专利名称：4,6－二取代嘧啶及其作为蛋白激酶抑制剂的用途的制作方法
发明的应用领域本发明涉及新的嘧啶衍生物，作为蛋白激酶尤其是蛋白激酶B(PKB)/Akt的一种或多种同功型(isoform)的抑制剂，其用于制药工业中以生产药物组合物。
已知的技术背景蛋白激酶是许多细胞过程如信号转导、增殖、细胞周期调节、分化和存活/凋亡以及在这些过程中引起疾病的病理生理学改变的关键调节剂。因此，蛋白激酶构成了治疗性干预的重要靶标分类(P.Cohen，Nature Rev DrugDiscovery 1，309，2002；T.G.Cross等，Exp.Cell Res.256，34-41，2000)。它们能按其底物特异性进行分类，即对酪氨酸和/或丝氨酸/苏氨酸残基具有特异性的酶。许多对酪氨酸残基有特异性的蛋白激酶都是与膜相关或跨膜的酶，如表皮生长因子受体(EGFR/HER1)。相反，许多对丝氨酸/苏氨酸具有特异性的蛋白激酶都是与细胞内信号转导过程有关的胞内激酶。对癌症的治疗来说，用于治疗慢性髓性白血病(CML)(能抑制bcr-abl激酶融合蛋白)的Gilvec(Imatinib)以及能抑制EGFR激酶用于治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者的Iressa(Gefitinib)已经在近期被批准。癌症是一种复杂的疾病，它是在对取得了功能性的细胞如提高存活力/对凋亡有抵抗力以及无限增殖潜力的细胞进行选择后出现的疾病。因此，优选的是开发对已建立肿瘤的一些特征有靶标性的用于治疗癌症的药物。优选具有确定病理生理学抑制特性的蛋白激酶。例如，Glivec不仅能潜在抑制bcr-abl激酶，而且还能抑制血小板衍生的生长因子受体(PDGF-R)激酶以及c-kit受体激酶。与肿瘤生物学和癌症疾病有因果关系的其它激酶的实例是各种血管内皮生长因子(VEGF)受体，胰岛素样生长因子受体(IGF1R)和下游信号激酶如磷脂酰肌醇激酶(PI3K)和磷酸肌醇依赖性激酶1(PDK1)，EGFR家族包括HER2、HER3和HER4，有丝分裂激酶家族包括polo-样激酶(PLK)和Aurora激酶同功酶及raf同功酶包括B-raf。
在对丝氨酸-苏氨酸有特异性的信号激酶类别中，具有同功酶Akt1(PKBα)、Akt2(PKBβ)和Akt3(PKBγ)的Akt(蛋白激酶B；PKB)对于治疗性干预是高度令人感兴趣的。已经显示出能介导哺乳动物细胞的重要存活信号的一个途径包含受体酪氨酸激酶如血小板衍生的生长因子受体(PDGF-R；Franke等，Cell.1995 Jun 2；81(5)727-36)或胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R；Kulik等，Mol Cell Biol.1997 Mar；17(3)1595-606)。被配体激活后，这些受体就激活了P13K途径。一方面，P13K的激活能保护细胞免于程序性细胞死亡(“凋亡”)并由此被认为能为细胞转导存活信号。这个信号被脂质磷酸酶PTEN(磷酸酶和张力蛋白同系物)所抵消，通过除去3′磷酸而断裂P13K产物PI(3，4，5)P3。PTEN在许多癌细胞中被删除或在功能上被灭活，形成了组成型存活信号。由P13K产生的磷脂酰肌醇脂质能刺激多个激酶，包括蛋白激酶B/Akt，它是由P13K传输的抗凋亡信号的中央下游媒介物(Datta等，Genes Dev.1999 Nov 15；13(22)2905-27.综述)。Akt酶的氨基端包含通过结合P13K产物PI(3，4，5)P3和PI(3，4，)P2而向细胞膜补充蛋白质由此形成构象变化的PH域。这个构象变化通过激酶PDK1和假定的激酶PDK2使Akt在苏氨酸308和丝氨酸473处被磷酸化(根据人Akt1的残基编号)。凋亡机制中的许多潜在底物都已经被确定了，它们在共有序列RXRXXS/T中被Akt磷酸化。第一个被确定的Akt底物是糖原合成酶激酶3(GSK3；Cross等，Nature.1995 Dec 21-28；378(6559)785-9)，在丝氨酸9处的GSK3磷酸化导致了它的灭活。除了调节糖原合成外，GSK3还与一些胞内信号途径的调节有关，这包括衔接蛋白复合物1(AP1)、cAMP效应元件结合蛋白(CREB)和肿瘤抑制基因产物分裂后期促进复合物(APC)。促凋亡(pro-apoptotic)蛋白Bcl2细胞死亡拮抗剂(Bad)在丝氨酸136处被Akt的磷酸化产生了14-3-3蛋白结合位点并由此防止了Bad结合并抑制抗细胞凋亡蛋白Bcl-xL(Datta等，Cell.1997 Oct17；91(23)231-41)。类似地，forkhead转录因子-Forkhead in横纹肌肉瘤样1因子(FKHRL1)在苏氨酸32和丝氨酸253处被Akt的磷酸化产生了14-3-3蛋白结合基序，这使得FKHRL1的细胞质保留(Brunet等，Cell.1999 Mar 19；96 (6)857-68)；由此下调了促凋亡Fas配体。胱天蛋白酶是作为凋亡引发剂和效应剂的胞内蛋白酶。Akt在丝氨酸196处对胱天蛋白酶-9进行直接磷酸化并抑制了其蛋白酶的活性(Cardone等，Science.1998 Nov 13；282(5392)1318-21)。由Akt引起的核因子kappa B(NFκB)途径的活化已经被Akt与核因子kappa B激酶抑制剂(Ikk)的直接关联所证明。由Akt引起的Ikk体外磷酸化被认为促进了IκB降解以及由此引起NFκB向胞核中易位(Ozes等，Nature.1999 Sep 2；401(6748)82-5)。
Akt的组成型活化(constitutive activation)能经常在人卵巢、乳腺(Stal等，Breast Cancer Res.，2003，5，R37-44)和前列腺癌(Malik等，Clinc.Cancer Res.，2002，8，1168-1171；Thakkar等，J.Biol.Chem.，2001，276，38361-38369)中被发现。这归因于脂质磷酸酶PTEN，PI3激酶途径负调节剂的完全损失(Nesterov等，J.Biol.Chem.，2001，276，10767-10774)。因此，Akt抑制剂有望成为作为凋亡的有效敏感化剂或诱导剂而用于治疗癌症的药物(Beresford等，J.Interferon CytokineRes.，2001，21，313-322)。
由于充当了肿瘤细胞内抗凋亡信号的调节剂，因此蛋白激酶B(PKB)/Akt就成为了癌症治疗的一个靶标。最近已经记载了选择性干扰Akt同功酶的化合物(Bamett等.Biochem.J 2005，385399-408)。这些Akt抑制剂，尤其是Akt1和Akt2的抑制剂，选择性地使肿瘤细胞对凋亡刺激如Trail、喜树碱和多柔比星敏感(DeFeo-Jones等。MolCancer Therap 2005，4271-279)。因此，Akt抑制剂预期会改变凋亡的阈值，使肿瘤细胞对凋亡刺激再度敏感，例如对化疗剂或死亡受体途径的激动剂，例如Trail或激动性DR4/5抗体再度敏感。然而，取决于肿瘤的遗传背景/分子表象，Akt抑制剂同样可能会在单一疗法中诱导凋亡细胞死亡。
现有技术国际申请WO03/037891理论上包含尤其是一般性地公开了的N-酰化间苯二胺衍生物，它据称是糖原合成酶激酶3(GSK3)抑制剂。WO02/094831记载了吡啶甲基氨基嘧啶类，它具有对抗缠绕杆菌属细菌的作用。WO01/47897涉及N-杂环化合物，它据称能通过抑制p38激酶而有效阻断细胞因子的生成，尤其是TNF-alpha(TNF-α)的表达。Hadas Reuveni等，Biochemistry 2002，41，10304-10314记载了筛选蛋白激酶B/Akt(PKB)抑制剂的方法。WO2004/048365公开了基于嘧啶的化合物，其据称能抑制磷脂酰肌醇(PI)3-激酶。
发明的描述现已经发现嘧啶衍生物，以下对其进行详细描述，由于具有不可预期的特定结构特征而不同于现有技术的化合物并具有令人惊奇和显著有利的性质。因此，例如这些嘧啶衍生物能作为蛋白激酶尤其是蛋白激酶B(PKB)/Akt的一种或多种同功型的抑制剂。
因此，本发明在第一方面(方面a)的一个实施方案(实施方案1)中涉及式I化合物以及这些化合物的盐 其中R1是Ar1、Har1、Aa1、Hh1、Ah1或Ha1，其中Ar1是苯基、R11-和/或R12-取代的苯基、萘基、R13-取代的萘基或芴基，其中R11是1-4C-烷氧基、1-4C-烷氧基-2-4C-烷氧基、卤素、苯氧基、1-4C-烷基羰基或苯基-1-4C-烷氧基，R12是1-4C-烷氧基，R13是1-4C-烷氧基，Har1任选被R14取代并且是单环、稠合二或三环5到14元杂芳基，其包含一到三个各自选自氮、氧和硫的杂原子，其中，R14是1-4C-烷基或苯基磺酰基，Aa1任选被R15取代并且是由两个芳基组成的联芳基，所述两个芳基独立地选自苯基和萘基，且所述两个芳基通过单键相连，其中，R15是卤素，Hh1是由两个杂芳基组成的联杂芳基，所述两个杂芳基独立地选自包含一或两个各自选自氮、氧和硫的杂原子的单环5或6元杂芳基，且所述两个杂芳基通过单键相连，Ah1是由选自苯基和萘基的芳基和选自包含一个或两个各自选自氮、氧和硫的杂原子的单环5或6元杂芳基组成的芳基杂芳基，由此，所述的芳基和杂芳基通过单键相连，Ha1是由选自包含一或两个各自选自氮、氧和硫的杂原子的单环5或6元杂芳基以及选自苯基和萘基的芳基组成的杂芳基芳基，由此所述的杂芳基和芳基通过单键相连，R2是氢、卤素或1-4C-烷基，R3是-U-Ar2或-V-Har2，其中U是键、1-4C-亚烷基或被氨基-1-4C-烷基取代的1-4C-亚烷基，Ar2是苯基或R31-和/或R32-和/或R321-取代的苯基，其中R31是1-4C-烷基、1-4C-烷氧基、卤素、硝基、三氟甲基、氰基、脒基或-W-R311，其中W是键或1-4C-亚烷基，R311是-N(R312)R313、卤素或Het1，其中R312是氢、1-4C-烷基、1-4C-烷氧基羰基或1-4C-烷氧基-2-4C-烷基，R313是氢、1-4C-烷基或1-4C-烷氧基-2-4C-烷基，Het1任选被R314取代并且是单环3到7元饱和杂环，其包含一或两个选自氧、氮和硫的杂原子，以及其通过环碳原子或通过环氮原子与结构部分W相连，其中R314是1-4C-烷基或1-4C-烷氧基羰基，R32是1-4C-烷氧基或卤素，或R31和R32彼此邻位键合到苯环上一起形成1-2C-亚烷基二氧基，R321是1-4C-烷氧基，V是键，Har2任选被R33和/或R34取代并且是单环或稠合二环5到10元不饱和或部分饱和的杂芳基，其包含一到三个各自选自氮、氧和硫的杂原子，其中R33是1-4C-烷基、三氟甲基、氰基或-W-R311，R34是1-4C-烷基。
本发明在第一方面(方面a)的另一个实施方案(实施方案2)中还涉及式I化合物以及这些化合物的盐，其中R1是Ar1或Har1，其中Ar1是芴基，Har1任选被R14取代并且是稠合三环13或14元杂芳基，其含有一到三个各自选自氮、氧和硫的杂原子，其中，R14是1-4C-烷基或苯基磺酰基，R2是氢、卤素或1-4C-烷基，R3是-U-Ar2或-V-Har2，其中，U是键、1-4C-亚烷基或被氨基-1-4C-烷基取代的1-4C-亚烷基，Ar2是苯基或被R31-和/或R32-和/或R321-取代的苯基，其中R31是1-4C-烷基、1-4C-烷氧基、卤素、硝基、三氟甲基、氰基、脒基或-W-R311，其中W是键或1-4C-亚烷基，R311是-N(R312)R313、卤素或Het1，其中R312是氢、1-4C-烷基、1-4C-烷氧基羰基或1-4C-烷氧基-2-4C-烷基，R313是氢、1-4C-烷基或1-4C-烷氧基-2-4C-烷基，Het1任选被R314取代并且是单环3到7元饱和杂环，其包含一或两个选自氧、氮和硫的杂原子，其通过环碳原子或通过环氮原子与结构部分W相连，其中R314是1-4C-烷基或1-4C-烷氧基羰基，R32是1-4C-烷氧基或卤素，或R31和R32彼此邻位键合到苯环上一起形成1-2C-亚烷基二氧基，R321是1-4C-烷氧基，V是键，Har2任选被R33和/或R34取代并且是单环或稠合二环5到10元不饱和或部分饱和的杂芳基，其包含一到三个各自选自氮、氧和硫的杂原子，其中R33是1-4C-烷基、三氟甲基、氰基或-W-R311，R34是1-4C-烷基。
1-4C-烷基表示具有1到4个碳原子的直链或支链烷基。其实例可以是丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、丙基、异丙基和优选乙基和甲基。
2-4C-烷基表示具有2到4个碳原子的直链或支链烷基。其实例可以是丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、丙基、异丙基和优选乙基和丙基。
1-4C-亚烷基是具有1到4个碳原子的直链或支链亚烷基。能被提及的直链亚烷基实例是亚甲基(-CH2-)、亚乙基(-CH2-CH2-)、三亚甲基(-CH2-CH2-CH2-)和四亚甲基(-CH2-CH2-CH2-CH2-)。能被提及的支链亚烷基实例是1，1-二甲基-亚甲基。
1-4C-烷氧基表示，除了氧原子外，还包含具有1到4个碳原子的直链或支链烷基的基团。能被提及的实例是丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、丙氧基、异丙氧基和优选乙氧基和甲氧基。
2-4C-烷氧基表示，除了氧原子外，还包含具有2到4个碳原子的直链或支链烷基的基团。能被提及的实例是丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、丙氧基、异丙氧基和优选乙氧基。
1-4C-烷氧基-2-4C-烷氧基表示一个上述的2-4C-烷氧基，其被一个上述的1-4C-烷氧基取代。能被提及的实例是2-甲氧基乙氧基，2-乙氧基乙氧基和2-异丙氧基乙氧基。
苯基-1-4C-烷氧基表示一个上述的1-4C-烷氧基，其被苯基取代。能被提及的实例是苯氧基和苄氧基。
1-4C-烷氧基-2-4C-烷基表示一个上述的2-4C-烷基，其被一个上述的1-4C-烷氧基取代。能被提及的实例是2-甲氧基乙基、2-乙氧基乙基和2-异丙氧基乙基。
1-2C-亚烷基二氧基表示，例如，亚甲二氧基[-O-CH2-O-]和亚乙二氧基[-O-CH2-CH2-O-]。
氨基-1-4C-烷基表示一个上述的1-4C-烷基，其被氨基取代。能被提及的实例是氨基甲基、2-氨基乙基和3-氨基丙基。
“被氨基-1-4C-烷基取代的1-4C-亚烷基”可以包括，例如，一个上述的1-4C-亚烷基，尤其是一个上述的直链亚烷基，例如，氨基-1-4C-烷基-亚甲基，如氨基甲基-亚甲基。
本发明意义的卤素是溴、氯或氟。
1-4C-烷基羰基表示，除了羰基外，还包含一个上述1-4C-烷基的基团。能被提及的一个实例是乙酰基。
1-4C-烷氧基羰基表示，除了羰基外，还包含一个上述1-4C-烷氧基的基团。能被提及的实例是甲氧基氧基、乙氧基羰基和叔丁氧基羰基。
在本发明的意义内，我们能明白，当本发明化合物的两个结构部分通过一个具有“键”的含义的组件连接时，那么所述的两个部分将通过单键直接与另一个相连。
Har1任选被R14取代并且是单环、稠合二或三环5到14元杂芳基，其包含一到三个各自选自氮、氧和硫的杂原子。更详细的是，Har1通过环碳原子连到嘧啶部分上。
根据本发明Har1的第一个具体实施方案的子细节包括单环基团，例如，但不限于此，呋喃基、噻吩基、吡咯基、唑基、异唑基、噻唑基、异噻唑基、咪唑基、吡唑基、三唑基、噻二唑基、二唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基或哒嗪基。
根据本发明Har1的第二个具体实施方案的子细节包括二环基团，例如，但不限于此，前述单环基团的苯并稠合类似物，例如，喹唑啉基、喹喔啉基、噌啉基、喹啉基、异喹啉基、吲哚基、异吲哚基、吲唑基、2，3-二氮杂萘基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、异苯并呋喃基、苯并唑基、苯并噻唑基或苯并咪唑基、或1，5-二氮杂萘基、中氮茚基或嘌呤基。
根据本发明Har1的第三个具体实施方案的子细节包括三环基团，例如，但不限于此，咔唑基、菲啶基、吖啶基、咔啉基、吩嗪基、二苯并呋喃基、二苯并噻吩基、吩噻嗪基、吩嗪基、phenoxathiinyl或thianthrenyl。
根据本发明，能被提及的Har1的另一个实例是，但不限于此，上述示例性Har1基团的R14-取代衍生物，特别是这样的Har1基团，其在环氮原子上被R14取代，并且其选自吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、噻二唑基、二唑基、吲哚基、异吲哚基、吲唑基、苯并唑基、苯并咪唑基、咔唑基、咔啉基、嘌呤基、吩噻嗪基或吩嗪基。
作为示例性Har1基团，可以更明确提及，例如二苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、吡啶基、苯并噻吩基、噻蒽基、二苯并噻吩基、N-苯基磺酰基吲哚基或N-甲基吲哚基。
作为示例性Har1基团，可以更明确提及，例如二苯并呋喃-4-基，吲哚-2-基、吲哚-5-基、吲哚-6-基、苯并噻吩-2-基、苯并噻吩-3-基、噻蒽-1-基、二苯并噻吩-4-基、N-苯基磺酰基吲哚-2-基或喹啉-3-基。
作为示例性的适宜Har1基团，可以明确提及，例如，噻蒽-1-基、二苯并噻吩-4-基，或者，特别是，二苯并呋喃-4-基。
Aa1任选被R15取代并且是由两个芳基组成的联芳基，其中所述两个芳基独立地选自苯基和萘基，且所述两个芳基通过单键相连。
Aa1可以包括，但不限于此，联苯基(例如1，1′-联苯-4-基)及其R15-取代衍生物(例如4′-氟-1，1′-联苯-4-基)。
Hh1是由两个杂芳基组成的联杂芳基，其中所述两个杂芳基独立地选自单环5或6元杂芳基，其包含一或两个选自氮、氧和硫的杂原子，且所述两个杂芳基通过单键相连。
Hh1可以包括，但不限于此，联噻吩基。
Ah1是由选自苯基和萘基的芳基以及选自单环5或6元的杂芳基组成的芳基杂芳基，其中杂芳基包含一个或两个选自氮、氧和硫的杂原子，由此，所述的芳基和杂芳基通过单键相连，由此，Ah1通过所述的杂芳基部分连接到嘧啶骨架上。
Ah1可以包括，但不限于此，苯基噻吩基。
Ha1是由杂芳基以及选自苯基和萘基的芳基组成的杂芳基芳基，其中杂芳基选自单环5或6元杂芳基，其含有一个或两个选自氮、氧和硫的杂原子，由此，所述的杂芳基和芳基通过单键相连，由此，Ha1通过所述的芳基部分连接到嘧啶骨架上。
Ha1可以包括，但不限于此，噻吩基苯基。
应理解，Har1、Hh1和Ah1中的每一个都通过环碳原子连接到嘧啶骨架上。
Het1任选被R314取代并且是单环3到7元饱和杂环，其包含一或两个选自氧、氮和硫的杂原子，其通过环碳原子或通过环氮原子连接到结构部分W上。
更详细的是，Het1任选在环氮原子上被R314取代。
Het1可以包括，但不限于此，氮丙啶-1-基、氮杂环丁烷-1-基、吡咯烷-1-基、哌啶-1-基、高哌啶-1-基、吡唑烷-1-基、咪唑啉-1-基、哌嗪-1-基、高哌嗪-1-基、吗啉-4-基、硫代吗啉-4-基、哌啶-3-基或哌啶-4-基。
根据本发明能被提及的Het1的另一个实例是，但不限于此，前述示例性Het1基团的R314-取代衍生物，特别是这样的Het1基团，其在环氮原子上被R314取代，其选自吡唑烷-1-基、咪唑啉-1-基、哌嗪-1-基、高哌嗪-1-基、哌啶-3-基和哌啶-4-基。
作为示例性Het1基团，可以更明确提及，例如，吗啉-4-基、吡咯烷-1-基、4-N-甲基-哌嗪-1-基或哌啶-3-基。
作为示例性的适宜Het1基团，可以明确提及，例如，吡咯烷-1-基或哌啶-3-基。
Har2任选被R33和/或R34取代并且是单环或稠合二环5到10元不饱和或部分饱和的杂芳基，其包含一到三个选自氮、氧和硫的杂原子。更详细的是，Har2通过环碳原子加到结构部分V上。优选的是，Har2任选在环碳原子上被R33和/或R34取代。
根据本发明Har2的一个实施方案包括不饱和的基团，例如，但不限于此，呋喃基、噻吩基、吡咯基、唑基、异唑基、噻唑基、异噻唑基、咪唑基、吡唑基、三唑基、噻二唑基、二唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基，其苯并稠合的类似物，例如，喹唑啉基、喹喔啉基、噌啉基、喹啉基、异喹啉基、吲哚基、异吲哚基、吲唑基、2，3-二氮杂萘基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、异苯并呋喃基、苯并唑基、苯并噻唑基或苯并咪唑基、或1，5-二氮杂萘基、中氮茚基或嘌呤基。
在另一个实施方案中Har2也可以包括以上列举环系统的部分氢化衍生物，尤其是前述苯并稠合基团的部分氢化衍生物，例如，但不限于此，二氢吲哚基、异二氢吲哚基、1，2，3，4-四氢喹啉基或1，2，3，4-四氢异喹啉基。
根据本发明可以被提及的Har2的另一个实例是，但不限于此，前述示例性Har2基团的R33-和/或R34-取代衍生物。
作为示例性Har2，可以更明确提及，例如，呋喃基、二甲基呋喃基、二甲基异唑基、甲基异唑基、吡啶基、三氟甲基吡啶基、氨基吡啶基、氯吡啶基、氟吡啶基、(氨基甲基)吡啶基、1，2，3，4-四氢异喹啉基、氨基甲基呋喃基、(吗啉基)吡啶基或氰基吡啶基。
作为示例性Har2基团，可以进一步更明确提及，例如，呋喃-2-基、2，5二甲基呋喃-3-基、3，5-二甲基异唑-4-基、5-甲基异唑-3-基、6-三氟甲基吡啶-3-基、吡啶-4-基、6-(氨基甲基)-吡啶-2-基、6-(氨基甲基)-吡啶-3-基、5-(氨基甲基)-吡啶-3-基、2-(氨基甲基)-吡啶-4-基、4-(氨基甲基)-吡啶-2-基、5-(氨基甲基)-吡啶-2-基、1，2，3，4-四氢异喹啉基、6-(吗啉-4-基)-吡啶-3-基、5-氰基-吡啶-3-基或6-氰基-吡啶-3-基。
示例性Har2基团可以是明确提及的基团，例如，(氨基甲基)吡啶基，如，6-(氨基甲基)-吡啶-2-基、6-(氨基甲基)-吡啶-3-基、5-(氨基甲基)-吡啶-3-基、2-(氨基甲基)-吡啶-4-基、4-(氨基甲基)-吡啶-2-基、5-(氨基甲基)-吡啶-2-基或1，2，3，4-四氢异喹啉-7-基或1，2，3，4-四氢异喹啉-6-基。
除非另有指明，在此提及的环基团指的是所有可能且稳定的位置异构体。因此，例如，吡啶基包括吡啶-2-基、吡啶-3-基和吡啶-4-基。
式I化合物的适宜盐-依赖于取代-是所有的酸加成盐或所有与碱成的盐。特别提及的可以是药学中通常使用的药理学上可耐受的无机或有机酸和碱。这些适宜的物质一方面是与酸形成的水不溶性和尤其是水溶性的酸加成盐，酸例如有盐酸、氢溴酸、磷酸、硝酸、硫酸、醋酸、柠檬酸、D-葡糖酸、苯甲酸、2-(4-羟基苯甲酰)苯甲酸、丁酸、磺基水杨酸、马来酸、月桂酸、苹果酸、富马酸、琥珀酸、草酸、酒石酸、双羟萘酸、硬脂酸、甲苯磺酸、甲烷磺酸或3-羟基-2-萘甲酸，酸被用于盐制备中-依赖于是否涉及单或多元酸以及依赖于所需要的盐-以等摩尔的定量比例或与之不同的一个比例使用。
另一方面，与碱成的盐-依赖于取代-也是适宜的。与碱成的盐的实例是锂、钠、钾、钙、铝、镁、钛、铵、葡甲胺或胍盐，在此，碱也以等摩尔定量比例或与之不同的一个比例用于盐制备中。
药理学上不耐受的盐，其也能被获得，例如根据本发明在工业规模中制备化合物期间形成作为加工产品获得，能通过本领域技术人员已知的方法转化为药理学上可耐受的盐。
根据专家的知识，本发明的式I化合物及其盐可以包含，例如当以晶体形式被分离时，各种量的溶剂。因此，包括在本发明范围内的有式I化合物及其盐的所有的溶剂化物尤其是所有水合物，特别是式I化合物盐的所有溶剂化物尤其是水合物。
在此记载作为替代物的组件，可以在任何可能的位置进行取代，除非另有指明。
通常，除非另有指明，在此提及的碳环基团，其单独存在或作为其它基团的一部分，可以在任何可取代的环碳原子上被其给出的取代基或母体分子基团取代。
