二膦酸盐的药物制剂的制作方法

专利名称：二膦酸盐的药物制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及二膦酸盐药物剂型、特别是二膦酸盐的口服药物制剂的用途和制备。本发明在二磷酸盐口服药物剂型的制备和异常增加的骨代谢病症的治疗中是有用的，该病症包括骨质疏松和继发于甲状旁腺功能亢进、甲状腺毒症、结节病或维生素D过多症的过度骨吸收造成的高钙血症。
二膦酸盐在脊椎动物中显示出有用的活性，可用于治疗显示出异常的骨代谢或由其产生的病症。在多种骨吸收增加的良性和恶性疾病中二膦酸盐被广泛地用于抑制破骨细胞的活性。所以，近来二膦酸盐已用于多发性骨髓瘤(MM)患者的长期治疗。这些焦磷酸盐类似物不仅降低了骨骼相关事件的发生，而且它们也给患者提供了临床的利益并改善了生存质量。二膦酸盐在体内可防止骨吸收；在骨的Paget’s病、肿瘤诱导的高钙血症以及更近的骨转移和多发性骨髓瘤(MM)(综述参阅Fleisch H 1997Bisphosphonates clinical.In Bisphosphonates in Bone Disease.From theLaboratory to the Patient.EdsThe Parthenon Publishing Group，NewYork/London pp68-163)的治疗中，已经证实了二膦酸盐的治疗有效性。二膦酸盐抑制骨吸收的机理仍然没有被充分理解，并且根据被研究的二膦酸盐机理似乎是变化的。二膦酸盐已经显示出强烈地结合于骨的羟磷灰石结晶，以降低骨代谢和骨吸收，以降低羟基脯氨酸或碱性磷酸酶在血液中的水平，除此之外也抑制破骨细胞的活化和活性。
二膦酸盐的口服一般存在显著的障碍，因为二膦酸盐的口服施用对胃肠道来说可以是腐蚀性的。所以二膦酸盐倾向于在动物和人中产生不良的胃障碍。由口服施用的二膦酸盐产生的不良胃障碍可导致恶心、呕吐、腹泻、血性排出物和溃疡，甚至达到需要进行紧急医学干预的程度。已经上市销售的口服二膦酸盐一般需要患者严格遵循施用方案，以便产生最低的胃障碍和腐蚀作用。除此之外，上市的二膦酸盐一般显示低的胃吸收和由此导致的低的生物利用度。所以，在当前已上市的制剂中二膦酸盐口服有效量一般要求可产生胃障碍的二膦酸盐的量。可采用能使所口服的二膦酸盐充分吸收并增加耐受性的具体给药方案，例如，参阅Physician′s DeskReference，2003版，Thomson Healthcare，Montvale，NJ 07645的FOSAMAX(阿仑膦酸)产品标签。但是，当前的口服施用方案提出了重要的依从性障碍问题，特别是在老年人群中，这样的二膦酸盐给予他们并使他们拥有不严格按精确的方案服药的机会有可能导致胃溃疡或更严重的作用。即使严格按照相对复杂的施用方案在部分敏感的个体中也可导致胃障碍和溃疡，这是因为要求口服施用的二膦酸盐达到一定的量以克服其低的口服生物利用度。在本发明中，多种可增加胃吸收和/或保护胃肠道免于由二膦酸盐(在下文中被称为本发明的活性剂)诱导的化学和/或机械损伤的作为成分的无活性物质的额外使用，可允许二膦酸盐的口服有效剂量被降低至可显著降低胃副作用的水平，并使得其可用于比现有的制剂更宽的患者人群的治疗。所以，本发明提供了用对患者更友好的活性剂、特别是二膦酸盐制剂克服口服施用障碍的方法，即该制剂是胃相容的和/或相对于可用的口服组合物中拥有最佳的生物利用度。
本发明组合物在耐受性和生物利用度之间寻求平衡。具有很高生物利用度的制剂可能并不必然是与胃相容的。最佳的生物利用度允许口服施用的活性剂达到治疗上相关的血液浓度，并且在施用的个体中与本发明活性剂如二膦酸盐当前的或常规的口服制剂相比伴有胃临床毒理学体征的减少。
