专利名称：一种香菇多糖冻干粉针剂及制备方法
技术领域：
本发明涉及一种香菇多糖冻干粉针剂，属药物领域。
背景技术：
香菇多糖是香菇中分离出来的一种具有明显抗癌效果的活性物质，于1969年在日本首次被发现，1986年日本首先生产并将香菇多糖制备成粉针剂销售国外，临床主要应用于胃癌、直肠癌等消化系统癌症，它的主要给药途径为静脉滴注或推注，我国于1988年开始进口日本味之素的香菇多糖，并应用于临床。自1982年以来，四川抗菌素研究所、河南省医药工业研究所先后从深层发酵培养的香菇液中提取香菇多糖，名为“香菇菌多糖”，区别从子实体中提取的香菇多糖。1986年河南开封制药厂生产香菇多糖片。同年卫生部批准福州梅峰制药厂试产“香菇菌多糖片”和“香菇多糖肌肉注射剂”，均对慢性迁延性肝炎有效，可使部分乙型肝炎患者表面抗原转阴；并配合化疗药物治疗晚期食道癌、胃癌也有较好疗效。目前市面上主要是南京振中生物工程有限公司生产的以香菇多糖为原料的注射用香菇多糖。
目前也有报道香菇多糖注射剂，它是采用单一甘露醇作支架剂，现行生产采用调pH为中性后进行过滤，采用高浓度氢氧化钠溶解，容易造成香菇多糖损失和分解，配制的水溶液中出现混悬不均匀等现象，导致使用安全性降低。
发明内容
本发明的技术方案是提供了一种香姑多糖冻干粉针剂，本发明的另一技术方案是提供了该冻干粉针剂的制备方法。
本发明的技术方案是一种抗肿瘤的香菇多糖冻干剂，其特征在于是以下述重量配比药物为原料香菇多糖0.8～1.20份，冻干赋形剂冻干赋形剂80～200份。
优选的药物配比是香菇多糖1.15份，冻干赋形剂100～160份。
更优选地，它是由如下重量配比的香菇多糖与冻干赋形剂制备而成香菇多糖1份，冻干赋形剂130份。
所述冻干赋形剂可以是甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸或脯氨酸中的一种，或它们与甘露醇的混合物，优选的冻干赋形剂是甘氨酸。中性氨基酸与甘露醇的混合物中重量配比为中性氨基酸120～150份、甘露醇0～30份。优选地，所述的中性氨基酸是甘氨酸。
进一步地，本发明香菇多糖冻干粉针剂是由如下重量配比的香菇多糖与冻干赋形剂制备而成香菇多糖0.8～1.20份，冻干赋形剂80～200份，冻干赋形剂按重量比为甘氨酸120～150份、甘露醇0～30份。
更进一步地，它是由下述重量配比的香菇多糖与冻干赋形剂制备而成
香菇多糖1.15份，甘氨酸150份。
本发明还提供了该香菇多糖冻干剂的制备方法，它包括如下步骤a、称取下述重量配比的香菇多糖与冻干赋形剂0.8～1.20份，冻干赋形剂80～200份；b、取香菇多糖，用碱液溶解，加冻干赋形剂，混合，过滤，用盐酸调节pH为6.5～8.0后分装入瓶，冻干后，封口。
优选的药物配比是取香菇多糖1.15份，用碱液溶解，再与一种冻干赋形剂150份混合搅拌，过滤。用盐酸调pH为6.5～8.0后分装入瓶，冻干后，封口。所述抗肿瘤的香菇多糖冻干粉针剂，其特征在于冻干赋形剂可以是所中性氨基酸或中性氨基酸与甘露醇的混合物；其中，所述的中性氨基酸为甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸或脯氨酸中的一种或多种，较好的冻干赋形剂是甘氨酸。
步骤b所述的碱液为0.1～1摩尔浓度的氢氧化钠。