除非另有指明，在此提及的杂环基团，其单独存在或作为其它基团的一部分，可以在任何可能的位置，例如任何可取代的环碳或环氮原子上，被其给出的取代基或母体分子基团取代。
包含可季铵化亚胺基型环氮原子(-N＝)的环可以优选在这些亚胺基型环氮原子上不被所提及的取代基或母体分子基团取代。
式I化合物的取代基R2和-N(H)C(O)R3能连接到相对于其中苯环与嘧啶-氨基部分键合的键合位置的邻、间或对位上，其中，优选的是在间位或特别是在对位上连接-N(H)C(O)R3。
式I化合物的取代基R11和R12能连接到相对于其中苯环键合到嘧啶部分上的键合位置的邻、间或对位上，其中，优选的是在间位或对位上连接。
式I化合物的取代基R31、R32和R321能加入到相对于其中苯环键合到结构部分U上的键合位置的邻、间或对位上，其中，重要的是在间位或对位上连接。
可以被提及的示例性Ar1基团是，但不限于此，3-苄氧基-苯基、4-苄氧基-苯基、苯基、3-甲氧基-苯基、4-甲氧基-苯基、3，4-二甲氧基-苯基、3，5-二甲氧基-苯基、3-氟-苯基、4-氟-苯基、3-乙酰基-苯基、4-乙酰基-苯基、3-苯氧基-苯基或4-苯氧基-苯基或6-甲氧基-萘-2-基。
说明性的示例性Ar1基团可以包括，但不限于此，3-苄氧基-苯基、4-苄氧基-苯基、苯基、3-甲氧基-苯基、4-甲氧基-苯基、3，4-二甲氧基-苯基、3-氟-苯基、3-乙酰基-苯基、4-乙酰基-苯基或4-苯氧基-苯基或6-甲氧基-萘-2-基。
可以被提及的示例性Ar2基团有，但不限于此，4-二甲基氨基-苯基、3-二甲基氨基-苯基、2-二甲基氨基-苯基、4-(吗啉-4-基)-苯基、3-(吗啉-4-基)-苯基、4-(吡咯烷-1-基)-苯基、3-(吡咯烷-1-基)-苯基、4-(4-甲基哌嗪-1-基-甲基)-苯基、3-(4-甲基哌嗪-1-基-甲基)-苯基、苯基、4-叔-丁基-苯基、3，4-二氯苯基、2，6-二氟-苯基、
4-氨基甲基-苯基、3-氨基甲基-苯基、2-氨基甲基-苯基、4-(2-氨乙基)-苯基、3-(2-氨乙基)-苯基、4-二甲基氨基甲基-苯基、3-二甲基氨基甲基-苯基、4-甲基氨基甲基-苯基、3-甲基氨基甲基-苯基、2-氨基-苯基、3-氨基-苯基、4-氨基-苯基、4-(哌啶-3-基)-苯基、3-(哌啶-3-基)-苯基、4-(吗啉-4-基甲基)-苯基、3-(吗啉-4-基甲基)-苯基、4-{[二-(2-甲氧基乙基)]氨基}-苯基、3-{[二-(2-甲氧基乙基)]氨基}-苯基、4-[(2-甲氧基乙基)氨基]-苯基、3-[(2-甲氧基乙基)氨基]-苯基、4-(2-氯乙基)-苯基、3-(2-氯乙基)-苯基、4-溴甲基-苯基、3-溴甲基-苯基、3-氰基-苯基、4-氰基-苯基、3-脒基-苯基、4-脒基-苯基、4-氨基甲基-2-氟-苯基、4-(1-氨基-1-甲基-乙基)-苯基、3-(1-氨基-1-甲基-乙基)-苯基、3，4-亚甲二氧基-苯基、3，4-亚乙二氧基-苯基、4-氟苯基、3-氟苯基、2-氟苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2-甲氧基苯基、3，4，5-三甲氧基-苯基、3，5-二甲氧基-苯基、3，4-二甲氧基-苯基、4-氟-3-三氟甲基-苯基、4-氯-2-氟-苯基或3-氯-4-氟-苯基。
说明性的示例性Ar2基团可以包括，但不限于此，4-二甲基氨基-苯基、3-二甲基氨基-苯基、2-二甲基氨基-苯基、4-(吗啉-4-基)-苯基、3-(吡咯烷-1-基)-苯基、4-(4-甲基哌嗪-1-基-甲基)-苯基、苯基、4-叔-丁基-苯基、3，4-二氯苯基、4-氨基甲基-苯基、3-氨基甲基-苯基、3-(2-氨乙基)-苯基、4-(2-氨乙基)-苯基、3-二甲基氨基甲基-苯基、4-二甲基氨基甲基-苯基、4-甲基氨基甲基-苯基、2-氨基-苯基、3-氨基-苯基、4-氨基-苯基、4-(哌啶-3-基)-苯基、4-(吗啉-4-基甲基)-苯基、3-{[二-(2-甲氧基乙基)]氨基}-苯基、4-[(2-甲氧基乙基)氨基]-苯基、4-(2-氯乙基)-苯基、4-溴甲基-苯基、3-氰基-苯基、4-氰基-苯基、3-脒基-苯基、4-脒基-苯基、4-氨基甲基-2-氟-苯基、4-(1-氨基-1-甲基-乙基)-苯基、3，4-亚甲二氧基-苯基、4-氟苯基、3-氟苯基、2-氟苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、3，4，5-三甲氧基-苯基、3，5-二甲氧基-苯基、3，4-二甲氧基-苯基、4-氟-3-三氟甲基-苯基、2，6-二氟-苯基、4-氯-2-氟-苯基或3-氯-4-氟-苯基。
更值得被提及的根据本发明方面a实施方案1的化合物包括那些式I化合物以及这些化合物的盐，其中，R1是Ar1、Har1或Aa1，其中Ar1是苯基、R11-和/或R12-取代的苯基、萘基、或R13-取代的萘基，其中R11是1-4C-烷氧基、卤素、苯氧基、1-4C-烷基羰基或苯基-1-4C-烷氧基，R12是1-4C-烷氧基，R13是1-4C-烷氧基，Har1任选被R14取代并且是单环、稠合二或三环5到14元杂芳基，其包含一到三个选自氮、氧和硫的杂原子，其中，R14是苯基磺酰基，Aa1任选被R15取代并且是由两个芳基组成的联芳基，所述两个芳基独立地选自苯基和萘基，且所述两个芳基通过单键相连，其中，R15是卤素，Hh1是由两个杂芳基组成的联杂芳基，所述两个杂芳基独立地选自包含一或两个各自选自氮、氧和硫的杂原子的单环5或6元杂芳基，且所述两个杂芳基通过单键相连，Ah1是由选自苯基和萘基的芳基以及选自单环5或6元的杂芳基组成的芳基杂芳基，其中杂芳基包含一个或两个选自氮、氧和硫的杂原子，由此所述的芳基和杂芳基通过单键相连，Ha1是由选自包含一或两个各自选自氮、氧和硫的杂原子的单环5或6元杂芳基以及选自苯基和萘基的芳基组成的杂芳基芳基，由此所述的杂芳基和芳基通过单键相连，R2是氢或1-4C-烷基，R3是-U-Ar2或-V-Har2，其中U是键、直链1-4C-亚烷基或被氨基-1-4C-烷基取代的直链1-4C-亚烷基，Ar2是苯基，或被R31-和/或R32-和/或R321-取代的苯基，其中R31是1-4C-烷基、1-4C-烷氧基、卤素、硝基、三氟甲基、氰基、脒基、-W-R311或Het1，其中W是键或1-4C-亚烷基，R311是-N(R312)R313或卤素，其中R312是氢、1-4C-烷基、1-4C-烷氧基羰基或1-4C-烷氧基-2-4C-烷基，R313是氢、1-4C-烷基或1-4C-烷氧基-2-4C-烷基，Het1任选被R314取代并且是单环3到7元饱和杂环，其包含一或两个选自氧、氮和硫的杂原子，其通过环碳原子或通过环氮原子与结构部分W相连，其中R314是1-4C-烷基或1-4C-烷氧基羰基，R32是1-4C-烷氧基或卤素，或R31和R32彼此邻位键合到苯环上一起形成1-2C-亚烷基二氧基，R321是1-4C-烷氧基，V是键，Har2任选被R33和/或R34取代并且是单环或稠合二环5到10元不饱和或部分饱和的杂芳基，其包含一到三个选自氮、氧和硫的杂原子，其中R33是1-4C-烷基、三氟甲基、氰基或-W-R311，R34是1-4C-烷基。
尤其值得被提及的根据本发明方面a实施方案1的化合物包括那些式I化合物，或者尤其是以下定义的式Ia化合物，以及这些化合物的盐，其中，R1是二苯并呋喃-4-基、二苯并噻吩-4-基、4-苄氧基-苯基、4-苯氧基-苯基或噻蒽-1-基，R2是氢或甲基，R3是-U-Ar2、-V-Har2或2-氨基-苯基，其中U是键，Ar2是3-(R31)-苯基、4-(R31)-苯基或3-(R31)-或4-(R31)-氟苯基，其中R31是1-4C-烷氧基、1-4C-烷基，氰基、氯、脒基、-W-R311、吡咯烷-1-基或哌啶-3-基，其中W是键，以及
R311是-N(R312)R313，其中R312是氢、1-4C-烷基、1-4C-烷氧基-乙基或叔丁氧基羰基，R313是氢或1-4C-烷基，或W是亚甲基、亚乙基或1，1-二甲基-亚甲基，R311是-N(R312)R313或溴，其中R312是氢、1-4C-烷基或叔丁氧基羰基，R313是氢或1-4C-烷基，或者U是亚甲基或亚乙基，以及Ar2是苯基、或3-(R31)-或4-(R31)-苯基，其中R31是氟、1-4C-烷氧基或氨基甲基，或者U是键或氨基甲基-亚甲基，以及Ar2是3，4-二氯苯基，V是键，Har2是1，2，3，4-四氢异喹啉基、异二氢吲哚基或R33-取代的吡啶基，其中R33是氨基甲基或三氟甲基。
更尤其值得被提及的根据本发明方面a实施方案1的化合物包括那些以下定义的式Ia化合物，以及这些化合物的盐，其中R1是二苯并噻吩-4-基、4-苄氧基-苯基、噻蒽-1-基或者尤其是二苯并呋喃-4-基，R2是氢或甲基，R3是-U-Ar2、-V-Har2或2-氨基-苯基，其中U是键，以及Ar2是3-(R31)-苯基、4-(R31)-苯基或3-(R31)-或4-(R31)-氟苯基，其中R31是脒基、-W-R311、吡咯烷-1-基或哌啶-3-基，其中W是键，R311是-N(R312)R313，其中R312是氢、甲基或2-甲氧基乙基，
R313是甲基，或W是亚甲基、亚乙基或1，1-二甲基-亚甲基，R311是-N(R312)R313，其中R312是氢或甲基，R313是氢，或者U是亚甲基，以及Ar2是4-(氨基甲基)-苯基，或者U是氨基甲基-亚甲基，以及Ar2是3，4-二氯苯基V是键，Har2是1，2，3，4-四氢异喹啉基、异二氢吲哚基或R33-取代的吡啶基，其中R33是氨基甲基。
根据本发明方面a实施方案1被强调的化合物是以下定义的式Ia化合物，以及这些化合物的盐，其中R1是二苯并呋喃-4-基，R2是氢，R3是-U-Ar2或-V-Har2，其中U是键，Ar2是3-(R31)-苯基、4-(R31)-苯基或2-氟-4-(R31)-苯基，其中R31是脒基或-W-R311，其中W是亚甲基、亚乙基或1，1-二甲基-亚甲基，R311是-N(R312)R313，其中R312是氢或甲基，R313是氢，V是键，Har2是1，2，3，4-四氢异喹啉-7-基、1，2，3，4-四氢异喹啉-6-基或R33-取代的吡啶基，其中R33是氨基甲基。
在第一个实施方案中，根据本发明方面a实施方案1更加被强调的化合物是以下定义的式Ia化合物以及这些化合物的盐，其中R1是二苯并呋喃-4-基，R2是氢，R3是-U-Ar2，其中U是键，Ar2是3-(R31)-苯基或4-(R31)-苯基，其中R31是脒基或-W-R311，其中W是亚甲基，R311是-N(R312)R313，其中R312是氢，R313是氢。
在第二个实施方案中，根据本发明方面a实施方案1更加被强调的化合物是以下定义的式Ia化合物以及这些化合物的盐，其中R1是二苯并呋喃-4-基，R2是氢，R3是-V-Har2，其中V是键，Har2是1，2，3，4-四氢异喹啉-7-基、1，2，3，4-四氢异喹啉-6-基或R33-取代的吡啶基，其中R33是氨基甲基；由此，更明确的是R1是二苯并呋喃-4-基，R2是氢，R3是-V-Har2，其中V是键，Har2是1，2，3，4-四氢异喹啉-7-基、1，2，3，4-四氢异喹啉-6-基、6-(R33)-吡啶-3-基、6-(R33)-吡啶-2-基、2-(R33)-吡啶-4-基、4-(R33)-吡啶-2-基或5-(R33)-吡啶-2-基，其中R33是氨基甲基。
更值得被提及的根据本发明方面a实施方案2的化合物包括那些式I化合物以及这些化合物的盐，其中
R1是Har1，其中Har1是咔唑基、菲啶基、吖啶基、咔啉基、吩嗪基、二苯并呋喃基、二苯并噻吩基、吩噻嗪基、吩嗪基、phenoxathiinyl，噻蒽基、N-甲基-咔唑基或N-甲基咔啉基，R2是氢或1-4C-烷基，R3是-U-Ar2或-V-Har2，其中U是键、直链1-4C-亚烷基或被氨基-1-4C-烷基取代的直链1-4C-亚烷基，Ar2是苯基或R31-和/或R32-和/或R321-取代的苯基，其中R31是1-4C-烷基、1-4C-烷氧基、卤素、硝基、三氟甲基、氰基、脒基、-W-R311或Het1，其中W是键或1-4C-亚烷基，R311是-N(R312)R313或卤素，其中R312是氢、1-4C-烷基，1-4C-烷氧基羰基或1-4C-烷氧基-2-4C-烷基，R313是氢、1-4C-烷基或1-4C-烷氧基-2-4C-烷基，Het1任选被R314取代并且是单环3到7元饱和杂环，其包含一或两个选自氧、氮和硫的杂原子，其通过环碳原子或通过环氮原子与结构部分W相连，其中R314是1-4C-烷基或1-4C-烷氧基羰基，R32是1-4C-烷氧基或卤素，或R31和R32彼此邻位键合到苯环上一起形成1-2C-亚烷基二氧基，R321是1-4C-烷氧基，V是键，Har2任选被R33和/或R34取代并且是单环或稠合二环5到10元不饱和或部分饱和的杂芳基，其包含一到三个各自选自氮、氧和硫的杂原子，其中R33是1-4C-烷基、三氟甲基、氰基或-W-R311，R34是1-4C-烷基。
尤其值得被提及的根据本发明方面a实施方案2的化合物包括那些式I化合物，尤其是以下定义的式Ia化合物，以及这些化合物的盐，其中
R1是Har1，其中Har1是咔唑基、菲啶基、吖啶基、咔啉基、吩嗪基、二苯并呋喃基、二苯并噻吩基、吩噻嗪基、吩嗪基、phenoxathiinyl、噻蒽基、N-甲基-咔唑基或N-甲基咔啉基，R2是氢或甲基，R3是-U-Ar2、-V-Har2或2-氨基-苯基，其中U是键，以及Ar2是3-(R31)-苯基、4-(R31)-苯基或3-(R31)-或4-(R31)-氟苯基，其中R31是脒基、-W-R311或哌啶-3-基，其中W是键，R311是-N(R312)R313，其中R312是氢、甲基或2-甲氧基乙基，R313是甲基，或W是亚甲基、亚乙基或1，1-二甲基-亚甲基，R311是-N(R312)R313，其中R312是氢或甲基，R313是氢，或者U是亚甲基，以及Ar2是4-(氨基甲基)-苯基，或者U是氨基甲基-亚甲基，以及Ar2是3，4-二氯苯基V是键，Har2是1，2，3，4-四氢异喹啉基、异二氢吲哚基或R33-取代的吡啶基，其中R33是氨基甲基。
更尤其值得被提及的根据本发明方面a实施方案2的化合物包括那些式I化合物，或者尤其是以下定义的式Ia化合物，以及这些化合物的盐，其中
R1是Har1，其中Har1是咔唑基、菲啶基、吖啶基、咔啉基、吩嗪基、二苯并呋喃基、二苯并噻吩基、吩噻嗪基、吩嗪基、phenoxathiinyl、噻蒽基、N-甲基-咔唑基或N-甲基咔啉基，R2是氢，R3是-U-Ar2或-V-Har2，其中U是键，Ar2是3-(R31)-苯基、4-(R31)-苯基或2-氟-4-(R31)-苯基，其中R31是脒基或-W-R311，其中W是亚甲基、亚乙基或1，1-二甲基-亚甲基，R311是-N(R312)R313，其中R312是氢或甲基，R313是氢，V是键，Har2是1，2，3，4-四氢异喹啉-7-基、1，2，3，4-四氢异喹啉-6-基或R33-取代的吡啶基，其中R33是氨基甲基。
在方面a的上下文中，本发明另一个方面(方面a1)还涉及根据方面a的化合物，以及这些化合物的盐，用于治疗或预防疾病，例如由在确定途径或信号网内的单一蛋白激酶例如PKB/Akt或多个蛋白激酶功能失调所介导的疾病。
在方面a的上下文中，本发明还有一个方面(方面a2)还涉及根据方面a的化合物，以及这些化合物的盐，用于制备预防或治疗疾病的药物组合物的用途，其中疾病是由在确定途径或信号网内的单一蛋白激酶例如PKB/Akt或多个蛋白激酶功能失调所介导的。
在方面a的上下文中，本发明仍然还有一个方面(方面a3)还涉及根据方面a的化合物，以及这些化合物的盐，用于制备预防或治疗疾病的药物组合物的用途，其中疾病是由在确定途径或信号网内的单一蛋白激酶例如PKB/Akt或多个蛋白激酶功能失调所介导的，由此排除由糖原合成酶激酶3介导的疾病。
关于这一点，所述的疾病尤其是具有良性或恶性行为的高度增殖性疾病，例如，细胞的瘤形成，如癌症，和/或对凋亡诱导有响应的疾病。
本发明第二个方面(方面b)还涉及根据式I方面a的化合物，以及这些化合物的盐，条件是以下物质被排除4-氨基-N-[4-(6-吡啶-3-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-苯并呋喃-2-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-噻吩-3-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-二苯并呋喃-1-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-苯并[b]噻吩-2-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-喹啉-8-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-萘-2-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-联苯-3-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-联苯-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-苯基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-萘-1-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-[6-(2-苯氧基-苯基)-嘧啶-4-基氨基]-苯基}-苯甲酰胺，4-氨基-N-{4-[6-(2-苄氧基-苯基)-嘧啶-4基氨基]-苯基}-苯甲酰胺，4-氨基-N-{4-[6-(4-苄氧基-苯基)-嘧啶-4-基氨基]-苯基}-苯甲酰胺，4-氨基-N-{4-[6-(3，4-二甲氧基-苯基)-嘧啶-4-基氨基]-苯基}-苯甲酰胺，和4-氨基-N-{4-[6-(2-甲氧基-苯基)-嘧啶-4基氨基]-苯基}-苯甲酰胺。
在方面b的上下文中，本发明另一个方面(方面b1)还涉及根据方面b的化合物，以及这些化合物的盐，用于治疗或预防疾病，例如由在确定途径或信号网内的单一蛋白激酶例如PKB/Akt或多个蛋白激酶功能失调所介导的疾病。
在方面b的上下文中，本发明还有一个方面(方面b2)还涉及根据方面b的化合物，以及这些化合物的盐，用于制备预防或治疗疾病的药物组合物的用途，其中疾病是由在确定途径或信号网内的单一蛋白激酶例如PKB/Akt或多个蛋白激酶功能失调所介导的，由此排除由糖原合成酶激酶3介导的疾病。
关于这一点，所述的疾病尤其是具有良性或恶性行为的高度增殖性疾病，例如，细胞的瘤形成，如癌症，和/或在哺乳动物中对凋亡诱导有响应的疾病。
本发明第三个方面(方面c)还涉及式I化合物，其中这些化合物是4-氨基-N-[4-(6-吡啶-3-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-苯并呋喃-2-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-噻吩-3-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-二苯并呋喃-1-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-苯并[b]噻吩-2-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-喹啉-8-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-萘-2-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-联苯-3-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-联苯-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-苯基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-萘-1-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-{4-[6-(2-苯氧基-苯基)-嘧啶-4-基氨基]-苯基}-苯甲酰胺，4-氨基-N-{4-[6-(2-苄氧基-苯基)-嘧啶-4-基氨基]-苯基}-苯甲酰胺，4-氨基-N-(4-[6-(4-苄氧基-苯基)-嘧啶-4-基氨基]-苯基}-苯甲酰胺，4-氨基-N-{4-[6-(3，4-二甲氧基-苯基)-嘧啶-4-基氨基]-苯基}-苯甲酰胺，和4-氨基-N-(4-[6-(2-甲氧基-苯基)-嘧啶-4-基氨基]-苯基}-苯甲酰胺。
在方面c的上下文中，本发明另一个方面(方面c1)还涉及根据方面c的化合物，以及这些化合物的盐，用于治疗或预防疾病，例如由在确定途径或信号网内的单一蛋白激酶例如PKB/Akt或多个蛋白激酶功能失调所介导的疾病。
在方面c的上下文中，本发明还有一个方面(方面c2)还涉及根据方面c的化合物，以及这些化合物的盐，用于制备预防或治疗疾病的药物组合物的用途，其中疾病是由在确定途径或信号网内的单一蛋白激酶例如PKB/Akt或多个蛋白激酶功能失调所介导的。
关于这一点，所述的疾病尤其是具有良性或恶性行为的高度增殖性疾病，例如，细胞的瘤形成，如癌症，和/或在哺乳动物中对凋亡诱导有响应的疾病。
本发明第四个方面(方面d)还涉及根据方面a的式I化合物以及这些化合物的盐，条件是当取代基-N(H)C(O)R3连接到相对于其中苯环键合到嘧啶-氨基部分上的键合位置的间位上时，R1不是Har1、Ah1或Hh1。
在方面d的上下文中，本发明另一个方面(方面d1)还涉及根据方面d的化合物，以及这些化合物的盐，用于治疗或预防疾病，例如由在确定途径或信号网内的单一蛋白激酶例如PKB/Akt或多个蛋白激酶功能失调所介导的疾病。
在方面d的上下文中，本发明还有一个方面(方面d2)还涉及根据方面d的化合物，以及这些化合物的盐，用于制备预防或治疗疾病的药物组合物的用途，其中疾病是由在确定途径或信号网内的单一蛋白激酶例如PKB/Akt或多个蛋白激酶功能失调所介导的。
关于这一点，所述的疾病尤其是具有良性或恶性行为的高度增殖性疾病，例如，细胞的瘤形成，如癌症，和/或在哺乳动物中对凋亡诱导有响应的疾病。
本发明第五个方面(方面e)还涉及根据方面a的式I化合物以及这些化合物的盐，其中R1是Har1、Ah1或Hh1，以及取代基-N(H)C(O)R3连接到相对于其中苯环键合到嘧啶-氨基部分上的键合位置的间位上。
在方面e的上下文中，本发明另一个方面(方面e1)还涉及根据方面e的化合物，以及这些化合物的盐，用于治疗或预防疾病，例如由在确定途径或信号网内的单一蛋白激酶例如PKB/Akt或多个蛋白激酶功能失调所介导的疾病。
在方面e的上下文中，本发明还有一个方面(方面e2)还涉及根据方面e的化合物，以及这些化合物的盐，用于制备预防或治疗疾病的药物组合物的用途，其中疾病是由在确定途径或信号网内的单一蛋白激酶例如PKB/Akt或多个蛋白激酶功能失调所介导的，由此排除由糖原合成酶激酶3介导的疾病。
关于这一点，所述的疾病尤其是具有良性或恶性行为的高度增殖性疾病，例如，细胞的瘤形成，如癌症，和/或在哺乳动物中对凋亡诱导有响应的疾病。