根据本发明可被治疗的异常升高的骨代谢病症包括绝经后骨质疏松症的治疗，如以降低骨质疏松骨折的风险；绝经后骨质疏松症的预防，如预防绝经后骨丢失；治疗或预防男性骨质疏松症；治疗或预防皮质类固醇诱导的骨质疏松症以及其他形式由于服药如苯妥英、甲状腺激素替代治疗而继发的骨丢失；治疗或预防与不运动和太空飞行有关的骨丢失；治疗或预防与类风湿性关节炎、成骨不全、甲状腺功能亢进、神经性厌食、器官移植、假关节松动和其他医学病症有关的骨丢失。例如，这样的其他医学病症可包括在类风湿性关节炎中关节周骨糜烂的治疗和预防，骨关节炎的治疗，如软骨下骨硬化、软骨下骨囊肿、骨赘形成的预防/治疗；继发于甲状旁腺功能亢进、甲状腺毒症、结节病和维生素D过多症的由过度的骨吸收导致的高钙血症的治疗或预防。
本发明的药物组合物可为经肠的组合物，如口服、直肠施用，气雾吸入或鼻腔施用，和肠胃外施用，如静脉或皮下施用。
适合于口服施用的本发明组合物获得了有趣结果。可口服施用的药物制剂为干法填充的由明胶、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、淀粉衍生物和增塑剂(如甘油或山梨醇)制成的硬或软胶囊。干法填充的胶囊可含有以颗粒形式存在的活性成分，例如在与填充剂(如乳糖)、粘合剂(如淀粉)和/或助流剂(如滑石粉或硬脂酸镁)，以及适当的稳定剂的混合物中。在软胶囊中，活性成分优选溶解或混悬在适宜的液体中，如溶解二膦酸盐的水性缓冲液或脂肪油、石蜡油或液体聚乙二醇，以帮助在非活性成分中的混悬或溶解，可能也加入稳定剂。当半固体的脂肪酸甘油酯，例如GELUCIRE(月桂酰聚乙二醇-32甘油酯，Gatefossé，Westwood，NJ)或半固体以脂为基础的生物利用度提高剂如维生素E-TPGS(水溶性的D-α-生育酚基聚乙二醇1000琥珀酸酯，Peboc Division of Eastman Chemicals，Anglesey，英国)被用作熔化的半固体或液体溶液或混悬液填充入由明胶、HPMC或淀粉衍生物制成的硬或软胶囊时，获得了有趣的结果。
这样的非活性成分增加易溶于水的活性成分如二膦酸盐的生物利用度是违反直觉的。同样这样的非活性成分增加口服耐受性和/或抑制由口服二膦酸盐导致的胃损伤也是新颖的。所以，在本发明中，这样的脂肪酸甘油酯和两亲的非活性成分的有用性是不寻常且新颖的。除此之外，这样的非活性成分如GELUCIRE和维生素E-TPGS在二膦酸盐的口服制剂中的用途和益处在现有技术中尚没有被辨别出。Gelucire44/14通过醇解/酯化反应而合成，使用氢化的棕榈仁油和PEG1500作为起始材料。所以GELUCIRE44/14是充分定义的单、双和三甘油三酯和聚乙二醇的单和双脂肪酸酯的混合物。占优势的脂肪酸为月桂酸(C12)。Gelucire50/13通过醇解/酯化反应而合成，使用氢化的棕榈油和PEG1500作为起始材料。
Gelucire50/13是充分定义的单、双和三甘油三酯和聚乙二醇的单和双脂肪酸酯的混合物。占优势的脂肪酸为棕榈硬脂酸(C16-C18)。
经肠和肠胃外施用的药物制剂为单位剂型的制剂，如糖衣丸、软或硬明胶胶囊和安瓿剂。它们用实质上已知的方式制备，如通过常规的混合、制粒、成型、溶解、熔化或冻干等方法。例如口服施用的药物制剂可通过将活性成分与固体载体混合而获得，适合的话，将获得的混合物制粒，并对混合物或颗粒进行加工，如有需要或必要在加入适宜的附加剂后制成片剂或糖衣丸芯。
适宜的载体可以是填充剂，如糖类，例如乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨醇、纤维素制品和/或磷酸钙，例如磷酸三钙或磷酸氢钙，也可是粘合剂，如淀粉糊，使用玉米、小麦、稻米或马铃薯淀粉，明胶、西黄蓍胶、甲基纤维素和/或聚乙烯吡咯烷酮，并且如有需要，也可是崩解剂如上述的淀粉、羧甲基淀粉、交联的聚乙烯吡咯烷酮、琼脂或海藻酸或其盐如海藻酸钠。附加剂尤其是流动调节剂和润滑剂如硅酸、滑石粉、硬脂酸或其盐，如硬脂酸镁和钙，和/或聚乙二醇。此外，糖衣丸用可对抗胃液的适宜包衣材料进行包衣，可以使用高浓度的糖溶液，任选含有阿拉伯胶、滑石粉、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇和/或二氧化钛，或在适宜的有机溶剂或溶剂混合物中的漆溶液，以产生可对抗胃液的包衣，适宜的纤维素制品溶液，如邻苯二酸乙酰纤维素或邻苯二酸羟丙基甲基纤维素。着色物质或色素可加至片剂或糖衣丸包衣中，以便于识别或指示活性成分的不同剂量。
