专利名称：血管内膜增厚抑制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及含有哒嗪酮化合物或者其药理学允许的盐作为有效成分的血管内膜增厚抑制剂。
背景技术：
目前认为，由动脉硬化性内膜增厚引起的冠状动脉狭窄是心肌梗塞、心绞痛发病机制的主要原因之一。一方面，近年来为了扩大由冠状动脉内膜增厚形成的狭窄部，广泛进行了经皮冠状动脉腔内成形术(PTCA)，还在实施支架的血管内置入。但是，进行这种PTCA或者支架的血管内置入时，由于血管内皮细胞被剥离，伴随的血管平滑肌细胞增殖造成内膜增厚，因此有时会出现再闭塞，这已成为医疗上的大课题。期待着特异性抑制血管内膜增厚的安全性高的药物制剂不仅可以预防、治疗动脉硬化性疾病，而且成为对PTCA或支架的血管内置入后的再狭窄的预防有用的药物制剂。
已知，哒嗪酮化合物或者其盐具有优良的抗血小板聚集作用、强心作用、血管扩张作用、抗过敏性慢反应物质(SRS-A，Slow Reacting Substancesof Anaphylaxis)作用、血栓素A2合成酶抑制作用、椎管狭窄症治疗作用、勃起功能障碍治疗作用、促进血管新生作用以及增强血管新生作用等作用，是期待作为抗血小板剂等的药物(例如，参考专利文献1～6)。
但是，没有关于该哒嗪酮化合物对血管内膜增厚具有如何效果的报道。对于血管内膜增厚有各种治疗方法，虽然药物治疗法已是现有的治疗方法之一，但是仍然期待有更加优良的药物治疗法。
专利文献1日本专利特公平7-107055号公报专利文献2日本专利特开平7-252237号公报专利文献3日本专利特开平7-285869号公报专利文献4WO 99/11268号公报专利文献5WO 00/12091号公报专利文献6WO 00/33845号公报发明的揭示本发明的目的是提供优良的血管内膜增厚抑制剂。
本发明人，反复进行了各种研究，发现下式(I)所示的哒嗪酮化合物或者其药理学允许的盐对于血管内膜增厚具有优良的抑制效果，藉此完成了本发明。
即，本发明提供了以式(I)所示的3(2H)-哒嗪酮化合物或者其药理学可允许的盐作为有效成分的血管内膜增厚抑制剂。
〔式中，R1、R2以及R3分别独立地表示氢原子或者碳原子数为1～6的烷基；X表示卤素原子、氰基或者氢原子；Y表示卤素原子、三氟甲基或者氢原子；A表示可被羟基取代的碳原子数为1～8的亚烷基。〕本发明的血管内膜增厚抑制剂适宜为以下的哒嗪酮化合物或者其药理学可允许的盐，即，在式(I)中，较好是R1以及R2为氢原子、R3为氢原子或者碳原子数为1～4的烷基、X为卤素原子、Y为卤素原子或者氢原子、A为可被羟基取代的碳原子数为1～5的亚烷基。
本发明的式(I)所示哒嗪酮化合物的血管内膜增厚抑制剂中，特好的示例是4-溴-6-〔3-(4-氯苯基)丙氧基〕-5-(3-吡啶基甲基氨基)-3(2H)-哒嗪酮或者4-溴-6-[3-(4-氯苯基)-3-羟基丙氧基]-5-(3-吡啶基甲基氨基)-3(2H)-哒嗪酮。
通过本发明可提供含有哒嗪酮化合物(I)或者其药理学可允许的盐的新血管内膜增厚抑制剂。
图1显示了试验例1的结果。显示了经口给予10mg/kg化合物A、300mg/kg西洛他唑(cilostazol)时的内膜面积。将溶剂组作为对照进行Dunnett检验，*表示p＜0.05，有显著差别。
图2显示了试验例1的结果。显示了经口给予10mg/kg化合物A、300mg/kg西洛他唑时的I/M比。将溶剂组作为对照进行Dunnett检验，*表示p＜0.05，有显著差别。
实施发明的最佳方式以下说明本发明的血管内膜增厚抑制剂中涉及的上式(I)所示的哒嗪酮化合物或者其药理学可允许的盐。
