27(s，1H)，8.04(m，1H)，7.42(m，1H)，7.28(m，2H)，4.35(dd，2H)，3.58(t，2H)，2.82(dd，2H)，2.32(m，2H)，1.75(m，2H)，1.40(m，2H)，0.90(t，3H).
步骤8向2-(4-叔丁基-苯甲酰基氨基)-4-羟基-苯甲酸甲酯(0.325g，0.99mmol)的丙酮(50mL)溶液中加入2-丁基-苯并呋喃-3-甲醛O-(3-溴-丙基)-肟(O.410g，1.21mmol)和碳酸铯(1.342g，4.1mmol)，将反应物在回流下加热过夜。然后将其冷却至室温，倾入盐水中，用乙酸乙酯萃取。合并的有机物用盐水洗涤，经MgSO4干燥，真空浓缩。残留物用乙酸乙酯/己烷(10/90-20/80)快速层析纯化，得到4-[3-({[(1E)-(2-丁基-1-苯并呋喃-3-基)亚甲基]氨基}氧基)丙氧基]-2-[(4-叔丁基-苯甲酰基)氨基]-苯甲酸甲酯。
(+ES，M+H)m/z 585.1H NMR(400MHz，DMSO-d6)；.11.95(s，1H)，8.45(s，1H)，8.02(d，1H)，7.97(d，1H)，7.90(d，1H)，7.86(d，2H)7.62(d，2H)，7.52(d，1H)，7.45(m，1H)，7.22(m，1H)，6.82(dd，1H)，4.32(dd，2H)，4.23(dd，2H)，3.88(s，3H)，2.80(t，2H)，2.21(m，2H)，1.62(m，2H)，0.87(t，3H).
元素分析理论值C35H45N2O6C，71.9；H，6.9；N，4.79，实测值C，71.58；H，6.96；N，4.66。
步骤9向4-[3-({[(1E)-(2-丁基-1-苯并呋喃-3-基)亚甲基]氨基}氧基)丙氧基]-2-[(4-叔丁基-苯甲酰基)氨基]-苯甲酸甲酯(0.229g，0.47mmol)的乙醇/水/四氢呋喃(8/3/1)的溶液中加入2.5N NaOH(6mL，15mmol)，将反应物在回流下加热45分钟直至所有原料耗尽。将其冷却至室温，真空浓缩至小体积，用2N HCl溶液酸化至pH 1。用乙酸乙酯萃取其，经硫酸镁干燥，真空浓缩。残留物用乙酸乙酯/己烷(10/90-20/80)快速层析纯化，得到标题化合物(0.200g，70％)，为灰白色固体。mp＝180.9-182.5℃；质谱(+ES，M+H)m/z 571。
(+ES，M+H)m/z 571.1H NMR(400MHz，DMSO-d6)；δ13.40(bs，1H)，12.60(bs，1H)，8.50(s，1H)，8.44(d，1H)，7.98(d，1H)，7.92(d，1H)，7.86(d，2H)7.60(d，2H)，7.53(d，1H)，7.29(m，1H)，7.23(m，1H)，6.77(dd，1H)，4.33(dd，2H)，4.23(dd，2H)，2.91(t，2H)，2.20(m，2H)，1.64(m，2H)，0.86(t，3H).
元素分析理论值C36H38N2O6C，71.56；H，6.71；N，4.91，实测值C，70.83；H，6.68；N，4.74。
实施例2合成{4-[3-({[(1E)-(2-丁基-1-苯并呋喃-3-基)亚甲基]氨基}氧基)-丙氧基]-苯基}-乙酸用类似于实施例1步骤9和10的方法，由2-丁基-苯并呋喃-3-甲醛O-(3-溴-丙基)-肟和4-羟基苯乙酸甲酯制备标题化合物(0.201g，39％)。mp＝180.9-182.5℃；质谱(+ES，M+H)m/z 410。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)；δ12.25(bs，1H)，8.48(s，1H)，7.92(d，1H)，7.54(d，1H)，7.30(m，1H)，7.24(m，1H)，7.14(d，2H)，6.88(d，2H)，4.30(dd，2H)，4.08(dd，2H)，3.46(2，3H)，2.92(t，2H)，2.15(m，2H)，1.64(m，2H)，1.31(m，2H)，0.87(t，3H).
