专利名称：治疗软骨和骨退行性疾病和治疗女性不孕症的包含单独ptx3或与tsg－6联合的药物的制作方法
本文描述的发明涉及长正五聚蛋白PTX3(PTX3)或它的一种功能性衍生物单独或与TSG-6联合在制备治疗软骨和骨疾病和治疗女性不孕症的药物中的应用。
背景技术：
PTX3是一种在不同类型细胞中表达的蛋白(Bottazzi等人，J.Biol.Chem.，1997；27232817-32823)，尤其在与炎性细胞因子白介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)接触后的单核吞噬细胞和内皮细胞中表达。
目前仍未完全了解PTX3的生物学功能。
这种蛋白由两个结构域组成与任何已知分子无关的N-末端和与短正五聚蛋白如C-反应蛋白(CRP)类似的C-末端。已经发现人PTX3(hPTX3)和动物PTX3之间的高度相似性。
PTX3基因位于小鼠染色体3上，处在与人3q区域(q24-28)类似的区域中，与文献记载的3q25区域中的hPTX3的位置一致。此外，小鼠PTX3(mPTX3)(Introna M.等人，Blood 87(1996)；1862-1872)与hPTX3在组织、位置和序列方面非常相似(Breviario，F.等人，J.Biol.Chem.，26722190，1992)。
具体而言，人基因与小鼠基因之间的序列一致性程度为82％，如果考虑保守性置换则达到92％。
hPTX3和mPTX3序列之间的高度相似性表明正五聚蛋白在进化过程中高度保守(Pepys，MB.，Baltz.MLAdv.Immunol.，34141，1983)。
有关正五聚蛋白的综述参见H.Gewurz等人，Current Opinion inImmunology，1995，754-64。
PTX3的以前的用途是已知的。
以本申请人名义申请的国际专利申请WO99/32516描述了长正五聚蛋白PTX3在治疗感染、炎性或肿瘤疾病中的应用。
WO02/38169描述了长正五聚蛋白PTX3在制备用于治疗生长因子FGF-2异常激活相关疾病的药物中的应用。
WO02/36151描述了长正五聚蛋白PTX3在治疗自身免疫性疾病中的应用。
WO03/011326描述了长正五聚蛋白PTX3在治疗女性不孕症中的应用。
WO03/084561描述了长正五聚蛋白PTX3在制备治疗生长因子FGF-8异常激活相关的肿瘤疾病的药物中的应用。
美国专利US 5,767,252描述了属于正五聚蛋白家族的神经细胞生长因子(也参见其中引用的文献)。该专利涉及神经生物学领域。
TSG-6是一种可被炎性刺激例如TNF诱导的蛋白；它由不同类型的细胞，包括成纤维细胞和结缔组织细胞产生。
TSG-6由两个域组成CUB域和LINK域。TSG-6的LINK域结合透明质酸。另外，TSG-6与间-α-胰蛋白酶抑制剂(IαI)结合。TSG-6与IαI的相互作用在富含透明质酸的基质的集合中有可能很重要(Caroline M.Miller and Anthony J.Day，J.of Cell Science，2003，116(10)1863-73)。
美国专利US 6,518,401描述了TSG-6蛋白(肿瘤坏死因子刺激的基因6(TSG-6)蛋白)。
美国专利US 6,210,905描述了TSG-6结合分子(肿瘤坏死因子刺激的基因6(TSG-6)结合分子)。
美国专利US 5,846,763描述了DNA编码的TSG-6[DNA编码的肿瘤坏死因子刺激基因6(TSG-6)]。
美国专利US 5,386,013描述了TSG-6(肿瘤坏死因子诱导蛋白6(TSG-6))。
此外，在J.，Biol.，Chem.，2002年12月27日；277(52)51068-76.电子出版于2002年10月24日，其中报道了TSG-6静脉内给药降低了很多炎性介质的浓度，并参与了抗炎活性。
在Development，2003年5月；30(10)2253-61中报道了不同的证据，即TSG-6是细胞外基质丘形成中的关键催化剂，是女性生育所必不可少的。
在Arthritis Rheum.，2002年8月；46(8)2207-18中报道了TSG-6的软骨特异性组成型表达为抗原特异性关节炎提供了软骨保护作用，而不是抗炎作用。这项研究建议TSG-6能够用于保护软骨，甚至在存在急性炎症的情况下亦如此。
很多骨和软骨疾病与各种类型关节炎有关，但并不仅仅与后者有关。概括来说，在关节炎中可以鉴别两个主要事件1)炎症，细胞因子产生和关节肿胀，和2)软骨变性和骨侵蚀。
这两个主要事件通常描述成是继发产生的(原因和结果)，但从治疗学观点来看，出现的一种观点是不用抑制炎症就可以防止骨侵蚀和软骨变性(Glant等人，2002，Arthritis & Rheumatism，462207-2218)。已知各种丝氨酸蛋白酶在骨和软骨变性事件中发挥着基本作用(Ronday等人，1996，Br.J.Rheumatol.35416-23)。它们的活性被描述成易受组织化程度的函数和细胞外基质组成的调节。
