专利名称：一种玉米sod脂质体及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种酶分子的脂质体制备方法。
背景技术：
脂质体是人工制备的依靠磷脂分子间疏水作用在水中自发形成的封闭囊状结构，药物包裹在脂质体内部。脂质体制备简单，对机体无毒，无免疫原性，进入体内后主要被网格细胞吞噬，因此可以提高药物的利用率。脂质体膜的组分一般为卵磷脂和胆固醇，卵磷脂本身就是机体细胞的组成成分，是一种生理活性物质，对身体机能有调控作用，能构促进新陈代谢增强人体的抵抗力，而且脂质体可以制成针剂、口服制剂或气雾剂等以实现多种途径给药。因而作为一种新型的药物载体备受重视。通过改变脂质体的大小和电荷或添加某种组分可以控制药物在组织内的分布，从而实现靶向给药。玉米SOD稳定性较差，不易透过细胞膜，具有免疫原性，易于被消化道内的酶降解，而SOD脂质体将能有效消除上述不理想因素脂质体的稳定性是脂质体工业化生产中所面临的巨大挑战。通常的研究中多以通过改变脂质体膜的组成比例和制备工艺来解决上述问题。通过增加膜质中胆固醇的含量可以提高脂质体的稳定性，因为胆固醇能够通过嵌入脂质分子内部降低膜的流动性从而提高稳定性。制备脂质体的常规材料为不饱和卵磷脂，由于含有双键，易于被空气中的氧气氧化，造成膜的破裂和药物的泄漏。因而，在制备过程中的成膜、超声处理、灌装和保存环节中多用氮气作为保护气来防止脂质氧化。
脂质体的制备方法有多种。薄膜分散法是将卵磷脂、胆固醇等类脂质及脂溶性药物溶于氯仿(或其他有机溶剂)中，然后旋转蒸发，使其在瓶内壁上形成薄膜，将水溶性药物溶于磷酸盐缓冲液中，加入烧瓶中不断搅拌，即得大孔脂质体，这种脂质体的包封率一般较高，但通透性差。超声波法是将药物水溶液与溶有脂质的有机溶剂混合后再超声处理制备脂质体，这种方法简便易行，但制得的脂质体包封率较低；冷冻干燥法对遇热不稳定的药物尤为适宜；逆相蒸发法是一种较为普遍的制备脂质体的方法，得到的脂质体为大单层脂质体，一般体积较大，此法适合于包裹水溶性药物、大分子生物活性物质，该法包封容积和包封率都很高。
发明内容
本发明的目的是提供一种玉米SOD脂质体及其制备方法，采用氢化大豆卵磷脂为包被材料，利用旋转薄膜-超声波法制备玉米SOD脂质体，具有生产工艺简单，同时提高包封率及细胞相容性。
本发明提供的玉米SOD脂质体，包括玉米SOD和脂质体膜层，其特征是脂质体膜层投料的组分及重量分数比例如下大豆氢化卵磷脂6胆固醇6
正己烷 18氯仿 18水 10本发明提供玉米SOD脂质体的的制备方法，其特征是1.将重量份数比例为1∶1的大豆氢化卵磷脂与胆固醇混合为混合物，将重量份数比例为1∶1的正己烷和氯仿混合为混合溶剂，将两者重量份数比例为3∶1的混合物与混合溶剂混合并充分溶解。
2.将溶解液倒入干燥的圆底烧瓶中，进行旋转蒸发，挥发去除有机溶剂，在烧瓶内壁上形成均一的薄膜。
3.然后加入pH值6.8的SOD酶液，酶液的重量份数比例为溶解液的0.5倍，50℃水合40分钟，用超声波细胞粉碎机处理5分钟。
4.将水合脂质体用冷冻离心机以4,000转/分钟离心，取上清液即得到脂质体溶液。
5.将脂质体溶液用冷冻干燥机制成冻干粉，罐装。
本发明和现有技术相比，具有如下优点1.采用旋转薄膜-超声波法，简化了脂质体的制备工艺。目前制备脂质体常规材料是卵磷脂，含有不饱和键，在制备过程中的成膜、超声处理、灌装和保存环节中需保护装置来防止脂质氧化，本发明通过调节成膜材料组分比例，可在常规条件下制备脂质体，避免氧化反应的发生，简化了工艺。
2.提高了脂质体的稳定性。制备脂质体制备的常规材料为不饱和卵磷脂，由于含有双键，易于被空气中的氧气氧化，造成膜的破裂和药物的泄漏。本发明通过提高相变温度使脂质体具有较好的稳定性。
3.本发明采用物理的方法来保护SOD免受蛋白酶降解，可用于制备为口服SOD制剂。
4.本发明制备的玉米SOD脂质体的酶学性质与天然SOD的性质十分接近。
5.本发明制备的玉米SOD脂质体粒径分布为57±21nm，小于不饱和卵磷脂脂质体的分子粒径，更易于透过细胞膜，为人体作吸收。
权利要求
1.一种玉米SOD脂质体，包括玉米SOD和脂质体膜层，其特征是脂质体膜层投料的组分及重量分数比例如下大豆氢化卵磷脂 6胆固醇 6正己烷 18氯仿18水 10。
2.一种如权利要求1所述的玉米SOD脂质体的制备方法，其特征是A.将重量份数比例为1∶1的大豆氢化卵磷脂与胆固醇混合为混合物，将重量份数比例为1∶1的正己烷和氯仿混合为混合溶剂，将两者重量份数比例为3∶1的混合物与混合溶剂混合并充分溶解；B.将溶解液倒入干燥的圆底烧瓶中，进行旋转蒸发，挥发去除有机溶剂，在烧瓶内壁上形成均一的薄膜；C.然后加入pH值6.8的SOD酶液，酶液的重量份数比例为溶解液的0.5倍，50℃水合40分钟，用超声波细胞粉碎机处理5分钟；D.将水合脂质体用冷冻离心机以4,000转/分钟离心，取上清液即得到脂质体溶液。
全文摘要
一种玉米SOD脂质体及其制备方法，包括玉米SOD和脂质体膜层，其特征是脂质体膜层投料的组分及重量分数比例如下是大豆氢化卵磷酯6，胆固醇6、正己烷18、氯仿18、水10，采用氢化大豆卵磷酯为包被材料，利用旋转薄膜－超声波法制备玉米SOD脂质体，具有生产工艺简单，同时提高包封率及细胞相容性。本发明采用物理的方法来保护SOD免受蛋白酶降解，可用于制备为口服SOD制剂。制备的玉米SOD脂质体的酶学性质与天然SOD的性质十分接近。玉米SOD脂质体粒径分布为57±21nm，小于不饱和卵磷酯脂质体的分子粒径，更易于透过细胞膜，为人体作吸收。
文档编号A61K9/127GK1814294SQ20051004786
公开日2006年8月9日 申请日期2005年11月29日 优先权日2005年11月29日
发明者张立军, 陈红漫, 刘剑利, 樊金娟, 秦萍 申请人:沈阳农业大学