元素分析理论值C24H27NO5C，70.4；H，6.65；N，3.42，实测值C，70.06；H，6.76；N，3.36。
实施例3合成4-[3({[(1E)-(2-丁基-1-苯并呋喃-3-基)亚甲基]氨基}氧基)-丙氧基]-2-羟基苯甲酸用类似于实施例1步骤9和10的方法，由2-丁基-苯并呋喃-3-甲醛O-(3-溴-丙基)-肟和2，4-羟基苯乙酸甲酯制备标题化合物(0.201g，39％)。mp＝140.3-141.5℃；质谱(API-ES-，M-H)m/z 410。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)；δ13.60(bs，1H)，11.60(b8，1H)，8.48(s，1H)，7.91(d，1H)，7.68(d，1H)，7.54(d，1H)，7.30(m，1H)，7.24(m，1H)，6.50(m，2H)，4.30(dd，2H)，4.18(dd，2H)，2.92(t，2H)，2.27(m，2H)，1.64(m，2H)，1.31(m，2H)，0.87(t，3H).
元素分析理论值C23H25NO6C，67.14；H，6.12；N，3.40，实测值C，67.17；H，6.76；N，3.27。
实施例4合成4-({[(1E)-(2-丁基-1-苯并呋喃-3-基)亚甲基]氨基}氧基)乙氧基]-3-氯苯甲酸步骤1向3-氯-4-羟基-苯甲酸(6.047g，32.4mmol)的丙酮(60mL)溶液中加入碳酸钾(9.60g，69.5mmol)和烯丙基溴(3.4mL，39.3mmol)。将反应混合物在回流下加热4小时，然后冷却至室温。使其在乙酸乙酯和盐水之间分配，用乙酸乙酯萃取水层。用盐水洗涤合并的有机物，经无水硫酸镁干燥，真空浓缩。残留物用乙酸乙酯/己烷(5/95)快速层析纯化，得到4-烯丙氧基-3-氯-苯甲酸甲酯(7.16g，98％)，为无色油状物，静置后固化。
1H NMR(300MHz，CDCl3)；δ8.00(d，1H)，7.84(dd，1H)，6.88(d，1H)，6.02(m，1H)，5.36(m，2H)，4.62(d，2H)，3.85(s，3H).
步骤2将4-烯丙氧基-3-氯-苯甲酸甲酯(7.16g，31.5mmol)的甲醇/二氯甲烷(1/1)(120mL)溶液冷却至-40℃，然后向反应混合物中通入臭氧发泡15分钟。然后向溶液中充入氮气20分钟，加入氢硼化钠(2.643g，69.86mmol)，使混合物升温至室温1小时。加入水(20mL)猝灭反应，将混合物倾入盐水，用乙酸乙酯萃取。合并的有机物用盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，真空浓缩。残留物用乙酸乙酯/己烷(40/60-50/50)快速层析纯化，得到3-氯-4-(2-羟基-乙氧基)-苯甲酸甲酯(6.88g，94％)，为白色固体。1H NMR(300MHz，CDCl3)；δ8.05(d，1H)，7.91(dd，1H)，6.95(d，1H)，4.19(t，2H)，4.02(bt，2H)，3.89(s，3H)，2.38(bs，1H)。
步骤3向3-氯-4-(2-羟基-乙氧基)-苯甲酸甲酯(6.860g，29.7mmol)的二氯甲烷(85mL)溶液中加入四溴化碳(12.210g，36.8mmol)和三苯膦(10.229g，39.0mmol)。将反应物在室温下搅拌2小时，然后真空浓缩。残留物用乙酸乙酯/己烷(10/90-25/75)快速层析纯化，得到4-(2-溴-乙氧基)-3-氯-苯甲酸甲酯(8.613，99％)，为白色固体。1H NMR(300MHz，CDCl3)；δ8.07(d，1H)，7.92(dd，1H)，6.93(d，1H)，4.40(t，2H)，3.89(s，2H)，2.70(bs，2H)。
步骤4用类似于实施例1步骤9的方法，由2-丁基-苯并呋喃-3-甲醛O-(3-溴-丙基)-肟和4-(2-溴-乙氧基)-3-氯-苯甲酸甲酯制备4-({[(1E)-(2-丁基-1-苯并呋喃-3-基)亚甲基]氨基}氧基)-乙氧基]-3-氯苯甲酸甲酯，为无色油状物(0.354g，51％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)；δ8.26(s，1H)，7.96(m，3H)，7.39(d，1H)，7.21(m，2H)，6.97(d，2H)，4.60(t，2H)，4.40(t，2H)，3.85(s，3H)，2.80(t，2H)，1.70(m，2H)，1.35(m，2H)，0.90(t，3H).
