专利名称：重组人干扰素α2a阴道泡腾片及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种阴道泡腾片及其制备方法，具体涉及一种干扰素α2a阴道泡腾片及其制备方法。
背景技术：
干扰素作为抗病毒、抗肿瘤和免疫调节药物已被广泛使用，采用的剂型主要是注射剂和外用剂型。目前，在国内市场上广泛应用于治疗妇科病毒性感染疾病的干扰素制剂有干扰素栓剂等产品。但在临床使用过程中，干扰素栓剂存在崩解慢、不易吸收、使用不便、起效慢和污染衣物的缺点，治疗效果受患者使用时的体位影响，患者阴道后穹隆腹侧面患处难以接触到药物，治疗不彻底。
发明内容
本发明的目的是提供了一种崩解快、易吸收、使用方便、起效快和不污染衣物，发泡量大，药物与病灶部位接触充分，疗效确切的重组人干扰素α2a阴道泡腾片。
本发明的另一目的是提供一种辅料用量少，工艺简单的重组人干扰素α2a阴道泡腾片的制备方法。
为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是一种重组人干扰素α2a阴道泡腾片，其特征在于该泡腾片含有重组人干扰素α2a和辅料，所述辅料包括泡腾剂、填充剂、崩解剂和粘合剂，所述泡腾剂是硼酸、无水柠檬酸和碳酸氢钠，所述填充剂是淀粉，所述崩解剂是羧甲基淀粉钠，所述粘合剂是聚乙烯吡咯烷酮PVP k-30；其中制成1000片干扰素阴道泡腾片中含有下述组份重组人干扰素α2a6×107～6×109硼酸100～140g
无水柠檬酸 40～80g淀粉 200～250g碳酸氢钠 100～140g羧甲基淀粉钠 10～20g硬脂酸镁 4.5～10gPVP k-30(8％)30～55毫升。
一种重组人干扰素α2a阴道泡腾片的制备方法，其特点在于它包括下述步骤(1)将PVP k-30溶于水中，制成重量百分比为8％的水溶液；(2)将淀粉、硼酸、无水柠檬酸分别干燥；(3)称取处方量的硼酸，无水柠檬酸，加入处方量淀粉的半量，混匀，加入处方量的干扰素，混匀，再用PVP k-30水溶液做粘合剂制软材，18目筛制粒；(4)称取处方量的碳酸氢钠，加入处方量一半的淀粉，用PVPk-30水溶液做粘合剂制软材，18目筛制粒；(5)将步骤(3)和(4)中制备的两种颗粒分别在温度为40℃±5℃条件下减压干燥3-5小时，颗粒水分含量控制在0.4％-0.8％，过16目筛整粒；(6)加入处方量的硬脂酸镁，混匀，压片；(7)包装即得成品。
干扰素阴道泡腾片的主要辅料具有下述作用泡腾剂-硼酸、无水柠檬酸和碳酸氢钠，酸和碱发生化学反应产生二氧化碳气体，使片子迅速崩解。选用硼酸，主要有以下几方面的作用(1)硼酸对干扰素有一定的保护作用(2)作为酸源，且硼酸具有拟菌作用，同时增加无水柠檬酸，确保酸碱反应时的发泡量。淀粉在制剂中作为填充剂，收载于中国药典中，已广泛用于片剂的制备中。崩解剂羧甲基淀粉钠中国药典已收载，为自由流动的粉末，能溶于水，无任何毒副作用，广泛用作片剂和胶囊剂的崩解剂。粘合剂聚乙烯吡咯烷酮k-30，是一种水溶性合成高分子化合物，具有优良的稳定性和溶解性，常用作片剂、胶囊剂和颗粒剂制备过程中的粘合剂。
本发明与现有技术相比具有以下优点本发明压制的阴道泡腾片具有崩解快、易吸收、使用方便、起效快和不污染衣物，发泡量大，药物与病灶部位接触充分，疗效确切的优点；制成的颗粒流动性良好，所压制成的片子外观平整光洁，硬度适中，崩解时限、发泡量等指标符合中国药典的相关规定；所选辅料自身理化性质稳定，不与干扰素发生化学反应，对干扰素的生物学活性无破坏作用，不影响干扰素的含量测定，对阴道粘膜无刺激作用，且皆为中国药典收载的药用辅料品种，价廉、方便、易得。
具体实施例方式