具体的施用方式和剂量可由主治医师考虑患者的具体情况，特别是年龄、体重、生活方式、活动水平、激素状况(如绝经后)和骨矿物质密度而选定。
本发明活性剂的剂量可依赖于多种因素，如活性成分作用的有效性和持续时间，包括使用的二膦酸盐的相对强度、施用的方式、温血动物的种属和/或温血动物的性别、年龄、体重和个体状态。
正常情况下二膦酸盐活性成分的单次剂量为0.005-1000mg/kg，经常为0.01-10mg/kg，给予体重约75kg的温血动物施用。
“mg/kg”表示被治疗的包括人的哺乳动物每kg体重的药物mg数。
上述的剂量一般间歇地施用，具有规则的施用中断期，例如，一天一次、一周一次、一个月一次、每六个月一次、一年一次，或根据单个二膦酸盐的治疗活性的持续时间采用较低的频率。
单剂量单位剂型的制剂优选含有从约1％至约90％的活性成分，不是单剂量单位剂型的制剂优选含有从约0.1％至约20％的活性成分。单剂量单位剂型如输注溶液的安瓿剂或用于制备输注溶液的固体、胶囊剂、片剂或糖衣丸含有如从约0.5mg至约2000mg的活性成分。应该理解使用的实际单位剂量取决于二膦酸盐的作用强度以及施用间隔等。所以，对于作用越强的二膦酸盐，一般来说单位剂量越低，并且施用间隔越长。例如，对于更强的最近的二膦酸盐如唑来膦酸，可使用约0.5至约2000mg的单位剂量。例如，也对于最近的更强的二膦酸盐类，从2至200mg的单位剂量可用于施用。
所以，在本说明书中，术语“治疗”或“进行治疗”表示预防性的或防止性的治疗也表示治愈或疾病改变的治疗，包括有得病危险或怀疑得病的患者的治疗，也包括已经得病或已被诊断患有疾病或医学病症的患者的治疗。在本发明的某些实施方案中，本发明也可用于骨质疏松症和类似疾病的预防性治疗。所以，二膦酸盐可给予有得骨质疏松症风险的个体施用，如绝经后的妇女，用于日常的施用，具有规则的施用中断期，例如，一天一次、一周一次、一个月一次、每六个月一次、一年一次，或根据单个二膦酸盐的治疗活性的持续时间采用更低的频率。例如，此处引用作为参考的公开在美国专利申请号60/26789中的二膦酸盐唑来膦酸，用于骨质疏松的治疗，可被施用，间隔每六个月一次，一年一次，直至每三年一次或甚至更低的频率。
本发明使用的二膦酸盐一般为抑制骨再吸收的二膦酸盐。
所以，用于本发明组合物的适宜二膦酸盐可包括下列的化合物或其可药用盐，或其任何水合物3-氨基-1-羟基丙烷-1，1-二膦酸(帕米膦酸)，如(帕米膦酸盐(APD)；3-(N，N-二甲基氨基)-1-羟基丙烷-1，1-二膦酸，如二甲基-APD；4-氢基-1-羟基丁烷-1，1-二膦酸(阿仑膦酸)，如阿仑膦酸盐；1-羟基-亚乙基-二膦酸，如依替膦酸盐；1-羟基-3-(甲基戊基氨基)-亚丙基-二膦酸，伊本膦酸，如伊本膦酸盐；6-氨基-1-羟基己烷-1，1-二膦酸，如氨基-己基-BP；3-(N-甲基-N-n-戊基氨基)-1-羟基丙烷-1，1-二膦酸，如甲基-戊基-APD(＝BM21.0955)；1-羟基-2-(咪唑-1-基)乙烷-1，1-二膦酸，如唑来膦酸；1-羟基-2-(3-吡啶基)乙烷-1，1-二膦酸(利塞膦酸)，如利塞膦酸盐，包括其N-甲基吡啶盐，例如N-甲基吡啶碘化物如NE-10244或NE-10446；1-(4-氯苯硫基)甲烷-1，1-二膦酸(替鲁膦酸)，如替鲁膦酸盐；3-[N-(2-苯基硫代乙基)-N-甲基氨基]-1-羟基丙烷-1，1-二膦酸；1-羟基-3-(吡咯烷-1-基)丙烷-1，1-二膦酸，如EB1053(Leo)；1-(N-苯基氨基硫代羰基)甲烷-1，1-二膦酸，如FR 78844(Fujisawa)；5-苯甲酰基-3，4-二氢-2H-吡唑-3，3-二膦酸四乙基酯，如U-81581(Upjohn)；1-羟基-2-(咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)乙烷-1，1-二膦酸，如YM529；以及1，1-二氯甲烷-1，1-二膦酸(氨屈膦酸)和YM175。
