一种中药提取物、制剂及其制备方法与用途的制作方法

专利名称：一种中药提取物、制剂及其制备方法与用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及中药技术领域，具体地说，是由当归、川芎或当归、川芎、红花配比提取的提取物、含有该提取物的制剂及其制备方法。
背景技术：
根据我国流行病学调查，近五十年来不论在农村或城市，心脑血管疾病的发病率和死亡率均呈上升趋势。50-60年代我国人口死亡原因中心血管病和脑血管病分别居第五六位，1970年以后则分别上升至第二三位，心脑血管疾病死亡者已占全部疾病死因第一位。我国因心脑血管疾病死亡者占总死亡人口的百分比，已由1957年的12.07％上升到2001年的42.6％，每年死于心脑血管疾病者达200万，另有部分患者虽经抢救而幸存，但多数留下残疾，生活不能自理，给亲属及社会造成严重负担。心脑血管疾病也是西方国家人群死亡的主要原因。根据目前已有的流行病学资料推测，疾病的发展趋势是到2020年，人类疾病死因排列顺序将有重大变化，但是冠心病和脑卒中仍将是人类死因的第一位和第二位。到那时，估算全球冠心病死亡人数将自1990年的630万增至1100万；脑卒中自440万增至770万。30年中循环系统死因构成将增高59.6％，冠心病和脑卒中分别增高74.6％和75％。这些资料充分说明，心脑血管疾病不仅是危害人类健康的主要疾病，更是目前和未来20年内人类致死、致残的“头号杀手”。
在心脑血管疾病的治疗药物中，中西药的应用各有侧重，中药以其副作用小的优势也占据较大的市场份额。例如由黄芪、党参、当归、丹参、红花组成的益气活血方[祝维峰，山东中医学院学报，1994，18(5)]；由生脉饮加丹参、黄芪、三七、红花、元胡、山楂组成的丹芪生脉饮，[陈宇春，光明中医，1999，14(5)]；由黄芪、党参、麦冬、丹参、川芎、降香组成的冠心病基本方[王金荣等，辽宁中医杂志，2001，28(8)]；由丹参、延胡索、黄芪、赤芍、川芎、当归组成的舒心通脉片[王秀娥等，山东中医杂志，1997，16(8)]；等等。但以上临床处方和中成药均有一定的不足之处，或偏于益气，或偏于通阳，或偏于活血，或剂型较差，临床上未得到全面推广。
并且现有技术中，当归、川芎和红花多以水蒸气蒸馏法和有机溶媒回流法提取其有效成分，因提取温度高、时间长、步骤多，导致有效成分的遗失，如挥发油中的主要成分蒿本内酯异构化，从而造成有效成分含量的降低。
因此开发出一种组方精练、独到，有效成分含量高，疗效显著的治疗心脑血管疾病的中药制剂是人们努力的方向。