步骤5用类似于实施例1步骤10的方法，由4-({[(1E)-(2-丁基-1-苯并呋喃-3-基)亚甲基]氨基}氧基)-乙氧基]-3-氯苯甲酸甲酯制备制备丙酮化合物，为白色固体。mp＝155.9-156.4℃；质谱(+ES，M+H)m/z416。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)；δ12.95(bs，1H)，8.53(s，1H)，7.95(d，1H)，7.86(m，2H)，7.54(d，1H)，7.30(m，3H)，4.54(t，2H)，4.48(t，2H)，2.92(t，2H)，1.63(m，2H)，1.30(m，2H)，0.87(t，3H).
元素分析理论值C22H22ClNO5C，63.54；H，5.33；N，3.37，实测值C，63.54；H，5.45；N，3.21。
实施例5合成2-溴-4-[({[(1E)-(2-丁基-1-苯并呋喃-3-基)亚甲基]氨基}氧基)甲基]-苯甲酸步骤1向2-溴-4-甲基-苯甲酸(5.50g，25.6mmol)的甲醇(250mL)溶液中加入浓硫酸(1mL)。加热反应物至回流过夜(约16小时)，任其冷却至室温，然后减压浓缩至约1/4体积。再将残留物在水和乙酸乙酯之间分配，分离各层，用另一份乙酸乙酯萃取水层。用饱和碳酸氢钠溶液洗涤合并的有机物一次，经无水硫酸镁干燥，通过硅胶塞过滤，减压浓缩。得到2-溴-4-甲基-苯甲酸甲酯油状物(4.95g，85％)。向该油(2.50g，10.9mmol)的四氯化碳(100mL)溶液中加入N-溴琥珀酰亚胺(2.04g，11.5mmol)和苯甲酰基过氧化物(benzoyl peroxide)(0.106g，0.44mmol)。加热反应物至回流。约1小时后，反应混合物变无色。此时，移去热源，让混合物冷却至室温，过滤混合物。减压浓缩滤液。粗混合物经HPLC(40％二氯甲烷/己烷)纯化，得到2-溴-4-溴甲基-苯甲酸甲酯(1.50g，45％)，为白色粉末。1H NMR(400MHz，CDCl3)；δ7.75(d，1H)，7.66(s，1H)，7.35(d，1H)，4.39(s，2H)，3.90(s，3H)。
步骤2向2-溴-4-溴甲基-苯甲酸甲酯(0.50g，1.62mmol)和2-丁基-苯并呋喃-3-甲醛肟(0.37g，1.70mmol)的丙酮(50mL)溶液中加入碳酸铯(2.12g，6.49mmol)。将混合物加热至回流4小时，任其冷却至室温。使混合物在乙酸乙酯和盐水之间分配，然后分离各层。用另一份乙酸乙酯萃取水层，合并有机物，经无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩。粗物质通过硅胶快速层析纯化，用乙酸乙酯/己烷(0/100-4/50梯度)洗脱，得到2-溴-4-[({[(1E)-(2-丁基-1-苯并呋喃-3-基)亚甲基]氨基}氧基)甲基]-苯甲酸甲酯(0.57g，79％)，为澄清无色油状物。
1H NMR(400MHz，CDC13)；δ8.30(1H，s)，7.90(1H，m)，7.79(1H，d)，7.74(1H，s)，7.39(2H，m)，7.24(2H，m)，5.19(2H，s)，3.90(3H，s)，2.80(2H，t)，1.70(2H，m)，1.36(2H，m)，0.91(3H，t).
步骤3向2-溴-4-[({[(1E)-(2-丁基-1-苯并呋喃-3-基)亚甲基]氨基}氧基)甲基]-苯甲酸甲酯(0.57g，1.28mmol)的1∶0.5∶0.3(3.33∶1.67∶1)的四氢呋喃∶乙醇∶水(36mL)溶液中加入2.5M氢氧化钠溶液(6mL)。将混合物加热至回流3小时，然后任其冷却至室温。浓缩混合物至约1/4体积，使其在乙酸乙酯和水之间分配。用1N盐酸溶液将水层酸化至约pH 1。然后分离各层。用另一份乙酸乙酯萃取水层。合并有机物，经无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩。干燥粗固体脱水，然后在二氯己烷/己烷重结晶一次，得到标题化合物(0.48g，86％)，为白色粉末。mp＝143.5-144.5℃。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)；δ13.38(bs，1H)，8.57(s，1H)，7.86(d，1H)，7.79(s，1H)，7.76(d，1H)，7.54(d，1H)，7.52(d，1H)，7.31(t，1H)，7.27(t，1H)，5.24(s，2H)，2.93(t，2H)，1.64(m，2H)，1.30(m，2H)，0.88(t，3H).
