专利名称：类风湿性关节炎的预防和/或治疗药物的制作方法
技术领域：
本发明涉及类风湿性关节炎的预防和/或治疗药物。
背景技术：
类风湿性关节炎是在多个关节发生的伴有肿胀和疼痛的炎症，如果长期进展就会引起不可逆的关节变形和功能障碍，而显著降低生活质量(Quality of LifeQOL)。在日本，类风湿性关节炎的患者占人口的0.6％，占30岁以上人口的1％，特别是近年来，随着老龄化社会的进展，老年人中的类风湿患者不断增加。
类风湿性关节炎分为以下四个病期“初期”，存在关节疼痛和关节炎的表现，但是尚不能明确诊断为类风湿性关节炎；“早期”，明确诊断为类风湿性关节炎，但是尚未出现或者仅出现轻微的不可逆的变化(早期类风湿性关节炎一般指从发病开始1～2年)；“进展期”，出现不可逆的变化，表现出严重的疲劳、低热、体重减少等全身症状；“晚期”，关节的炎症几乎静止，但是残留有严重的关节变形和挛缩等不可逆的变化，以疼痛和功能障碍为主要症状。各病期的治疗方法不同。关于类风湿性关节炎的发病机制，尽管有研究报告显示其与遗传因素和后天因素(传染性疾病)有关，但是其原因仍然尚未阐明，因此，既无法完全治愈，也无法完全预防。
因此，目前的治疗目的为，早期诊断类风湿性关节炎，以尽可能快的速度且最大限度地抑制类风湿性关节炎的炎症，防止出现不可逆的变化，阻止其进展，以提高患者身体上、精神上、社会上的QOL。由此，在治疗类风湿性关节炎时，要对患者详细说明病情和治疗方法，在此基础上应用物理疗法、运动疗法、药物疗法、手术疗法等多种方法。
作为药物疗法，能够在临床应用非类固醇类抗炎药物(NSAIDs)、改善病情抗风湿药(DMARDs)、类固醇类药物等，最近，也应用将炎症性细胞因子作为靶的抗体等生物制剂(非专利文献1)。
根据作用机制，DMARDs可以分为免疫调节药物和免疫抑制药物两类，其中，其作用机制为叶酸代谢拮抗作用(二氢叶酸还原酶抑制作用)的免疫抑制药物甲氨蝶呤(methotrexate)(N-[4-[(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲氨基]苯甲酰基]-L-谷氨酸)确认具有高效的作用。但是，甲氨蝶呤是从抗癌剂扩大功能而得到的药剂，可诱发以间质性肺炎为主的严重副作用，因此，存在有需要严格控制给药方法和用量这样的缺点。
此外，尽管生物制剂具有强有力的抗风湿作用，但是在医疗经济上，存在有价格昂贵这样的缺点，同时在方便性上，也存在有仅限于通过注射给药而无法经口给药这样的缺点。
作为炎症性细胞因子的白细胞介素-1β(IL-1β)在很多疾病中，例如，在类风湿性关节炎、变形性关节症、骨质疏松症、炎症性大肠炎、免疫缺陷综合征、败血症、肝炎、肾炎、缺血性疾病、胰岛素依赖性糖尿病、动脉硬化、帕金森氏病(Perkinson’s disease)、阿尔茨海默氏病(Alzheimer’s disease)、和白血病等中，被确认其产生亢进，已知IL-1β诱导胶原酶、COX和PLA2等被认为与炎症相关的酶的合成，而且，如果将其注射于动物的关节内，则会引起与类风湿性关节炎非常相似的关节破坏。因此，作为炎症性疾病的治疗药物，对IL-1β抑制剂进行了研究和开发，已知有IL-1受体拮抗剂(非专利文献2)等生物体成分由来的物质、T-614(非专利文献3)、S-2474(非专利文献4)、2-苄基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-哒嗪-3-酮(专利文献1)、FR133605(非专利文献5)等低分子化合物。
类风湿性关节炎的病理情况在年龄、病期、并发症、副作用、QOL等方面，每个患者差异很大。而且，不仅不存在绝对的治疗药物，甚至存在有能够控制症状的治疗药物突然失去效果的“逃逸现象(escapephenomenon)”。在这样的背景下，在进行药物疗法时，经常采用更换药物和并用药物的方法，关于药物使用方法的临床研究也很盛行。
关于叶酸代谢拮抗剂和IL-1β抑制剂并用的效果，已经有关于甲氨蝶呤和IL-1抑制剂并用的报告(专利文献2、3；非专利文献6)。
但是，这里所提到的IL-1抑制剂是人重组体IL-1受体拮抗剂，是一种生物制剂，所以其剂型仅限于注射剂，对患者来说是很不方便的。此外，认为制剂给药后也会发生拒绝反应。因此，就需求能够经口给药、副作用少的类风湿性关节炎的预防、治疗方法。