发明内容
本发明的目的之一是提供一种组方精炼、独到，有效成分含量高的治疗心脑血管疾病的中药提取物。
本发明的另一目的是提供包含该提取物的中药复方制剂。
本发明的又一目的是提供该中药提取物及其制剂的制备方法。
本发明是通过下面的技术方案实现的。
本发明药物是在《普济本事方》的经典止血活血方子——佛手散的基础上进行的改进。当归，辛、甘、温，归肝、心、脾经；川芎，辛、温，归肝、胆、心包经；两味药活血化瘀，通络止痛。为了达到更好的疗效，本发明还选红花和冰片入药，红花，辛、温，归心、脾、肺经；冰片，辛、苦、微寒，归心、脾、肺经，清郁热，止疼痛。以上诸药，在中医方剂学的理论基础上，巧妙配伍，精妙组合，严密组方，按照合理的现代提取工艺提取有效成分并制备成药物制剂，从而达到活血化瘀，理气止痛之目的。
制备本发明中药提取物的原料主要为当归、川芎，其重量份配比为当归30～75份 川芎20～65份制备本发明中药提取物的原料还可加入红花，其各组分用量为当归30～75份 川芎20～65份 红花5～10份优选为当归40～50份 川芎40～50份 红花8～10份本发明所述的“中药提取物”是指上述配方中原料药亲脂性成分和亲水性成分的混合物。在本发明中，凡使用“中药提取物”术语时，即表明上述两种提取物之混合物的总称。
所述的中药提取物由超临界流体萃取法提取，优选CO2超临界流体萃取法提取。优选萃取条件为萃取温度为30℃～50℃，压力为25MPa～45Mpa，提取时间为1～3h，CO2流量为10～30kg/L，夹带剂为0.5％～5％丙酮；更优选萃取条件为萃取温度为40℃，压力为35Mpa，提取时间为2.5h，CO2流量为25kg/L，夹带剂为2％丙酮。
以上述中药提取物作为活性成分，加入赋形剂，可以制成各种药物剂型，如片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、滴丸剂、口服液、注射剂等。
以上述中药提取物作为活性成分，还可以再加入冰片和赋形剂，制成各种药物剂型，如片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、滴丸剂、口服液、注射剂等。
本发明所述的中药制剂是指药剂中的常规剂型，可以是片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂(硬胶囊剂和软胶囊剂)、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、滴丸剂等；优选的是颗粒剂、胶囊剂(硬胶囊和软胶囊)、片剂、丸剂；最佳为软胶囊剂。加入的辅料可以是淀粉、蔗糖、乳糖、甘露醇、硅衍生物、纤维素及其衍生物、明胶、甘油、琼脂、碳酸钙、表面活性剂、聚乙二醇、糊精等。
以本发明的中药提取物为活性成分制备软胶囊时，各组分重量配比为中药提取物2.5％～10％ 植物油85％～96％ 助悬剂1.5％～5％优选配比为5％～8％ 植物油87％～92％ 助悬剂为2％～4％其中，所述植物油选自大豆油、麻油、玉米油、菜籽油、花生油、芝麻油、葵花籽油、核桃油；优选大豆油、麻油；所述助悬剂选自蜂蜡、黄蜡、白蜂蜡、虫蜡；优选蜂蜡、黄蜡。
具体的制备方法包括以下步骤称取配方量的中药提取物、助悬剂和适量的植物油；加热，使助悬剂溶解；用剪切式乳匀机剪切至适宜的分散度；加入余量植物油至配方量，剪切至分散均匀；药液与囊材液用自动旋转轧囊机制备成软胶囊。其中，所述的加热温度优选70℃～85℃。
以本发明的中药提取物加入冰片制备软胶囊时，各组分重量配比为中药提取物2.5％～10％ 植物油80％～95.8％ 助悬剂1.5％～5％ 冰片0.2％～5％优选配比为中药提取物5％～8％ 植物油86％～91.5％ 助悬剂为2％～4％ 冰片0.5％～2％其中，所述植物油选自大豆油、麻油、玉米油、菜籽油、花生油、芝麻油、葵花籽油、核桃油；优选大豆油、麻油；所述助悬剂选自蜂蜡、黄蜡、白蜂蜡、虫蜡；优选蜂蜡、黄蜡。
上述软胶囊剂的制备方法包括以下步骤称取配方量的中药提取物、助悬剂、冰片和适量的植物油；加热，使助悬剂溶解；用剪切式乳匀机剪切至适宜的分散度；加入余量植物油至配方量，剪切至分散均匀；药液与囊材液用自动旋转轧囊机制备成软胶囊。其中，所述的加热温度优选70℃～85℃。
上述软胶囊的囊材是胶料，水，增塑剂和防腐剂。其中，胶料选自明胶或阿拉伯胶，优选明胶；增塑剂为甘油或山梨醇或甘油与山梨醇的混合物；干胶料同干增塑剂的比为1∶0.3～1；胶料与水的比为1∶0.4～1.4。
本发明药物可改善脑微小动脉的血液循环，有利于改善大脑皮层脑血管床的供血，脑微小动脉括约肌的开放，可用于预防和治疗心、脑血管疾病，尤其对小中风、脑性眩晕、脑梗塞后遗症、冠心病、心绞痛等有显著疗效。
本发明药物的提取工艺是经过大量试验的结果，下面通过具体试验说明。
实验材料及检测方法1.实验药材、试剂1.1药材川芎、当归及红花购于陕西商洛药源基地，按中国2005年版药典一部检验均为合格品。其中，当归和川芎的阿魏酸含量分别为0.053％和0.025％；红花中羟基红花黄色素的含量为1.05％。
1.2试剂甲醇、乙腈为进口试剂，色谱级；磷酸等试剂(天津试剂二厂)，均为分析级；水为自制，为重蒸馏水。
2.检验用对照品及对照品溶液配制2.1阿魏酸和羟基红花黄色素A对照品和川芎对照药材(购于中国药品生物制品检定所)。
2.2阿魏酸对照品溶液称取阿魏酸对照品适量，用70％甲醇溶解后精密稀释成13.2μg/ml，棕色瓶置冰箱冷藏保存，备用。
2.3羟基红花黄色素A对照品溶液称取羟基红花黄色素A对照品适量，加25％甲醇溶解并稀释成0.13mg/ml。
2.4川芎和当归对照药材溶液分别取川芎和当归对照药材粉末1g和当归对照药材，乙醚20ml回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加2ml乙酸乙酯溶解，作为对照品溶液。
3.样品溶液配制3.1阿魏酸测定的样品溶液精密称取0.1g超临界萃取物，置容量瓶中，用70％甲醇适量超声使溶解，并精密稀释，每1ml溶液含20mg的当归药材，微孔滤膜滤过，取续滤液供测定用。
3.2羟基红花黄色素A测定的样品溶液精密称取0.1g超临界萃取物，置容量瓶中，用70％甲醇适量超声使溶解，并精密稀释，每1ml溶液含12mg的红花药材，滤过，取续滤液供测定用。
3.3超临界萃取物样品溶液精密称取0.1g超临界萃取物，加乙酸乙酯适量，制成每1ml含当归药材1g的溶液。
4.仪器、设备4.1超临界萃取设备HA121-50-05型(江苏南通华安超临界萃取有限公司)4.2高效液相色谱仪Waters Alliance HPLC(waters公司)4.3超声波清洗器KQ-100DB型数控超声波清洗器5.检测方法按中国药典2005年版一部“川芎的鉴别方法”、“当归的阿魏酸含量测定方法”和“红花的羟基红花黄色素含量测定方法”进行检测。
提取工艺研究
1.加夹剂的超临界萃取平行实验研究1.1超临界萃取方法 按处方比例分别取已经混匀的当归、川芎及红花混合药粉末400g，置超临界萃取釜中，丙酮为夹带剂，分别按0％、2％和4％加入，CO2流量为25kg/h按表1中参数进行超临界萃取，得到的提取物按给定的TLC和HPLC测定条件测定，结果见表1。
1.2实验结果 表明夹带剂丙酮的加入，对挥发油(藁本内酯类)、阿魏酸的萃取影响较小，而对羟基红花黄色素的影响较大。因此，加入夹带剂是必要的。但夹带剂浓度增大，影响对羟基红花黄色素A的萃取增加的幅度变小，考虑其他因素，夹带剂浓度采用加入2％的丙酮。
2.超临界萃取中CO2流量对萃取结果的影响2.1超临界萃取方法 按处方比例分别取已经混匀的当归、川芎及红花混合药粉末400g，置超临界萃取釜中，CO2流量为25kg/h，按表2中参数进行超临界萃取。
2.2提取物按给定的检测TLC和HPLC测定条件测定，结果见表2。
表1.夹带剂对超临界萃取结果的影响