至少拥有一定的化学稳定性、治疗有效性、以及胃吸收和耐受性的临床有用量的活性剂的可药用盐可以是与碱形成的盐，金属盐适宜地衍生于元素周期表Ia、Ib、IIa、IIb族，包括碱金属盐，如钾盐和钠盐，或碱土金属盐。例如，钙或镁盐，也包括具有氨或有机胺的铵盐获得了有意义的结果，在其中二膦酸的一个、两个、三个或四个，特别是一个或两个酸性的氢原子被可药用的阳离子所取代，正如在钠、钾或铵盐中所见，特别是钠盐，也可为特征在于在膦酸基团的每一个基团中拥有一个酸性的氢和一个可药用的阳离子如钠离子的盐。
所有上述的二膦酸衍生物都可从文献中充分了解。这包括它们的生产方法(参阅，如EP-A-513760，pp.13-48)。例如，3-氨基-1-羟基丙烷-1，1-二膦酸可如美国专利3,962,432中所描述的那样被制备，二钠盐可如美国专利4,639,338和4,711,880中所描述的那样被制备，并且1-羟基-2-(咪唑-1-基)乙烷-1，1-二膦酸可如美国专利4,939,130中所描述的那样被制备。
本发明的活性剂可以异构体或异构体的混合物形式被使用，一般为光学异构体如对映体或非对映异构体或几何异构体，一般为顺反异构体。光学异构体以纯的对映体和/或外消旋体形式获得。
本发明的活性剂可以它们的水合物或包含用于它们的结晶的溶剂的形式使用。
本发明的活性剂(二膦酸盐)优选以药物组合物形式被使用，药物组合物含有治疗有效量的活性成分，任选具有适宜于施用的无机或有机固体、半固体或液体可药用载体，或与可药用载体混合。
本发明的活性剂可单独施用，或与其他的骨活性药物组合施用，以固定的组合或以两者分离的形式分别施用，如激素，如雌激素、降钙素、甲状旁腺激素或这些物质的任何类似物、雷洛昔芬或其他的选择性雌激素受体调节剂(SERMs)。此类另外的骨活性药物可以比二膦酸盐更频繁地施用。
实施例下列的实施例说明如上所述的本发明，但不以任何方式限制本发明。
在下列实施例中，术语“活性成分”应被理解为上述的根据本发明有用的二膦酸衍生物和其治疗有效的盐和水合物中的任何一种。
用于狗研究的片剂使用Carver压片机(Carver，Inc.，Wabash，IN)，压力为约1吨，将表1中的配方压成10mm的斜边片剂。用硬脂酸作为润滑剂以避免唑来膦酸在溶解时与Mg2+的潜在结合。采用柠檬酸使狗胃的pH接近于人胃的pH，并且根据受试物种，本发明的组合物可含有或不含有柠檬酸。含有柠檬酸的制剂可产生粘冲，在压片前需要对冲进行润滑。应该避免在制剂中加入表面活性剂，因为它可能刺激胃肠道(GIT)。
表1具有或不具有柠檬酸的唑来膦酸常规片的实例
使用溶出测定装置，桨转速设定为50转/分钟，在pH 4.5和37℃时，两种类型的唑来膦酸常规片在体外在约15分钟后达到完全的释放。
脂缓释制剂唑来膦酸在GELUCIRE 44/14和GELUCIRE 50/13中的溶解度较差，在60℃时低于1mg/g。
在混悬液中，在GELUCIRE中本发明的活性成分，唑来膦酸的释放将被延缓，所以，当药物物质接触到胃内容物时有可能迅速溶解。对于混悬液的均匀性和溶出优化，可使用粒度大小被降低的唑来膦酸。这可用柠檬酸或不用柠檬酸来配制。柠檬酸在GELUCIRE中不易溶解，它的粒度也可使用乳钵和乳棒来降低。