上式(I)中，R1、R2、R3中碳原子数为1～6的烷基可以是直链状也可以是支链状。具体可例举如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基等。
作为较好的R1以及R2，可分别例举为氢原子，作为R3，可例举如氢原子以及碳原子数为1～4的烷基。
作为R3中的碳原子数为1～4的烷基，具体可例举如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基等。作为更好的R3，可例举氢原子。
X、Y中的卤素原子表示氟原子、氯原子、溴原子或者碘原子。作为较好的X，可例举卤素原子，作为较好的Y，可例举如卤素原子以及氢原子。
A中可被羟基取代的碳原子数为1～8的亚烷基可以是直链状也可以是支链状，具体可举例如，亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚丁基、亚戊基、亚己基、亚庚基、亚辛基、2，2-二甲基亚乙基、2，2-二乙基亚乙基、2，2-二-正丙基亚乙基、羟基亚甲基、1-羟基亚乙基、2-羟基亚乙基、3-羟基亚丙基等。
作为较好为的A，可例举可被羟基取代的碳原子数为1～5的亚烷基。
式(I)中，亚甲基与吡啶环的结合位置没有特别的限定，较好为在相对于吡啶环的氮原子的3位。
另外，Y可在苯环上的任意位置取代，较好为在4位。
特好为如下的哒嗪酮化合物，即，在式(I)中，R1以及R2为氢原子、R3为氢原子或者碳原子数为1～4的烷基、X为卤素原子、Y为卤素原子或者氢原子、A为可被羟基取代的碳原子数为1～5的亚烷基。
作为较好的化合物，可例举如4-溴-6-〔3-(4-氯苯基)丙氧基〕-5-(3-吡啶基甲基氨基)-3(2H)-哒嗪酮、4-溴-6-[3-(4-氯苯基)-3-羟基丙氧基]-5-(3-吡啶基甲基氨基)-3(2H)-哒嗪酮以及其药理学可允许的盐。
本发明中，作为哒嗪酮化合物(I)的药理学可允许的盐，可例举如无机酸盐(盐酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、硫酸盐等)、有机酸盐(醋酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、富马酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐等)等。这些盐可由哒嗪酮化合物(I)通过已知的方法获得。
本发明中的哒嗪酮化合物(I)以及其药理学可允许的盐也包括立体以及光学异构体。这些哒嗪酮化合物(I)以及其药理学可允许的盐是已知的化合物，是低毒性的。该化合物可通过例如日本专利特公平7-107055号公报、美国专利5314883号公报、欧州专利482208号公开公报、日本专利特开平7-252237号公报、美国专利5750523号公报、欧州专利742211号公开公报中公开的方法来获得。
本发明的哒嗪酮化合物(I)以及其药理学可允许的盐对于人、犬、牛、马、兔、小鼠、大鼠等哺乳动物，均具有优良的血管内膜增厚抑制效果。
本发明涉及的哒嗪酮化合物(I)或者其药理学可允许的盐的给予量根据患者的年龄、体重、症状程度来适宜选择即可。通常，对于成人为0.001mg～5g/日，较好为0.005～1000mg/日，将其1日1次或分多次给予。
作为本发明涉及的哒嗪酮化合物(I)或者其药理学可允许的盐的给予形式，可例举如注射剂(皮下、静脉、肌肉、腹腔注射)、软膏剂、栓剂、气雾剂、滴眼剂、滴鼻剂等非经口给药，或者片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、散剂、锭片、咀嚼剂、糖浆剂、溶液剂、乳剂、悬浮剂等经口给药，或者通过药剂浸渍血管支架或将药剂缓缓送至局部的其他装置的药物的局部给药方法。