本发明第六个方面(方面f)还涉及根据方面a的式I化合物以及这些化合物的盐，第一个条件是当取代基-N(H)C(O)R3连接到相对于其中苯环键合到嘧啶-氨基部分上的键合位置的间位上时，R1不是Har1、Ah1或Hh1，第二个条件是排除以下化合物4-氨基-N-[4-(6-吡啶-3-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-苯并呋喃-2-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-噻吩-3-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-二苯并呋喃-1-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-苯并[b]噻吩-2-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-喹啉-8-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-萘-2-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-联苯-3-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-联苯-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-苯基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-(6-萘-1-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，4-氨基-N-{4-[6-(2-苯氧基-苯基)-嘧啶-4-基氨基]-苯基}-苯甲酰胺，4-氨基-N-{4-[6-(2-苄氧基-苯基)-嘧啶-4-基氨基]-苯基}-苯甲酰胺，4-氨基-N-(4-[6-(4-苄氧基-苯基)-嘧啶-4-基氨基]-苯基)-苯甲酰胺，4-氨基-N-[4-[6-(3，4-二甲氧基-苯基)-嘧啶-4-基氨基]-苯基}-苯甲酰胺，和4-氨基-N-{4-[6-(2-甲氧基-苯基)-嘧啶-4-基氨基]-苯基}-苯甲酰胺。
在方面f的上下文中，本发明另一个方面(方面f1)还涉及根据方面f的化合物，以及这些化合物的盐，用于治疗或预防疾病，例如由在确定途径或信号网内的单一蛋白激酶例如PKB/Akt或多个蛋白激酶功能失调所介导的疾病。
在方面f的上下文中，本发明还有一个方面(方面f2)还涉及根据方面f的化合物，以及这些化合物的盐，用于制备预防或治疗疾病的药物组合物的用途，其中疾病是由在确定途径或信号网内的单一蛋白激酶例如PKB/Akt或多个蛋白激酶功能失调所介导的。
关于这一点，所述的疾病尤其是具有良性或恶性行为的高度增殖性疾病，例如，细胞的瘤形成，如癌症，和/或在哺乳动物中对凋亡诱导有响应的疾病。
在本发明化合物中，特别令人感兴趣的是那些根据方面a的式I化合物，其被-在本发明的范围内-一个或者-当可能的时候多个以下令人感兴趣和/或具体的实施方案所包括根据本发明的方面a，一个令人感兴趣的化合物实施方案(实施方案a)是那些式I化合物，其中所述化合物是式Ia化合物 实施方案a指的是那些式I化合物，其中取代基-N(H)C(O)R3连接到相对于其中苯环键合到嘧啶-氨基部分上的键合位置的对位上。
根据本发明的方面a，另一个令人感兴趣的化合物实施方案(实施方案b)是那些式I化合物，其中所述化合物是式Ib化合物
实施方案b指的是那些式I化合物，其中取代基-N(H)C(O)R3连接到相对于其中苯环键合到嘧啶-氨基部分上的键合位置的间位上。
根据本发明的方面a，一个特别的式I化合物实施方案(实施方案1′)指的是那些式I、Ia或Ib化合物，其中结构部分U是键。
根据本发明的方面a，另一个特别的式I化合物实施方案(实施方案2′)指的是那些式I、Ia或Ib化合物，其中结构部分U是亚甲基。
根据本发明的方面a，另一个特别的式I化合物实施方案(实施方案3′)指的是那些式I、Ia或Ib化合物，其中结构部分U是亚乙基。
根据本发明的方面a，另一个特别的式I化合物实施方案(实施方案4′)指的是那些式I、Ia或Ib化合物，其中结构部分U是被氨基-1-2C-烷基取代的1-2C-亚烷基，尤其是被氨基-1-2C-烷基取代的亚甲基，更特别的是被氨基甲基取代的亚甲基。
根据本发明的方面a，另一个特别的式I化合物实施方案(实施方案5′)指的是那些式I、Ia或Ib化合物，其中R1是Ar1。
根据本发明的方面a，另一个特别的式I化合物实施方案(实施方案6′)指的是那些式I、Ia或Ib化合物，其中R1是Aa1。
根据本发明的方面a，另一个特别的式I化合物实施方案(实施方案7′)指的是那些式I、Ia或Ib化合物，其中R1是Har1。
根据本发明的方面a，另一个特别的式I化合物实施方案(实施方案8′)指的是那些根据实施方案b的式Ib化合物，其中R1是Ar1、Aa1或Ha1，尤其是Ar1或Aa1。
根据本发明的方面a，另一个特别的式I化合物实施方案(实施方案9′)指的是那些根据实施方案b的式Ib化合物，其中R1是Har1、Hh1或Ah1，尤其是Har1。
根据本发明的方面a，另一个特别的式I化合物实施方案(实施方案10′)指的是那些根据实施方案a的式Ia化合物，其中R1是Ar1、Aa1、Ha1、Har1、Hh1或Ah1，尤其是Ar1、Aa1或Har1。
根据本发明的方面a，另一个特别的式I化合物实施方案(实施方案11′)指的是那些式I、Ia或Ib化合物，其中R2是氢。
根据本发明的方面a，一个更值得被提及的式I化合物实施方案(实施方案12′)包括那些实施方案a的式Ia化合物，其中R1是Ar1。
根据本发明的方面a，另一个更值得被提及的式I化合物实施方案(实施方案13′)包括那些实施方案a的式Ia化合物，其中R1是Aa1。
根据本发明的方面a，另一个更值得被提及的式I化合物实施方案(实施方案14′)包括那些实施方案a的式Ia化合物，其中R1是Har1。
根据本发明的方面a，一个更详细的特别的式I化合物实施方案(实施方案15′)指的是那些式I、Ia或Ib化合物，其中R1是苯氧基-苯基或苄氧基-苯基；尤其是4-苯氧基-苯基或特别是4-苄氧基-苯基。
根据本发明的方面a，另一个更详细的特别的式I化合物实施方案(实施方案16′)指的是那些式I、Ia或Ib化合物，其中R1是稠合三环13-或14-元杂芳基，其包含一到三个选自氮、氧和硫的杂原子，其中杂芳基通过环碳原子连接到嘧啶部分上，例如，咔唑基、菲啶基、吖啶基、咔啉基、吩嗪基、二苯并呋喃基、二苯并噻吩基、吩噻嗪基、吩嗪基、phenoxathiinyl或thianthrenyl；尤其是噻蒽-1-基、二苯并噻吩-4-基或特别是二苯并呋喃-4-基。
根据本发明的方面a，另一个更详细的特别的式I化合物实施方案(实施方案17′)指的是那些式I、Ia或Ib化合物，其中R1是二苯并呋喃-4-基。
根据本发明的方面a，另一个更详细的特别的式I化合物实施方案(实施方案18′)指的是那些式I、Ia或Ib化合物，其中R3是-U-Ar2或-V-Har2，其中U是键，直链1-4C-亚烷基，或被氨基-1-4C-烷基取代的直链1-4C-亚烷基，Ar2是R31-和/或R32-取代的苯基，其中R31是卤素、氰基、脒基、-W-R311或Het1，其中W是键或1-4C-亚烷基，
R311是-N(R312)R313或Het1，其中R312是氢、1-4C-烷基，1-4C-烷氧基羰基或1-4C-烷氧基-2-4C-烷基，R313是氢或1-4C-烷基，Het1任选被R314取代并且是单环3-到7-元饱和杂环，其包含一或两个选自氧、氮和硫的杂原子，以及其通过环碳原子或通过环氮原子与结构部分W相连，其中，R314是1-4C-烷基或1-4C-烷氧基羰基，R32是卤素，V是键，Har2是1，2，3，4-四氢异喹啉-7-基或R33-取代的吡啶基，其中R33是-W-R311；或者其中，更明确的是，R3是-U-Ar2或-V-Har2，其中U是键，直链1-2C-亚烷基或被氨基-1-2C-烷取代的直链1-2C-亚烷基，Ar2是R31-和/或R32-取代的苯基，其中R31是氟、氯、氰基、脒基、-W-R311或Het1，其中W是键或1-4C-亚烷基，R311是-N(R312)R313，其中，R312是氢、1-2C-烷基、1-2C-烷氧基-乙基，R313是氢或1-2C-烷基，Het1是吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基或N-(1-4C-烷基)-哌嗪基，尤其是吡咯烷-1-基或哌啶-3-基，R32是氟或氯，V是键，Har2是1，2，3，4-四氢异喹啉-7-基或R33-取代的吡啶基，其中R33是-W-R311，其中W是1-2C-亚烷基，R311是-N(R312)R313，其中R312是氢或1-2C-烷基，
R313是氢；或者是，其中，还更加明确的是，R3是-U-Ar2、-V-Har2或2-氨基-苯基，其中U是键，以及Ar2是3-(R31)-苯基、4-(R31)-苯基或3-(R31)-或4-(R31)-氟苯基，其中R31是脒基、-W-R311、吡咯烷-1-基或哌啶-3-基，其中W是键，亚甲基、亚乙基或1，1-二甲基-亚甲基，R311是-N(R312)R313或(2-甲氧基乙基)-氨基，其中R312是氢或甲基，R313是氢或甲基，或者U是亚甲基，以及Ar2是4-(氨基甲基)-苯基，或者U是氨基甲基-亚甲基，以及Ar2是3，4-二氯苯基，以及V是键，Har2是1，2，3，4-四氢异喹啉-7-基或R33-取代的吡啶基，其中R33是氨基甲基，或者是，其中，特别是，R3是-U-Ar2、-V-Har2或2-氨基-苯基，其中U是键，以及Ar2是3-(R31)-苯基、4-(R31)-苯基或3-(R31)-或4-(R31)-氟苯基，其中R31是脒基、-W-R311、吡咯烷-1-基或哌啶-3-基，其中W是键，以及R311是-N(R312)R313或(2-甲氧基乙基)-氨基，其中R312是氢或甲基，R313是甲基，或，特别是
W是亚甲基、亚乙基或1，1-二甲基-亚甲基，以及R311是-N(R312)R313，其中R312是氢或甲基，R313是氢，或者，U是亚甲基，以及Ar2是4-(氨基甲基)-苯基，或者U是氨基甲基-亚甲基，以及Ar2是3，4-二氯苯基，以及V是键，Har2是1，2，3，4-四氢异喹啉-7-基或R33-取代的吡啶基，其中R33是氨基甲基，或者是，其中，更特别的是，R3是-U-Ar2或-V-Har2，其中U是键，Ar2是3-(R31)-苯基、4-(R31)-苯基或2-氟-4-(R31)-苯基，其中R31是脒基或-W-R311，其中W是亚甲基、亚乙基或1，1-二甲基-亚甲基，R311是-N(R312)R313，其中R312是氢或甲基，R313是氢，V是键，Har2是1，2，3，4-四氢异喹啉-7-基、6-(R33)-吡啶-3-基、6-(R33)-吡啶-2-基、2-(R33)-吡啶-4-基或4-(R33)-吡啶-2-基，其中R33是氨基甲基。
根据本发明的方面a，相应的另一个更详细特别的式I化合物实施方案指的是其中R2是氢的实施方案1′到10′中的每一个，或者，特别的是，12′到18′中的每一个。
根据本发明的方面a，一个尤其详细特别的式I化合物实施方案(实施方案19′)指的是那些式I、Ia或Ib化合物，其包括于实施方案15′和实施方案18′，其中R2是氢。
根据本发明的方面a，一个尤其详细特别的式I化合物实施方案(实施方案20′)指的是那些式I、Ia或Ib化合物，其包括于实施方案16′和实施方案18′，其中R2是氢。
根据本发明的方面a，一个尤其详细特别的式I化合物实施方案(实施方案21′)指的是那些式I、Ia或Ib化合物，其包括于实施方案17′和实施方案18′，其中R2是氢。
根据本发明的方面a，一个被强调的式I化合物实施方案是实施方案a。这样，根据本发明方面a的化合物，其来自式Ia，是在本发明意义内被强调的。因此，在实施方案1′到21′中，来自式Ia的化合物是被强调的。
从前述提及的内容可见，应理解，根据本发明的方面a，上述的化合物实施方案指的不仅是方面a，而且还有方面b到f中的任意一个或所有。
根据本发明，一个特别的化合物实施方案涉及的是那些在此定义的式Ia化合物及其盐，其中R1是二苯并呋喃-4-基，R2是氢，R3是-V-Har2，其中V是直接键，Har2是被氨基甲基取代的吡啶基。
根据本发明，另一个特别的化合物实施方案涉及的是那些在此定义的式Ia化合物及其盐，其中R1是二苯并呋喃-4-基，R2是氢，R3是-V-Har2，其中V是直接键，Har2是1，2，3，4-四氢异喹啉基或异二氢吲哚基，由此，Har2通过苯环部分的环碳原子与基团-V-Har2的结构部分V键合。
根据本发明，另一个特别的化合物实施方案涉及的是那些在此定义的式Ia化合物及其盐，其中
R1是二苯并呋喃-4-基，R2是氢，R3是-U-Ar2，其中U是直接键，Ar2是3-(氨基甲基)-苯基、4-(氨基甲基)-苯基、3-脒基-苯基或4-脒基-苯基。
本发明化合物能例如按以下反应方案1所述并根据以下特别指明的反应步骤来制备，或者特别的是，按以下实施例中记载的示例说明的方法，或者是类似于或相似于本领域技术人员已知的制备步骤或合成策略来制备。
式I化合物，其中R1、R2和R3的含义如上，能按照以下描述获得。
在方案1所述合成途径的第一个反应步骤中，式V化合物，其中R2的含义如上且X是-NO2或-N(H)PG1，其中PG1是适宜的保护基，例如叔丁氧羰基(Boc)或以下文献中提到的那些基团之一″有机合成中的保护基(Protective Groups in Orgainc Synthesis)″，T.Greene和P.Wuts(John Wiley & Sons，Inc.1999，3rd Ed.)，或″保护基(ProtectingGroups)(Thieme Foundations Organic Chemistry Series N Group″，P.Kocienski(Thieme Medical Publishers，2000)，与4，6-二氯嘧啶进行亲核取代反应得到相应的式IV化合物。所述的反应能在本领域技术人员已知或如下实施例中记载的方式下进行。
式IV化合物与式R1-M化合物进行反应，其中R1的含义如上且M是基团或原子，其适于与式IV化合物通过形成CC-键的反应进行反应以得到相应的式III化合物。所述的形成CC-键的反应可以是，例如，Kumada偶联、Negishi偶联、Hiyama偶联、Sonogashira偶联、Stille反应，或者优选的是，Suzuki偶合反应。这样，对于Suzuki偶联反应来说，式III化合物是硼酸酯，或者特别的是硼酸，其中M是-B(OH)2。
适宜的是，Suzuki反应按照本领域普通技术人员已知和/或以下记载的方式以及以下实施例示例说明的方法或与之类似或相似的方式进行。
反应方案1
更详细的是，提及的Suzuki反应能在单独有机溶剂例如甲苯、苯、二甲基甲酰胺中，或在醚溶剂(例如二甲氧基乙烷或二烷)或醇溶剂中或其混合物中，或者优选的是，在包含有机溶剂(例如二甲氧基乙烷)和水的混合物中，与有机(例如三乙胺)或优选无机碱(例如氢氧化钾、氢氧化铊、碳酸氢钠、碳酸铯、氟化铯，或者特别是碳酸钾或碳酸钠)，在存在过渡金属催化剂例如镍或特别是钯催化剂(例如Pd(OAc)2、PdCl2(PPh3)2或Pd(PPh3)4)，以及任选氯化锂的情况下进行。该反应在20℃到160℃，通常是60℃到130℃的范围内进行10分钟至5天，通常是30分钟至24小时。有利的是，所用溶剂是脱气的并且反应在保护气中进行。
在下一反应步骤中，式III化合物的硝基，其中X是-NO2，被还原为相应式II化合物的氨基。所述的还原在本领域技术人员已知的方式下或按照以下实施例的记载进行。更详细的是，还原能通过例如催化氢化，如在Raney镍或贵金属催化剂例如在活性碳上钯或特别是铂的存在下，在适宜的溶剂中进行。
式III化合物，其中X是-N(H)PG1，也能被转化为相应的式II化合物。所述的转化能以对技术人员来说本身是常规方式或以下实施例记载的方式脱去保护基PG1而获得。
式II化合物，其中R1和R2的含义如上，能与式R3-C(O)-Y化合物进行反应，其中Y是适宜的离去基，优选氯原子，且R3代表以上给出的取代基，其能被，如果必要的话，本领域技术人员已知的暂时保护基保护(例如叔丁氧羰基保护基)，在任选除去所述的暂时保护基后，得到式I化合物，其中R1、R2和R3的含义如上。
或者是，式I化合物，其中R1、R2和R3的含义如上，也能由式II化合物，其中R1和R2的含义如上，和式R3-C(O)-Y化合物，其中Y是羟基且R3代表以上给出的取代基，其能被，如果必要的话，本领域技术人员已知的暂时保护基保护(例如叔丁氧羰基保护基)，通过与本领域技术人员已知的酰胺键连接试剂进行反应以及随后的任选除去所述的暂时保护基来获得。示例性酰胺键连接试剂是本领域技术人员已知的，可以被提及的有例如，碳二亚胺(如二环己基碳二亚胺或，优选的是，1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸化物)、偶氮二羧酸衍生物(如偶氮二羧酸二乙基酯)、脲盐[如O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲四氟硼酸盐或O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基-脲-六氟磷酸盐]和N，N′-羰基二咪唑。在本发明的范围内，优选的酰胺键连接试剂是脲盐，特别是碳二亚胺，优选的是，1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸化物。
所述的式I化合物与式R3-C(O)-Y的反应能以本领域已知的方式或按照以下实施例的记载进行。
式V、R1-M或R3-C(O)-Y化合物是已知的或能以已知的方式或类似于或相似于本领域已知化合物的方式获得，或者它们能按照以下实施例的记载或与之类似或相似的方式获得。
任选地，式I化合物也能被通过本领域普通技术人员已知的方法转化为其它的式I化合物。更特别的是，例如，从式I化合物，其中a)R312是氢，相应的酯化合物能通过酯化反应获得；b)R312或R313是氢，相应的醚化合物能通过醚化反应获得；c)R312或R314是1-4C-烷氧基羰基，例如叔丁氧基羰基，相应的游离氨基化合物能通过除去1-4C-烷氧基羰基获得；d)R31是氰基，相应的脒基能通过形成亚氨酸酯和随后的氨化而获得。
在a)、b)、c)和d)中提及的方法能方便地以类似于本领域技术人员已知的方法或按照以下实施例示例记载的方法进行。
任选地，式I化合物能被转化为其盐，或者，任选的是，式I化合物的盐能被转化为游离化合物。
此外，本领域技术人员已知的是，如果在起始或中间化合物中有多个反应中心，那么就可能需要通过保护基阻断一个或多个反应中心以允许反应在期望的反应中心上特定进行。使用大量已证实保护基的详细说明能在例如″有机合成中的保护基″T.Greene和P.Wuts(JohnWiley & Sons，Inc.1999，3rd Ed.)或″保护基(Thieme FoundationsOrganic Chemistry Series N Group″P.Kocienski(Thieme MedicalPublishers，2000)中找到。
根据本发明的物质能用本身已知的方法分离和纯化，例如在减压下馏出溶剂以及对从适宜溶剂中获得的剩余物进行重结晶或用一种常规的纯化方法进行，例如在适宜的载体物质上进行柱色谱。
盐通过在适宜的溶剂(例如酮如丙酮、甲基乙基甲酮或甲基异丁基甲酮，醚如二乙醚，四氢呋喃或二烷，氯化烃如二氯甲烷或氯仿，或低分子量脂肪醇，例如乙醇或异丙醇)中溶解游离的化合物而获得，所述溶剂包含所希望的酸或碱，或者然后向其中加入所希望的酸或碱。该盐通过过滤、再沉淀、用非溶剂导致沉淀出加成盐或蒸发溶剂来获得。所获得的盐能通过碱化或酸化转化为游离的化合物，游离化合物能相反地转化为盐。如此，药学上不能接受的盐能被转化为药学上可接受的盐。
适宜的是，本发明提及的转化能以类似于或相似于本身为本领域技术人员熟悉的方法来进行。
本领域技术人员在他/她知识的基础上以及这些合成途径的基础上(这显示并记载于本发明的说明书中)，知晓如何找到式I化合物的其它可能的合成途径。所有这些其它可能的合成途径也是本发明的部分。
对本发明已进行了详细描述，本发明的范围不限于这些记载的特征或实施方案。对本领域技术人员来说显而易见的是，能在本领域已有知识的基础上，尤其是本发明公开(例如明确、含蓄或内在的公开)的基础上，对已描述的本发明进行修饰、类推、变化、衍生、对应和调整，并不背离本发明的精神和范围(如附加权利要求所定义的那样)。
以下实施例用于说明本发明而非进一步的限制。同样，其它的式I化合物(没有明确记载其制备)能以类似或相似的方法或类似于本身为本领域技术人员熟悉的方式用常规处理技术来制备。
任何一个或所有的根据本发明的式I化合物，其是在以下实施例中被提及的，尤其是作为最终化合物而被详细说明的，及其盐或不含盐的形式，都是本发明特别感兴趣的主题。
在实施例中，mp代表熔点，h代表小时，min代表分钟，conc.代表浓缩，Boc代表叔丁氧基羰基，其它的缩写具有对技术人员来说本身是常规的含义。
实施例最终化合物1.N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-4-吗啉-4-基-苯甲酰胺将4-吗啉-4-基-苯甲酸(228mg，1.1mmol)和1-羟基苯并三唑(148mg，1.1mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)(5mL)并加入N′-(3-二甲基氨基)丙基-N-乙基碳二亚胺盐酸化物(632mg，3.3mmol)和三乙胺(0.46mL，3.3mmol)。在环境温度下搅拌该混合物1小时。
将N-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基)-苯-1，4-二胺三氟醋酸盐(化合物A1)(500mg，1.1mmol)溶于DMF(5mL)，加入另外的三乙胺(0.15mL，1.1mmol)并在0℃下加入上述混合物。所得混合物于室温下搅拌过夜并加入氯仿(30mL)。过滤、洗涤并干燥所得固体。
产量257mg(48％)
mp335-345℃1H-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝3.25(4H，m，N(CH2)2)；3.76(4H，m，O(CH2)2)；7.93(1H，s，C6-H)；8.29(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.31(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.35(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.77(1H，s，C2-H)；9.87(1H，s，NH)；9.96(1H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝47.26(N(CH2)2)；65.81(O(CH2)2)；105.25(C6)；152.79(C2)；155.02(C6)；156.82(C苯并呋喃)；157.98(C4)；160.61(C苯并呋喃)；164.38(CO-NH).
2.N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-4-二甲基氨基-苯甲酰胺在10℃下，以分批的方式向位于吡啶(10mL)中的N-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基)-苯-1，4-二胺三氟醋酸盐(化合物A1)(500mg，1.1mmol)溶液内加入4-二甲基氨基苯甲酰氯(288mg，1.21mmol)。环境温度下进行14小时后，蒸发该混合物，粗产物经结晶纯化。
产率47％mp285-300℃1H-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝3.01(6H，m，N(CH3)2)；7.97(1H，s，C6-H)；8.20(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.25(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.40(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.92(1H，s，C2-H)；10.02(1H，s，NH)；11.40(1H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝39.71(N(CH3)2)；105.65(C5)；151.89(C2)；152.43(C5)；154.29(C苯并呋喃)；155.09(C4)；160.79(C苯并呋喃)；164.73(CO-NH).
