专利名称：：人参皂甙Compound-K在制药中的新应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种人参皂甙Compound-K在制药中的新应用，特别涉及一种人参皂甙Compound-K在制备预防或治疗关节炎的药物中的应用。
背景技术：
：中国专利(公开号CN1570133A)公开了人参皂武Compound-K的结构及其制备方法，以及其在抗肿瘤方面的一些应用，其具有如下结构但其在预防或治疗关节炎的应用却未见报道。
发明内容本发明的目的在于研究人参皂甙Compound-K在其他领域应用的可能性，从而提供其在制药中的新用途。本发明提供了人参皂甙Compound-K在制备预防或治疗关节炎的药物中的应用。具体实施方式实施例l初测毒人参皂甙Compound-K，静脉注射360mg/kg剂量，小鼠活动正常，未见1、实验目的观察待测样品对角叉菜胶致小鼠急性炎症的影响。2、材料和试剂1)药物人参皂甙Compound-K，剂量为10mg/kg，5mg/kg，2.5mg/kg。消炎痛，10mg/kg。角叉菜胶，用双蒸水配制成1%浓度。2)动物昆明种小鼠60只体重19-21g性别雄性每组动物数10只实验室温度2426°C，相对湿度6070%3、实验方法动物先分成大剂量组10mg/kg，iv;中剂量组5mg/kg，iv;小剂量组2.5mg/kg，iv;消炎痛组10mg/kg，po;空白对照组生理盐水10mg/kg，iv。按上述方法给药三天，致炎前先用排水法测各组小鼠右后足跖的体积一次，末次给药一小时后在小鼠右后足跖中部皮下注射1%角叉菜胶O.lml致炎，以后每隔一小时测足跖体积1次，小鼠致炎前及致炎后不同时间右后足跖体积的差值即为肿胀值，计算肿胀率及抑制率，组间差异以t检验进行比较。肿胀率％=En;EoX100%toEn=致炎后不同时间的肿胀值Eo=致炎前的肿胀值e—t抑制率％=-x100%cc=对照组的肿胀率T=治疗组的肿胀率4、结果结果见表1。人参皂甙Compound-K可明显地抑制角叉菜胶致小鼠足跖急性炎症，其中高剂量组作用最强，4h时作用最好，对小鼠急性炎症的抑制率可达65.66%，消炎痛组与小剂量组作用相当。表l人参皂甙Compmind-K对角叉菜胶致小鼠急性炎症的影响(％,n=10，x±s)致炎后不同时间的肿胀值ml<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>*P<0.05，**P<0.01与致炎对照组比较()内为肿胀率(％)<>力为渐劍率广％)实施例3人参皂甙Compound-K对角叉菜胶诱发大鼠足跖肿胀的影响1、实验目的观察待测样品对角叉菜胶致大鼠急性炎症的影响。2、材料和试剂1)药物人参皂甙Compound-K，剂量为10mg/kg，5mg/kg，2.5mg/kg。消炎痛，lmg/kg。角叉菜胶，用双蒸水配制成1%浓度。2)动物大鼠，SD系体重130150g性别雄性每组动物数8只实验室温度2426°C，相对湿度6070%3、实验方法动物先分成大剂量组10mg/kg,iv;中剂量组5mg/kg,iv;小剂量组2.5mg/kg，iv;消炎痛组lmg/kg,po;空白对照组生理盐水10mg/kg,iv。动物先分组，按上述方法给药三天，致炎前先用排水法测各组大鼠右后足跖的体积一次，末次给药一小时后在大鼠右后足跖中部皮下注射1%角叉菜胶O.lml致炎，以后每隔一小时测足跖体积1次，计算肿胀率及抑制率方法同上，组间差异以t检验进行比较。4、结果结果见表2，人参皂甙Compoimd-K可明显地抑制角叉菜胶致大鼠足跖急性炎症，其中高剂量组作用最强，对大鼠急性炎症的抑制率最高可达78.23%，消炎痛组作用介于高剂量和低剂量之间。