质谱(+ESI)m/z 430，(-ESI，M-H)m/z 428。元素分析理论值C21H20BrNO4C，58.62；H，4.68；N，3.26。实测值C，58.33；H，4.76；N，3.08。
实施例6合成6-[3-({[(1E)-(2-丁基-1-苯并呋喃-3-基)亚甲基]氨基}氧基)丙氧基]-4′-(三氟甲基)-1，1′-联苯基-3-甲酸步骤1在氮气氛下，用冰/丙酮浴将4-羟基-苯甲酸甲酯(10.0g，65.7mmol)的乙腈(110mL)溶液冷却至-5℃，向其中缓慢加入四氟硼酸(54％重量的乙醚溶液，6.35g，72.3mmol)，同时保持温度低于-5℃。加入完成后，将N-溴琥珀酰亚胺(12.9g，72.3mmol)溶于乙腈(55mL)的溶液缓慢加入反应混合物中，以使温度上升不超过10℃。然后移去冰浴，任反应混合物升温至室温，搅拌3小时。加入饱和亚硫酸氢钠溶液猝灭反应直至黄色消失。用两份乙醚萃取反应混合物。合并的有机物用一份盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩。粗物质通过硅胶快速层析纯化，用二氯甲烷/己烷(80/20-100/0梯度)洗脱，得到3-溴-4-羟基-苯甲酸甲酯(13.5g，89％)，为白色粉末。1H NMR(400MHz，CDCl3)；δ8.18(s，1H)，7.91(d，1H)，7.04(d，1H)，6.02(bs，1H)，3.88(s，3H)。
步骤2向圆底烧瓶中加入2M碳酸氢钾溶液(29.2mL，58.4mmol)、二氧六环(75mL)、3-溴-4-羟基-苯甲酸甲酯(4.50g，19.5mmol)、4-三氟甲基苯硼酸(4.07g，21.4mmol)和第二份二氧六环(75mL，加入的总体积150mL)。然后通过向混合物中通入干燥氮气发泡5分钟将混合物脱气。脱气后，加入含二氯甲烷的[1，1′-二(二苯膦基)-二茂铁]二氯合钯(II)与络合物1∶1(DPPF；0.40g，0.49mmol)，在环境温度下搅拌反应混合物1小时。然后将混合物加热至回流5小时，任其冷却至环境温度保持14小时，然后再回流5小时。冷却至环境温度后，使混合物在1M盐酸(100mL)和乙酸乙酯之间分配。分离各层，将水层调至pH 3。用另外两份乙酸乙酯萃取水层。合并有机物。经无水硫酸镁干燥，通过Celite过滤，减压浓缩。粗物质通过硅胶快速层析纯化，用乙醚/己烷(0/100-20/80梯度)洗脱，得到6-羟基-4′-三氟甲基-联苯基-3-甲酸甲酯(3.40g，76％)，为白色粉末。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)；δ10.76(s，1H)，7.87(s，1H)，7.84(d，1H)，7.76(s，4H)，7.06(d，1H)，3.79(s，3H)。
步骤3向6-羟基-4′-三氟甲基-联苯基-3-甲酸甲酯(1.20g，4.05mmol)和1，3-二溴丙烷(4.09g，20.3mmol)的丙酮(125mL)溶液中加入碳酸钾(2.80g，20.3mmol)。将反应混合物加热至回流3小时，任其冷却至室温。使混合物在乙酸乙酯和盐水之间分配，分离各层。再用一份乙酸乙酯萃取水层。合并有机物，经无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩。粗油通过硅胶快速层析纯化，用乙酸乙酯/己烷(0/100-9/92梯度)洗脱，得到6-(3-溴-丙氧基)-4′-三氟甲基-联苯基-3-甲酸甲酯(1.23g，73％)，为白色粉末。
1H NMR(400MHz，CDCl3)；δ8.03(d，1H)，7.99(s，1H)，7.61(AA’BB’，4H)，7.02(d，1H)，4.18(t，2H)，3.88(s，3H)，3.43(t，2H)，2.23(m，2H).