0号胶囊可分别含有高达660mg和680mg的GELUCIRE50/13和GELUCIRE44/14。本制剂可方便地设置为每100mg的唑来膦酸500mg的GELUCIRE。GELUCIRE的混合物被用于释放速率的优化单独的GELUCIRE 55/13在约7-8小时后可提供100％的释放；50∶50的GELUCIRE 50/13∶GELUCIRE 44/14在3至3.5小时可提供100％的释放。
微乳制剂I可以考虑多种已知的作为潜在生物利用度提高剂的液体脂类介质，例如在下表所显示的那样。在实施例的所有赋形剂中唑来膦酸的溶解度用目视的方法进行评估并被确定是极低的(＜0.2mg/g赋形剂)。唑来膦酸在这些脂类介质中的一个的制剂通过灌胃给予研究的狗。制剂适宜地可每100mg唑来膦酸含有5mL的潜在生物利用度提高剂(20mg/mL)。鉴于唑来膦酸在赋形剂中差的溶解度，在赋形剂中的制剂可能是混悬液。但是，本发明的制剂可能使活性剂在赋形剂中产生完全的溶出。粒度被降低至约200微米的唑来膦酸可被用于产生混悬液的最大均匀性。在制备后混悬液一般可迅速沉淀，因此可能需要在给狗施用前临时配制。
受试的赋形剂和它们的组合物详述如下·安慰剂43.0％CREMOPHOR(BASF，Ludwigshafen，德国)，35.7％的玉米油单-双-三甘油酯，10.6％的丙二醇、10.6％的乙醇、0.1％的生育酚DL-α·LABRASOL，(Gatefossé，Westwood，NJ)Caprylocaproyl聚乙二醇-8甘油酯，HLB＝14，作为生物利用度提高剂
·LABRAFIL M2125CS，(Gatefossé，Westwood，NJ)Linoleoyl聚乙二醇-6甘油酯，HLB＝4，作为生物利用度提高剂·CAPROYL PGMC，(Gatefossé，Westwood，NJ)丙二醇单辛酸酯，HLB＝5，作为增溶剂和吸收提高剂·CAPMULPG-8，(Abitec Corp.，Janesville，WI)中链脂肪酸(主要为辛酸)丙二醇单酯，HLB＝4.4，在Beagle狗中以1000和2000mg/kg的剂量连续施用28天无毒性，乳化剂/表面活性剂被用作增溶剂和生物利用度提高剂，容易吸收·CAPMULMCM，(Abitec Corp.，Janesville，WI)中链单和双甘油酯(主要为辛酸和癸酸)，HLB＝5.5-6.0，乳化剂/表面活性剂被用作增溶剂和生物利用度提高剂，容易吸收·CAPTEX 200，(Abitec Corp.，Janesville，WI)丙二醇二辛酸酯/二癸酸酯，作为生物利用度提高剂·CAPTEX 355EP，(Abitec Corp.，Janesville，WI)辛酸/癸酸甘油酯，用作生物利用度提高剂维生素E-TPGS制剂维生素E-TPGS是半固体的赋形剂，熔点约为41℃，且亲水亲油平衡值(HLB)为15-19。它易于从胃肠道(GIT)吸收。
唑来膦酸在40℃时在维生素E-TPGS中的溶解度低于0.22mg/g。使用粉碎至约200微米粒度的唑来膦酸制备维生素E-TPGS胶囊。该药物物质被混悬于预热至约40℃的维生素E-TPGS中以形成分散体。然后将该分散体装入胶囊。药物物质的溶出是不依赖于pH的。在约75分钟后可达到从明胶胶囊的表观完全溶出。
用于狗研究的制剂的选择制剂和施用方式的选择从上述的制剂中选择制剂和施用方式。
·将狗随机分成5组，每一组用于5个制剂中的一个。以在研究开始时狗的计划体重(projected weight)为准制备单位剂量。液体制剂用灌胃法施用(20mg/mL唑来膦酸溶液或混悬液)，半固体制剂在明胶胶囊中施用(0.2mg/mg唑来膦酸混悬液)，·四种制剂用柠檬酸溶液冲服，一种制剂作为柠檬酸作用的对照并用自来水冲服(2.5mL/kg)。柠檬酸溶液浓度以唑来膦酸剂量为准对于10mg/kg的剂量为24mg/mL(pH～2.2)，对于25mg/kg的剂量为60mg/Ml(pH～2.1)。柠檬酸冲服的理由为(a)降低狗胃的pH，(b)部分钙的增溶可能就地形成复合物，(c)细胞旁路的转运的潜在提高。