将本发明涉及的哒嗪酮化合物(I)或者其药理学可允许的盐通过制药的常用方法制剂化用于给药。
经口给药的片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、散剂、锭片、咀嚼剂可使用赋形剂(例如蔗糖、乳糖、葡萄糖、淀粉、甘露糖醇等)、粘合剂(例如糖浆、阿拉伯胶、明胶、山梨糖醇、西黄蓍胶(tragacanth)、甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮等)、崩解剂(例如淀粉、羧甲基纤维素或者其钙盐、微晶纤维素、聚乙二醇等)、润滑剂(日文滑沢剤)(例如滑石、硬脂酸镁、硬脂酸钙、二氧化硅等)、润滑剂(日文潤滑剤)(例如月桂酸钠(ラウリル酸ナトリウム)、甘油等)等通过已知方法来调制。
另外，经口给药用的制剂时，通过添加有机酸可改善溶出性、吸收性。作为有机酸，可例举如枸橼酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、苹果酸、酒石酸等。
另外，注射剂、气雾剂、糖浆剂、溶液剂、乳剂、悬浮剂、滴眼剂、滴鼻剂等可使用活性成分的溶剂(例如水、乙醇、异丙醇、丙二醇、1，3-丁二醇、聚乙二醇等)、表面活性剂(例如山梨醇酐脂肪酸酯、聚氧乙烯山梨醇酐脂肪酸酯、聚氧乙烯脂肪酸酯、加氢蓖麻油的聚氧乙烯醚、卵磷脂等)、悬浮剂(例如羧甲基钠盐、甲基纤维素等纤维素衍生物，西黄蓍胶、阿拉伯胶等天然胶类等)、防腐剂(例如对羟基苯甲酸的酯、苯扎氯铵、山梨酸盐等)等通过常用方法来调制。栓剂可使用例如可可豆脂、聚乙二醇、含水羊毛脂、脂肪酸三甘油酯、椰子油等通过已知方法来调制。经皮吸收型制剂的软膏中，可使用例如白色凡士林、液体石蜡、高级醇、聚乙二醇软膏基质、亲水软膏、水性凝胶基质等。
实施例为详细说明本发明，以下例举试验例以及实施例，但本发明不通过这些来限定解释。
在下述的试验例以及实施例中，使用按照通常方法制得的化合物A(4-溴-6-〔3-(4-氯苯基)丙氧基〕-5-(3-吡啶基甲基氨基)-3(2H)-哒嗪酮盐酸盐)。
试验例1化合物A对大鼠大腿动脉内膜增厚的效果1.通过光敏化反应造成内膜增厚的方法通过腹腔给予戊巴比妥(50mg/mL/kg)进行麻醉，在Wister大鼠的左颈静脉中置入插管，剥离左大腿动脉后安装脉冲超声波多普勒血流计的探针。在探针安装部的上部距动脉5mm处照射绿色光(540nm、80万勒克斯)。照射开始10分钟后，确认血流稳定之后，向左颈静脉中给予孟加拉玫瑰红15mg/mL/kg损害血管内皮之后，缝合手术部分。
2.分组与给药分组是按顺序分成溶剂组(9只)、化合物A10mg/kg给予组(10只)、西洛他唑300mg/kg给予组(10只)。药物悬浮于0.5％甲基纤维素溶液中，调制成5mL/kg的给予量，在手术当日确认术后清醒之后立即经口给药。之后1日1次在上午经口给药连续3周。
3.评价方法手术3周之后，在麻醉状态下暴露左大腿动脉，从左心室以75～90mmHg的灌注压灌注生理盐水来除去血液后，通过含有1％多聚甲醛和2％戊二醛的磷酸缓冲生理盐水(PBS)来灌流固定左大腿动脉后再摘取。作为对照摘取没有受到伤害的右大腿动脉。将摘取的大腿动脉切片在10％中性福尔马林缓冲液中保存。以0.5mm的间隔连续切片制作大腿动脉病理标本。染色是进行苏木精曙红(HE)染色。作为内膜增厚的指标，通过计算机图像解析装置来测定大腿动脉横断切片的中膜部以及内膜部的面积，计算出中膜面积/内膜面积比(I/M比)。