表2.超临界萃取CO2流量对萃取结果的影响

由结果可知，在固定夹带剂、萃取压力、时间和温度的条件下，CO2流量对萃取结果的影响很小，当超临界流体的流速达到一定时，超临界萃取CO2流量对萃取结果的影响是次要的。因此，超临界萃取时固定CO2流量为25kg/h，正交实验不再考察此因素。
3.提取工艺的正交实验研究在夹带剂、CO2流量对超临界萃取影响的平行实验结果优选的基础上，根据各味药的药理作用及其有效成分的性质，并结合生产工艺和剂型的要求，拟考察温度、时间和压力流量三个因素，每因素选了三水平设计试验，以阿魏酸和羟基红花黄色素A的提取总量及超临界CO2萃取得率为指标，进行试验优选。
表3.水提取正交试验因素—水平设计表

3.1CO2超临界流体萃取方法按处方中各药材的比例，准确称取各药材粉末合计400克，共9份，在平行操作条件下，按L9(34)正交表试验9次。萃取完毕，从分离釜1、2收得萃取物，称重，计算萃取物收率。分别测定萃取物中的阿魏酸和羟基红花黄色素A的含量，根据萃取率分别折算成每克药材中的提取总量。
3.2萃取率计算

3.3超临界萃取正交实验结果与分析结果见表4。
3.4方差分析方差分析结果表明被考察因素中，A(温度)、B(萃取压力)(时间)、C(萃取压力)对阿魏酸萃取没有显著性影响(P＞0.05)，但对阿魏酸萃取有较大影响(P＜0.10)。因素A(温度)对羟基红花黄色素A萃取有显著性影响(P＜0.05)，B(时间)、C(萃取压力)对羟基红花黄色素A萃取均有一定的影响(P＜0.10)；而各因素则对萃取物的得率的影响均无显著性差异。
表4.超临界萃取正交实验设计与实验表
表5各因素对阿魏酸和羟基红花黄色素A萃取影响显著性方差分析结果

F0.90(2，2)＝9.0，F0.95(2，2)＝19.03.5试验结果综合分析根据对试验数据直观和方差分析的结果，可以得出萃取工艺的基本条件即对于本方来说，在固定夹带剂浓度(加入2％的丙酮)和CO2流量(25kg/h)的条件下，阿魏酸萃取的最佳工艺参数组合为A3B3C2，即温度为50℃，时间为2.5小时，萃取压力为35Mpa；而对羟基红花黄色素A来说，最佳提取工艺参数组合为A2B3C3，即温度为40℃，时间为2.5小时，萃取压力为45Mpa；对萃取物收率各因素均无显著影响。尽管对于阿魏酸和羟基红花黄色素萃取来说，各自的最佳萃取温度分别为50℃和40℃，萃取压力分别为35Mpa和45Mpa，但萃取效率相差均不很大，考虑生产的安全性和降低能耗，而且在40℃和35Mpa的条件下，阿魏酸和羟基红花黄色素萃取转移率均超过了65％，综合考虑，确定最佳工艺参数组合为萃取CO2流量为25kg/h，夹带剂加入量为2％的丙酮，萃取温度为40℃，萃取压力为35Mpa和萃取时间为2.5小时。
3.6工艺验证3.6.1按优选的工艺参数条件按处方中各药材的比例，准确称取混合好的各药材粉末合计4000克置萃取釜中，按综合优选的工艺参数条件，在平行操作条件下，进行萃取；萃取完毕后从分离釜1、2收得萃取物并称重，按给定的TLC和HPLC测定条件和方法进行测定，计算萃取物收率和有效成分含量，分别测定萃取物中的阿魏酸和羟基红花黄色素A的含量，根据萃取率分别折算成每克药材中的提取总量，重复三次。具体结果见表6。
表6.工艺验证结果