实施例中的制剂的生产在实施例中口服施用的五种制剂如下1.20mg/mL的唑来膦酸溶液在pH4.5的醋酸盐缓冲液中，用柠檬酸冲服，2.20mg/mL的唑来膦酸溶液在pH4.5的醋酸盐缓冲液中，用自来水冲服，3.0.2mg/mg的唑来膦酸缓冲液在GELUCIRE中，用柠檬酸冲服，4.20mg/mL的唑来膦酸缓冲液在CAPMUL PG-8中，用柠檬酸冲服，5.0.2mg/mg的唑来膦酸缓冲液在维生素E-TPGS中，用柠檬酸冲服。
制剂1、2和4，用柠檬酸冲服制剂1、2和4在给狗施用之前就地配制。在每次施用之前，每组狗的一种制剂通过将赋形剂或缓冲液加入到预先称重的药物物质中并在搅拌盘中搅拌而制备。在施用过程中制剂保持在不停的搅拌状态下。以体积为准进行施用，体积用每一只狗的体重进行校正。
唑来膦酸在pH4.5的醋酸盐缓冲液中易溶，并且加入自来水(最终pH～3.8)或柠檬酸(最终pH～2.2)冲服液不产生沉淀。唑来膦酸也易于均匀地分散在CAPMULPG-8中。CAPMULPG-8混悬液加入柠檬酸冲服液可形成乳剂，在约10分钟的搅拌后，唑来膦酸被完全增溶。
制剂3唑来膦酸在GELUCIRE胶囊中的制剂在表2中详述。
表2.唑来膦酸GELUCIRE制剂
GELUCIRE 44/14在65-70℃熔化并精确称量。然后称出GELUCIRE50/13并加入到已熔化的GELUCIRE 44/14中。混合物在65-70℃被熔化并匀化。在使用低剪切搅拌器搅拌的同时缓慢加入粒度约200微米的唑来膦酸。在胶囊灌装过程中保持该混合物在65-70℃并不停地搅拌。使用容积式移液管(positive displacement pipet)手工灌装胶囊。以单位剂量和每只狗的重量为准精确称量每一个胶囊的含量。胶囊被放置在40℃36小时以进行固化，然后在4-8℃冰箱放置直至施用。
用高效液相色谱仪(HPLC)分析胶囊中唑来膦酸含量和降解产物。实施例结果详述如下·10mg/kg规格含量测定＝97.9％，·25mg/kg规格含量测定＝97.6％。
制剂5维生素E-TPGSTM胶囊的制剂在表3中详述。
表3.唑来膦酸维生素E-TPGS制剂
将维生素E-TPGS在50℃熔化。在搅拌的同时缓慢加入粒度约200微米的唑来膦酸。在胶囊灌装过程中保持该混合物在50℃并不停地搅拌。使用容积式移液管手工灌装胶囊。以单位剂量和每只狗的重量为准精确称量每一个胶囊的含量。保持胶囊在4-8℃直至施用。
用HPLC分析胶囊中唑来膦酸含量和降解产物。实施例结果详述如下·10mg/kg规格含量测定＝99.2％，·25mg/kg规格含量测定＝99.6％。
施用、耐受性和生物利用度试验如本文所述制备唑来膦酸制剂并准备狗研究组。制剂通过灌胃或胶囊口服施用，一日一次，剂量为10或25mg唑来膦酸/千克/天，给予五组(3只/剂量/组)禁食的雄性beagle狗直至1周。
制剂受试者组组1和2施用唑来膦酸的醋酸盐缓冲液，分别用柠檬酸和自来水冲服。
组3施用唑来膦酸的GELUCIRE混悬液，其被置于明胶胶囊并用柠檬酸冲服。
组4施用唑来膦酸在CAPMUL PG-8中的半固体混悬液，用柠檬酸冲服。
组5施用唑来膦酸在维生素E-TPGS中的混悬液，其被置于明胶胶囊中并用柠檬酸冲服。
组1、2和4的施用体积为0.5mL/kg(10mg/kg/天)和1.25mL/kg(25mg/kg/天)。
雄性beagle狗可从Marshall Farms，North Rose，纽约获得。在施用开始时，动物约为7至9个月的月龄，并且体重从约7至10千克。每天观察临床体征(施用前、施用后5分钟之内、施用后约0.5、1、2、4和6小时)。在所有组进行体重和摄食量的测定。通过HPLC分析唑来膦酸在收集的血清样本中的水平来确定生物利用度，样本来自所有的动物在第一次和第七次施用后约24小时。来自处死前濒死动物的血样，以及来自于在第一和第七次每日施用后存活动物和处死前存活动物的血样被收集起来用于毒代动力学研究。在所有的动物中可进行尸检并记录肉眼可见的发现。