香菇多糖是生物反应调节剂，它是通过刺激免疫细胞成熟，分化和增殖，改善宿主机体平衡，达到恢复和提高宿主细胞对淋巴因子、激素和其它生理活性因子的反应性，由于是间接作用，所以毒副作用小。香菇多糖的毒副反应一般有头晕、胸闷等可逆性反应，少数病人有面部潮红。静脉滴注香菇多糖易出现过敏性休克。本发明和现行工艺相比，在工艺上采用在调pH之前进行过滤可减少香菇多糖有效成分的损失，香菇多糖在碱性条件下溶解，呈完全均一的溶液状态，容易过滤，过滤后再调pH值，更为合理，而原工艺采用先调pH值，香菇多糖已析出呈混悬状态，再过滤则损失较大。同时发明人采用更低浓度的NaOH溶液，更有利于减少生产过程中由于苛性碱引起的降解反应。由于酸性和碱性条件下香菇多糖易分解故本发明药物辅料中采用中性氨基酸，由于氨基酸类的助溶作用和pH调节作用，克服了原工艺采用甘露醇，右旋糖酐等冻干支架剂在水溶液中出现的不均匀溶液的现象，获得均匀分散溶液，使其毒副反应降低。同时因其采用少量甘露醇或不采用甘露醇，使得含量测定更准确，更方便。稳定性考查结果显示溶液更稳定。
过敏性(局部、全身和光敏毒性)、溶血和局部(血管理、皮肤、黏膜、肌等)刺激性等主要与局部、全身组药相关的特殊安全性试验说明，本发明香菇多糖制剂家免静注0.4mg/kg，连续3天观察对血管无刺激。肌注0.1mg/只，于48h后观察对肌肉无刺激。溶血性试验显示红细胞不溶。豚鼠腹腔注射受试药物0.5ml，隔日一次，共3次致敏。首次注射后第14天制备血清，对豚鼠进行皮内注射被动致敏，48小时后激发。试验结果显示，注射用香菇多糖被动皮肤过敏性反应为阴性。主动全身过敏试验(ASA)豚鼠腹腔注射受试物0.5ml，隔日一次，共3次致敏。首次注射后第14天、21天予以静脉注射受试药2ml进行激发，试验结果显示，注射用香菇多糖主动全身过敏反应为阴性。
本发明香菇多糖冻干粉针采用中性氨基酸作支架剂，溶液更均匀，临床使用更安全，通过降低氢氧化钠浓度，过滤后调节pH值，可减少香菇多糖损失，减少由于酸碱引起的水解反应，为临床提供了一种安全、有效的药物选择。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式
，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
具体实施方法实施例1 本发明香菇多糖冻干粉针辅料筛选试验取200ml容量瓶5只，分别加香菇多糖原料115mg，加3ml 1摩尔浓度的氢氧化钠溶液，让其自然溶胀，搅拌溶解，加少量注射用水稀释，搅匀，依次加甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸、脯氨酸、甘露醇14.0g，过滤，滤液用盐酸中和至pH7.2，再加注射用水至200毫升，进行溶液均匀性检测，结果如表1。
表1溶液均匀性检测结果
实验结果表明，选用的氨基酸相对于单纯用甘露醇的作支架剂对比，香菇多糖在水溶液中分散更加均匀。由于均匀的分散，在临床上使用更安全。
实施例2 本发明香菇多糖冻干粉针的辅料配比筛选试验取200ml容量瓶7只，分别加香菇多糖原料115mg，加3ml 1摩尔浓度的氢氧化钠溶液，让其自然溶胀，搅拌溶解，加少量注射用水稀释，搅匀，加甘氨酸、10.0g，依次在7只容量瓶中加入甘露醇0g、2g、5g、10g、15、30g、40g，混匀，过滤，滤液用盐酸中和至pH7.2，再加注射用水至200毫升，进行溶液均匀性检测，结果如表2。
表2溶液均匀性检测结果
实验结果表明，单独选用氨基酸作支架剂也行，只是用量稍大，但和甘露醇合用后，既可以改善冻干制剂的形态，又可减少赋形剂的整体用量。