此外，迄今为止，尚不清楚关于上述表现出IL-1β抑制作用的低分子化合物与叶酸代谢拮抗剂的并用效果。
专利文献1WO99/25697专利文献2日本专利特表2002-509529专利文献3US2004/0044001非专利文献1American College of Rheumatology Subcommittee onRheumatoid Arthritis Guidelines，Arthritis & Rheumatism 46，pp 328-346，2002非专利文献2Arthritis & Rheumatism 42，pp 498-506，1999非专利文献3J.Pharmacobio-Dyn.11，pp 649-655，1992非专利文献4YAKUGAKU ZASSHI 123，pp 323-330，2003非专利文献5J.Rheumatol.23，pp 1778-1783，1996非专利文献6J.Rheumatol.26，pp 1225-1229，1999发明内容本发明者鉴于上述情况进行了深入研究，结果发现，通过并用作为IL-1β抑制剂的2-苄基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-哒嗪-3-酮和作为叶酸代谢拮抗剂的甲氨蝶呤，能够得到优良的关节炎抑制效果，从而完成本发明。
即，本发明提供一种类风湿性关节炎的预防和/或治疗药物，其特征在于，其含有2-苄基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-哒嗪-3-酮和甲氨蝶呤。
此外，本发明提供一种类风湿性关节炎的预防和/或治疗方法，其特征在于，给药2-苄基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-哒嗪-3-酮和甲氨蝶呤。
此外，本发明提供2-苄基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-哒嗪-3-酮和甲氨蝶呤在制造类风湿性关节炎的预防和/或治疗药物中的使用。
本发明的药剂能够经口给药，副作用等少，表现出优良的关节炎抑制作用，对类风湿性关节炎的预防和/或治疗是有用的。
图1是表示在对照组(未给药组)、2-苄基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-哒嗪-3-酮(药剂A)30mg/kg给药组、甲氨蝶呤(药剂B)0.05mg/kg给药组、以及药剂A和药剂B并用给药组中，大鼠胶原诱发关节炎模型在首次致敏30天后双后肢浮肿容积的图。另外，提示有逃逸现象的个体的各例值以黑色圆点表示。
具体实施例方式
在本发明中使用的2-苄基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-哒嗪-3-酮能够以例如国际公开号第WO99/25697中所述的方法或者类似的方法制造。即，使用聚磷酸等缩合剂，使对氯苯乙酸与茴香硫醚(thioanisole)发生反应，得到2-(4-氯苯基)-4’-(甲硫基)苯乙酮。使2-(4-氯苯基)-4’-(甲硫基)苯乙酮和叔丁醇钾等碱在四氢呋喃中发生反应，然后添加溴乙酸乙酯，得到2-(4-氯苯基)-4-[4-(甲硫基)苯基]-4-氧代丁酸乙酯。使2-(4-氯苯基)-4-[4-(甲硫基)苯基]-4-氧代丁酸乙酯与肼水合物在乙醇中发生反应，得到5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-4，5-二氢-2H-哒嗪-3-酮。使用碳酸钾等碱，使如此得到的5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-4，5-二氢-2H-哒嗪-3-酮与溴化苄在N，N-二甲基甲酰胺等溶剂中反应，就能够制造出2-苄基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-哒嗪-3-酮。
此外，在本发明中使用的叶酸代谢拮抗剂优选为甲氨蝶呤。甲氨蝶呤能够使用市售品，例如SIGMA公司生产的甲氨蝶呤。
如果并用2-苄基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-哒嗪-3-酮和甲氨蝶呤，则相比于分别单独使用上述药物的情况，对类风湿性关节炎具有非常显著的治疗作用。