表2人参皂甙Compoimd-K对角叉菜胶致大鼠急性炎症的影响(％，n=10，x±s)致炎后不同时间的肿胀值ml<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>*P<0.05,**P<0.01与致炎对照组比较()内为肿胀率(％)实施例4人参皂甙Compound-K对佐剂诱导的大鼠佐剂性关节炎的影响(一)人参皂甙Compound-K对佐剂诱导的大鼠佐剂性关节炎的预防作用。1、材料和试剂1)药物人参皂甙Compound-K，剂量为10mg/kg，5mg/kg，2.5mg/kg。消炎痛lmg/kg。雷公藤1.5mg/kg。弗氏完全佐剂购于Sigma公司，每只大鼠右后足跖中部皮下注射O.lml致炎2)动物大鼠，SD系体重130150g性别雄性每组动物数8只实验室温度2426°C，相对湿度6070%2、实验方法动物先分成大剂量组10mg/kg，iv;中剂量组5mg/kg，iv;小剂量组2.5mg/kg，iv;消炎痛组lmg/kg,po;雷公藤组1.5mg/kg，po;空白对照组生理盐水10mg/kg，iv。动物致炎前先用排水法测右后足跖的体积一次，然后在大鼠右后足跖中部皮下注射弗氏完全佐剂O.lml致炎，致炎后次日按上述分组，并开始给药15天，每隔一定时间测足跖体积，计算肿胀率及抑制率同上，组间差异以t检验进行比较。3、结果结果见表3，人参皂甙Compound-K可预防大鼠佐剂性的关节炎，其中高剂量组作用略高于雷公藤组，与消炎痛组相当。表3人参皂甙Compoiiiid-K对角叉菜胶致大鼠佐剂性关节炎的预防作用(％,n=10，x±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>(二)人参皂甙Compound-K对佐剂诱导的大鼠佐剂性关节炎的治疗作用。1、材料和试剂1)药物人参皂甙Compound-K，剂量为10mg/kg，5mg/kg，2.5mg/kg。消炎痛lmg/kg。雷公藤1.5mg/kg。弗氏完全佐剂购于Sigma公司，每只大鼠右后足跖中部皮下注射O.lml致炎2)动物-大鼠，SD系体重130150g性别雄性每组动物数8只实验室温度2426°C，相对湿度6070%2、实验方法-动物先分成大剂量组10mg/kg，iv;中剂量组5mg/kg，iv;小剂量组2.5mg/kg，iv;消炎痛组lmg/kg，po;雷公藤组1.5mg/kg，po;空白对照组生理盐水10mg/kg，iv。动物致炎前先用排水法测右后足跖的体积一次，然后在大鼠右后足跖中部皮下注射弗氏完全佐剂O.lml致炎，致炎后20日起按上述分组，并开始给药8天，每隔一定时间测足跖体积，计算肿胀率及抑制率同上，组间差异以t检验进行比较。3、结果结果见表4，人参皂甙Compound-K可治疗大鼠佐剂性关节炎，其中高剂量组作用最强，26day时作用最好，抑制率最高可达36.15%,明显高于消炎痛组和雷公藤组。表4人参皂甙Compoimd-K对角叉菜胶致大鼠佐剂性关节炎的治疗作用(％,n=10，x±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>实施例5人参皂甙Compound-K对II型胶元(CII)诱导的大鼠关节炎的影响1、材料和试剂1)药物药物人参皂甙Compound-K，剂量为10mg/kg，5mg/kg，2.5mg/kg。Enbrel:9mg/kg，皮下注射，每4天一次。雷公藤1.5mg/kg。致炎剂II型胶元溶解在O.lmol/L醋酸中，使终浓度为2mg/ml胶元溶液，4"C过夜，次日将II型胶元溶液滴加至冷的不完全弗氏佐剂中，充分乳化(11型胶元液:弗氏不完全佐剂=1:1)，使II型胶元终浓度为lmg/ml。