工艺验证结果表明，优选出的超临界萃取工艺是可行的，不仅萃取物得率稳定，各项质量指标均稳定，阿魏酸和羟基红花黄色素A的萃取转移率也达到了70％以上，同时，萃取物的得率比较适中，非常适合软胶囊制剂。说明选择的工艺是可行的，完全能够满足制剂工艺的需要。
3.6.2提取工艺研究说明按处方比例取混合药粉采用水蒸气蒸馏得到挥发油；按相同的药材比例，采用TLC检测方法，在365nm处，对比水蒸气蒸馏得到挥发油和超临界萃取物的斑点及荧光强度，发现超临界萃取物的斑点的荧光强度明显超过水蒸气蒸馏得到的挥发油的斑点，说明本发明中，提取挥发油采用超临界萃取法明显优于水蒸气蒸馏法。
本发明药物是在寻证古方的基础上，充分分析论证，巧妙配伍，精妙组合，严密组方，标本兼治，疗效显著，具有下述突出优点1.本发明在佛手散的基础上选择红花入药，显著提高了药效。
2.增加冰片入药，提高了生物利用度。
3.以各单味药的主要有效成分的理化性质为理论依据，采用CO2超临界流体萃取技术提取亲脂性和亲水性成分，避免了藁本内酯的异构化，从而为疗效的提高奠定了物质基础。
下面以本发明药物(以下称为归芎软胶囊)的药效学试验，毒理学试验和具体实施例来进一步阐述本发明的有益效果，但不构成对本发明的限制。
药效学试验1.材料与方法1.1材料健康Wistar大鼠，雌雄不限，体重230-270g，由中国医学科学院实验动物研究所提供，(动物合格证号医动字第01-3008号)健康昆明种小鼠，雌雄各半，体重19-25g，由中国医学科学院实验动物研究所提供(合格证号医动字第01-3001号)。实验前适应性饲养3天，动物房温度24±1℃。
归芎软胶囊(GXRJNGui Xiong Ruan Jiao Nang)由全欧中药商会中药专家组提供，批号028170，成人(按体重为60kg计算)口服量为2000mg/d，相当于生药量0.625g/(kg·d)，按等效量折算大鼠为3.5g/(kg·d)，小鼠6g/(kg·d)；通心络，石家庄以岭药业有限公司，批号050613；阿司匹林，石家庄医药集团有限公司第一制药厂，批号050103LC；心得安，苏州医药集团有限公司，批号041101；尼莫地平，山东健康药业有限公司，批号0501068。
仪器BS-634血小板聚集仪，北京生化仪器厂。WXG-1型微机化动物心功能仪，南京铁道医学院。
1.2方法1.2.1大鼠血栓形成实验1取wistar大鼠40只，随机分为归芎软胶囊大、中、小剂量组、阳性对照组和阴性对照组5组，每织8只。5组于实验前24h及1h分别灌胃给予小剂量归芎软胶囊3.0g/kg(相当于人等效量)、中剂量归芎软胶囊6.0g/kg、大剂量归芎软胶囊12.0g/kg，阿司匹林0.3g/kg和水。给药容积均为5ml/kg。腹腔注射氯胺酮50mg/kg麻醉大鼠，分离左颈外静脉和左颈动脉，预先精密称量1根长5cm的4号丝线的质量，置于3段聚乙烯管的中段(长8cm，内径1.8mm)，两端各连接一段长10cm，内径1mm的聚乙烯管，并在管内充满肝素生理盐水(含肝素量为50U/ml)，当管的一端插入左颈外静脉后，从聚乙烯管注入上述肝素生理盐水1ml/kg，夹住管壁并将管的另一端插入左颈动脉，然后放开血流，15min时中断血流，并迅速取出丝线称量，以此线重量减去原线重量即为血栓湿重。计算血栓形成抑制率抑制率＝(对照组血栓湿重一给药组血栓湿重)÷对照组血栓湿重×100％。
1.2.2大鼠血栓形成实验2取Wistar大鼠50只，随机分为5组，每组10只。4组于实验前24h及1h分别灌胃给予中、小剂量芎软胶囊6.0和3.0g/kg及等剂量通心络，第5组为对照组给予水，灌胃容积、测定方法及数据处理方法均同上。
1.2.3小鼠凝血时间测定取小鼠50只，随机分为归芎软胶囊大、中、小剂量组、阳性对照组和阴性对照组5组，每组10只。5组分别灌胃给予归芎软胶囊24.0、12.0和6.0g/kg，阿司匹林0.3g/kg和水，灌胃容积均为10ml/kg，于灌胃后1h用玻片法观察小鼠凝血时间。
1.2.4小鼠游泳耗竭时间测定取健康小鼠90只，随机分为6组，每组15只。5组分别灌胃给予大、小剂量归芎软胶囊6.0、24.0g/kg和相同剂量通心络及苯丙胺0.2g/kg，第6组为对照组给予水。灌胃容积均为10ml/kg，1次/d，连续灌胃5天，于第5天给药后1h测定小鼠游泳耗竭时间。方法按小鼠体质量6％在鼠尾跟部负重后，将小鼠投入水中，观察小鼠自投入水中至头部沉入7s以上不能抬起的时间，此时间即为游泳耗竭时间。计算各组小鼠游泳耗竭时间的平均值。
1.2.5对大鼠动-静脉旁路血栓形成的影响雄性大鼠60只，体重2804±20g，随机分为6组，连续给纳7天(阿司匹林给药4天)，末次给药1小时后，大鼠戊巴比妥钠腹腔注射麻醉(0.05g/kg)，气管插管，分离右颈总动脉和左颈外静脉，在聚乙烯管中段放入5cm长的4号手术丝线，管内充满肝素生理盐水50u/ml，将管两端分别插入右颈总动脉和左颈外静脉，形成动-静脉血流旁路，大鼠股静脉注入肝素生理盐水50u/kg，即开放血流，15分钟后阻断血流，迅速取出血栓称重，总重量减去丝线重即为血栓湿重。
1.2.6对大鼠血小板聚集功能的影响雄大鼠60只，体重200±20g，均分6组，给药同实验2.2，在末次给药1小时后，大鼠戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，以硅化注射器自大鼠腹主动脉采血，置硅化离心管中，用3.8％柠檬酸溶液9∶1抗凝，以1000转/分离心5分钟，制成富血小板血浆(PRP)，以2000转/分，离心10分钟，制成贫血小板血浆(PPP)，按比浊法，加入60umol ADP溶液20ul，用RS-634型血小板聚集仪测定各组大鼠血小板最大聚集率。
1.2.7对小鼠脑循环障碍的影响小鼠70只，雌雄各半，体重21±2g，均分7组。连续给药7天，尼莫地平于实验当天口服给药一次。末次给药30分钟后，乌拉坦1.2g/kg腹腔注射麻醉，分离两侧颈总动脉，用0号手术线同时结扎两侧颈总动脉及迷走神经，立即记录小鼠因脑缺血缺氧后的死亡时间。
1.2.8对小鼠注射空气致心脑缺氧的影响小鼠90只，雌雄各半，体重20±2g，均分6组，给药同实验2.4，心得安于实验当天给药一次。在末次给药30分钟后，小鼠尾静脉注射空气0.1ml/只，0.1秒注射完，立即记录小鼠吸气停止时间。
1.2.9对人鼠缺血性脑水肿的影响体重230g±18g，雌性人鼠60只，随机分为6组，每组10只。各组大鼠ig给药，连续5天。伪结扎组和模型对照组给予同体积生理盐水。末次给药后，大鼠以水合氯醛350mg/kg的剂量ip麻醉。各组动物结扎双侧颈总动脉，伪结扎组仅暴露、分离双侧颈总动脉，不结扎。术后动物在温度为28-30℃的观察室内观察48h。如有动物死亡，立即断头，取大脑称湿重。动物在术后48h全部断头处死，取大脑，分析天平称湿重。之后，将大脑放入110℃的烘箱内烘烤48h至恒重，分析天平称干重。
2结果2.1归芎软胶囊对大鼠血栓形成的影响归芎软胶囊3个剂量组和阿司匹林组的大鼠血小板血栓的形成受到显著抑制，与对照组比较均有显著性意义(P＜0.01)，结果见表1。
表1.归芎软胶囊对大鼠血栓形成的影响(n＝8，X±S)