实施例3 本发明香菇多糖冻干粉针主料与辅料配伍筛选试验分别取本品115mg，用0.25mol/L氢氧化钠50ml溶解，加辅料适量，加注射用水至150ml，调节pH至7.0～7.5，用灭菌注射用水稀释至200ml，无菌过滤，分装(2ml/瓶)，冷冻干燥，试验结果见表3。
表3辅料用量的确定
试验结果表明，在每支针剂辅料(甘氨酸)用量为150mg外观时最好，即主药∶辅料为1.15∶150，即1∶130。
实施例4本发明香菇多糖冻干粉针的制备取香菇多糖原料1.10克，加0.25mol/L氢氧化钠溶液500ml，让其自然溶胀，搅拌溶解，加少量注射用水稀释，搅匀，加丙氨酸100g，搅拌均匀，过滤，滤液用盐酸中和至pH6.8～7.2，再加注射用水至2000毫升，过滤测含量，分装，2ml/瓶，进行冷冻干燥，出箱，封口，压盖，检漏，轧盖，贴标签。
实施例5 本发明香菇多糖冻干粉针的制备取香菇多糖原料1.15克，加0.25mol/L氢氧化钠溶液500ml，让其自然溶胀，搅拌溶解，加少量注射用水稀释，搅匀，加丝氨酸120g，搅拌均匀，过滤，滤液用盐酸中和至pH6.8～7.2，再加注射用水至2000毫升，过滤测含量，分装，2ml/瓶，进行冷冻干燥，出箱，封口，压盖，检漏，轧盖，贴标签。
实施例6 本发明香菇多糖冻干粉针的制备取香菇多糖原料1.05克，加30ml 1摩尔浓度的氢氧化钠溶液，让其自然溶胀，搅拌溶解，加少量注射用水稀释，搅匀，加甘氨酸120g，搅拌均匀，过滤，滤液用盐酸中和至pH6.8～7.2，再加注射用水至2000毫升，过滤测含量，分装，2ml/瓶，进行冷冻干燥，出箱，封口，压盖，检漏，轧盖，贴标签。
实施例7 本发明香菇多糖冻干粉针的制备取香菇多糖原料1.08克，加30ml 1摩尔浓度的氢氧化钠溶液，让其自然溶胀，搅拌溶解，加少量注射用水稀释，搅匀，加甘氨酸与甘露醇混合物(100∶15)150g，搅拌均匀，过滤，滤液用盐酸中和至pH6.8～7.2，再加注射用水至2000毫升，过滤测含量，分装，2ml/瓶，进行冷冻干燥，出箱，封口，压盖，检漏，轧盖，贴标签。
以下通过理化性质和毒理实验证明本发明的有益效果。
试验例1 本发明香菇多糖冻干粉针理化实验及毒理实验取香菇多糖原料1.15克，加0.25mol/L氢氧化钠溶液500ml，让其自然溶胀，搅拌溶解，加少量注射用水稀释，搅匀，加甘氨酸与甘露醇混合物(100∶5)140g，搅拌均匀，过滤，滤液用盐酸中和至pH6.8～7.2，再加注射用水至2000毫升，过滤稳定性试验产品经高温(40℃、60℃、80℃)、高湿(RH92.5％、RH75％、25℃)及光照(4500lx)等影响因素试验后，外观性状、澄明度、pH值、含量及无菌检查均符合要求。本发明产品加速试验(40℃ RH75％)3个月的考察结果，外观性状、澄明度、pH值、含量、杂质及无菌检查均符合要求。
本发明产品在室温留样考察第0、1、3、6、12、18、24个月，经定期取样检查各项项目均符合要求。
毒理实验证明，采用本方法制备的香菇多糖冻干制剂，规格1mg，用生理盐水稀释至2ml/支，于对家兔耳缘静脉注射受试药物2ml/kg，连续3日观察，血管刺激性情况，结果显示，家兔注射受试药物后，无明显挣扎现象，动物反应温和，耳缘静脉血管及周围组织无明显红肿现象。病理组织学检查，给药一侧耳表皮、真皮组织结构完好，未见变性、坏死、缺失及过度角化，耳缘静脉无明显扩张，未见血栓形成；给予家兔股四头肌注射受试药物1ml，于48h后，观测肌肉刺激试验情况，结果显示，注射用香菇多糖注射部位的肌肉组织与对照部位肌肉组织无任何差异，反应级数为0；溶血性实验从家兔心脏取血，使成脱纤血液后加入生理盐水配成2％的红细胞悬液，加入供试液，并做阳性、阴性对照，1小时后观察，结果显示阳性，对照管全部溶血，受试物及阴性对照管的红细胞全部下沉，上层液体无色澄明，镜检红细胞不凝集。