4.统计处理所得的结果用平均值±标准差来表示。内膜部面积以及I/M比通过Bartlett法进行考察各组的方差齐性检验，如具有方差齐性则通过单因素法进行方差分析，之后使用Dunnett法，对溶剂组和各药物组的平均值的差进行检验。当不具有方差齐性时，进行Kruskal-Wallis秩和检验，如果有显著差异则再使用Dunnett法来检验溶剂组和各药物组的平均秩和的差。将p＜0.05(双侧)视为有统计意义。
结果结果示于图1。经口给予10mg/kg的化合物A可使内膜部面积以及I/M比显著下降，明确了其显示内膜增厚抑制作用。另外，西洛他唑300mg/kg未见作用。
实施例1(片剂)将化合物A 10g、乳糖20g、淀粉5g、硬脂酸镁0.1g以及羧甲基纤维素钙7g合计42.1g通过通常方法混合之后，制成1片中含有50mg化合物A的糖衣片。
实施例2(片剂)调制含有化合物A10.0mg作为主药、枸橼酸5.0mg作为有机酸、乳糖123.0mg作为赋形剂、羟丙基纤维素4.0mg作为粘合剂、交联羧甲基纤维素钠7.0mg作为崩解剂以及硬脂酸镁1.0mg作为润滑剂的片剂。
实施例3(胶囊剂)将化合物A10g、乳糖20g、微晶纤维素10g以及硬脂酸镁1g的合计41g通过通常方法混合之后，填充到明胶胶囊中，制成1胶囊中含有50mg化合物A的胶囊剂。
实施例4(气雾混悬液)混合下述成分(A)，将所得的混合液装入到设置有阀门的容器中，将下述喷射剂(B)从阀门喷嘴压入直到在20℃约为2.46～2.81mg/cm2表压，制得气雾混悬液。
(A)-化合物A 0.25质量％、十四烷酸异丙酯0.10质量％、乙醇26.40质量％，(B)-1，2-二氯四氟乙烷和1-氯五氟乙烷的60∶40(质量比)的混合物73.25质量％。
产业上利用的可能性提供了含有哒嗪酮化合物或者其药理学可允许的盐作为有效成分的新血管内膜增厚抑制剂。
另外，在这里引用作为本申请要求优先权基础的日本专利愿2004-32551号(2004年2月9日向日本专利厅提出申请)的全部说明书的内容，作为本发明说明书的公开内容。
权利要求
1.血管内膜增厚抑制剂，其特征在于，含有式(I)所示3(2H)-哒嗪酮化合物或者其药理学可允许的盐， 式中，R1、R2以及R3分别独立地表示氢原子或者碳原子数为1～6的烷基；X表示卤素原子、氰基或者氢原子；Y表示卤素原子、三氟甲基或者氢原子；A表示可被羟基取代的碳原子数为1～8的亚烷基。
2.如权利要求1所述的血管内膜增厚抑制剂，其特征在于，式(I)所示的化合物中，R1以及R2为氢原子、R3为氢原子或者碳原子数为1～4的烷基、X为卤素原子、Y为卤素原子或者氢原子、A为可被羟基取代的碳原子数为1～5的亚烷基。
3.如权利要求1所述的血管内膜增厚抑制剂，其特征在于，式(I)所示的化合物为4-溴-6-[3-(4-氯苯基)丙氧基]-5-(3-吡啶基甲基氨基)-3(2H)-哒嗪酮或者4-溴-6-[3-(4-氯苯基)-3-羟基丙氧基]-5-(3-吡啶基甲基氨基)-3(2H)-哒嗪酮。
4.如权利要求1～3中任一项所述的血管内膜增厚抑制剂，其特征在于，药理学可允许的盐为有机酸盐或无机酸盐。
5.如权利要求1～3中任一项所述的血管内膜增厚抑制剂，其特征在于，药理学可允许的盐为盐酸盐。
全文摘要
提供了对于经皮冠状动脉腔内成形术(PTCA)以及支架的血管内置入后再狭窄的预防、进展的治疗有效的增厚血管内膜增厚抑制剂。它是含有式(I)所示3(2H)－哒嗪酮化合物或者其药理学可允许的盐的血管内膜增厚抑制剂，式中，R
文档编号A61P9/00GK1905882SQ20058000173
公开日2007年1月31日 申请日期2005年2月2日 优先权日2004年2月9日
发明者西山浩史, 首藤典正, 水流添畅智 申请人:日产化学工业株式会社, 大正制药株式会社