注与对照组比较，*P＜0.012.2归芎软胶囊与通心络抗血栓作用比较归芎软胶囊对大鼠动脉血栓形成的抑制作用显著强于相同剂量的通心络，结果见表2。
表2.归芎软胶囊与通心络抗血栓作用比较(n＝10，X±S)

注与对照组比较*P＜0.01，与通心络组比较ΔP＜0.05ΔΔP＜0.012.3归芎软胶囊对小鼠凝血时间的影响归芎软胶囊大、中剂量组和阿司匹林组的小鼠凝血时间均显著延长，与对照组比较均有显著性统计学意义，结果见表3。
表3.归芎软胶囊对小鼠凝血时间的影响(n＝10，X±S)

注与对照组比较*P＜0.01
2.4归芎软胶囊对小鼠游泳耗竭时间的影响各给药组小鼠的游泳耗竭时间均显著延长，与对照组比较均有显著性意义，且归芎软胶囊大剂量组有高度显著性差异，说明川芎软胶囊可剂量依赖性地延长小鼠游泳耗竭时间，具有抗疲劳，增强动物体力及耐力的作用，结果见表4。
表4.归芎软胶囊对小鼠游泳耗竭时间的影响(n＝15，X±S)

注与对照组比较*P＜0.05，**P＜0.012.5归芎软胶囊对大鼠动-静脉旁路血栓形成的影响归芎软胶囊三个剂量组均能明显抑制大鼠动-静脉旁路血栓形成，高、低剂量组呈现明显的作用差别，归芎软胶囊与通心络同剂量组比较，其血栓抑制率无显著差别，结果见表5。
表5.归芎软胶囊对大鼠动-静脉旁路血栓形成的影响(n＝10，X±S)

注与对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01，与归芎软胶囊I组比较ΔP＜0.052.6归芎软胶囊对大鼠血小板聚集功能的影响归芎软胶囊三个剂量组对ADP诱导的大鼠体内血小板聚集均有明显的抑制作用，归芎软胶囊与通心络同剂量组比较，其血小板聚集抑制率无显著差别，见表6。
表6.归芎软胶囊对大鼠血小板聚集功能的影响(n＝10，X±S)

注与对照组比较**P＜0.01，与归芎软胶囊I组比较ΔP＜0.052.7归芎软胶囊对小鼠脑循环障碍的影响归芎软胶囊三个剂量组均能明显延长脑循环障碍小鼠的存活时间，各组间呈现一定的量效关系，归芎软胶囊与通心络同剂量组比较，其存活时间无差别，见表7。
表7归芎软胶囊对小鼠脑循环障碍的影响(n＝10，X±S)

注与对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01，与归芎软胶囊I组比较ΔΔP＜0.01，与归芎软胶囊II组比较#P＜0.052.8归芎软胶囊对小鼠注射空气致心脑缺氧的影响归芎软胶囊三个剂量组均能明显延长小鼠吸气时间，中、高剂量组的作用相近，归芎软胶囊与通心络同剂量组比较，前者吸气停止时间较后者稍有延长，见表8。
表8归芎软胶囊对小鼠注射空气致心脑缺氧的影响(n＝15，X±S)