下面以实施例进一步解释本发明，但是本发明的保护范围并不限于这些实施。
(一)处方选择重组人干扰素α2a阴道泡腾片的配方(1000片)
其制备工艺(1)将PVP k-30溶于纯化水中制成8％的溶液，备用；(2)将淀粉、硼酸、无水柠檬酸分别于60±5℃干燥2-3小时，过100目筛备用；(3)称取处方量的硼酸、无水柠檬酸，加入处方量半量的淀粉，加入配方量的干扰素，混匀，用配制好的PVP k-30(8％)水溶液做粘合剂制软材，过18目筛制粒；(4)称取处方量的碳酸氢钠，加入处方量半量的淀粉，用配制好的PVP k-30(8％)水溶液做粘合剂制软材，过18目筛制粒；(5)将步骤(3)和(4)中制备的两种颗粒分别在温度为40℃±5℃条件下减压干燥3-5小时，颗粒水分含量控制在0.4％-0.8％，过16目筛整粒；(6)加入处方量的硬脂酸镁、羧甲基淀粉钠混合均匀，压片；(7)包装即得成品。
用法用量每次1片，隔日1次，6～10次为一个疗程，将泡腾片置于阴道后穹隆处。
(二)初步稳定性试验根据重组人干扰素α2a的理化性质，结合泡腾片剂型的自身特殊性，对本制剂进行了影响因素的稳定性考察，考察本品在强光、高温、高湿条件下的稳定性情况，为产品的包装、运输、贮存、有效期的确定提供理论依据。考察项目参照中国药典(2005版)，选择外观，效价，PH值和崩解时限为考察指标。
分别在光照4500Lx±500Lx(冷藏干燥)、高湿RH75％(冷藏避光)、高温40℃(避光干燥)条件下进行放置，试验结果表明本品对光照较为敏感，在强光照射下，放置15天效价降至0天的80％。本品对湿度非常敏感，高湿放置第7天片子外表面出现泡腾现象，外观已不合格，第10天片子出现松片，崩解时限缩短。同时，本品对温度也较敏感，高温放置第5天效价降至0天的85％，放置10天效价降至0天的65％。因此本品应包装密封，贮存应避光、干燥，冷藏。
加速稳定性实验的结果表明本品在市售包装，温度25±2℃，相对湿度60±10％的条件下放置6个月，效价有下降的趋势，但仍在合格范围内，而其它考察指标与0月结果比较无显著性变化，均符合标准要求。
长期稳定性试验结果本品在市售包装，温度6±2℃，相对湿度60±10％的条件下，长期试验12个月各项指标均没有显著性变化，表明本品在上述贮藏条件下稳定，长期稳定性试验正在进行。
综合上述影响实验、加速实验、长期稳定性实验结果，重组人干扰素α2a阴道泡腾片的贮藏条件为2-8℃避光、干燥保存，按照有关规定，有效期暂定为18个月。
(三)急性毒性试验选用性成熟健康雌性家兔，体重为2.40-2.60Kg，随即分为两组，每组10只。药物组阴道一次性给药1.0×106IU/Kg，基质片泡腾片为对照组给相同体积。给药组相当于临床用药的100倍(临床日用量为6.0×105IU/人，人体重按60Kg计算)。连续观察14天。
给药后至观察期满，无1例动物出现中毒症状及死亡。各组动物四肢活动自如，饮食饮水及排便正常，精神状态良好，体重略有增加。用药局部皮肤粘膜颜色正常，无充血、红肿，无异常分泌物。提示重组人干扰素α2a泡腾片无急性毒性作用。
(四)长期毒性试验选用性成熟健康雌性家兔，随机分为五组，即基质片组、空白对照组、泡腾片高、中、低剂量组。阴道给药，泡腾片组小、中、大剂量分别2.4×105IU/Kg，4.8×105IU/Kg，7.2×105IU/Kg，分别相当于临床用量的24、48、72倍(临床用量为6.0×105IU/人，人体重按60Kg计算)。每天定时给药1次，连续4周。动物自由摄食、饮水。停药后恢复2周。