2-苄基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-哒嗪-3-酮和甲氨蝶呤的配合量，以质量比计优选在1000∶1～1∶1的范围内。
2-苄基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-哒嗪-3-酮和甲氨蝶呤可以同时或者以一定间隔经口给药各自的制剂，也可以作为配合剂经口给药。
本发明的药剂的给药方式没有特殊限制，能够根据治疗的目的而适宜地选择，例如，能够举出以锭剂、胶囊剂、颗粒剂、薄膜衣剂、散剂、糖浆剂等经口给药，或者以注射剂、栓剂、吸入剂、经皮吸收剂、滴眼剂、滴鼻剂等非经口给药，特别优选经口给药。
适合这些给药方式的医药制剂，能够使用药学容许的载体，例如，淀粉类、乳糖、蔗糖、甘露醇、硅酸等赋形剂和增量剂；琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、特定的复合硅酸盐等崩解剂；羟丙基甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、阿拉伯树胶等粘合剂；滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇类、十二烷基硫酸钠、或者其混合物等润滑剂；乳糖、玉米淀粉等稀释剂；柠檬酸、磷酸、酒石酸、乳酸等有机酸、盐酸等无机酸、氢氧化钠、氢氧化钾等氢氧化碱、三乙醇胺、二乙醇胺、二异丙醇胺等胺类等的缓冲剂；对羟基安息香酸酯类、苯扎氯铵(benzalkonium chloride)等防腐剂；硬脂酸钙、硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠等阴离子性表面活性剂、苯扎氯铵、苄索氯铵(benzethonium chloride)、西吡氯铵(cetylpyridiniumchloride)等阳离子性表面活性剂、单硬脂酸甘油酯、蔗糖脂肪酸酯、聚氧乙烯硬化蓖麻油、聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧乙烯烷基酯等非离子性表面活性剂等乳化剂；亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、二丁基羟基甲苯、丁基羟基茴香醚、EDTA等稳定剂，此外，根据需要，也能够进一步适宜地组合使用矫臭剂、分散剂、保存剂、香料等。
本发明的2-苄基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-哒嗪-3-酮和甲氨蝶呤可以一天给药一次或者分成两次以上给药。
实施例以下，例举实施例对本发明作更加具体的说明，但是本发明不限于这些实施例。
实施例12-苄基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-哒嗪-3-酮(使用以上述方法合成的)和甲氨蝶呤的并用给药以及分别单独给药时，抑制双后肢浮肿的作用采用以下方法(大鼠胶原诱发关节炎模型)测定(FDA，CBER，CDER，CDRHGuidance for industry-Clinical development programs for drugs，devices，and biological productsfor the treatment of rheumatoid arthritis(RA)-.(1999))。并且，试验动物使用雌性Lewis大鼠(LEW/Crj)(Charles River Laboratories Japan，Inc.)。
使用小动物用的足容积测定装置(TK-101CMP，Unicom)测定8周龄LEW/Crj大鼠的双后肢的踝前端部分的容积(以下称为双后肢容积)，作为试验开始时的双后肢容积(以下称为Pre值)。以该Pre值作为指标，进行以单参数的区组分配，使得各组达到均衡。