步骤4向6-(3-溴-丙氧基)-4′-三氟甲基-联苯基-3-甲酸甲酯(0.30g，0.72mmol)和2-丁基-苯并呋喃-3-甲醛肟(0.16g，0.72mmol)的1∶0.5∶0.3(3.33∶1.67∶1)的四氢呋喃∶乙醇∶水(18mL)溶液中加入2.5M氢氧化钠溶液(3mL)。将混合物加热至回流3小时，然后任其冷却至室温。将混合物冷却至约1/4体积，使其在乙酸乙酯和水之间分配。用1M盐酸溶液将水层酸化至约pH 1。然后分离各层。再用一份乙酸乙酯萃取水层。合并有机物，经无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩。粗物质通过硅胶快速层析，用乙酸乙酯/己烷(20/80含1％甲酸)洗脱，然后通过HPLC(90％乙腈/0.1％三氟乙酸)纯化，得到标题化合物(0.16g，40％)，为白色固体。mp＝139.5-140.5℃。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)；δ8.46(s，1H)，7.96(dd，1H)，7.89(d，1H)，7.87(d，1H)，7.77(s，4H)，7.53(d，1H)，7.28(m，2H)，7.19(dd，1H)，4.26(t，2H)，4.23(t，2H)，2.91(t，2H)，2.13(m，2H)，1.63(m，2H)，1.29(m，2H)，0.86(t，3H).
质谱(-ESI，M-H)m/z 538.4。元素分析理论值C30H28F3NO5C，66.78；H，5.23；N，2.60。实测值C，66.57；H，5.33；N，2.52。
实施例7筛选PAI-1抑制活性使测试化合物溶于DMSO，终浓度为10mM，然后在生理缓冲液中稀释100倍。向含140nM重组人纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1；Molecular Innovations，Royal Oak，MI)的pH 6.6缓冲液溶液中加入测试化合物(1-100μm终浓度，最大DMSO浓度的0.2％)启动抑制测定。在室温培养1小时后，加入70nM重组人组织纤溶酶原激活剂(tPA)，并将测试化合物、PAI-1和tPA的混合物再培养30分钟。第二次温育后，加入tPA的发色底物Spectrozyme-tPA(American Diagnostica，Greenwich，CT)，在0和60分钟时，在405nm读取吸光率。相对PAI-1抑制等于在测试化合物和PAI-1的存在下残留的tPA活性。对照处理包括通过使用(2∶1)摩尔比PAI-1和无测试化合物单独对tPA的任何作用下完全抑制tPA。
实施例8确定抑制PAI-1的IC50的测定。
该测定以tPA和活性PAI-1之间的非SDS可解离相互作用为基础。起初在测定板上涂布人tPA(10μg/ml)。将本发明的测试化合物溶于DMSO，使成10mM，然后用生理缓冲液(pH 7.5)稀释至1-50μM终浓度。将测试化合物与人PAI-1(50ng/ml)一起在室温下温育15分钟。用0.05％吐温20和0.1％BSA溶液洗涤tPA涂布的板，然后该板用3％BSA溶液封闭。然后将等分试样取代的测试化合物/PAI-1溶液加入到tPA涂布的板中，在室温下温育1小时，然后洗涤。通过加入1∶1000稀释度的抗人PAI-133B8单克隆抗体等份试样，在室温下温育该板1小时(Molecular Innovations，Royal Oak，MI)，评价与板结合的活性PAI-1。再次洗涤该板，按山羊血清1∶50,000稀释度，加入山羊抗小鼠IgG-碱性磷酸酶偶联物溶液。将该板在室温下温育30分钟，洗涤。加入碱性磷酸酶底物。将板在室温下温育45分钟，在OD405nm测定显色。在不同浓度测试化合物存在下，定量测定与tPA结合的活性PAI-1以测定IC50。结果用对数最佳拟合方程分析。根据由标准曲线0-100ng/ml范围测量，该测定的灵敏度是5ng/ml人PAI-1。