除非另有指明，以下化合物，从化合物A1和适宜的本领域已知的苯甲酸衍生物开始，以类似于上述酰胺偶联实施例(实施例1)的方法进行制备。
3.N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-4-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-苯甲酰胺mp270-274℃1H-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝2.26(3H，s，CH3)；2.45(s)；3.30(2H，s)，3.56(2H，s)，7.94(1H，s，C6-H)；8.25(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.32(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.38(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.78(1H，s，C2-H)；9.88(1H，s，NH)；10.20(1H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝45.09(CH3)；51.96，54.28，81.30(NCH2)；105.51(C5)；152.93(C2)；155.02(C6)；158.86(C苯并呋喃；157.96(C4)；160.59(C苯并呋喃)；164.74(CO-NH).
4.N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-2-(4-二甲基-氨基-苯基)-乙酰胺
mp＞260℃1H-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝2.86(6H，s，N(CH3)2)；3.49(2H，s，CH2)；7.88(1H，s，C5-H)；8.22(1H，d，C苯并呋喃-H)8.30(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.36(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.75(1H，s，C2-H)；9.80(1H，s，NH)；10.01(1H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝40.25(N(CH3)2)；42.42(CH2)；105.41(C5)；152.91(C2)；154.99(C6)；156.82(C苯并呋喃)；157.95(C4)；160.60(C苯并呋喃)；169.12(CO-NH).
5.N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-2-二甲基氨基-苯甲酰胺mp246-249℃1H-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝2.81(6H，m，N(CH3)2)；7.92(1H，s，C5-H)；8.24(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.36(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.39(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.77(1H，s，C2-H)；9.86(1H，s，NH)；11.27(1H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝43.81(N(CH3)2)；105.45(C5)；152.94(C2)；155.01(C6)；156.86(C苯并呋喃)；157.97(C4)；160.63(C苯并呋喃)；165.09(CO-NH).
6.N-(4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-3-吡咯烷-1-基苯甲酰胺mp250-255℃1H-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝2.00(4H，m，(CH2)2)；3.30(4H，m，N(CH2)2)；7.92(1H，s，C5-H)；8.23(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.32(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.38(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.78(1H，s，C2-H)；9.86(1H，s，NH)；10.08(1H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝24.93((CH2)2)；47.31(N(CH2)2)；105.50(C5)；152.92(C2)； 155.01(C6)；156.86(C苯并呋喃)；157.97(C4)；160.58(C苯并呋喃)；165.63(CO-NH).
7.N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺mp323-325℃1H-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝7.92(1H，s，C5-H)；8.24(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.30(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.37(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.78(1H，s，C2-H)；9.87(1H，s，NH)；10.24(1H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝105.51(C5)；152.93(C2)；155.02(C6)；156.88(C苯并呋喃)；157.98(C4)；160.58(C苯并呋喃)；164.89(CO-NH).
8.4-叔-丁基-N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺mp261-263℃1H-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝1.34(9H，s，C(CH3)3)；7.92(1H，8，C5-H)；8.25(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.36(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.38(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.78(1H，s，C2-H)；9.86(1H，s，NH)；10.16(1H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝30.92(C(CH3)3)；105.51(C5)；153.95(C2)；155.02(C6)；156.86(C苯并呋喃)；157.97(C4)；160.59(C苯并呋喃)；164.84(CO-NH).
9.3，4-二氯-N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺mp317-321℃1H-NMR (DMSO-d6)δ/ppm＝7.93(1 H，s，C5-H)；8.23(1H，d，C苯并呋喃-H)8.32(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.38(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.79(1H，s，C2-H)；9.90(1H，s，NH)；10.39(1H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝105.63(C5)；152.94(C2)；155.02(C6)；156.92(C苯并呋喃)；157.96(C4)；160.55(C苯并呋喃)；162.48(CO-NH).
10.N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-3-二甲基氨基-苯甲酰胺在10℃下，以分批的方式向位于吡啶(10mL)中的N-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基)-苯-1，4-二胺三氟醋酸盐(化合物A1)(500mg，1.1mmol)溶液内加入3-二甲基氨基苯甲酰氯(288mg，1.21mmol)。环境温度下进行14小时后，蒸发该混合物，粗产物经结晶纯化。
产率32％mp225-232℃1H-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝3.01(6H，s，N(CH3)2)；7.92(1H，s，C5-H)；8.22(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.38(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.41(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.92(1H，s，C2-H)；10.27(1H，s，NH)；10.93(1H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm ＝ 40.79(N(CH3)2)；105.64(C6)；152.55(C2)；155.08(C6)；155.28(C苯并呋喃)；157.97(C4)；160.79(C苯并呋喃)；165.47(CO-NH).
除非另有指明，以下化合物，从化合物A1和适宜的本领域已知的苯甲酸衍生物开始，以类似于上述酰胺偶联实施例(实施例1)的方法进行制备。
11.N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-异烟酰胺mp283-295℃1H-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝7.93(1H，s，C5-H)；8.28(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.30(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.36(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.78(1H，s，C2-H)；9.92(1H，s，NH)；10.50(1H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝105.64(C5)；152.94(C2)；155.02(C6)；156.92(Cbenzofurane)；157.95(C4)；160.54(C苯并呋喃)；163.28(CO-NH).
12.N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-4-二甲基氨基甲基-苯甲酰胺
mp299℃1H-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝2.19(6H，s，N(CH3)2)；3.49(2H，s，CH2)；7.93(1H，s，C6-H)；8.25(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.32(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.38(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.78(1H，s，C2-H)；9.87(1H，s，NH)；10.20(1H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝44.87(N(CH3)2)；82.79(CH2)；105.52(C5)；152.93(C2)；155.02(C6)；156.87(C苯并呋喃)；157.97(C4)；160.59(C苯并呋喃)；164.73(CO-NH).
13.N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-4-吗啉-4-基甲基-苯甲酰胺mp＞250℃1H-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝2.37(4H，d)；3.29(2H，s)；3.58(4H，m，OCH2)；7.92(1H，s，C6-H)；8.23(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.32(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.38(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.78(1H，s，C2-H)；9.87(1H，s，NH)；10.20(1H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝53.10；61.88；66.08 105.55(C5)；152.94(C2)；155.03(C6)；156.89(C苯并呋喃)；157.99(C4)；160.60(C苯并呋喃)；164.76(CO-NH).
14.N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-4-(4-甲基哌嗪-1-基)-苯甲酰胺mp304-319℃1H-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝2.22(3H，s，CH3)；2.45(4H，m，CH2)；7.02(1H，d)；7.88(1H，s)；8.24(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.31(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.38(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.77(1H，s，C2-H)；9.85(1H，s，NH)；9.93(1H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝45.67；46.90；54.29；105.41(C5)； 152.64(C2)；155.01(C6)；156.83(C苯并呋喃)；157.97(C4)；160.60( C苯并呋喃)；164.39(CO-NH).
15.N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-6-吗啉-4-基-烟酰胺mp310-312℃1H-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝3.60(4H，m，N(CH2)2)；3.72(4H，m，O(CH2)2)；7.93(1H，s，C5-H)；8.24(1H，d，C苯并呋喃-H)； 8.31(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.36(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.77(1H，s，C2-H)；9.87(1H，s，NH)；10.04(1H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝44.65(N-CH2)；65.76(O-CH2)；105.35(C5)；152.92(C2)；155.02(C6)；156.84(C苯并呋喃)；157.97(C4)；159.69(C苯并呋喃)；163.37(CO-NH).
16.N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-3-[3-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)-丙基]-苯甲酰胺mp186-188℃17.N-{4-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基氨基甲酰基]-苄基}-氨基甲酸叔-丁基酯mp311-321℃
18.N-{2-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基氨基甲酰基]-苯基}-氨基甲酸叔-丁基酯mp＞340℃19.N-{3-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基氨基甲酰基]-苯基}-氨基甲酸叔-丁基酯mp215-218℃20.3-{4-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基氨基甲酰基]-苯基}-哌啶-1-羧酸叔-丁基酯mp259-261℃21.N-(4-{[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基氨基甲酰基]-甲基}-苯基)-氨基甲酸叔-丁基酯mp＞320℃1H-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝1.47(9H，s，C(CH3)3)；3.56(2H，s，(CH2))；7.88(1H，s，C6-H)；8.22(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.30(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.36(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.75(1H，s，C2-H)；9.81(1H，s，NH)；10.07(1H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝28.11(C(CH3)3)；42.56(CH2)；78.74(C(CH3)3)；105.45(C6)；152.46(C2)；155.00(C6)；156.82(C苯并呋喃)；157.59 (C4)；160.59(C苯并呋喃)；168.63(CO-NH).
22.N-{3-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基氨基甲酰基]-苄基}-氨基甲酸叔-丁基酯mp237℃1H-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝1.41(9H，s，C(CH3)3)；4.22(2H，d，(CH2))；7.92(1H，s，C5-H)；8.23(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.30(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.36(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.78(1H，s，C2-H)；9.87(1H，s，NH)；10.23(1H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝28.22(C(CH3)3)；43.23(CH2)；77.76(C(CH3)3)；105.54(C5)；152.93(C2)；155.01(C6)；156.88(C苯并呋喃)；157.97(C4)；160.50(C苯并呋喃)；164.96(CO-NH).
23.N-(2-{4-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基氨基甲酰基]苯基}-乙基)-氨基甲酸叔-丁基酯mp＞250℃1H-N/MR(DMSO-d6)δ/ppm＝1.38(9H，s，C(CH3)3)；2.77(2H，t)；3.17(2H，d，(N-CH2))；6.90(1H，t，NH)；7.91(1H，s，C5-H)；8.23(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.31(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.37(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.78(1H，s，C2-H)；9.87(1H，s，NH)10.18(1H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝28.23(C(CH3)3)；35.23(CH2)；41.17(N-CH2)；77.40(C(CH3)3)；105.51(C5)；152.93(C2)；155.02(C6)；156.86(C苯并呋喃)；157.97(C4)；160.59 (C苯并呋喃)；164.70(CO-NH).
24.N-{2-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基氨基甲酰基]-吡啶-4-基甲基}-氨基甲酸叔-丁基酯
mp245℃1H-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝1.41(9H，s，C(CH3)3)；4.22(2H，d，(CH2))；7.92(1H，s，C5-H)；8.23(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.30(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.36(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.78(1H，s，C2-H)；9.87(1H，s，NH)；10.23(1H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝28.22(C(CH3)3)；43.23(CH2)；77.76(C(CH3)3)；105.64(C5)；152.93(C2)；155.01(C6)；156.88(C苯并呋喃)；157.97(C4)；160.60(C苯并呋喃)；164.96(CO-NH).
