专利名称：一种能增强免疫功能的组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种由蜂胶、红景天组成的能增强免疫的组合物及其制备方法，属医药保健用途领域。
背景技术：
红景天是景天科红景天属植物高山红景天(R hodioal Sachalinensis.A.Bor.)或狭叶红景天(R.Kirilowii(Regel)Regel[Sedum Ki rilowii Regel])的干燥全草。最早载于《四部医典》，为常用的藏族用药，藏名“扫罗玛尔布”，民间用于治疗肺热咳嗽、咳血、白带、跌打损伤等。西藏红景天药用植物种类甚多，有长鞭红景天、喜马红景天、圆齿红景天、全瓣红景天(圣地红景天)、背药红景天等。红景天具有扶正固本、调和阴阳、益气补血、通脉养心、促脑益智、滋补强身的功效。近代药理学研究表明红景天制刑具有抗衰老、抗疲劳、抗病毒、抗缺氧、抗微波辐射作用。
近年来的研究显示红景天的主要活性成分是红景天甙及其甙元酪醇，另外还分离得到化学成分主要有酚类、黄酮及其二者的甙类。除此之外，还有香豆素、有机酸、蒽醌、甾类、萜类、生物碱、内酯、鞋质、脂肪、蛋白质以及K、Na、Ca、Mg、Fe、Cu、Zn、Cr等微量元素。田军等通过对云南红景天的挥发油研究发现挥发油主要成分为正辛醉、牛儿醉、里哪醇、桃金娘醉、正葵醉、及橙花醉乙酸酯等。
蜂胶是蜜蜂从植物的嫩芽和树皮或茎干伤口采集的粘性分泌物——树脂，与其上鄂腺分泌物及花粉、蜂蜡相混调合而成的具有芳香气味的天然胶状固体物质，是蜜蜂用于筑巢用的一种填充和粘合材料。蜂胶是植物药用成分的高度浓缩物，它所含的药用成分之多、浓度之高是一般药用植物无法相比的，因而具有多种药理作用。蜂胶早已引起众多国内外学者的重视和关注，并已成功地在临床上应用于多种疾病的防治，被誉为“天然药物”。目前，蜂胶在动物保健中应用日益广泛，在作为饲料添加剂和药物上取得重大成果。
蜂胶是褐色、固体状的粘性物质，带有芳香气味，味苦，在低温条件下变硬、脆；65℃时熔化。蜂胶所含成分，目前已知的有树脂、蜂蜡、芳香油、花粉及20余种酮类化合物，其中2种黄酮类(5，7——二羟基-3，4-二甲基黄酮和5-羟基-4，7-二甲氧基黄酮)是首次发现的。研究表明，新采集的蜂胶约含55％的树脂和香脂、30％的蜂蜡、10％的芳香挥发油和5％的花粉夹杂物。蜂胶中还含有多种维生素、氨基酸、酶和多糖等。
发明内容
本发明公布了一种具有增强免疫功能的组合物，是以蜂胶、红景天为原料制成的制剂。
红景天对机体的免疫系统具有广泛的调节作用。在用COXB3(柯萨奇B3)病毒建立的小鼠病毒性心肌炎模型中，孙寒等发现高山红景天复方制剂通过免疫机制的调节和体内自由基的快速清除而起到对病毒性心肌炎的治疗作用。王福俤等以T淋巴细胞、胸腺和脾脏重量及指数为指标对红景天的免疫功能进行研究，结果发现胸腺、脾脏重量及其指数均高于对照组切能提高外用血T淋巴细胞百分率，表明红景天对小鼠淋巴细胞免疫功能有增强作用。高山红景天甙在体外实验中发现能直接致小鼠淋巴细胞转化，表明具有丝裂原样作用；同时具有杀瘤作用，红景天甙免疫小鼠的PEM(腹腔巨噬细胞)杀伤肝癌的效率高达72.3％，其可能的机制是红景天甙通过iNOS介导的NO合成进而达到杀瘤的效应。在赵文等的实验中发现蔷薇红景天能提高机体的细胞脂免疫、体液免疫及非特异性免疫功能，表现在(1)增加小鼠外用血T淋巴纫胞细胞数并能使动物因产生迟发型变态反应而致的足趾肿胀度增加；(2)能增加小鼠脾脏的相对重量及由脾脏产生抗体的B淋巴细胞；(3)机体巨噬细胞的吞噬指数有所增加。而且在1250-5000mg剂量范围内对小鼠体内S-180生长有非常显著的抑瘤作用。