作为PTX3对细胞外基质各种成分的内聚作用的结果，本发明涉及PTX3单独或与TSG-6联合在骨和软骨退行性疾病中的保护作用。
PTX3联合TSG-6在细胞外基质水平上的分子内聚功能也已经被证明在维持卵丘中有决定性作用，卵丘是由粒层细胞和卵母细胞周围基质组成的结构。
发明概述现已发现TSG-6是长正五聚蛋白PTX3的新配体，由于这种结合，PTX3对软骨和骨疾病发挥着有效的保护和治疗作用。
本发明的一个目的是PTX3或它的一种功能性衍生物在制备治疗骨和软骨疾病的药物中的应用。
本发明的另一个目的是PTX3或它的一种功能性衍生物与TSG-6联合在制备治疗骨或软骨疾病的药物中的应用。所述骨或软骨疾病的非限制性实例选自骨关节炎；骨关节病；关节退行性疾病；胶原缺乏；以软骨内骨化为特征的软骨或骨疾病原发性关节炎，包括例如，类风湿性关节炎、幼年型关节炎、未分化的慢性关节炎和多关节炎；自身免疫源性继发性关节炎，包括例如，系统性红斑狼疮关节炎、牛皮癣关节炎、克罗恩病关节炎；代谢障碍源性关节炎，包括例如，尿酸单钠关节病、焦磷酸盐关节病、草酸钙关节病；感染性关节炎、归咎于骨质疏松症的关节炎、无菌性骨坏死、良性和恶性骨肿瘤。
本发明的另一个目的是PTX3或它的一种功能性衍生物与TSG-6联合在制备用于改善需要这种治疗的妇女生育力的药物中的应用。
本发明的另一个目的是包含PTX3或它的一种功能性衍生物和TSG-6的联合。
本发明的另一个目的是PTX3或它的一种功能性衍生物和TSG-6的联合作为药物的应用。
本发明的另一个目的是包含作为活性成分的PTX3或它的一种功能性衍生物和TSG-6的联合，和至少一种药学可接受赋形剂和/或稀释剂的药物组合物。
本发明的联合在减少软骨和骨变性中，和在改善卵母细胞-卵丘复合体内聚力，从而提高女性生育力中比单独组分更有效。
发明详述“长正五聚蛋白PTX3”是指任何长正五聚蛋白PTX3，也就是说，不论它是天然的(人或动物)、重组的或合成来源的。
“衍生物”是指具有一个或多个突变、缺失、插入或转导后修饰，并且保留了结合TSG-6的功能的长正五聚蛋白PTX3的功能性类似物。
长正五聚蛋白PTX3的优选类型是人长正五聚蛋白PTX3，其序列描述在WO99/32516中。
“TSG-6”是在US 6,518,401和其它上述美国专利中描述的TSG-6。
就关于工业应用方面来说，长正五聚蛋白PTX3或其衍生物和TSG-6将是药物组合物的形式，其中，活性成分被药学可接受的赋形剂和/或稀释剂，例如无菌盐水溶液、羧甲基纤维素或本领域专家已知的其它赋形剂所溶解和/或所赋形。
可用于长正五聚蛋白PTX3的药物组合物的实例是描述在WO99/32516中的那些。
本发明化合物可以通过肠内、胃肠外和阴道途径给药，特别优选的药物形式是缓释植入剂或关节内注射形式。
根据主治医师的判断，日剂量将取决于患者的体重、年龄和全身状况。
应当注意的是，所述药物组合物包括缓释形式的制备可以使用药剂师和制药工艺学专家熟知的常规技术和手段来进行。
权利要求
1.PTX3或它的一种功能性衍生物在制备治疗骨或软骨疾病的药物中的应用。
2.PTX3或它的一种功能性衍生物与TSG-6联合在制备治疗骨或软骨疾病的药物中的应用。
3.PTX3或它的一种功能性衍生物与TSG-6联合在制备用于改善需要这种治疗的妇女生育力的药物中的应用。
4.根据权利要求1-3的应用，其中，PTX3是指任何长正五聚蛋白PTX3，也就是说，不论是天然的(人或动物)、重组的或合成来源的。
5.根据权利要求1-4的应用，其中，衍生物是指具有一个或多个突变、缺失、插入或转导后修饰，并且保留了结合TSG-6的功能的长正五聚蛋白PTX3的功能性类似物。
6.根据权利要求6的应用，其中，长正五聚蛋白PTX3是人长正五聚蛋白PTX3。
7.根据权利要求1或2的应用，其中，所述疾病选自骨关节炎；骨关节病；关节退行性疾病；胶原缺乏；以软骨内骨化为特征的软骨或骨疾病原发性关节炎，包括例如，类风湿性关节炎、幼年型关节炎、未分化的慢性关节炎和多关节炎；自身免疫源性继发性关节炎，包括例如，系统性红斑狼疮关节炎、牛皮癣关节炎、克罗恩病关节炎；代谢障碍源性关节炎，包括例如，尿酸单钠关节病、焦磷酸盐关节病、草酸钙关节病；感染性关节炎、归咎于骨质疏松症的关节炎、无菌性骨坏死、良性和恶性骨肿瘤。
8.包含PTX3或它的一种衍生物和TSG-6的组合。
9.权利要求8的组合作为药物的应用。
10.包含作为活性成分的权利要求8的组合和至少一种药学可接受赋形剂和/或稀释剂的药物组合物。
全文摘要
描述了正五聚蛋白PTX3和它与TSG－6的联合在制备治疗骨或软骨疾病和治疗女性不孕症的药物中的应用。
文档编号A61P19/04GK1893969SQ200480037195
公开日2007年1月10日 申请日期2004年12月21日 优先权日2003年12月23日
发明者B·伯塔兹, P·卡尔米纳蒂, C·戈兰达, A·曼托万尼 申请人:迪菲安特制药有限公司