抑制纤溶酶原激活物抑制剂-1的本发明化合物概述于表1中。
表1
b通过修改PAI-1抑制的主筛选测定IC50尽管为清楚地理解，通过举例方式详细地阐述了前述发明，但在通过非限制性阐述提供的附属权利要求的范围内，通过本发明公开进行某些改变和改进是可以理解的，并且这些改变和改进可在不进行过度的实验前提下实施，这对本领域技术人员是显而易见的。
以上引用的所有出版物和专利文件通过引用全文结合到本文中，如同每篇文献单独引用时结合到本文中一样。
权利要求
1.一种下式化合物 或其药学上可接受的盐或酯形式其中R1是连接A的直接键、C1-C4亚烷基或-O-C1-C4亚烷基；R2和R3独立是氢、卤素、C1-C4烷基、C1-C3全氟烷基、-O-C1-C3全氟烷基、C1-C3烷氧基、-OH、-NH2、-NO2、-O(CH2)p-芳基、-O(CH2)p-杂芳基、芳基、杂芳基、-NH(CH2)p-芳基、-NH(CH2)p-杂芳基、-NH(CO)-芳基、-NH(CO)-杂芳基、-O(CO)-芳基、-O(CO)-杂芳基、-NH(CO)-CH＝CH-芳基或-NH(CO)-CH＝CH-杂芳基；p是0-6的整数；R4是氢、C1-C8烷基或C3-C6环烷基；A是-COOH或酸类似物；X是C1-C8亚烷基、C3-C6亚环烷基、-(CH2)mO-或-(CH2)mNH-；m是1-6的整数；和R5是氢、C1-C8烷基、C3-C6环烷基、-CH2-C3-C6环烷基、杂芳基、-CH2-杂芳基、芳基或苄基；R6和R7独立是氢、卤素、C1-C6烷基、C1-C6全氟烷基、-O-C1-C6全氟烷基、C1-C6烷氧基、-OH、-NH2、-NO2、-O(CH2)n-芳基、-O(CH2)n-杂芳基、芳基或杂芳基；和n是0-6的整数，其中所述烷基、环烷基、芳基和杂芳基各自被一个或多个取代基任选取代。
2.权利要求1的化合物，其中R5是氢、C1-C8烷基、C3-C6环烷基、-CH2-C3-C6环烷基、吡啶基、-CH2-吡啶基、苯基或苄基，其中所述环烷基、吡啶基和苄基的环被1-3个选自以下的基团取代卤素、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C3全氟烷基、-O-C1-C3全氟烷基、C1-C3烷氧基、-OH、-NH2、-NO2或-CN。
3.权利要求1或权利要求2的化合物，其中R1是连接A的直接键。
4.权利要求1-3中任一项的化合物，其中R1是亚甲基。
5.权利要求1-4中任一项的化合物，其中所述芳基和杂芳基环任选被1-3个选自以下的基团取代卤素、C1-C6烷基、C1-C3全氟烷基、-O-C1-C3全氟烷基、C1-C3烷氧基、-OH、-NH2、-NO2或-CN。
6.权利要求1-5中任一项的化合物，其中R2是氢、卤素、-OH、任选被CF3取代的芳基或任选被叔丁基取代的-NHC(O)-芳基。
7.权利要求1-6中任一项的化合物，其中R3是氢、卤素、-OH、任选被CF3取代的芳基或任选被叔丁基取代的-NHC(O)-芳基。
8.权利要求1-7中任一项的化合物，其中R4是氢或C1-C8烷基。
9.权利要求1-8中任一项的化合物，其中R5是C1-8烷基。
10.权利要求1-9中任一项的化合物，其中R6和R7独立是氢或C1-6烷基。
11.权利要求1-10中任一项的化合物，其中X是-(CH2)mO。
12.权利要求1的化合物，所述化合物具有下式 或其药学上可接受的盐或酯形式。
13.权利要求1的化合物，所述化合物具有下式 或其药学上可接受的盐或酯形式。
14.权利要求1的化合物，所述化合物具有下式 或其药学上可接受的盐或酯形式。