注与对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01，与归芎软胶囊I组比较ΔΔP＜0.012.9归芎软胶囊对大鼠缺血性脑水肿的影响归芎软胶囊中、高剂量组均能明显减轻脑组织的含水量，与对照组比较有显著差异，结果见表9。
表9归芎软胶囊对大鼠缺血性脑水肿的影响(n＝10，X±S)

注与对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001急性毒性试验归芎软胶囊按225g/kg原生药体重小鼠灌胃给药后，每日一次，给药后按常规饲养，每天观察小鼠饮水、进食、排便、活动及毛色方面的情况，连续7天，要求的各项观察指标均正常，小鼠未出现任何毒性反应。不能求出其LD50，小鼠最大耐受倍数为临床成人用量的363.63倍。
具体实施例方式
实施例1活性成分制备实施例称取当归600g，川芎400g于萃取釜中，调节萃取温度为35℃，压力为30Mpa，CO2流量为30kg/h，夹带剂为3％丙酮，分离釜1温度45°，压力10Mpa，分离釜2温度40℃，压力5Mpa，提取3h后从分离釜1、2收得萃取物共计56g。
实施例2活性成分制备实施例称取当归460g，川芎540g于萃取釜中，调节萃取温度为30℃，压力为40Mpa，CO2流量为20kg/h，夹带剂为4％丙酮，分离釜1温度45°，压力10Mpa，分离釜2温度40℃，压力5Mpa，提取1.5h后从分离釜1、2收得萃取物共计52g。
实施例3活性成分制备实施例称取当归480g，川芎520g于萃取釜中，调节萃取温度为40℃，压力为35Mpa，CO2流量为25kg/h，夹带剂为2％丙酮，分离釜1温度45°，压力10Mpa，分离釜2温度40℃，压力5Mpa，提取2.5h后从分离釜1、2收得萃取物共计52g。
实施例4活性成分制备实施例称取当归500g，川芎500g于萃取釜中，调节萃取温度为45℃，压力为40Mpa，CO2流量为25kg/h，夹带剂为1％丙酮，分离釜1温度45°，压力10Mpa，分离釜2温度40℃，压力5Mpa，提取2.5h后从分离釜1、2收得萃取物共计50g。
实施例5活性成分制备实施例称取当归400g，川芎600g于萃取釜中，调节萃取温度为45℃，压力为35Mpa，CO2流量为25kg/h，夹带剂为2％丙酮，分离釜1温度45°，压力10Mpa，分离釜2；温度40℃，压力5Mpa，提取3h后从分离釜1、2收得萃取物共计52g。
实施例6活性成分制备实施例称取当归500g，川芎420g，红花80g于萃取釜中，调节萃取温度为50℃，压力为40Mpa，CO2流量为25kg/h，夹带剂为0.5％丙酮，分离釜1温度45°，压力10Mpa，分离釜2温度40℃，压力5Mpa，提取2.5h后从分离釜1、2收得萃取物共计55g。
实施例7活性成分制备实施例称取当归750g，川芎200g，红花50g于萃取釜中，调节萃取温度为40℃，压力为45Mpa，CO2流量为25kg/h，夹带剂为2％丙酮，分离釜1温度45°，压力10Mpa，分离釜2温度40℃，压力5Mpa，提取3h后从分离釜1、2收得萃取物共计53g。
实施例8活性成分制备实施例称取当归300g，川芎600g，红花100g于萃取釜中，调节萃取温度为38℃，压力为43Mpa，CO2流量为25kg/h，夹带剂为2％丙酮，分离釜1温度45°，压力10Mpa，分离釜2温度40℃，压力5Mpa，提取2h后从分离釜1、2收得萃取物共计50g。
实施例9活性成分制备实施例称取当归400g，川芎500g，红花100g于萃取釜中，调节萃取温度为45℃，压力为35Mpa，CO2流量为25kg/h，夹带剂为2％丙酮，分离釜1温度45°，压力10Mpa，分离釜2温度40℃，压力5Mpa，提取1.5h后从分离釜1、2收得萃取物共计54g。
实施例10活性成分制备实施例称取当归350g，川芎650g，红花50g于萃取釜中，调节萃取温度为38℃，压力为45Mpa，CO2流量为25kg/h，夹带剂为3％丙酮，分离釜1温度45°，压力10Mpa，分离釜2温度40℃，压力5Mpa，提取2.5h后从分离釜1、2收得萃取物共计56g。
实施例11活性成分制备实施例称取当归485g，川芎427g，红花88g于萃取釜中，调节萃取温度为40℃，压力为35Mpa，CO2流量为25kg/h，夹带剂为2％丙酮，分离釜1温度45°，压力10Mpa，分离釜2温度40℃，压力5Mpa，提取2.5h后从分离釜1、2收得萃取物共计53g。
实施例12活性成分制备实施例称取当归515g，川芎400g，红花85g于萃取釜中，调节萃取温度为45℃，压力为35Mpa，CO2流量为25kg/h，夹带剂为2％丙酮，分离釜1温度45°，压力10Mpa，分离釜2温度40℃，压力5Mpa，提取2h后从分离釜1、2收得萃取物共计51g。