观察指标每周称量动物体重，观察动物饮食情况，活动状态，毛发、粪便等。于给药后2周、4周和停药后2周分别采血检查血常规、肝、肾等功能，取主要脏器作病理学检查心、肝、脾、肺、肾、脑、阴道、子宫、卵巢等并同时测定脏器系数。
结果表明，重组人干扰素α2a阴道泡腾片的剂量为7.2×105IU/Kg。给动物使用4周，未发现长期毒性反应。
阴道泡腾片组、基质片组和阴性对照组在刺激注射后15分钟内均没有出现如竖毛、呼吸困难、打喷嚏、干呕或咳嗽、锣音、抽搐、虚脱或死亡等任一现象，判定过敏反应为阴性。阳性对照组在刺激注射后15分钟内均出现不同程度上述过敏现象，判定过敏反应为阳性。
结果表明重组人干扰素α2a泡腾片不引起豚鼠过敏反应。
(五)局部刺激性试验选用性成熟健康雌性家兔，体重2.5～3.0Kg，随机分为4组泡腾片高、低剂量组、基质片组和空白对照组，每组4只。高、低两个剂量分别为2.4×105IU/Kg、7.2×105IU/Kg，折算等效剂量分别相当于临床用量的24倍，72倍(临床用量为6.0×105IU/60Kg人)。基质片组给与相同规格的片剂基质。空白对照组用无菌棉签探入动物阴道中，保持相同时间。
观察时间单次刺激试验给药24小时后处死动物；多次刺激试验每天固定时间给药1次，连续1周。于末次给药后24小时处死动物，取出阴道局部组织，观察充血、红肿等现象。大体观察后，经固定液固定，进行病理组织学检查。
结果表明，重组人干扰素α2a泡腾片对家兔阴道粘膜无明显刺激作用。
(六)药理学试验选用健康Wistar雌性大鼠40只，随即分为四组，每组10只。即对照组、泡腾片高、中、低剂量组15.0×105IU/Kg、10.0×105、5.0×105。大鼠麻醉后固定，常规手术，进行气管、颈动脉插管，测定心率、血压、呼吸、心电指标。阴道给药，记录给药前及给药后3～360分钟的各项指标。
结果表明，重组人干扰素α2a阴道泡腾片对大鼠心电图的各波形、心率、血压、呼吸无明显影响。
选用健康Wistar雌性大鼠40只，随机分为四组，每组10只。即对照组，泡腾片高、中、低剂量组15.0×105IU/Kg、10.0×105、5.0×105。阴道给药采用旷场行为试验法观察动物自发及探究行为。
结果表明，重组人干扰素α2a阴道泡腾片阴道给药对大鼠自发及探究行为无明显影响。
(七)有效性评价主要药效学试验采用HSV-2病毒液感染豚鼠阴道制备阴道炎模型，将模型豚鼠随机分为泡腾片高、中、低剂量组，阳性对照组(无环鸟苷ACV)和阴性对照组五组，对重组人干扰素α2a阴道泡腾片治疗作用进行药效学分析。泡腾片高、中、低剂量分别为1.2×105IU/只、1.2×1041U/只、1.2×103IU/只；阳性对照组给ACV750mg/Kg(250mg/只)、阴性对照组给以0.5ml生理盐水，阴道给药9天，每天1次。给药后连续观察15天。每天记录豚鼠干扰HSV-2死亡时间，计算死亡保护率和延长生命率。三个剂量的泡腾片组动物死亡率均显著下降，阴道内感染症状得到缓解，且随该药剂量增加而作用增大，呈量效关系，重组人干扰素α2a阴道泡腾片中剂量组与无环鸟苷组作用近似。
结果表明重组人干扰素α2a阴道泡腾片1.2×105IU/只、1.2×104IU/只、1.2×103IU/只，每日1次于阴道给药，连续9日对HSV-2型单疱病毒性阴道炎有明显拟制作用。
(八)质量控制评价(1)外观检查本品为白色或类白色片，外观完整光洁，色泽均匀。
(2)鉴别试验用免疫印迹法(《中国药典》2005年版三部附录VIIIA)或免疫斑点法(《中国药典》2005年版三部附录VIIIB)测定，结果为阳性。
(3)PH值随机抽取本品2片，研细，置50ml水中，搅拌，待气泡消失后，依法测定(《中国药典》2005年版三部附录VA)为4.5-6.5。
