专利名称：一种治疗肺结核病的中药组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗肺结核病的中药组合物及其制备方法。
背景技术：
目前，有效治疗肺结核的药物，主要是西药。但西药一般具有较大的毒副作用。纯中药制成的治疗肺结核病的药物，其疗效一般不理想，不能有效杀灭结核病毒。
发明内容本发明为了克服以上技术的不足，提供了一种疗效好、可有效杀灭结核病毒的治疗肺结核病的纯中药组合物。
本发明的另一目的在于提供上述组合物的制备方法。
本发明的治疗肺结核病的中药组合物，是由以下重量配比的原料和药用辅料制成黄芪300-600g、党参200-500g、黄精300-600g、当归200-500g、丹参200-500g、猫爪草300-600g、百部150-350g、白及150-350g、夏枯草200-500g。
上述本发明的中药组合物，所述原料优选的重量配比为黄芪350-500g、党参250-400g、黄精350-500g、当归250-400g、丹参250-400g、猫爪草350-500g、百部200-300g、白及200-300g、夏枯草250-400g。
上述本发明的中药组合物，所述原料最优选的重量配比为，黄芪420g、党参336g、黄精420g、当归336g、丹参336g、猫爪草420g、百部252g、白及252g、夏枯草336g。
上述本发明的中药组合物，最好制备成咀嚼片片剂。
本发明的中药组合物，为山东中医药大学附属医院呼吸科内科主任医师、山东中医药大学中医内科学教研室陶凯教授的临床验方，属于中药新药6类，本课题已经被列为国家863重点课题。原料经提取后保留的成分大多是低聚糖和多聚糖，口感好，所以我们将剂型设计为咀嚼片，即保留了传统水煎剂的有效成分，方便了患者服用，还便于保存和运输，扩大了销售群体。较之普通片剂能迅速发挥药效，提高了生物利用度。
方解为黄芪补气、益精为君药；党参、黄精益气养阴为辅臣；当归、丹参补血、活血化瘀，亦为辅臣，取当归补血汤之意，补益精血，丹参则可活血养血；猫爪草、百部杀痨虫、清虚热为佐；白及收敛肺气、去瘀生新为佐，夏枯草清肺虚热亦为佐药，又助猫爪草清虚热之力。全方配伍，可益精血，补肺气，杀痨虫，清虚热，祛瘀生新，共奏益气、养阴、化瘀杀虫之功效。
本发明的中药组合物，在目前临床上用于治疗III、IV型肺结核病进展期病症，肺结核活动期配合西药化疗减毒增效，减少耐药性，增强抗痨作用，减少肺组织损害方面尤为突出。在结核病的活动期联合西药使用，减少耐药性，增加局部血液循环，增加肺部血药浓度，提高抗痨作用；在结核病稳定期，单独使用抗痨片减少肺组织损伤，加快病理组织修复，巩固疗效，提高机体免疫力，防止复发有显著疗效。
肺痨的治疗原则是补虚为主，参以杀虫。本方中各味药中水溶性的多糖是提高机体免疫力的主要成分，脂溶性的成分对人型结核杆菌有一定的抑制作用。考虑工厂的实际生产情况，兼顾脂溶性和水溶性成分，同时参考黄芪精口服液的提取工艺，我们暂拟订乙醇的水溶液渗漉提取各成分。渗漉属于动态浸出，即溶剂相对药粉流动浸出，溶剂的利用率高，有效成分浸出完全，并且保证有效成分不被破坏。
当归、夏枯草和猫爪草中含有挥发油，挥发油在本方中可以治疗肺痨引起的咳嗽，并有消除炎症的作用，但是，由于有些挥发性成分，对热、光不稳定，所以我们采用CO2超临界提取挥发油的方法，不仅方便了大生产的操作，也保证了提取物的质量。
辅料的选择加入适量的阿斯巴甜使片剂的口感更好，加淀粉减少干浸膏的粘性。用乙醇做粘和剂，90％的乙醇制软材粘性太强，95％的乙醇制软材，捏即散，利于制粒。减小物料的吸潮，增加物料的流动性利于片重差异。综合比较确定选用硬脂酸镁，它既可赋予物料较好的流动性，又因为其疏水性而能防潮。