除非另有指明，以下化合物，从化合物A2和适宜的本领域已知的苯甲酸衍生物开始，以类似于上述酰胺偶联实施例(实施例1)的方法进行制备。
25.{4-[3-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基氨基甲酰基]-苄基}-氨基甲酸叔-丁基酯mp233-236℃26.N-(2-{4-[3-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基氨基甲酰基]-苯基}-乙基)-氨基甲酸叔-丁基酯mp239-241℃27.N-{2-[3-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基氨基甲酰基]-苯基}-氨基甲酸叔-丁基酯mp无定形28.{3-[3-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基氨基甲酰基]-苯基}-氨基甲酸叔-丁基酯mp160-163℃29.N-{3-[3-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基氨基甲酰基]-苄基}-氨基甲酸叔-丁基酯mp216-219℃30.N-{4-[3-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基氨基甲酰基]-苯基}-氨基甲酸叔-丁基酯mp214℃31.N-{4-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基氨基甲酰基]-苄基}-甲基-氨基甲酸叔-丁基酯从化合物A1和化合物D1开始，以类似于上述酰胺偶联实施例(实施例1)的方法制备标题化合物。
mp225-230℃32.{5-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基氨基甲酰基]-吡啶-2-基甲基}-氨基甲酸叔-丁基酯从化合物A1和化合物D2开始，以类似于上述酰胺偶联实施例(实施例1)的方法制备标题化合物。
33.{4-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基氨基甲酰基]-吡啶-2-基甲基}-氨基甲酸叔-丁基酯从化合物A1和化合物D3开始，以类似于上述酰胺偶联实施例(实施例1)的方法制备标题化合物。
34.(4-{[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基氨基甲酰基]-甲基}-苄基)-氨基甲酸叔-丁基酯从化合物A1和化合物D4开始，以类似于上述酰胺偶联实施例(实施例1)的方法制备标题化合物。
mp238-240℃35.N-{4-[3-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-4-甲基-苯基氨基甲酰基]-苄基}-氨基甲酸叔-丁基酯从化合物A3和适宜的本领域已知的苯甲酸衍生物开始，以类似于上述酰胺偶联实施例(实施例1)的方法制备标题化合物。
mp200-205℃36.N-(1-{4-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基氨基甲酰基]-苯基}-1-甲基-乙基)-氨基甲酸叔-丁基酯从化合物A1和化合物D5开始，以类似于上述酰胺偶联实施例(实施例1)的方法制备标题化合物。
37.N-(2-{3-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基氨基甲酰基]-苯基}-乙基)-氨基甲酸叔-丁基酯从化合物A1和化合物D6开始，以类似于上述酰胺偶联实施例(实施例1)的方法制备标题化合物。
mp235-238℃38.{4-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基氨基甲酰基]-苯基}-(2-甲氧基乙基)-氨基甲酸叔-丁基酯从化合物A1和化合物D7开始，以类似于上述酰胺偶联实施例(实施例1)的方法制备标题化合物。
mp228-231℃(分解)39.N{4-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基氨基甲酰基]-3-氟苄基}氨基甲酸叔-丁基酯从化合物A1和化合物D8开始，以类似于上述酰胺偶联实施例(实施例1)的方法制备标题化合物。
产量163mg(25％)mp255℃40.{6-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基氨基甲酰基]-吡啶-2-基甲基}-氨基甲酸叔-丁基酯从化合物A1和化合物D9开始，以类似于上述酰胺偶联实施例(实施例1)的方法制备标题化合物。
mp195-197℃41.N-{5-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基氨基甲酰基]-吡啶-3-基甲基}-氨基甲酸叔-丁基酯从化合物A1和化合物D10开始，以类似于上述酰胺偶联实施例(实施例1)的方法制备标题化合物。
42.N-[3-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-4-二甲基氨基-苯甲酰胺在10℃下，以分批的方式向位于吡啶(10mL)中的N-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基)-苯-1，3-二胺三氟醋酸盐(化合物A2)(500mg，1.1mmol)溶液内加入4-二甲基氨基苯甲酰氯(222mg，1.21mmol)。环境温度下进行2天后，蒸发该混合物，粗产物经结晶纯化。
产率33％mp＞250℃43.N-[3-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-4-二甲基氨基甲基-苯甲酰胺从化合物A2和适宜的本领域已知的苯甲酸衍生物开始，以类似于上述酰胺偶联实施例(实施例1)的方法制备标题化合物。
mp240-242℃44.3-氰基-N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺从化合物A1和适宜的本领域已知的苯甲酸衍生物开始，以类似于上述酰胺偶联实施例(实施例1)的方法制备标题化合物。
mp285-290℃
45.3-甲脒基-N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺将溶于二烷(60mL)和甲醇(20mL)中的3-氰基-N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺(化合物44)(275mg，0.57mmol)冷却到0-5℃，并加入HCl-气。0.5小时后，蒸发该混合物，向剩余物中加入甲醇(10mL)和(NH4)2CO3(0.50g，0.52mmol)并搅拌混合物48小时。用含水盐酸/异丙醇中和后，用硅胶快速色谱纯化产物。
产量56mgmp300-306℃46.4-氰基-N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺从化合物A1和适宜的本领域已知的苯甲酸衍生物开始，以类似于上述酰胺偶联实施例(实施例1)的方法制备标题化合物。
mp＞250℃47.4-甲脒基(Carbamimidoyl)-N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺从化合物46开始，以类似于实施例45的方法制备标题化合物。
mp213-219℃48.N-[3-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-3-二甲基氨基-苯甲酰胺在10℃下，以分批的方式向位于吡啶(10mL)中的N-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基)-苯-1，3-二胺三氟醋酸盐(化合物A2)(500mg，1.1mmol)溶液内加入3-二甲基氨基苯甲酰氯HCl(288mg，1.21mmol)。环境温度下进行48小时后，蒸发该混合物，粗产物经快速色谱纯化。
产率25％mp245-251℃49.4-氨基甲基-N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺三氟醋酸盐在0.5ml三氟醋酸(TFA)/二氯甲烷(5mL)的混合物中搅拌N-{4-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基氨基甲酰基]-苄基}-氨基甲酸叔-丁基酯(化合物17)过夜。过滤、洗涤并干燥所得固体。
产率40％
mp155-165℃1H-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝4.14(2H，m，CH2-NH2)；7.90(1H，s，C5-H)；8.26(3H，m，C苯并呋喃-H)；8.32(2H，bs，CH2-NH2)；8.82(1H，s，C2-H)；10.08(1H，s，NH)；10.29(1H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝41.89(CH2-NH2)；105.61(C5)；152.85(C2)；155.03(C6)；155.93(C苯并呋喃)；157.41(C4)；160.61(C苯并呋喃)；164.28(CO-NH).
除非另有指明，从适宜的Boc-保护化合物17至41或A4至A6开始，以类似于实施例49的方法制备以下化合物。
50.2-氨基-N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺三氟醋酸盐mp136-138℃1H-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝7.86(1H，s，C5-H)；8.24(2H，dd，C苯并呋喃-H)；8.37(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.87(1H，s，C2-H)；10.09(1H，s，NH)；10.40(1H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝105.41(C6)；152.69(C2)；155.05(C6)；156.26(C苯并呋喃)；158.05(C4)；160.76(C苯并呋喃)；167.13(CO-NH).
51.3-氨基-N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺三氟醋酸盐mp140-147℃1H-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝7.86(1H，s，C5-H)；8.26(2H，dd，C苯并呋喃-H)；8.35(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.68(1H，s，C2-H)；10.25(1H，s，NH)；10.35(1H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝105.52(C5)；152.73(C2)；154.30(C6)；155.05(C苯并呋喃)；156.50(C4)；160.72(C苯并呋喃)；164.99(CO-NH).
52.N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-4-哌啶-3-基-苯甲酰胺三氟醋酸盐mp140-147℃1H-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝1.81(2H，m)；1.92(2H，m)；3.08(3H，m)；3.36(2H，m)；7.89(1H，s，C5-H)；8.29(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.31(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.36(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.84(1H，s，C2-H)；10.27(2H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝22.29；29.35；43.00；47.59；105.56(C5)；152.80(C2)；155.05(C6)；155.20(C苯并呋喃)；157.02(C4)；160.67(C苯并呋喃)；164.60(CO-NH).
53.2-(4-氨基-苯基)-N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-乙酰胺mp125-130℃1H-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝3.68(2H，s，CH2)；7.85(1H，s，C6-H)；8.25(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.29(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.34(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.82(1H，s，C2-H)；10.22(2H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝42.44(CH2)；105.51(C5)；152.73(C2)；155.05(C6)；156.59(C苯并呋喃)；160.70(C苯并呋喃)；168.26(CO-NH).
54.3-氨基甲基-N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺三氟醋酸盐mp238-240℃1H-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝4.16(2H，d，(CH2))；7.90(1H，s，C5-H)；8.30(6H，m，C苯并呋喃-H)；8.83(1H，s，C2-H)；10.18(1H，s，NH)；10.34(1H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm(特征信号)＝42.11(CH2)；105.61(C5)；152.83(C2)；155.05(C6)；155.51(C苯并呋喃)；157.70(C4)；160.66(C苯并呋喃)；164.54(CO-NH).
55.4-(2-氨基-乙基)-N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺三氟醋酸盐mp202℃1H-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝2.94(2H，m)；3.05(2H，m，(N-CH2))；7.90(1H，s，C5-H)；8.19(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.35(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.86(1H，s，C2-H)；10.28(1H，s，NH)；10.56(1H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝32.85(CH2)；39.62(N-CH2)；105.57(C5)；152.93(C2)；153.33；155.08(C6)；155.97(C苯并呋喃)；157.82(C4)；160.77(C苯并呋喃)；164.65(CO-NH).
56.4-氨基甲基-吡啶-2-羧酸-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-酰胺三氟醋酸盐mp211℃(分解)57.4-氨基甲基-N-[3-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺三氟醋酸盐mp114℃58.4-(2-氨基-乙基)-N-[3-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺三氟醋酸盐mp87-90℃59.2-氨基-N-[3-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺三氟醋酸盐mp140-150℃60.3-氨基-N-[3-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺三氟醋酸盐mp150-153℃61.3-氨基甲基-N-[3-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺三氟醋酸盐mp150-156℃62.4-氨基-N-[3-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺三氟醋酸盐mp185-188℃63.N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-4-甲基氨基甲基-苯甲酰胺三氟醋酸盐mp130-140℃64.6-氨基甲基-N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-烟酰胺三氟醋酸盐mp145-150℃65.2-氨基甲基-N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-异烟酰胺三氟醋酸盐mp248-250℃66.2-(4-氨基甲基-苯基)-N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-乙酰胺三氟醋酸盐mp251-255℃67.4-氨基甲基-N-[3-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-4-甲基-苯基]-苯甲酰胺三氟醋酸盐mp180-185℃68.1，2，3，4-四氢-异喹啉-7-羧酸-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-酰胺三氟醋酸盐mp153-157℃69.4-(1-氨基-1-甲基-乙基)-N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]苯甲酰胺三氟醋酸盐mp泡沫70.3-(2-氨基-乙基)-N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺三氟醋酸盐mp237-239℃71.N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-4-(2-甲氧基乙基氨基)苯甲酰胺三氟醋酸盐mp＞250℃72.4-氨基甲基-N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-2-氟苯甲酰胺mp＞200℃(分解)
73.6-氨基甲基-吡啶-2-羧酸-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-酰胺mp183-186℃74.5-氨基甲基-N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-烟酰胺mp184℃(分解)75.3-氨基-N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-2-(3，4-二氯-苯基)-丙酰胺三氟醋酸盐mp195-205℃76.3-氨基-N-[3-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-2-(3，4-二氯苯基)-丙酰胺三氟醋酸盐mp138-145℃从适宜的在此提及的起始化合物(这是本领域已知的或以本领域已知的方式获得)开始，以下实施例能类似或相似于被描述的实施例来制备。
77.5-氨基甲基-吡啶-2-羧酸[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-酰胺三氟醋酸盐mp164-170℃78.1，2，3，4-四氢-异喹啉-6-羧酸[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-酰胺三氟醋酸盐mp146℃起始化合物A1.N-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基)-苯-1，4-二胺三氟醋酸盐于环境温度下，在5ml三氟醋酸(TFA)和50ml二氯甲烷的混合物中搅拌N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]氨基甲酸叔-丁基酯(化合物B1)(5.0g，11.1 mmol)6小时。过滤固体并用二氯甲烷洗涤。
产量3.8g(77％)
mp215-220℃1H-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝7.95(1H，s，C5-H)；8.24(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.31(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.35(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.85(1H，s，C2-H)；10.43(2H，s，NH2).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝105.17(C5)；111.53；114.06；116.94；118.44；119.68；121.20；122.76；122.89；123.33；123.47；124.71；126.62；127.49；127.97；138.04；152.81；154.89；155.10；157.92(q，CF3COOH)；161.02.
A2.N-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基)-苯-1，3-二胺三氟醋酸盐以类似于近于上述对位实施例(实施例A1)的方法制备化合物。
mp142-146℃A3.N*3*-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基)-4-甲基-苯-1，3-二胺将(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基)-(2-甲基-5-硝基-苯基)-胺(化合物B3)(820mg，2.07mmol)溶于DMF(50mL)，加入Pt/C(164mg，10％Pt)并将混合物氢化20小时。经过标准后处理后，通过快速色谱法纯化粗产物。
产量422mg(56％)mp255-257℃除非另有指明，从化合物A1和适宜的本领域已知的苯甲酸衍生物开始，以类似于上述酰胺偶联实施例(实施例1)的方式制备下列化合物A4和A5。
A4.7-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基氨基甲酰基]-3，4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸叔-丁基酯mp235-238℃A5.N-[2-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基氨基甲酰基]-2-(3，4-二氯苯基)-乙基]-氨基甲酸叔-丁基酯mp208-214℃A6.N-[2-[3-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基氨基甲酰基]-2-(3，4二氯苯基)-乙基]-氨基甲酸叔-丁基酯从化合物A2和适宜的本领域已知的苯甲酸衍生物开始，以类似于上述酰胺偶联实施例(实施例1)的方式制备标题化合物。
mp90-95℃B1.N-[4-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]氨基甲酸叔-丁基酯在二甲氧基乙烷(500mL)中，于惰性气体下，与二氯-二(三环己基膦)-钯(II)(2.28g，3.1mmol)和含水Na2CO3-溶液(32.8g，位于310mL水中)一起，在80℃下对N-[4-(6-氯嘧啶-4-基氨基)苯基]氨基甲酸叔-丁基酯(化合物C1)(10.1g，31mmol)和4-二苯并呋喃硼酸(9.96g，47mmol)加热4小时。蒸发并提取剩余物后，通过结晶纯化产物。
产量9.5g(67％)mp222-226℃1H-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝1.49(9H，s，(CH3)3)；7.87(1H，s，C5-H)；8.24(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.30(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.35(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.73(1H，s，C2-H)；9.27(1H，s，NH)；9.73(1H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d5)δ/ppm＝28.15(C(CH3)3)；78.70(C(CH3)3)；105.17(C5)；111.39；118.51；120.71；120.86；121.30；121.59；122.85；123.15；123.29；124.47；126.52；127.71；133.86；134.48；152.56；152.92；155.00；156.72；157.95；160.71.
B2.[3-(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基氨基)-苯基]-氨基甲酸叔-丁基酯以类似于上述对位实施例(实施例B1)的方法制备该化合物。
mp234-250℃1H-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝1.52(9H，s；(C(CH3)3)；7.17(2H，m)；8.22(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.27(1H，d，C苯并呋喃-H)；8.45(1H，d，C苯并呋喃-H)； 8.76(1H，s)；9.77(1H，s，NH)；9.82(1H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝27.85(C(CH3)3)；78.47(C(CH3)3)；105.77(C2)；152.48；153.25；155.28(C苯并呋喃)；156.99(C苯并呋喃)；157.70；160.99(C苯并呋喃).
B3.(6-二苯并呋喃-4-基-嘧啶-4-基)-(2-甲基-5-硝基-苯基)-胺将含水Na2CO3-溶液(11.0g，104mmol碳酸盐，位于104mL水中)与(6-氯嘧啶-4-基)-(2-甲基-5-硝基-苯基)-胺(化合物C3)(2.80g，10.6mmol)、4-二苯并呋喃硼酸(3.36g，15.9mmol)和双三苯基膦钯二氯化物(0.74g，1.1mmol)在乙二醇二甲醚(168mL)中搅拌。将该混合物加热到80℃。1小时后，冷却混合物并过滤。产物通过快速硅胶色谱纯化。
产量2.00g(48％)mp210-213℃C1.N-[4-(6-氯嘧啶-4-基氨基)-苯基]氨基甲酸叔-丁基酯于90℃下，将4，6-二氯嘧啶(14.89g，0.1mol)、N-Boc-1，4-苯二胺(20.83g，0.1mol)和二异丙基乙基胺(17.11mL，0.1mol)在正-丁醇(160mL)中加热20小时。蒸发后，提取剩余物并通过结晶纯化。
产量25.5g(80％)
mp165-166℃1H-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝1.47(9H，s，(CH3)3)；6.89(1H，s，C5-H)；7.43(4H，s，Ar)；8.40(1H，s，C2-H)；9.28(1H，s，NH)；9.69(1H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝28.11(C(CH3)3)；79.01(C(CH3)3)；103.93(C5)；118.44；121.30；132.65；135.22；152.47；157.52；158.14；161.02.
C2.[3-(6-氯嘧啶-4-基氨基)-苯基]-氨基甲酸叔-丁基酯从适宜的起始化合物开始，以类似于实施例C1的方法制备标题化合物。
mp107-111℃1H-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝1.48(9H，s；(C(CH3)3)；6.80(1H，s)；7.11(1H，d)；7.22(1H，t)；7.37(1H，d)；7.68(1H，s)；8.44(1H，s)；9.37(1H，s，NH)；9.81(1H，s，NH).
13C-NMR(DMSO-d6)δ/ppm＝28.09(C(CH3)3)；78.89(C(CH3)3)；104.56(C2)；110.08 113.23；114.23；128.67；138.80；139.76；152.40；157.63；158.06；160.97.
