专利名称：一种衍生肌腱支架材料及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种肌腱支架及其制备方法。
背景技术：
以往可吸收降解聚脂类生物化学材料无法达到正常人的肌腱的生物力学特点和组织相容性，而异体肌腱支架免疫反应大，也不理想。并且这两种肌腱支架都不利于组织细胞生长、繁殖和分泌细胞外基质。
发明内容
本发明的目的是为了解决以往可吸收降解聚脂类生物化学材料无法达到正常人的肌腱的生物力学特点和组织相容性，异体肌腱支架免疫反应大和这两种肌腱支架都不利于组织细胞生长、繁殖和分泌细胞外基质的问题，而提供的一种衍生肌腱支架材料及其制备方法。本发明衍生肌腱支架材料由动物或人的肌腱作原料制成。其制备方法通过以下步骤实现(一)切取动物或人的肌腱进行预处理，再将其浸泡在甘油与MEM混合液中；(二)将浸泡过的肌腱置于密封的容器内，在-80～-90℃冷冻10±1天；(三)真空冻干在-30～-60℃，0.03～0.1kpa的条件下使肌腱的水分含量降到5％～10％；(四)进行物理扭转分丝处理；(五)过氧化氢浸泡振荡；(六)室温下蒸馏水浸洗2～4次，每次25～35min；(七)再次真空冻干在-30～-60℃，0.03～0.1kpa的条件下使肌腱的水分含量降到5％～10％；(八)密封，再用1～10mGry强度的Co60-γ射线消毒，即得到衍生肌腱支架材料。
本发明与正常人的肌腱的生物力学特点和组织相容性十分接近，化学处理少，无有害化学残留物，免疫反应小，三维立体纤维结构有利于组织细胞生长、繁殖、分泌细胞外基质和营养成分的进出。
本发明中所使用的MEM培养液可从市场直接购买，容易得到。
图1是衍生肌腱支架材料与正常人的肌腱的预调滞后曲线图，曲线A为正常人的肌腱的预调滞后曲线，曲线B为衍生肌腱支架材料的预调滞后曲线；图2是衍生肌腱支架材料与正常人的肌腱的应力松弛平均值曲线图，曲线C为正常人的肌腱的应力松弛平均值曲线，曲线D为衍生肌腱支架材料的应力松弛平均值曲线；图3是衍生肌腱支架材料的断裂曲线图；图4是正常人的肌腱的断裂曲线图。
具体实施例方式
具体实施方式
一本实施方式衍生肌腱支架材料由动物或人的肌腱作原料制成。
具体实施方式
二本实施方式与具体实施方式
一的不同点是衍生肌腱支架材料由哺乳动物或人的肌腱作原料制成。
具体实施方式
三本实施方式通过以下步骤实现衍生肌腱支架材料的制备(一)切取动物或人的肌腱进行预处理，再将其浸泡在甘油与MEM混合液中；(二)将浸泡过的肌腱置于密封的容器内，在-80～-90℃冷冻10±1天；(三)真空冻干在-30～-60℃，0.03～0.1kpa的条件下使肌腱的水分含量降到5％～10％；(四)进行物理扭转分丝处理；(五)过氧化氢浸泡振荡；(六)室温下蒸馏水浸洗2～4次，每次25～35min；(七)再次真空冻干在-30～-60℃，0.03～0.1kpa的条件下使肌腱的水分含量降到5％～10％；(八)密封，再用1～10mGry强度的Co60-γ射线消毒，即得到衍生肌腱支架材料。
本实施方式制备出的衍生肌腱支架材料植入人体内，植入衍生肌腱支架材料的周围组织未见坏死、感染、积液现象；衍生肌腱支架材料与周围组织轻度粘连，易于分离，11-12周后可见肌腱外膜形成及血管生长。本实施方式在人体内胶原合成速度快，修复肌腱力学性能强，吻合口愈合能力强适宜植入人体。
具体实施方式
四本实施方式与具体实施方式
三的不同点是步骤(一)中预处理是将动物或人的肌腱用生理盐水冲洗，再洗去滑液及腱周膜。
具体实施方式
五本实施方式与具体实施方式
三的不同点是步骤(一)中甘油与MEM混合液由占甘油与MEM混合液体积10±0.5％的甘油和90±0.5％的MEM组成。
具体实施方式
六本实施方式与具体实施方式
三或五的不同点是步骤(一)中甘油与MEM混合液由占甘油与MEM混合液体积10％的甘油和90％的MEM组成。
具体实施方式
七本实施方式与具体实施方式
三的不同点是步骤(一)中预处理过的肌腱浸泡在甘油与MEM混合液中5～10min。
具体实施方式
八本实施方式与具体实施方式
七的不同点是步骤(一)中预处理过的肌腱浸泡在甘油与MEM混合液中6min。
具体实施方式
九本实施方式与具体实施方式
七的不同点是步骤(一)中预处理过的肌腱浸泡在甘油与MEM混合液中9min。
具体实施方式
十本实施方式与具体实施方式
七的不同点是步骤(一)中预处理过的肌腱浸泡在甘油与MEM混合液中7min。
具体实施方式
十一本实施方式与具体实施方式
三的不同点是步骤(二)将浸泡过的肌腱置于密封的容器内-85℃冷冻10天。
具体实施方式
十二本实施方式与具体实施方式
三的不同点是步骤(二)将浸泡过的肌腱置于密封的容器内-81℃冷冻9天。
具体实施方式
十三本实施方式与具体实施方式