被动过敏性试验(PCA)豚鼠腹腔注射受试药物0.5ml，隔日一次，共3次致敏。首次注射后第14天制备血清，对豚鼠进行皮内注射被动致敏，48小时后激发。试验结果显示，注射用香菇多糖被动皮肤过敏性反应为阴性。
主动全身过敏试验(ASA)豚鼠腹腔注射受试物0.5ml，隔日一次，共3次致敏。首次注射后第14天、21天予以静脉注射受试药2ml进行激发，试验结果显示，注射用香菇多糖主动全身过敏反应为阴性。
本发明香菇多糖冻干粉针采用中性氨基酸作支架剂，溶液更均匀，临床使用更安全，通过降低氢氧化钠浓度，过滤后调节pH值，可减少香菇多糖损失，减少由于酸碱引起的水解反应，为临床提供了一种安全、有效的药物选择。
权利要求
1.一种香菇多糖冻干粉针剂，其特征在于它是由如下重量配比的香菇多糖与冻干赋形剂制备而成香菇多糖0.8～1.20份，冻干赋形剂80～200份，其中，所述的冻干赋形剂为中性氨基酸或中性氨基酸与甘露醇的混合物。
2.根据权利要求1所述的香菇多糖冻干粉针剂，其特征在于所述的冻干赋形剂中，中性氨基酸与甘露醇的重量配比为中性氨基酸120～150份、甘露醇0～30份。
3.根据权利要求1或2所述的香菇多糖冻干燥粉针剂，其特征在于所述的中性氨基酸为甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸或脯氨酸。
4.根据权利要求3所述的香菇多糖冻干粉针剂，其特征在于所述的中性氨基酸是甘氨酸。
5.根据权利要求4所述的香菇多糖冻干粉针剂，其特征在于它是由香菇多糖与甘氨酸制备而成，其重量配比为香菇多糖1.15份、甘氨酸150份。
6.一种制备权利要求1-5任一项所述的香菇多糖冻干粉针剂的方法，它包括如下步骤a、称取下述重量配比的香菇多糖与冻干赋形剂0.8～1.20份，冻干赋形剂80～200份；b、取香菇多糖，用碱液溶解，加冻干赋形剂，混合，过滤，用盐酸调节pH为6.5～8.0后分装入瓶，冻干后，封口。
7.根据权利要求6所述香菇多糖冻干粉针剂的制备方法，其特征在于所述的冻干赋形剂为中性氨基酸或中性氨基酸与甘露醇的混合物；其中，所述的中性氨基酸为甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸或脯氨酸。
8.根据权利要求7所述香菇多糖冻干粉针剂的制备方法，其特征在于步骤b所述的碱液为0.1～1摩尔浓度的氢氧化钠。
全文摘要
本发明提供了一种香菇多糖冻干粉针剂，它是由香菇多糖，冻干赋形剂为原料制备而成，其中所述的冻干赋形剂为中性氨基酸或中性氨基酸与甘露醇的混合物。本发明冻干粉针采用中性氨基酸作支架剂，溶液均匀，临床使用安全，其制备方法通过降低氢氧化钠浓度，先过滤，再调节pH值，可减少香菇多糖损失，减少由于酸碱引起的水解反应，为临床提供了一种安全、有效的药物选择。
文档编号A61P31/00GK1969876SQ20051002214
公开日2007年5月30日 申请日期2005年11月25日 优先权日2005年11月25日
发明者吴四灵, 王小林 申请人:成都三康药物研究所