15.权利要求1的化合物，所述化合物是1)4-[3-({[(1E)-(2-丁基-1-苯并呋喃-3-基)亚甲基]氨基}氧基)丙氧基]-2-[(4-叔丁基苯甲酰基)氨基]-苯甲酸，2){4-[3-({[(1E)-(2-丁基-1-苯并呋喃-3-基)亚甲基]氨基}氧基)丙氧基]苯基}乙酸，3)4-[3({(1E)-(2-丁基-1-苯并呋喃-3-基)亚甲基]氨基}氧基)丙氧基]-2-羟基苯甲酸或其药学上可接受的盐或酯形式4)4-[2-({[(1E)-(2-丁基-1-苯并呋喃-3-基)亚甲基]氨基}氧基)乙氧基]-3-氯苯甲酸，5)2-溴-4-[({[(1E)-(2-丁基-1-苯并呋喃-3-基)亚甲基]氨基}氧基)甲基]苯甲酸，6)6-[3-({[(1E)-(2-丁基-1-苯并呋喃-3-基)亚甲基]氨基}氧基)丙氧基]-4′-(三氟甲基)-1，1′-联苯基-3-甲酸或其药学上可接受的盐或酯形式。
16.一种抑制患者PAI-1活性的方法，所述方法包括给予需要这种治疗的患者治疗有效量的权利要求1-5中任一项的化合物。
17.权利要求16的方法，其中所述治疗有效量是25mg/kg/日-200mg/kg/日。
18.一种治疗患者的与PAI-1有关的病症的方法，所述方法包括给予需要这种治疗的患者治疗有效量的权利要求1-15中任一项的化合物。
19.权利要求18的方法，其中所述治疗有效量是25mg/kg/日-200mg/kg/日。
20.权利要求18的方法，其中所述PAI-1相关病症是纤维蛋白溶解系统损伤。
21.权利要求18的方法，其中所述PAI-1相关病症是血栓形成、心房纤维性颤动、肺纤维化、中风、心肌缺血、手术血栓栓塞并发症、心血管病、动脉粥样硬化斑块形成、慢性阻塞性肺病、肾纤维化、多囊卵巢综合征、糖尿病、阿尔茨海默氏病或癌症。
22.权利要求21的方法，其中所述血栓形成选自静脉血栓形成、动脉血栓形成、脑血栓形成和深静脉血栓形成。
23.权利要求21的方法，其中所述PAI-1相关病症是由患者的非胰岛素依赖型糖尿病导致的心血管病。
24.一种药用组合物，所述组合物含治疗有效量的权利要求1-15中任一项的化合物或其药学上可接受的盐或酯形式和药学上可接受的赋型剂或载体。
25.一种治疗血栓形成、心房纤维性颤动、肺纤维化、手术血栓栓塞并发症、中风、心肌缺血、动脉粥样硬化斑块形成、慢性阻塞性肺病或肾纤维化的方法，所述方法包括给予需要这种治疗的患者治疗有效量的式1化合物 式1其中R1是连接A的直接键、C1-C4亚烷基或-O-C1-C4亚烷基；R2和R3独立是氢、卤素、C1-C4烷基、C1-C3全氟烷基、-O-C1-C3全氟烷基、C1-C3烷氧基、-OH、-NH2、-NO2、芳基、杂芳基、-O(CH2)p-芳基、-O(CH2)p-杂芳基、-NH(CH2)p-芳基、-NH(CH2)p-杂芳基、-NH(CO)-芳基、-NH(CO)-杂芳基、-O(CO)-芳基、-O(CO)-杂芳基、-NH(CO)-CH＝CH-芳基或-NH(CO)-CH＝CH-杂芳基；p是0-6的整数；R4是氢、C1-C8烷基或C3-C6环烷基；A是-COOH或酸类似物；X是C1-C8亚烷基、C3-C6亚环烷基、-(CH2)mO-或-(CH2)mNH-；m是1-6的整数；和R5是氢、C1-C8烷基、C3-C6环烷基、-CH2-C3-C6环烷基、杂芳基、-CH2-杂芳基、芳基或苄基；R6和R7独立是氢、卤素、C1-C6烷基、C1-C6全氟烷基、-O-C1-C6全氟烷基、C1-C6烷氧基、-OH、-NH2、-NO2、-O(CH2)n-芳基、-O(CH2)n-杂芳基、芳基或杂芳基；和n是0-6的整数。
26.用作药物的权利要求1-15中任一项的化合物。
27.权利要求1-15中任一项的化合物在制备用于抑制患者的PAI-1活性或治疗患者的PAI-1相关病症的药物中的用途。
全文摘要
本发明涉及式(I)苯并呋喃肟或其药学上可接受的盐或酯形式，其中R
文档编号A61P7/02GK1882329SQ200480034456
公开日2006年12月20日 申请日期2004年9月24日 优先权日2003年9月25日
发明者L·M·哈夫兰, J·A·布特拉, H·M·埃罗克达, D·J·詹金斯, E·G·贡德尔森 申请人:惠氏公司