(4)崩解时限取本品6片，依法检查(《中国药典》2005年版三部附录VC)，符合规定。
(5)融变时限取本品3片，依法检查(《中国药典》2005年版三部附录VD)，符合规定。
(6)发泡量取本品10片，依法测定(《中国药典》2005年版二部附录IA)，符合规定。
(7)重量差异取本品20片，精密称定总重量，求得平均片重后，再分别精密称定各片的重量。每片重量与平均片重相比较，超出重量差异±5％的药片不得多于2片，并不得有1片超出限度1倍。结果符合规定。
(8)脆碎度取本品6.5g，依法测定(《中国药典》2005年版三部附录VE)。结果符合规定。
(9)微生物限度检查取本品适量，依法测定(《中国药典》2005年版三部附录XIIG)，细菌总数小于100个/g；霉菌、酵母菌不得检出；金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌不得检出。
(10)效价测定取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于干扰素α2a 25万IU)，置25ml量瓶中，用测定培养液定容至刻度，充分溶解后混匀，取药液离心(10000rpm，10min)，取上清液，按《中国药典》2005版三部附录XC的方法进行测定。干扰素效价为标示量的80％～150％。
权利要求
1.一种重组人干扰素α2a阴道泡腾片，其特征在于该泡腾片含有重组人干扰素α2a和辅料，所述辅料包括泡腾剂、填充剂、崩解剂和粘合剂，所述泡腾剂是硼酸、无水柠檬酸和碳酸氢钠，所述填充剂是淀粉，所述崩解剂是羧甲基淀粉钠，所述粘合剂是聚乙烯吡咯烷酮PVP k-30；其中制成1000片干扰素阴道泡腾片中含有下述组份重组人干扰素α2a 6×107～6×109硼酸 100～140g无水柠檬酸 40～80g淀粉 200～250g碳酸氢钠 100～140g羧甲基淀粉钠 10～20g硬脂酸镁 4.5～10gPVP k-30(8％) 30～55毫升。
2.一种重组人干扰素α2a阴道泡腾片的制备方法，其特点在于它包括下述步骤(1)将PVP k-30溶于水中，制成重量百分比为8％的水溶液；(2)将淀粉、硼酸、无水柠檬酸分别干燥；(3)称取处方量的硼酸，无水柠檬酸，加入处方量淀粉的半量，混匀，加入处方量的干扰素，混匀，再用PVP k-30水溶液做粘合剂制软材，18目筛制粒；(4)称取处方量的碳酸氢钠，加入处方量一半的淀粉，用PVPk-30水溶液做粘合剂制软材，18目筛制粒；(5)将步骤(3)和(4)中制备的两种颗粒分别在温度为40℃±5℃条件下减压干燥3-5小时，颗粒水分含量控制在0.4％-0.8％，过16目筛整粒；(6)加入处方量的硬脂酸镁，混匀，压片；(7)包装即得成品。
全文摘要
本发明涉及一种重组人干扰素α2a阴道泡腾片及其制备方法，该阴道泡腾片是将重组人干扰素α2a加入部分辅料中制成酸性颗粒，和其他辅料制成的碱性颗粒混合后压制成片，所述辅料包括泡腾剂、填充剂、崩解剂和粘合剂，所述泡腾剂是硼酸、无水柠檬酸和碳酸氢钠，所述填充剂是淀粉，所述崩解剂是羧甲基淀粉钠，所述粘合剂是聚乙烯吡咯烷酮PVP k－30。本发明压制的阴道泡腾片具有崩解快、易吸收、使用方便、起效快和不污染衣物，发泡量大，药物与病灶部位接触充分，疗效确切的优点；所选辅料自身理化性质稳定，不与干扰素发生化学反应，对干扰素的生物学活性无破坏作用，不影响干扰素的含量测定，对阴道粘膜无刺激作用。
文档编号A61P15/00GK1970079SQ200610105139
公开日2007年5月30日 申请日期2006年12月8日 优先权日2006年12月8日
发明者陶玉, 石继红 申请人:陕西沃普森制药有限公司