实施例13软胶囊制备实施例取明胶100份加入120份水中使其吸水膨胀，另将30份甘油加热至60℃～80℃，将膨胀的明胶加入，搅拌，熔融，保温待用；取实施例1制备的活性成分56g，大豆油400g，蜂蜡25g，80℃加热至蜂蜡溶解，用剪切式乳匀机剪切至适宜的分散度，加入余量的大豆油300g，剪切至分散均匀；将明胶液与药液装入自动旋转轧囊机，压制成规格为0.4g/粒的软胶囊。
实施例14软胶囊制备实施例取明胶100份加入140份水中使其吸水膨胀，另将30份甘油加热至60℃～80℃，将膨胀的明胶加入，搅拌，熔融，保温待用；取实施例3制备的活性成分52g，大豆油400g，蜂蜡25g，80℃加热至蜂蜡溶解，用剪切式乳匀机剪切至适宜的分散度，加入余量的大豆油300g，剪切至分散均匀；将明胶液与药液装入自动旋转轧囊机，压制成规格为0.4g/粒的软胶囊。
实施例15软胶囊制备实施例取明胶100份加入130份水中使其吸水膨胀，另将30份甘油加热至60℃～80℃，将膨胀的明胶加入，搅拌，熔融，保温待用；取实施例11制备的活性成分53g，玉米油400g，蜂蜡30g，85℃加热至蜂蜡溶解，用剪切式乳匀机剪切至适宜的分散度，加入余量的玉米油200g，剪切至分散均匀；将明胶液与药液装入自动旋转轧囊机，压制成规格为0.4g/粒的软胶囊。
实施例16软胶囊制备实施例取明胶100份加入140份水中使其吸水膨胀，另将35份甘油加热至60℃～80℃，将膨胀的明胶加入，搅拌，熔融，保温待用；
取实施例11制备的活性成分53g，麻油500g，蜂蜡35g，冰片5.5g，75℃加热至蜂蜡溶解，用剪切式乳匀机剪切至适宜的分散度，加入余量的麻油350g，剪切至分散均匀；将明胶液与药液装入自动旋转轧囊机，压制成规格为0.4g/粒的软胶囊。
实施例17软胶囊制备实施例取明胶100份加入120份水中使其吸水膨胀，另将40份甘油加热至60℃～80℃，将膨胀的明胶加入，搅拌，熔融，保温待用；取实施例10制备的活性成分56g，玉米油500g，虫蜡20g，80℃加热至虫蜡溶解，用剪切式乳匀机剪切至适宜的分散度，加入余量的玉米油300g，剪切至分散均匀；将明胶液与药液装入自动旋转轧囊机，压制成规格为0.4g/粒的软胶囊。
实施例18软胶囊制备实施例取明胶100份加入120份水中使其吸水膨胀，另将30份甘油加热至60℃～80℃，将膨胀的明胶加入，搅拌，熔融，保温待用；取实施例3制备的活性成分52g，麻油500g，黄蜡20g，冰片5g，85℃加热至黄蜡溶解，用剪切式乳匀机剪切至适宜的分散度，加入余量的麻油300g，剪切至分散均匀；将明胶液与药液装入自动旋转轧囊机，压制成规格为0.4g/粒的软胶囊。
实施例19软胶囊制备实施例取明胶100份加入120份水中使其吸水膨胀，另将30份山梨醇加热至60℃～80℃，将膨胀的明胶加入，搅拌，熔融，保温待用；取实施例6制备的活性成分55g，菜籽油400g，蜂蜡30g，70℃加热至蜂蜡溶解，用剪切式乳匀机剪切至适宜的分散度，加入余量的菜籽油400g，剪切至分散均匀；将明胶液与药液装入自动旋转轧囊机，压制成规格为0.4g/粒的软胶囊。
实施例20软胶囊制备实施例取明胶100份加入140份水中使其吸水膨胀，另将30份山梨醇加热至60℃～80℃，将膨胀的明胶加入，搅拌，熔融，保温待用；取实施例3制备的活性成分52g，花生油400g，黄蜡30g，冰片2g，85℃加热至黄蜡溶解，用剪切式乳匀机剪切至适宜的分散度，加入余量的花生油300g，剪切至分散均匀；将明胶液与药液装入自动旋转轧囊机，压制成规格为0.4g/粒的软胶囊。
实施例21软胶囊制备实施例取明胶100份加入140份水中使其吸水膨胀，另将30份甘油加热至60℃～80℃，将膨胀的明胶加入，搅拌，熔融，保温待用；取实施例11制备的活性成分53g，麻油450g，虫蜡20g，冰片5g，85℃加热至虫蜡溶解，用剪切式乳匀机剪切至适宜的分散度，加入余量的麻油300g，剪切至分散均匀；将明胶液与药液装入自动旋转轧囊机，压制成规格为0.4g/粒的软胶囊。
实施例22软胶囊制备实施例取明胶100份加入120份水中使其吸水膨胀，另将30份甘油加热至60℃～80℃，将膨胀的明胶加入，搅拌，熔融，保温待用；取实施例8制备的活性成分50g，麻油350g，黄蜡20g，冰片4.5g，80℃加热至黄蜡溶解，用剪切式乳匀机剪切至适宜的分散度，加入余量的麻油300g，剪切至分散均匀；将明胶液与药液装入自动旋转轧囊机，压制成规格为0.4g/粒的软胶囊。
实施例23软胶囊制备实施例取阿拉伯胶100份加入130份水中使其吸水膨胀，另将30份甘油加热至60℃～80℃，将膨胀的明胶加入，搅拌，熔融，保温待用；取实施例11制备的活性成分55g，麻油450g，黄蜡25g，冰片4.5g，80℃加热至黄蜡溶解，用剪切式乳匀机剪切至适宜的分散度，加入余量的麻油300g，剪切至分散均匀；将明胶液与药液装入自动旋转轧囊机，压制成规格为0.4g/粒的软胶囊。