也有文献报道，蜂胶能增强机体非特异和特异性免疫功能，于晓红等采用氢化考的松免疫功能低下小鼠模型(HC小鼠模型)，观察蜂胶乙醇提取液(EEP)对HC小鼠的免疫功能的影响，结果表明，EEP能增强小鼠体液免疫功能，提高溶血素含量，增强小鼠巨噬细胞吞噬功能。高春义等观察了蜂胶提取物对移植了S180肉瘤小鼠免疫功能的影响，表明蜂胶提取物能使胸腺/体重比值增大(P＜0.05)，WBC(血白细胞计数)维持在正常水平，脾细胞杀伤肿瘤细胞能力增强(P＜0.05)。动物实验表明，蜂胶还可抑制由化学致癌物诱发的肿瘤。韩国学者1999年报道了sigma蜂胶(#1010)对人肿瘤细胞有明显的诱导凋亡作用；我国郭秀蝉等也证实国产醇提取蜂胶对Hep-II人肝癌细胞在体外有很强的杀伤作用。免疫调节是慢性肝病尤其是慢性病毒性肝炎治疗的重要环节，流行病学资料证明，HBV、HCV感染是患肝癌主要危险因素，HBV携带者、乙型肝炎肝硬化者患肝癌的可能性增加数百倍，因此，蜂胶可对慢性乙型肝炎和慢性丙型肝炎进行肝癌的二级预防。
因此，本发明结合现代药理研究，利用红景天与蜂胶在增强免疫功能方面互补的优势，组成一个能提高免疫功能的组合物。
本发明组合物是按下述重量配比的原料组成的蜂胶1-100份 红景天1-100份本发明组合物优选方案是
蜂胶2.5份红景天3份本发明是这样实现的(1)取蜂胶，用30-90％乙醇溶解，静置，过滤，收集滤液，减压浓缩，得蜂胶提取物；(2)取红景天，加4-10倍水煮沸1-4小时，过滤，收集滤液，浓缩，加70-100％乙醇，静置，过滤，收集滤液，浓缩，得红景天提取物；(3)将蜂胶提取物、红景天提取物混合，并加入一定的辅料，得本发明组合物。
本发明组合物可根据临床应用需要，研制成各种药物剂型，如注射剂(注射液、注射用粉针剂、大输液)、丸剂、散剂、片剂、栓剂、颗粒剂、膜剂、胶囊剂、滴丸剂、气雾剂、微囊剂、膏剂、酒剂、糖浆剂、口服溶液剂。因此，本发明组合物可以研制成药物，也符合保健食品要求，可开发成保健食品。
具体实施例方式
实施范例1蜂胶2份 红景天4份实施范例2蜂胶2.5份红景天3份实施范例3(1)取蜂胶，用90％乙醇溶解，静置，过滤，收集滤液，减压浓缩，得蜂胶提取物；(2)取红景天，加8倍水煮沸2小时，过滤，收集滤液，浓缩，加80％乙醇，静置，过滤，收集滤液，浓缩，得红景天提取物；
(3)将蜂胶提取物、红景天提取物混合，并加入一定的辅料，得本发明组合物。
免疫药理学研究实验材料〔一〕动物昆明种小鼠，雌雄兼用，体重20±1g；豚鼠250g，鸡1.5kg，雌雄不拘，均由四川省医学科学院实验动物研究所提供。
(二)药物及试剂氢化可的松山东新华制药厂生产，批号040824；盐酸左旋咪唑上海延安制药厂生产，批号040515；本发明组合物(以下简称组合物)不加赋形剂，含原生药0.2g/ml；组分一不加赋形剂，含红景天生药量0.13g/ml；组分二不加赋形剂，含蜂胶生药量0.7g/ml；印度墨汁英国Winson&Newto厂产品；豚鼠血清取3只豚鼠血清混合用于补体制备；鸡红细胞(CRBC)悬液制备CRBC在4℃冰箱中保存于Alsever’s液中，临用时生理盐水离心洗涤三次，配成5％混悬液；植物血凝素(PHA)上海市医学化验所产品，批号040612。
(三)仪器722光栅分光光度计上海光学仪器厂生产；SMY-2型数字测温仪德州电子设备厂产品；LXJH离心沉淀机，上海医疗器械三厂产品；S658电热恒温水浴箱，温州永强医疗器械厂生产。
方法与结果(一)对免疫功能的影响1.对小鼠单核医噬细胞吞噬功能的影响
小鼠50只，随机分为5组，组合物2g/kg，组分一1.3g/kg，组分二0.7g/kg，左旋咪唑25mg/kg，对照组给予常水，灌胃给药，每日一次，连续8d，末次给药后，每鼠尾静脉注射20％印度墨汁0.1ml/log，注射后分别在2min，10min从眼眶静脉丛取血20ul计算单核巨噬细胞碳粒廓清指数K值，结果表明，本发明组合物能明显提高小鼠单核巨噬细胞的吞噬能力，与左旋咪哇比较差异无显著性意义(P＞0.05)；作用明显强于组分一和组分二(P＞0.05)。提示本发明组合物中组分一和组分二能增强小鼠单核巨噬细胞的吞噬能力，且具有协同作用。