C3.(6-氯嘧啶-4-基)-(2-甲基-5-硝基-苯基)-胺于110℃下，将4，6-二氯嘧啶(5.37g，36.0mmol)和2-甲基-5-硝基苯胺(5.48g，36.0mmol)在正-丁醇(58mL)中与二异丙基乙基胺(4.66g，36mmol)加热3天。蒸发混合物，产物通过标准方法纯化。
产量3.1g(27％)mp128-130℃D1.4-[(叔-丁氧基羰基-甲基-氨基)-甲基]-苯甲酸向位于四氢呋喃(THF)(93mL)中的4-甲基氨基甲基-苯甲酸(化合物E1)(2.55g，15.4mmol)内加入三乙胺(1.72g，17.0mmol)和Boc-酐(Boc2O)(4.04g，18.5mmol)。环境温度下1小时后，通过快速色谱纯化剩余物。
产量1.5g(37％)mp131-133℃D2.6-(叔-丁氧基羰基氨基-甲基)-烟酸向位于含水的1N NaOH(60mL)和叔-丁醇(40mL)中的6-氨基甲基-烟酸盐酸化物(化合物E2)(5.35g，28.3mmol)溶液中加入Boc-酐(Boc2O)(6.20g，28.4mmol)并将混合物搅拌过夜。蒸发溶剂后，通过标准方法分离产物。
产量3.57g(50％)mp145-147℃
D3.2-(叔-丁氧基羰基氨基-甲基)-异烟酸从化合物E3开始，以类似于实施例D2的方法制备标题化合物。
mp207℃D4.[4-(叔-丁氧基羰基氨基-甲基)-苯基]-乙酸从适宜的本领域已知起始化合物开始，以类似于实施例D2的方法制备标题化合物。
mp89-91℃D5.4-(1-叔-丁氧基羰基氨基-1-甲基-乙基)-苯甲酸从化合物E4开始，以类似于实施例D2的方法制备标题化合物。
mp205-208℃D6.3-(2-叔-丁氧基羰基氨基-乙基)-苯甲酸将3-氰基甲基-苯甲酸乙基酯(化合物E5)(7.15g，41mmol)溶解在乙醇(200mL)和浓盐酸(5mL)中，加入Pd/C(2g)并将混合物在3巴氢气压力下氢化24小时。然后，过滤、蒸发混合物并用甲醇(120mL)和含水2N NaOH(50mL，0.1mol)处理剩余物并在40℃下加热6小时，过滤，滤液用含水2N盐酸(32mL，64mmol)处理。加入Boc-酐(Boc2O)(9.81g，45mmol)和叔丁醇并在环境温度下搅拌16小时。蒸发混合物，剩余物用二氯甲烷/乙酸乙酯(1∶1，3×30mL)和水提取。蒸发后，用快速色谱法纯化有机相。
产量1.73g(16％)mp121-123℃D7.4-[叔-丁氧基羰基-(2-甲氧基乙基)-氨基]-苯甲酸向位于甲醇(60mL)中的4-[叔-丁氧基羰基-(2-甲氧基乙基)-氨基]-苯甲酸2-甲氧基-乙基酯(化合物E6)(1.37g，3.9mmol)中加入含水2NNaOH(30mL，60mmol)并将溶液在环境温度下搅拌16小时。通过使用含水2N盐酸溶液将pH调节到4，蒸发甲醇，水相用CH2Cl2(4×15mL)提取。干燥(MgSO4)和蒸发后，将粗产物转入到下一步骤中，无需进一步纯化。
产量1.11g(49％)，无色油状物D8.4-(叔-丁氧基羰基氨基-甲基)-2-氟苯甲酸将4-氰基-2-氟苯甲酸(1.965g，11.9mmol)溶解在乙醇和氯仿中，加入Pd/C(5％，700mg)并氢化6小时。过滤混合物并蒸发。将剩余物溶解在含水2N NaOH(12mL，24mmol)和叔丁醇(15mL)中并加入Boc-酐(Boc2O)(2.84g，13mmol)。反应后，蒸发混合物，后处理后，过滤所得产物。
产量2.27g(71％)mp125-127℃(分解)D9.6-(叔-丁氧基羰基氨基-甲基)-吡啶2-羧酸从化合物E7开始，以类似于实施例D2的方法制备标题化合物。
mp238-240℃D10.5-(叔-丁氧基羰基氨基-甲基)-烟酸从化合物E8开始，以类似于实施例D2的方法制备标题化合物。
E1.4-甲基氨基甲基-苯甲酸在环境温度下，用甲胺溶液(40％，75mL，867mmol)处理4-溴甲基-苯甲酸(5g，22.8mmol)4天。蒸发所得混合物，剩余物通过快速色谱纯化。
产率66％mp250-255℃E2.6-氨基甲基-烟酸盐酸化物将6-氰基-烟酸(1g，6.7mmol)溶解在乙醇(100mL)和氯仿(2mL)中并在3巴氢气压力下，使用位于碳上的钯作为催化剂氢化5小时。过滤催化剂后，通过蒸发溶剂分离产物。
产量0.54g(43％)E3.2-氨基甲基-异烟酸盐酸化物从适宜的起始化合物开始，以类似于实施例E2的方法制备标题化合物。
E4.4-(1-氨基-1-甲基-乙基)-苯甲酸盐酸化物将4-(1-甲酰氨基-1-甲基-乙基)-苯甲酸乙基酯(2.97g，12.6mmol)加入到水(30mL)、二烷(15mL)和浓盐酸(3.01mL，36.1mmol)的混合物中，并将该混合物加热到100℃ 12小时。蒸发反应混合物并从乙醇中将剩余物结晶。
产量2.15g(79％)mp310-318℃E5.3-氰基甲基-苯甲酸甲基酯向位于乙腈(230mL)中的3-溴甲基-苯甲酸甲基酯(25.28g，0.11mol)中加入氰化钾(14.3g，0.22mmol)和18-冠-6(1.00g，2.6mmol)并将混合物回流加热24小时。过滤后，将粗产物转入到下一步骤中，无需进一步纯化。
产量18.5g(96％)E6.4-(叔-丁氧基羰基-(2-甲氧基乙基)-氨基]-苯甲酸2-甲氧基-乙基酯向4-(2-甲氧基-乙基氨基)-苯甲酸2-甲氧基乙基酯(化合物F1)(1.93g，7.6mmol)中加入Boc-酐(Boc2O)(2.28g，10.5mmol)并将混合物加热到50℃ 30小时。冷却后，对混合物进行硅胶色谱。
产量1.37g(51％)，无色油状物E7.6-氨基甲基-吡啶-2-羧酸盐酸化物将6-氰基-吡啶-2-羧酸(化合物F2)(250mg，1.6mmol)溶解在乙醇(100mL)中，加入浓盐酸(1mL)和Pd/C(150mg)并在3巴氢气压力下将混合物氢化6小时。过滤催化剂并将粗产物转入到下一步骤中，无需进一步纯化。
产量255mg(85％)mp214-221℃E8.5-氨基甲基-烟酸将5-氨基甲酰基-烟酸(化合物F3)(5.00g)和三氯氧化磷(50mL，0.55mol)加热到100℃ 5小时。通常后处理后，将粗产物溶解在用盐酸酸化的乙醇中并用Pd/C(1.00g，5％Pd)在4巴氢气压力下氢化16小时。过滤催化剂后，蒸发混合物，用乙醇处理剩余物并用氯仿提取几次。
产量0.21g(5％)F1.4-(2-甲氧基-乙基氨基)-苯甲酸甲氧基乙基酯向位于DMF(60mL)中的4-氨基苯甲酸(4.11g，30.0mmol)和2-氯乙基-甲基-醚(17.01g，180mmol)内加入碳酸钾(41.4g，0.30mol)和碘化钾(1.25g，7.5mmol)并将混合物回流加热24小时。冷却后，过滤盐并蒸发滤液。剩余物用水(30mL)和TBME(100mL)提取，干燥并蒸发TBME-相。所得油状物通过色谱法纯化。
产量4.60g(60％)，浅黄色油状物
F2.6-氰基-吡啶2-羧酸将6-氨基甲酰基-吡啶-2-羧酸(化合物G1)(500mg，3mmol)和三氯氧化磷(POCl3)(15mL)加热到回流温度2小时。在常规方法下后处理混合物后，粗产物无需任何纯化就能被进一步使用。
产量280mg(63％)mp180-181℃F3.5-氨基甲酰基-烟酸在含水浓氨溶液(40mL，25％)中将吡啶-3，5-二羧酸单苄基酯(化合物G2)(1.92g，7.5mmol)加热到90℃ 6小时。冷却后，蒸发溶液并将剩余物以粗产物状态使用，无需进一步纯化。
产量1.46gmp288℃G1.6-氨基甲酰基-吡啶-2-羧酸将吡啶-2，6-二羧酸单苄基酯(化合物H1)(1g，3.8mmol)和含水的25％氨溶液(40mL)加热到90℃ 6小时。冷却后蒸发混合物并用乙醚洗涤。
产量800mgmp231℃G2.吡啶-3，5-二羧酸单苄基酯将吡啶-3，5-二羧酸(10.0g，60mmol)、苄醇(69mL，0.67mol)、水(24mL)和硫酸(3.3mL)的混合物在回流温度下加热2小时。将该混合物加入到含水饱和NaHCO3-溶液(600mL)中并用二氯甲烷(4×100mL)处理水相。将水相调节到pH 3.8并过滤所得固体。
产量1.99g(13％)H1.吡啶-2，6-二羧酸单苄基酯将吡啶2，6-二羧酸(16.7g，0.1mol)和苄醇(115mL，1.0mol)在硫酸(5.5mL)和水(40mL)中于回流温度下加热2小时。冷却后，用含水NaHCO3溶液(约1L)中和溶液并用氯仿提取。酸化水相并用氯仿(250mL)提取，干燥并蒸发有机相。剩余物用二乙醚处理并过滤所得固体。产量1.99g(8％)mp137-138℃
商业应用本发明化合物具有有价值的药理学性质，其能使得它们在商业上应用。
这样，例如，它们抑制蛋白激酶特别是蛋白激酶B(PKB)/Akt的一种或多种同功型，并表现出细胞活性，而且它们预期能在对其抑制有响应的疾病的治疗中有商业应用。
蛋白激酶指的是对底物蛋白中酪氨酸、丝氨酸或苏氨酸残基的羟基有活性的酶。特别的是，蛋白激酶催化了ATPγ磷酸酯的水解并将这个磷酸酯转移到酪氨酸、丝氨酸或苏氨酸残基上以形成磷酸酯联接。
蛋白激酶的抑制以及类似的术语指的是抑制一种或多种蛋白激酶特别是选自对癌症的治疗有病理生理学重要性的蛋白激酶组的蛋白激酶的活性和功能。在这个激酶组内，具有同功型Akt1(PKBα)，Akt2(PKBβ)和Akt3(PKBγ)的蛋白激酶B(PKB)/Akt是特别重要的。抑制PKB/Akt的活性和类似的术语指的是直接或间接(途径依赖性)抑制PKB/Akt激酶的活性。
在本发明的含义内特别令人感兴趣的还有那些本发明的化合物，其选择性地抑制蛋白激酶B(PKB)/Akt或其一种或多种同功型，或牵涉在疾病状态中特别是癌症中的最相关或作为病因的蛋白激酶选集，这指的是，当与具有能抑制像蛋白激酶A(PKA)这样的其它蛋白激酶活性的化合物抑制作用相比，那些化合物对所述蛋白激酶具有更大的抑制作用。
蛋白激酶抑制剂的细胞活性和类似的术语指的是与蛋白激酶抑制有关的任何细胞作用，特别是确定的底物蛋白的脱磷酸化，其引起例如诱导凋亡或化学敏感化。化学敏感化和类似的术语按通常用于凋亡刺激的敏感化肿瘤细胞的宽泛意义理解。这些刺激包括，例如，死亡受体的效应剂，和存活途径，以及细胞毒/化疗和靶向剂，最后还有放射。诱导凋亡和类似的术语用于鉴定以下化合物，其在与这种化合物或与常规用于治疗的其它化合物联用下接触的细胞中能执行程序性细胞死亡。“凋亡”通过被接触细胞的复杂生化事件来确定，例如半胱氨酸特异性蛋白酶(“胱天蛋白酶”)的激活和染色质断裂。在与化合物接触的细胞中诱导凋亡不是必须与抑制细胞增殖结合的。优选的是，抑制增殖和/或诱导凋亡对具有异常细胞生长的细胞是有特异性的。
此外，本发明化合物能在细胞和组织中抑制蛋白激酶的活性，引起向脱磷酸化的底物蛋白偏移，和，作为功能性结果，例如诱导凋亡，细胞周期停滞或对化疗或靶向特异癌症药物的敏感化。在优选的实施方案中，对PKB/Akt的特异性抑制，单独或与标准的细胞毒或靶向癌症药物组合，能诱导在此提及的细胞效应。
本发明化合物具有抗增殖和/或促凋亡和/或化学敏感化的性质。由此，本发明的化合物能用于治疗恶性细胞。因此，本发明的化合物预期能在哺乳动物例如人类中产生抗增殖和/或促凋亡和/或化学敏感化的作用。
这样，本发明化合物有治疗、改善或预防在此记载的具有良性或恶性行为的疾病的商业应用，例如用于抑制细胞瘤形成。
“瘤形成”由显示异常细胞增殖和/或存活和/或阻断分化的细胞所界定。良性瘤形成述及细胞的过度增殖，不能在体内形成侵略性的转移性肿瘤。相反，恶性瘤形成述及具有多细胞和生化异常性的细胞，能形成全身性疾病，例如在远端器官中形成肿瘤转移。
本发明化合物能优选用于治疗恶性瘤形成(也被描述为癌症)，其特征在于肿瘤细胞最终转移到远端器官或组织中。能用本发明化合物治疗的恶性瘤形成的实例包括实体瘤和血液肿瘤。实体瘤的实例有乳腺、膀胱、骨、脑、中枢和外周神经系统、结肠、内分泌腺(例如甲状腺和肾上腺皮质)、食道、子宫内膜、生殖细胞、头和颈、肾、肝、肺、喉和下咽部、间皮瘤、卵巢、胰腺、前列腺、直肠、肾脏、小肠、软组织、睾丸、胃、皮肤、输尿管、阴道和外阴的肿瘤。恶性瘤形成包括遗传肿瘤，例如视网膜母细胞瘤和维尔姆斯瘤。此外，恶性瘤形成包括所述器官中的原发性肿瘤和远端器官相应的继发性肿瘤(“肿瘤转移”)。血液肿瘤的实例有白血病和淋巴瘤的侵略性和缓慢进展(indolent)形式，即非霍奇金病，慢性和急性髓性白血病(CML/AML)、急性成淋巴细胞白血病(ALL)、霍奇金病、多发性骨髓瘤和T-细胞淋巴瘤。还包括骨髓增生异常综合征、浆细胞瘤形成、瘤外综合征、未知原发位点的癌症以及与AIDS有关的恶性肿瘤。
需要指明的是，癌症疾病以及恶性瘤形成不是必须要求在远端器官中形成转移。某些肿瘤通过其侵略性的生长性能对原始器官本身产生破坏性影响。这些能引起组织和器官结构的破坏，最终导致指定器官功能的衰竭。
肿瘤细胞增殖也能实现正常细胞的行为和器官的功能。例如，新血管的形成，即被描述为新血管形成的过程，通过肿瘤或肿瘤转移而诱导。本发明化合物将可商业应用于治疗由良性细胞增殖或肿瘤细胞增殖引起的病理生理学相关过程，例如但不限于由血管内皮细胞的非生理性增殖引起的新血管形成。
抗药性对标准癌症治疗频繁失败是特别重要的。这个抗药性由多种细胞和分子机制引起。抗药性一方面由以PKB/Akt作为关键信号激酶的抗凋亡存活信号的组成型活化引起。抑制PKB/Akt能引起对标准化疗或靶向特异性癌症治疗的再度敏感化。结果是，本发明化合物的商业应用性不限于癌症患者的一线治疗。在本发明的优选实施方案中，对肿瘤化疗或靶向特异性抗肿瘤药物有抗性的癌症患者也能用这些化合物进行治疗，用于例如二线或三线治疗周期。特别的是，本发明化合物能与标准的化疗或靶向药物联用以使肿瘤对这些试剂再度敏感。
在本文提及的本发明化合物的性质、功能和适用性的上下文中，本发明化合物预期突出之处在于与之有关的有价值和合乎希望的效果，例如低毒性、普遍的高生物利用度(例如良好的肠内吸收)、高治疗窗、没有显著的副作用，和/或与其治疗和药学适应性有关的其它有益效果。
本发明还包括治疗包括人在内的哺乳动物的方法，所述哺乳动物患有上述病症、病、紊乱或疾病中的一种。该方法的特征在于给予需要这种治疗的受治者药理学活性和治疗有效且可耐受量的一种或多种本发明化合物。
本发明还包括在包括人在内的哺乳动物中治疗、预防或改善对抑制蛋白激酶特别是PKB/Akt有响应的疾病的方法，其包含给予所述哺乳动物药理学活性和治疗有效且可耐受量的一种或多种本发明化合物。
本发明还包括在包括人在内的哺乳动物中治疗具有良性或恶性行为的(高度)增殖疾病和/或对诱导凋亡有响应的疾病，例如癌症，特别是那些上述记载的癌症疾病的方法，其包含给予所述哺乳动物药理学活性和治疗有效且可耐受量的一种或多种本发明化合物。
本发明还包括在包括人在内的哺乳动物中抑制细胞(高度)增殖或阻止异常细胞生长的方法，其包含给予所述哺乳动物药理学活性和治疗有效且可耐受量的一种或多种本发明化合物。
本发明还包括在包括人在内的哺乳动物中，在具有异常细胞生长的细胞内诱导凋亡的方法，其包含给予所述哺乳动物药理学活性和治疗有效且可耐受量的一种或多种本发明化合物。
本发明还包括在包括人在内的哺乳动物中，在体内调节蛋白激酶活性、抑制细胞增殖和/或诱导凋亡用于治疗对之有响应的疾病例如上述提及的那些疾病的方法，其包含给予所述哺乳动物药理学活性和治疗有效且可耐受量的一种或多种本发明化合物。
本发明还包括在包括人在内的哺乳动物中，通过对化疗或靶向特异性抗肿瘤药物的敏感化来治疗恶性瘤形成例如癌症的方法，其包含给予所述哺乳动物药理学活性和治疗有效且可耐受量的一种或多种本发明化合物。
本发明还包括在包括人在内的哺乳动物中，治疗良性和/或恶性瘤形成例如在此提及的那些疾病如癌症的方法，其包含给予所述哺乳动物药理学活性和治疗有效且可耐受量的一种或多种本发明化合物。
本发明还包括在包括人在内的哺乳动物中，用于导致对化疗或靶向特异性抗肿瘤药物敏感化的方法，其包含给予所述哺乳动物药理学活性和治疗有效且可耐受量的一种或多种本发明化合物。
本发明还涉及本发明化合物用于生产能治疗、预防或改善对蛋白激酶抑制剂治疗特别是PKB/Akt抑制剂治疗有响应的疾病例如在此提及的那些疾病如癌症的药物组合物中的用途。
本发明还涉及本发明化合物用于生产能治疗、预防或改善对阻止异常细胞生长和/或诱导凋亡有响应的疾病例如在此提及的那些疾病特别是癌症的药物组合物中的用途。
本发明还涉及本发明化合物用于生产能在哺乳动物中治疗、预防或改善具有良性或恶性行为的高度增殖性疾病和/或对诱导凋亡有响应的疾病例如在此提及的那些疾病特别是癌症的药物组合物中的用途。
本发明还涉及本发明化合物用于生产能治疗良性和/或恶性瘤形成例如癌症的药物组合物中的用途。
本发明还涉及本发明化合物用于生产能用于导致对化疗或靶向特异性抗肿瘤剂敏感化的药物组合物中的用途。
本发明还涉及本发明化合物用于生产能用于导致对在此提及的那些疾病特别是癌症的放疗敏感化的药物组合物中的用途。
本发明还涉及本发明化合物用于生产能治疗对蛋白激酶抑制剂治疗敏感并不同于细胞瘤形成的疾病的药物组合物中的用途。这些非恶性疾病包括但不限于良性前列腺增生、神经纤维瘤病和皮肤病。
本发明还涉及包含一种或多种本发明化合物以及药学上可接受的载体或稀释剂的药物组合物。
本发明还涉及包含一种或多种本发明化合物以及药学上可接受的助剂、赋形剂或介质的组合，例如用于在哺乳动物中治疗、预防或改善具有良性或恶性行为的(高度)增殖性疾病和/或对诱导凋亡有响应的疾病例如癌症。
本发明还涉及基本上由治疗有效且可耐受量的一种或多种本发明化合物以及常用的药学上可接受的介质、稀释剂和/或赋形剂组成的组合物，用于治疗例如对抑制蛋白激酶特别是PKB/Akt敏感的疾病。
本发明还涉及本发明化合物，其用于治疗例如在治疗、预防或改善对抑制蛋白激酶特别是PKB/Akt敏感的疾病，例如具有良性或恶性行为的(高度)增殖性疾病和/或对诱导凋亡有响应的疾病，例如在此提及的那些疾病，特别是癌症的用途。
本发明还涉及本发明化合物，其用于治疗，特别是治疗在此提及的那些疾病。
本发明还涉及具有蛋白激酶抑制性能，特别是PKB/Akt抑制性能的本发明化合物。
本发明还涉及具有抗增殖和/或凋亡诱导活性的本发明化合物。
此外，本发明涉及制造品，其含有包装材料和包含在所述包装材料中的药剂，其中药剂对于抑制蛋白激酶的作用，特别是抑制蛋白激酶B/Akt，改善蛋白激酶介导的疾病的症状，在治疗上是有效的，其中包装材料包含标签或包装插页(insert)，其指示药剂可用于预防或治疗蛋白激酶介导的疾病，其中所述的药剂包含一种或多种本发明化合物。或者，包装材料、标签和包装插页与一般被视为用于具有相关应用的标准包装材料、标签和包装插页的那些相比拟或相似。
本发明药物组合物通过本身为本领域技术人员已知和本领域技术人员熟悉的方法制备。对药物组合物来说，使用本发明化合物(＝活性化合物)本身或优选其与适宜药学助剂和/或赋形剂组合，例如是片剂、包衣片、胶囊、囊片、栓剂、贴剂(例如作为TTS)、乳液、混悬液、凝胶或溶液的形式，活性化合物的有利含量为0.5到95％，其中，通过适当选择助剂和/或赋形剂，给药形式(例如缓释形式或肠溶形式)完全适应于活性化合物和/或所希望的作用起效。
本领域技术人员基于他/她的专业知识熟悉适于所希望的药物剂型(formulation)、制剂(preparation)或组合物的助剂、介质、赋形剂、稀释剂、载体或辅剂。除了溶剂外，也能使用凝胶形成剂、软膏基质和其它活性化合物赋形剂，例如抗氧化剂、分散剂、乳化剂、防腐剂、增溶剂、着色剂、络合剂或渗透促进剂。
取决于被治疗或预防的特定疾病，通常被给予以治疗或预防该疾病的其它治疗活性剂，可以任选与本发明化合物共同给予。在此使用的通常被给予以治疗或预防特定疾病的其它治疗剂是已知适于所治疾病的。
例如，本发明化合物可以与用于治疗先前提及疾病的一种或多种标准治疗剂组合。
在一个特别的实施方案中，本发明化合物可以与一种或多种本领域已知的抗癌药例如一种或多种化疗和/或靶向特异性抗癌药组合。
用于治疗癌症的已知化疗抗癌药的实例包括但不限于(i)烷化/氨甲酰化剂例如环磷酰胺(Endoxan)、异环磷酰胺(Holoxan)、噻替派(Thiothepa Lederle)、美法仑(Alkeran)或氯乙基亚硝基脲(BCNU)；(ii)铂衍生物像顺铂(PlatinexBMS)、奥沙利铂或卡铂(CarboplatBMS)；(iii)抗有丝分裂剂/微管蛋白抑制剂例如长春花碱类(长春新碱、长春碱、长春瑞滨、长春氟宁)，紫杉烷类例如紫杉醇(Paclitaxel)、泰索帝(Docetaxel)和类似物以及新的制剂和其偶联物，epothilones例如Epothilone B(Patupilone)、Azaepothilone(Ixabepilone)或ZK-EPO，全合成的epothilone B类似物；(iv)拓补异构酶抑制剂例如蒽环类抗生素例如多柔比星(Adriblastin)，鬼臼乙叉苷类例如依托泊苷(Etopophos)和喜树碱类似物例如托泊替康(Hycamtin)；(v)嘧啶类拮抗剂例如5-氟尿嘧啶(5-FU)、卡培他滨(Xeloda)、阿拉伯糖胞嘧啶/阿糖胞苷(Alexan)或吉西他滨(Gemzar)；(vi)嘌呤类拮抗剂例如6-巯嘌呤(Puri-Nethol)、6-硫基鸟嘌呤或氟达拉滨(Fludara)和最后(vii)叶酸拮抗剂例如氨甲喋呤(Farmitrexat)和培美曲塞(Alimta)。
用在实验性或标准癌症治疗中的靶向特异性抗癌药类的实例包括但不限于(i)激酶抑制剂例如Glivec(Imatinib)、ZD-1839/lressa(Gefitinib)、Bay43-9006(Sorafenib)、SU11248(Sutent)或OSI-774/Tarceva(Erlotinib)；(ii)蛋白酶体抑制剂例如PS-341(Velcade)；(iii)热休克蛋白90抑制剂像17-烯丙基氨基格尔德霉素(17-AAG)；(iv)血管靶向剂(VTAs)像Cobretastatin A4磷酸酯或AVE8062/AC7700和抗血管生成药物像VEGF抗体Avastin(Bevacizumab)或KDR酪氨酸激酶抑制剂PTK787/ZK222584(Vatalanib)；(v)单克隆抗体例如郝塞汀(Trastuzumab)、Mabthera/Rituxan(Rituximab)、C225/Erbitux(Cetuximab)或Avastin(见上)以及单克隆抗体和抗体片段的突变体和偶联物；(vi)基于寡核苷酸的治疗剂像G-3139/Genasense(Oblimersen)；(vii)蛋白酶抑制剂；(viii)激素治疗剂例如抗雌激素药(如他莫昔芬)、抗雄激素药(如氟他胺或康士德)、LHRH类似物(如亮丙立德、戈舍瑞林或曲普瑞林)以及芳香酶抑制剂；(ix)Toll-样受体9(TLR9)激动剂像Promune以及(x)I/II类组蛋白脱乙酰酶(HDACs)抑制剂，即SAHA，NVP-LBH589、缩肽/FK228或MS275。
用在组合治疗中的其它靶向特异性抗癌药的实例包括博莱霉素、类视黄醇如全反式维A酸(ATRA)、DNA甲基转移酶抑制剂如2-脱氧胞苷衍生物地西他滨(Docagen)、阿拉诺新、细胞因子例如白介素-2或干扰素如干扰素α2或干扰素-γ、TRAIL、DR4/5激动性抗体、FasL和TNF-R激动剂。
作为用在本发明组合治疗中的示例性抗癌药，以下药物是可以被提及的，但不限于此5FU、放线菌素D、
ABAREUX，ABCIXIMAB，ACLARUBICIN，ADAPALENE，ALEMTUZUMAB，ALTRETAMINE，AMINOGLUTETHIMIDE，AMIPRILOSE，AMRUBICIN，ANASTROZOLE，ANCITABINE，ARTEMISININ，AZATHIOPRINE，BASILIXIMAB，BENDAMUSTINE，BEXXAR，BICALUTAMIDE，BLEOMYCIN，BROXURIDINE，BUSULFAN，CAPECITABINE，CARBOPLATIN，CARBOQUONE，CARMUSTINE，CETRORELIX，CHLORAMBUCIL，CHLORMETHINE，CISPLATIN，CLADRIBINE，CLOMIFENE，CYCLOPHOSPHAMIDE，DACARBAZINE，DACLIZUMAB，DACTINOMYCIN，DAUNORUBICIN，DESLOREUN，DEXRAZOXANE，DOCETAXEL，DOXIFLURIDINE，DOXORUBICIN，DROLOXIFENE，DROSTANOLONE，EDELFOSINE，EFLORNITHINE，EMITEFUR，EPIRUBICIN，EPITIOSTANOL，EPTAPLATIN，ERBITUX，ESTRAMUSTINE，ETOPOSIDE，EXEMESTANE，FADROZOLE，FINASTERIDE，FLOXURIDINE，FLUCYTOSINE，FLUDARABINE，FLUOROURACIL，FLUTAMIDE，FORMESTANE，FOSCARNET，FOSFESTROL，FOTEMUSTINE，FULVESTRANT，GEFITINIB，GEMCITABINE，GLIVEC，GOSERELIN，GUSPERIMUS，HERCEPTIN，IDARUBICIN，IDOXURIDINE，IFOSFAMIDE，IMATINIB，IMPROSULFAN，INFLIXIMAB，IRINOTECAN，LANREOTIDE，LETROZOLE，LEUPRORELIN，LOBAPLATIN，LOMUSTINE，MELPHALAN，MERCAPTOPURINE，METHOTREXATE，METUREDEPA，MIBOPLATIN，MIFEPRISTONE，MILTEFOSINE，MIRIMOSTIM，MITOGUAZONE，MITOLACTOL，MITOMYCIN，MITOXANTRONE，MIZORIBINE，MOTEXAFIN，NARTOGRASTIM，NEBAZUMAB，NEDAPLATIN，NILUTAMIDE，NIMUSTINE，OCTREOTIDE，ORMELOXIFENE，OXALIPLATIN，PACLITAXEL，PALIVIZUMAB，PEGASPARGASE，PEGFILGRASTIM，PENTETREOTIDE，PENTOSTATIN，PERFOSFAMIDE，PIPOSULFAN，PIRARUBICIN，PLICAMYCIN，PREDNIMUSTINE，PROCARBAZINE，PROPAGERMANIUM，PROSPIDIUMCHLORIDE，RALTITREXED，RANIMUSTINE，RANPIRNASE，RASBURICASE，RAZOXANE，RITUXIMAB，RIFAMPICIN，RITROSULFAN，ROMURTIDE，RUBOXISTAURIN，SARGRAMOSTIM，SATRAPLATIN，SIROLIMUS，SOBUZOXANE，SPIROMUSTINE，STREPTOZOCIN，TAMOXIFEN，TASONERMIN，TEGAFUR，TEMOPORFIN，TEMOZOLOMIDE，TENIPOSIDE，TESTOLACTONE，THIOTEPA，THYMALFASIN，TIAMIPRINE，TOPOTECAN，TOREMIFENE，TRASTUZUMAB，TREOSULFAN，TRIAZIQUONE，TRIMETREXATE，TRIPTORELIN，TROFOSFAMIDE，UREDEPA，VALRUBICIN，VERTEPORFIN，VINBLASTINE，VINCRISTINE，VINDESINE，VINORELBINE，VOROZOLE和ZEVALIN.