上述本发明的中药组合物的制备方法，最好采用以下步骤进行，(1)、将当归、夏枯草和猫爪草粉碎，用CO2超临界萃取器提取挥发油；将β-环糊精溶于适量水中，研磨后，加入提取后的挥发油，研磨，抽滤，石油醚洗涤，恒温干燥后得包结物；(2)、将超临界提取后的药渣与粉碎的黄芪、党参、黄精、百部和白及混合，加入10倍重量50％的乙醇溶液渗漉提取，提取液回收乙醇至密度为1.20-1.26的清膏，然后，将清膏继续浓缩至密度为1.34-1.36的稠浸膏，减压干燥得提取物；(3)丹参超微粉碎，得超微细粉；(4)将上述的包结物、提取物、超微细粉和药用辅料，过100目筛混匀，压片，制成咀嚼片。
一、取本发明的药物进行以下体外抗结核实验(由北京市结核病胸部肿瘤研究所药研室提供数据)1.培养基7H9液体培养基(含10％ADC)，7H10固体培养基(含10％OADC、0.03％琼脂)。
2.药物及其处理(试管二倍稀释法)本发明的药物实施例1中的包结物、提取物、超微细粉的混合物。异烟肼(INH)为Sigma公司产品。本发明的药物和INH分别用蒸馏水溶解制成初溶液(储备液)，灭菌后，使其在培养基中为所设计的浓度。
3.实验菌及其在培养基中浓度实验菌为结核分枝杆菌标准株H37Rv。将在改良罗氏培养基上生长良好的培养物，用玛瑙乳钵磨成菌悬液，使其在培养基中成以下浓度(1)在7H9液体培养基中为10-2mg/ml；(2)在7H10固体培养基斜面上接种10-3mg/ml的菌悬液0.1ml。
4.培养与观察置37℃培养，以培养四周的结果为准。
5.结果5.1在7H9液体培养基中所试药物的最小抑菌浓度(MIC)如表1。
表1在7H9液体培养基中的MIC
5.2在7H10固体培养基中所试药物的MIC如表2。
表2在7H10培养基中的MIC
在本实验条件下，本发明的药物在7H9液体培养基中，对H37Rv的MIC为5.0mg/ml，在7H10固体培养基中，对H37Rv的MIC为1.56mg/ml。
二、本发明的药物的抗菌作用(下述的药效学实验和毒性实验全部由中国中医研究院西苑医院进行，试验起止日期2005年7月～2005年11月)1.菌种本试验用了临床分离的致病菌株，包括金黄色葡萄球菌9株、表皮葡萄球菌10株、卡他球菌3株、链球菌10株、绿脓杆菌4株、变形杆菌6株、致病性大肠杆菌9株、肺炎杆菌6株及金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和大肠杆菌质控株各1株，共60株，均由中国医学科学院医药生物技术研究所提供。
2.药物本发明的药物提取清膏1.9474g生药/g清膏，由山东润华药业有限公司提供，批号用蒸馏水配成1g生药/ml浓度的药液，100℃30分钟消毒，凉后2000转/分10分钟离心，取上清放冰箱备用。
3.试验方法将生药浓度为1g/ml的本发明的药物提取清膏用M-H培养基稀释成含生药100、50、25、12.5、6.25、3.125、1.56mg/ml浓度的药液，将各浓度的药液100μl/孔分别依次加入无菌的96孔培养板内，共65列，每板设1列不加细菌的药物对照。
把1∶1000稀释的新鲜的细菌培养物加入到上述各排稀释好的含药培养板中，10μl/孔，另设不加药的各菌株对照孔。链球菌放5％CO2、37℃恒温箱内培养20小时，其它各菌置37℃培养箱内培养20～48小时后观察结果。无细菌生长的最小稀释度的药物浓度即为最小抑菌浓度(MIC)。在本试验中将MIC＞100mg/ml定为无抑菌作用，计算总抑制率和MIC50。