三的不同点是步骤(二)将浸泡过的肌腱置于密封的容器内-89℃冷冻11天。
具体实施方式
十四本实施方式与具体实施方式
三的不同点是步骤(四)物理扭转分丝处理是将肌腱反复扭转形成纤维状。
具体实施方式
十五本实施方式与具体实施方式
三的不同点是步骤(五)用体积百分比为3±0.5％的过氧化氢浸泡振荡2.5～3.5h。
具体实施方式
十六本实施方式与具体实施方式
三或十五的不同点是步骤(五)用体积百分比为3％的过氧化氢浸泡振荡3h。
具体实施方式
十七本实施方式与具体实施方式
三的不同点是步骤(一)中切取哺乳动物或人的肌腱。
具体实施方式
十八本实施方式采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)与流式细胞仪(FCM)测试衍生肌腱支架材料(TDBM)的生物相容性，另取体外培养的工程细胞作对照组。FCM检测结果如表1、2所示，结果表明TDBM降解过程中没有影响细胞生长的毒性代谢产物产生，与衍生肌腱支架材复合的肌腱细胞增殖和活性未受影响。通过分析表明，与衍生肌腱支架复合的肌腱细胞无异倍体出现，体外连续培养两个月后的形态学观察也证实肌腱细胞未出现无限增殖倾向，说明衍生肌腱支架材料无致癌作用，具有良好的生物相容性。
表1两组细胞细胞周期对照表
表2两组细胞细胞DNA倍体水平及凋亡对照表
具体实施方式
十九本实施方式采用测力传感器、光栅位移传感器、电子式万能材料试验机、位移信号数据采集卡和计算机测试衍生肌腱支架材料的生物力学。衍生肌腱支架材料与正常人的肌腱断裂特性的检测结果如表3所示，衍生肌腱支架材料与正常人的肌腱的预调滞后曲线如图1所示，衍生肌腱支架材料与正常人的肌腱的应力松弛平均值曲线如图2所示，衍生肌腱支架材料的断裂曲线如图3所示，正常人的肌腱的断裂曲线如图4所示。
以上检测结果对比说明，衍生肌腱支架材料与正常人的肌腱在生物力学方面十分接近，它完全可以替代正常人的肌腱。
表3衍生肌腱支架材料与正常人的肌腱试件断裂特性
权利要求
1.一种衍生肌腱支架材料，其特征是它由动物或人的肌腱作原料制成。
2.根据权利要求1所述的衍生肌腱支架材料，其特征是它由哺乳动物或人的肌腱作原料制成。
3.一种衍生肌腱支架材料的制备方法，其特征是它按下述步骤进行(一)切取动物或人的肌腱进行预处理，再将其浸泡在甘油与MEM混合液中；(二)将浸泡过的肌腱置于密封的容器内，在-80～-90℃冷冻10±1天；(三)真空冻干在-30～-60℃，0.03～0.1kpa的条件下使肌腱的水分含量降到5％～10％；(四)进行物理扭转分丝处理；(五)过氧化氢浸泡振荡；(六)室温下蒸馏水浸洗2～4次，每次25～35min；(七)再次真空冻干在-30～-60℃，0.03～0.1kpa的条件下使肌腱的水分含量降到5％～10％；(八)密封，再用1～10mGry强度的Co60-γ射线消毒，即得到衍生肌腱支架。
4.根据权利要求3所述的一种衍生肌腱支架材料的制备方法，其特征在于步骤(一)中预处理是将动物或人的肌腱用生理盐水冲洗，再洗去滑液及腱周膜。
5.根据权利要求3所述的一种衍生肌腱支架材料的制备方法，其特征在于步骤(一)中甘油与MEM混合液由占甘油与MEM混合液体积10±0.5％的甘油和90±0.5％的MEM组成。
6.根据权利要求3或5所述的一种衍生肌腱支架材料的制备方法，其特征在于步骤(一)中预处理过的肌腱浸泡在甘油与MEM混合液中5～10min。
7.根据权利要求3所述的一种衍生肌腱支架材料的制备方法，其特征在于步骤(二)将浸泡过的肌腱置于密封的容器内-85℃冷冻10天。
8.根据权利要求3所述的一种衍生肌腱支架材料的制备方法，其特征在于步骤(四)物理扭转分丝处理是将肌腱反复扭转形成纤维状。
9.根据权利要求3所述的一种衍生肌腱支架材料的制备方法，其特征在于步骤(五)用体积百分比为3±0.5％的过氧化氢浸泡振荡2.5～3.5h。
10.根据权利要求3所述的一种衍生肌腱支架材料的制备方法，其特征在于步骤(一)中切取哺乳动物或人的肌腱。
全文摘要
一种衍生肌腱支架材料及其制备方法，它涉及一种肌腱支架及其制备方法。它解决了以往可吸收降解聚脂类生物化学材料无法达到正常人的肌腱的生物力学特点和组织相容性，异体肌腱支架免疫反应大的问题。本发明衍生肌腱支架由动物或人的肌腱作原料制成。其制备按下述步骤进行(一)切取动物或人的肌腱预处理，再浸泡于甘油与MEM混合液中；(二)在－80～－90℃冷冻10±1天；(三)真空冻干；(四)物理扭转分丝处理；(五)过氧化氢浸泡振荡；(六)室温下蒸馏水浸洗；(七)再次真空冻干；(八)密封，用Co
文档编号A61L27/38GK1970095SQ20051001056
公开日2007年5月30日 申请日期2005年11月23日 优先权日2005年11月23日
发明者曲彦隆 申请人:曲彦隆