2.对鸡红细胞(CRBC)致敏小鼠血清溶血素(IgM)形成的影响(1)对CRBC致敏的正常小鼠IgM形成的影响小鼠50只，随机分为本发明组合物组2g/kg，组分一1.3g/kg，组分二0.7g/kg，左旋咪唑25mg/kg，空白对照等5组。每天灌胃给药1次，连续8d，在给药4d时每鼠ip5％CRBC悬液0.2ml致敏。末次给药24h后，摘取眼球取血，分离血清，测其光密度(OD)值。结果表明，本发明组合物和各组分对CRBC致敏的正常小鼠IgM形成未见明显影响。
(2)对CRBC致敏免疫功能低下的小鼠IgM形成的影响小鼠60只，随机分成正常对照组，氢考模型组，本发明组合物组2g/kg，组分一1.3g/kg，组分二0.7g/kg，左旋咪唑25mg/kg，等六组，每日灌胃给药1次，连续8d，在给药第5d正常对照组im生理盐水，其余5组im氢考33mg/kg，每日一次，连续4d，末次药后24h摘取眼球取血，分离血清，测其OD值。本发明组合物组与空白组比较无显著统计学意义，表明本发明组合物能使氢考所致免疫功能低下小鼠IgM调节至正常水平，而组分一和组分二与空白组比较有统计学意义(P＜0.05)。
3.对PHA在免疫低下小鼠体内诱发淋巴细胞转化的影响小鼠60只，随机分成正常对照组与氢考模型组ig生理盐水，本发明组合物组2g/kg，组分一1.3g/kg，组分二0.7g/kg，左旋咪唑25mg/kg，等六组，每日一次，连续9d。给药第1天为d1，d2-d9，每日一次，正常对照im生理盐水，其余4组imPHA6mg/kg及氢考50mg/kg，末次给药24h后剪鼠尾采外周血涂片，计数淋巴细胞转化率。结果表明，本发明组合物及各组分具有增加小鼠淋巴细胞转化的作用，但本发明组合物作用明显强于各组分，与左旋咪唑的作用的相当。
结论本发明组合物及其各组分能明显促进非特异性免疫单核巨噬细胞的吞噬能力，使免疫功能低下小鼠模型IgM调节接近正常水平，尤其可增强PHA在免疫功能低下小鼠体内诱发淋巴细胞转化的作用；但本发明组合物的作用明显强于各组分，表明，蜂胶与红景天配伍在增强免疫方面具有协同作用，体现了本发明在制备增强免疫功能医药保健品的重要性。
权利要求
1.一种能增强免疫功能的组合物，其特征在于，能增强免疫功能的组合物在用于制备增强免疫功能保健食品及药物中的用途。
2.根据权利要求1所述的一种能增强免疫功能的组合物，其特征在于，是按下述重量配比的原料制成的药剂蜂胶1-100份、红景天1-100份。
3.根据权利要求1或2所述的一种能增强免疫功能的组合物，其特征在于，是按下述重量配比的原料制成的药剂蜂胶2.5份、红景天3份。
4.根据权利要求1或2或3所述的一种能增强免疫功能的组合物，其特征在于，可研制成适用于临床的各种药物剂型，如注射剂(注射液、注射用粉针剂、大输液)、丸剂、散剂、片剂、栓剂、颗粒剂、膜剂、胶囊剂、滴丸剂、气雾剂、微囊剂、膏剂、酒剂、糖浆剂、口服溶液剂。
全文摘要
本发明涉及一种由蜂胶、红景天组成的能增强免疫功能的组合物及其制备方法，属医药保健用途领域，本发明要解决的技术问题是公开一种由蜂胶、红景天组成的组合物，明显促进非特异性免疫单核巨噬细胞的吞噬能力，使免疫功能低下小鼠模型IgM调节接近正常水平，尤其可增强PHA在免疫功能低上小鼠体内诱发淋巴细胞转化的作用；且本发明组合物的作用明显强于各组分，表明蜂胶与红景天配伍在增强免疫方面具有协同作用，体现了本发明在制备增强免疫功能医药保健品的重要性。
文档编号A61K35/56GK1861108SQ200510068040
公开日2006年11月15日 申请日期2005年5月9日 优先权日2005年5月9日
发明者孙毅, 高红, 王晓玲, 张健 申请人:孙毅