4.结果本发明的药物对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、卡他球菌等球菌有抑制作用，抑制率分别为90、70及100％，绿脓杆菌、大肠杆菌、肺炎杆菌等杆菌没有抑制作用。本发明的药物的总抑制率为35％，MIC50为12.32mg/ml。
三、本发明的药物的解热作用1.试验药物本发明的药物提取清膏，1.9474g生药/g清膏，由山东润华药业有限公司提供，批号大鼠给药剂量分别为5.0、2.5、1.25g生药/kg。用蒸馏水配成0.5、0.25、0.125g生药/ml药液备用同类对照药百地滋阴丸，山西杨文水制药有限公司产品，批号20050453。大鼠给药剂量1.6g/kg。用蒸馏水配成0.16g生药/ml药液备用。阳性对照药阿司匹林肠溶片，40mg/片，北京曙光药业有限有限公司产品，批号040311。给药剂量为200mg/kg，用蒸馏水配成20mg/ml浓度的药液备用。
2.致热源干酵母片，每片含酵母0.5g，广东五洲药业有限公司产品，批号051202。用生理盐水配成15％的菌悬液使用。
3。试验方法实验动物随机分为6组，即模型对照组(等量蒸馏水)、阿斯匹林组(200mg/kg)、百地滋阴丸组(1.6g/kg)、本发明的药物小剂量(1.25g生药/kg)组、中剂量(2.5g生药/kg)组及大剂量(5.0g/kg)组，每组10只。连续3天测定三次大鼠肛温取平均值作致热前正常体温，将体温不正常的大鼠剔除。试验时动物背部皮下注射酵母菌混悬液(15％，10ml/kg)，给药组同时灌胃药1次，模型对照组组给予等量蒸馏水，4h后再给药1次，于药后3、4、5、6、7、8h测定大鼠体温，计算各时间点体温的变化，进行组间比较。以体温变化值为纵坐标，以时间为横坐标作图。
4.结果模型组大鼠注射酵母菌后3h体温开始逐渐升高，7h达到高峰，而后体温逐渐下降；本发明的药物大、中、小剂量组药后3～7h体温明显下降，显著低于模型对照组(P＜0.05～0.001)。阿斯匹林组药后3～7h体温升高幅度明显低于模型对照组(P＜0.05～0.001)；同类对照药百地滋阴丸组药后3～7h体温亦显著下降(P＜0.05～0.01)。表明本发明的药物对酵母菌致热大鼠体温有明显的解热作用。
四、本发明的药物对枸橼酸所豚鼠的止咳作用1.药物
(1)受试药本发明的药物提取清膏含1.9474g生药/g清膏，批号。山东润华药业有限公司提供。分三个剂量组，剂量为4.4(大)、2.2(中)、1.1(小)g生药/kg。用蒸馏水配制成0.44、及0.22g、0.11g(生药)/ml的药液放冰箱备用。
(2)阳性对照药咳平片，10mg/片，由北京曙光药业有限责任公司生产，批号030619，给药剂量为7mg/kg，用蒸馏水配成0.7mg/ml的药液备用。百地滋阴丸，18g/丸，山西杨文水制药有限公司生产，批准文号国药准字B20020590，生产批号20050453，给药剂量为1.4g/kg，用蒸馏水配成0.14g/ml的药液备用。
2.试验方法试验前将豚鼠逐只置于4L容器的密闭钟罩内，以(600mmHg)的压力通过玻璃喷头喷入17.5％枸橼酸，喷雾1分钟，记录5分钟内豚鼠的咳嗽次数进行筛选，咳嗽次数少于10次者弃用，挑选合格的豚鼠用于试验。
取筛选后合格豚鼠60只，雌雄各半，随机分为6组，(1)模型组(给水)；(2)咳平片组(7mg/kg)；(3)百地滋阴组(1.4g/kg)；(4)本发明的药物大剂量组(4.4g生药/kg)；(5)本发明的药物中剂量组(2.2g生药/kg)；(6)本发明的药物小剂量组(1.1g生药/kg)，以10ml/kg的体积每日灌胃给药一次，连续3天，末次给药后90分钟，将豚鼠逐只置入4L容积的密闭钟罩内，以(600mmHg)的压力通过玻璃喷头喷入17.5％枸橼酸，喷雾1分钟，观察记录豚鼠的咳嗽潜伏期和5分钟内咳嗽次数，经t检验，比较组间差异。