本领域技术人员基于他/她的专业知识知道共给药的其它治疗剂的日总剂量以及给药形式。所述的日总剂量可在很宽的范围内变化。
在本发明的实践中，本发明化合物可以与一种或多种标准治疗剂，特别是本领域已知的抗癌药例如上述提及的这些药物(如化疗和/或靶向特异性抗癌药)在组合治疗中分开、连续、同时或按时间顺序交错给予(例如作为合并的单位剂型，分开的单位剂型，相邻的离散单位剂型，固定或非固定组合，部件式药盒(kit-of-parts)或混合物)。
在这个情况下，本发明还涉及含有第一活性成分和第二活性成分的组合，其中第一活性成分是至少一种本发明化合物，第二活性成分是至少一种标准治疗剂，特别是至少一种本领域已知的抗癌药例如一种或多种上述提及的药物，用于分开、连续、同时或按时间顺序交错用于治疗，例如治疗、预防或改善对蛋白激酶抑制剂治疗有响应的疾病，特别是对PKB/Akt抑制剂治疗有响应的疾病，例如在哺乳动物中具有良性或恶性行为的高度增殖性疾病和/或对诱导凋亡有响应的疾病，例如在此提及的那些疾病，特别是癌症。
根据本发明，术语“组合”可以以固定组合、非固定组合或部件式药盒的形式存在。
“固定组合”被定义为其中所述的第一活性成分和所述的第二活性成分在一个单元剂量中或单一实体中一起存在的组合。“固定组合”的一个实例是其中所述的第一活性成分和所述的第二活性成分以用于同时给药的混合形式(例如以制剂形式)存在的药物组合物。“固定组合”的另一个实例是其中所述的第一活性成分和所述的第二活性成分存在于一个单元中但没有混合的药物组合。
“部件式药盒”被定义为其中所述的第一活性成分和所述的第二活性成分以多于一个单元的形式存在的组合。“部件式药盒”的一个实例是其中所述的第一活性成分和所述的第二活性成分分开存在的组合。部件式药盒的组分可以分开、连续、同时或按时间顺序交错给予。
本发明还涉及含有第一活性成分和第二活性成分和任选药学上可接受的载体或稀释剂用于在治疗中分开、连续、同时或按时间顺序交错使用的药物组合物，其中所述的第一活性成分至少一种本发明化合物，第二活性成分是至少一种标准治疗剂，特别是本领域已知的抗癌药，如一种或多种上述提及的药物。
本发明还涉及含有第一活性成分和药学上可接受的载体或稀释剂的制剂以及第二活性成分和药学上可接受的载体或稀释剂的制剂用于在治疗中分开、连续、同时或按时间顺序交错使用的部件式药盒，其中所述的第一活性成分是本发明化合物，第二活性成分是标准治疗剂，特别是本领域已知的抗癌药，如上述提及药物中的一个。任选地，所述的药盒含有说明其治疗用途的说明书，例如用以治疗对抑制蛋白激酶特别是蛋白激酶B(PKB)/Akt有响应的良性和/或恶性瘤形成。
本发明还涉及含有至少一种本发明化合物以及至少一种已知治疗剂特别是至少一种本领域已知的抗癌药用于同时、连续或分开给药的组合制剂。
此外，本发明还涉及在患者中治疗对抑制蛋白激酶特别是蛋白激酶B(PKB)/Akt有响应的疾病和/或紊乱例如癌症的方法，其包含在组合治疗中向需要这种治疗的患者分开、同时、连续或按时间顺序交错给予药学活性和治疗有效且可耐受量的药物组合物，其中该药物组合物含有本发明化合物以及药学上可接受的载体或稀释剂，以及药学活性和治疗有效且可耐受量的一种或多种标准治疗剂，特别是一种或多种本领域已知的抗癌药，例如一种或多种在此提及的药物。
此外，本发明涉及在患者中治疗、预防或改善(高度)增殖性疾病和/或对诱导凋亡有响应的疾病例如良性或恶性瘤形成的方法，特别是在此提及的这些癌症疾病中的任何一个，该方法包含给予本发明组合。
本发明还涉及商业包装，其含有一种或多种本发明化合物以及针对与一种或多种标准治疗剂例如一种或多种化疗剂和/或靶向特异性抗癌药如在此提及的那些药物中的任意一个同时、连续或分开使用的说明书。
本发明还涉及商业包装，其基本上由一种或多种本发明化合物作为唯一活性成分以及针对与一种或多种标准治疗剂例如本领域已知的抗癌药如在此提及的那些药物中的任意一个同时、连续或分开使用的说明书。
本发明还涉及商业包装，其包含一种或多种本领域已知的抗癌药如在此提及的那些药物中的任意一个以及针对与一种或多种本发明化合物同时、连续或分开使用的说明书。
在本发明组合治疗情况下提及的组合物、组合、制剂、剂型、药盒或包装也可以包括多于一种的本发明化合物和/或多于一种的标准治疗剂例如所提及的本领域已知的抗癌药。
另外，本发明还涉及具有蛋白激酶抑制特别是PKB/Akt抑制性能的本发明药物组合或组合物。
本发明还涉及具有抗-(高度)增殖和/或诱导凋亡活性的本发明药物组合或组合物。
本发明还涉及在患者中治疗对抑制蛋白激酶有响应的疾病和/或紊乱例如癌症的方法，其包含给予需要这种治疗的患者在此记载的组合、组合物、剂型、制剂或药盒。
本发明还涉及组合物、组合、剂型、制剂或药盒在生产用于治疗、预防或改善对抑制蛋白激酶特别是蛋白激酶B(PKB)/Akt有响应的疾病和/或紊乱例如在此提及的那些疾病特别是癌症的药学产品例如商业包装或药物中的用途。
本发明还涉及一种或多种本发明化合物用于生产与化疗剂或靶向特异性药剂例如在此提及的抗癌药中的任何一个组合用于治疗癌症特别是治疗上述提及的那些癌症疾病中之一的药物中的用途。
本发明组合或部件式药盒的第一和第二活性成分可以以分开的剂型提供(即彼此独立)，其随后在组合治疗中一起用于同时、连续、分开或按时间顺序交错使用；或是作为组合包装的分开组分被一起包装并呈现，用于在组合治疗中同时、连续、分开或按时间顺序交错使用。
本发明组合或部件式药盒的第一和第二活性成分的药物剂型形式能够是相似的，即两个成分都形成单独的片剂或胶囊，或者能够是不同的，即适于不同的给药形式，例如一个活性成分配制成片剂或胶囊，另一个配制成例如静脉内给药的形式。
本发明组合、组合物或药盒的第一和第二活性成分的量可以合在一起构成用于治疗、预防或缓解(高度)增殖性疾病特别是在此提及的那些疾病之一的治疗有效量。
此外，本发明化合物能用在癌症术前或术后的治疗中。
此外，本发明化合物可与放疗组合使用，特别是用于使癌症患者对标准放疗敏感化。
本发明组合指的是以固定组合形式(固定的单元剂量形式)含有本发明化合物以及其它活性抗癌药的组合物，或是含有以离散分开的剂量形式(非固定组合)存在的所述两个活性成分的药物包装。对于含有所述两个活性成分的药物包装来说，活性成分优选被包装成适于改善顺应性的凸泡片(blister cards)。
每个凸泡片优选包含一日治疗所取的药物。如果以不同的日次数取药，那么药物能根据不同的日取药次数范围(例如早上和晚上，或早上、中午和晚上)放置在凸泡片的不同区段上。用于以特定日次数一起取的药物的凸泡腔能调整为适应各个日次数范围。不同的日次数当然也以清楚可见的方式呈现在凸泡上，当然还可能的是，例如指示取药时段，例如声明次数。
所述每日区段可以代表凸泡片的一行，然后在这列上按时间顺序标识日次数。
必须以特定日次数一起获取的药物一起放置在凸泡片的适宜时间上，优选隔开狭窄的距离，以允许它们能容易地从凸泡中被推出，并具有不会忘记从凸泡中取得所述剂量形式的效果。
可以以本领域可用的通常可接受的给药方式的任何一个进行本发明药物组合物或组合的给药。适宜给药方式的说明性实例包括静脉内、口服、经鼻、胃肠外、局部、经皮和直肠递送。口服和静脉内递送是优选的。
对于皮肤病的治疗来说，本发明的化合物特别以适于局部施用的那些药物组合物的形式给予。对于药物组合物的制备来说，本发明的化合物(＝活性化合物)优选与适宜的药学辅剂混合并进一步加工得到适宜的药物剂型。适宜的药物剂型是例如粉末、乳液、混悬液、喷雾剂、油、软膏、脂肪软膏、乳膏、糊剂、凝胶或溶液。
本发明的药物组合物通过本身已知的方法制备。活性化合物的剂量为蛋白激酶的惯用量级。这样，治疗皮肤病的局部施用形式(例如软膏)包含浓度为例如0.1-99％的活性化合物。全身治疗中的惯用剂量(口服)为0.3到30mg/kg每天，(静脉内递送)为0.3到30mg/kg/h。
理想剂量方案的选择和药物治疗的持续时间，尤其是在每种情况下需要的活性化合物最佳给药剂量和方式，能由本领域技术人员在他/她专业知识的基础上确定。
生物学研究ΔPHAkt1、Akt1(活性)、Akt1(无活性)、PDK1和PKA的表达及纯化对生化试验来说，在SF9昆虫细胞中与PDK1共表达的且没有其PH域的ΔPHAkt1作为GST融合蛋白使用(命名为GST-ΔPH-Akt1；107-480aa；在pAcG1载体(BD Biosciences Pharmingen)中克隆)。使用谷胱甘肽亲和色谱通过标准规程纯化蛋白质。
对生化Akt1试验来说，包含N-末端His6标记物的重组全长人Akt1在被杆状病毒感染的Sf21昆虫细胞中克隆并表达。Akt1通过GST-MAPKAP-K2和PDK1活化，并在Ni2+/NTA-琼脂糖(agrose)和谷胱甘肽琼脂糖(Upstate，UK；#14-276)上再度提纯。
对生化Akt1(无活性)试验来说，包含N-末端His6标记物的重组全长人Akt1在被杆状病毒感染的Sf21昆虫细胞中克隆并表达。使用Ni2+/NTA-琼脂糖(Upstate，UK；#14-279)来纯化酶。
对生化Akt1(无活性)试验来说，包含N-末端His6标记物的重组全长人PDK1在被杆状病毒感染的Sf21昆虫细胞中克隆并表达。使用Ni2+/NTA-琼脂糖来纯化酶。
对生化PKA试验来说，PKA的催化亚单位在大肠杆菌中作为His-标记的人重组蛋白表达，并相应地被纯化(PanVera，USA；#R3791)。
生化ΔPH Akt1试验根据本发明，为了研究Akt的抑制，已经开发了基于闪烁板(flashplate)的试验。
Akt1试验是使用没有PH域并在昆虫细胞中与PDK1共表达的Akt1进行的生化试验。GST-ΔPH-Akt1试验在96孔板中进行，于30℃下，在100μl反应缓冲液中(50nM HEPES，pH7.5；3mM MgCl2；3mMMnCl2；3μM Na-Orthovanadat；1mM DTT；1μg/ml PEG8000)，孵育100ng/孔GST-ΔPH-Akt1、100ng/孔的组蛋白2B(Roche，#223514)作为底物、10μl本发明化合物(在二甲亚砜(DMSO)中溶解试验化合物形成10mM溶液，随后稀释)和100nM ATP(包括33p-ATP)80分钟。反应通过加入100μl终止缓冲液(2％H3PO4，5分钟)来终止，并用洗涤缓冲液(0.9％NaCl)洗3次。依赖于蛋白底物组蛋白2B中33P并入，检测是基于磷酸化蛋白与闪烁体包覆的闪烁板(NEN，USA；#SMP-200)的粘附来进行。该磷酸化通过使用板读数器(WallacMicrobeta；Perkin Elmer，USA)对板计数60秒来测定。使用生物统计程序(GraphPad Prism，USA)进行数据分析。优选的化合物显示出低于5μM的ΔPH-Akt1抑制IC50。
在前述试验中确定的抑制ΔPHAkt1的典型IC50值在下表A中，其中化合物的序号相应于实施例的序号。
表AAkt抑制
生化Akt1(活性)试验(全长Akt1)根据本发明，为了研究Akt1(全长型)抑制，已经开发了基于闪烁板的试验。
全长Akt1试验是使用以N-末端与GST融合并在昆虫细胞中与PDK1共表达的Akt1进行的生化试验。Akt1试验在96孔板中进行，于30℃下，在96孔微量滴定板中，在100μl反应缓冲液中(50nMHEPES，pH7.5；3mM MgCl2；3mM MnCl2；3μM Na-Orthovanadat；1mM DTT；1μg/ml PEG8000)，孵育500ng/孔GST-Akt1、1μM Crosstide(N-末端生物素酰化的合成肽(KGSGSGRPRTSSFAEG)Upstate，#12-385)作为底物、10μl试验化合物(试验化合物溶解在二甲亚砜(DMSO)中形成10mM溶液，随后稀释)和100nM ATP(包括33P-ATP)60分钟。反应通过加入100μl终止缓冲液(5M NaCl，35mMEDTA pH8.0)5分钟而终止。将190μl反应混合物转移到抗生蛋白链菌素-包覆的闪烁板(Perkin Elmer，#SMP-103)中并在室温下再孵育30分钟。用洗涤缓冲液(0.9％NaCl)洗涤板3次。依赖于肽底物crosstide中33P并入，检测基于生物素酰化肽与闪烁体包覆的闪烁板(NEN，USA；#SMP-103)的抗生蛋白链菌素包覆表面的特异性结合来进行。该磷酸化通过使用板读数器(Wallac Microbeta；Perkin Elmer，USA)对板计数60秒来测定。使用生物统计程序(GraphPad Prism，USA)进行数据分析。优选的化合物显示出低于2μM的Akt1抑制IC50。
在前述试验中确定的抑制Akt1(全长Akt1，有活性)的典型IC50值在下表B中，其中化合物的序号相应于实施例的序号。
表BAkt1抑制(全长Akt1，有活性)
生化Akt1(无活性)试验(全长Akt1)为了研究本发明化合物对Akt1活性的抑制，已经开发了基于IMAP的试验，用于PKBα(全Akt1，无活性)。
PDK-依赖的活化和随后的Akt1酶促活性纯化的人Akt1活性按常规在试验中测定，其中，在存在磷脂酰肌醇-3，4，5-三磷酸酯(PIP3)的情况下，酶首先被PDK1激活。一旦被激活，荧光标记的肽底物的Akt1-依赖性磷酸化使用IMAP技术(Molecular Devices)通过荧光偏振测定。
这个Akt-激活试验使用了无活性的全长Akt1(Upstate，#25675U)、全长PDK1、荧光标记的AKT1底物肽(Thermo ElectronGmbH，5-荧光素-NH-RARTSSFAEPG-CONH2)和磷脂囊泡(PIP3，Biomol，Cat.#PH-107；DOPC/DOPS″Upstate Lipid Blend″，AvantiPolar Lipids，Cat.#790595P)。
磷脂的制备如下将5mg DOPC/DOPS溶解在200μl 10mM Tris(pH7.4)中，并通过移液将300μg PIP3重悬在950μl 10mM Tris(pH7.4)中。将950μl溶解的PIP3与50μl溶解的DOPC/DOPS混合并在低于20℃的温度下孵育2小时。然后在最大功率下对混合物超声处理30分钟，直至得到半透明的磷脂囊泡制剂。将囊泡混悬液的等份部分在-80℃下冷冻直至需要的时侯，对溶解的DOPC/DOPS也是如此。
试验在384孔板中进行。孵育在室温下进行60分钟。终体积为25μl的反应缓冲液化合物包含10mM Tris pH7.4、10mM MgCl2、1mM DTT和0.1mg/ml BSA。相反，活性缓冲液包含50ng/孔Akt1、20ng/孔PDK1、1，25μM肽底物、50μM ATP和磷脂囊泡(1∶20)。在用PDK1活化Akt1前，由DMSO中的母液加入试验化合物。孵育后，加入珠状物(beads)(IMAP结合试剂；Molecular Devices；1∶167)并测定荧光偏振(激发485nm，发射530nm)。使用生物统计程序进行数据分析。优选的化合物显示出低于5μM的Akt1抑制IC50。
在前述试验中确定的抑制Akt1(全长Akt1，无活性)的典型IC50值在下表C中，其中化合物的序号相应于实施例的序号。
表CAkt1活化的抑制(全长Akt1，无活性)
生化PKA试验为了研究本发明化合物的激酶活性，已经开发了基于闪烁板的试验，用于丝氨酸/苏氨酸激酶，PKA。
试验在96孔板中进行，于22℃下，在100μl反应缓冲液中(50nMHEPES，pH7.5；3mM MgCl2；3mM MnCl2；3μM Na-Orthovanadat；1mM DTT)，孵育1ng/孔His-PKA(PanVera，USA；#R3791)、0,5μM/孔PKA肽(#12-394；Upstate，USA)作为底物、10μl本发明化合物(试验化合物溶解在二甲亚砜(DMSO)中形成10mM溶液，随后稀释)和100nM ATP(包括33P-ATP)80分钟。反应通过加入加入100μl终止缓冲液(2％H3PO4，5分钟)而终止并用洗涤缓冲液(200μl1xPBS)洗涤3次。依赖于肽底物中33P并入，检测基于磷酸化肽与闪烁体包覆的闪烁板(Perkin Elmer，USA；#SMP-103)表面的粘附来进行。该磷酸化通过使用板读数器(Wallac Microbeta；Perkin Elmer，USA)对板计数60秒来测定。通过使用这个方法来测定PKA抑制的IC50。使用生物统计程序(GraphPad Prism，USA)进行数据分析。优选的化合物显示出高于10μM的PKA抑制IC50。
在前述试验中确定的抑制PKA的典型IC50值在下表D中，其中化合物的序号相应于实施例的序号。
表DPKA抑制
细胞PI3K/Akt途径试验为了研究本发明化合物的细胞活性，已经建立了基于ELISA的试验。该试验基于Sandwich ELISA试剂盒(PathScanTM磷酸-Akt1(Ser473)；Cell Signaling，USA；#7160)。
该试验检测了磷酸化Akt1蛋白的内源水平。磷酸-Akt1(Ser473)抗体(Cell Signaling，USA；#9271)已经被包覆到微孔上。与细胞溶解产物孵育后，包覆的抗体捕获磷酸化Akt蛋白。深入洗涤后，加入Akt1单克隆抗体(Cell Signaling，USA；#2967)以检测被捕获的磷酸-Akt1蛋白。然后使用HRP连接的抗小鼠抗体(Cell Signaling，USA；#7076)以识别结合的检测抗体。加入HRP底物(＝TMB；Cell Signaling，USA；#7160)以显色。这个显色的光密度强度与磷酸化Akt1蛋白的量成正比。