用于对大鼠诱发关节炎的致敏胶原乳剂是使用Handy MicroHomogenizer((株)Microtec Nition)，将0.3％的II型胶原液(胶原技术研修会)、佐剂肽(Adjuvant peptide)(肽研究所)、以及弗氏不完全佐剂(Adjuvant Incomplete Freund)(DIFCO)在冰冷的条件下混匀而制备的。将制备好的胶原乳剂以0.1mL/site皮下给药于大鼠背部10处，进行首次致敏。在首次致敏7天后，将相同乳剂0.12mL皮下给药于尾根部，进行加强致敏。
从首次致敏的第2天开始到第29天为止进行给药。在2-苄基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-哒嗪-3-酮单独给药组，早晨(9:00-11:00)和晚上(15:30-17:30)分两次以30mg/kg经口给药。在甲氨蝶呤单独给药组，白天(11:30-13:30)以0.05mg/kg经口给药一次。而在2-苄基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-哒嗪-3-酮和甲氨蝶呤并用给药组，2-苄基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-哒嗪-3-酮在早晨(9:00-11:00)和晚上(15:30-17:30)以30mg/kg经口给药，甲氨蝶呤在白天(11:30-13:30)以0.05mg/kg经口给药。
首次致敏的30天之后，再次测定双后肢容积，求出该值与Pre值之差，计算出双后肢浮肿容积。
表1和图1表示2-苄基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-哒嗪-3-酮单独给药组、甲氨蝶呤单独给药组、以及两种药物并用给药组在首次致敏的30天之后的双后肢浮肿容积。双后肢浮肿容积(mL)以各组7只大鼠的平均值±标准误差表示。此外，降低率以(对照组双后肢浮肿容积平均值-各组双后肢浮肿容积平均值)/(对照组双后肢浮肿容积平均值)×100表示；相对指数以(各组双后肢浮肿容积平均值)/(对照组双后肢浮肿容积平均值)表示。
结果显示，2-苄基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-哒嗪-3-酮单独给药和甲氨蝶呤单独给药没有表现出很强的抑制浮肿的作用，浮肿容积没有降低至对照组的50％以下。
另一方面，两种药物并用给药能够很强地降低双后肢浮肿容积，其相对指数(0.21)小于各单独给药组的相对指数的积(0.52)，确认其并用具有明确的相乘效果。此外，也能够避免逃逸现象。
双后肢浮肿容积以各组7只大鼠的平均值±标准误差表示。
权利要求
1.一种类风湿性关节炎的预防和/或治疗药物，其特征在于含有2-苄基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-哒嗪-3-酮和甲氨蝶呤。
2.如权利要求1所述的类风湿性关节炎的预防和/或治疗药物，其特征在于类风湿性关节炎伴有关节的炎症。
3.如权利要求1或2所述的类风湿性关节炎的预防和/或治疗药物，其特征在于剂型为经口给药制剂。
4.2-苄基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-哒嗪-3-酮和甲氨蝶呤在制造类风湿性关节炎的预防和/或治疗药物中的使用。
5.如权利要求4所述的使用，其特征在于类风湿性关节炎伴有关节的炎症。
6.如权利要求4或5所述的使用，其特征在于剂型为经口给药制剂。
7.一种类风湿性关节炎的预防和/或治疗方法，其特征在于给药2-苄基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-哒嗪-3-酮和甲氨蝶呤。
8.如权利要求7所述的类风湿性关节炎的预防和/或治疗方法，其特征在于类风湿性关节炎伴有关节的炎症。
9.如权利要求7或8所述的类风湿性关节炎的预防和/或治疗方法，其特征在于给药方法为经口给药。
全文摘要
本发明提供一种类风湿性关节炎的预防和/或治疗药物，其含有2－苄基－5－(4－氯苯基)－6－[4－(甲硫基)苯基]－2H－哒嗪－3－酮和甲氨蝶呤。本发明的药物能够经口给药，副作用少，表现出优良的抑制关节炎的作用。
文档编号A61K31/50GK101031305SQ20058003282
公开日2007年9月5日 申请日期2005年9月29日 优先权日2004年9月29日
发明者天竺桂裕一朗, 古志朋之 申请人:兴和株式会社