3.结果表明，本发明的药物大、中、剂量组明显减少咳嗽次数，与模型组比较有显著性差异，分别(P＜0.05～0.01)，大、中、小剂量组均有延长咳嗽潜伏期的趋势，对照药百地滋阴丸能明显延长咳嗽潜伏期及减少咳嗽次数，与模型组比较有显著性差异(P＜0.01)，咳平片作用不明显。
五、长期毒性实验本发明的药物27.25、13.88及6.94g生药/kg(临床用量的70、35、17.5倍)组动物连续灌胃给药13周各组动物未见严重不良反应，摄食量、血常规、生化12项指标、心电图、脏器指标在各组之间均无统计学差异。病理检查各脏器均未见该药引起的明显中毒性病理改变。
六、急性毒性实验以40ml/kg体重的剂量灌胃给药一次后，小鼠静伏少动，竖毛，少吃，少喝，约过2～3h后基本恢复正常；间隔6小时第二次给药后出现与上述相同的症状；16小时后第3次给药，症状相同。24小时后大便、行为、精神等基本恢复正常，皮毛也恢复正常，与正常对照组比较均无区别；摄食量第3～4天基本恢复正常。第一天给药后摄食量减少，体重明显降低，但摄食量逐渐恢复正常的同时，发育也良好，体重也恢复得与正常组没有差异(详见表1、表2)。神经、呼吸等其他系统均未发现异常现象，一直观察到第14天无动物死亡，解剖观察未见肉眼可见的病变。
本发明的药物，用于治疗肺结核病具有疗效好、可有效杀灭结核病毒、由纯中药制成。
本发明的制备方法，具有提取纯度高，药物损失少的优点。
具体实施方式
实施例1称取以下重量的原料备用黄芪420g、党参336g、黄精420g、当归336g、丹参336g、猫爪草420g、百部252g、白及252g、夏枯草336g。
1、将处方中各味中药(除丹参外)粉碎备用；2、将当归、夏枯草和猫爪草粉碎用CO2超临界萃取仪器提取挥发油；萃取温度、压力和时间分别为45℃、30MPa、3h。
3、将β-环糊精溶于20倍量的水中，研磨5min，加入挥发油(50％乙醇溶液(V/V))，研磨为90分钟，冰箱(4℃)冷藏24h，抽滤，石油醚洗涤，40℃恒温干燥4h，即得包结物。
4、将超临界提取的药渣与粉碎的黄芪、党参、黄精、百部和白及用12倍量50％乙醇的乙醇溶液渗漉提取，流速为(6ml/min/kg)18ml/min，药液回收乙醇至密度为1.20-1.26的清膏，然后，将清膏继续浓缩至密度为1.34-1.36的稠浸膏，得提取物；5、减压干燥；6、丹参超微粉碎，得超微细粉；7、将上述各步骤所得的包结物、提取物、超微细粉过100目筛混匀，加入95％的乙醇制软材，烘干，过16目筛整粒，加入适量淀粉、阿斯巴甜和0.8％硬脂酸镁混匀，压片；8、将所得素片包衣，得成品1000片；9、包装；10、入库。
用法与用量本品为咀嚼片，一次3片，一日3次。
实施例2称取以下重量的原料备用黄芪350g、党参400g、黄精530g、当归250g、丹参220g、猫爪草380g、百部250g、白及230g、夏枯草450g。
制备方法、用法与用量与实施例1基本相同，制备成咀嚼片。
实施例3称取以下重量的原料备用黄芪500g、党参280g、黄精360g、当归450g、丹参300g、猫爪草500g、百部200g、白及200g、夏枯草250g。
1、将处方中各味中药(除丹参外)粉碎备用；2、将当归、夏枯草和猫爪草粉碎，采用水蒸汽蒸馏法提取挥发油；将β-环糊精溶于20倍量的水中，研磨5min，加入挥发油(50％乙醇溶液(V/V))，研磨为90分钟，抽滤，石油醚洗涤，干燥4h，即得包结物。