II型胶元乳剂4"C冰箱保存备用。免疫方法每只大鼠分5点背部皮内注射免疫，每点0.1ml，共5ml(含有II型胶元量为0.5mg)，7天后以同样的方法追加免疫一次。对照组注射0.1mol/L醋酸及不完全弗氏佐剂乳化液，注射前及免疫后20天起用排水法测定右后足踝部关节的肿胀度。2)动物大鼠，SD系体重140160g性别雄性每组动物数8只实验室温度2426°C，相对湿度6070%2.人参皂甙Compound-K对II型胶元(CII)诱导的关节炎的预防作用2.1实验方法将预先已溶解在0.1mol/L醋酸并放置过夜的II型胶元，调整浓度为2mg/ml后以1:1的比例慢慢滴加至弗氏不完全佐剂中，充分乳化后在每个大鼠背部5点皮内注射，每点0.1ml(每鼠共0.5ml，含胶元0.5mg)进行首次免疫，于第7天同法进行第二次免疫，此即为致炎动物。相似的方法处理正常对照组动物，但免疫组分中不含胶元。动物分成大剂量组人参皂甙Compound-K10mg/kg,iv;中剂量组人参皂式Compound-K5mg/kg，iv;小剂量组人参皂武Compound陽K2.5mg/kg,iv;雷公藤组1.5mg/kg，po;Enbrel组9mg/kg，sc;空白对照组生理盐水10mg/kg，iv。给药组动物首次免疫时开始给药，于第一次免疫后8天停止给药。用排水法测量免疫前和首次免疫后20、22、24、27、29天的足踝关节肿胀值，计算肿胀率及抑制率同上，组间差异以t检验进行比较。实验结束，取足踝关节作病理检查。2.2结果结果见表5。人参皂甙Compoimd-K可明显地预防II型胶元诱导的关节炎，其中高剂量组作用最强，其作用明显高于雷公藤组，与enbrd组相当。表5人参皂甙Compound-K对II型胶元(CH)诱导的关节炎的预防作用(％，n=8，x±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>*P<0.05，**P<0.01与致炎对照组比较()内为肿胀率(％)<〉/^为湖劍率卩％」3.人参皂甙Compound-K对II型胶元(CII)诱导的关节炎的治疗作用3.1实验方法将II型胶原(CII)与弗氏不完全佐剂研磨成乳剂，分别在每个大鼠背部皮内注射免疫，至19天大鼠足关节大部分开始肿胀，挑选足关节出现肿胀的致敏大鼠40只，随即分为5组，每组8只，分别为至炎对照组；人参皂甙Compound-K10mg/kg,iv;中齐U量组人参皂武Compound-K5mg/kg，iv;小剂量组人参皂甙Compound-K2.5mg/kg，iv;Enbrel组9mg/kg，sc;雷公藤组1.5mg/kg;空白对照组生理盐水10mg/kg，iv。连续给药8天。用排水法测量致炎前及症状开始后(20天后)不同时间的足肿胀值，计算肿胀率及抑制率，以组间差异以t检验进行比较。3.2结果结果见表6，人参皂甙Compound-K可治疗II型胶元诱导的关节炎，其中高剂量组作用最强，31day时作用最好，抑制率最高达27.67%，高于雷公藤组，与enbrd组相当。表6人参皂甙Compound-K对II型胶元(CII)诱导的关节炎的治疗作用(％，n=8，x±s)致炎后不同天数的肿胀值ml<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>权利要求1、一种人参皂甙Compound-K在制备预防或治疗关节炎的药物中的应用。全文摘要本发明提供结构式如右的人参皂甙Compound-K在制备预防或治疗关节炎的药物中的应用。文档编号A61K31/7028GK101147743SQ20061011619公开日2008年3月26日申请日期2006年9月19日优先权日2006年9月19日发明者刘全海,李晶晶申请人:上海医药工业研究院