(a)表4 研究设计、动物分配以及受试物的剂量
NA＝不适用结果在10mg/kg/天时，施用制剂1的1只狗和施用制剂4的所有狗出现了与受试物相关的濒死性。在25mg/kg/天时，在所有施用制剂1、3和4的狗中，在施用制剂2的两只狗以及施用制剂5的1只狗中出现了与受试物相关的濒死性。濒死性最早是在第4天施用制剂4剂量为10和25mg/kg/天的动物中观察到的，与此同时其他剂量组的狗在第6或第7天因濒死而被处死。早期死亡或被处死的动物中死亡或濒死的原因是在多个器官中的出血和坏死。
在10mg/kg/天时，清楚地表明制剂4最不能被耐受，其证据在于100％的濒死性和在处死前严重的与受试物有关的临床体征包括运动活性的降低、共济失调、呕吐(带有或不带有饲料、血和/或化合物)、流涎、食欲不振、粪便减少、苍白和/或外表消瘦、触摸冰凉、上睑下垂、粪便改变(腹泻、软便、粘液样便和/或粪便稀少)以及体重降低(在3次施用后与基线时相比降低了15％)。根据在一只动物中的濒死性，制剂1也不能被耐受，临床体征与在制剂4中观察到的类似，并且在研究结束时存活的狗中体重降低了7％。制剂2、3和5可较好地被耐受，在1周的治疗期所有的动物都存活，并且临床体征通常与上述的相比较不严重。体重降低也是最少的，对于制剂2为2-5％，对于制剂3为1-7％并且对于制剂5为0-5％。
在25mg/kg/天时，在所有施用的制剂中都可观察到与受试物相关的临床体征，包括运动活性的降低、共济失调、上睑下垂、食欲不振、粪便减少、呕吐(带有或不带有饲料、血和/或化合物)、以及粪便改变。苍白或外表消瘦、触摸冰凉和/或共济失调在制剂4之外的所有制剂组中都可观察到，制剂4的动物在出现这些体征之前被处死。此外，到第7天为止在25mg/kg/天的所有施用制剂中都观察到了极端的体重降低，与基线相比范围为12-14％(制剂1)、14％(制剂2)、15-18％(制剂3)和9-12％(制剂5)。
食欲不振(定义为小于等于50％的饲料消耗)，呕吐和粪便的变化通常在第3天和第4天开始，与此同时运动能力的降低和外观的改变(消瘦、冰凉、苍白)通常在第5天或其后开始。在第1天观察到的唯一的临床体征是在25mg/kg/天施用制剂4的动物中观察到的呕吐。
检查与受试物有关的死亡率、临床体征和体重的总结在表5、表6、表7、表8、表9和表10中给出。
(a)表5 10mg/kg/天时死亡率数据的总结
(b)表6 25mg/kg/天时死亡率数据的总结
(c)表7 10mg/kg/天时临床体征数据的总结
(d)表8 25mg/kg/天时临床体征数据的总结
(e)(f)表9 早期处死动物与受试物相关的体重降低
(g)(h)表10 直至研究结束时存活的动物与受试物相关的体重降低
毒代动力学评价第1天和第7天的平均毒代动力学参数列于表11和表12中。除了制剂4在25mg/kg/天的第1天外，制剂1、2和4在两个剂量水平上的tmax通常出现在施用后0.5小时。制剂3和5在两个剂量水平两天中的tmax通常为0.5至2小时，并与制剂中组分的缓慢释放相一致。
在10mg/kg/天时，对于制剂1、2、3和5从第1天至第7天检测到了轻微的蓄积趋势。
(a)表11 唑来膦酸在第1天的平均毒代动力学参数
(b)表12 唑来膦酸在第7天的平均毒代动力学参数
结论本实施例证实，使用带有亲脂性生物利用度提高剂和增溶剂如CAPMUL PG-8和维生素E-TPGS的本发明制剂，可产生唑来膦酸在胃肠道具有可耐受副作用的显著胃吸收。
权利要求
1.药物制剂，该药物制剂包含含有二膦酸或其盐以及非活性成分的口服剂型，所述非活性成分选自中链脂肪酸的酯或亲脂性的聚乙二醇酯，所述的非活性成分具有从约1至约30的亲水亲油平衡值(HLB)。