实施例24片剂制备实施例将实施例1中的活性成分56g与淀粉1∶1比例混合，将25g羧甲基纤维素钠与上述混合物混合均匀，加入75％的乙醇溶液作为黏合剂，过22目筛，40度烘箱干燥，加入适量硬脂酸镁，压片，制成300mg/片的片剂。
实施例25包衣片剂制备实施例将实施例11中的活性成分53g与17g轻质氧化镁混合，加入17g淀粉，乳糖17g，0.5％的HPMC水溶液做黏合剂，制成300mg/片的素片，以30％的尤特奇RL30D包衣，制成300mg/片的包衣制剂。
实施例26胶囊制备实施例将实施例3中的活性成分52g与淀粉1∶1比例混合，将25g羧甲基纤维素钠与上述混合物混合均匀，加入75％的乙醇溶液作为黏合剂，过22目筛，40度烘箱干燥，整粒，装硬胶囊，制成270mg/粒的胶囊。
实施例27浓缩丸制备实施例将实施例11中的活性成分53g与微晶纤维素进行混合，其中微晶纤维素的用量为浸膏粉的40％，加入水作为粘合剂制成素丸。
将上述素丸选用上海卡乐康(COLORCON)包衣技术有限公司的欧巴代(胃溶型)为本品的包衣材料进行包衣，得浓缩丸制剂。
包衣条件如下选用水为溶解剂；包衣液浓度为20％；包衣增重5％；进风温度80℃；片床温度45℃；雾化压力2.0bar；包衣锅转速17rmp；进料流速3g/min。
实施例28颗粒剂制备实施例取实施例11中的活性成分53g，甲基纤维素9g，糖粉820g，混合均匀后，加入适量70％乙醇，制成软材，制粒，挥去乙醇，80℃喷雾干燥，制成颗粒剂。
实施例29滴丸剂制备实施例取300g聚乙二醇-6000加热至80℃，熔融后加入实施例11中的活性成分53g，搅拌均匀，移至滴丸机中，保持熔融液温度70℃，由上往下，滴速适中滴入10℃甲基硅油中，制成滴丸剂1000粒。
权利要求
1.一种中药提取物，其特征在于，它主要由下列重量份配比的原料药制成当归30～75川芎20～65。
2.根据权利要求1所述的中药提取物，其特征在于，原料药还有红花5～10。
3.根据权利要求2所述的中药提取物，其特征在于，原料药重量份配比为当归40～50川芎40～50红花8～10。
4.权利要求1～3任一权利要求所述的中药提取物的提取方法，其特征在于，采用超临界流体萃取法，条件为萃取温度为30℃～50℃，压力为25MPa～45Mpa，提取时间为1～3h，CO2流量为10～30kg/L，夹带剂为0.5％～5％丙酮。
5.根据权利要求4所述的中药提取物的提取方法，其特征在于，采用CO2超临界流体萃取法，条件为萃取温度为40℃，压力为35Mpa，提取时间为2.5h，CO2流量为25kg/L，夹带剂为2％丙酮。
6.含有权利要求1～3任一权利要求所述中药提取物的制剂，其特征在于，它包括该中药提取物和药剂中可接受的载体。
7.根据权利要求6所述的中药制剂，其特征在于，是软胶囊，包括以下重量百分比的组分中药提取物2.5％～10％植物油85％～96％助悬剂1.5％～5％。
8.根据权利要求6所述的中药制剂，其特征在于，是软胶囊，它包括以下重量百分比的组分中药提取物2.5％～10％植物油80％～95.8％助悬剂1.5％～5％冰片0.2％～5％。
9.根据权利要求7或8所述的中药制剂，其特征在于，所述植物油选自大豆油、麻油、玉米油、菜籽油、花生油、芝麻油、葵花籽油、核桃油。
10.根据权利要求7或8所述的中药制剂，其特征在于，助悬剂选自蜂蜡、黄蜡、白蜂蜡、虫蜡。
11.权利要求7或8所述中药制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤称取适量的植物油和配方量的其余各组分；加热，使助悬剂溶解；用剪切式乳匀机剪切至适宜的分散度；加入余量植物油至配方量，剪切至分散均匀；药液与囊材液用自动旋转轧囊机制备成软胶囊。
12.根据权利要求11所述的中药制剂的制备方法，其特征在于，加热温度为70℃～85℃。
13.权利要求1～3任一权利要求所述中药提取物在制备改善脑微小动脉血液循环，改善大脑皮层脑血管床的供血，促进脑微小动脉括约肌开放以及预防和治疗小中风、脑性眩晕、脑梗塞后遗症、脑血管供血不足、冠心病、心绞痛等心脑血管疾病药物中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种中药提取物以及含有该提取物的中药制剂，该中药提取物主要以当归、川芎为原料药制成，或者进一步含有红花。本发明中药提取物的提取工艺采用CO
文档编号A61K47/44GK1903238SQ20061006605
公开日2007年1月31日 申请日期2006年3月28日 优先权日2005年7月28日
发明者祝国光 申请人:祝国光