将MCF7细胞(ATCC HTB-22)以10000个细胞/孔的密度接种到96孔板平底板上。接种24小时后，用不含雌激素的培养基(IMEM包括0，1％用活性碳处理的FCS)使细胞饥饿。24小时后，在96孔板的每个孔中加入1μl各化合物稀释液(试验化合物溶解在DMSO中形成10mM溶液，随后稀释)并在包含5％CO2的潮湿空气中于37℃下孵育48小时。为了刺激Akt磷酸化，在化合物中平行加入β-Heregulin(20ng/ml)。包含未被刺激的对照细胞的孔(没有β-Heregulin刺激)在有或没有稀释化合物的情况下孵育。将包含未被处理的对照细胞的孔(没有化合物)用包含0.5％ v∶v DMSO的介质填充并用β-Heregulin填充或者未被刺激。
在非变性的条件下收获细胞并在1x细胞溶解缓冲液(20mM Tris(pH7.5)、150mM NaCl、1mM乙二胺四乙酸盐(EDTA)、1mM乙二醇二-(2-氨基乙基)-N，N，N′，N′-四乙酸(EGTA)、1％Triton X-100、2.5mM焦磷酸钠、1mM β-甘油磷酸酯、1mM Na3VO4、1μg/ml亮肽素)中用简单的超声处理使细胞溶解。在4℃下将溶胞产物微量离心10分钟并将上清液转入到新试管中。向微量离心管加入100μl样本稀释剂(0.1％吐温-20、0.1％叠氮化钠，位于20X PBS中)并将100μl细胞溶解产物转移到试管中并涡旋。将100μl各个稀释的细胞溶解产物加入到适宜的孔(磷酸-Akt(Ser473)抗体包覆的微孔；Cell Signaling，USA；#7160)中并在4℃下孵育过夜。板用1x洗涤缓冲液(1％吐温-20、0.33％麝香草酚，位于20X PBS中)洗涤4次。然后向每个孔中加入100μl检测抗体(Akt1(2H10)单克隆检测抗体；Cell Signaling，USA；#2967)并在37℃下孵育1小时。每个步骤间重复所述洗涤程序。将100μl HRP-连接的二级抗体(抗小鼠IgG HRP-连接的抗体；Cell Signaling，USA；#7076)加入到每个孔中并在37℃下孵育30分钟。然后在每个孔中加入100μl TMB底物(0.05％3，3′，5，5′-四甲基联苯胺、0.1％过氧化氢、复合多肽，位于缓冲溶液中；Cell Signaling，USA；#7160)并在25℃下孵育30分钟。最后，向每个孔中加入100μl终止溶液(0.05％α和β不饱和羰基化合物)并将板温和地振荡几秒钟。加入终止溶液后，在30分钟内于450nm下读取吸收度(Wallac Victor2；Perkin Elmer，USA)。使用统计程序(Excel；Microsoft，USA)进行数据分析。
在前述试验中确定的抑制Akt途径的典型IC50值在下表E中，其中化合物的序号相应于实施例的序号。
表EAkt途径抑制(pAkt-ELISA)
细胞pGSK3试验为了研究本发明化合物的细胞活性，已经建立了基于ELISA的试验，用于磷酸化的糖原合成酶激酶3，GSK3。该试验基于检测磷酸化GSK3内源性水平的固相夹心式ELISA(BioSource International，Inc.；Catalog#KHO0461)。磷酸-GSK3(Ser9)抗体被包覆到微孔上。用细胞溶解产物孵育后，包覆的抗体捕获磷酸化GSK3蛋白。深入洗涤后，加入GSK3多克隆抗体以检测被捕获的磷酸-GSK3蛋白。然后使用HRP-连接的抗小鼠抗体(抗兔IgG-HRP)识别结合的检测抗体。第二次孵育并洗涤以除去所有多余抗兔IgG-HRP后，加入底物溶液，其通过结合酶发挥作用以产生颜色。这个有色产物的强度与最初样本中GSK-3β[pS9]的浓度成正比。
将MCF7细胞(ATCC HTB-22)以10000个细胞/孔的密度接种到96孔板上。24小时后，将1μl各个化合物稀释液(试验化合物溶解在DMSO中形成10mM溶液，随后稀释)加入到96孔板的每个孔中并在包含5％CO2的潮湿空气中于37℃下孵育48小时。
收获细胞并在细胞提取缓冲液(10mM Tris，pH7.4、100mMNaCl、1mM EDTA、1mM EGTA、1mM NaF、20mM Na4P2O7、2mMNa3VO4、1％Triton X-100、10％甘油、0.1％SDS、0.5％脱氧胆酸盐、1mM PMSF)中用简单的涡旋使细胞溶解。在4℃下将溶解产物离心10分钟并将上清液转入到新的试管中。加入50μl样本稀释剂(标准稀释缓冲液，Biosource)并将100μl细胞溶解产物转移到试管中并涡旋。将100μl各个稀释的细胞溶解产物加入到适宜的孔(包覆磷酸-GSK3(Ser9)抗体的微孔；Biosource)中并在室温下孵育3小时。板用1x洗涤缓冲液(Biosource)洗涤4次。向每个孔中加入50μl检测抗体(GSK3(Ser9)检测抗体；Biosource)并在室温下孵育30分钟。在每个步骤之间重复所述洗涤程序。将100μl HRP-连接的二级抗体(抗小鼠IgGHRP-连接的抗体)加入到每个孔中并在室温下孵育30分钟。在每个孔中加入100μl TMB底物(0.05％3，3′，5，5′-四甲基联苯胺、0.1％过氧化氢、复合多肽，位于缓冲溶液中；Biosource)并在室温下孵育30分钟。最后，向每个孔中加入100μl终止溶液(0.05％α和β不饱和羰基化合物)并将板轻微振荡几秒钟。加入终止溶液后，在30分钟内于450nm下测量吸收度(Wallac Victor2；Perkin Elmer，USA)。使用统计程序(Microsoft Excel，USA)进行数据分析并测定对pGSK3磷酸化的抑制。
在前述试验中确定的抑制GSK3的典型IC50值在下表F中，其中化合物的序号相应于实施例的序号。
表FGSK3抑制(pGSK3-ELISA)
细胞增殖/细胞毒试验使用MCF7和MDA-MB-468(ATCC HTB-22和HTB-132)细胞系以及Alamar Blue(Resazurin)细胞成活力试验(O′Brien等，EurJ Biochem 267，5421-5426，2000)评价如本文记载的化合物的抗增殖活性。通过细胞脱氢酶的活性将Resazurin还原为荧光resorufin，这与活的增殖性细胞相关。试验化合物溶解在DMSO中形成10mM溶液，随后稀释。以10000个细胞/孔(MCF7)或5000个细胞/孔(MDA-MB-468)的密度和200μl/孔的体积将MCF7或MDA-MB-434细胞接种到96孔平底板上。接种24小时后，向96孔板的各个孔中加入1μl化合物稀释液。对每个化合物的稀释液至少重复测定两次。包含未被处理的对照细胞的孔用包含0.5％ v∶v DMSO的200μl DMEM填满。然后细胞在包含5％二氧化碳的潮湿空气中于37℃下与底物孵育48小时。为了测定细胞的成活力，加入了20μl Resazurin溶液(Sigma；90mg/l)。在37℃下孵育4小时后，于544nm消光和590nm发射下测定荧光(Wallac Victor2；Perkin Elmer，USA)。为了计算细胞的成活力，将未被处理细胞的发射值设作100％成活力，被处理细胞的发射率相对于未被处理细胞的值设置。成活力以％值表示。化合物细胞毒活性的相应IC50值通过非线性回归由浓度-效果曲线确定。使用生物统计程序(GraphPad Prism，USA)进行数据分析。
在前述试验中确定的抗增殖/细胞毒效力的典型IC50值在下表G中，其中化合物的序号相应于实施例的序号。
表G抗增殖/细胞毒活性
在表A到G之一或多个表中提及的式I化合物及其盐是本发明优选的主题。
化学敏感化试验在此公开的化合物用于评价使癌细胞对凋亡刺激敏感化的活性。本发明记载的化合物，单独和与化疗剂和靶向癌症治疗剂组合，被测定以确定对凋亡诱导的作用。在每孔2×103到1×104细胞的浓度范围内，在其各自的生长培养基中，将癌细胞接种到96孔板上，48-72小时后，如下进行凋亡试验a)对于与化疗剂如喜树碱的组合试验来说，化合物在指明的各浓度下加入，在37℃下于CO2孵育器内将板孵育18小时。对于采用喜树碱进行处理的标准组合试验来说，在指明的各浓度下同时进行加入。
b)对涉及加入促凋亡剂如死亡受体配体TRAIL/Apo2L(ResearchDiagnostics)的组合试验来说，在加TRAIL前1.5小时加入化合物并在加入TRAIL另外3到4小时后对板进行孵育。在此时段情况下，于试验结束前用TRAIL配体对板孵育2、3、4和6小时。
对这两个程序来说，最终的总体积不超过250μl。在孵育结束时，通过离心(200xg；10min.，室温下)将细胞形成团粒，并弃去上清液。在室温下，使用溶解缓冲液对细胞进行重悬并孵育30分钟(细胞死亡检测ELISAPLUS，Roche，Cat.No.11774425001)。重复离心(200xg；10min.室温下)后，将上清液的一等份部分转入到微量板的被抗生蛋白链菌素包覆的孔中。随后进行孵育(2h，室温)，上清液中核小体与两种单克隆抗体即抗组蛋白(生物素标记的)和抗-DNA(结合了过氧化物酶；细胞死亡检测ELISAPLUS，Roche，Cat.No.11774425001)结合。抗体-核小体复合物与微量板结合。固定的抗体-组蛋白复合物在室温下被洗涤三次以除去没有免疫反应性的细胞组分。加入底物溶液(ABTS；细胞死亡检测ELISAPLUS，Roche，Cat.No.11774425001)并在室温下孵育样本15分钟。用分光光度计(在405nm处吸收)测定有色产物的(和由此固定的抗体-组蛋白复合物的)量。数据以相对于对照的活性百分比表示，以顺铂作为阳性对照。50μM顺铂产生的凋亡诱导决定定义为100个顺铂单位(100 CPU)。
权利要求
1.式I化合物以及这些化合物的盐 其中R1是Ar1、Har1、Aa1、Hh1、Ah1或Ha1，其中Ar1是苯基、R11-和/或R12-取代的苯基、萘基、R13-取代的萘基或芴基，其中R11是1-4C-烷氧基、1-4C-烷氧基-2-4C-烷氧基、卤素、苯氧基、1-4C-烷基羰基或苯基-1-4C-烷氧基，R12是1-4C-烷氧基，R13是1-4C-烷氧基，Har1任选被R14取代并且是单环、稠合二或三环5到14元杂芳基，其包含一到三个各自选自氮、氧和硫的杂原子，其中，R14是1-4C-烷基或苯基磺酰基，Aa1任选被R15取代并且是由两个芳基组成的联芳基，所述两个芳基独立地选自苯基和萘基，且所述两个芳基通过单键相连，其中，R15是卤素，Hh1是由两个杂芳基组成的联杂芳基，所述两个杂芳基独立地选自包含一或两个各自选自氮、氧和硫的杂原子的单环5或6元杂芳基，并且所述两个杂芳基通过单键相连，Ah1是由选自苯基和萘基的芳基以及选自包含一个或两个各自选自氮、氧和硫的杂原子的单环5或6元杂芳基组成的芳基杂芳基，由此所述的芳基和杂芳基通过单键相连，Ha1是由选自包含一或两个各自选自氮、氧和硫的杂原子的单环5或6元杂芳基以及选自苯基和萘基的芳基组成的杂芳基芳基，由此所述的杂芳基和芳基通过单键相连，R2是氢、卤素或1-4C-烷基，R3是-U-Ar2或-V-Har2，其中U是键、1-4C-亚烷基或被氨基-1-4C-烷基取代的1-4C-亚烷基，Ar2是苯基，或被R31-和/或R32-和/或R321-取代的苯基，其中R31是1-4C-烷基、1-4C-烷氧基、卤素、硝基、三氟甲基、氰基、脒基或-W-R311，其中W是键或1-4C-亚烷基，R311是-N(R312)R313、卤素或Het1，其中R312是氢、1-4C-烷基、1-4C-烷氧基羰基或1-4C-烷氧基-2-4C-烷基，R313是氢、1-4C-烷基或1-4C-烷氧基-2-4C-烷基，Het1任选被R314取代并且是单环3到7元饱和杂环，其包含一或两个选自氧、氮和硫的杂原子，其通过环碳原子或通过环氮原子与结构部分W相连，其中R314是1-4C-烷基或1-4C-烷氧基羰基，R32是1-4C-烷氧基或卤素，或R31和R32彼此邻位键合到苯环上一起形成1-2C-亚烷基二氧基，R321是1-4C-烷氧基，V是键，Har2任选被R33和/或R34取代并且是单环或稠合二环5到10元不饱和或部分饱和的杂芳基，其包含一到三个各自选自氮、氧和硫的杂原子，其中R33是1-4C-烷基、三氟甲基、氰基或-W-R311，R34是1-4C-烷基。
2.根据权利要求1的化合物以及这些化合物的盐，其中R1是二苯并呋喃-4-基、二苯并噻吩-4-基、4-苄氧基-苯基、4-苯氧基-苯基或噻蒽-1-基，R2是氢或甲基，R3是-U-Ar2、-V-Har2或2-氨基-苯基，其中U是键，以及Ar2是3-(R31)-苯基、4-(R31)-苯基或3-(R31)-或4-(R31)-氟苯基，其中R31是1-4C-烷氧基、1-4C-烷基、氰基、氯、脒基、-W-R311、吡咯烷-1-基或哌啶-3-基，其中W是键，以及R311是-N(R312)R313，其中R312是氢、1-4C-烷基、1-4C-烷氧基-乙基或叔丁氧基羰基，R313是氢或1-4C-烷基，或W是亚甲基、亚乙基或1，1-二甲基-亚甲基，R311是-N(R312)R313或溴，其中R312是氢、1-4C-烷基或叔丁氧基羰基，R313是氢或1-4C-烷基，或者U是亚甲基或亚乙基，以及Ar2是苯基、或3-(R31)-或4-(R31)-苯基，其中R31是氟、1-4C-烷氧基或氨基甲基，或者U是键或氨基甲基-亚甲基，以及Ar2是3，4-二氯苯基，V是键，Har2是1，2，3，4-四氢异喹啉基或R33-取代的吡啶基，其中R33是氨基甲基或三氟甲基。
3.根据权利要求1或2的化合物以及这些化合物的盐，条件是当取代基-N(H)C(O)R3连接到相对于其中苯环键合到嘧啶-氨基部分上的键合位置的间位上时，R1不是Har1、Ah1或Hh1。
4.根据权利要求1或2的化合物以及这些化合物的盐，所述化合物来自式Ia
5.根据权利要求1的化合物以及这些化合物的盐，所述化合物来自权利要求4定义的式Ia，其中R1是二苯并噻吩-4-基、4-苄氧基-苯基、噻蒽-1-基或二苯并呋喃-4-基，R2是氢或甲基，R3是-U-Ar2、-V-Har2或2-氨基-苯基，其中U是键，以及Ar2是3-(R31)-苯基、4-(R31)-苯基或3-(R31)-或4-(R31)-氟苯基，其中R31是脒基、-W-R311、吡咯烷-1-基或哌啶-3-基，其中W是键，R311是-N(R312)R313，其中R312是氢、甲基或2-甲氧基乙基，R313是甲基，或W是亚甲基、亚乙基或1，1-二甲基-亚甲基，R311是-N(R312)R313，其中R312是氢或甲基，R313是氢，或者U是亚甲基，以及Ar2是4-(氨基甲基)-苯基，或者U是氨基甲基-亚甲基，以及Ar2是3，4-二氯苯基，V是键，Har2是1，2，3，4-四氢异喹啉基、异二氢吲哚基或R33-取代的吡啶基，其中R33是氨基甲基。
6.根据权利要求1的化合物以及这些化合物的盐，所述化合物来自权利要求4定义的式Ia，其中R1是二苯并呋喃-4-基，R2是氢，R3是-U-Ar2或-V-Har2，其中U是键，Ar2是3-(R31)-苯基、4-(R31)-苯基或2-氟-4-(R31)-苯基，其中R31是脒基或-W-R311，其中W是亚甲基、亚乙基或1，1-二甲基-亚甲基，R311是-N(R312)R313，其中R312是氢或甲基，R313是氢，V是键，Har2是1，2，3，4-四氢异喹啉-7-基、1，2，3，4-四氢异喹啉-6-基或R33-取代的吡啶基，其中R33是氨基甲基。
7.根据权利要求1的化合物以及这些化合物的盐，所述化合物来自权利要求4定义的式Ia，其中R1是二苯并呋喃-4-基，R2是氢，R3是-U-Ar2，其中U是键，Ar2是3-(R31)-苯基或4-(R31)-苯基，其中R31是脒基或-W-R311，其中W是亚甲基，R311是-N(R312)R313，其中R312是氢，R313是氢。
8.根据权利要求1的化合物以及这些化合物的盐，所述化合物来自权利要求4定义的式Ia，其中R1是二苯并呋喃-4-基，R2是氢，R3是-V-Har2，其中V是键，或是Har2是1，2，3，4-四氢异喹啉-7-基或1，2，3，4-四氢异喹啉-6-基；或者是Har2是R33-取代的吡啶基，其中R33是氨基甲基，例如6-(R33)-吡啶-3-基、6-(R33)-吡啶-2-基、2-(R33)-吡啶-4-基、4-(R33)-吡啶-2-基或5-(R33)-吡啶-2-基，其中R33是氨基甲基。
9.根据前述任意权利要求的化合物，其用于治疗疾病。
10.含有一种或多种根据权利要求1至8任一项的化合物以及一种或多种常规药学赋形剂和/或介质的药物组合物。
11.含有一种或多种第一活性成分以及一种或多种第二活性成分的组合，所述第一活性成分选自根据权利要求1至8任一项的化合物，所述第二活性成分选自化疗抗癌药和靶向特异性抗癌药，用于在治疗中分开、连续、同时或按时间顺序交错使用，例如以在哺乳动物中治疗、预防或改善具有良性或恶性行为的高度增殖性疾病和/或对诱导凋亡有响应的疾病。
12.根据权利要求1至8任一项的化合物用于生产药物组合物的用途，所述药物组合物是用以治疗、预防或改善由在确定途径或信号网内的单一蛋白激酶例如PKB/Akt或多个蛋白激酶的功能失调介导的疾病例如具有良性或恶性行为的高度增殖性疾病和/或对诱导凋亡有响应的疾病。
13.根据权利要求1至8任一项的化合物用于生产用以治疗良性和/或恶性瘤形成例如癌症的药物组合物的用途。
14.在患者中治疗具有良性或恶性行为的高度增殖性疾病和/或对诱导凋亡有响应的痰病例如癌症的方法，其包含给予所述患者治疗有效量的权利要求1至8任一项的化合物。
全文摘要
本发明涉及式(I)所示的新嘧啶衍生物，它是蛋白激酶特别是蛋白激酶B/Akt的一种或多种同功型的有效抑制剂。
文档编号A61P35/00GK1972934SQ200580020545
公开日2007年5月30日 申请日期2005年6月28日 优先权日2004年6月28日
发明者W·沃舒恩, M·赫德曼, J·斯塔德尔韦瑟, T·巴尔, T·梅尔, T·贝克斯, T·齐奥塞克, A·祖尔克, U·格拉德勒 申请人:奥坦纳医药公司