2.根据权利要求1的药物制剂，其中所述的二膦酸或其盐为骨再吸收抑制剂。
3.根据上述权利要求中任何一项的药物制剂，其中所述的骨再吸收抑制剂可用于治疗或预防骨质疏松症或与不规则的破骨细胞活性有关的疾病。
4.根据上述权利要求中任何一项的药物制剂，其中所述的二膦酸或其盐选自伊本膦酸、阿仑膦酸、依替膦酸、利塞膦酸、以及替鲁膦酸或其盐。
5.根据权利要求1-3中的任何一项的药物制剂，其中所述的二膦酸或其盐为唑来膦酸或其盐。
6.根据上述权利要求中任何一项的药物制剂，其中所述的非活性成分为中链脂肪酸(主要为辛酸)的丙二醇单酯。
7.根据权利要求6的药物制剂，其中所述的非活性成分具有4.4的HLB值。
8.根据权利要求1-5中的任何一项的药物制剂，其中所述的非活性成分为D-α-生育酚基聚乙二醇1000琥珀酸酯。
9.根据上述权利要求中任何一项的药物制剂，其中所述的非活性成分为中链脂肪酸(主要为辛酸)丙二醇单酯和D-α-生育酚基聚乙二醇1000琥珀酸酯的组合产品。
10.根据上述权利要求中任何一项的药物制剂，其中所述的二膦酸或其盐的剂量在从约0.01mg/kg至约500mg/kg的范围之内。
11.根据上述权利要求中任何一项的药物制剂，其中所述的二膦酸或其盐的剂量在从约0.1mg/kg至约200mg/kg的范围之内。
12.根据上述权利要求中任何一项的药物制剂，其中所述的二膦酸或其盐的剂量在从约0.2mg/kg至约100mg/kg的范围之内。
13.治疗方法，该方法包括施用根据上述权利要求中的任何一项的口服剂型以提供所述的二膦酸或其盐提高的生物利用度或提高的耐受性。
14.根据权利要求13的方法，其中所述的提高的生物利用度是指经过测定绝对生物利用度提高了。
15.根据权利要求14的方法，其中所述的绝对生物利用度在从约1％至约50％的范围之内。
16.根据权利要求14的方法，其中所述的绝对生物利用度在从约2.5％至约30％的范围之内。
17.根据权利要求14的方法，其中所述的绝对生物利用度在从约7.5％至约20％的范围之内。
18.根据权利要求14的方法，其中所述的提高的生物利用度是指经过测定在所述的受试者中血液水平的Cmax在从约1至约16,000ng/mL的范围之内。
19.根据权利要求14的方法，其中所述的提高的生物利用度是指经过测定在所述的受试者中血液水平的Cmax在从约10至约8,000ng/mL的范围之内。
20.根据权利要求14的方法，其中所述的提高的生物利用度是指在所述的受试者中血液水平的AUC(0-24Hr)在从约100至约40,000ng/hr/mL范围之内。
21.根据权利要求14的方法，其中所述的提高的生物利用度是指在所述的受试者中血液水平的AUC(0-24Hr)在从约100至约20,000ng/hr/mL范围之内。
22.根据权利要求14的方法，其中所述的增加的耐受性是指经过测定胃肠道毒性降低了。
23.治疗方法，该方法包括施用根据上述权利要求1-12中的任何一项的剂型以提供所述的二膦酸或其盐提高的生物利用度或提高的耐受性。
24.制备在权利要求1中所定义的制剂的方法，该方法包括将二膦酸或其盐混悬在非活性成分中得到分散体，并将该分散体装入胶囊中。
25.根据权利要求23的方法，其中所述非活性成分在混悬二膦酸或其盐之前被预热。
26.根据权利要求23或24的方法，其中的分散体被装入明胶胶囊中。
全文摘要
包含含有二膦酸或其盐以及非活性成分的口服剂型的药物制剂，所述非活性成分选自中链脂肪酸的酯或亲脂性的聚乙二醇酯，所述非活性成分具有从约1至约30的亲水亲油平衡值(HLB)。
文档编号A61K47/14GK1897926SQ200480038621
公开日2007年1月17日 申请日期2004年12月22日 优先权日2003年12月23日
发明者E·A·赞努, S·D·贝特曼, M·普迪派迪, A·E·罗伊斯, A·T·M·塞拉尤迪恩 申请人:诺瓦提斯公司