3、将水蒸汽提取后的药渣与粉碎的黄芪、党参、黄精、百部和白及用10倍量60％乙醇的乙醇溶液提取两次，合并提取液，过滤，浓缩至密度为1.34-1.36的稠浸膏，减压干燥，得提取物；4、丹参超微粉碎，得超微细粉；7、将上述各步骤所得的包结物、提取物、超微细粉过100目筛混匀，加入95％的乙醇制软材，烘干，过16目筛整粒，加入适量的乳糖，装成1000粒胶囊，0.5g/粒。
用法与用量口服，一次2粒，一日3次。
实施例4称取以下重量的原料备用黄芪450g、党参300g、黄精400g、当归250g、丹参380g、猫爪草420g、百部300g、白及200g、夏枯草400g。
1、将丹参粉碎，得丹参细粉；2、将其余原料混合，粉碎成粗粉，加入10倍量50％乙醇的乙醇溶液提取两次，合并提取液，过滤，浓缩至密度为1.3的稠浸膏，减压干燥，得提取物；3、将上述各步骤所得的提取物和丹参细粉过100目筛混匀，加入95％的乙醇制软材，烘干，过16目筛整粒，加入适量的糊精，用常规的方法制备成颗粒剂1000包，8g/粒。
用法与用量口服，一次1包，一日2次。
权利要求
1.一种治疗肺结核病的中药组合物，其特征在于是由以下重量配比的原料和药用辅料制成，黄芪300-600g、党参200-500g、黄精300-600g、当归200-500g、丹参200-500g、猫爪草300-600g、百部150-350g、白及150-350g、夏枯草200-500g。
2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于所述原料的重量配比为，黄芪350-500g、党参250-400g、黄精350-500g、当归250-400g、丹参250-400g、猫爪草350-500g、百部200-300g、白及200-300g、夏枯草250-400g。
3.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于所述原料的重量配比为，黄芪420g、党参336g、黄精420g、当归336g、丹参336g、猫爪草420g、百部252g、白及252g、夏枯草336g。
4.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于制备成咀嚼片片剂。
5.一种权利要求4所述的中药组合物的制备方法，其特征在于包括以下步骤，(1)、将当归、夏枯草和猫爪草粉碎，用CO2超临界萃取器提取挥发油；将β-环糊精溶于适量水中，研磨后，加入提取后的挥发油，研磨，抽滤，石油醚洗涤，恒温干燥后得包结物；(2)、将超临界提取后的药渣与粉碎的黄芪、党参、黄精、百部和白及混合，加入10倍重量50％的乙醇溶液渗漉提取，提取液回收乙醇至密度为1.20-1.26的清膏，然后，将清膏继续浓缩至密度为1.34-1.36的稠浸膏，减压干燥得提取物；(3)丹参超微粉碎，得超微细粉；(4)将上述的包结物、提取物、超微细粉和药用辅料，过100目筛混匀，压片，制成咀嚼片。
全文摘要
本发明涉及一种治疗肺结核病的中药组合物及其制备方法。本发明的治疗肺结核病的中药组合物，是由以下重量配比的原料和药用辅料制成黄芪300－600g、党参200－500g、黄精300－600g、当归200－500g、丹参200－500g、猫爪草300－600g、百部150－350g、白及150－350g、夏枯草200－500g。其制备方法为，(1)、将当归、夏枯草和猫爪草粉碎，用CO
文档编号A61P31/06GK1785384SQ20051004509
公开日2006年6月14日 申请日期2005年11月17日 优先权日2005年11月17日
发明者简惠, 陶凯 申请人:山东润华药业有限公司